专利名称：治疗前列腺肥大的淫羊藿提取物及其在制备药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及治疗前列腺肥大的淫羊藿提取物及其在制备药物中的应用，具体为淫羊藿黄酮和多糖类成份与载体或其它中药提取物组配，制备治疗前列腺肥大及前列腺炎的药物。
背景技术：
淫羊藿为小檗科(Berberidaceae)淫羊藿属(Epimedium)植物，有淫羊藿Epimedium brevicornum，箭叶淫羊藿E.sagittatum，柔毛淫羊藿E.pubescens，乌山淫羊藿E.wushanense，及朝鲜淫羊藿E.koreanum的干燥地上部分。它具有补肾壮阳、强筋骨和祛风湿的功效，用于治疗阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛等功效。淫羊藿主要含有黄酮、多糖、木脂素和生物碱等化学成分。临床应用和药理实验报道认为，淫羊藿黄酮类成分或多糖类成分具有治疗心血管疾病、增强人体免疫力、调节性功能、治疗骨质疏松及抗衰老的作用。但是，至今这些临床及药理实验均是将其黄酮与多糖分别单独地进行研究。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种淫羊藿有效部位组配的药用组合物，其可与常规载体和/或若干其它具有协同作用的中药提取物组配，制备治疗前列腺肥大及前列腺炎的药物组合物，其应该疗效显著，且基本无毒副作用，尤其符合老人用药及长期用药的要求。
为解决上述技术问题，本发明提供下述技术方案。
一种治疗前列腺肥大的药物组合物，其特征在于含有淫羊藿属植物中提取的按重量比计2-8份∶8-2份的总黄酮与多糖类；总黄酮中黄酮含量为20-90％；多糖的分子量范围为1000至700000。
所述的药物组合物中，淫羊藿总黄酮与多糖类的配比可以为3-6份∶7-4份；总黄酮中淫羊藿甙与淫羊藿甙I的含量为10-90％；多糖的分子量范围为45000至620000。
前述药物组合物中的淫羊藿提取物以如下方法制备取淫羊藿药材，用含60-95％有机溶剂的水溶液提取，提取液减压回收有机溶剂后的残留物上大孔吸附树脂柱D101或D140，用水与乙醇的混合溶剂梯度洗脱，收集30-85％乙醇液部分，减压回收，干燥得总黄酮，总黄酮中黄酮含量为20-90％；取60-95％有机溶剂的水溶液提取过后的淫羊藿药渣，用水提取，浓缩水提取液，加入乙醇，使含醇量达到70-85％，静置，滤得多糖粗品；取多糖粗品溶于水后，加入氯仿∶正丁醇按体积比3-6∶1份的混合液，滤除蛋白质，滤液用分子量为1000的超滤膜超滤，除去分子量1000以下的成分，浓缩液继续浓缩干燥，得淫羊藿多糖，其分子量范围为1000至700000；将淫羊藿总黄酮与多糖类按重量比计2-8份∶8-2份的配比混合。
所述药物组合物中的淫羊藿提取物的制备方法中，淫羊藿提取所用的60-95％有机溶剂的水溶液，其中有机溶剂为乙醇、丙酮、异丙醇和/或甲醇；淫羊藿总黄酮与多糖类的配比为3-6份∶7-4份。
所述药物组合物中的淫羊藿提取物的制备方法中，总黄酮中淫羊藿甙与淫羊藿甙I的含量为10％-90％；淫羊藿多糖制备方法中，多糖粗品可再次溶于水，加入乙醇，使含醇量达到70-85％，静置，滤取多糖粗品，多糖的分子量为45000至620000。
前述药物组合物，其特征在于淫羊藿总黄酮与多糖类的配比为3∶8份、4∶6份、5∶5份、6∶4份或7∶3份；其可与药学上可接受载体或辅料混合。
一种治疗前列腺肥大及前列腺炎的药物组合物，其特征在于含人参、花粉、黄芪、黄柏和淫羊藿总黄酮和/或淫羊藿多糖类。
该复方药物组合物，其特征在于按重量比计，含6-10％人参皂甙的人参提取物1-6份、含10-20％黄酮的花粉或花粉提取物1-8份、含3-5％黄芪皂甙及20-30％黄芪多糖的黄芪提取物1-4份与含10-15％小檗碱的黄柏提取物1-6份，黄酮含量为20-90％的淫羊藿总黄酮和/或淫羊藿多糖类4-16份。
所述复方药物组合物，其特征在于含人参提取物1-2份，花粉或花粉提取物2-4份，黄芪提取物1-2份，黄柏提取物1-2份，淫羊藿总黄酮和/或淫羊藿多糖类5-10份。
前述复方药物组合物，其特征在于可以与药学上可接受的载体或辅料混合，按常规制成各种口服制剂。
淫羊藿提取物较详细的制备方法描述如下。
将淫羊藿叶粗粉用60-95％有机溶剂的水溶液提取1-4次，每次提取溶剂的用量为6-10ml/g，提取时间1-3小时，过滤合并提取液，减压回收有机溶剂，水溶液加入大孔吸附树脂柱(如D101或D140)中，用水及乙醇的混合溶剂洗脱，收集30％-85％乙醇液部分，减压回收，干燥得A部分。A部分提取物为总黄酮(即粗黄酮，或黄酮粗品)，其中黄酮含量为20-90％，总黄酮中淫羊藿甙及淫羊藿甙I的含量为10-90％。
取淫羊藿叶粗粉用60-95％有机溶剂的水溶液提取后的药渣，用水提取3次，水的用量为6-10ml/g，提取时间1-2小时，过滤合并滤液，浓缩，加入乙醇，使含醇量达到70-85％，搅匀，静止12-24小时，过滤得到沉淀物。如需要可重复精制3次，得棕红色多糖粗品。粗多糖溶于500毫升水中，加入氯仿∶正丁醇(3～6∶1)混合溶剂100-200毫升，滤除蛋白质，该水溶液用分子量为1000的超滤膜超滤，除去分子量1000以下的成分，浓缩液继续浓缩干燥，得精制淫羊藿多糖部分B。多糖分子量在1000至700000，多糖部分按常规测定方法鉴定了EPS-1及EPS-2两个组分，其分子量分别为45000及620000；多糖由岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖七种单糖组成。另外，本发明还鉴定了四个多糖组分，其分子量分别为3400、25000、45000及520000。
A部分黄酮类与B部分多糖类按一定比例混合，得到所需淫羊藿提取物，实验证明具有良好疗效的A部分与B部分的比例为2∶8；3∶7；4∶6；5∶5；6∶4；7∶3以及8∶2。
临床实验研究表明本发明的含淫羊藿黄酮与淫羊藿多糖一定配比的药物组合物具有治疗良性前列腺肥大疾病，其对于良性前列腺肥大，总有效率达93.7％。本组患者临床症状积分下降显著(P＜0.01)，生活质量显著提高，主要表现为夜尿次数减少，排尿改善。尿流率显著提高(P＜0.01)，提示梗阻有所减轻。膀胱残余尿量减少(P＜0.01)。PSA(前列腺特异性抗原)值治前(3.31±3.68μg/L)及治后(3.03±3.84μg/L)有所下降，但无统计学意义。
临床实验研究表明本发明的淫羊藿提取物与人参提取物、花粉及花粉提取物、黄芪提取物及黄柏提取物组成的复方，对治疗前列腺肥大兼慢性前列腺炎疾病亦有显著疗效。该组方对良性前列腺肥大及慢性前列腺炎，总有效率达75.0％。本组患者临床症状积分下降显著(P＜0.01)，生活质量显著提高，主要表现为夜尿次数减少，排尿改善。尿流率显著提高(P＜0.01)，提示梗阻有所减轻。膀胱残余尿量减少(P＜0.01)。PSA(前列腺特异性抗原)值治前(4.41±5.28μg/L)及治后(1.84±1.07μg/L)显著下降(P＜0.01)。
本发明的淫羊藿提取物制备工艺简单，有效组分简单明确，且有效组分黄酮与多糖之间具有协同治疗作用，黄酮与多糖相应的配比增进了此种协同疗效，用于治疗良性前列腺肥大疗效显著。
下面结合实例描述淫羊藿提取物的制备方法及其在制备治疗良性前列腺肥大药物中的应用，以及淫羊藿提取物、人参提取物、花粉及花粉提取物、黄芪提取物及黄柏提取物组成的复方，在制备治疗前列腺肥大兼慢性前列腺炎药物中的应用。
具体实施例方式
实例1、不同种淫羊藿植物的黄酮及多糖含量测定制备淫羊藿提取物的植物包括淫羊藿Epimedium brevicornum，箭叶淫羊藿E.sagittatum，柔毛淫羊藿E.pubescens，乌山淫羊藿E.wushanense，及朝鲜淫羊藿E.koreanum的干燥地上部分。分别采集于四川、陕西、湖南、湖北、贵州及辽宁等省。其中的总黄酮用UV方法测定，淫羊藿甙(icarrin)及淫羊藿甙I(icarisid I)用HPLC法测定及多糖含量采用苯酚-硫酸法测定。
测定结果显示，其中总黄酮的含量6-20％，总多糖含量为13-26％。
实例2、淫羊藿提取物的制备淫羊藿(陕西采集)叶粗粉用500g，用3升60％乙醇溶液提取3次(60℃)，提取时间2小时，过滤合并提取液，减压回收有机溶剂，水溶液加入大孔吸附树脂(D101或D140柱，湿重1000g)，用3升水洗脱，再用30％-85％乙醇液洗脱，减压回收乙醇洗脱液，干燥得A部分20g提取物(得率3％，黄酮含量45.8％，主要成分为淫羊藿甙和次淫羊藿甙)。将过滤后的药渣用3升水煮提50分钟，提取3次，过滤合并滤液，浓缩至1升，过滤，加入95％的乙醇，使含醇量达到75％，搅匀，静止12小时，过滤得到沉淀物。重复水溶醇沉精制2次，得棕红色粗多糖(56g)。粗多糖溶于500ml水中，用氯仿正丁醇(5∶1)有机溶剂100ml混合，振荡混匀，除去蛋白质，水溶液用分子量为1000的超滤膜超滤，除去分子量1000以下的成分，浓缩液继续浓缩干燥，得精制淫羊藿多糖部分B(36.5g)。多糖的分子量在1000至700000。鉴定了EPS-1及EPS-2两个多糖组分，分子量分别为45000及620000。多糖由岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖七种单糖组成。另外，还鉴定了四个多糖组分，其分子量分别为3400、25000、45000及520000。
A部分与B分别按2∶8；3∶7；4∶6；5∶5；6∶4；7∶3以及8∶2的比例混合，得到所需淫羊藿提取物。
制备淫羊藿提取物的植物包括淫羊藿Epimedium brevicornum，箭叶淫羊藿E.sagittatum，柔毛淫羊藿E.pubescens，乌山淫羊藿E.wushanense，及朝鲜淫羊藿E.koreanum的干燥地上部分。每种植物用量为500g，按上述工艺制备。总黄酮中黄酮含量为20-90％。各部分得率结果如下
实例3、淫羊藿提取物及人参、花粉、黄芪及黄柏的复方制备该复方由以下五类组分混合组成淫羊藿提取物(总黄酮中黄酮为40％，总黄酮中淫羊藿甙为20％；多糖为40％)5份；人参提取物(人参皂甙含量6-10％)1份；花粉或花粉提取物(黄酮含量10％-20％)2份；黄芪提取物(黄芪皂甙3-5％以上，黄芪多糖20-30％)1份；黄柏提取物(小檗碱10-15％)1份。
淫羊藿提取物按实例2中方法制备。
人参提取物(人参皂甙含量6-10％)制备方法如下500克人参粗粉，用70％的乙醇水溶液1-2L加热回流提取2-3次，减压回收乙醇，过滤，蒸干滤液，得人参提取物160克。
花粉或花粉提取物(黄酮含量10-20％)制备方法如下500克花粉，用75％的乙醇水溶液1-2L加热回流提取2-3次，减压回收乙醇，过滤，蒸干滤液，得花粉提取物126克。
黄芪提取物(黄芪皂甙3-5％以上，黄芪多糖20-30％)制备方法如下500克黄芪粗粉，用75％的乙醇水溶液2-4L加热回流提取2-3次，减压回收乙醇，过滤，滤液上大孔吸附树脂(D101，1公斤)，用水和乙醇水溶液梯度洗脱，收集30％-85％的乙醇液，浓缩干燥，得提取物67克(含黄芪皂甙4.7％)。用75％乙醇液洗脱后的药渣用水(1L)煮3次，过滤浓缩至1L，加入乙醇使乙醇含量为75-85％，沉淀精制得多糖部分克。皂甙部分与多糖部分按7∶3的比例混合，得黄芪提取物。
黄柏提取物(小檗碱10％-15％)制备方法如下500克黄柏粉碎，用75％的乙醇水溶液1-2L加热回流提取2-3次，减压回收乙醇，过滤，蒸干滤液，得黄柏提取物96克。
实例4、急性毒性研究淫羊藿提取物动物选用SD小鼠(昆明种)40只，体重20±2g，雌雄各半，实验前禁食16小时，让其自由饮水。均分2组(n＝20)，第一组一次性灌服淫羊藿提取物I(A∶B为4∶6份；A、B混合后测得黄酮含量40％，淫羊藿甙10％，多糖60％)6g/kg，第二组一次性灌服淫羊藿提取物I 9g/kg，观察7天，记录动物给药后食欲、自发活动、粪便、生长发育及死亡情况。同样实验操作，相同的剂量，我们观察了淫羊藿提取物II(A∶B为6∶4份；A、B混合后测得黄酮含量40％，淫羊藿甙20％，多糖40％)及淫羊藿提取物III(A∶B为7∶3份；A、B混合后测得淫羊藿甙60％，多糖30％)及实例3淫羊藿复方(淫羊藿、人参、黄芪、花粉及黄柏)对小鼠的急性毒性。
结果显示，淫羊藿提取物I、II、III及实例3淫羊藿复方经口服灌胃的LD50未能测出，因此，口服用药的LD50大于9g/kg。
实例5、临床实验研究结果1、临床实验研究的目的1)观察淫羊藿提取物对良性前列腺肥大确切疗效及毒副反应；2)观察及前述实例3中的淫羊藿组方(淫羊藿、人参、黄芪、花粉及黄柏)对前列腺肥大兼慢性前列腺炎的疗效及毒副作用。
2、病人纳入标准1)凡符合单纯性前列腺肥大，年龄在50岁以上，2)前列腺肥大伴前列腺炎，年龄在30岁以上，3)症状及体征计分≥6分，并伴相应理化检测不同程度异常者，4)前列腺肥大伴阳萎、早泄者。
病人统计资料如下
*良性前列腺肥大组用淫羊藿提取物；**前列腺肥大伴慢性前列腺炎用淫羊藿提取物组方(人参、黄芪、花粉及黄柏)3、治疗方法良性前列腺肥大组用淫羊藿提取物(A∶B为6∶4份；混合后测得黄酮含量40％，淫羊藿甙20％，多糖40％)。剂量250mg/粒×3粒×2次/天。
前列腺肥大兼慢性前列腺炎组用实例3淫羊藿提取物复方。剂量250mg/粒×3粒×2次/天。
4、观察方法积分≥6分作为观察对象。平分见下表前列腺肥大临床症状体征计分方法症状体征0分1分 2分 3分排尿状况正常 尿细或线状尿流断续成线 尿点滴而下，不状 成线小腹症状无 满闷感胀满感 胀满痛排尿时间＜40秒 40-50秒 51-60秒 ＞60秒尿流率 ＞15ml/秒 11-15ml/秒6-10ml/秒＜6ml/秒残留尿量10ml 10-50ml 50-100ml ＞100ml前列腺肥大 正常 I度增生 II度增生 III度增生注前列腺肥大增生分度，参考文献吴赛珠，性激素与老年疾病，第一版，北京中国科学技术出版社1998.171-189。
5、疗效标准临床控制主要症状和体征消失，积分率降低90％以上，理化指标恢复正常。
显效主要症状和体征大部分消失，积分减少60-89％，理化指标基本恢复正常。
有效主要症状及体征部分减轻或消失，积分减少15-59％，理化指标有所好转。
无效主要症状和体征无变化，甚至加重。
6、毒副反应观察血常规观察治疗前后RBC、Hb、WBC及Plt变化尿常规观察治疗前后尿蛋白及RBC的变化肝功能观察治疗前后ALT及AST的变化肾功能观察治疗前后BUN及Cr的变化。
7、统计处理对计量资料用X±SD表示，配对t-test处理；组简处理用Ridit检验。
8、结果1)良性前列腺肥大与前列腺肥大兼慢性前列腺炎两组治疗前后临床症状积分变化如下表所示。
表1、两组前列腺肥大临床症状积分变化(X±SD)
2)膀胱残余尿量。两组治疗前后的尿残余量显著减少。
表2、两组膀胱残余尿量变化(单位mL，X±SD)
3)尿流率。两组治疗前后的尿流率显著增加。
表3、两组尿流率变化(单位mL/秒，X±SD)
4)前列腺特异性抗原(PSA)测定。前列腺肥大兼慢性前列腺炎组PSA显著下降。
表4、两组PSA变化(单位μg/L，X±SD)
5)良性前列腺肥大与前列腺肥大兼慢性前列腺炎组总体疗效评价表5良性前列腺肥大与前列腺肥大兼慢性前列腺炎组总体疗效评价
两组疗效比较采用Ridit分析处理，结果P＜0.05，表明良性肥大组总总体疗效优于良性前列腺肥大伴炎症组。
良性前列腺肥大与前列腺肥大伴兼慢性前列腺炎组改善性功能疗效评价在良性前列腺肥大与前列腺肥大兼慢性前列腺炎组病人中，服用实例3淫羊藿复方，剂量250mg/粒×3粒×2次/天。总体疗效评价为28.6％病人的阳痿症状得到改善；50％的早泄病人得到改善。
临床实验研究表明，淫羊藿提取物对于良性前列腺肥大，总有效率达93.7％。本组患者临床症状积分下降显著(P＜0.01)，生活质量显著提高，主要表现为夜尿次数减少，排尿改善。尿流率显著提高(P＜0.01)，提示梗阻有所减轻。膀胱残余尿量减少(P＜0.01)。PSA(前列腺特异性抗原)值治前(3.31±3.68μg/L)及治后(3.03±3.84μg/L)有所下降，但无统计学意义。
临床实验研究表明，淫羊藿提取物与人参提取物、花粉及花粉提取物、黄芪提取物及黄柏提取物组成的复方对前列腺肥大兼慢性前列腺炎，总有效率达75.0％。本组患者临床症状积分下降显著(P＜0.01)，生活质量显著提高，主要表现为夜尿次数减少，排尿改善。尿流率显著提高(P＜0.01)，提示梗阻有所减轻。膀胱残余尿量减少(P＜0.01)。PSA(前列腺特异性抗原)值治前(4.41±5.28μg/L)及治后(1.84±1.07μg/L)显著下降(P＜0.01)。该组病人中拌有阳痿及早泄性功能的病人有效率分别为28.6％及50.0％。
在临床实验研究中，全部患者未出现任何毒副反应，治疗前后所有血常规、肝功能、肾功能及尿常规无一例出现异常。
淫羊藿提取物有效组分简单明确，制备方法简单，工艺适合工业化生产，用于制备良性前列腺肥大的药物，临床效果显著。
权利要求
1.一种治疗前列腺肥大的药物组合物，其特征在于含有淫羊藿属植物中提取的按重量比计2-8份∶8-2份的总黄酮与多糖类；总黄酮中黄酮含量为20-90％；多糖的分子量范围为1000至700000。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于淫羊藿总黄酮与多糖类的配比为3-6份∶7-4份；总黄酮中淫羊藿甙与淫羊藿甙I的含量为10％-90％；多糖的分子量范围为45000至620000。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于淫羊藿提取物以如下方法制备，取淫羊藿药材，用含60-95％有机溶剂的水溶液提取，提取液减压回收有机溶剂后的残留物上大孔吸附树脂柱D101或D140，用水与乙醇的混合溶剂梯度洗脱，收集30％-85％乙醇液部分，减压回收，干燥得总黄酮，总黄酮中黄酮含量为20-90％；取60-95％有机溶剂的水溶液提取过后的淫羊藿药渣，用水提取，浓缩水提取液，加入乙醇，使含醇量达到70-85％，静置，滤得多糖粗品；取多糖粗品溶于水后，加入氯仿∶正丁醇按体积比3-6∶1份的混合液，滤除蛋白质，滤液用分子量为1000的超滤膜超滤，除去分子量1000以下的成分，浓缩液继续浓缩干燥，得淫羊藿多糖，其分子量范围为1000至700000；将淫羊藿总黄酮与多糖类按重量比计2-8份∶8-2份的配比混合。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于淫羊藿提取所用的60-95％有机溶剂的水溶液，其中有机溶剂为乙醇、丙酮、异丙醇和/或甲醇；淫羊藿总黄酮与多糖类的配比为3-6份∶7-4份。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于总黄酮中淫羊藿甙与淫羊藿甙I的含量为10％-90％；淫羊藿多糖制备方法中，多糖粗品可再次溶于水，加入乙醇，使含醇量达到70-85％，静置，滤取多糖粗品，多糖的分子量为45000至620000。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于淫羊藿总黄酮与多糖类的配比为3∶8份、4∶6份、5∶5份、6∶4份或7∶3份；其可与药学上可接受载体或辅料混合。
7.一种治疗前列腺肥大及前列腺炎的药物组合物，其特征在于含人参、花粉、黄芪、黄柏和淫羊藿总黄酮和/或淫羊藿多糖类。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于按重量比计，含6-10％人参皂甙的人参提取物16份、含10-20％黄酮的花粉或花粉提取物1-8份、含3-5％黄芪皂甙及20-30％黄芪多糖的黄芪提取物1-4份与含10-15％小檗碱的黄柏提取物1-6份，黄酮含量为20-90％的淫羊藿总黄酮和/或淫羊藿多糖类4-16份。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于含人参提取物1-2份，花粉或花粉提取物2-4份，黄芪提取物1-2份，黄柏提取物1-2份，淫羊藿总黄酮和/或淫羊藿多糖类5-10份。
10.根据权利要求7-9之一所述的药物组合物，其特征在于可以与药学上可接受的载体或辅料混合，按常规制成各种口服制剂。
全文摘要
本发明用淫羊藿属植物中提取的淫羊藿黄酮和多糖类成份按重量比计2－8份:8－2份,制备治疗前列腺肥大的药物；总黄酮中黄酮含量为20－90%；多糖的分子量范围为1000至700000；或者将淫羊藿黄酮和多糖类成份与人参、花粉、黄芪、黄柏提取物组配,制备治疗前列腺肥大及前列腺炎的药物,临床实验均疗效显著,且未出现任何毒副反应。
文档编号A61K36/481GK1422622SQ0214857
公开日2003年6月11日 申请日期2002年12月18日 优先权日2002年12月18日
发明者董辉 申请人:董辉