专利名称：在冷冻水基质中包括颗粒的稳定组合物的制作方法
有关申请的交叉参考本申请要求在2001年10月19日提交的临时申请60/347,548的优先权，该申请被引入本文以供参考并构成本文的一部分。
联邦赞助的研究或发展不适用。
发明
背景技术：
领域本发明公开了一种水溶性较差的化合物的稳定悬浮液组合物，及其制备方法，所述组合物包括悬浮在冷冻水基质中的化合物颗粒。该组合物在长时间内，优选六个月或更长时间内保持稳定。
背景技术：
正在配制的在水溶液中溶解度差或不溶的药物化合物的数量正日益增加。以注射形式输送这些化合物有一定困难。当将不溶于水的药物调配成亚微米级颗粒的稳定悬浮液时，具有明显的益处。对于安全有效地利用这些制剂来说，精确控制粒径是必不可少的。为了安全地通过毛细管而不引起栓塞，粒径必须小于7微米(Allen等人，1987；Davis和Taube，1978；Schroeder等人，1978；Yokel等人，1981)。该问题的解决方案之一是制备不溶性候选药物的极细小颗粒并产生微米颗粒或纳米颗粒的悬浮液。这样，就能使以前不能在水基体系中调配的药物适合静脉给药。适合静脉给药的包括小的粒径(＜7μm)，低毒性(当使用有毒制剂组分或残余溶剂)，和给药后药物颗粒的生物可利用率。
悬浮液也适合口服、肌肉内、肺、局部或皮下给药。当通过这些途径给药时，有利的粒径在5-100μm范围内。
当悬浮液长期储存时，它们可能缺乏足够的物理和化学稳定性。当颗粒聚集形成较大颗粒(一般是小粒径造成的)时出现物理不稳定性。Ostwald-Mie熟化可能是由于小的颗粒半径和伴随的表面活性的增加(由此引起溶解度的增加)而产生。特别是，纳米颗粒具有非常高的表面体积比，这增加了它们的溶解速率和溶解度。结果，颗粒可以溶解在悬浮液中，随后通过重结晶形成大晶体。聚结和晶体生长产生纳米颗粒的悬浮液，所述纳米颗粒具有更大的且变化着的粒径。颗粒大于7μm的悬浮液不再适合静脉给药。
在悬浮液中，活性成分也可能由于与悬浮介质相互作用而发生降解，随着时间的延长而降低活性。即使微量的溶解也可能促进活性成分的降解。化学降解速率取决于粒径、固有溶解度和活性成分的化学性质。
对于物理和化学稳定性方面，非常期望一种具有长的存放期的水悬浮液药物制剂，优选最少具有六个月的存放期。
现有技术中已经公开了几种方法来限制悬浮液中纳米颗粒的聚结和晶体生长，以提高它们的物理稳定性和存放期。一种方法包括向制剂中加入表面稳定剂的步骤。合适的表面稳定剂包括表面活性剂、聚合物、浊点改性剂(参见美国专利5,298,262、5,346,702和5,470,583)、晶体生长改性剂(参见美国专利5,665,331)和低温防护剂(参见美国专利5,302,401)。尽管已经发现这些方法对于限制颗粒聚结和晶体生长是成功的，但是还没有发现能够延长液体状态下的悬浮液在室温或冰箱中的存放期的合适的表面活性剂。或者，如果能够找到这种稳定剂，它们也具有不希望的毒性分布。
如Liversidge等人的美国专利6,267,989中所述，抑制纳米颗粒聚结和晶体生长的另一种方法是将平均粒径限制为约150nm至约350nm的窄范围内。该专利指出，当颗粒在该粒径范围内时，聚结和晶体生长被最小化。然而，窄范围的粒径限制了它的应用。对于某些应用来说，有利的是粒径超过400nm的纳米颗粒悬浮液。这些应用包括，但不限于，口服、皮下、或肌肉给药，其中理想的粒径为5-100微米。在其它制剂中，理想的粒径可能小于100nm。对于例如为躲避RES(网状内皮系统)而设计的颗粒来说，这一点是对的。这种长期循环的颗粒也能够迁移通过松弛的、有孔的脉管系统，如与某些癌性肿瘤有关的脉管系统。这将有利于被动指向这些肿瘤。
Yiv等人在美国专利6,245,349中公开了亲脂和两性药物的脂类纳米颗粒的稳定制剂。该制剂是一种水包油微乳液，由磷酯、丙二醇、聚乙二醇、表面活性剂和水组成。可任选使用一种诸如甘油三酯的油组分。将各组分混合在一起形成乳液。对于要过滤灭菌的制剂来说，平均粒径应当小于200nm。该组合物或者以浓缩形式或者以稀释形式储存。稀释形式包括含水的缓冲剂，在约-50℃至约40℃的温度范围内是稳定的。在实施例1中，组合物在-20℃下储存21天而没有出现明显的相分离、粒径变化或药物结晶。然而，该方法仅限于粒径小于200nm的水包油分散液，其中所有组分都是液体。这种分散液一般通过过滤灭菌来灭菌，这要求分散液通过孔大小为220nm的过滤器。
现有技术还公开了为延长存放期而提高纳米颗粒制剂的化学稳定性的方法。通用方法是通过冷冻干燥除去水介质，并以冷冻干燥形式储存该纳米颗粒。实例之一是美国专利5,091,187的实施例6。在冷冻干燥前一般需要进行透析，以除去任何不想要的溶质例如盐，或者为了防止冷冻干燥期间这些溶质的浓缩。由于透析是非常耗时的方法并且冷冻干燥是一种耗能的方法，因此透析和冷冻干燥的附加步骤增加了生产成本。此外，冷冻干燥的制剂在通过注射(静脉内、肌肉内或皮下)或口服给药之前，需要用合适的分散介质重新配制。这在药剂的给药时需要更多的人力，同时引入了重新调配过程中可能出现的潜在的人为错误。
作为开发新方法以稳定这些悬浮液的部分努力，我们发现，通过将药物颗粒包在冷冻水基质中，冷冻可以避开这些不稳定机理。在如此低的温度下，药物溶解度降低，水介质非常高的粘度不利于溶质药物从固体颗粒中扩散出去。这种扩散包括成核、晶体生长和奥斯特瓦尔德(Ostwald)熟化。通过降低药物在水介质中的分解，较低温度也可增加化学稳定性。例如，在低于混合物的低共熔点时，也可能出现水的结晶，这排除了形成含有药物的溶液相的可能性，所述药物能够进行二次成核、晶体生长和奥斯特瓦尔德熟化。
本发明中的纳米颗粒可以通过本领域已知的任何方法来制备。一种方法重点在于降低输送药物的粒径。在包括美国专利6,228,399、6,086,376、5,922,355和5,660,858系列的专利之一中，Parikh等人公开了，可以利用超声技术来制备水不溶性化合物的微粒。在这些专利中，美国专利5,922,355公开了一种利用超声技术制备更小颗粒的改进方法。该方法改进包括，在单相水体系中将活性药剂与磷酯和表面活性剂混合，对该体系施加能量以制成更小颗粒。然而，该专利没有公开通过冷冻稳定悬浮液。
授予Haynes的美国专利5,091,188还公开了降低药理学上活性的水不溶性药物的粒径，并在颗粒上应用脂类涂层以形成固体形式。该专利涉及一种基本上由药物固体颗粒的水悬浮液组成的药物组合物，所述颗粒的直径为约0.05至约10μm。粘贴在颗粒表面上的脂类涂层用于稳定这些颗粒。在成膜脂类表面活性剂存在下将药物加入水中，然后在水悬浮液中降低粒径，从而制成组合物。然而，冷冻悬浮液并没有被描述作为稳定方法。
美国专利5,858,410公开了适合肠胃外给药的药物纳米悬浮液。该专利公开了，将分散在溶剂中的至少一种固体治疗活性化合物在活塞缝隙(piston-gap)匀化器中进行高压匀化，形成通过光子关联能谱法(PCS)测试的平均直径为10nm至1000nm的颗粒，在总颗粒中大于5微米的颗粒比例低于0.1％(库尔特粒度仪测定的数量分布)，而没有预先转变为融体，其中活性化合物在室温下为固体，不溶、或者仅仅极少溶于、或者中度可溶于水、水介质和/或有机溶剂。该专利的实施例公开了匀化之前进行喷射研磨。
美国专利5,145,684公开了另一种方法,它通过降低粒径来提供用于肠胃外递送的不溶性药物的纳米颗粒。该专利公开了，在表面改性剂存在下，湿研磨不溶性药物得到平均有效粒径低于400nm的药物颗粒。该专利强调了该方法中不使用任何溶剂的必要性。该专利公开了吸附在药物颗粒表面的表面改性剂的量要足以防止聚结成更大颗粒。
除了在物理上降低药物颗粒的大小和用表面稳定剂涂覆颗粒之外，还可以通过多种沉淀方法来制备纳米颗粒。这些方法典型地包括将药物溶解在溶剂中作为连续相，随后通过将溶液条件改变为非连续相，这样药物细颗粒就沉淀出来进入非连续相中。涂层试剂或表面稳定剂一般用于与药物共沉淀以稳定颗粒。这些沉淀方法的实例是溶剂和反溶剂微沉淀(microprecipitation)、转相沉淀、pH变化沉淀、超临界流体沉淀和温度变化沉淀。
合适的沉淀技术的实例包括制备纳米颗粒悬浮液，其公开于美国专利申请60/258,160、09/874,799、09/874,637、09/874,499和09/953,979中，这些文献被引入本文以供参考并组成本文的一部分。这些申请公开了通过下述方法形成小颗粒有机化合物将有机化合物溶解在与水溶混的有机溶剂中，接着将有机化合物沉淀在水介质中形成预悬浮液，然后向预悬浮液中施加能量以稳定颗粒涂层、改变颗粒的晶格结构或降低粒径。该方法被优选用于制备水溶性差的药物活性的化合物的悬浮液。
美国专利5,118,528公开了通过溶剂反溶剂沉淀法制备纳米颗粒的方法。该方法包括下述步骤(1)制备一种物质在溶剂或溶剂混合物中的液相，其中可以加入一种或多种表面活性剂，(2)制备非溶剂或非溶剂混合物的第二液相，非溶剂与该物质的溶剂或溶剂混合物混溶，(3)通过搅拌将溶液(1)和(2)加到一起，和(4)除去不想要的溶剂得到纳米颗粒的胶体悬浮液。该专利指出，它制成了小于500nm的物质颗粒而不需要提供能量。特别是，该专利表明了，利用高能设备如超声波仪和匀化器是不利的。
美国专利4,826,689公开了由水不溶性药物或其它有机化合物制备大小均匀的颗粒的方法。首先，将适当的固体有机化合物溶解在有机溶剂中，该溶液可以用非溶剂稀释。然后，注入该含水的沉淀用液体，沉淀出具有基本上均匀的平均直径的未聚结颗粒。然后将颗粒从有机溶剂中分离出来。根据有机化合物和所需的粒径，可以根据本发明改变温度、非溶剂与有机溶剂的比例、注入速率、搅拌速率和体积等参数。该专利指出，该方法形成了亚稳态的药物，它在热力学上是不稳定的。该专利指出，该方法通过采用结晶抑制剂(例如聚乙烯基吡咯烷酮)和表面活性剂(例如聚氧化乙烯-共-氧化丙烯)使药物成为亚稳态，赋予亚稳态沉淀物足够的稳定性以通过离心、膜过滤或反渗透而分离。
美国专利5,780,062公开了通过下述步骤制备不溶性药物小颗粒的方法(1)将药物溶解在与水溶混的第一溶剂中，(2)制备聚合物和两亲物在含水第二溶剂中的第二溶液，其中药物基本上不可溶，由此形成了聚合物/两亲物络合物，和(3)将第一步和第二步中制备的溶液混合以沉淀药物和聚合物/两亲物络合物的聚集体。
美国专利4,997,454公开了由固体化合物制备均匀大小的颗粒的方法。该专利中的方法包括下述步骤将固体化合物溶解在合适溶剂中，接着注入沉淀用液体，由此沉淀了具有基本上均匀的平均直径的非聚结颗粒。然后将颗粒从溶液中分离出来。该专利不赞成形成结晶态的颗粒，这是由于沉淀过程中，晶体能够溶解并再结晶，由此使粒径分布范围变宽。该专利赞成，在沉淀过程中，将颗粒变为热力学上不稳定的颗粒。
都授予Mathiowitz等人的美国专利6,235,224B1和6,143,211公开了利用转相现象沉淀微囊包封的微粒。该方法包括将聚合物和药物与溶剂混合。将该混合物引入有效量的混溶的非溶剂中，由此自发形成微囊包封的产物。
通过pH改变的微沉淀是用于制备纳米颗粒药剂的分散体的另一项技术。参见美国专利5,766,635、5,716,642、5,665,331、5,662,883、5,560,932和4,608,278。该技术涉及将药物化合物溶解在具有非中性pH值的水基质中，然后将该基质中和以将化合物沉淀在水基质中。
在另一种方法中，例如授予Spenlenhauer等人的美国专利5,766,635中所公开的那样，纳米颗粒是这样制备的将聚氧化乙烯和/或聚氧化丙烯/聚交酯共聚物溶解在有机溶剂中，将这样形成的有机溶液与水溶液混合，使纳米颗粒从溶液中沉淀出来，在不使用表面活性剂的情况下微观流动该悬浮液。这样就制成了由固体聚合物基质组成的载体颗粒，其中可以加入共沉淀的药剂。
超临界流体沉淀公开在Krukonis等人的美国专利5,360,478和5,389,263以及Johnston的WO97/14407中。该技术与溶剂反溶剂沉淀法相似。在该方法中，将压力、温度在临界点以上为气体或液体的超临界流体作为反溶剂。将超临界流体加入到溶质在溶剂中的溶液，这会引起溶质达到或接近超饱和态，并以细颗粒的形式沉淀出来。
温度变化沉淀法公开在Domb的美国专利5,188,837中。该方法涉及将热稳定药物加入到聚合物中。该聚合物通常是油基的(例如磷酯、合成蜡)，并具有低熔点。将药物与聚合物一起加热至稍高于聚合物的熔点，以形成药物在熔融聚合物中的温热乳液。然后，通过将乳液加入到冷的非溶剂浴例如水中而快速冷却乳液，利用剧烈振荡使乳液形成液滴，并固化使活性剂进入悬浮液中。
制备水溶性差的有机化合物的亚微米颗粒的另一种方法是形成化合物乳液。将有机化合物溶解在有机相中。有机相与水相形成乳液。乳液蒸发方法公开在美国专利申请09/964,273中。该方法包括下述步骤(1)提供具有有机相和水相的多相体系，有机相中含有药理学上有效的化合物，和(2)超声处理该体系以蒸发部分有机相，使水相的化合物沉淀，其平均有效粒径低于约400nm。
美国专利5,605,785公开了制备用于照相的化合物的纳米非晶态分散体的方法。形成纳米非晶态分散体的方法包括乳化的任何已知方法，产生具有非晶态颗粒的分散相。
制备药物活性化合物的亚微米级纳米颗粒悬浮液的又一种方法是，在沉淀过程中，在某一点上播下晶种，产生所需形态的晶体。(参见美国专利申请10/035,821)。该方法包括如下步骤将第一定量的药物活性化合物溶解在与水混溶的第一有机溶剂中形成第一溶液。然后对第一溶液播下晶种。或者，对第二溶剂播下晶种。也可以在沉淀过程中的其它时间点上利用晶种化合物。然后将第一溶液与第二溶剂混合。第一溶液与第二溶剂的混合引起药物活性化合物以所需的形态沉淀。
另一种方法涉及制备涂覆有蛋白质的悬浮颗粒。授予Desai等人的美国专利5,916,596公开了对其中分散有药物活性剂的有机相和含有生物相容聚合物的水介质的混合物施加高剪切力。将该混合物在高压匀化器中，在约3,000至约30,000psi的压力范围内进行剪切。该专利要求该混合物基本上不含有表面活性剂，这是由于表面活性剂与蛋白质的组合使用引起大的、针形晶粒的形成，所晶粒在存放过程中尺寸变大。参见第17-18栏，实施例4。
授予Soon-Shiong等人的美国专利5,560,933公开了在用于体内递送的水不溶性药物周围形成聚合物外壳。该方法公开了，对包括含聚合物的水介质和其中分散有基本上不溶于水的药物的分散剂的混合物施加超声处理。在该参考文献中，超声处理被用于促使在聚合物中形成二硫键，使聚合物交联，以在药物外围形成聚合物外壳。超声处理的时间要足以形成二硫键。
Grinstaff等人的美国专利5,665,383中，公开了对单相B即水介质施加超声处理，将免疫刺激剂包封在聚合物外壳内以在体内递送。超生处理促进了包封剂通过二硫键交联形成外壳。
美国专利5,981,719和6,268,053公开了制备粒径小于10微米的大分子微粒的方法。在优选热的能量存在下，将大分子与可溶聚合物或可溶聚合物的混合物(例如白蛋白)在接近大分子等电点的pH值下混合预定时间。该方法形成的微粒使含水流体进入其中，并使溶解的大分子和聚合物离开其中，并能够具有短期或长期的释放动力学，由此提供大分子的快速或持久释放。
发明简述含水的纳米颗粒悬浮液的缺点之一是其物理化学稳定性很差。物理不稳定性是由于颗粒聚结和晶体生长。化学不稳定性是由于溶解在周围溶液(它与悬浮的固相平衡)中的活性成分的降解，这种降解由于活性成分与赋形剂如表面活性剂和缓冲剂的之间的相互作用而增强。由于这些稳定性问题，许多含水的纳米颗粒体系不适合用作药物制剂。例如，如果溶解的活性化合物由于水解作用而化学不稳定，那么溶液中的分解将使化学平衡向着逐渐降解和损失活性成分的方向移动。
我们发现，通过将药物颗粒包在冷冻水基质中，冷冻方法可以避开这些不稳定性机理。在这样的低温下，药物溶解度降低，水介质非常高的粘度不利于溶质药物从固体颗粒中扩散出去。这种扩散包括成核、晶体生长和奥斯特瓦尔德熟化。较低温度也降低了药物分子在水介质中的自发降解，增加了它们的化学稳定性。低温还减缓了由于活性成分与赋形剂的相互作用而引起的活性成分的降解。例如，低于混合物的低共熔点，也可能出现水的结晶，从而排除了形成含有药物的溶液相的可能性，所述药物能够进行二次成核、晶体生长和奥斯特瓦尔德熟化。
本发明提供了水溶性差的药剂在水基质中稳定的纳米颗粒悬浮液组合物以及该组合物的制备方法。本发明计划提供诸如化妆品、照相用试剂等其它化合物的稳定悬浮液。该组合物能够在长期优选六个月或更长时间内储存。
本发明可以用于本领域已知的任何纳米颗粒体系。纳米颗粒悬浮液可以由任何已知方法制成，所述方法例如物理研磨、匀化、高剪切混合、乳液蒸发沉淀、溶剂反溶剂沉淀、超临界流体沉淀、温度变化沉淀、pH变化沉淀、熔融沉淀和晶体播种。
本发明还适用于含有大量成分例如包括表面改性剂、pH调节剂、晶体生长改性剂、冷冻保存剂、渗透剂、助溶剂和粘度调节剂的纳米颗粒体系。
该组合物使用前不需要用合适的分散剂进行重新调配，适用于多种给药途径，包括但不限于注射(静脉内、肌肉内、皮下)、肺部给药、眼部给药、局部和口服。
本发明的这些和其它方面和特征将参考附图
和后面的说明进行讨论。
发明详述尽管本发明容许有多种不同形式的实施方案，并将在本文中详细描述，但是本发明的优选实施方案是基于下述立场公开的，即本发明公开的内容将被认为是对发明原理进行举例说明，而不是将本发明很宽的范围限定为所述实施方式。
本发明公开了用于静脉给药或口服的药物组合物，以及该组合物作为水基质中纳米颗粒悬浮液的制备方法。肠胃外给药包括静脉内、动脉内、鞘内、腹膜内、眼内、关节内、硬膜内、肌肉内、真皮内或皮下注射。该组合物还适用于其它非口服给药途径，例如包括局部、眼睛、鼻、口腔、吸入、直肠等。
药剂优选是水溶性差的化合物。当组合物在冰箱内或室温下长期优选一年或更长时间存放时，它在物理和化学上不稳定。通过冷冻该含水的纳米颗粒悬浮液并以冷动状态存放该组合物，可以实现稳定化作用。在这样的低温下，药物溶解度降低，水介质非常高的粘度不利于溶质药物从含有该药物的固体颗粒中扩散出去。这种扩散包括成核、晶体生长和奥斯特瓦尔德熟化。较低温度也降低了药物分子在水介质中的自发分解，增加了它们的化学稳定性。例如，低于混合物的低共熔点，也可能出现水的结晶，从而排除了形成含有药物的溶液相的可能性，所述药物能够进行二次成核、晶体生长和奥斯特瓦尔德熟化。
还可以用不是药剂的其它水溶性差的物质(例如包括照相用化合物)的悬浮液来实施本发明。
A.纳米颗粒悬浮液组合物本发明组合物包括悬浮于冷冻水基质中的药剂的纳米颗粒。根据需要，该组合物可以含有一种或多种赋形剂，这取决于具体的药剂、制备纳米颗粒悬浮液的方法和给药途径。
1.药剂本发明可以用许多药剂进行实施，所述药剂可以是治疗剂、诊断剂或化妆品。它们包括有机和无机化合物和生物制剂诸如蛋白质、肽、糖类、多糖类、多肽、核苷酸和低聚核苷酸。
药剂能够以晶相或非晶性的非晶相存在。药剂优选是水溶性差的。“水溶性差”是指，药剂在水中的溶解度低于10mg/ml，优选低于1mg/ml。由于这些水溶性差的药剂在水介质中有限的配制替代方式，因此它们大部分适用于含水的纳米颗粒悬浮液制剂。
通过将这些药剂包在固体载体基质(例如聚乳酸盐-聚羟乙酸盐共聚物、白蛋白、淀粉)中，或者通过将这些药剂包封在外围囊中，所述囊对于药剂是不能渗透的，由此还可以用水溶性药剂实施本发明。这种包囊可以是聚合物涂层例如聚丙烯酸酯。此外，由这些水溶性药剂制成的纳米颗粒和微粒可以进行改性以提高化学稳定性，并通过控制药剂从颗粒中的释放而控制其药动学性质。水溶性药剂的实例包括，但不限于，简单的有机化合物、蛋白质、肽、核苷酸、低聚核苷酸和碳水化合物。
治疗剂可以从大量已知种类的药物中选择，所述药物包括例如止痛药、抗炎剂、驱虫药(antihelmintics)、抗心率失常药、抗生素(包括青霉素)、抗凝血剂、抗抑郁剂、抗糖尿病药、抗癫痫药、抗真菌剂、抗组胺药、抗高血压药、抗毒覃碱剂、抗分枝杆菌剂、抗肿瘤药、抗原生动物剂、免疫抑制剂、免疫刺激剂、抗甲状腺剂、抗病毒药、抗忧虑镇静剂(安眠药和精神安定药)、收敛剂、β-肾上腺受体阻断剂、血液产品和替代品、心肌收缩剂(cardic inotropic agent)、造影剂、皮质类固醇、咳嗽抑制剂(祛痰剂和粘液溶解剂)、诊断剂、诊断显影剂、利尿剂、多巴胺能药(抗帕金森氏病药)、止血剂、免疫药、脂类调节剂、肌肉驰缓药、拟副交感神经药、甲状旁腺降钙素和双膦酸盐、前列腺素、放射性药物、性激素(包括类固醇)、抗过敏药、兴奋剂和减食欲药、拟交感神经药、甲状腺药、血管舒张药、疫苗和黄嘌呤。
诊断剂包括X射线显影剂和造影剂。X射线显影剂的实例包括WIN-8883(3，5-二乙酰氨基-2，4，6-三碘代苯甲酸乙酯)，也称作泛影酸的乙酯(EEDA)；WIN 67722即(6-乙氧基-6-氧代己基-3，5-二(乙酰氨基)-2，4，6-三碘代苯甲酸酯；2-(3，5-二(乙酰氨基)-2，4，6-三碘代苯甲酸)丁酸乙酯(WIN 16318)；泛影酸乙酸乙酯(WIN 12901)；2-(3，5-二(乙酰氨基)-2，4，6-三碘代苯甲酸基)丙酸乙酯(WIN 16923)；N-乙基2-(3，5-二(乙酰氨基)-2，4，6-三碘代苯甲酸基)乙酰胺(WIN65312)；异丙基2-(3，5-二(乙酰氨基)-2，4，6-三碘代苯甲酸基)乙酰胺(WIN 12855)；二乙基2-(3，5-二(乙酰氨基)-2，4，6-三碘代苯甲酸基)丙二酸酯(WIN 67721)；2-(3，5-二(乙酰氨基)-2，4，6-三碘代苯甲酸基)苯基乙酸乙酯(WIN 67585)、丙二酸的[[3，5-二(乙酰氨基)-2，4，5-三碘代苯甲酸基]氧]二(1-甲基)酯(WIN 68165)；和苯甲酸的3，5-二(乙酰氨基)-2，4，6-三碘代-4-(乙基-3-乙氧基-2-丁烯酸)酯(WIN 68209)。优选的造影剂包括那些在生理条件下期望较快分解，从而将任何与颗粒有关的炎症反应降低至最小的物质。分解可以是由于酶水解、生理pH值下羧酸的增溶或其它机理。因此，优选溶解性差的碘代羧酸例如胆影酸、泛影酸和甲泛影酸，以及易于水解的碘代类例如WIN 67721、WIN 12901、WIN 68165和WIN 68209或其它物质。
抗肿瘤药或抗癌药包括但不限于，紫杉醇及其衍生化合物，和其它的选自生物碱、抗代谢物、烷化剂和抗生素的抗肿瘤药。
优选的治疗剂或诊断剂包括用于口服和静脉给药的那些试剂。对这些种类的治疗剂和诊断剂的描述及在这些种类中的物质列表参见Martindale，The Extra Pharmacopoeia，Twenty-ninth Edition，ThePharmaceutical Press，London，1989，该文献引入本文以供参考，并构成本文的一部分。治疗剂和诊断剂为市售，和/或通过本领域已知技术能够制成。
化妆品是任何具有化妆活性的活性组分。这些活性组分的实例具体可以是，润肤剂、湿润剂、自由基抑制剂、抗炎剂、维生素、除色剂、去粉刺剂、抗皮脂溢出剂(antiseborrhoeics)、角质软化剂、减肥药、皮肤着色剂和防晒剂，特别是亚油酸、视黄醇、视黄酸、抗坏血酸烷基酯、聚不饱和脂肪酸、烟酸酯、生育酚烟酸酯；大米、黄豆或牛油树脂(shea)的未皂化物；神经酰胺、羟基酸如乙醇酸、硒衍生物、抗氧剂、β胡萝卜素、γ-阿魏酸脂(orizanol)和甘油酸硬脂酯。化妆品可由市售获得，和/或通过本领域已知技术制成。
以组合物重量计，药剂的含量为约0.01％至约50％、更优选约0.1％至约30％、最优选约0.5％至约5％。
2.赋形剂本发明的赋形剂是任选的。组合物中可以包括一种或多种赋形剂。赋形剂的实例包括缓冲剂、表面改性剂、pH调节剂、晶体生长改性剂、冷冻保存剂、渗透剂、助溶剂和粘度调节剂。
合适的表面改性剂优选已知的有机和无机药物赋形剂，例如阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂或生物表面活性分子。
合适的阴离子表面活性剂包括但不限于，月桂酸钾、月桂基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、烷基聚氧乙烯硫酸盐、藻酸钠、二辛基磺基琥珀酸钠、甘油酯、羧甲基纤维素钠、胆酸和其它胆汁酸(例如胆酸、脱氧胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、甘氨脱氧胆酸)及其盐(例如脱氧胆酸钠等)。合适的阳离子表面活性剂包括但不限于，季铵化合物，例如苯扎氯铵、鲸蜡基三甲基溴化铵、月桂基二甲基苯甲基氯化铵、乙酰基肉毒碱盐酸盐或烷基吡啶鎓卤化物。
合适的非离子表面活性剂包括聚氧乙烯脂肪醇的醚(Macrogoland Brij)，聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(Polysorbates)，聚氧乙烯脂肪酸的酯(Myrj)，聚氧乙烯衍生的脂或磷酯，脱水山梨醇的酯(Span)，甘油单硬脂酸酯，聚乙二醇，聚丙二醇，鲸蜡醇，鲸蜡醇硬脂醇混合物，硬脂醇，芳基烷基聚醚醇，聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(poloxamers)，polaxamines，甲基纤维素，羟基纤维素，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，非结晶纤维素，包括淀粉和淀粉衍生物例如羟乙基淀粉(HES)的多糖，聚乙烯醇，和聚乙烯基吡咯烷酮。在本发明优选方式中，非离子表面活性剂是聚氧乙烯和聚氧丙烯共聚物，优选丙二醇和乙二醇的嵌段共聚物。这种聚合物以商品名POLOXAMER(有时也称作PLURONIC)出售，其中几个供应商是Spectrum Chemical和Ruger。在聚氧乙烯脂肪酸的酯中，包括那些带有短的烷基链的酯。这种表面活性剂的实例之一是BASFAktiengesellschaft制造的SOLUTOLHS15，即聚乙烯-660-羟基硬脂酸酯。
表面活性生物分子包括诸如白蛋白、酪蛋白、肝素、水蛭素或其它合适的蛋白质的分子。
表面改性剂的其它代表性实例包括明胶、酪蛋白、阿拉伯胶、胆固醇、黄蓍胶、硬脂酸、苯扎氯铵、硬脂酸钙、甘油单硬脂酸酯、鲸蜡醇硬脂醇混合物、聚西托醇(cetomacrogol)乳化蜡、脱水山梨醇酯、聚氧乙烯烷基酯例如聚乙二醇醚如聚西托醇1000，聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯例如市售TweensTM、聚乙二醇、聚氧乙烯硬脂酸酯、胶体二氧化硅、磷酸酯、十二烷基硫酸钠、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、非结晶纤维素、硅酸镁铝、三乙醇胺、聚乙烯醇、和聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)。这些表面改性剂中的大多数是已知的药物赋形剂，详细描述于Handbook ofPharmacertical Excipients，由American Pharmaceutical Association和The Pharmaceutical Society of Great Britain，the Pharmaceutical Press于1986年联合出版，该文献引入本文以供参考并构成本文的一部分。
表面改性剂可以从市场上得到，和/或用本领域已知的技术制备。该组合物中可以同时使用两种或多种表面改性剂。
合适的pH调节剂包括但不限于缓冲剂、氢氧化钠、盐酸、三(羟甲基)氨基甲烷(tris)、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、葡甲胺等。缓冲剂还包括但不限于氨基酸如甘氨酸、亮氨酸、丙氨酸、赖氨酸等。
合适的晶体生长改性剂描述在美国专利5,665,331中。晶体生长改性剂定义为这样一种化合物，即在共沉淀方法中其被引入药剂的微沉淀晶体结构中，由此通过称作奥斯特瓦尔德熟化方法抑制微晶沉淀物的生长或增大。有些晶体生长改性剂在分子基础上与药剂结构相似。同样适合作为晶体改性剂的是聚合物，例如美国专利4,826,689中所公开的结晶抑制剂聚乙烯吡咯烷酮。晶体生长改性剂还可以通过下述方式发挥作用，即与超饱和状态下的溶质形成络合物，由此防止或抑制晶体成核和/或生长。
用于纳米颗粒悬浮液中的冷冻保存剂公开在美国专利5,302,401中。在该专利中，冷冻保存剂在冷冻干燥过程中阻止纳米颗粒聚结。合适的冷冻保存剂的实例包括碳水化合物例如蔗糖、木糖、葡萄糖和糖醇如甘露醇和山梨醇，表面活性剂如聚山梨醇酯(吐温(Tweens))，以及甘油和二甲基亚砜。冷冻保存剂还包括水溶性聚合物例如聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)、淀粉和聚烷氧基醚例如聚乙二醇、聚丙二醇和泊咯沙姆。生物衍生的冷冻保存剂包括白蛋白。另一类冷冻保存剂包括聚乙二醇化脂类(pegylated lipids)例如Solutol。优选的冷冻保存剂是碳水化合物。优选的碳水化合物是单糖或二糖。优选的二糖是蔗糖。另一种优选的冷冻保存剂包括聚合物，例如但不限于上面列出的那些。又一种优选的冷冻保存剂是白蛋白。
粘度调节剂是影响组合物粘度的试剂。该调节剂的实例是碳水化合物(例如纤维素、树胶、糖、糖醇)，聚合物(例如泊咯沙姆、poloxamines、聚乙烯基吡咯烷酮)，蛋白质(例如白蛋白、乳蛋白)。这些试剂列在由Gower出版的Handbook of Pharmaceutical Additives中，在Thickeners，Viscosity control agents，Consistency regulators，Bodying agents，Antigellants等章节中，该文献被引入本文以供参考，并构成本文的一部分。
合适的渗透剂包括糖(例如葡萄糖、蔗糖)、糖醇(例如甘露醇、山梨醇)、盐(例如氯化钠)、甘油和甘油衍生物等。
合适的助溶剂的实例是乙醇、二甲基亚砜、和N-甲基-2-吡咯烷酮。其它实例包括乳酸、乙酸和其它液体羧酸。
以组合物重量计，赋形剂的含量为约0.001％至约20％，优选约0.01％至约5％。
赋形剂可以在纳米颗粒制备过程中加入到水介质中，或者与水介质混合之前直接加入到药剂中。如果药剂在与含水的反溶剂混合之前溶解在有机相中，那么赋形剂可以在沉淀之前加入到有机相中。
3.粒径和纳米颗粒的形状在本发明中，粒径是通过动态光散射方法测定的(例如，光子关联能谱法、激光衍射、小角激光散射(LALLS)、中角激光散射(MALLS)、遮光法(light obscuration)(例如Coulter法)、流变学或在上述范围内的显微镜法(光学显微镜或电子显微镜))。本发明适用于粒径在很大范围内的纳米颗粒和微粒悬浮液。颗粒的优选平均有效粒径低于约100μm，更优选低于约7μm，更优选低于约2μm，最优选低于约400nm，甚至更优选低于约200nm或该范围内的任意范围或组合。
4.纳米颗粒悬浮液的制备方法药剂的含水纳米颗粒悬浮液可以通过包括机械研磨活性剂的任意方法、沉淀技术或者悬浮药剂的方法来制备。正如美国专利5,145,684中所公开的那样，机械研磨包括诸如喷射研磨、珠粒研磨(pearlmilling)、球磨、锤磨、流体能量研磨或湿磨的技术，该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。
沉淀步骤可以用于制备颗粒悬浮液，对该悬浮液进一步进行施加能量的步骤。正如美国专利5,091,188所公开的那样(该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分)，施加能量的步骤包括将颗粒分散液置于高剪切条件，例如利用微观流化器、活塞缝隙匀化器或逆流匀化器施加的空化、剪切或冲击力。合适的活塞缝隙匀化器在市场上可以买到，例如由Avestin以商品名EMULSIFLEX出售的那些匀化器和由Spectronic Instruments出售的French Pressure Cells。合适的微观流化器可得自Microfiuidics Corp。下面描述的晶体播种步骤可以在溶液被置于高剪切条件的过程中的任何时候进行，最优选的是在施加能量步骤之前进行。
施加能量的步骤也可以利用超声技术完成。超声处理步骤可以利用任何合适的超声设备例如Branson Model S-450A或Cole-Parmer500/750 Watt Model来进行。这些设备在工业上是众所周知的。典型地，超声设备具有超声角或探针，将它插入到含有药物的溶液中，向溶液中发射声能。在本发明优选实施方式中，超声设备是在约1kHz至约90kHz、更优选约20kHz至约40kHz、或者其中任意范围或其组合的频率下工作。探针尺寸可以改变，优选是例如1/2英寸或1/4英寸等的不同尺寸。在超声处理过程中，将溶液冷却至低于室温的温度也是有利的。下面描述的晶体播种步骤可以在溶液被置于高剪切条件下的过程中的任何时候进行，最优选的是在施加能量步骤之前进行。
沉淀方法在沉淀方法中，将药剂溶解在溶剂中得到溶液。然后将溶液与水介质混合得到药剂细颗粒的预悬浮液。水介质可以任选地包含一种或多种赋形剂，所述赋形剂选自表面改性剂、pH调节剂、冷冻保存剂、晶体生长改性剂、渗透剂、助溶剂和粘度调节剂。在沉淀步骤之前，也可以将赋形剂包括在其中溶解有药剂的溶剂中。按照需要，可以对预悬浮液施加能量以稳定药剂涂层，改变晶格结构，或者进一步降低沉淀物颗粒的大小。能量来源包括但不限于超声、匀化、微观流动、逆流匀化、或提供冲击、剪切或空化力的其它方法。能源也包括以加热或冷却的形式、或者通过温度变化(例如循环)连续输入热量的方法。
一些已知的沉淀方法是乳液蒸发沉淀、微沉淀、溶剂反溶剂沉淀、超临界流体沉淀、温度变化沉淀、pH变化沉淀和晶体播种。
乳液蒸发沉淀乳液蒸发法公开在美国专利申请09/964,273中，该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。该方法包括下述步骤(1)提供包括有机相和水相的多相体系，有机相中含有制药学上有效的化合物；和(2)超声处理该体系以蒸发一部分有机相，使水相中的化合物沉淀，其平均有效粒径小于约2μm。提供多相体系的步骤包括下述步骤(1)将与水不混溶的溶剂(油相)与制药学上有效的化合物混合得到有机溶液，(2)用一种或多种表面活性化合物制备水基溶液，和(3)将有机溶液与水溶液混合形成多相体系。搅拌或混合多相体系形成粗乳液。在该粗乳液中，水中将含有直径近似小于约1μm的油滴。该粗乳液被超声处理得到微乳液，最终得到亚微米级颗粒悬浮液。
与水不混溶的溶剂选自碳原子数为5或更多的直链、支链或环状烷烃，碳原子数为5或更多的直链、支链或环状烯烃，碳原子数为5或更多的直链、支链或环状炔烃，芳烃、全部或部分卤化的烃、醚、酯、酮，单甘油酯、二甘油酯或三甘油酯，天然油、醇、醛、酸、胺，线性或环状硅氧烷，六甲基二硅氧烷，或这些溶剂的任意组合。优选的与水不混溶的溶剂是二氯甲烷。
超声处理步骤可以用任何其它提供能量的方式代替，其它能源来源的实例是超声、匀化、微观流动、逆流匀化，或提供冲击、剪切或空化力的其它方法。
微沉淀微沉淀方法公开在美国专利申请60/258,160、09/874,799、09/874,637、09/874,499和09/953,979中。有机化合物小颗粒是通过下述方法形成的，将有机化合物沉淀在水介质中形成预悬浮液，随后施加能量以稳定颗粒涂层或者改变颗粒的晶格结构。该方法优选用于制备水溶性差的制药学上活性的化合物的悬浮液，所述化合物适合肠胃外给药或口服给药。
该方法可以分为两类，方法A和方法B。
方法A在方法A中，首先将有机化合物(“药物”)溶解在第一溶剂中形成第一溶液。根据有机化合物在第一溶剂中的溶解度，有机化合物的加入量为约0.1％(w/v)至约50％(w/v)。为了确保化合物完全溶解于第一溶剂中，有必要将浓缩液从约30℃加热至约100℃。
向其中加入一种或多种任选的表面改性剂以得到第二水溶液，所述表面改性剂选自例如阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂或生物表面活性分子。
向第二溶液中加入pH调节剂也是有利的，所述pH调节剂选自例如缓冲液、氢氧化钠、盐酸、三(羟甲基)氨基甲烷缓冲液、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、葡甲胺等。其它缓冲剂包括氨基酸如甘氨酸、亮氨酸、丙氨酸、赖氨酸等。第二溶液的pH值在约2至约11的范围内。
在本发明的优选方式中，制备亚微米级的有机化合物颗粒的方法包括将第一溶液加入第二溶液的步骤。加入速率取决于批量的大小和有机化合物的沉淀动力学。典型地，对于小规模实验室制备方法(制备1L)来说，加入速率为约0.05cc/min至约10cc/min。在加入过程中，溶液应当处于恒定搅拌下。通过光学显微镜观察到，形成了非晶形颗粒、半结晶固体或过冷液体，得到预悬浮液。该方法还包括下述步骤，将预悬浮液进行退火步骤，以将非晶形颗粒、过冷液体或半结晶固体转变为更稳定的结晶固体状态。所得颗粒将具有平均有效粒径，这通过动态光散射方法(例如在上述范围内的光子关联能谱、激光衍射、小角激光散射(LALLS)、中角激光散射(MALLS)、遮光方法(例如Coulter方法)、流变学、或显微镜(光学或电子))来测定。
施加能量的方法涉及通过超声、匀化、逆流匀化、微观流动或其它提供冲击力、剪切力或空化力的方法来加入能量。在该阶段中可以将样品冷却或加热。在本发明的一个优选方式中，退火步骤是用活塞缝隙匀化器进行的，所述匀化器例如由Avestin Inc.以商品名EmulsiFlex-C160出售的那种。在本发明的另一个优选方式中，退火是用超声处理器通过超声处理完成的，所述处理器为例如由Sonics andMaterials，Inc制造的Vibra-Cell Ultrasonic Processor(600W)。在本发明的又一个优选方式中，退火是采用美国专利5,720,551所述的乳化设备完成的，所述文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。
根据退火速率，有利地将处理样品的温度调整在约-30℃至30℃的范围内。另外，为了在处理固体中实现所需的相变，退火过程中将预悬浮液加热至约30℃至约100℃的温度也是必要的。
除了非晶形固体、半结晶固体或过冷液体之外，预悬浮液中还可能含有易碎晶体，这种晶体在沉淀之前比其固体状态更容易破碎。这样，施加能量步骤将这些颗粒分裂为所需大小。
方法B方法B在下述几个方面不同于方法A。第一个区别是，将表面活性剂或表面活性剂的组合物加入到第一溶液中。表面活性剂可以选自非离子、阴离子和阳离子表面活性剂。
除了非晶形颗粒、半结晶固体或过冷液体之外，预悬浮液中还可能含有易碎晶体，这种晶体在沉淀之前比其固体状态更容易破碎。这样，施加能量步骤将这些颗粒分裂为所需大小。
一种合适的乳液沉淀技术公开在共同未决的、普通转让的美国申请09/964273中，该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。该方法包括下述步骤(1)提供包括有机相和水相的多相体系，有机相中含有制药学上有效的化合物，和(2)超声处理该体系以蒸发部分有机相，引起水相的化合物沉淀，其平均有效粒径低于约2μm。提供多相体系的步骤包括下述步骤(1)将与水不混溶的溶剂与制药学上有效的化合物混合得到有机溶液，(2)用一种或多种表面活性化合物制备水基溶液，和(3)将有机溶液与水溶液混合形成多相体系。有机相与水相的混合步骤包括使用活塞缝隙匀化器、胶体研磨机、高速搅拌设备、挤出设备、手工搅拌或振荡设备、微观流动器、或其它提供高剪切条件的设备或技术。在粗乳液的水中含有直径约小于1μm的油滴。该粗乳液被超声处理得到微乳液，最终得到亚微米级颗粒悬浮液。
下面详细描述的任选的多晶型控制步骤可以通过这些步骤的任何一个中进行。多晶型控制步骤可以在超声处理该体系之前或之后进行。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是在超声处理过程中进行的。
另一种制备亚微米级颗粒的方法公开在共同未决的、普通转让的美国申请10/183,035中，该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。该方法包括下述步骤(1)提供包括有机相和水相的多相粗分散液，有机相中含有药物化合物；(2)对粗分散液施加能量形成细分散液；(3)冷冻该细分散液；和(4)冷冻干燥该细分散液得到制药学上有效化合物的亚微米级颗粒。提供多相体系的步骤包括下述步骤(1)将与水不混溶的溶剂与制药学上有效的化合物混合得到有机溶液，(2)用一种或多种表面活性化合物制备水基溶液，和(3)将有机溶液与水溶液混合形成多相体系。有机相与水相的混合步骤包括使用活塞缝隙匀化器、胶体研磨机、高速搅拌设备、挤出设备、手工搅拌或振荡设备、微观流动器、或其它提供高剪切条件的设备或技术。
下面详细描述的多晶型控制步骤可以在这些步骤的任何一个步骤之中来进行。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是通过提供多相体系步骤中的混合步骤(3)进行的。
溶剂反溶剂沉淀合适的溶剂反溶剂沉淀技术公开在美国专利5,118,528和5,100,591中，该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。该方法包括下述步骤(1)制备生物活性物质在溶剂或溶剂混合物中的液相，可向其中加入一种或多种表面活性剂；(2)制备非溶剂或非溶剂混合物的第二液相，非溶剂与该物质的溶剂或溶剂混合物相混溶，(3)通过搅拌将溶液(1)和(2)加到一起，和(4)除去不想要的溶剂得到纳米颗粒的胶体悬浮液。该专利指出，它制成了小于500nm的物质颗粒而不需要提供能量。
如上所述，下面详细描述的任选的多晶型控制步骤可以在这些步骤的任何一个步骤中进行。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是在将溶液(1)和(2)加到一起之前在步骤(3)中进行的。
转相沉淀一种合适的转相沉淀方法公开在美国专利6,235,224、6,143,211和美国专利申请2001/0042932，所述文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。转相是用于描述下述物理现象的术语，即溶解在连续相溶剂体系中的聚合物转变为固体大分子网络，其中聚合物是连续相。诱导转相的一种方法是向连续相中加入非溶剂。聚合物由单相变为不稳定的两相混合物富聚合物部分和贫聚合物部分。在富聚合物相中，非溶剂的胶束液滴作为成核部位，并被聚合物包覆。专利6,235,224指出，在某些条件下，聚合物溶液的转相能够自发形成离散微粒，包括纳米颗粒。该专利公开了将一种聚合物溶解或分散于一种溶剂中。药剂也溶解或分散于溶剂中。对于本发明有效的任选的多晶型控制步骤来说，希望药剂溶解于溶剂中。聚合物、药剂和溶剂一起形成包括连续相的混合物，其中溶剂是连续相。然后将混合物加入至少过量10倍的混溶的非溶剂中，自发形成平均粒径为10nm至10μm的药剂的微囊包封的微粒。粒径受溶剂与非溶剂体积比、聚合物浓度、聚合物-溶剂溶液的粘度、聚合物分子量和溶剂非溶剂对的特性的影响。该方法省略了例如通过形成乳液产生溶剂微液滴的步骤。该方法还免去了搅拌和/或剪切力。
下面详述的任选的多晶型控制步骤可以在这些步骤的任何一个之中来进行。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是在向连续相中加入非溶剂之前或过程中进行的。
PH变化沉淀PH变化沉淀技术典型地包括下述步骤将药物溶解在具有一定pH的溶液中，此时药物是可溶的，随后改变pH使药物不再可溶。根据具体的药物化合物，pH可以是酸性的或碱性的。然后将溶液中和形成亚微米级的药物活性化合物颗粒的预悬浮液。一种合适的pH变化沉淀方法公开在美国专利5,665,331中，该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。该方法包括下述步骤，将药剂与晶体生长改性剂(CGM)一起溶解在碱性溶液中，然后在合适的表面改性的表面活性剂存在下用酸中和该溶液形成药剂的细颗粒分散液。在沉淀步骤之后可以是分散液的膜渗透提纯步骤，然后将分散液的浓度调整至所需浓度。该报导方法得到了Z平均直径小于400nm(用光子关联能谱测定)的微晶颗粒。
下面详细描述的任选的多晶型控制步骤可以在这些步骤的任何一个之中进行。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是在中和步骤之前或之中进行的。
其它pH变化沉淀方法的实例公开在美国专利5,716,642、5,662,883、5,560,932和4,608,278中，所述文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。
注入沉淀方法合适的注入沉淀技术公开在美国专利4,997,454和4,826,689中，这些文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。首先，将合适的固体化合物溶解在合适的有机溶剂中形成溶剂混合物。然后，将与有机溶剂相混溶的沉淀用非溶剂注入在溶剂混合物中，温度为约-10℃至约100℃，注入速率为每50ml体积约0.01ml/min至约1000ml/min下，制成沉淀的非聚结的化合物固体颗粒的悬浮液，其具有小于10μm的基本上均匀的平均直径。优选的是，在进行沉淀用非溶剂的注入时进行溶液的搅动(例如搅拌)。非溶剂中可以含有表面活性剂来稳定颗粒以防止聚结。然后将颗粒从溶剂中分离出来。根据固体化合物和所需的粒径，本发明可以改变温度、非溶剂与溶剂之比、注入速率、搅拌速率和体积参数。粒径与非溶剂和溶剂的体积比、以及注入温度成正比例，而与注入速率和搅拌速率成反比。沉淀用非溶剂可以是含水的或非水的，这取决于化合物的相对溶解度和所需的悬浮赋形剂。
下面详细描述的任选的多晶型控制步骤可以在这些步骤的任何一个之中来进行。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是在非溶剂注入之前或之中进行的。
温度变化沉淀温度变化沉淀技术，也称作热熔技术，公开在Domb的美国专利5,188,837中，该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。在本发明的一个实施方案中，脂球是通过下述方法制成的(1)熔融或溶解将在熔融赋形剂中被递送的物质如药物，形成被递送物质的液体；(2)在高于物质或赋形剂的熔点的温度下，将磷酯连同水介质一起加入到熔融的物质或赋形剂中；(3)在高于赋形剂熔点的温度下混合悬浮液直至得到均匀的细颗粒制剂；然后(4)快速冷却制剂至室温或室温以下。
下面详细描述的任选的多晶型控制步骤可以在这些步骤的任何一个之中来进行，只要处理温度不高于药物的熔点。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是在冷却温热的药剂分散液之前进行的。
溶剂蒸发沉淀溶剂蒸发沉淀技术公开在美国专利4,973,465中，该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。该专利公开了制备微晶的方法，所述方法包括下述步骤(1)提供溶解在普通有机溶剂或溶剂混合物中的药物组合物和磷酯的溶液；(2)蒸发溶剂或溶剂混合物，和(3)将通过蒸发溶剂或溶剂混合物得到的膜在水溶液中进行剧烈搅拌，使其悬浮在水溶液中。可以通过向溶液中施加能量以蒸发足量的溶剂，从而除去溶剂，使化合物产生沉淀。也可以通过其它公知技术例如向溶液施加真空或者在溶液上吹入氮气，从而除去溶剂。下面详细描述的任选的多晶型控制步骤可以在这些步骤的任何一个之中来进行。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是在蒸发步骤之前进行的。
反应沉淀反应沉淀包括将药物化合物溶解在合适的溶剂中形成溶液的步骤。化合物的加入量应当为使化合物在溶剂中达到饱和点或饱和点以下的量。通过与化学试剂反应，或者与施加能量(例如热或UV光等)有关的改性方法将化合物改性，使得改性化合物具有在该溶剂中的较低溶解度并从溶液中沉淀出来。下面详细描述的任选的多晶型控制步骤可以在这些步骤的任何一个之中来进行。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是沉淀步骤之前或之中进行的。
压缩流体沉淀通过压缩流体沉淀的一种合适技术公开在Johnston的WO97/14407中，该文献被引入本文以供参考并构成本文的一部分。该方法包括将水不溶性药物溶解在溶剂中形成溶液的步骤。然后将溶液喷入压缩流体中，该流体可以是气体、液体或超临界流体。将压缩流体加入溶质在溶剂的溶液中，这会使溶质达到或接近超饱和状态，并以细颗粒的形式沉淀出来。这里，压缩流体作为反溶剂，它降低了其中溶解有药物的溶剂的内聚能密度。
或者，药物可以溶解在压缩流体中，然后将它喷入水相中。压缩流体的快速膨胀降低了流体的溶解能力，这依次使溶质以细颗粒沉淀在水相中。这里，压缩流体充当溶剂。
为了稳定颗粒以防止聚结，该技术中可以包括表面改性剂如表面活性剂。通过该技术制备的颗粒通常为500nm或更小。
下面详述的任选的多晶型控制步骤可以通过在这些步骤的任何一个之中来进行。在本发明的最优选方式中，多晶型控制步骤是在颗粒形成步骤之前或之中进行的。
悬浮方法制备含水的纳米颗粒悬浮液的其它方法是悬浮方法。在该方法中，通过将颗粒直接加入水介质中，从而将药剂颗粒分散在水介质中，以得到预悬浮液。该颗粒一般包覆有表面改性剂来抑制颗粒的聚结。可以向药剂或水介质中加入一种或多种其它赋形剂。
可以向药剂或预悬浮液中施加能量以将药剂粒径降低至所需大小。能量来源的实例包括但不限于，超声、匀化、微观流动、逆流匀化、或其它提供冲击力、剪切力或空化力的方法。
多晶型控制方法制备悬浮液的方法还包括晶体播种的步骤，以控制药物的晶体结构。术语“晶体结构”是指晶格内分子的排列和/或构象。能够结晶成不同晶体结构的化合物被称作多晶型化合物。多晶型的鉴定在药物制备过程中是一个重要步骤，因为相同药物的不同多晶型物表现出不同的溶解度、治疗活性、生物利用率和悬浮能力。同样，相同赋形剂的不同多晶型物也表现出不同的溶解度、与被递送药物的相容性、化学稳定性和悬浮稳定性。因此，对于确保产物纯度和批量之间的再现性来说，控制化合物的多晶型是重要的。
在上述方法中，化合物的多晶型可以通过晶体播种的附加步骤来控制。晶体播种包括利用种子化合物或施加能量形成种子化合物。在本发明的优选方式中，种子化合物是所需多晶型的制药学上活性的化合物。或者，种子化合物也可以是与所需多晶型结构类似的惰性杂质或有机化合物。
种子化合物可以从任一任何方法中的包含药物的溶液中沉淀出来。该方法包括如下步骤将制药学上活性的化合物以足够的超过它在第一溶液中的溶解度的量加入，形成超饱和溶液。处理超饱和溶液以所需多晶型沉淀制药学上活性的化合物。处理超饱和溶液包括将溶液熟化一段时间直至观察到晶体形成，得到晶种混合物。处理溶液还包括改变溶液的温度或pH值。还可以向超饱和溶液施加能量，使制药学上活性的化合物从溶液中以所需多晶型沉淀出来。可以用包括上述能量施加步骤的多种方法来施加能量。此外，能量还可以通过加热预悬浮液或将其暴露于电磁能、粒子束或电子束来源的方法施加。电磁能包括使用激光束、动态电磁能、或其它辐射源。还考虑了利用超声、静电场和静电磁场作为能源施加来源。
在本发明的优选方式中，由熟化的超饱和溶液制备晶种的方法包括下述步骤(i)向药物溶液中加入一定量的制药学上活性的化合物得到超饱和溶液，(ii)熟化超饱和溶液形成可检测出的晶体，产生晶种混合物；和(iii)沉淀晶种混合物形成预悬浮液。然后，按照本文所述方法进一步处理预悬浮液，以得到具有所需多晶型和所需粒径范围的制药学上活性的化合物的含水悬浮液。
晶体播种的步骤还可以通过向第一溶液或预悬浮液中施加能量形成种子化合物的方法完成，只要暴露的液体或液体混合物含有药物化合物或种子物质。可以按照上述相同的方法对超饱和溶液施加能量。
因此，本发明提供了一种具有所需多晶型的药物化合物的组合物，它基本上不含未指定的多晶型物。预计本发明方法可以用于选择性地制备多种药物化合物的所需多晶型。
6.组合物的灭菌根据组合物具体组分的热稳定性和组合物的粒径，在冷冻之前可以对组合物进行热灭菌或先过滤再灭菌的处理。制备无菌产品的优选方法是过滤所选组分，然后在冷冻之前进行灭菌处理。本发明的另一种灭菌方法是在冷冻之前或之后进行γ辐射。
实施例实施例1采用微沉淀方法A，通过匀化然后冷冻悬浮液来制备伊曲康唑悬浮液表面活性剂溶液向4L烧瓶中加入3500mL蒸馏水、22g甘油、22g泊咯沙姆407、和22g泊咯沙姆188。加热该表面活性剂溶液，并搅拌溶解固体。将表面活性剂溶液冷却并用蒸馏水稀释成4L。
伊曲康唑浓缩液在100mL烧杯中，混合15g伊曲康唑和67.5g乳酸。加热混合物以溶解固体。将伊曲康唑浓缩液冷却至室温。
预悬浮液将伊曲康唑浓缩液转移到60mL注射器中。将1.5L表面活性剂溶液转移到有夹套的匀化器漏斗中。将顶部搅拌器放入稀释溶液中直至混合叶片完全浸入。利用注射器泵，在搅拌下将伊曲康唑浓缩液缓慢加入稀释溶液中。
匀化悬浮液将预悬浮液立刻匀化(10,000psi)约20分钟。
最终的悬浮液将悬浮液离心匀化20分钟，从而将过量的乳酸除去。将上清液倒掉，将固体在由新鲜表面活性剂溶液组成的表面活性剂溶液中再次悬浮。将悬浮液混合并离心20分钟。将上清液倒掉，将固体在由新鲜表面活性剂溶液组成的表面活性剂溶液中再次悬浮。将再次悬浮的样品在10,000psi下匀化约20分钟。悬浮液的最终pH为约4。将悬浮液收集到50mL的瓶子中，并用贴有Teflon的塞子密封。
冷冻的悬浮液将3-50mL最终的悬浮液样品放入-20℃冷冰装置中，将3-50mL最终悬浮液样品在2-8℃下存放。在大约1个月后，将样品从-20℃下取出，使其在环境条件下融化。将样品转移到2-8℃下。没有观察到相分离、明显的聚结或结块。对进行冷冻的样品和存放在2-8℃下的对比样品用激光散射方法测试其粒径分布。冷冻样品和对比样品在粒径分布上没有可辨别的差别(如下)。
有理由推测，冷冻悬浮液在这样的存放条件下可以稳定存放1年或更长时间。
实施例2非晶形伊曲康唑纳米悬浮液通过在-70℃下存放进行稳定化将4.0g伊曲康唑溶解在20mL二氯甲烷中并与400mL 5％的白蛋白溶液(由25％的溶液稀释来的)混合。将混合溶液手动振荡以有效分散两种液体。然后将粗乳液超声处理(T＝5℃)6分钟(用1″探针在40％振幅下每隔30秒进行超声处理)。将超声处理的溶液在屋内真空(house vacuum)(约100托)下旋转蒸发(rotovapped)约1/2小时，然后在泵真空(＜20托)下旋转蒸发约2小时。将旋转蒸发的产品用光散射检测(Horiba)分析，表明颗粒平均直径为406nm。然后将该产品送入Galbraith Laboratories Inc.进行GC顶部空间分析，表明二氯甲烷浓度为12.3ppm。可见光学显微镜检测表明，颗粒为球形，没有结晶迹象。另外，对该方法制成的颗粒进行X射线粉末衍射分析，进一步证明了完全是非晶态的。
将约35mL产品在-70℃下存放32天。用HORIBA光散射检测法和显微镜检查对悬浮液再次分析表明，粒径基本上没有变化(平均值为427nm)。有理由推测，在这样的存放条件下，冷冻悬浮液在一年或更长时间内是稳定的。
实施例3在PEG-磷酯表面活性剂体系中1％的布地奈德成分1％布地奈德1.2％mPEG-PSPE，分子量20002.25％甘油0.14％磷酸氢二钠将称量的mPEG-PSPE(棕榈酰-硬脂酰-磷脂酰基乙醇胺)和一体积预先制成的含有2.25％甘油和0.14％磷酸氢二钠、pH为8.6的水溶液混合，并用高剪切搅拌器搅拌。加入药物，并在高剪切力下搅拌混合物形成预悬浮液。在25,000psi的压力下，将预悬浮液分散匀化30次。
将一部分样品在-20℃下冷冻24小时，然后使之在室温下完全融化。
粒径测试结果(用激光衍射计测定)
实施例4含有白蛋白表面活性剂的1％的萘丁美酮成分5％人白蛋白1％萘丁美酮将1体积白蛋白溶液和称量的药物混合，并在高剪切力下混合形成预悬浮液。在25,000psi的压力下，将预悬浮液分散匀化30次。
将一部分样品在-20℃下冷冻24小时，然后使其在室温下完全融化。
粒径测试结果(用激光衍射计测定)
实施例5含有聚烷氧基醚表面活性剂和胆汁盐的1％的萘丁美酮成分2.2％泊咯沙姆1880.1％脱氧胆酸盐2.2％甘油1％萘丁美酮将称量的药物和一体积溶液混合，所述溶液含有2.2％泊咯沙姆188、0.1％脱氧胆酸钠和2.2％甘油，溶液pH调整为8.7，并用高剪切力下混合形成预悬浮液。在25,000psi的压力下，将预悬浮液分散匀化20次。
将一部分样品在-20℃下冷冻24小时，然后使其在室温下完全融化。
粒径测试结果(用激光衍射计测定)
实施例6含有PEG-脂肪酸酯的1％的布地奈德成分0.125％Solutol2.25％甘油1％布地奈德将称量的药物和一体积溶液混合，所述溶液含有0.125％Solutol和2.25％甘油，溶液pH调整为8.7，并进行高剪切混合形成预悬浮液。在25,000psi的压力下，将预悬浮液分散匀化30次。
将一部分样品在-20℃下冷冻24小时，然后使其在室温下完全融化。
粒径测试结果(用激光衍射计测定)
实施例7成分1％维生素E TPGS(d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸盐)
1％萘丁美酮2.25％甘油0.14％磷酸氢二钠将称量的维生素E TPGS和1体积预先制成的水溶液混合，所述溶液含有2.25％甘油和0.14％磷酸氢二钠，pH为8.6。将混合物用涡动搅拌器搅拌，直至维生素E TPGS溶解。加入药物并强力搅拌(ultraturraxed)混合物形成预悬浮液。在25kpsi的压力下，用AvestinB3匀化器将预悬浮液分散匀化30次。
将一部分样品在-20℃下冷冻24小时，然后使其在室温下完全融化。
粒径测试结果
尽管举例说明并描述了具体的实施方案，但是在不偏离本发明精神的情况下可以作出多种改变，并且保护范围仅限于后面权利要求的范围。
权利要求
1.一种水溶性差的化合物的悬浮液组合物，所述组合物包括悬浮于冷冻水基质中的化合物颗粒。
2.根据权利要求1的组合物，其中所述化合物在水中的溶解度低于10.0mg/ml。
3.根据权利要求1的组合物，其中所述化合物选自结晶相药剂、非晶相药剂、结晶相化妆品和非晶相化妆品。
4.根据权利要求1的组合物，其中药剂选自治疗剂和诊断剂。
5.根据权利要求4的组合物，其中治疗剂选自止痛药、抗炎剂、驱虫药、抗心率失常药、抗生素、抗凝血剂、抗抑郁剂、抗糖尿病药、抗癫痫药、抗真菌剂、抗组胺药、抗高血压药、抗毒覃碱剂、抗分支杆菌剂、抗肿瘤药、抗原生动物剂、免疫抑制剂、免疫刺激剂、抗甲状腺剂、抗病毒药、抗忧虑镇静剂、收敛剂、β-肾上腺受体阻断剂、造影剂、皮质类固醇、咳嗽抑制剂、诊断剂、诊断显影剂、利尿剂、多巴胺能药、止血剂、免疫药、脂类调节剂、肌肉驰缓药、拟副交感神经药、甲状旁腺降钙素、前列腺素、放射性药物、性激素、抗过敏药、兴奋剂、拟交感神经药、甲状腺药、血管舒张药、疫苗和黄嘌呤。
6.根据权利要求4的组合物，其中所述治疗剂选自伊曲康唑、萘丁美酮和布地奈德。
7.根据权利要求1的组合物，其中以组合物总重量计，药剂含量为约0.01wt％至约50wt％。
8.根据权利要求1的组合物，其中药剂的粒径为约50nm至50μm。
9.根据权利要求1的组合物，其中药剂颗粒的平均直径为约50nm至2μm。
10.根据权利要求1的组合物，其中约超过99％的颗粒的粒径小于约5μm。
11.根据权利要求1的组合物，所述组合物还包括一种或多种赋形剂，所述赋形剂选自表面改性剂、pH调节剂、晶体生长改性剂、冷冻保存剂、渗透剂、助溶剂和粘度调节剂。
12.根据权利要求11的组合物，其中表面改性剂选自阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和表面活性生物改性剂。
13.根据权利要求12的组合物，其中非离子表面活性剂选自聚氧乙烯脂肪醇的醚，聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯脂肪酸的酯，聚氧乙烯衍生的脂类例如mPEG-PSPC(棕榈酰-硬脂酰-磷脂酰基胆碱)、mPEG-PSPE(棕榈酰-硬脂酰-磷脂酰基乙醇胺)，脱水山梨醇的酯，甘油单硬脂酸酯，聚乙二醇，聚丙二醇，鲸蜡醇，鲸蜡醇硬脂醇混合物，硬脂醇，芳基烷基聚醚醇，聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物，polaxamines，甲基纤维素，羟基纤维素，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，非结晶纤维素，多糖，淀粉，淀粉衍生物，羟乙基淀粉，聚乙烯醇，和聚乙烯吡咯烷酮。
14.根据权利要求12的组合物，其中阴离子表面活性剂选自月桂酸钾、三乙醇胺硬脂酸盐、月桂基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、烷基聚氧乙烯硫酸盐、藻酸钠、二辛基磺基琥珀酸钠、甘油酯、羧甲基纤维素钠、胆汁酸及其盐、胆酸、脱氧胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、甘氨脱氧胆酸和羧甲基纤维素钙。
15.根据权利要求12的组合物，其中阳离子表面活性剂选自季铵化合物、苯扎氯铵、鲸蜡基三甲基溴化铵、壳聚糖、月桂基二甲基苯甲基氯化铵。
16.根据权利要求12的组合物，其中表面活性生物改性剂选自白蛋白、酪蛋白、肝素、水蛭素或其它蛋白质。
17.根据权利要求11的组合物，其中pH调节剂选自缓冲剂、氢氧化钠、盐酸、三(羟甲基)氨基甲烷、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、葡甲胺、氨基酸，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、苯基丙氨酸、色氨酸、组氨酸、脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸和牛磺酸。
18.根据权利要求11的组合物，其中冷冻保存剂选自碳水化合物、甘油、聚烷氧基醚、PEG-脂肪酸和脂类、生物基的表面活性剂和其它表面活性剂。
19.根据权利要求18的组合物，其中碳水化合物选自糖类、二糖和糖醇。
20.根据权利要求19的组合物，其中二糖是蔗糖。
21.根据权利要求19的组合物，其中糖醇是甘露醇。
22.根据权利要求18的组合物，其中表面活性剂选自聚山梨醇酯(吐温)、甘油、聚烷氧基醚、PEG-脂肪酸、PEG-脂类、白蛋白、淀粉和二甲基亚砜。
23.根据权利要求11的组合物，其中粘度调节剂选自碳水化合物、聚合物和蛋白质。
24.根据权利要求11的组合物，其中以组合物总重量计，赋形剂含量为约0.001％至约20％。
25.根据权利要求11的组合物，其中以组合物总重量计，赋形剂含量为约0.01％至约5％。
26.根据权利要求1的组合物，其中悬浮液至少稳定6个月。
27.一种稳定水溶性差的化合物的水介质的悬浮液的方法，所述方法包括下述步骤提供在水基质中的悬浮液；和冷冻该含水悬浮液。
28.根据权利要求27的方法，其中化合物在水中的溶解度低于10.0mg/ml。
29.根据权利要求27的方法，其中化合物选自结晶相药剂、非晶相药剂、结晶相化妆品和非晶相化妆品。
30.根据权利要求27的方法，其中药剂选自治疗剂和诊断剂。
31.根据权利要求30的方法，其中治疗剂选自杀真菌剂、止痛药、抗炎剂、驱虫药、抗心率失常药、抗生素、抗凝血剂、抗抑郁剂、抗糖尿病药、抗癫痫药、抗组胺药、抗高血压药、抗毒覃碱剂、抗原生生物药、抗分支杆菌剂、抗肿瘤药、免疫抑制剂、免疫刺激剂、抗甲状腺剂、抗病毒药、抗忧虑镇静剂、收敛剂、β-肾上腺受体阻断剂、造影剂、皮质类固醇、咳嗽抑制剂、诊断剂、诊断显影剂、利尿剂、多巴胺能药、止血剂、免疫药、脂类调节剂、肌肉驰缓药、拟副交感神经药、甲状旁腺降钙素、前列腺素、放射性药物、性激素、抗过敏药、兴奋剂、拟交感神经药、甲状腺药、血管舒张药、疫苗和黄嘌呤。
32.根据权利要求30的方法，其中治疗剂选自伊曲康唑、布地奈德和萘丁美酮。
33.根据权利要求27的方法，其中以组合物总重量计，药剂含量为约0.01wt％至约50wt％。
34.根据权利要求27的方法，其中药剂的粒径为约50nm至50μm。
35.根据权利要求27的方法，其中药剂颗粒的平均直径为约50nm至2μm。
36.根据权利要求27的方法，其中约超过99％的颗粒的粒径小于约5μm。
37.根据权利要求27的方法，所述方法还包括在冷冻之前通过过滤灭菌进行灭菌的步骤。
38.根据权利要求27的方法，所述方法还包括在冷冻之前通过加热灭菌进行灭菌的步骤。
39.根据权利要求27的方法，所述方法还包括通过γ辐射进行灭菌的步骤。
40.根据权利要求27的方法，其中提供悬浮液的步骤选自下列方法将药剂沉淀于水介质中得到预悬浮液；和将药剂悬浮于水介质中得到预悬浮液。
41.根据权利要求40的方法，其中沉淀步骤选自微沉淀、乳液蒸发、溶剂反溶剂沉淀、超临界流体沉淀、温度变化沉淀、pH变化沉淀和晶体播种。
42.根据权利要求40的方法，其中悬浮步骤包括将药剂加入水介质的步骤。
43.根据权利要求42的方法，所述方法还包括对药剂或预悬浮液施加能量的步骤。
44.根据权利要求43的方法，其中对药剂施加能量的步骤包括选自超声、匀化、微观流动、逆流匀化的方法，和提供冲击力、剪切力或空化力，或以连续方式或通过温度变化输入热能的方法。
45.根据权利要求43的方法，其中药剂颗粒在施加能量步骤之前具有第一平均粒径，而在施加能量步骤之后具有第二平均粒径，其中第二平均粒径小于第一平均粒径。
46.根据权利要求40的方法，其中预悬浮液还包括一种或多种赋形剂，所述赋形剂选自表面改性剂、pH调节剂、晶体生长改性剂、冷冻保存剂、渗透剂、助溶剂和粘度调节剂。
47.根据权利要求46的方法，其中表面改性剂选自阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和表面活性生物改性剂。
48.根据权利要求45的方法，其中非离子表面活性剂选自聚氧乙烯脂肪醇的醚，聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯脂肪酸的酯，聚氧乙烯衍生的脂类例如mPEG-PSPC(棕榈酰-硬脂酰-磷脂酰基胆碱)、mPEG-PSPE(棕榈酰-硬脂酰-磷脂酰基乙醇胺)，脱水山梨醇的酯，甘油单硬脂酸酯，聚乙二醇，聚丙二醇，鲸蜡醇，鲸蜡醇硬脂醇混合物，硬脂醇，芳基烷基聚醚醇，聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物，polaxamines，甲基纤维素，羟基纤维素，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，非结晶纤维素，多糖，淀粉，淀粉衍生物，羟乙基淀粉，聚乙烯醇，和聚乙烯吡咯烷酮。
49.根据权利要求47的方法，其中阴离子表面活性剂选自月桂酸钾、三乙醇胺硬脂酸盐、月桂基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、烷基聚氧乙烯硫酸盐、藻酸钠、二辛基磺基琥珀酸钠、甘油酯、羧甲基纤维素钠、胆汁酸及其盐、胆酸、脱氧胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、甘氨脱氧胆酸和羧甲基纤维素钙。
50.根据权利要求47的方法，其中阳离子表面活性剂选自季铵化合物、苯扎氯铵、鲸蜡基三甲基溴化铵、壳聚糖和月桂基二甲基苯甲基氯化铵。
51.根据权利要求47的方法，其中表面活性生物改性剂选自白蛋白、酪蛋白、肝素、水蛭素或其它蛋白质。
52.根据权利要求46的方法，其中pH调节剂选自氢氧化钠、缓冲剂、盐酸、三(羟甲基)氨基甲烷、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、葡甲胺、氨基酸，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸、脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸和牛磺酸。
53.根据权利要求46的方法，其中冷冻保存剂选自碳水化合物、甘油、聚烷氧基醚、PEG-脂肪酸和脂类、生物基的表面活性剂和其它表面活性剂。
54.根据权利要求53的方法，其中碳水化合物选自糖类、二糖和糖醇。
55.根据权利要求54的方法，其中二糖是蔗糖。
56.根据权利要求54的方法，其中糖醇是甘露醇。
57.根据权利要求53的方法，其中表面活性剂选自聚山梨醇酯(吐温)、甘油、聚烷氧基醚、PEG-脂肪酸、PEG-脂类、白蛋白、淀粉和二甲基亚砜。
58.根据权利要求46的方法，其中粘度调节剂选自碳水化合物、聚合物和蛋白质。
59.根据权利要求46的方法，其中以预悬浮液总重量计，赋形剂含量为约0.001％至约20％。
60.根据权利要求46的方法，其中以预悬浮液总重量计，赋形剂含量为约0.01％至约5％。
61.根据权利要求43的方法，其中对预悬浮液施加能量的步骤包括实施如下方法的步骤，所述方法选自超声、匀化、微观流动、逆流匀化，和提供冲击力、剪切力或空化力、或以连续方式或通过温度变化输入热能的方法。
62.根据权利要求41的方法，其中乳液蒸发方法包括下述步骤将药剂溶解在与水不混溶的挥发性溶剂中形成溶液；将溶液与水介质结合形成乳液；将乳液混合形成微乳液；和除去微乳液中与水不混溶的挥发性溶剂形成含水悬浮液。
63.根据权利要求62的方法，其中含水悬浮液还包括一种或多种赋形剂，所述赋形剂选自表面改性剂、pH调节剂、晶体生长改性剂、冷冻保存剂、渗透剂、助溶剂和粘度调节剂。
64.根据权利要求63的方法，其中表面改性剂选自阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和表面活性生物改性剂。
65.根据权利要求64的方法，其中非离子表面活性剂选自聚氧乙烯脂肪醇的醚，聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯脂肪酸的酯，聚氧乙烯衍生的脂类例如mPEG-PSPC(棕榈酰-硬脂酰-磷脂酰基胆碱)、mPEG-PSPE(棕榈酰-硬脂酰-磷脂酰基乙醇胺)，脱水山梨醇的酯，甘油单硬脂酸酯，聚乙二醇，聚丙二醇，鲸蜡醇，鲸蜡醇硬脂醇混合物，硬脂醇，芳基烷基聚醚醇，聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物，polaxamines，甲基纤维素，羟基纤维素，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，非结晶纤维素，多糖，淀粉，淀粉衍生物，羟乙基淀粉，聚乙烯醇，和聚乙烯吡咯烷酮。
66.根据权利要求64的方法，其中阴离子表面活性剂选自月桂酸钾、三乙醇胺硬脂酸盐、月桂基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、烷基聚氧乙烯硫酸盐、藻酸钠、二辛基磺基琥珀酸钠、甘油酯、羧甲基纤维素钠、胆汁酸及其盐、胆酸、脱氧胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、甘氨脱氧胆酸和羧甲基纤维素钙。
67.根据权利要求64的方法，其中阳离子表面活性剂选自季铵化合物、苯扎氯铵、鲸蜡基三甲基溴化铵、壳聚糖、月桂基二甲基苯甲基氯化铵。
68.根据权利要求64的方法，其中表面活性生物改性剂选自白蛋白、酪蛋白、肝素、水蛭素或其它蛋白质。
69.根据权利要求63的方法，其中pH调节剂选自缓冲剂、氢氧化钠、盐酸、三(羟甲基)氨基甲烷、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、葡甲胺和氨基酸，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸、脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸和牛磺酸。
70.根据权利要求63的方法，其中冷冻保存剂选自碳水化合物、甘油、聚烷氧基醚、PEG-脂肪酸和脂类、生物基的表面活性剂和其它表面活性剂。
71.根据权利要求70的方法，其中碳水化合物选自糖类、二糖和糖醇。
72.根据权利要求71的方法，其中二糖是蔗糖。
73.根据权利要求71的方法，其中糖醇是甘露醇。
74.根据权利要求70的方法，其中表面活性剂选自聚山梨醇酯(吐温)、聚烷氧基醚、PEG-脂肪酸、PEG-脂类、白蛋白、淀粉、甘油和二甲基亚砜。
75.根据权利要求63的方法，其中粘度调节剂选自碳水化合物、聚合物和蛋白质。
76.根据权利要求63的方法，其中以悬浮液总重量计，赋形剂含量为约0.001％至约20％。
77.根据权利要求63的方法，其中以悬浮液总重量计，赋形剂含量为约0.01％至约5％。
78.根据权利要求62的方法，其中与水不混溶的挥发性溶剂选自碳原子数为5或更多的直链、支链或环状烷烃，碳原子数为5或更多的直链、支链或环状烯烃，碳原子数为5或更多的直链、支链或环状炔烃，芳烃，部分或全部卤化的烃、醚、酯、酮，单甘油酯、二甘油酯或三甘油酯，天然油、醇、醛、酸、胺，直链或环状硅氧烷，六甲基二硅氧烷，或这些溶剂的任意组合。
79.根据权利要求62的方法，其中与水不混溶的挥发性溶剂是二氯甲烷。
80.根据权利要求62的方法，所述方法还包括将乳液冷却至约4℃的步骤。
81.根据权利要求62的方法，其中混合步骤包括施加能量的步骤，所述施加能量由选自如下的方法实施超声、匀化、微观流动、逆流匀化，和提供冲击力、剪切力或空化力、或以连续方式或通过温度变化输入热能的方法。
82.根据权利要求62的方法，其中除去与水不混溶的挥发性溶剂的步骤是通过超声处理进行的。
83.根据权利要求62的方法，其中除去与水不混溶的挥发性溶剂的步骤是通过将微乳液放入高真空下进行的。
84.根据权利要求62的方法，其中药剂颗粒通常是球形。
85.根据权利要求39的方法，其中溶剂反溶剂方法包括下述步骤将药剂溶解在与水混溶的溶剂中形成非水溶液；和将非水溶液与水介质结合以沉淀药剂，得到预悬浮液。
86.根据权利要求85的方法，所述方法还包括搅拌预悬浮液形成悬浮液的步骤。
87.根据权利要求86的方法，其中搅拌步骤包括对预悬浮液施加能量的步骤。
88.根据权利要求87的方法，其中施加能量的步骤包括使用如下方法对预悬浮液施加能量的步骤，所述方法选自超声、匀化、微观流动、逆流匀化，和提供冲击力、剪切力或空化力、或以连续方式或通过温度变化输入热能的方法。
89.根据权利要求85的方法，其中含水悬浮液还包括一种或多种赋形剂，所述赋形剂选自表面改性剂、pH调节剂、晶体生长改性剂、冷冻保存剂、渗透剂、助溶剂和粘度调节剂。
90.根据权利要求89的方法，其中表面改性剂选自阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和表面活性生物改性剂。
91.根据权利要求84的方法，其中非离子表面活性剂选自聚氧乙烯脂肪醇的醚，聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯脂肪酸的酯，聚氧乙烯衍生的脂类例如mPEG-PSPC(棕榈酰-硬脂酰-磷脂酰基胆碱)、mPEG-PSPE(棕榈酰-硬脂酰-磷脂酰基乙醇胺)，脱水山梨醇的酯，甘油单硬脂酸酯，聚乙二醇，聚丙二醇，鲸蜡醇，鲸蜡醇硬脂醇混合物，硬脂醇，芳基烷基聚醚醇，聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物，polaxamines，甲基纤维素，羟基纤维素，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，非结晶纤维素，多糖，淀粉，淀粉衍生物，羟乙基淀粉，聚乙烯醇，和聚乙烯吡咯烷酮。
92.根据权利要求90的方法，其中阴离子表面活性剂选自月桂酸钾、三乙醇胺硬脂酸盐、月桂基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、烷基聚氧乙烯硫酸盐、藻酸钠、二辛基磺基琥珀酸钠、甘油酯、羧甲基纤维素钠、胆汁酸及其盐、胆酸、脱氧胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、甘氨脱氧胆酸和羧甲基纤维素钙。
93.根据权利要求90的方法，其中阳离子表面活性剂选自季铵化合物、苯扎氯铵、鲸蜡基三甲基溴化铵、壳聚糖和月桂基二甲基苯甲基氯化铵。
94.根据权利要求90的方法，其中表面活性生物改性剂选自白蛋白、酪蛋白、肝素、水蛭素或其它蛋白质。
95.根据权利要求89的方法，其中pH调节剂选自缓冲剂、氢氧化钠、盐酸、三(羟甲基)氨基甲烷、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、葡甲胺和氨基酸，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸、脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸和牛磺酸。
96.根据权利要求89的方法，其中冷冻保存剂选自碳水化合物、甘油、聚烷氧基醚、PEG-脂肪酸和脂类和生物基的表面活性剂。
97.根据权利要求96的方法，其中碳水化合物选自糖类、二糖和糖醇。
98.根据权利要求97的方法，其中二糖是蔗糖。
99.根据权利要求97的方法，其中糖醇是甘露醇。
100.根据权利要求96的方法，其中表面活性剂选自聚山梨醇酯(吐温)、聚烷基醚、PEG-脂肪酸、PEG-脂类、白蛋白、淀粉、甘油和二甲基亚砜。
101.根据权利要求88的方法，其中粘度调节剂选自碳水化合物、聚合物和蛋白质。
102.根据权利要求88的方法，其中以预悬浮液总重量计，赋形剂含量为约0.001％至约20％。
103.根据权利要求88的方法，其中以预悬浮液总重量计，赋形剂含量为约0.01％至约5％。
104.一种将水溶性差的药剂或化妆品在冷冻水基质中的悬浮液给病人服用的方法，所述方法包括下述步骤提供药剂或化妆品的冷冻悬浮液；融化冷冻悬浮液；和通过下述途径将融化的悬浮液给病人服用，所述途径选自肠胃外注射(静脉内、动脉内、鞘内、腹膜内、眼内、关节内、硬膜内、肌肉内、真皮内或皮下注射)、口服、肺部给药、眼部给药或局部给药。
全文摘要
本发明公开了一种水溶性差的药剂或化妆品的稳定悬浮液组合物，及其制备方法，所述组合物具有悬浮于冷冻水基质的药剂或化妆品颗粒形式。该组合物在长时间，优选六个月或更长时间内保持稳定，适合肠胃外、口服或非口服给药途径，例如肺部给药(吸入)、眼用或局部给药。
文档编号A61K31/4985GK1750811SQ02820792
公开日2006年3月22日 申请日期2002年10月18日 优先权日2001年10月19日
发明者詹姆士·E·基普, 马克·J·多蒂, 克里斯蒂娜·L·里贝克, 肖恩·布林耶尔森, 杰米·特雷莎·康克尔 申请人:巴克斯特国际公司