溶媒法制备高纯度头孢他美钠工艺及医药用途的制作方法

专利名称：溶媒法制备高纯度头孢他美钠工艺及医药用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及头孢他美钠(6R，7R)-3-甲基-7-[(2-氨基-4-噻唑基)-(甲氧亚氨基)-乙酰氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4，2，0]-辛-2-烯-2-羧酸钠的溶媒法制备方法。
背景技术：
自1964年头孢噻吩(Cephalothin)问世以来，头孢类药物得到蓬勃发展，至今已有五十余种药物在世界范围内生产、销售，直接治疗着大部分细菌感染患者，作为第三代口服头孢菌素类药物——盐酸头孢他美酯(Cefetamet PivilHydrochloride，分子式C20H25N5O7·HCl)系日本武田药业公司与瑞士Roche公司共同研发，于1992年在墨西哥首先上市销售，其作用机制是口服进入胃肠道后，在肠道中经酯酶水解成活性体头孢他美酸(Cefetamet Acid，分子式C14H15N5O5S2)而发挥抗菌作用，头孢他美酸对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等具有广泛的抗菌作用，特别是对革兰氏阳性菌中的肺炎链球菌，酿脓链球菌等有很强的抗菌力，对需氧菌及厌氧菌所产生的头孢菌素酶等多种β-内酰胺酶极为稳定，是临床上广泛应用的抗感染口服药物。
然而，临床应用中，发现该药存在以下缺点1)该药由于是口服，且水溶性差，导致服药后生物利用度差，绝对生物利用度不超过50％，其余部分被排出体外，造成极大浪费；2)该药为酯溶性的，无法制成注射剂使用；3)对危重病人由于口服困难而无法使用此品；4)制备过程中，工艺复杂，收率低，杂质含量高，不易除尽。综上所述，制备高纯度的头孢他美酸从而进一步制备高纯度的头孢他美钠，开发可供注射用头孢他美钠，即现今急需解决的问题之一。

发明内容
本发明提供了一种通过改进现有制备工艺做到能提供高纯度的头孢他美酸，并以高纯度的头孢他美酸为原料，制备高纯度的头孢他美钠，进而制成可供注射用的只含头孢他美钠不含其它辅剂的头孢他美钠制剂，克服盐酸头孢他美酯口服制剂常用的缺陷，从而使其成为新型的临床用药品。
本发明所指高纯度的头孢他美酸和头孢他美钠的结构式分别如下 通用名头孢他美酸化学名(6R，7R)-3-甲基-7-[(2-氨基-4-噻唑基)-(甲氧亚氨基)-乙酰氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4，2，0]辛-2-烯-2-羧酸 通用名头孢他美钠化学名(6R，7R)-3-甲基-7-[(2-氨基-4-噻唑基)-(甲氧亚氨基)-乙酰氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4，2，0]-辛-2-烯-2-羧酸钠本发明所述高纯头孢他美酸的制备方法是在有机溶剂如醇类、丙酮或水中用有机碱如二乙胺、三乙胺、特丁胺或无机碱如碳酸氢钠，使低纯度的头孢他美酸在低温条件下如0℃～～-30℃，较佳为-5℃～～-25℃下结晶，成有机碱或无机碱的盐得以分离，再于水相条件下和无机酸如硫酸、硝酸、盐酸和醋酸等中和，等电点结晶得到高纯度头孢他美酸，经检测其HPLC法色谱纯度≥99.5％；将上述高纯度头孢他美酸用有机溶剂溶解，与成盐剂如碳酸氢钠和三乙胺成盐而制得高纯度头孢他美钠，经检测其HPLC法色谱纯度≥99.0％。
也可将上述两者结合一步法从低纯度头孢他美酸制备高纯度的头孢他美钠即在有机相中在适当温度下与有机碱或无机碱成盐溶解，成盐剂成盐而制得高纯度头孢他美钠。
本发明制得的头孢他美酸的HPLC法色谱纯度≥99.5％，本发明制得的头孢他美钠的HPLC法色谱纯度≥99.0％，本发明所述头孢他美钠是白色或类白色无定型粉末，易溶于水，微溶于醇，不溶于丙酮，含量以头孢他美酸计在94％以上(干品计算)由于制得的高纯度的头孢他美钠其纯度在99.0％以上，杂质含量大大减少，可容易溶解于水，无需添加助溶剂就可制成只含头孢他美钠的注射剂。经试验证明其溶解度和澄清度符合2005版中国药典要求。


图1头孢他美酸HPLC2头孢他美酸HPLC3头孢他美酸HPLC4头孢他美酸——三乙胺盐HPLC5头孢他美酸——三乙胺盐α-粉末衍射6头孢他美酸——三乙胺盐HPLC7头孢他美酸——三乙胺盐α-粉末衍射8头孢他美钠HPLC9头孢他美钠HPLC10无定形头孢他美钠X-射线粉末图具体实施方式
以下通过对若干具体化合物合成实例的实施方式再对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1 头孢他美酸精制方法1取头孢他美酸60.0g(HPLC纯度97.5％)，加纯水480ml，搅拌悬浮于10℃以下，加15.24g碳酸氢钠溶解，活性炭3g脱色，过滤，水洗炭层，滤洗液合并，用4N盐酸调pH＝1.5-3.0，结晶沉化两小时，过滤，水洗，真空干燥得57.6g头孢他美酸。HPLC纯度99.39％(见图1)实施例2 头孢他美酸精制方法2取60.0g头孢他美酸(HPLC 97.5％)加500ml乙醇，冰水冷却，内温低于15℃时，加入三乙胺30ml，搅拌结晶，过滤，少许异丙醇洗，抽干后将结晶溶于450ml纯水中，用4N盐酸调pH＝1.5-3.0，沉化，过滤、水洗，真空干燥，得头孢他美酸53.0g，HPLC纯度99.64％(见图2)实施例3 头孢他美酸精制方法3取60.0g头孢他美酸(HPLC 97.5％)加500ml丙酮，冰水冷却，内温低于15℃时，加入三乙胺30ml，搅拌结晶，过滤，少许丙酮洗，抽干后将结晶溶于450ml纯水中，用4N盐酸调pH＝1.5-3.0，沉化，过滤、水洗，真空干燥，得头孢他美酸51.5g，HPLC 99.57％。(见图3)实施例4 头孢他美酸—三乙胺盐制备方法1取60.0g头孢他美酸(HPLC 97.5％)加500ml乙醇，冰水冷却，内温低于15℃时，加入三乙胺30ml，搅拌结晶，将有机相中的结晶过滤，洗涤后干燥，即得结晶型头孢他美酸—三乙胺盐64.0g，其HPLC纯度99.72％。
分子式为C14H15N5O5S2·N(C2H5)3，见图4和图5。
实施例5 头孢他美酸—三乙胺盐制备方法2取60.0g头孢他美酸(HPLC 97.5％)加500ml丙酮，冰水冷却，内温低于15℃时，加入三乙胺30ml，搅拌结晶，过滤，洗涤，干燥，得66.0g结晶型头孢他美酸—三乙胺，其HPLC纯度为99.58％，见图6；X-射线粉末图见图7。
实施例6 无菌高纯度头孢他美钠的制备方法1将50g头孢他美酸(纯度99.5％以上)于纯水100ml，乙醇100ml中悬浮，加碳酸氢钠使溶解，活性炭50g脱色，脱热源，过滤去炭层，少许1∶1水—异丙醇洗，滤洗液无菌过滤，于无菌室内，加异丙醇3.5L搅拌结晶，并冷却到-20℃～～-25℃，结晶10小时以上，过滤，丙酮洗，无菌干燥，得无菌无定型高纯度头孢他美钠45.8g，HPLC纯度99.64％(见图8)实施例7 无菌高纯度头孢他美钠的制备方法2将60.0g头孢他美酸，悬浮于450ml乙醇中，加入三乙胺30ml使其溶解，室温脱色，过滤，乙醇洗，无菌过滤，于无菌室内搅拌下滴加异辛酸钠/乙醇液(其浓度为10％)300ml，一小时内滴加完毕，冰水外-5℃～～-10℃下冷却2小时，过滤，乙醇洗，无菌干燥，得无菌无定型高纯度头孢他美钠49.5g，HPLC纯度99.74％，见图9，图10。
实施例8 高纯度头孢他美钠溶解度试验

试验结果表明其溶解度极好。
实施例9 高纯度头孢他美钠澄清度试验


试验结果表明按照中国药典2005版有关头孢菌素类品种所规定要求，其澄清度(浊度)要求应小于1#浊度标准，符合要求。
※※澄清度是以中国药典2005版要求配制1#、0.5#浊度标准液进行比较。
实施例10 头孢他美钠制剂分装由实施例6、7中所得无菌头孢他美钠，在无菌分装线下进行分装，装量为每个西林瓶内的纯品头孢他美钠(以头孢他美酸计)1g，0.5g，0.25g。
试验实施例1 体外活性试验采用琼脂二倍稀释法测定注射用头孢他美钠(cefetamet sodium)对临床分离363株致病菌的体外抗菌作用，及其对小鼠感染细菌的体内疗效，并与同类抗生素头孢曲松、头孢克罗、头孢甲肟以及目前临床常用抗生素左氧沙星、奈替米星进行比较。注射用头孢他美的体外抗菌活性研究表明其对所试验的大部分菌株均有强弱不等的抗菌活性，MIC值范围大多在1->128ug/ml，对革兰阴性菌抗菌活力强于革兰阳性菌。
体外抗菌试验结果表明头孢他美钠与对照药物头孢曲松钠、头孢克罗、头孢甲肟、左氧沙星、奈替米星对所试验的革兰氏阳性菌中的普通金葡球菌、MSSA、MRSA的MIC50值分别为16、8、32、4、1、0.5ug/ml；1、0.25、64、＞128、32、0.25ug/ml；32、2、1、0.5、0.06、0.25ug/ml。对MRSE、MSSE的MIC50值是8、4、4、1、0.125、0.06ug/ml；8、2、0.125、0.125、0.06、0.03ug/ml。对化脓性链球菌、肺炎链球菌的MIC50值分别是1、0.25、1、0.06、0.5、0.25ug/ml和1、0.25、2、0.125、0.25、0.5ug/ml。
头孢他美及对照药物头孢曲松钠、头孢克罗、头孢甲肟、左氧沙星、奈替米星对所试验的革兰氏阴性菌中的大肠埃希菌、克雷伯肺炎菌、普通变形杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单孢菌、卡他布兰汉菌的体外抗菌活性较好，MIC50值依次分别为1、1、8、0.5、16、1ug/ml；1、0.125、12 8、0.125、0.125、2ug/ml；2、8、128、4、0.5、2ug/ml；8、4、16、8、0.03、1ug/ml；4、1、2、4、0.5、4ug/ml；4、2、0.5、0.5、0.06、2ug/ml。对其他所试验的革兰氏阴性菌，头孢他美的MIC范围大多在1-128ug/ml。对所试验的产超广谱β-内酰胺酶(ESBL株)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，头孢他美表现出较对照药物更好的体外抗菌活性，头孢他美和对照药物对这两种菌株的MIC50值分别为64、64、＞128、64、8、8ug/ml和16、64、128、32、2、32ug/ml。
体内保护试验结果表明头孢他美钠对金黄色葡萄球菌05-2、肺炎链球菌05-16及大肠埃希菌ESBL05-10感染小鼠均有体内保护作用，对这3种临床致病菌感染小鼠的ED50分别是20.73mg/kg、14.64mg/kg。
头孢他美钠对金黄色葡萄球菌05-2感染小鼠的半数保护剂量ED50(20.73mg/kg)均不如其他对照药物，头孢克罗、头孢甲肟、头孢曲松、左氧沙星及奈替米星对该菌株感染小鼠的ED50分别是15.39mg/kg、9.18mg/kg、9.93mg/kg、3.96mg/kg及1.99mg/kg。
头孢他美钠对肺炎链球菌05-16感染小鼠的半数保护剂量ED50(14.64mg/kg)与几个头孢类抗生素相当，头孢克罗、头孢甲肟、头孢曲松对该菌株感染小鼠的ED50分别是15.68mg/kg、17.30mg/kg、13.56mg/kg；但不如同时作为对照的喹诺酮类抗生素左氧沙星及奈替米星，他们对肺炎链球菌05-16感染小鼠的半数保护剂量ED50分别是2.00mg/kg及2.33mg/kg。
试验实施例2 急性毒性试验本试验采用固定剂量试验方法和最大耐受量试验方法对注射用头孢他美钠单次给药毒性进行研究。
固定剂量试验方法选用SPF级SD大鼠为试验系统，以2000mg/kg剂量单次尾静脉注射给药，动物给药后即刻和观察周期内，既未发现一般行为的异常，也未发现任何的异常征状。试验结果表明，在本试验条件下，SD大鼠尾静脉单次注射头孢他美钠无严重急性中毒的危险性。
最大耐受量试验方法选用SPF级KM小鼠为试验系统，以5000、2000mg/kg剂量单次尾静脉注射给药。5000mg/kg剂量组所有动物给药后即刻出现抽搐，呈侧卧状；其中一部分动物死亡，未死亡动物在30分钟内恢复正常。2000mg/kg剂量组所有动物给药后即刻未出现任何异常。试验结果表明，在本试验条件下，KM小鼠单次尾静脉注射头孢他美钠的最大耐受剂量不小于2000mg/kg，相当于临床拟用剂量的20倍。
试验实施例3 动物药代动力学试验15只健康Beagle犬随机分为3组，每组5只，雌雄均有，分别静脉注射7.5、30、600mg/kg注射用头孢他美钠(若按体表面积折算，分别相当于人用临床剂量的0.5、2、40倍)后，其药动学参数分别为Cmax 38.8、113.4、5.04ug/ml，t1/2β0.86、1.31、1.43h，V 0.153、0.221、0.284L/kg，CL/F 0.160、0.203、0.220L/kg/h。12h内AUC 53.2、162.6、2883.7ug/ml*h，经3p97程序拟合，头孢他美在Beagle犬体内的药动学特征符合二室开放模型。
180只大鼠随机分为36组(每组12个采血时间点×3组)，每组5只，雌雄均有，分别静脉注射50、100、1000mg/kg注射用头孢他美钠(若按体表面积折算，分别相当于人用临床剂量的1、2、20倍)后，其药代动力学参数分别为Cmax 66.7、216.9、1972.7ug/ml，t1/2β1.49、1.36、1.27h，V 0.606、0.448、0.466L/kg，CL/F 0.409、0.41 3、0.396L/kg/h。12h内AUC 129.1、293.1、2627.3ug/ml*h，经3p97程序拟合，头孢他美在大鼠体内的药动学特征也符合二室开放模型。
大鼠静脉注射100mg/kg注射用头孢他美(若按体表面积折算，相当于人用临床剂量的2倍)后，1h时组织中头孢他美浓度最高，4h时次之，8h最低，8h时组织中头孢他美药量己几乎从组织中完全清除，提示该药在组织中无蓄积。1h时头孢他美在各组织中的浓度从高到低依次为肾、肝、肺、胃、心、骨骼肌、脾、小肠、脂肪、脑和生殖腺(睾丸或卵巢)，其中头孢他美在肾组织中的浓度虽然最高，但也仅为同时间血清浓度的1.5倍左右，提示该药从口服途径改为静脉注射是可行的，也应该是安全的。
根据文献报道，口服头孢他美的前药-盐酸头孢他美酯后经肠道吸收并很快被肠壁的酯酶水解为头孢他美而显示抗菌活性，在体内90％的头孢他美以原形从尿中排出，并于24h内排出完毕。
根据文献报道，头孢他美的血清蛋白结合率为22％。
试验实施例4 注射用头孢他美钠反复给药毒性试验1、注射用头孢他美钠大鼠反复给药毒性试验在本中心GLP实验条件下，屏障系统内，120只SD大鼠分为4组，雌雄各半，30只/组，分别尾静脉注射注射用头孢他美钠160、400、1000mg/kg/d三个剂量(按等效体表面积计算分别相当于拟用临床剂量的3.2、8和20倍，按公斤体重计算分别相当于拟用临床剂量的20、50和125倍)和生理盐水，连续4周。在末次给药后24小时，每组处理大鼠20只，雌雄各半，腹主动脉采血检查血常规、血凝、生化指标和电解质指标，作系统尸检，取12个脏器称重计算脏器系数，30个脏器作病理学检查。剩余动物停药作恢复期观察2周，然后处死做如上全部指标检测。
在本实验条件下，大鼠连续4周静脉注射注射用头孢他美钠1000mg/kg/d(按等效体表面积计算相当于临床剂量的20倍，按公斤体重计算相当于临床剂量的125倍)可造成大鼠体重降低、代谢旺盛、贫血、营养不良和肾功能损伤，中毒的靶器官为肾脏。在停药2周后上述不良反应基本恢复正常。中剂量(400mg/kg/d)和低剂量组(160mg/kg/d)大鼠未见明显毒性变化。无毒副反应的安全剂量为≤400mg/kg/d(按等效体表面积计算相当于临床剂量的8倍，按公斤体重计算相当于临床剂量的50倍)。
2、注射用头孢他美钠犬反复给药毒性试验在本中心GLP实验条件下，开放系统内，24只Beagle犬分为4组，雌雄各半，6只/组，分别静脉滴注注射用头孢他美钠96、240、600mg/kg/d三个剂量(按等效体表面积计算分别相当于拟用临床剂量的6.4、16和40倍，按公斤体重计算分别相当于拟用临床剂量的12、30和75倍)和生理盐水，连续4周。每日观察外观征状；每周称体重一次；分别于给药前、给药2周、给药末及恢复2周后各测一次尿常规和心电图检查；给药前、给药2周、给药末及恢复2周后各做一次血液及血液生化检查。在末次给药后24小时，每组处理犬3只，解剖，作系统尸检，取12个脏器称重计算脏器系数，30个脏器作病理学检查。剩余动物停药作恢复期观察2周，然后处死做如上全部指标检测。
在本实验条件下，Beagle犬连续4周静脉滴注注射用头孢他美钠三个剂量未见明显毒性变化，异常的指标和剂量不呈正相关，且在恢复期后均恢复正常。无毒副反应的安全剂量为≤600mg/kg/d(按等效体表面积计算相当于临床剂量的40倍，按公斤体重计算相当于临床剂量的75倍)。
试验实施例5 注射用头孢他美钠安全性药理试验大、小鼠静脉、腹腔注射给予注射用头孢他美钠，剂量分别是200、400、800mg/kg，是临床拟用剂量的25倍、50倍和100倍，进行了小鼠自主活动、戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影响和大鼠协调运动试验，结果与对照组比较，注射用头孢他美钠对小鼠自主活动、小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量和大鼠协调运动均无明显影响。Beagle犬静脉注射注射用头孢他美钠40mg/Kg(临床拟用剂量的5倍)，给药后观察4小时，其一般行为活动无异常。表明注射用头孢他美钠对大、小鼠及犬的神经精神系统无明显影响。
Beagle犬静脉注射注射用头孢他美钠，剂量为400mg/kg(临床拟用剂量的50倍)，进行麻醉犬呼吸、血压、心电图的观察。未发现注射用头孢他美钠对犬呼吸、血压和心电图有明显影响。
试验实施例6 注射用头孢他美钠遗传毒性试验1、注射用头孢他美钠小鼠骨髓微核试验本试验以NIH小白鼠为实验动物，对注射用头孢他美钠进行了雌性、雄性小鼠骨髓微核试验。试验设计剂量为2000mg/kg、1000mg/kg和500mg/kg(按体表面积折算，分别是临床剂量的28、14和7倍)，腹腔注射(ip)给药，给药一次；阳性对照组(环磷酰胺，剂量50mg/kg，ip)，给药一次。给药后24小时颈椎脱臼处死动物，取股骨骨髓制片，计数200个嗜多染红细胞与正红细胞中他们的比例及1000个嗜多染红细胞中微核细胞树。用SPSS统计软件对各组数据进行统计分析。
本实验结果表明，染毒各剂量组微核发生率与阴性对照组比较无显著差异(P＞0.05)，阳性对照组微核发生率与阴性对照组比较有极显著差异(P＜0.01)。试验各组PCE与NCE的比值均在正常值范围内。试验结果表明，在本试验室条件下，DADS对小鼠无诱发PCE微核升高作用，即试验结果为阴性。
2、注射用头孢他美钠对CHL细胞体外培养染色体畸变试验试验以仓鼠肺细胞株(CHL)为靶细胞，以其有丝分裂中期相染色体为检测对象，试验设5个剂量。其剂量设计依据CHL细胞半数生长抑制浓度(IC50)测试结果，选用接近IC50浓度的剂量为最高剂量，以等比设5个剂量组，即500、250、125、62.5、31.25mg/ml。另设阳性对照组(非活化阳性对照物丝裂霉素MMC0.5μg/ml与活化阳性对照物环磷酰胺CP50μg/ml)和溶剂对照组(生理盐水)。不加-S9mix的24、48小时以及加S9mix的24小时三种染色体标本。对标本进行镜下观察，根据染色体畸变细胞率，判断供试品是否具有诱发哺乳动物细胞染色体畸变的作用。试验结果显示供试品24小时和48小时非代谢活化法(-S9mix)以及24小时代谢活化法(+S9mix)均为阴性。阳性对照物MMC、CP畸变率均＞20％，而阴性溶剂对照均＜5％，表明测试系统符合测试要求。综上所述，试验结果表明该供试品对仓鼠肺细胞株染色体畸变诱发作用为阴性。
3、注射用头孢他美钠对小鼠淋巴瘤细胞L5178Ytk基因突变试验试验采用小鼠淋巴瘤细胞L5178Ytk+/-3.7.2c细胞系，根据溶解度测定所确定的最高剂量开始，以2倍稀释度向下设6-10个剂量，进行毒性测试，通过计算第0天的相对存活率(RS)和相对总增长率(RTG)来确定细胞毒性。选择10％-20％RSG作为诱变试验的最高剂量，并以2倍稀释度向下设2-5个剂量。小鼠淋巴瘤细胞在活化或非活化条件下暴露于供试品，处理后第2天，将细胞接种于含有突变选择剂三氟胸苷的96孔板中，计数各剂量组的突变细胞集落数。试验结果表明，在非代谢活化及代谢活化条件下，各剂量组供试品未见诱导小鼠淋巴瘤L5178Y细胞的突变率增加。阳性对照诱导的突变率显著增加。因此，本供试品各剂量组对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因无致突变作用。
试验实施例7 头孢他美钠大鼠敏感期生殖毒性试验受试药头孢他美钠SD大鼠敏感期生殖毒性静脉注射给药剂量为500mg/kg和1000mg/kg(相当于临床拟用量的5倍和10倍)，在SD孕大鼠致畸敏感期静脉给药，另设生理盐水对照组和阳性对照组(越霉素8mg/kg)，母鼠于妊娠第20天作剖腹产，检查卵巢黄体数、子宫着床、胎仔吸收、外观、内脏及骨骼发育等指标。
实验结果表明高剂量组(1000mg/kg)孕大鼠出现了体重被轻度抑制等母体毒性反应；低剂量组(500mg/kg)各项指标与对照组比较未见明显差异；阳性对照组多出现体重下降、胚胎吸收多、死胎多等现象；受试药各剂量组胎仔外观未见异常；阳性对照组胎仔多数出现骨化不全、胸骨对裂等致畸现象，经对头孢他美钠各组胎仔的内脏及骨骼研究表明其内脏和骨骼发育与对照组比较无明显差异。
上述研究结果表明在本实验条件下，静脉注射头孢他美钠500mg/kg和1000mg/kg(相当于临床拟用量的5倍和10倍)，对高剂量孕大鼠有母体毒性，表现为体重下降等现象，低剂量组孕大鼠与生理盐水对照组比较未见明显差异，头孢他美钠各剂量组胎仔外观、内脏及骨骼发育均未见与给药有关的畸形，即未见头孢他美钠有明显致畸胎作用。
试验实施例8 过敏性、溶血性、刺激性安全试验本试验采用固定剂量试验方法和最大耐受量试验方法对注射用头孢他美钠单次给药毒性进行研究。
固定剂量试验方法选用SPF级SD大鼠为试验系统，以2000mg/kg剂量单次尾静脉注射给药，动物给药后即刻和观察周期内，既未发现一般行为的异常，也未发现任何的异常征状。试验结果表明，在本试验条件下，SD大鼠尾静脉单次注射头孢他美钠无严重急性中毒的危险性。
最大耐受量试验方法选用SPF级KM小鼠为试验系统，以5000、2000mg/kg剂量单次尾静脉注射给药。5000mg/kg剂量组所有动物给药后即刻出现抽搐，呈侧卧状；其中一部分动物死亡，未死亡动物在30分钟内恢复正常。2000mg/kg剂量组所有动物给药后即刻未出现任何异常。试验结果表明，在本试验条件下，KM小鼠单次尾静脉注射头孢他美钠的最大耐受剂量不小于2000mg/kg，相当于临床拟用剂量的20倍。
权利要求
1.一种溶媒法制备高纯度头孢他美钠的方法，其工艺步骤如下a)将头孢他美酸置于有机溶剂中，冰水冷却，内温低于15℃时，加入有机碱，搅拌结晶，过滤，少许异丙醇洗，抽干后得头孢他美酸-有机碱盐结晶；b)将头孢他美酸-有机碱盐结晶溶于纯水中，用4N盐酸调pH，沉化，过滤、水洗，真空干燥，得高纯度头孢他美酸；c)将高纯度头孢他美酸，悬浮于有机溶剂中，加入有机碱使其溶解，脱色，过滤，乙醇洗，无菌过滤，于无菌室内搅拌下滴加异辛酸钠成盐，一小时内滴加完毕，过滤，有机溶剂洗，无菌干燥，得无菌无定型高纯度头孢他美钠，HPLC纯度99.74％。
2.如权利要求1所述的制备高纯度头孢他美钠的方法，其特征在于其有机溶剂可以为乙醇和丙酮。
3.如权利要求1所述的制备高纯度头孢他美钠的方法，其特征在于其有机碱可以为三乙胺、二乙胺或特丁胺。
4.一种溶媒法制备高纯度头孢他美钠的方法，其工艺步骤如下a)将头孢他美酸置于纯水中，搅拌悬浮于10℃以下，加碳酸氢钠溶解，活性炭脱色，过滤，水洗炭层，滤洗液合并，用4N盐酸调pH，结晶沉化两小时，过滤，水洗，真空干燥得高纯度头孢他美酸。b)将高纯度头孢他美酸置于纯水100ml，乙醇100ml中悬浮，加碳酸氢钠使溶解，活性炭50g脱色，脱热源，过滤去炭层，少许1∶1水-异丙醇洗，滤洗液无菌过滤，于无菌室内，加异丙醇搅拌结晶，并冷却到-20℃～～-25℃，结晶10小时以上，过滤，丙酮洗，无菌干燥，得无菌无定型高纯度头孢他美钠，HPLC纯度99.64％。
5.如权利要求1或4所述的制备高纯度头孢他美钠的方法，其特征在于用4N盐酸调pH为1.5-3.0。
6.一种高纯度头孢他美钠在制备注射用头孢他美钠制剂中的用途，其特征在于该制剂只含高纯度头孢他美钠，不含其它辅剂。
7.如权利要求6所述的制备注射用头孢他美钠制剂的用途，其特征在于制剂的规格为每个西林瓶内的高纯度头孢他美钠装量为1g，0.5g，0.25g(以头孢他美酸计)。
全文摘要
本发明公开了一种高纯度头孢他美钠(6R，7R)－3－甲基－7－[(2－氨基－4－噻唑基)－(甲氧亚氨基)－乙酰氨基]－8－氧代－5－硫杂－1－氮杂双环[4，2，0]－辛－2－烯－2－羧酸钠的溶媒法制备方法及高纯度头孢他美钠用于制备注射用头孢他美钠的医药用途。
文档编号A61P31/00GK1903860SQ200510021319
公开日2007年1月31日 申请日期2005年7月25日 优先权日2005年7月25日
发明者刘家健, 陈长谭, 游莉, 李波, 张晓 , 石克金, 陈林, 张淑华, 王青松, 朱洁, 刘萍, 王平, 程强, 刘玉川 申请人:四川抗菌素工业研究所有限公司, 海南豪创药业有限公司