一种奥拉西坦光降解产物及其制备方法和分析检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及药物技术领域，具体设及一种奥拉西坦光降解产物，W及该光降解产 物的制备方法和分析检测方法。
【背景技术】
[0002] 促智药是一类能促进学习记忆能力的新型中枢神经系统药物，与精神抑制药、抗 抑郁药、抗焦虑药、精神兴奋药和致幻剂等精神药物均不同，它是通过对脑细胞中生物能量 代谢(如葡萄糖、ATP、蛋白质、RNA、类脂等）的同化作用，选择性作用于大脑皮层和海马，保 护、激活或促进神经细胞功能的恢复，改善与精神行为有关的脑整合机制(如记忆、学习、回 答问题及分析问题、解决问题的能力）。目前最引人注目的促智药是化咯烧酬类，其代表性 药物奥拉西坦是一种合成的径基氨基下酸环状衍生物，又称奥拉酷胺、径氧化醋胺，商品名 有neuromet和健朗星等，由意大利史克比切姆公司于1974年首次合成，是美国抑A批准的用 于治疗老年痴呆的药物之一。其化学结构式如下：
[0003]
[0004] 奥拉西坦临床上用于治疗各种理化因素引起的脑损伤，各种脑缺氧和慢性脑功能 不全等。对痴呆、休克、老年精神衰退综合症(如记忆力衰退、适应性降低、老年虚弱和精神 性活动障碍等）、促进儿童大脑与智力的发育，对正常人的记忆力、工作效率的提高均有一 定疗效。可用于治疗一氧化碳和慢性酒精中毒，对己比妥和农药中毒的解救也有一定的作 用。
[0005] 国际上公认的药品注册要符合人用药品注册技术国际协调会（ICH)及EP欧洲药典 中的要求，其对药物中的杂质进行了严格的规定。ICH要求申报者应对原料药在合成、精制 和储存过程中最可能产生的那些实际存在的和潜在的杂质进行概述，该描述应对合成中的 化学反应、由原料引起的杂质及可能的降解产物进行合理的、科学地评估;并且申报资料中 还应对那些在原料药中实际存在的表观量大于或等于0.05% (每日最大剂量大于2g)的杂 质结构特征进行描述。
[0006] 可能的降解产物可通过破坏性试验和稳定性试验进行评估。但是，现有的奥拉西 坦质量标准中，有关物质的液相分析方法洗脱强度较弱，可能并不能将降解产物都分离检 测出来。运些漏检出的降解产物无疑降低了奥拉西坦的质量，如不对运些降解产物加 W严 格控制，可能会对人体产生严重的毒副作用。
【发明内容】
[0007] 为了克服上述缺陷，本发明采用洗脱强度高的洗脱剂对奥拉西坦的破坏性试验样 品和稳定性试验样品进行分析，在光破坏样品中发现了一种新的降解产物，该降解产物在 稳定性试验长期6个月未避光样品中开始检测到，且含量随时间增高，长期18月时达 0.05%。因此：
[0008] 本发明的第一目的在于提供一种新的奥拉西坦光降解产物；
[0009] 本发明的第二目的在于提供所述光降解产物的制备方法；
[0010] 本发明的第=目的在于提供所述光降解产物的分析检测方法；
[0011] 本发明的第四目的在于提供所述光降解产物在奥拉西坦及其制剂的有关物质检 查项中作为杂质对照品的用途。
[0012] 上述目的是通过如下技术方案实现的：
[0013] -种奥拉西坦光降解产物，化学结构如下，
[0014]
[0015] -种所述光降解产物的制备方法，包括如下步骤：
[0016] (1)光照破坏样品制备:将奥拉西坦原料药光照破坏，先经冷白巧光灯照射，再经 紫外巧光灯照射；
[0017] (2)降解产物富集:将上述光照破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为70%~85%的 甲醇溶液中，揽拌，抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物；
[0018] (3)降解产物粗品：将上述浓缩物用正相硅胶柱色谱分离，用体积比为8:1~10:1 的二氯甲烧-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集5~10个柱体积洗脱液，浓缩得降解产物粗品；
[0019] (4)反相硅胶柱制备:将上述降解产物粗品用反相硅胶柱纯化，固定相为十八烷基 硅烷键合硅胶，流动相为甲醇体积百分浓度为80 %~90 %的甲醇-水，等度洗脱，收集5~9 个柱体积洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得所述光降解产物。
[0020] 进一步地，步骤（1)所述光照破坏方法为:先经一百二十万勒克斯冷白巧光灯照射 36~48小时，再经200瓦小时/平方米的紫外巧光灯照射24~36小时。
[0021 ]更进一步地，步骤(1)所述光照破坏方法为:先经一百二十万勒克斯冷白巧光灯照 射42小时，再经200瓦小时/平方米的紫外巧光灯照射30小时。
[0022] 进一步地，步骤(3)为:将步骤(2)浓缩物用正相硅胶柱色谱分离，用体积比为9:1 的二氯甲烧-甲醇混合溶剂等度洗脱，收集7~8个柱体积洗脱液，浓缩得降解产物粗品。
[0023] 更进一步地，步骤(3)所述正相硅胶粒径大小为200~300目。
[0024] 进一步地，步骤(4)为:将步骤(3)降解产物粗品用反相硅胶柱纯化，固定相为十八 烷基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇体积百分浓度为85 %的甲醇-水，等度洗脱，收集7~8个 柱体积洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得所述光降解产物。
[0025] 一种所述光降解产物的液相分析方法，HPLC色谱条件包括：
[0026] 色谱柱:Agilent ZORBAX XDB-C18(4.6mmX250mm，5皿）；
[0027] 流动相:4为乙腊，8为0.05111〇1/1正辛胺溶液(憐酸调节抑值至6.8);
[0028] 梯度洗脱程序：0~6min，A20%;6~15min，A20%一75%;15~40min，A75%;40 ~50min，A 75%一20%;50~60min，A 20%;
[0029] 流动相流速:1.〇1111.111111-1;
[0030] 检测波长:260nm;
[0031] 柱溫：30。。
[0032] 进样量：10化。
[0033] 上述色谱条件下，所述光降解产物能与极性相近的杂质完全分离开，分离度大于 1.5。流动相在260nm检测波长下紫外本底吸收低，且260nm为所述光降解产物的最大吸收波 长，保证了所述光降解产物的响应灵敏度，提高检出量。
[0034] 所述的奥拉西坦光降解产物在奥拉西坦及其制剂的有关物质检查项中作为杂质 对照品的用途。该光降解产物容易获得，且纯度高(大于98%)，可W使用该化合物作为对照 品利用外标法对其进行质量控制。
[0035] 本发明的有益效果：
[0036] (1)本发明发现了一种新的奥拉西坦光降解产物，该降解产物结构首次报道；
[0037] (2)本发明提供的所述光降解产物的制备方法简单易行，可大量制备该降解产物；
[0038] (3)本发明提供的液相分析方法能快速检测出所述降解产物，选择该降解产物的 最大吸收波长作为检测波长，提高了该降解产物的检出率，结果准确可靠；
[0039] (4)本发明提供的光降解产物可W用于奥拉西坦及其制剂的有关物质检查，进一 步提高奥拉西坦及其制剂的质量标准，提高其安全性和可控性。
【具体实施方式】
[0040] 下面结合具体实施例详细说明本发明的技术方案。
[0041] 实施例1:奥拉西坦光降解产物的制备
[0042] 取50g奥拉西坦原料均匀摊在培养皿中，置于冷白巧光灯下光照42小时，光照强度 为一百二十万勒克斯;取出表面皿，再置于紫外巧光灯下照射30小时，紫外巧光灯照射强度 为200瓦小时/平方米，照射结束后取出。然后将光照破坏样品溶于甲醇体积百分浓度为 75 %的甲醇-水溶液中，揽拌20分钟，用抽滤漏斗抽滤，收集滤液，减压浓缩得浓缩物3.5g; 然后将浓缩物用5ml甲醇溶解，用4g粒度为100~200目的正相硅胶拌样，挥干溶剂，用80g粒 度为200~300目的正相硅胶作为分离硅胶进行柱色谱分离，用体积比为9:1的二氯甲烧-甲 醇混合溶剂等度洗脱，收集7~8个柱体积洗脱液，减压浓缩得降解产物粗品1.2g;然后将降 解产物粗品用甲醇体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液溶解，用反相硅胶柱纯化，固定相为 十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇体积百分浓度为85 %的甲醇-水，等度洗脱，收集7~ 8个柱体积的洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥得淡黄色粉末750mg(光降解产物）eHPLC归一化纯 度大于98%。
[0043] 光降解产物化学结构确证：
[0044] 皿-ESIMS显示[M+H]+为m/z 141.0708, [M+化]+为m/z 163.0512。结合核磁特征可 得分子式为0抽8化02，不饱和度为4。核磁共振氨