专利名称：一种治疗抑郁症和肿瘤的中药制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于中药制药技术领域，具体涉及到一种治疗抑郁症和肿瘤的中药制剂及其制备方法。
背景技术：
积雪草Centella asiatica(L.)Urban.(Hydrocotyle asiatica L.)为伞形科植物积雪草的干燥全草，分布于江苏、安徽、浙江、江西、湖南、湖北、福建、台湾、广东、广西、陕西、四川、云南等省区，资源非常丰富。积雪草为常用中药，性微寒，味苦辛；首载于《神农本草经》，具清热利湿、解毒消肿之功效，多用于湿热黄疸、痈肿疮毒、跌打损伤等症。近代研究不断表明积雪草还有许多新的用途。
文献《中草药》(1996，09)“积雪草的抗癌作用”中报道了积雪草提取物可显著改善认知能力并有助于防止病情恶化，同时对改善焦虑症症状亦有良好效果，该文献作了积雪草植物的离体抗培养中的肿瘤细胞试验，积雪草能有效地百分之百地摧毁培养中的癌细胞。在跟踪动物实验中，积雪草提取物使带肿瘤的小鼠生命延长了2倍多，且在服药过量时，显示了令人信服的无毒性；文献《第二军医大学学报》(1998，02)“积雪草挥发油成分分析及其抗抑郁作用研究”、文献《第二军医大学学报》(2002，11)“积雪草总管对抑郁症大鼠神经内分泌功能的影响”报道了积雪草的有效部位总苷、挥发油对抑郁症的治疗作用。
1999年11月14日世界卫生组织(WHO)总干事布伦特兰博士披露，精神疾病已经给人类社会带来沉重的负担。世界上前10种致人残废或丧失劳动能力的疾病中有5种是精神疾病精神抑郁症，精神分裂症，两极精神紊乱，酗酒和强迫性神经病。而全世界的十大疾病中，精神抑郁症位于第五位。据估计，到2020年，出缺血性心脏病以外，抑郁症会成为影响寿命、增加经济负担的第二大疾病。随着医学由生物医学模式向生物-心理-社会医学模式的转变，产生了生活质量这一新的健康指标，情绪或心理问题成为生活质量的重要方面。为了解癌症患者的情绪状态，北京医科大学临床肿瘤学院(北京肿瘤医院)内科主任刘淑俊教授等与精神卫生研究所赵友文教授协作，对247例恶性肿瘤患者抑郁和焦虑的发病调查表明，恶性肿瘤患者的抑郁和焦虑的严重度指数明显高于正常人群。该调查结果显示，抑郁和焦虑的发生率分别为42.51％和13.36％，抑郁和焦虑兼有者为12.15％，其中轻度抑郁者70例占抑郁患者的66.67％，中度抑郁患者30例占28.57％，重度抑郁者5例占4.76％；轻度焦虑患者28例占焦虑患者的84.85％，中度焦虑患者5例占15.15％。247例恶性肿瘤患者中，存在隐匿性抑郁症105例，他们同时出现躯体症状，如失眠、情绪低落、食欲减退、体重下降等，其发生率高于普通肿瘤患者，这些病人(甚至主管医师)不认为自己身体不好是因为心情不好或者情绪抑郁引起的，因而忽视了心理治疗。同时发现，手术前患者的抑郁、焦虑发生率高于手术后。为此，专家指出，不要忽视躯体症状背后的情感障碍。躯体不适，实际是抑郁的躯体症状表现。重视外科术前患者的心理障碍也是非常重要的。临床分期调查显示，分期与抑郁焦虑的发生率有显著差异，所调查的51例临床分期为I～IV期康复会的患者，其抑郁和焦虑的发生率均值均低于内科、外科、门诊患者的发生率和均值。说明建立肿瘤病人的康复会及抗癌乐园，对减轻肿瘤患者的情感障碍、提高生活质量、治疗、预后均起到积极作用。专家强调，在治疗肿瘤的同时，应加强对肿瘤患者抑郁和焦虑的治疗，使患者能正确对待疾病，增强治疗的依从性，减轻躯体症状，全面提高生活质量，也可以通过早诊早治，减少中重度抑郁和焦虑患者的出现，避免患者轻生念头导致严重后果。
专利申请号为02111386的专利采用积雪草总苷中羟基积雪草苷用于治疗抑郁症，但该专利采用常规提取方法，没有专利的新颖性，同时采用硅胶柱层析法纯化羟基积雪草苷，该方法在实际生产过程中无法实现工业化转化，因此缺乏了专利的实用性；专利CN1194154A阐述了积雪草总苷的制备方法，但该方法复杂，过程繁琐，使用了较多的有机溶剂，对环境污染严重，有害于实际操作者的身体健康；专利申请号01113014的专利阐述了积雪草的有效部位-积雪草总苷抗抑郁的作用，但对积雪草的抗抑郁的另一个抗抑郁有效部位-积雪草挥发油未进行提取纯化，使资源浪费，药物的作用没有得到充分的发挥。
发明内容
基于上述情况，本发明的目的在于采用现代提取纯化技术手段对中药积雪草进行提取纯化，得到有效部位-积雪草总苷、挥发油，与药用辅料混合，制备成输液剂、水针剂、粉针剂、和冻干粉针剂等注射制剂，用于抑郁症、肿瘤疾病、肿瘤疾病合并的抑郁症，本发明的各组制剂，药理实验结果表明，具有更广泛、更强的药理活性。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的本发明注射制剂是由中药积雪草的有效部位与药剂学上可接受的常规药用辅料制备而成的注射用输液制剂、水针制剂、粉针剂或冻干粉针剂。
本发明的积雪草有效部位可通过下述方法制备1)、取干燥积雪草全草，用挥发油提取器提取挥发油，提取的挥发油用羟丙基-β-环糊精进行包合，得到积雪草包和物；2)、将提取挥发油后的残渣用15-25倍量、浓度为20％-40％的乙醇浸泡2-4小时，置于循环超声提取器中，常温下超声功率400-800W，提取2-4次，每次35-75分钟。合并提取液，浓缩至原体积的1/4-1/3，用30％-50％的乙醇沉淀，上清液备用，沉淀干燥至乙醇完全除尽，备用。取上述沉淀用浓度为20％-40％乙醇溶解，加入1/12-1/8量的澄清剂静置2-4小时，离心分离，上清液与上述得到的上清液合并备用，弃去沉淀。取合并上清液，浓缩后加至预先处理好的大孔吸附树脂柱上，用15-20倍量的蒸馏水洗至洗脱液近无色，洗去糖类和鞣质部分，洗脱液弃去；然后用8-12倍量20％-60％的乙醇洗脱，收集洗脱液，收集洗脱液，将洗脱液浓缩成相对密度为1.25-1.35(50℃)的浓缩液；3)、将上述得到积雪草的浓缩液和挥发油包合物混合即得到积雪草有效部位。
将积雪草有效部位与药用辅料混合制备成本发明的注射用输液制剂、水针制剂、粉针剂或冻干粉针剂。
本发明中制备输液剂和水针剂的药用辅料为氯化钠或葡萄糖，制备粉针剂和冻干粉针剂的药用辅料为甘露醇或葡聚糖或半乳糖。
本发明中所用的澄清剂为101果汁澄清剂或甲壳素类吸附澄清剂。
本发明中所述的大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂，包括D101型、AB-8型、或NKA型大孔吸附树脂。
二.药理实施例实施例1对大鼠肝肿瘤抑制的比较实验动物大鼠50只，150g～180g，雌雄不分，分成5组，每组10只，分别用于空白组、两种制剂实验组。
实验药物生理盐水(北京乾露春科技有限公司实验室提供)市售艾迪注射液(北京白塔寺医药批发公司购买，贵州益制药股份有限公司生产)本发明的各组制剂北京乾露春科技有限公司实验室提供)实验方法取大鼠作W256的肝内接种，接种7天后，用戊巴比妥钠按35mg/kg的剂量腹腔注射麻醉，固定，剖腹暴露肝，测量肝上肿瘤表面最大径(a)和最小径(b)，按(a*b2)/2＝V(肿瘤体积)。分离胃、十二指肠动脉、肝总动脉和肝固有动脉，结扎胃、十二指肠动脉远端，以银夹阻断肝总动脉，于手术放大镜下在胃十二指肠动脉上切口并插入外径0.3mm导管后再送入肝固有动脉，然后按实验分组分别注入受试药物，术后拔管结扎胃十二指肠动脉，放开肝总动脉银夹，再缝合切口，将大鼠置于动物室待苏醒，继续饲养观察，手术后8天，按上法检测肿瘤体积，见表1表1 两种制剂对肿瘤的抑制
注与阴性对照比较**P＜0.01，与阳性对照比较[*]P＜0.05按上述方法，在进行实验，观察大鼠存活天数，见表2表2 大鼠存活天数比较
注与阴性对照比较**P＜0.01，与阳性对照比较[*]P＜0.05实施例2物理、化学和生物因素均能诱发癌症，但人癌发病原因的80％-90％认为是环境化学物质引起的。
两种制剂对二乙基亚硝胺(DENA)诱发大鼠肝癌的抑制实验动物大鼠50只，120g左右，雌雄不分，分成5组，每组10只，分别用于空白组、两种制剂实验组。
实验药物生理盐水(北京乾露春科技有限公司实验室提供)市售艾迪注射液(北京白塔寺医药批发公司购买，贵州益佰制药股份有限公司生产)本发明的各组制剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)实验方法用含二乙基亚硝胺(DENA)的饮水喂养大鼠，36周得原发性肝癌，分别给药，按照药理实验一计算实验结果，见表3
表3 两种制剂对肿瘤的抑制
注与阴性对照比较**P＜0.01，与阳性对照比较[*]P＜0.05表4 大鼠存活天数比较
注与阴性对照比较**P＜0.01，与阳性对照比较[*]P＜0.05结论通过以上药理实验表明，本发明的各组制剂比市售艾迪注射液的抗癌的药理作用更好，有利于癌症的治疗。
实施例3抑郁症大鼠神经内分泌功能的影响实验动物雄性SD大鼠60只，体重160-180g，北京大学动物实验室提供，大鼠随机分为阴性对照组(生理盐水组)、阳性对照组(金丝桃素片)、实验组(本发明的各组制剂)实验方法采用长期未预知应激刺激导致动物抑郁症模型。各组抑郁型动物分别2次/天灌胃给药，给药14天后，测定每组动物血清的TSH、T3、T4和rT3的浓度。
结果见表5表5 各组制剂对大鼠神经内分泌的影响
**P＜0.01，*P＜0.05结论通过以上实验数据表明，本发明的各组制剂均有较好的抗抑郁作用，与市售同类品种比较具有更好的药理作用。
注本发明的各组制剂还具有抗炎、抗组织纤维化、抑制乳腺增生等药理作用。
四.制备实施例实施例1(1)取干燥积雪草全草3000克，用挥发油提取器提取挥发油，提取的挥发油用羟丙基-β-环糊精进行包合，得到积雪草包和物；将提取挥发油后的残渣用15倍量、浓度为20％的乙醇浸泡2小时，置于循环超声提取器中，常温下超声功率400W，提取2次，每次35分钟。合并提取液，浓缩至原体积的1/4，用30％的乙醇沉淀，上清液备用，沉淀干燥至乙醇完全除尽，备用。取上述沉淀用浓度为20％乙醇溶解，加入1/12量的101果汁澄清剂静置2小时，离心分离，上清液与上述得到的上清液合并备用，弃去沉淀。取合并上清液，浓缩后加至预先处理好的D101型大孔吸附树脂柱上，用15倍量的蒸馏水洗至洗脱液近无色，洗去糖类和鞣质部分，洗脱液弃去；然后用8倍量20％的乙醇洗脱，收集洗脱液，收集洗脱液，将洗脱液浓缩成相对密度为1.25(50℃)的浓缩液；(2)将由上述浓缩液和挥发油包合物组成的积雪草有效部位100克与药用辅料氯化钠400g混合制备成注射用输液制剂1000瓶或水针制剂4000支或粉针剂1000支或冻干粉针剂1000支。
实施例2(1)取干燥积雪草全草30公斤，用挥发油提取器提取挥发油，提取的挥发油用羟丙基-β-环糊精进行包合，得到积雪草包和物；将提取挥发油后的残渣用25倍量、浓度为40％的乙醇浸泡4小时，置于循环超声提取器中，常温下超声功率800W，提取4次，每次75分钟。合并提取液，浓缩至原体积的1/3，用50％的乙醇沉淀，上清液备用，沉淀干燥至乙醇完全除尽，备用。取上述沉淀用浓度为40％乙醇溶解，加入1/8量的甲壳素类吸附澄清剂静置4小时，离心分离，上清液与上述得到的上清液合并备用，弃去沉淀。取合并上清液，浓缩后加至预先处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱上，用20倍量的蒸馏水洗至洗脱液近无色，洗去糖类和鞣质部分，洗脱液弃去；然后用12倍量60％的乙醇洗脱，收集洗脱液，收集洗脱液，将洗脱液浓缩成相对密度为1.35(50℃)的浓缩液；(2)将由上述浓缩液和挥发油包合物组成的积雪草有效部位1000克与药用辅料葡萄糖4000克混合制备成注射用输液制剂10000瓶或水针制剂40000支或粉针剂10000支或冻干粉针剂10000支。
实施例3(1)取干燥积雪草全草6000克，用挥发油提取器提取挥发油，提取的挥发油用羟丙基-β-环糊精进行包合，得到积雪草包和物；将提取挥发油后的残渣用16倍量、浓度为25％的乙醇浸泡3小时，置于循环超声提取器中，常温下超声功率500W，提取3次，每次40分钟。合并提取液，浓缩至原体积的1/3，用40％的乙醇沉淀，上清液备用，沉淀干燥至乙醇完全除尽，备用。取上述沉淀用浓度为25％乙醇溶解，加入1/9量的101果汁澄清剂静置3小时，离心分离，上清液与上述得到的上清液合并备用，弃去沉淀。取合并上清液，浓缩后加至预先处理好的NKA型大孔吸附树脂柱上，用16倍量的蒸馏水洗至洗脱液近无色，洗去糖类和鞣质部分，洗脱液弃去；然后用9倍量30％的乙醇洗脱，收集洗脱液，收集洗脱液，将洗脱液浓缩成相对密度为1.30(50℃)的浓缩液；(2)将由上述浓缩液和挥发油包合物组成的积雪草有效部位200克与药用辅料葡聚糖800克混合制备成注射用输液制剂2000瓶或水针制剂8000支或粉针剂2000支或冻干粉针剂2000支。
实施例4(1)取干燥积雪草全草9000克，用挥发油提取器提取挥发油，提取的挥发油用羟丙基-β-环糊精进行包合，得到积雪草包和物；将提取挥发油后的残渣用17倍量、浓度为30％的乙醇浸泡3小时，置于循环超声提取器中，常温下超声功率550W，提取3次，每次50分钟。合并提取液，浓缩至原体积的1/3，用45％的乙醇沉淀，上清液备用，沉淀干燥至乙醇完全除尽，备用。取上述沉淀用浓度为35％乙醇溶解，加入1/10量的甲壳素类吸附澄清剂静置3小时，离心分离，上清液与上述得到的上清液合并备用，弃去沉淀。取合并上清液，浓缩后加至预先处理好的D101型大孔吸附树脂柱上，用18倍量的蒸馏水洗至洗脱液近无色，洗去糖类和鞣质部分，洗脱液弃去；然后用10倍量40％的乙醇洗脱，收集洗脱液，收集洗脱液，将洗脱液浓缩成相对密度为1.35(50℃)的浓缩液；(2)将由上述浓缩液和挥发油包合物组成的积雪草有效部位300克与药用辅料半乳糖1200克混合制备成注射用输液制剂3000瓶或水针制剂12000支或粉针剂3000支或冻干粉针剂3000支。
实施例5(1)取干燥积雪草全草15公斤，用挥发油提取器提取挥发油，提取的挥发油用羟丙基-β-环糊精进行包合，得到积雪草包和物；将提取挥发油后的残渣用20倍量、浓度为25％的乙醇浸泡4小时，置于循环超声提取器中，常温下超声功率600W，提取3次，每次60分钟。合并提取液，浓缩至原体积的1/4，用45％的乙醇沉淀，上清液备用，沉淀干燥至乙醇完全除尽，备用。取上述沉淀用浓度为35％乙醇溶解，加入1/11量的101果汁澄清剂静置4小时，离心分离，上清液与上述得到的上清液合并备用，弃去沉淀。取合并上清液，浓缩后加至预先处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱上，用19倍量的蒸馏水洗至洗脱液近无色，洗去糖类和鞣质部分，洗脱液弃去；然后用9倍量55％的乙醇洗脱，收集洗脱液，收集洗脱液，将洗脱液浓缩成相对密度为1.28(50℃)的浓缩液；(2)将由上述浓缩液和挥发油包合物组成的积雪草有效部位500克与药用辅料甘露醇或氯化钠2000克混合制备成注射用输液制剂5000瓶或水针制剂20000支或粉针剂5000支或冻干粉针剂5000支。
实施例6(1)取干燥积雪草全草24公斤，用挥发油提取器提取挥发油，提取的挥发油用羟丙基-β-环糊精进行包合，得到积雪草包和物；将提取挥发油后的残渣用24倍量、浓度为35％的乙醇浸泡3小时，置于循环超声提取器中，常温下超声功率750W，提取3次，每次70分钟。合并提取液，浓缩至原体积的1/4，用45％的乙醇沉淀，上清液备用，沉淀干燥至乙醇完全除尽，备用。取上述沉淀用浓度为35％乙醇溶解，加入1/10量的101果汁澄清剂静置3小时，离心分离，上清液与上述得到的上清液合并备用，弃去沉淀。取合并上清液，浓缩后加至预先处理好的NKA型大孔吸附树脂柱上，用18倍量的蒸馏水洗至洗脱液近无色，洗去糖类和鞣质部分，洗脱液弃去；然后用10倍量45％的乙醇洗脱，收集洗脱液，收集洗脱液，将洗脱液浓缩成相对密度为1.30(50℃)的浓缩液；(2)将由上述浓缩液和挥发油包合物组成的积雪草有效部位800克与药用辅料葡萄糖或甘露醇3200克混合制备成注射用输液制剂8000瓶或水针制剂32000支或粉针剂8000支或冻干粉针剂8000支。
权利要求
1.一种治疗抑郁症和肿瘤的中药注射制剂，其特征在于该注射制剂是以中药积雪草有效部位与药学上可接受的常规药用辅料按下述方法制备成的输液制剂、水针制剂、粉针剂或冻干粉针剂，其中积雪草有效部位是通过下述方法得到的，(1)取干燥积雪草全草，用挥发油提取器提取挥发油，提取的挥发油用羟丙基-β-环糊精进行包合，得到积雪草包合物；(2)将提取挥发油后的残渣用15-25倍量、浓度为20％-40％的乙醇浸泡2-4小时，置于循环超声提取器中，常温下超声功率400-800W，提取2-4次，每次35-75分钟。合并提取液，浓缩至原体积的1/4-1/3，用30-50％的乙醇沉淀，上清液备用，沉淀干燥至乙醇完全除尽，备用；(3)取上述沉淀用浓度为20％-40％乙醇溶解，加入1/12-1/8量的澄清剂静置2-4小时，离心分离，上清液与上述得到的上清液合并备用，弃去沉淀；(4)取合并上清液，浓缩后加至预先处理好的大孔吸附树脂柱上，用15-20倍量的蒸馏水洗至洗脱液近无色，洗去糖类和鞣质部分，洗脱液弃去；然后用8-12倍量20％-60％的乙醇洗脱，收集洗脱液，收集洗脱液，将洗脱液浓缩成50℃时相对密度为1.25-1.35的浓缩液；(5)将所得到的浓缩液与挥发油包合物混合即得到积雪草有效部位；将积雪草有效部位与药用辅料混合制备成注射用输液制剂、水针制剂、粉针剂或冻干粉针剂。
2.根据权利要求1所述的中药注射制剂，其特征在于其中制备输液剂和水针剂的药用辅料为氯化钠或葡萄糖。
3.根据权利要求1所述的中药注射制剂，其特征在于其中制备粉针剂和冻干粉针剂的药用辅料为甘露醇或葡聚糖或半乳糖。
4.根据权利要求1所述的中药注射制剂，其特征在于其中所述的澄清剂为101果汁澄清剂或甲壳素类吸附澄清剂。
5.根据权利要求1所述的中药注射制剂，其特征在于其中所述的大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂。
6.根据权利要求5所述的中药注射制剂，其特征在于所述的大孔吸附树脂为D101型、AB-8型、或NKA型大孔吸附树脂。
全文摘要
本发明公开了一种治疗抑郁症和肿瘤的中药制剂及其制备方法，其特征在于以从中药积雪草提取纯化的有效部位为原料，与药用辅料混合制备成注射用输液制剂、水针制剂、粉针剂以及冻干粉针剂，药理实验表明，本发明的积雪草注射用中药制剂具有更广泛、更强的药理活性。
文档编号A61P35/00GK1583127SQ200410045598
公开日2005年2月23日 申请日期2004年6月11日 优先权日2004年6月11日
发明者张正生 申请人:张正生