专利名称：一种植物组培消毒方法
技术领域：
本发明涉及一种植物组培外植体的消毒方法，属于植物组培技术领域。
背景技术：
植物组织培养技术近几年发展很快，已经成为名优植物工厂化育苗技术的重要手段之一。国内外对植物组织培养重视，其原因在于，从一个优良植物株选取组织、器官、作为培养材料，通过人为物理、化学等环境的调节，可以有计划的在短期内，培育多株遗传特性相同的优良种苗。植物组培外植体的消毒，属于植物组培技术领域中不可缺少的首要环节，是组织培养成败的第一要素。但是，由于植物材料的消毒较难掌握，名优植物材料消毒实践中出现的问题是，消毒时间长了植物材料死亡，消毒时间短了植物材料表面细菌不能杀死，致使植物材料污染死亡。
发明内容
本发明的目的在于提供一种毒副作用小，操作简便，适应范围宽消毒效果好的方法及消毒剂组合物。
本发明的技术方案是这样实现的这种植物组培消毒方法，其特征在于将植物的种子清洗干净或植物材料剪成带叶芽的茎段，洗去表面污垢，用组成至少包括如下比例的次氯酸钠1-3％，氯化汞0.05-0.5％，水余量的消毒剂浸泡5-30分钟。
所述的植物组培消毒方法，消毒剂中次氯酸钠与氯化汞的应用比例为1-3∶0.1。
所述的植物组培消毒方法，消毒剂中含有过氧化氢3-10％。
所述的植物组培消毒方法，消毒剂中的水经过1.2kg/cm2，121℃，30分钟的高压消毒处理。
所述的植物组培消毒方法，植物组培材料在消毒剂中的浸泡时间包括，水稻、小麦种子20～30分钟，木本植物6～15分钟，草本植物5～10分钟。
所述的植物组培消毒方法，种子去壳后浸泡在消毒剂中用摇床振荡30分钟消毒。
所述的植物组培消毒方法，于植物茎段或茎尖用流水冲洗表面污垢，用70％酒精冲洗一次，再用消毒剂浸泡5-10分钟。
本发明的植物组培消毒方法的适用范围比较广，不仅适用于裸露的种子，同时对木本植物，草本植物，药用植物都显示了很好的效果。尤其是对一些国外引进的名优资源，使用该方法以毒副作用小，效果明显等优势，为名优资源保存利用提供了有利的保障。
具体实施例方式
下面结合本发明的植物组培消毒方法的应用实例，说明本发明的具体实施方式
。
1、消毒器皿准备选取200mL的三角瓶，使用前冲洗干净，用塑料膜封口，经高压消毒后备用。
2、消毒剂的准备分别配制0.1％氯化汞(重量％)溶液，1％、2％、3％的次氯酸钠(重量％)溶液，5％、10％的过氧化氢(体积％)溶液，使用前按需要比例混合；经高压消毒的无菌水。
3、器械的准备消毒滤纸、手术刀、剪刀、镊子等。
实施例1将水稻种子去壳后放到150mL三角瓶中，用无菌水冲洗一遍，加入次氯酸钠∶氯化汞为的3∶0.1消毒剂，置于摇床震荡30分钟，用无菌水冲洗3～4遍，接种到培养基中，在暗培养环境25～27℃的条件下，3天即可出芽，消毒效果100％。
实施例2从田间取转基因油麻新鲜茎尖，用流水从洗表面污垢，用70％酒精冲一次，加入次氯酸钠∶氯化汞为2∶0.1的消毒剂浸泡，消毒时间为5～10分钟，无菌水冲洗至清，而后选择带芽点或叶圆基的材料，剪成0.5cm的茎段或茎尖，接种到已经备好的培养基中，材料的消毒效果95％以上，培养3～5天长出新芽。
实施例3从田间取转基因油麻新鲜茎尖，用流水从洗表面污垢，用70％酒精冲一次，加入过氧化氢∶次氯酸钠∶氯化汞为5∶1∶0.1的消毒剂浸泡，消毒时间为10～15分钟，无菌水冲洗至清，而后选择带芽点或叶圆基的材料，剪成0.5cm的茎段或茎尖，接种到已经备好的培养基中，材料的消毒效果95％以上，培养3～5天长出新芽。
实施例4选取驱蚊草茎段或茎尖，用首先流水冲洗，然后用70％酒精10秒，加入次氯酸钠∶氯化汞为2∶0.1的消毒剂浸泡，消毒时间为5～8分钟，最后用备好的无菌水冲洗至清，用已消毒手术刀分割成0.5cm左右，接种到所需培养基中，采用该方法消毒效果达95％以上。
实施例5霍霍巴试管污染苗的消毒，根据污染程度不同，首先用无菌水冲洗，再用70％酒精消毒，加入次氯酸钠∶氯化汞为2∶0.1的消毒剂浸泡，消毒时间为6～10分钟，用无菌水冲洗至清，用滤纸吸去多余水分，接种到相应的培养基中，消毒效果可以达到90％以上。
实施例5草樱花的消毒，选取草樱花的茎段，经流水冲洗去表面尘土，70％酒精消毒10秒，加入次氯酸钠∶氯化汞为1∶0.1的消毒剂浸泡，消毒时间为5～8分钟，用无菌水冲洗至清，用滤纸吸去多余水分，接种到相应的培养基中，消毒效果可以达到90％以上；在正常的培养条件下，5天可以观察到新的生长点。
实施例6珠美海棠试管苗的消毒，用流水从洗表面污垢，用70％酒精冲一次，加入过氧化氢∶氯化汞为10∶0.1的消毒剂浸泡，消毒时间为15～20分钟，无菌水冲洗至清，而后选择带芽点或叶圆基的材料，剪成0.5cm的茎段或茎尖，接种到已经备好的培养基中，材料的消毒效果95％以上，培养3～5天长出新芽。
权利要求
1.一种植物组培消毒方法，其特征在于将植物的种子清洗干净或植物材料剪成带叶芽的茎段，洗去表面污垢，用组成至少包括如下比例的次氯酸钠1-3％，氯化汞0.05-0.5％，水余量的消毒剂浸泡5-30分钟。
2.根据权利要求1所述的植物组培消毒方法，其特征在于消毒剂中次氯酸钠与氯化汞的应用比例为1-3∶0.1。
3.根据权利要求1所述的植物组培消毒方法，其特征在于消毒剂中含有过氧化氢3-10％。
4.根据权利要求1所述的植物组培消毒方法，其特征在于消毒剂中的水经过1.2kg/cm2，121℃，30分钟的高压消毒处理，。
5.根据权利要求1所述的植物组培消毒方法，其特征在于植物组培材料在消毒剂中的浸泡时间包括，水稻、小麦种子20～30分钟，木本植物6～15分钟，草本植物5～10分钟。
6.根据权利要求5所述的植物组培消毒方法，其特征在于种子去壳后浸泡在消毒剂中用摇床振荡30分钟消毒。
7.根据权利要求1所述的植物组培消毒方法，其特征在于植物茎段或茎尖用流水冲洗表面污垢，用70％酒精冲洗一次，再用消毒剂浸泡5-10分钟。
全文摘要
本发明提供一种植物组培消毒方法，其特征在于将植物的种子清洗干净或植物材料剪成带叶芽的茎段，洗去表面污垢，用组成至少包括如下比例的次氯酸钠1－3％，氯化汞0.05－0.5％，水余量的消毒剂浸泡5－30分钟。本发明的植物组培消毒方法的适用范围比较广，不仅适用于裸露的种子，同时对木本植物，草本植物，药用植物都显示了很好的效果。尤其是对一些国外引进的名优资源，使用该方法以毒副作用小，效果明显等优势，为名优资源保存利用提供了有利的保障。
文档编号A61L2/18GK1561695SQ200410012209
公开日2005年1月12日 申请日期2004年3月26日 优先权日2004年3月26日
发明者王玉珍, 罗景兰, 史印山, 徐进 申请人:中国科学院遗传与发育生物学研究所