应用血管肽酶抑制剂治疗心绞痛的制作方法

专利名称：应用血管肽酶抑制剂治疗心绞痛的制作方法
背景技术：
近几年来，专利和技术文献报导了某些化合物的单一分子既具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性又具有中性内肽酶(EC24.11；NEP)抑制活性。令人感兴趣的是，这些化合物可用作心血管药物，特别是在治疗高血压、充血性心力衰竭和肾脏疾病方面。这些化合物也称为血管肽酶抑制剂、双重金属蛋白酶抑制剂、NEP/ACE抑制剂或ACE/NEP抑制剂。
Omapatrilat就是这样一种血管肽酶抑制剂，它目前正在进行临床评价。Omapatrilat的化学名称为[4S-[4α(R*)，7α，10aβ]]-八氢-4-[(2-巯基-1-氧代-3-苯基丙基)氨基]-5-氧代-7H-吡啶并[2，1-b][1，3]硫氮杂(thiazepine)-7-羧酸，其结构式为 。Robl在美国专利5,508,272中公开了Omapatrilat、其制备及其在治疗心血管疾病中的应用。
BMS 189,921是另一个目前正进行临床评价的血管肽酶抑制剂。BMS 189,921的化学名称为[S-(R*，R*)]-六氢-6-[(2-巯基-1-氧代-3-苯基丙基)氨基]-2，2-二甲基-7-氧代-1H-氮杂-1-乙酸，其结构式为 。Karanewsky等在美国专利5,552,397中公开了BMS 189,921、其制备及其在治疗心血管疾病中的应用。
发明概述本发明涉及应用血管肽酶抑制剂治疗和/或减轻心绞痛症状。用于这种治疗的优选血管肽酶抑制剂是omapatrilat或其药学上可接受的盐、BMS189,921或其药学上可接受的盐、或其混合物。最优选应用omapatrilat。
根据本发明，可单独应用一种或联合应用多种血管肽酶抑制剂治疗心绞痛。也可将一种或多种所述血管肽酶抑制剂与已知的治疗心绞痛有效的一种或多种药学上的活性药物联合应用。这类药物包括长效硝酸酯类、β-肾上腺素能阻滞剂、钙离子通道阻滞剂、抗血小板药物等。所述联合治疗可应用含有一种或多种所述血管肽酶抑制剂或其药学上可接受的盐和一种或多种其它抗心绞痛药物的单一剂型、同时给予各活性药物的相应剂量、或根据交错时间表给予每种活性药物的相应剂量。
附图简述

图1是显示血管肽酶抑制剂omapatnlat对分离的大鼠心脏灌注模型低速灌注性局部缺血30分钟后的Frank-Starling斜率的影响的曲线图。
图2是显示选择性血管紧张素转换酶抑制剂福辛普利拉对相同的分离的大鼠心脏灌注模型的Frank-Starling斜率的影响的曲线图。
发明详述通常心绞痛被描述为胸骨下胸部不适感，如紧迫感、沉闷感、压迫感或烧灼感。其特征为是非局灶性的-也就是说，患者不能用手指指出症状部位。这种不适可放射到左肩或左臂、或放射到颈部和颌部。部分病人以更不典型的术语描述其心绞痛，例如锐痛，“气痛”，仅颌部、牙齿、前臂或背部不适，或起始于上腹部并向胸部放射的不适。部分病人将其描述为没有明确不适的呼吸短促，这种症状称为等于心绞痛的呼吸困难(angina-equivalent dyapnea)。
当心肌需氧量升高到通过增加冠状动脉血流不能满足其需要的水平时就会发生心绞痛，通常是由于一支或多支心外膜冠状血管动脉粥样硬化性狭窄病变引起。因此，通常因为体力劳累或情绪紧张引起心绞痛。大多数稳定型心绞痛患者能够确定预计可引起不适的具体活动或情况；爬坡或急走是常见的情况。某些用力阈值(effortthreshold)变化因素不常见。此外，在寒冷气候下、饭后或清晨进行活动更可能引起心绞痛。部分病人述说将胳膊高举过头的活动很容易产生不适。在部分心绞痛病人中的可变的心绞痛用力阈值提示，冠状血流的动态变化(例如，由于冠状血管舒缩张力间歇性增加)有助于限制血液的固定性动脉粥样硬化性狭窄。稳定型心绞痛的发作通常逐渐开始并持续2到10分钟。通常经休息或舌下含服硝酸甘油可迅速缓解不适。
紧张引起的心绞痛也发生于某些患有严重主动脉瓣狭窄、左心室肥厚或缺乏明显冠状动脉狭窄的肺动脉高压患者。在这些情况下，即便是正常的冠状动脉血流也可能满足不了心肌需氧量增高的要求。心绞痛也可发生于有严重左心室膨大的患者，特别是伴有舒张期冠状动脉灌注压降低如晚期主动脉回流时。
将严重程度、频率或持续时间近期加重或自发性加重-尤其是如果伴有休息痛-的心绞痛认为是不稳定型心绞痛。也将近期发作心绞痛，特别是如果发生于轻微活动或休息时的心绞痛患者包括于这种类型中。大多数不稳定型心绞痛患者具有潜在阻塞性冠状动脉疾病；通常因为动脉粥样硬化斑与其上堆积的血小板裂开-或富含纤维蛋白引起非预期性症状的突然发作或稳定型转化为不稳定型心绞痛。不稳定型心绞痛也可能因为冠状血管外因素(第二种不稳定型心绞痛)而突然发生。例如严重贫血或一氧化碳中毒限制了血液携带或释放氧气的能力，而可使冠心病患者在平时可能很好耐受的情况下发生心绞痛。未控制的系统性动脉性高血压、快速的节律紊乱或由于肺病引起的低氧血症以及甲状腺机能亢进均可诱发心绞痛。
Prinzmetal’s心绞痛在特征和部位上均与稳定型心绞痛相似并常对硝酸甘油有效。然而，其特征是休息时发生，没有明显的诱发因素或在先的心跳加快或血压升高。解释这些特征性表现的潜在机理为瞬间冠状动脉痉挛。通常，这种发作发生于清晨。部分Prinzmetal’s心绞痛病人报告有其它与血管舒缩相关的症状如偏头痛或雷诺氏现象。参见Textbook of Internal Medicine，第三版，第316-317页(1997)。
本发明涉及应用一种或多种血管肽酶抑制剂治疗和/或减轻心绞痛症状。用于这种用途的优选血管肽酶抑制剂是omapatrilat或其药学上可接受的盐和BMS 189,921或其药学上可接受的盐，特别优选omapatrilat。可给予心绞痛患者血管肽酶抑制剂的剂量范围为每24小时约0.1 mg/Kg到约2.0 mg/Kg，优选每24小时约0.3 mg/Kg到约1.0 mg/Kg。可将所述血管肽酶抑制剂在24小时内以一次或多次剂量给予，以提供总量在上述范围内的活性药物。如果在24小时内多次给予，则可将所述剂量等分或可分为多种规格。当然，医师将根据心绞痛的类型和严重程度可调整所用活性药物的剂量。同样，如果联合应用血管肽酶抑制剂，则可将一种或两种所述抑制剂均给予较少的剂量以使所给予的活性药物的联合总量在上述范围内。
优选将所述血管肽酶抑制剂以片剂或胶囊剂口服给予。然而，也可应用其它给药方法，包括舌下含服、颊膜贴片、胃肠外给药如皮下、静脉内或肌肉内注射或输注技术、鼻腔给药如吸入喷雾、局部给药如乳膏或软膏剂、经皮给药如贴于皮肤的贴片、或直肠给药如栓剂。各种不同的剂型除含有所述血管肽酶抑制剂外，还有常用的药学上可接受的载体、稳定剂、防腐剂、润滑剂、稀释剂和其它常用成份。可给予立即释放或延长释放制剂。
本发明的另一个方面是用一种或多种以上定义的血管肽酶抑制剂与另一类已知治疗心绞痛有效的药学活性药物联合治疗心绞痛。这类药物包括长效硝酸酯如硝酸甘油、单硝酸异山梨酯和二硝酸异山梨酯、β-肾上腺素能阻滞剂(如盐酸普萘洛尔、马来酸噻吗洛尔、卡维地洛、酒石酸美托洛尔和阿替洛尔)以及钙离子通道阻滞剂(如磺酸氨氯地平、盐酸地尔硫和盐酸异搏定)。本发明也包括一种或多种血管肽酶抑制剂与辅助性治疗心绞痛有效的药学活性药物如抗血小板药物的联合应用。这类抗血小板药物包括氯吡格雷、噻氯匹定、阿斯匹林和潘生丁。在所述联合治疗中，所用长效硝酸酯、β-肾上腺素能阻滞剂、钙离子通道阻滞剂和/或抗血小板药物的剂量是早已批准的用于治疗心绞痛的剂量或治疗医师决定用的较小剂量。同样，在所述联合治疗中，血管肽酶抑制剂的剂量可少于上述单独治疗所用的剂量。
所述血管肽酶抑制剂和其它一种或多种药学活性药物制备成单一剂型、可同时给予的独立剂型、或可根据交错时间表以独立剂型给予。
术语药学上可接受的盐包括碱金属盐(如钠和钾)、碱土金属盐(如钙和镁)、氨基酸(如精氨酸、赖氨酸等)衍生盐、以及胺(如烷基胺例如t-丁胺、t-戊胺等、取代的烷基胺例如苄胺、二烃基胺、取代的二烃基胺例如N-甲基葡糖胺、三烃基烷、取代的三烃基胺和季铵盐)衍生盐。
下述实施例证实所述血管肽酶抑制剂omapatrilat的抗心绞痛作用。
实施例1低灌流性局部缺血的分离的大鼠心脏灌注模型方法学雄性SD大鼠(体重为350-450克)禁食过夜，然后用戊巴比妥钠麻醉(30-40 mg/Kg，腹腔注射)。通过气管切开术插管后，用啮齿动物呼吸器(683型，Harvard Instruments，South Natick，MA)维持所述动物通气，使呼吸为65-75次/分钟而潮气量达到4-5 ml，并通过颈外静脉给予肝素钠(1000 IU/Kg)以抗凝。实行正中胸廓切开术，将肋骨回缩并暴露心脏。去除心包并清除升主动脉所有结缔组织。用2-0丝线围绕所述主动脉的根部放置以便固定灌注插管。然后钳夹下腔静脉并在主动脉根部作一切口。将连接3通开关的自制的钢制插管迅速插入所述切口中，然后用预置的缝线结扎固定。用氧合(95％氧、5％二氧化碳，pH 7.4)包含1.25 mM氯化钙、112 mM氯化钠、25 mM碳酸氢钠、5 mM氯化钾、1 mM磷酸氢钾、1.2 mM硫酸镁和5.5 mM葡萄糖的Krebs-Henseleit溶液建立逆行体外灌注。然后将心脏转移到标准的Langendorff灌注装置上[Doring等，The isolated perfusedwarm-blooded heart according to Langendorff，三月，第一版Biomesstechnik-Verlag；1988]，用温热至37℃并以86 mmHg恒定灌注压给予氧合Krebs-Henseleit缓冲液灌注心脏。用乳胶指套(#55613-413，VWR Scientific，S.Plainfield，NJ)作成充满水的乳胶球，并将其与不锈钢插管(LL2型，Hugo Sachs，March-Hugstetten，德国)连接，然后将该插管插入左心室。将所述插管与压力传感器(P23型，GouldInstruments，Valley View，OH)连接，以测定心室压力变化。然后将心脏浸入到水套式(water-jacketed)(37℃)器官浴中。用体外电磁流体探头(MDL 1401型，Skalar Instruments，Litchfield，CT)监测灌注液流速。让心脏以其原有的正常窦性心率搏动。以250 Hz将所有数据连续数字化以用于随后的分析(Po-Neh-Mah Acquisition系统，GouldInstruments，Valley View，OH)。根据所述数字化数据，可以获得对照、药物预处理、低速灌流和再灌注时的稳定状态测得的心率、灌注液流速和LV(左心室)形成压(LV收缩期-LV舒张末期压力)。一式四次制备和检测心脏。
心室功能根据一式三条Frank-Starling(FS)曲线的线性部分平均斜率获得心肌功能的周期性负荷独立指标[Schlant，心血管系统的正常生理，Hurst JW编辑，心脏，第4版，纽约McGraw-Hill；197871-100]。同样，还记录并计算了各不连续系列的FS曲线获得的左心室形成压峰值(left ventricular developed pressures)(LVDPmax)的均值。使用程序控制输入/撤出泵(44型，Harvard Apparatus，South Natick，MA)通过所述心室内球囊以50μl/min的恒定速率的膨胀来获得FS曲线。在所述FS曲线下降时停止膨胀球囊，该点定义为左心室形成压(LVDP)降低而球囊体积进一步增加(预加荷载)。然后所述球囊体积以300μl/min缩小直到检测不到LVDP(＜2 mmHg)。重复这一步骤直到获得3个重复曲线。
药物制剂的给予将所述试验化合物以2500倍的给药浓度溶解于100％二甲亚砜(DMSO)中，然后用程序控制输液泵(22型，Harvard Apparatus，SouthNatick，MA)注入到每个心脏的远端灌注流中。每个泵通过特定的计算机程序控制，该程序可连续监测每个心脏的灌注液流速，并能动态调整试验化合物的输注率以维持0.04％的恒定DMSO浓度。赋形剂心脏是以同样的方式但不用药物处理。
实验方案使用这种模型，将血管肽酶抑制剂omapatrilat与赋形剂和选择性血管紧张素转化酶抑制剂福辛普利拉(福辛普利的游离酸形式)两者相比较。Omapatrilat在20个心脏、赋形剂在21个心脏、福辛普利拉在19个心脏上进行了试验。
将每一化合物的最大剂量限制在用正常心脏评价不影响血液动力学的最大剂量，以便避免药物性心脏抑制对心室功能产生的混淆作用。
在开始5分钟的平衡期之后，测定每个心脏的对照FS曲线并记录每个心脏的LVDPmax。然后将实验预加荷载(球囊体积)调节到特定的球囊体积，该体积可在每个心脏中产生70％的LVDPmax。然后维持这一体积，随后详细介绍。一旦所述预加荷载在所有心脏中完成，跟着有一个5分钟的对照期。此时开始输注药物或赋形剂并在余下的实验中继续进行。
为了避免混淆影响肌收缩力的药物作用，在低灌流性局部缺血期药物治疗的剂量依据是最高为在正常灌注压下不影响稳态血液动力学的最高浓度。在5分钟的对照期之后，将所述药物连续输注给予，以正常灌注(86 mmHg)持续10分钟，低灌流性局部缺血(50 mmHg)持续45分钟。采用Frank-Starling(FS)关系斜率作为对照期及低灌流性局部缺血期心室收缩功能的负荷独立指数。将所有FS数据归一化并表示为每个心脏对照FS的百分率。将所有相似组的数据汇总并以均数±sem(均数的标准误)表示。用单因素方差分析比较所有各组。p值＜0.05有显著性。
Omapatrilat剂量(μM) 0 3 10 30相对于对照的FS斜率％ 48.157.063.571.1Sem 2.7 4.2 3.3 3.9
福辛普利拉剂量(μM) 0 10 30相对于对照的FS斜率％ 47.7 49.4 52.3Sem 2.73.43.4该数据的图示见图1(omapatrilat)和2(福辛普利拉)。
这些数据证明所述血管肽酶抑制剂omapatrilat以剂量依赖形式改善所述FS斜率(R2＝0.99)，而所述选择性血管紧张素转化酶抑制剂福辛普利拉与赋形剂在等克分子剂量时则没有显著性差异。
实施例2劳力性机能障碍的犬模型用劳力性心肌功能不全的犬模型评价omapatrilat(0.3 mg/Kg，静脉注射，n＝7)的功效[Matsuzaki等，“钙阻滞剂(地尔硫)对清醒狗运动时的局部心肌血流和功能的影响”Circulation，1984，69，801-814]。训练依赖侧支灌注(心脏)后壁的带有仪器的狗在机动踏车上跑动。在对照期(阶段-2)和给药(阶段-1)之后，开始运动(阶段1)，每2分钟增加运动量直到心率不能随增加运动量而增加，或拒绝(refusal)。最大运动量预定为阶段7。同样，运动后的恢复阶段(8，9)也是2分钟时间。采用下列方案
连续获得系统性血液动力学、局部心肌壁增厚和局部心室电描记图(electograms)(数据)并将其数字化以用于随后的分析。成对进行所有运动研究，这样在赋形剂治疗研究后4小时接着进行omapatrilat研究。将所有数据归一化并表示为适当赋形剂对照值的百分率。根据情况用单因素方差分析或t-检验来比较各组均数。p值＜0.05有显著性意义。目前和以往类似的实验方案公布的数据证明，急性运动的单次发作可在3小时内完全恢复。在目前的研究中，在第二项(omapatrilat)运动研究以前的所有血液动力学值100％恢复到各个赋形剂对照值的观测结果证明从对照运动中完全恢复。
在这一实验中，在对照或运动期间omapatrilat(0.3 mg/Kg，静脉注射)没有显著影响左心室收缩压或二重积(心率×LV收缩压)。由于每只狗的运动终点不同，因此所有运动数据均以赋形剂对照的百分率表示。
所得数据如下
左心室收缩(LVS)压
心率
二重积(心率×LV收缩压)
从以上数据可得出结论，运动性心脏功能的改善并不归因于心室负荷或心率的改变。
如以下数据所示，尽管系统性血液动力学不受omapatrilat影响，但是7只狗中有6只的运动量峰值得以延伸。
运动量峰值(Kcal)
这种运动量峰值的增加伴随着缺血区域增厚心肌壁的强壮性增加，(p＜0.001)，并且在相应的局部电描记图中ST段趋于降低(p＝0.06)。所得数据显示如下后壁肥厚
ST段
用omapatrilat可显著改善后壁心肌肥厚。相应的ST段升高说明这一缺血区域的功能。这种功能的改善与以上所示运动量提高相一致。
权利要求
1.一种治疗和/或缓解心绞痛症状的方法，包括给予有效量的血管肽酶抑制剂。
2.权利要求1的方法，其中所述血管肽酶抑制剂选自omapatrilat或其药学上可接受的盐、[S-(R*，R*)]-六氢-6-[(2-巯基-1-氧代-3-苯基丙基)氨基]-2，2-二甲基-7-氧代-1H-氮杂-1-乙酸或其药学上可接受的盐以及它们的混合物。
3.权利要求2的方法，其中所述血管肽酶抑制剂是omapatrilat。
4.一种治疗和/或缓解心绞痛症状的方法，包括一起给予有效量的血管肽酶抑制剂和另一种活性药物。
5.权利要求4的方法，其中所述血管肽酶抑制剂选自omapatrilat或其药学上可接受的盐、[S-(R*，R*)]-六氢-6-[(2-巯基-1-氧代-3-苯基丙基)氨基]-2，2-二甲基-7-氧代-1H-氮杂-1-乙酸或其药学上可接受的盐以及它们的混合物。
6.权利要求5的方法，其中所述血管肽酶抑制剂是omapatrilat。
7.权利要求4的方法，其中所述另一种活性药物与所述血管肽酶抑制剂同时给予。
8.权利要求4的方法，其中所述另一种活性药物与所述血管肽酶抑制剂分开给予。
9.权利要求4的方法，其中所述另一种活性药物是有机硝酸酯、β-肾上腺素能阻滞剂、钙离子通道阻滞剂或抗血小板药物。
10.权利要求9的方法，其中所述有机硝酸酯选自硝酸甘油、单硝酸异山梨酯和硝酸异山梨酯。
11.权利要求9的方法，其中所述β-肾上腺素能药物选自盐酸普萘洛尔、马来酸噻吗洛尔、卡维地洛、酒石酸美托洛尔和阿替洛尔。
12.权利要求9的方法，其中所述钙离子通道阻滞剂选自磺酸氨氯地平、盐酸地尔硫和盐酸异搏定。
13.权利要求9的方法，其中所述抗血小板药物选自氯吡格雷、噻氯匹定、阿斯匹林和潘生丁。
14.一种包含血管肽酶抑制剂和抗血小板药物的药用组合物。
15.权利要求14的药用组合物，其中所述血管肽酶抑制剂选自omapatrilat或其药学上可接受的盐、[S-(R*，R*)]-六氢-6-[(2-巯基-1-氧代-3-苯基丙基)氨基]-2，2-二甲基-7-氧代-1H-氮杂-1-乙酸或其药学上可接受的盐以及它们的混合物。
16.权利要求15的组合物，其中所述血管肽酶抑制剂是omapatrilat而所述抗血小板药物是阿斯匹林。
17.权利要求15的组合物，其中所述血管肽酶抑制剂是omapatrilat而所述抗血小板药物是氯吡格雷。
18.一种包含血管肽酶抑制剂的组合物的用途，用于生产治疗和/或缓解心绞痛症状的药物。
19.权利要求18的使用方法，其中所述血管肽酶抑制剂选自omapatrilat或其药学上可接受的盐、[S-(R*，R*)]-六氢-6-[(2-巯基-1-氧代-3-苯基丙基)氨基]-2，2-二甲基-7-氧代-1H-氮杂-1-乙酸或其药学上可接受的盐以及它们的混合物。
20.权利要求19的使用方法，其中所述血管肽酶抑制剂是omapatrilat。
21.权利要求18的使用方法，其中所述组合物包含血管肽酶抑制剂和另一种活性药物。
22.权利要求21的使用方法，其中所述血管肽酶抑制剂选自omapatrilat或其药学上可接受的盐、[S-(R*，R*)]-六氢-6-[(2-巯基-1-氧代-3-苯基丙基)氨基]-2，2-二甲基-7-氧代-1H-氮杂-1-乙酸或其药学上可接受的盐以及它们的混合物。
23.权利要求22的使用方法，其中所述血管肽酶抑制剂是omapatrilat。
24.权利要求21的使用方法，其中所述另一种活性药物是有机硝酸酯、β-肾上腺素能阻滞剂、钙离子通道阻滞剂或抗血小板药物。
25.权利要求24的使用方法，其中所述有机硝酸酯选自硝酸甘油、单硝酸异山梨酯和硝酸异山梨酯。
26.权利要求24的使用方法，其中所述β-肾上腺素能药物选自盐酸普萘洛尔、马来酸噻吗洛尔、卡维地洛、酒石酸美托洛尔和阿替洛尔。
27.权利要求24的使用方法，其中所述钙离子通道阻滞剂选自磺酸氨氯地平、盐酸地尔硫和盐酸异搏定。
28.权利要求24的使用方法，其中所述抗血小板药物选自氯吡格雷、噻氯匹定、阿斯匹林和潘生丁。
全文摘要
血管肽酶抑制剂、尤其是omapatrilat有效用于治疗和/或缓解心绞痛症状。所述血管肽酶抑制剂可与其它活性药物联合使用。
文档编号A61K31/34GK1347321SQ00805543
公开日2002年5月1日 申请日期2000年3月9日 优先权日1999年3月29日
发明者J·R·鲍维尔, H·H·霍尔兹格雷菲 申请人:布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司