治疗慢性阻塞性肺气肿的中药组合物及其制备方法

专利名称：治疗慢性阻塞性肺气肿的中药组合物及其制备方法
技术领域：
本发明属于治疗呼吸系统疾病的药物组合物及其制备方法，尤其是含治疗慢性阻塞性肺气肿的中药提取物的药物组合物及其制备方法。
背景技术：
呼吸系统疾病的常见症状有咳嗽、多痰，常伴有炎症。慢性阻塞性肺气肿是一种严重的呼吸系统常见病，其症状主要为咳、痰、喘、哮鸣音、气短，患病人数多，由于其缓慢进行发展，严重影响患者的劳动能力和生活质量。慢性阻塞性肺气肿是肺脏终末支气管远端部分的膨胀及过度充气，导致肺组织弹力减弱和容积增大的总称。其临床表现为逐渐加重的呼吸困难，活动后气短，少气不足以息，属中医学“虚喘”的范围。目前西医尚无好的治疗方法，市售的治疗慢性阻塞性肺气肿中成药，主要以补肾纳气、止咳化痰为主。补肾纳气为肾虚不能纳气而出现气喘等症时，通过补肾治疗气喘。

发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，研制一种治疗呼吸系统疾病的纯中药的药物组合物，具有消炎、止咳、化痰、平喘的疗效。尤其是对肺肾二虚的慢性阻塞性肺气肿疾病，不但应具有补肺益肾功能，即补肺、补肾功能，而且应具有活血化瘀作用，以便通过攻补兼施，标本兼治，达到优良的效果。
本发明要解决的技术问题还包括研究一种制备上述治疗呼吸系统疾病的中药组合物的方法，将其制成剂量小、使用方便的现代制剂，该方法重现性好，可工业化生产。
为解决上述问题，本发明提供如下技术解决方案。
一种治疗呼吸系统疾病的药物组合物，其特征在于主要是由下列重量份的原料药制成黄芪1-10份、巴戟天1-6份、桃仁1-4.5份、水蛭1-5份。其中原料药较好的用量为黄芪3-8份、巴戟天2-5份、桃仁2-4份、水蛭1-4份。其中原料药较好的用量为黄芪4-6份、巴戟天3-4份、桃仁3-4份、水蛭2-3份。
前述药物组合物的制备方法，包括下列步骤1)称取各原料药黄芪、巴戟天、桃仁、水蛭，备用；2)取水蛭粉碎成粗粉，用乙醇渗漉，将乙醇渗漉过的水蛭药渣留待处理，浓缩乙醇渗漉液，得浸膏A，备用；3)取桃仁用乙醇回流提取，浓缩乙醇提取液，得浸膏B，备用；4)取黄芪、巴戟天与2)的水蛭药渣，用水提取，向水提液中加乙醇，使乙醇含量为50％～80％，除去乙醇后，得黄芪、巴戟天与水蛭药渣的水提物的浸膏C，备用；5)将上述浸膏A、浸膏B及浸膏C合并，干燥，制得本发明药物组合物的活性组分。
前述药物组合物，其中原料药还有淫羊藿或补骨脂1-6份、矮地茶1-10份。较好的药物组合物中各组分的用量为黄芪3-8份、巴戟天2-5份、桃仁2-4份、水蛭1-4份、淫羊藿或补骨脂2-5份、矮地茶2-8份。较好药物组合物中各组分的用量为黄芪4-6份、巴戟天3-4份、桃仁3-4份、水蛭2-3份、淫羊藿或补骨脂3-4份、矮地茶3-6份。
较好的药物组合物的制备方法，包括下列步骤1)称取各原料药黄芪、巴戟天、桃仁、水蛭、淫羊藿或补骨脂、矮地茶，备用；2)取水蛭粉碎成粗粉，用乙醇渗漉，将乙醇渗漉过的水蛭药渣留待处理，浓缩乙醇渗漉液，得浸膏A，备用；3)取桃仁和矮地茶用乙醇回流提取，浓缩乙醇提取液，得浸膏B，备用；4)取黄芪、巴戟天与2)的水蛭药渣以及淫羊藿或补骨脂，用水提取，向水提液中加乙醇，使乙醇含量为50％～80％，除去乙醇后，得水提物的浸膏C，备用；5)将上述浸膏A、浸膏B及浸膏C合并，干燥，制得本发明药物组合物的活性组分。
前述药物组合物，其中原料药还有仙灵脾或丹参1-8份。更为合适的药物组合物的制备方法，包括下列步骤1)称取各原料药黄芪、巴戟天、桃仁、水蛭、淫羊藿或补骨脂、矮地茶、仙灵脾或丹参，备用；2)仙灵脾或丹参用90％乙醇4～10倍量回流提取2～4次，每次1～3小时，药渣留待处理，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，得浸膏D，备用；3)取水蛭粉碎成粗粉，用50％～80％乙醇渗漉，将乙醇渗漉过的水蛭药渣留待处理，减压回收乙醇渗漉液，得浸膏A，备用；4)取桃仁、矮地茶，用50％～80％乙醇5～10倍量回流提取2～4次，每次1～3小时，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，得浸膏B，备用；5)取黄芪、巴戟天、淫羊藿或补骨脂、3)的水蛭药渣、2)的仙灵脾或丹参药渣加水煎煮1～3次，每次加水7～12倍，向水提取液中加乙醇使乙醇含量达50％～80％，沉淀后过滤，浓缩乙醇液，得浸膏C，备用；6)将上述浸膏A、浸膏B、浸膏C与浸膏D合并，干燥，与药学上可接受辅料混合。
本发明治疗呼吸系统疾病的纯中药的药物组合物，通过补肺益肾与活血化瘀，攻补兼施，达到消炎、止咳、化痰、平喘的优良效果。尤其是对肺肾二虚的慢性阻塞性肺气肿疾病，不但具有补肺益肾功能即补肺、补肾功能，而且具有活血化瘀作用，通过攻补兼施，标本兼治，达到优良的治疗效果。本发明制备上述治疗呼吸系统疾病的中药组合物的方法，将其制成剂量小、使用方便的现代制剂，该方法重现性好，可工业化生产。
呼吸系统疾病的常见症状有咳嗽、多痰，常伴有炎症。慢性阻塞性肺气肿是一种严重的呼吸系统常见病，该病为久病，在整体上有肺、脾、肾功能不足，为引起动则气短的重要原因，实属肺通气功能不足，肺循环功能障碍所导致，治疗当益气补肾、活血化瘀。本发明药物组合物中黄芪补气，巴戟天补肾，桃仁和水蛭为活血化瘀药。本发明药物组合物中，可以再加入止咳化痰平喘的矮地茶，与巴戟天同为补肾的淫羊藿或补骨脂；或者再加入活血化瘀的丹参或仙灵脾。本发明组方既可益气补肾，又兼活血化瘀，临床疗效显著提高。
本发明药物组合物的部分药理学实验数据如下。
一、本发明药物组合物抑制小白鼠耳廓肿胀试验实验结果(见表1)采用小白鼠耳廓二甲苯致炎法，给小白鼠灌胃本发明药物组合物26.4、13.2和6.6g生药/kg，结果表明本发明药物组合物高、中组动物的耳廓肿胀度与模型对照组比较，均有显著降低(P＜0.05)；肿胀抑制百分率在给药后均能达到59.0％以上。提示本品有明显的消炎作用。
实验动物普通级KM种小白鼠，体重18～22g，♀♂兼有，购于江宁青龙山动物养殖场，合格证号SCXK(苏)2002-0018。
实验药品本发明药物组合物(干浸膏粉)6.72g生药/g，批号020305，江苏省中医药研究院药物制剂研究室提供；乙酰水杨酸肠溶片(阿司匹林)25mg/片，批号20010702，南京第二制药厂。
实验方法取小鼠50只，称重，随机分为5组，每组10只，♀♂兼有，分别为模型组(蒸馏水20ml/kg)、阿司匹林对照组(0.2g/kg)和本发明药物组合物高、中、低剂量组(26.4、13.2和6.6g生药/kg)。将供试药品配成不同浓度后等容积灌胃给药，给药量均为20ml/kg，给药后1h在小白鼠右耳正反两面按组分别涂以二甲苯0.02ml/只，左耳作对照，15min后处死动物，将双耳同部位等面积剪下(打孔法)，分别称重，以左右耳片重量差为肿胀程度，计算各组肿胀度，按下式求出肿胀抑制率(％)。各给药组与模型对照组进行t-检验统计处理。 表1、本发明药物组合物对二甲苯致小白鼠耳廓肿的影响(x±s)组别 剂量 动物数右耳重 左耳重 肿胀度 抑制率(g/kg) (只) (mg) (mg) (mg) (％)模型组25 1043.6±6.524.4±2.419.2±6.3 /阿司匹林组0.2 1028.0±4.524.4±2.63.6±3.5***81.3高剂量组 26.4 1030.3±5.125.0±2.95.5±4.8***71.4中剂量组 13.2 1031.7±6.925.0±2.96.7±5.4***64.8低剂量组 6.6 1031.4±4.923.5±4.17.9±4.9***59.0注与模型对照组比较，*p＜0.001。
实验方法参考文献卫生部药政管理局.中药新药研究指南(药学 药理学 毒理学)176～177李仪奎等.中药药理实验方法学(第一版).上海上海科学技术出版社1991299～300。
二、本发明药物组合物抑制大白鼠肉芽肿试验实验结果(见表2)给大白鼠灌胃本发明药物组合物26.4、13.2和6.6g生药/kg后，采用大白鼠慢性炎症琼脂肉芽肿法进行试验。结果表明给药组动物的肉芽肿湿重与模型对照组相比，均有显著降低(P＜0.05～0.01)，抑制率大于25.4％。提示灌胃一定剂量的本发明药物组合物对大白鼠慢性炎症性琼脂肉芽肿具有明显的抗炎作用。
实验动物普通级SD大白鼠，♂，体重140～170g，购于江宁青龙山动物养殖场，合格证号SCXK(苏)2002-0018。
实验药品本发明药物组合物(干浸膏粉)含生药6.72g生药/g，批号020305，江苏省中医药研究院制剂研究室提供；乙酰水杨酸肠溶片(阿司匹林)25mg/片，批号20010702，南京第二制药厂；琼脂批号980424，中国药品生物制品检定所。
实验方法大白鼠肉芽肿模型的制备雄性大白鼠背部中线处取2.0×2.0cm面积脱毛，消毒，皮下注射2％琼脂(55℃水浴保温)2ml，注射后立即凸起球状包块即成。隔日取50只上述肉芽肿模型大白鼠，♂，随机分5组，每组10只，分别为模型对照组(ig蒸馏水10ml/kg)、阳性药阿司匹林组(0.1g/kg)、本发明药物组合物高、中、低三个剂量组(13.2、6.6和3.3g生药/kg)。将供试药品配成相应浓度后，各组动物灌胃(ig)给药，给药量均为10ml/kg。每日ig 1次，连续给药7天，每日观察动物活动状况和肉芽肿变化，末次药后1小时脱椎处死大白鼠，剪开肉芽部位皮肤，剥离肉芽肿琼脂块，称取湿重，各给药组与模型对照组进行组间t-检验统计处理。肉芽肿抑制率(％)按下例公式计算 表2、本发明药物组合物对大白鼠慢性炎症琼脂肉芽肿的影响(x±s)组别 剂量动物数肉芽肿湿重 抑制率(g/Kg) (只) (g) (％)模型对照组10 103.19±0.80 /阿司匹林组0.1 102.40±0.85*34.6高剂量组 13.2102.23±0.58**58.5中剂量组 12.5102.31±0.63*35.0低剂量组 6.25102.37±0.70*25.4注与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
实验方法参考文献卫生部药政管理局.中药新药研究指南(药学药理学毒理学)94～95，203～204；李仪奎等.中药药理实验方法学(第一版).上海上海科学技术出版社1991303～305；陈奇等.中药药理研究方法学.北京人民卫生出版社，1993366～369。
三、本发明药物组合物小鼠止咳试验(氨水喷雾法)实验结果(见表3)给小鼠灌胃本发明药物组合物26.4、13.2和6.6g生药/kg的后，采用浓氨水喷雾法进行止咳试验，结果表明本发明药物组合物高、中量组与模型对照组相比，均能延长咳嗽潜伏期(P＜0.05～0.001)；2分钟内咳嗽次数也明显减少(P＜0.01～0.001)。结果提示本发明药物组合物口服给药能明显延长咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数，对小鼠具有明显的的止咳作用。
实验动物普通级KM种小白鼠，体重18～22g，♀♂兼有，购于江宁青龙山动物养殖场，合格证号SCXK(苏)2002-0018。
实验药品、器材本发明药物组合物(干浸膏粉)含生药6.72g/g，批号020305，江苏省中医药研究院制剂研究室提供；枸橼酸喷托维林片(咳必清)每片含枸橼酸喷托维林25mg，批号020118-2，苏州医药集团有限公司；1.4S-888型超声波雾化器中外合资道芬电子有限公司生产。
实验方法取小鼠50只，称重，随机分为5组，每组10只，♀♂兼有，分别为模型组(蒸馏水20ml/kg)、阳性药咳必清对照组(0.05g/kg)和本发明药物组合物高、中、低剂量组(26.4、13.2和6.6g生药/kg)。将供试药品配成相应浓度后，各组动物灌胃(ig)给药，给药量均为20ml/kg，给药1h后各鼠分别置于有盖活动箱内，用超声波雾化器以相同强度将浓氨水雾化后喷入活动箱内，喷雾15秒后，立即观察动物咳嗽潜伏期(在吸入氨水气雾后至发生咳嗽所需时间为潜伏期)，并记灵2分钟内的咳嗽次数，各给药组与模型对照组进行组间t-检验统计学处理。
表3、本发明药物组合物对小鼠止咳作用的影响(x±s，n＝10)组别 剂量(g/Kg)咳嗽潜伏期(S) 咳嗽次数/2分钟模型对照组 2022.0±9.4 36.7±10.9咳必清组 0.05 40.8±20.3*13.0±7.4***高剂量组 26.4 52.4±20.7***15.5±11.3***中剂量组 13.2 48.6±32.8*21.7±11.5**低剂量组 6.6 30.7±13.5 25.9±17.3注与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
实验方法参考文献卫生部药政管理局.中药新药研究指南(药学 药理学 毒理学)73；李仪奎等.中药药理实验方法学(第一版).上海上海科学技术出版社1991424；3陈奇等.中药药理研究方法学.北京人民卫生出版社，1993636。
四、本发明药物组合物豚鼠止咳试验(枸橼酸喷雾法)实验结果(见表4)给豚鼠灌胃本发明药物组合物13.2、6.6和3.3g生药/kg后，采用枸橼酸喷雾法进行止咳试验，结果表明5分钟内咳嗽次数明显减少(P＜0.001)；止咳率达220％以上。提示本发明药物组合物具有明显的的镇咳作用。
实验动物豚鼠，♀♂兼有，体重220～250g，购于江宁青龙山动物养殖场，合格证号SCXK(苏)2002-004。
实验药品、器材本发明药物组合物(干浸膏粉)含生药6.72g/g，批号020305，江苏省中医药研究院制剂研究室提供；枸橼酸喷托维林片(咳必清)每片含枸橼酸喷托维林25mg，批号020118-2，苏州医药集团有限公司；1.4S-888型超声波雾化器中外合资道芬电子有限公司。
实验方法选取体重220～250g豚鼠，♀♂兼有，随机分5组，每组10只，模型对照组灌胃(蒸馏水10ml/kg)、阳性药咳必清对照组(0.025/kg)、本发明药物组合物高、中、低三个剂量组分别灌胃(13.2、6.6和3.3g生药/kg)。将供试药品配成相应浓度后，各组动物灌胃(ig)给药，给药量为10ml/kg。给药1h后，分别置于有盖活动箱内，用超声波雾化器以相同强度雾化喷入18％枸橼酸气雾，喷雾15秒后，立即观察5分钟动物咳嗽次数，各给药组与模型对照组进行组间t-检验统计处理。按下公试计算止咳率(％) 表4、本发明药物组合物对小鼠止咳作用的影响(x±s，n＝10)组别 剂量(g/Kg) 咳嗽次数/5分钟 相对止咳率(％)模型对照组10 31.1±11.1 /咳必清组 0.057.4±2.3***420高剂量组 16.411.1±5.6***280中剂量组 13.212.7±6.3***245低剂量组 6.6 14.1±7.4***220注与模型对照组比较，***P＜0.001。
实验方法参考文献卫生部药政管理局.中药新药研究指南(药学 药理学 毒理学)73；李仪奎等.中药药理实验方法学(第一版).上海上海科学技术出版社1991426；陈奇等.中药药理研究方法学.北京人民卫生出版社，1993五、本发明药物组合物小鼠祛痰试验(酚红祛痰法)实验结果(见表5)给小鼠灌胃本发明药物组合物26.4、13.2和6.6g生药/kg的后，采用酚红祛痰法，用分光光度计测定酚红排泌量(OD值)，结果表明本发明药物组合物各给药组与模型对照组相比，能明显增加呼吸道粘膜排出酚红量(P＜0.001)；气管排痰增加率达188％以上。结果提示本发明药物组合物具有显著的祛痰作用。
实验动物普通级KM种小白鼠，体重23～28g，♀♂兼有，购于江宁青龙山动物养殖场，合格证号SCXK(苏)2002-0018。
实验药品本发明药物组合物(干浸膏粉)含生药6.72g/g，批号020305，江苏省中医药研究院制剂室提供；复方甘草合剂批号20010325，南京第二制药厂。
实验方法取小鼠50只，禁食不禁水16h以上称重，随机分为5组，每组10只，♀♂兼有，分别为模型组(蒸馏水20ml/kg)、阳性药甘草合剂对照组(20ml/kg)和本发明药物组合物高、中、低剂量组(26.4、13.2和6.6g生药/kg)。给药量均为20ml/kg，灌胃给药后0.5h腹腔注射2.5％酚红生理盐水0.5ml，注射后0.5h脱颈处死，仰卧固定于手术板上，剪开颈正中皮肤，分离气管，于喉头下将7号针针头小心插入气管内约0.3cm，用丝线结扎固定后，用1ml注射器吸取5％NaHCO3溶液1ml，通过针头来回灌洗呼吸道3次(每次不作停留)，将灌洗液注入一试管中，重新吸取5％NaHCO3溶液1ml，如上再灌洗2次，共用洗液3ml，抽洗9次，将3次的洗液合并置试管中，放置一定时间用，使杂质沉淀，取上清透明红色液体用545nm752型紫外可见分光光度计比色测OD值，各给药组与模型对照组进行t-检验统计处理。气管排痰增加率按下式计算 表5、本发明药物组合物对小鼠祛痰作用的影响(x±s，n＝10)组别 剂量(g/Kg)气管酚红排泌量(OD) 排痰增加率(％)模型对照组200.26±0.04 /甘草合剂组200.87±0.08***335高剂量组 26.4 0.66±0.23***254中剂量组 13.2 0.64±0.17***246低剂量组 6.6 0.49±0.18***188注与模型对照组比较，***P＜0.001。
实验方法参考文献卫生部药政管理局.中药新药研究指南(药学 药理学 毒理学)73；李仪奎等.中药药理实验方法学(第一版).上海上海科学技术出版社1991430；陈奇等.中药药理研究方法学.北京人民卫生出版社，1993642。
六、本发明药物组合物豚鼠平喘试验实验结果(见表6)给豚鼠灌胃本发明药物组合物13.2、6.6和3.3g生药/kg的后，采用药物引喘法，本发明药物组合物引喘潜伏期与模型对照组相比均有显著延长(P＜0.01)；给药前后自身比较(P＜0.05)；给药后哮喘抽动的动物数也明显减少。结果表明本发明药物组合物口服给药能明显延长引喘潜伏期，减少哮喘抽动的动物数，对豚鼠具有明显平喘作用。
实验动物豚鼠，♀♂兼有，体重230～260g，购于江宁青龙山动物养殖场，合格证号SCXK(苏)2002-004。
实验药品、器材本发明药物组合物(干浸膏粉)6.72g生药/g，批号020305，江苏省中医药研究院制剂研究室提供；氨茶碱注射液每2ml内含氨茶碱0.25g，批号010710，常州兰陵制药有限公司；4磷酸组胺注射液每1ml内含1mg，批号010311，上海第十制药厂；氯化乙酰胆碱100mg/支，进口分装；致喘剂5mg磷酸组胺加1g氯化乙酰胆碱以蒸馏水配成100ml的混合液(临用时配制)；S-888型超声波雾化器中外合资道芬电子有限公司。
实验方法预试验选取体重230～260g豚鼠，分别置入有盖的动物活动箱内，用超声波雾化器以相同强度喷入致喘剂(含1mg/ml氯化乙酰胆碱和0.05mg/ml磷酸组胺)准确喷雾15秒钟，动物在吸入以上药液后经过一定的潜伏期，产生哮喘反应，60秒钟内产生哮喘反应的为敏感动物，超过60秒钟者为不敏感者，不预选用。“哮喘”反应判断以喘吸性抽搐为标准。隔日取预选过“哮喘”豚鼠，♀♂兼有，随机分5组，每组10只，模型对照组ig蒸馏水10ml/kg、阳性药组腹腔注射氨茶碱0.125g/kg(1ml/kg)、本发明药物组合物高、中、低三个剂量组分别灌胃13.2、6.6和3.3g生药/kg，给药量均为10ml/kg。给药30分钟后，分别放入上述喷雾装置内按预选时的同样条件分别喷入致喘剂。记录喷雾开始至症状出现的时间(以喘吸性抽搐为准)作为潜伏时间，观察3分钟(180秒)，无喘吸性抽搐者引喘潜伏期以180秒计算。各给药组与模型对照组进行组间t-检验统计处理。
表6本发明药物组合物对豚鼠平喘作用的影响(x±s，n＝10)组别剂量 给药前 给药后(g/Kg)引喘潜伏期 抽动 引喘潜伏期 抽动动物数(s) 动物数 (s) (只)模型对照组 10.0 40.8±8.9 10/10 41.5±9.3 10/10氨茶碱组0.2 43.7±11.5 10/10 115.8±49.5***▲▲ 0/10高剂量组13.2 41.4±12.5 10/10 63.7±20.3**▲ 2/10中剂量组6.6 43.8±15.5 10/10 60.2±16.5**▲ 4/10低剂量组3.3 43.0±13.6 10/10 57.3±11.5**▲ 4/10注与模型对照组比较，**P＜0.01，***P＜0.001；给药前后自身比较，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。
实验方法参考文献卫生部药政管理局.中药新药研究指南(药学 药理学 毒理学)73；李仪奎等.中药药理实验方法学(第一版).上海上海科学技术出版社1991443～444；陈奇等.中药药理研究方法学.北京人民卫生出版社，1993649～651。
七、本发明药物组合物小白鼠急性毒性试验报告实验结果本发明药物组合物口服给药未见明显的毒性反应，无法按常规方法测定半数致死量(LD50)。小白鼠一日灌胃给药的最大给药量为345.6g生药/kg，此剂量为本发明药物组合物拟临床人用量的576倍，未见明显毒性反应。在第一次给药后0.5～1小时内，小白鼠活动减少，但轻敲笼具有抬头反应，4h后基本恢复正常活动，第二次给药后多数动物伏下，活动减少，1h后多数动物开始活动，2h后活动正常，未见其它不良反应，也无动物死亡。动物的活动减少主要可能是给药量过大引起的不适。一周后复称体重为24.9±2.0g。处死解剖动物后，其主要脏器均未见明显的异常病变。小白鼠灌胃给药的最大给药量为345.6g生药/kg，此剂量为本发明药物组合物拟临床人用量的576倍(正常成人平均体重按60kg计算，每日服用36g生药)。
实验动物清洁级KM种小白鼠，体重18～20g，♀♂各半，购于中科院上海实验动物中心，合格号中科(沪)动管第99004号；实验药品本发明药物组合物(干粉)，含生药材6.72g/g，批号020305，由本院中药制剂室提供。
实验方法预试验取禁食16h以上的小白鼠♀♂各5只，用含生药4.32g/ml本发明药物组合物(此浓度为12号灌胃器能抽吸的最大浓度)供试液按0.4ml/10g的给药量(最大灌胃量)，6h内灌胃给药2次，总给药剂量为345.6g生药/kg，连续观察7天，结果无动物死亡，无法按常规测定LD50，故进行最大给药量测定。
最大给药量测定试验选取健康小白鼠20只，♀♂各半，体重19.6±1.0g，禁食(不禁水)约16h后用含生药量4.32g/ml的本发明药物组合物供试液按0.4ml/10g的最大给药量灌胃给药，6h内给药2次，总给药剂量为345.6g生药/kg，给药后小白鼠正常饲养(室温25±0.5℃；相对湿度55～60％)，观察动物的活动、皮毛、饮食、粪便有无异常改变，并观察有无中毒症状及死亡(若有死亡，则进行解剖及病理学检验)，连续观察一周。一周后复称体重，处死动物进行解剖，观察心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、脑、舌、胃、肠、膀胱、性腺(子宫、卵巢或睾丸和附睾)等主要脏器有无异常变化。
实验方法参考文献卫生部药政管理局.中药新药研究指南(药学 药理学 毒理学)203～204八、本发明药物组合物治疗慢性阻塞性肺气肿61例临床实验本发明药物组合物治疗慢性阻塞性肺气肿肺肾气虚症30对病人(治疗组30例，对照组31例)疗程30天，结果治疗组显控率63.3％，总有效率93.3％，疗效明显优于对照组，经统计学处理有非常显著性差异(P＜0.01)。对咳、痰、喘、气短等项症状的疗效，治疗组咳嗽、咯痰、气短效果较好，均优于对照组，平喘作用次之，但也比对照组为优。统计学处理有显著性差异(P＜0.01)。体征前后变化治疗组舌苔白腻大部分改善，脉象弦紧治后部分转为平脉，痰液白粘，治后大多转为稀或无痰。实验室检查血、尿常规、肝肾功能检查，除少部分病人中性粒细胞增高治疗后恢复正常余均无明显变化，肺功能检测部分病人治后有改善，心电图检查治后无明显改变。
病例选择标准中医辨证分型及其依据按卫生部制定的《中药新药治疗慢性支气管炎临床研究指导原则》(2002年五月版)慢性肺源性心脏病(1993年版)及1973年阻塞性肺气肿临床诊断标准(试行)肺肾气虚证症见咳嗽、气喘、气短、活动后加重或少量泡沫痰，腰酸腿软、乏力或畏寒肢冷，舌质淡，苔薄白，脉沉细。
西医诊断标准阻塞性肺气肿临床诊断可参考病史，体征，X线检查和肺功能检查等综合判断，初步分为轻、中、重三度。
表7、诊断标准分度项目 轻度 中度 重度1.慢性支气管炎等病史 有有 有病 2.气短 劳动时轻度平静时轻度 平静时明显史劳动或稍活动后明显1.胸廓形状 肋间略增宽 肋间隙增宽 典型桶状2.叩诊反响 略增强 增强 明显增强或空盒音体 3.呼吸音 略减弱 减弱 明显减弱4.心尖搏动(位置) 正常内移 移到剑下5.心界正常略缩小 明显缩小或不易叩征 6.心音(心尖区) 无改变 减弱 明显减弱及遥远7.肺肝界 第六肋缘下 第七肋缘下 第八肋缘下8.肺底活动度 4.0CM以上3.1-4.0cM3.0CM以下1.横膈运动受限 2.0-1.5CM横膈1.4-0.6cM0.5CM-不动横膈低位变平 位于11后肋或肋间 11后肋或肋间 12后肋以下X 2.肺血管纹理 变化不显著 外围分支纤细 纤细稀疏3.肺大泡 偶见 可有较常见4.肺野透亮读增强 明显 中等轻度或无变化线深呼吸时变化5.心影的改变，心胸比例 0.45-0.4 0.39-0.350.34以下1.最大通气量 61-80％ 41-60％ 40％以下肺(占预计值百分比)功 2.第一秒时间肺活量 60-50％50-40％ 40％以下能(占肺活量百分比)3.残气量/肺总量比值 40-50％50-60％ 60％以上4.最大呼气流量-容积曲线(MEUF)治疗前后比较肺气肿的分期第一期，无症状期，患者无自觉症状，体格检查、胸部X线片和肺通气功能测定均无异常发现，仅在病理检查时发现有肺气肿，因此属于亚临床阶段。
第二期，即通气障碍期患者有发作性或持续性呼吸困难。慢性咳嗽，疲乏无力，体格检查和胸部X线检查有肺气肿表现，肺功能测定显示通气障碍，残气量增加。当出现临床症状及体征可做出肺气肿诊断的虽属于早期肺气肿，但已进入第二期。
第三期，低血氧症期除上述症状外，还可以出现食欲不振，体重减轻，虚弱，紫绀，休息或运动时氧分压降低。
第四期，二氧化碳储留期出现嗜睡，意识障碍。二氧化碳分压升高。
第五期，肺源性心脏病期分为代偿期和失代偿期，后期可出现心力衰竭。
病情程度的划分咳嗽轻度(+)白天间断咳嗽，不影响正常生活和工作。
中度(++)症状介于轻度(+)及重度(+++)之间。
重度(+++)昼夜咳嗽频繁或阵咳，影响休息和睡眠。
咯痰轻(+)昼夜咯痰10-50ml，或夜间及清晨咯痰5-25ml。
中(++)昼夜咯痰51-l00ml，或夜间及清晨咯痰26-50ml。
重(+++)昼夜咯痰100ml以上，或夜间及清晨咯痰50ml以上。
喘息轻度(+)喘息偶有发作，程度轻，不影响睡眠活动。
中度(++)病情介于轻度(+)及重度(+++)之间。
重度(+++)喘息明显，不能平卧，影响睡眠及活动。
哮鸣音轻(+)偶闻，或在咳嗽，深呼吸后出现。
中(++)散在。
重(+++)满布。
气短(呼吸功能不全临床标准)
I级(轻度)中度劳动时即感呼吸困难，轻度发绀。
II级(中度)轻度活动时即感呼吸困难，中度发绀。
III级(重度)静息时即感呼吸困难，重度发绀。
表8、脉血液气体分级标准项目 轻度 中度 重度PaO2＞50MMHG 30-50MMHG ＜30MMHGSaO2＞80％60-80％＜60％PaCO2＜50MMHG 50-70MMHG ＞70MMHG临床病情程度判断治疗时咳、痰、喘、哮鸣音、气短五项中，任何一项够重度者为重度；够中度者为中度；四项中均不够重度和中度者为轻度。
观察指标安全性观测，治疗开始时及疗程结束时各查一次。一般体检项目体温、呼吸、心率、血压等。血、尿、便常规化验。心电图、肝、肾功能检查。
疗效性观察中医症状(包括咳、痰、喘、哮鸣、气短)体征(心肺体征、肺部罗音和舌、脉观察)；肺功能(PEF)；胸部X线检查；痰培养与痰细胞学检查；动脉血气分析；血液流变学检查；超氧化物歧化酶检查(SOD)；甲皱微循环检查。
临床试验采用按单盲随机对照的方法，观察治疗组、对照组各30例按1∶1的比例共观察60例。全部病例选择门诊和住院病人，门诊病人严格控制可变因素。
试验用药治疗组口服本发明药物组合物，每次四粒，一日三次，(由江苏省中医研究院药理研究室提供)，对照组口服肺气肿片(含化学药克喘素，镇江中药厂生产)，每次四粒，一日三次，均三十天为一疗程。服药期间不服其他抗菌素及镇咳去痰平喘药。
疗效判断标准及其依据(按中药新药肺气虚症的临床研究指导原则2002年版----试行)临床痊愈肺气虚的临床症状、体征消失或基本消失，症候积分减少＞＝95％显效肺气虚的临床症状、体征明显改善，症候积分减少＞＝70％有效肺气虚的临床症状、体征均有好转，症候积分减少＞＝30％无效肺气虚的临床症状、体征无明显改善，甚或加重，症候积分减少不足30％注症候积分按尼莫地平法。
单项症状疗效判断标准(按中药新药慢性支气管炎的临床研究指导原则2002年版----试行)临床控制咳、痰、喘、气短症状基本消失，肺部哮鸣音轻度者。
显效咳、痰、喘、气短症状明显好转(+++——+)，肺部哮鸣音减轻。
有效咳、痰、喘、气短症状好转(+++——++，或+++——+)，肺部哮鸣音减轻。
无效咳、痰、喘、气短症状无改变，或减轻不明显，以及症状及哮鸣音加重者。
治疗结果两组病例综合疗效本发明药物组合物与肺气肿片，对对咳、痰、喘、气短综合疗效分临控率、显控率、总有效率、疗效平均等级经秩和检验有显著性差异(见表9)表9、两组病例综合疗效分析组别 例数 临控 显效 好转 无效 显控率％ 有效率％ 疗效平均等级 秩和检验Uc P治疗组30 7 12 9 2 63.3 93.3 2.83.15＜0.05对照组31 3 3 19 6 19.4 80.6 2.09两组疗效比较治疗组疗效优于对照组注无效编一级，好转编二级，显效编三级，临控编四级，下同。
单项症状疗效(见表10)表10、两组病人单项症状疗效分析症状 组别例数 临控 显效 好转 无效 显控率％ 有效率％ 疗效平均等级秩和检验Uc P咳嗽 治疗组 2813 6 7 2 67.8 92.8 3.072.68 ＜0.05对照组 286 2 146 28.6 78.6 2.28咯痰 治疗组 2811 9 6 2 71.4 92.9 3.043.38 ＜0.05对照组 264 2 101023.1 61.5 2.0气喘 治疗组 236 4 112 43.5 91.3 2.614.94 ＜0.05对照组 135 0 0 8 38.5 38.5 2.15气短 治疗组 307 10 112 56.5 93.3 2.732.79 ＜0.05对照组 314 2 187 19.4 77.4 2.09治疗组镇咳、去痰、平喘、对气短的改善均优于对照组另外，有数据表明疗效以年青组疗效优于老年组；病程以2-5年以内者疗效为最优。
具体实施例方式
本发明所用药材均为市售。黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao，或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。巴戟天为茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How的干燥根。淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicomum Maxim.、箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb.Et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim.、巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying、或朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥地上部分。丹参为唇形科植物丹参Salviamiltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。桃仁为蔷薇科植物桃Prunus persica(L.)Batsch或山桃Prunus davidiana(Carr.)Franch的干燥成熟种子。水蛭为水蛭科动物蚂蟥Whitmania pigra、水蛭Hirudo nipponica Whitman或柳叶蚂蟥Whitmania acranulata Whitman的干燥体。矮地茶为紫金牛科植物紫金牛Ardisiajaponica(Thunb.)BL.的干燥全株。
本发明的药用组合物制剂可以制成各种制剂形式，包括片剂、胶囊剂、混悬剂、冲剂。优选的是片剂、胶囊剂。其中填充剂可选用乳糖、微晶纤维素、糊精、淀粉、磷酸钙等；崩解剂可选用羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠等；亦可选加粘合剂、润湿剂及润滑剂。
实施例1配方黄芪10克 巴戟天6克 淫羊藿6克 丹参8克 桃仁4.5克 水蛭5克 矮地茶10克。按配方称取原料药，备用。
1)将丹参用90％乙醇10倍量回流提取4次，每次3小时，合并乙醇提取液，减压回收乙醇得丹参醇提浸膏，备用；2)取水蛭粉碎成粗粉，用80％乙醇渗漉，减压回收乙醇渗漉液，得水蛭渗漉膏，备用；3)取桃仁、矮地茶，分别用80％乙醇8倍量回流提取4次，每次4小时，合并所述桃仁乙醇提取液和所述矮地茶乙醇提取液，减压回收乙醇，得桃仁等醇提浸膏，备用；4)取黄芪、巴戟天、淫羊藿与所述水蛭药渣、所述丹参药渣加水煎煮4次，每次加水12倍，加乙醇使乙醇含量为80％，沉淀后过滤，回收乙醇，得黄芪等水提浸膏，备用；5)合并所述丹参醇提浸膏、所述水蛭渗漉浸膏、所述桃仁等醇提取浸膏及黄芪等水提浸膏，喷雾干燥，加入常规辅料干法制粒，装胶囊中，每粒重0.35克。每日三次，每次四粒。
实施例2配方黄芪1克 巴戟天1克 淫羊藿1克 丹参1克 桃仁1克 水蛭1克 矮地茶1克。按配方称取原料药，备用。
1)将丹参用90％乙醇4倍量回流提取2次，每次0.5小时，合并乙醇提取液，减压回收乙醇得丹参醇提浸膏，备用；2)取水蛭粉碎成粗粉，用50％乙醇渗漉，减压回收乙醇渗漉液，得水蛭渗漉膏，备用；3)取桃仁、矮地茶，分别用50％乙醇8倍量回流提取2次，每次1小时，合并所述桃仁乙醇提取液和所述矮地茶乙醇提取液，减压回收乙醇，得桃仁等醇提浸膏，备用；4)取黄芪、巴戟天、淫羊藿与所述水蛭药渣、所述丹参药渣加水煎煮2次，每次加水6倍，加乙醇使乙醇含量为50％，沉淀后过滤，回收乙醇，得黄芪等水提浸膏，备用；5)合并所述丹参醇提浸膏、所述水蛭渗漉浸膏、所述桃仁等醇提取浸膏及黄芪等水提浸膏，喷雾干燥，干法制粒，装胶囊中，每粒重0.35克。每日三次，每次四粒。
实施例3配方黄芪8克 巴戟天5克 淫羊藿5克 丹参7克 桃仁4克 水蛭4克 矮地茶8克。按配方称取原料药，备用。
1)丹参用90％乙醇10倍量回流提取4次，每次3小时，合并乙醇提取液，减压回收乙醇得丹参醇提浸膏，备用；2)取水蛭粉碎成粗粉，用80％乙醇渗漉，减压回收乙醇渗漉液，得水蛭渗漉膏，备用；3)取桃仁、矮地茶，分别用80％乙醇10倍量回流提取4次，每次1小时，合并所述桃仁乙醇提取液和所述矮地茶乙醇提取液，减压回收乙醇，得桃仁等醇提浸膏，备用；4)取黄芪、巴戟天、淫羊藿与所述水蛭药渣、所述丹参药渣加水煎煮3次，每次加水7倍，加乙醇使乙醇含量为80％，沉淀后过滤，回收乙醇，得黄芪等水提浸膏，备用；5)合并所述丹参醇提浸膏、所述水蛭渗漉浸膏、所述桃仁等醇提取浸膏及黄芪等水提浸膏，常规湿法制粒，干燥后，分装入袋。
实施例4配方黄芪2克 巴戟天2克 淫羊藿2克 丹参6克 桃仁2克 水蛭1克 矮地茶2克。按配方称取原料药，备用。
1)丹参用90％乙醇5倍量回流提取3次，每次1小时，合并乙醇提取液，减压回收乙醇得丹参醇提浸膏，备用；2)取水蛭粉碎成粗粉，用60％乙醇渗漉，减压回收乙醇渗漉液，得水蛭渗漉膏，备用；3)取桃仁、矮地茶，分别用60％乙醇7倍量回流提取3次，每次1小时，合并所述桃仁乙醇提取液和所述矮地茶乙醇提取液，减压回收乙醇，得桃仁等醇提浸膏，备用；4)取黄芪、巴戟天、淫羊藿与所述水蛭药渣、所述丹参药渣加水煎煮2次，每次加水9倍，加乙醇使乙醇含量为60％，沉淀后过滤，回收乙醇，得黄芪等水提浸膏，备用；5)合并所述丹参醇提浸膏、所述水蛭渗漉浸膏、所述桃仁等醇提取浸膏及黄芪等水提浸膏，加入常规辅料湿法制粒，装胶囊中，每粒重0.35克。每日三次，每次四粒。
实施例5配方黄芪7克 巴戟天4克 淫羊藿5克 丹参2克 桃仁4克 水蛭4克 矮地茶8克。按配方称取原料药，备用。
1)丹参用90％乙醇9倍量回流提取3次，每次1小时，合并乙醇提取液，减压回收乙醇得丹参醇提浸膏，备用；2)取水蛭粉碎成粗粉，用75％乙醇渗漉，减压回收乙醇渗漉液，得水蛭渗漉膏，备用；3)取桃仁、矮地茶，分别用70％乙醇9倍量回流提取4次，每次1小时，合并所述桃仁乙醇提取液和所述矮地茶乙醇提取液，减压回收乙醇，得桃仁等醇提浸膏，备用；4)取黄芪、巴戟天、淫羊藿与所述水蛭药渣、所述丹参药渣加水煎煮3次，每次加水8倍，加乙醇使乙醇含量为70％，沉淀后过滤，回收乙醇，得黄芪等水提浸膏，备用；5)合并所述丹参醇提浸膏、所述水蛭渗漉浸膏、所述桃仁等醇提取浸膏及黄芪等水提浸膏，真空干燥，加入常规辅料制粒，压片，每片重0.35克。
实施例6配方黄芪3克 巴戟天2克 淫羊藿2克 桃仁2克 水蛭1克 矮地茶2克。按配方称取原料药，备用。
1)取水蛭粉碎成粗粉，用75％乙醇渗漉，减压回收乙醇渗漉液，得水蛭渗漉膏，备用；2)取桃仁、矮地茶，分别用60％乙醇8倍量回流提取2次，每次1小时，合并所述桃仁乙醇提取液和所述矮地茶乙醇提取液，减压回收乙醇，得桃仁等醇提浸膏，备用；
3)取黄芪、巴戟天、淫羊藿与所述水蛭药渣加水煎煮3次，每次加水10倍，加乙醇使乙醇含量为60％，沉淀后过滤，回收乙醇，得黄芪等水提浸膏，备用；4)合并所述水蛭渗漉浸膏、所述桃仁等醇提取浸膏及黄芪等水提浸膏，真空干燥，加入常规辅料制粒，压片，每片重0.35克。每日三次，每次四粒。
实施例7配方黄芪6克 巴戟天4克 淫羊藿4克 桃仁4克 水蛭2克 矮地茶6克。按配方称取原料药，备用。
1)取水蛭粉碎成粗粉，用70％乙醇渗漉，减压回收乙醇渗漉液，得水蛭渗漉膏，备用；2)取桃仁、矮地茶，分别用60％乙醇5倍量回流提取2次，每次1小时，合并所述桃仁乙醇提取液和所述矮地茶乙醇提取液，减压回收乙醇，得桃仁等醇提浸膏，备用；3)取黄芪、巴戟天、淫羊藿与所述水蛭药渣加水煎煮3次，每次加水9倍，加乙醇使乙醇含量为70％，沉淀后过滤，回收乙醇，得黄芪等水提浸膏，备用；4)合并所述水蛭渗漉浸膏、所述桃仁等醇提取浸膏及黄芪等水提浸膏，常压干燥，加入常规辅料制粒，装胶囊中，每粒重0.35克。
实施例8配方黄芪10克 巴戟天6克 桃仁4.5克 水蛭5克。按配方称取原料药，备用。
1)取水蛭粉碎成粗粉，用80％乙醇渗漉，减压回收乙醇渗漉液，得水蛭渗漉膏，备用；2)取桃仁用80％乙醇8倍量回流提取4次，每次4小时，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，得桃仁醇提浸膏，备用；3)取黄芪、巴戟天与所述水蛭药渣加水煎煮4次，每次加水12倍，加乙醇使乙醇含量为80％，沉淀后过滤，回收乙醇，得黄芪等水提浸膏，备用；4)合并所述水蛭渗漉浸膏、所述桃仁等醇提取浸膏及黄芪等水提浸膏，喷雾干燥，加入常规辅料干法制粒，装胶囊。
权利要求
1.一种治疗呼吸系统疾病的药物组合物，其特征在于主要是由下列重量份的原料药制成黄芪1-10份、巴戟天1-6份、桃仁1-4.5份、水蛭1-5份。
2.权利要求1的药物组合物，其中原料药的用量为黄芪3-8份、巴戟天2-5份、桃仁2-4份、水蛭1-4份。
3.权利要求2的药物组合物，其中原料药的用量为黄芪4-6份、巴戟天3-4份、桃仁3-4份、水蛭2-3份。
4.权利要求1～3之一的药物组合物的制备方法，包括下列步骤1)称取各原料药黄芪、巴戟天、桃仁、水蛭，备用；2)取水蛭粉碎成粗粉，用乙醇渗漉，将乙醇渗漉过的水蛭药渣留待处理，浓缩乙醇渗漉液，得浸膏A，备用；3)取桃仁用乙醇回流提取，浓缩乙醇提取液，得浸膏B，备用；4)取黄芪、巴戟天与2)的水蛭药渣，用水提取，向水提液中加乙醇，使乙醇含量为50％～80％，除去乙醇后，得黄芪、巴戟天与水蛭药渣的水提物的浸膏C，备用；5)将上述浸膏A、浸膏B及浸膏C合并，干燥，制得本发明药物组合物的活性组分。
5.权利要求1的药物组合物，其中原料药还有淫羊藿或补骨脂1-6份、矮地茶1-10份。
6.权利要求5的药物组合物，其中各组分的用量为黄芪3-8份、巴戟天2-5份、桃仁2-4份、水蛭1-4份、淫羊藿或补骨脂2-5份、矮地茶2-8份。
7.权利要求6的药物组合物，其中各组分的用量为黄芪4-6份、巴戟天3-4份、桃仁3-4份、水蛭2-3份、淫羊藿或补骨脂3-4份、矮地茶3-6份。
8.权利要求5～7之一药物组合物的制备方法，包括下列步骤1)称取各原料药黄芪、巴戟天、桃仁、水蛭、淫羊藿或补骨脂、矮地茶，备用；2)取水蛭粉碎成粗粉，用乙醇渗漉，将乙醇渗漉过的水蛭药渣留待处理，浓缩乙醇渗漉液，得浸膏A，备用；3)取桃仁和矮地茶用乙醇回流提取，浓缩乙醇提取液，得浸膏B，备用；4)取黄芪、巴戟天与2)的水蛭药渣以及淫羊藿或补骨脂，用水提取，向水提液中加乙醇，使乙醇含量为50％～80％，除去乙醇后，得水提物的浸膏C，备用；5)将上述浸膏A、浸膏B及浸膏C合并，干燥，制得本发明药物组合物的活性组分。
9.权利要求5的药物组合物，其中原料药还有仙灵脾或丹参1-8份。
10.权利要求9的药物组合物的制备方法，包括下列步骤1)称取各原料药黄芪、巴戟天、桃仁、水蛭、淫羊藿或补骨脂、矮地茶、仙灵脾或丹参，备用；2)仙灵脾或丹参用90％乙醇4～10倍量回流提取2～4次，每次1～3小时，药渣留待处理，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，得浸膏D，备用；3)取水蛭粉碎成粗粉，用50％～80％乙醇渗漉，将乙醇渗漉过的水蛭药渣留待处理，减压回收乙醇渗漉液，得浸膏A，备用；4)取桃仁、矮地茶，用50％～80％乙醇5～10倍量回流提取2～4次，每次1～3小时，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，得浸膏B，备用；5)取黄芪、巴戟天、淫羊藿或补骨脂、3)的水蛭药渣、2)的仙灵脾或丹参药渣加水煎煮1～3次，每次加水7～12倍，向水提取液中加乙醇使乙醇含量达50％～80％，沉淀后过滤，浓缩乙醇液，得浸膏C，备用；6)将上述浸膏A、浸膏B、浸膏C与浸膏D合并，干燥，与药学上可接受辅料混合。
全文摘要
一种治疗呼吸系统疾病尤其是慢性阻塞性肺气肿的药物组合物及其制备方法，主要含黄芪、巴戟天、桃仁、水蛭的提取物，亦可加入矮地茶、淫羊藿或补骨脂、丹参或仙灵脾，本发明通过补肺益肾与活血化瘀，攻补兼施，标本兼治，达到消炎、止咳、化痰、平喘的优良效果。
文档编号A61P11/00GK1634339SQ200410065749
公开日2005年7月6日 申请日期2004年11月16日 优先权日2004年11月16日
发明者朱启勇, 贾晓斌, 沈明勤 申请人:江苏省中医药研究院