专利名称：贯众有效部位及单体在抗癌和抗关节炎药剂中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药有效部位的制药新用途，具体讲是贯众有效部位及单体在制备抗癌和抗关节炎药物中的应用，属于药物领域。
贯众是一种较常用中草药，具有清热解毒、驱虫、凉血止血等功效，临床用于预防感冒，治疗胆道蛔虫病、妇产科出血、带状疱疹等。到目前为止尚未见有关贯众有效部位用于抗关节炎的报道，也未见用二氧化碳超临界法提取贯众有效部位并用于抗癌药物制备的相关报道。
本发明目的是提供中药贯众的药物新用途，即贯众有效部位在制备抗关节炎药物中的应用；同时提供采用二氧化碳超临界法提取贯众有效部位并用于抗癌药物制备。
本发明所述的贯众有效部位是按照常规的溶剂法或二氧化碳超临界萃取法从中药贯众中提取的，优选是从绵马贯众中提取；本发明所述的单体指绵马酸ABA、黄绵马酸ABB和东北贯众素ABBA，是从贯众有效部位中经过反复硅胶柱层析分离得到的。
贯众有效部位的提取方法如下溶剂法取绵马贯众药材，粉碎后用丙酮或乙醚回流提取，提取液浓缩至原体积的一半，室温放置1～2周，析出黄褐色沉淀，滤集沉淀，用丙酮或乙醚充分溶解后搅拌均匀，抽滤，如此反复处理至滤液为淡黄色为止，沉淀干燥得浅黄色粉末，即为贯众有效部位。
超临界法取绵马贯众药材，粉碎后用二氧化碳超临界提取，提取温度35～65℃，提取压力20～30MPa，所得提取物即为贯众有效部位。
本发明所述的贯众有效部位也可以经过反复硅胶柱层析制备成绵马酸ABA、黄绵马酸ABB和东北贯众素ABBA纯品。
本发明所述的贯众有效部位或绵马酸ABA、黄绵马酸ABB纯品制成药剂后，均具有抗癌作用；本发明所述的贯众有效部位或东北贯众素ABBA均具有抗关节炎作用。
按照常规制剂工艺，可以将本发明所述的贯众有效部位、绵马酸ABA、黄绵马酸ABB和东北贯众素ABBA制成任何一种适用于临床使用的药物制剂，例如胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、口服液体制剂、注射剂等。
将贯众有效部位制成片剂的方法如下取绵马贯众药材，粉碎后用乙醚回流提取，提取液浓缩至原体积的一半，室温放置1～2周，析出黄褐色沉淀，滤集沉淀，用乙醚充分溶解后搅拌均匀，抽滤，如此反复处理至滤液为淡黄色为止，沉淀干燥得浅黄色粉末，即为贯众有效部位。取贯众有效部位1份，加入药用淀粉5份，混匀，制粒，压片，制得片剂。
经实验研究，证明本发明所述的贯众有效部位及绵马酸ABA、黄绵马酸ABB纯品均具有抗癌作用；本发明所述的贯众有效部位及东北贯众素ABBA纯品均具有抗关节炎作用。
实验例1本发明贯众有效部位对大鼠佐剂性关节炎的影响1、实验材料样品贯众有效部位及东北贯众素ABBA，由北京扬新科技有限公司提供。雷公藤多苷上海医科大学红旗制药厂，批号20000501。卡介苗(BCG)上海生物制品厂。动物清洁级SD大鼠，♂，体重16～200g，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司。2、实验方法大鼠随机分成正常组、模型组、给药组、阳性药对照组，用卡介苗于大鼠右足跖皮内注射致炎，致炎后第16天开始灌胃给药，每天一次，连续给药7天，在致炎前和致炎后第16天、第20天、第24天、第28天用足容积测量仪测定大鼠右测足爪容积，求出肿胀度(Δml＝致炎后容积-致炎前容积)，以观察AA大鼠的继发炎症变化情况。3、实验结果表1贯众有效部位及东北贯众素ABBA单体对AA大鼠的足爪肿胀的影响组别 剂量 动物数 肿胀值+(cm)mg/kg (只)d16d20d24d28模型组 100.487±0.234Δ0.800±0.239Δ0.838±0.341Δ0.668±0.247Δ正常组 100.118±0.0320.115±0.0770.199±0.0870.225±0.089有效部位 220 100.536±0.1770.587±0.2480.429±0.1720.324±0.172**单体 100 100.531±0.1620.577±0.2470.348±0.196*0.311±0.156**雷公藤多苷 30100.607±0.2280.434±0.203*0.323±0.137**0.298±0.124*ΔP＜0.01(与正常组比较)；**P＜0.01，*P＜0.05(与模型组比较)4、结论本发明所述的贯众有效部位及东北贯众素ABBA对大鼠佐剂性关节炎的继发炎症有抑制作用。实验例2本发明所述的贯众有效部位及绵马酸ABA、黄绵马酸ABB纯品的体外抗肿瘤作用1、实验材料药物贯众有效部位及绵马酸ABA、黄绵马酸ABB纯品细胞株HelaS3(人宫颈癌细胞)，A549(人肺癌细胞)，Hep-G2(人肝癌细胞)培养液RPMI1640+15％NBS(Hep-G2为进口FBS)+双抗2、实验方法MTT法。3、实验结果表1贯众有效部位及绵马酸ABA、黄绵马酸ABB对三株人体肿瘤细胞体外增殖的抑制作用HelaS3A549 Hep-G2样品 IC50100μg/ml时IC50100μg/ml时IC50100μg/ml时μg/ml 抑制率％ μg/ml 抑制率％ μ/ml抑制率％有效部位 77.76 78.49 ＞100 25.96＞100 9.77绵马酸ABA74.03 88.32 ＞100 28.78＞100 13.26黄绵马酸ABB 49.13 94.52 79.79 70.96＞100 0实验例3本发明所述的贯众有效部位的体内抗肿瘤作用1、实验材料药物贯众有效部位溶剂0.5％CMC-Na溶液阳性对照药注射用环磷酰胺瘤源小鼠Lewis肺癌由上海医药工业研究院药理室传代维持动物C57BL/6小鼠，由上海中科院实验动物中心提供2、实验方法无菌条件下取生长旺盛的瘤源，匀浆法制成1×107/ml细胞悬液，于小鼠腋皮下接种0.2ml/只，次日开始腹腔注射给药，每天一次，连续7天，3周后处死，取瘤称重，计算抑瘤率抑瘤率％＝[(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重]×100％3、实验结果表1 贯众有效部位对小鼠Lewis肺癌(皮下接种)疗效实验结果组别剂量 动物动物体重 瘤重抑瘤率mg/kg/d 只 g(始/终)g(X±SD) ％阴性对照 相应溶剂8 20.2/26.32.74±0.32阳性对照 30 8 20.4/24.00.28±0.17* 89.96样品 200 8 20.0/23.11.26±0.23* 54.01100 8 20.3/24.61.40±0.18* 48.9150 8 20.1/24.51.61±0.12* 41.24*p＜0.01(与阴性对照组比)4、结论本发明所述贯众有效部位及绵马酸ABA、黄绵马酸ABB纯品均具有抗肿瘤作用。
权利要求
1.贯众有效部位及单体在抗癌和抗关节炎药剂中的应用。
2.根据权利要求1的应用，其中所述的贯众为绵马贯众。
3.根据权利要求1的应用，其中所述的贯众有效部位主要含绵马酸ABA、黄绵马酸ABB和东北贯众素ABBA，贯众有效部位是按照下述方法制备的方法(1)取绵马贯众药材，粉碎后用甲醇、丙酮或乙醚回流提取，提取液浓缩至原体积的一半，室温放置1～2周，析出黄褐色沉淀，滤集沉淀，用甲醇、丙酮或乙醚充分溶解后搅拌均匀，抽滤，如此反复处理至滤液为淡黄色为止，沉淀干燥得浅黄色粉末，即为贯众有效部位。方法(2)取绵马贯众药材，粉碎后用二氧化碳超临界提取，提取温度35～65℃，提取压力20～30MPa，所得提取物即为贯众有效部位。
4.根据权利要求1的应用，其中所述的单体为绵马酸ABA、黄绵马酸ABB和东北贯众素ABBA，它们是从上述贯众有效部位中经过反复硅胶柱层析分离得到的。
5.绵马酸ABA和黄绵马酸ABB在抗癌药剂中的应用。
6.东北贯众素ABBA在抗关节炎药剂中的应用。
全文摘要
本发明公开了贯众有效部位及单体的新制药用途，具体说是贯众有效部位及单体在制备抗癌和抗关节炎药物中的应用。
文档编号A61P19/02GK1475271SQ0315004
公开日2004年2月18日 申请日期2003年7月31日 优先权日2003年7月31日
发明者胡文波 申请人:北京扬新科技有限公司