专利名称：防治肾组织纤维化的药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor，HGF)，特别是涉及肝细胞生长因子作为防治肾组织纤维化的药物。
背景技术：
慢性进行性肾功能减退是造成终末期肾病(End-Stage renal disease，ESRD)，进而发展成尿毒症的最主要原因。大量临床实践和实验研究均证实当肾组织结构损伤至一定程度后，不论原发病因是否存在，肾脏都不可避免地发生进行性功能衰竭，其组织形态学表现为肾小球硬化，肾小管萎缩及间质的纤维化。
体内、外实验结果证实，肾小管-间质纤维化在ESRD发生过程中有着十分重要的作用。肾小管萎缩和间质纤维化的程度，直接关系到肾功能不全进展的程度。因此控制/逆转肾小管-间质纤维化可以显著地减缓ESRD的发展，这可能成为治疗肾脏病的一种新方法，但目前尚未见行之有效的方法和药物。
现已知，近端小管是构成肾单位的主要结构之一，承受三分之二水及电解质的重吸收和几乎全部有机物(如氨基酸和葡萄糖等)的重吸收。肾小管上使细胞对于机体水、电解质内环境平衡的稳定致关重要。
纤维化是组织/器官慢性病变过程中，其组织结构进行性毁损的共同特点，同时也是生理机能进行性衰竭的基础。以肾脏病为例，肾小管上使细胞在病理因素影响下，如转化生长因子(TGFβ)的作用，上皮细胞转化成为肌源性纤维母细胞而失去上皮细胞的结构和功能，同时能够合成、分泌大量的细胞外基质，如纤维连接蛋白等。这一病变过程直接造成慢性肾变时肾小管的萎缩以及间质的纤维化。因此肾小管上皮细胞转化成肌源性成纤维母细胞造成小管-间质纤维化是重要致病机制。
三、技术内容1、技术问题本发明的目的就是提供一种用肝细胞生长因子(Hepatocyte growthfactor，HGF)作为防治肾组织纤维化的药物。
2、技术方案本发明的防止肾组织纤维化的药物，其特征在于在该药物中含有肝细胞生长因子，将该肝细胞生产因子用生理盐水相混合制成注射针剂，其肝细胞生长因子在生理盐水中的浓度为1μg/ml。该药物中肝细胞生长因子使用的剂量为5～40μg/kg/次。每日2次。
根据本发明人在动物体内、外的实验、研究，发现外源性肝细胞生长因子能够有效地阻断肌源性成细维母细胞的激活，有效地防治肾小管的萎缩及间质的纤维化。
3、技术效果本发明人的研究表明，HGF能够阻断TGFβ1所致的肾小管上皮细胞(HKC细胞)表达α-SMA蛋白。
α-SMA蛋白是肌源性成纤维母细胞重要表现蛋白。正常培养条件下的是肾小管上皮细胞不表达α-SMA蛋白，但TGFβ1能够促使HKC细胞表达α-SMA，此说明HKC细胞在TGFβ1的作用下能转化为肌源性成纤维母细胞。研究表明0.1ng/ml浓度的TGFβ1就能促进HKC细胞表达α-SMA蛋白，而2ng/ml浓度的TGFβ1这种作用就十分明显，但是当存在HGF时，TGFβ1的作用就被抑制，HGF的浓度达到5ng/ml时既部分抑制TGFβ1所致的α-SMA蛋白表达，20ng/ml的HGF就能基本完全抑制HKC细胞在TGFβX作用下的α-SMA蛋白表达。
本发明人的研究还表明，HGF能阻断HKC细胞在TGFβ1作用所致的纤维连接蛋白表达。
纤维连接蛋白(Fibronectin)是细胞外基质成分之一，具有多种重要的生物学作用。小管上皮细胞几乎不表达纤维连接蛋白，但是肌源性成纤维母细胞则可以产生大量的纤维连接蛋白。大量的纤维连接蛋白合成与聚积直接造成组织的纤维化。HKC细胞在TGFβ1(10ng/ml)作用下，纤维连接蛋白合成显著增多。HGF并不能影响HKC细胞生成纤维连接蛋白。但当HGF(20ng/ml)与TGFβ1同时加入HKC细胞后，小管上皮细胞合成纤维连接蛋白的量明显减少，几乎接近正常对照组水平。此说明，TGFβ1的作用下，小管上皮细胞在转化成肌源性成纤维母细胞的同时，相关的细胞基质蛋白的合成也显著多，而HGF则可以显著地抑制这一过程。
肝细胞生长因子能够治疗梗阻性肾病小鼠的小管-间质病变。
梗阻性肾病是典型的小管-间质病变的动物模型，其肾组织病变的小管萎缩，间质成纤维母细胞增多及间质细胞基质聚集为特点，而TGFβ1是造成上述病变的主要原因。肝细胞生长因子能显著地抑制肾组织的病变过程。
具体实施例方式
本发明的防治肾组织纤维化的药物，其特征在于在该药物中含有肝细胞生长因子，将该肝细胞生产因子用生理盐水相混合制成注射针剂，其肝细胞生产因子在生理盐水中的浓度为1μg/ml。该药物中肝细胞生长因子使用的剂量为5～40μg/kg/次。每日2次，静脉注射。肝细胞生长因子作为防治肾组织纤维化的药物能够有效阻断TGFβ1作用下，肌源性成纤维母细胞的转化及纤维连接蛋白的增多和聚集。因此能有效减缓进行性肾功能衰竭，能有效治疗梗阻性肾病及加速一过性输尿管梗阻肾脏的功能恢复。
权利要求
1.一种防治肾组织纤维化的药物，其特征在于在该药物中含有肝细胞生长因子，将该肝细胞生产因子用生理盐水相混合制成注射针剂，其肝细胞生产因子在生理盐水中的浓度为1μg/ml。
2.根据权利要求1所述的防止肾组织纤维化的药物，其特征在于该药物中肝细胞生长因子使用的剂量为5～40μg/kg/次。
全文摘要
防治肾组织纤维的药物是一种用肝细胞生长因子作为防治肾组织纤维化的药物,其特征在于在该药物中含有肝细胞生长因子,将该肝细胞生产因子用生理盐水相混合制成注射针剂,其肝细胞生产因子在生理盐水中的浓度为1μg/ml。该药物中肝细胞生长因子使用的剂量为5～40μg/kg/次。
文档编号A61K38/19GK1376517SQ0211285
公开日2002年10月30日 申请日期2002年4月8日 优先权日2002年4月8日
发明者刘友华, 杨俊伟 申请人:刘友华, 杨俊伟