一种头孢曲松钠光降解产物及其制备方法和分析检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物技术领域，具体涉及一种头孢曲松钠光降解产物，以及该光降解 产物的制备方法和分析检测方法。
【背景技术】
[0002] 头孢曲松钠是瑞士 Roche公司1982年上市的广谱长效抗菌素，具有很大市场份 额，是第三代具有广谱抗菌活性的头孢菌素，用于敏感致病菌所致的下呼吸道感染、尿路、 胆道感染，以及腹腔感染、盆腔感染、皮肤软组织感染、骨和关节感染、败血症、脑膜炎等及 手术期感染预防。头孢曲松钠原料药生产厂家众多，其化学结构如下：
[0003]
[0004] 该原料药的质量标准在英国药典、欧洲药典、美国药典中均有收载，杂质控制要求 为：五个已知杂质A、B、C、D、E限度不超过1. 0%，未知杂质限度不超过0. 05%，总杂限度不 超过4.0%。中国药典2010版杂质限度要求为：单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面 积的〇. 5倍（0. 5% )，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍（2. 0% )。 [0005] 五个已知杂质A、B、C、D、E化学结构如下：
[0007] 国际上公认的药品注册要符合人用药品注册技术国际协调会（ICH)及EP欧洲药 典中的要求，其对药物中的杂质进行了严格的规定。ICH要求申报者应对原料药在合成、精 制和储存过程中最可能产生的那些实际存在的和潜在的杂质进行概述，该描述应对合成中 的化学反应、由原料引起的杂质及可能的降解产物进行合理的、科学地评估；并且申报资料 中还应对那些在原料药中实际存在的表观量大于或等于0.05% (每日最大剂量大于2g)的 杂质结构特征进行描述。
[0008] 可能的降解产物可通过破坏性试验和稳定性试验进行评估。但是，现有的头孢曲 松钠质量标准中，有关物质的液相分析方法洗脱强度较弱，可能并不能将降解产物都分离 检测出来。这些漏检出的降解产物无疑降低了头孢曲松钠的质量，如不对这些降解产物加 以严格控制，可能会对人体产生严重的毒副作用。
【发明内容】
[0009] 为了克服上述缺陷，本发明采用洗脱强度高的洗脱剂对头孢曲松钠的破坏性试 验样品和稳定性试验样品进行分析，在光破坏样品中发现了一种新的降解产物，该降解产 物在稳定性试验长期6个月未避光样品中开始检测到，且含量随时间增高，长期18月时达 0. 05%。因此：
[0010] 本发明的第一目的在于提供一种新的头孢曲松钠光降解产物；
[0011] 本发明的第二目的在于提供所述光降解产物的制备方法；
[0012] 本发明的第三目的在于提供所述光降解产物的分析检测方法；
[0013] 本发明的第四目的在于提供所述光降解产物在头孢曲松钠及其制剂的有关物质 检查项中作为杂质对照品的用途。
[0014] 上述目的是通过如下技术方案实现的：
[0015] -种头孢曲松钠光降解产物，化学结构如下，
[0016]
[0017] -种所述光降解产物的制备方法，包括如下步骤：
[0018] (1)光照破坏样品制备：将头孢曲松钠原料药光照破坏，先经冷白荧光灯照射，再 经紫外荧光灯照射；
[0019] (2)降解产物富集：将上述光照破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为60%~90%的 甲醇-水溶液中，搅拌，抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物；
[0020] (3)降解产物粗品：将上述浓缩物用正相硅胶柱色谱分离，用体积比为2:1~1:2 的二氯甲烷-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集5~9个柱体积洗脱液，浓缩得降解产物粗品；
[0021] (4)反相硅胶柱制备：将上述降解产物粗品用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷 基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇体积百分浓度为85 %~95 %的甲醇-水，等度洗脱，收集 4~8个柱体积洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得所述光降解产物。
[0022] 进一步地，步骤（1)所述光照破坏方法为：先经一百二十万勒克斯冷白荧光灯照 射15~25小时，再经200瓦小时/平方米的紫外荧光灯照射10~20小时。先经冷白荧 光照射，再经紫外荧光照射，能显著提高所述光降解产物的得率，光照时间过长不但不能继 续提高得率，反而会有降低趋势，可能是因为会进一步转化成其他化学物质。
[0023] 进一步地，步骤（3)所述正相硅胶粒径大小为200~300目。分离硅胶粒径大小 决定了硅胶表面积，粒径太大会导致所述光降解产物与极性相近的杂质难以分离开，粒径 太小会显著增大柱内压力，洗脱速度过慢。同时，硅胶粒径还影响所需要的洗脱液体积。
[0024] -种所述光降解产物的液相分析检测方法，HPLC色谱条件包括：
[0025] 色谱柱：Agilent ZORBAX XDB-C18 (4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0026] 流动相：Α为乙腈，B为0· 05mol/L正辛胺溶液（磷酸调节pH值至6· 5);
[0027] 梯度洗脱程序：0 ~5min，A 20%;5 ~15min，A 20%-75%;15 ~40min，A 75%; 40 ~50min，A 75% - 20% ;50 ~60min，A 20% ;
[0028] 流动相流速：1. OmL · min S
[0029] 检测波长：260nm ;
[0030] 柱温：30 Γ ;
[0031] 进样量：10 μ L。
[0032] 上述色谱条件下，所述光降解产物能与极性相近的化合物完全分离开，分离度大 于1. 5。流动相在260nm检测波长下紫外本底吸收低，且260nm为所述光降解产物的最大吸 收波长，保证了所述光降解产物的响应灵敏度，提高检出量。
[0033] 所述的头孢曲松钠光降解产物在头孢曲松钠及其制剂的有关物质检查项中作为 杂质对照品的用途。该光降解产物容易获得，且纯度高（大于98%)，可以使用该化合物作 为对照品利用外标法对其进行质量控制。
[0034] 本发明的有益效果：
[0035] (1)本发明发现了一种新的头孢曲松钠光降解产物，该降解产物结构首次报道；
[0036] (2)本发明提供的所述光降解产物的制备方法简单易行，可大量制备该降解产 物；
[0037] (3)本发明提供的液相分析方法能快速检测出所述降解产物，选择该降解产物的 最大吸收波长作为检测波长，提高了该降解产物的检出率，结果准确可靠；
[0038] (4)本发明提供的光降解产物可以用于头孢曲松钠及其制剂的有关物质检查，进 一步提尚头抱曲松纳及其制剂的质量标准，提尚其安全性和可控性。
【附图说明】
[0039] 图1为光降解产物氢谱信号归属图；
[0040] 图2为光降解产物碳谱信号归属图；
[0041] 图3为头孢曲松钠稳定性试验长期6个月未避光样品的供试品溶液色谱图（箭头 指示的色谱峰即为本发明提供的降解产物的色谱峰）。
【具体实施方式】
[0042] 下面结合具体实施例详细说明本发明的技术方案。
[0043] 实施例1 :头孢曲松钠光降解产物的制备和结构确证
[0044] 取50g头孢曲松钠原料均匀摊在培养皿中，置于冷白荧光灯下光照20小时，光照 强度为一百二十万勒克斯；取出表面皿，再置于紫外荧光灯下照射15小时，紫外荧光灯照 射强度为200瓦小时/平方米，照射结束后取出。然后将光照破坏样品溶于甲醇体积百分 浓度为75 %的甲醇-水溶液中，搅拌20分钟，用抽滤漏斗抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩 物3. 5g ;然后将浓缩物用5ml甲醇溶解，用4g粒度为100~200