减少与来氟米特治疗相关毒性的方法和组合物的制作方法

专利名称：减少与来氟米特治疗相关毒性的方法和组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物领域。更具体地，涉及一种减少与来氟米特治疗相关毒性的方法和组合物。
背景技术：
来氟米特(Leflunomide)是一种异噁唑类衍生物，对多种疾病表现出治疗潜能，比如，作为抗炎药、免疫抑制剂、抗癌药和抗病毒药。
来氟米特最近在美国被批准可用于类风湿性关节炎的治疗，用于减轻关节炎症。它的上市商标为ARAVA。
美国专利号No.5624946及5688824(其内容引入本文作为参考)报道了，来氟米特已在实验中被单独或与其他免疫抑制剂协同应用于治疗和预防异种和同种异体移植的受体慢性排斥。
除了治疗、预防和逆转急慢性排斥的作用外，美国专利申请U.S.2003/0114597(其内容引入本文作为参考)报道了，在体外试验中来氟米特表现出对抗疱疹病毒科病毒的作用。
美国专利No.4965276描述了用来氟米特治疗慢性移植物抗宿主病以及其他自身免疫疾病比如系统性红斑狼疮。此外，来氟米特对于某些特定肿瘤具有抗肿瘤的作用(Xu X et al.，Biochem.Pharmacol.1999；581405)，这可能是通过抑制肿瘤的新生血管生成而达到治疗效果。
这些报道也提到，服用来氟米特后可能产生的毒性因而限制了大剂量应用。与大剂量相关的毒性包括贫血、腹泻和小肠及肝脏的病理改变。在来氟米特抗肿瘤的一项研究中(抑制致癌基因产物PDGF和PDGFr)，当治疗剂量起到有益疗效的同时也产生了严重的副作用，包括严重消瘦、厌食和贫血。(Ko，Yoo-Joung，etal.Clinical Cancer Research，2001；7800-805)近来，有建议使用尿苷(uridine)以减少来氟米特的毒性而不明显降低来氟米特抗同种异体移植排斥的作用。由于尿苷的生物利用度(约8-10％)很差，其疗效依赖于大剂量，而大剂量的应用可能引起胃肠道并发症，包括腹泻，这是需要长期服用治疗药物的移植病人所无法耐受的，加剧了来氟米特治疗本身所引发腹泻。
综上所述，迄今为止还缺乏有效降低施用来氟米特的毒性的有效方法。因此，本领域迫切需要开发新的有效降低来氟米特的毒性的方法。

发明内容
本发明人经过深入而广泛的研究，意外地发现，使用乳清酸能够减轻来氟米特的毒性。乳清酸(也称为维生素B13)是尿苷合成途径中的一个中间体，它能消除丙二腈酰胺(malononitrilamide)(一种来氟米特的代谢物)所引起的嘧啶不足，同时能避免使用尿苷所带来的问题。基于此发现，本发明人完成了本发明。
在本发明的第一方面，提供了一种药物组合物，它包含有效量的(如0.05-90wt％)来氟米特化合物；可生物利用的嘧啶化合物、或其盐类或其组合(含量通常为0.05-90wt％)；以及药学上可接受的载体。
在另一优选例中，所述的嘧啶化合物选自下组乳清酸及其盐；三乙酰尿苷及其盐；胞啶及其盐；酰化胞啶及其盐，或其组合。
在另一优选例中，所述的药物组合物包含500毫克至2000毫克的嘧啶化合物。
在另一优选例中，来氟米特化合物选自下组来氟米特、A771726、FK778、或FK779。
在另一优选例中，所述的组合物是控释剂型或直肠给药剂型、或口服剂型。
在另一优选例中，所述的组合物是单元剂型在本发明的第二方面，提供了一种嘧啶化合物的用途，它用于制备降低施用来氟米特化合物的毒性和/或副作用的药物，或者制备扩大来氟米特给药剂量范围的药物。
更佳地，所述的来氟米特化合物位于抑制移植物排异的药物中。
在本发明的第三方面，提供了一种来氟米特化合物和可生物利用的嘧啶化合物构成的混合物的用途(较佳地，来氟米特化合物和可生物利用的嘧啶化合物两者的重量比为1∶10-10∶1)，所述的化合物被用于制备药物，所述的药物用于治疗银屑病或关节炎，用于改善肾功能、或用于改善肝功能。
在另一优选例中，所述的嘧啶化合物选自下组乳清酸及其盐；三乙酰尿苷及其盐；胞啶及其盐；酰化胞啶及其盐，或其组合。
在本发明的第四方面，提供了一种药物组合产品，它包括一包装，所述的包装内具有多个容器，其中至少一个容器内有来氟米特化合物，至少一个容器内有可生物利用的嘧啶化合物，还具有将来氟米特化合物与嘧啶化合物联合施用于作为移植受体的对象的说明书。
具体实施例方式
本发明提供了有效减少或消除来氟米特毒性而不减少它的生物活性的方法和组合物，比如，不减少它的免疫抑制活性。本发明提供了有生物利用性的嘧啶化合物来减少来氟米特的毒副反应(如贫血、腹泻、肝毒性)。结果是，可服用大剂量的来氟米特化合物服用后，而毒性反应的危险降至极低，而同时一直保留其治疗效果。来氟米特化合物同口服的有生物利用性的嘧啶类物质(如乳清酸)的一起施用，提供了使用来氟米特进行治疗的机会，而原先认为这样(大剂量地)使用来氟米特是有毒性的。例如，本发明提供了一种方法，该方法通过将来氟米特化合物和乳清酸联合施用来减少A771726(一种来氟米特的代谢物)类似物(在以下描述)的毒性。在本发明中，除了乳清酸外，乳清酸和其他可生物利用的嘧啶类化合物的类似物和代谢产物也是合适的。
在一方面，本发明提供了药物组合物特别是口服药。这样的药物组合物包括来氟米特化合物；可生物利用的(特别是可口服生物利用的)嘧啶类化合物或其盐；以及药学上可接受的载体。
另一方面，本发明提供了一种提高扩大来氟米特药物剂量范围的方法。该方法包括对某一对象(比如哺乳动物)一起施用有效量的来氟米特化合物和可口服生物利用的嘧啶化合物或其盐，如乳清酸。因此本发明提供了一种服用大剂量的来氟米特化合物而不会产生来氟米特毒副作用或毒副作用降低的方法，这种方法包括向用来氟米特治疗的哺乳动物如人类给予有效量的可生物利用的嘧啶类化合物。
本发明更进一步提供了一种用于预防或治疗某些特定疾病病症或病程的方法，其中这些疾病适合于用来氟米特化合物进行治疗。这些疾病状态或状况包括移植排斥。
本发明现在将要详细描述，本领域技术人员会理解，本发明的描述仅仅是代表性的，不应视为对其全部保护范围的限制。
以下在本领域中使用的定义有助于技术人员理解本发明。
“改善”意味着减少、减轻、抑制或减小与疾病状态有关的任何不需要的作用及症状或任何不想要的治疗结果。例如，“改善抑制嘧啶生物合成的作用”指由抑制嘧啶生物合成所引起的副作用明显减少。合适地，观察到至少减少50％症状或副作用。
术语“联合给药”包括在单元剂型中施用两个或多种成分，或同时施用，或依次给药，只要它们给予的方式足以使两种药物在体内达到有效的血药浓度。药物可以是混合物，可以在同一片药物里，也可简单地同时给药。药物可以从不同的途径给予，比如一种药物可以从静脉施用而另一种药物可以口服。在依次给药中，一种药物可直接跟随在另一种药物后面或插入中间施用，也就是一种药物先用而另一种药物随后使用。
如本文所用，“有效量”的化合物指的是化合物能够达到有效功用的数量和组分，比如在一种具体化的功用中，能够制止移植排斥。因此，“有效治疗剂量”是能够产生有效的疗效的剂量。“减少毒性的有效量”指的是能够有效地减少毒性作用的剂量。即在疾病治疗中给予有效的剂量可观察到付作用或病情症状或病程的改善。
“扩大药物剂量范围”指提供了一种手段，通过该手段可给予更大的剂量药物以增加疗效。典型地，扩大药物剂量范围是有用的，比如，当某种药物的治疗作用是剂量依赖型时，然而增大的药物剂量也会导致剂量依赖性的毒性。此外，术语“扩大药物剂量范围”也可指在据信有毒性的剂量下施用药物。
“来氟米特化合物”通常指的是来氟米特、其类似物、其代谢产物及代谢产物的类似物。
来氟米特是一种异噁唑类衍生物，化学名为N-(4-三氟甲基苯基)-5-甲基异噁唑-4-甲酰胺，具有下列化学式(I)
可用于本发明方法的来氟米特类似物可用结构式(II)表示 式中R1和R2独立地选自下组-CF3、-H、-Cl、-F、-Br、-CN、-COOH、-OCH3、-NH-CO-CH2Cl和NH-CO-CH2Br。(参见，如美国专利No.4087535；6133301和6727272)。
来氟米特的活性代谢物是“A771726”(2-氰基-3-羟基-N-(4-三氟甲基苯基)-丁烯酰胺)。在服药后，来氟米特很快转化为具有活性的开环形式，A771726，如以下结构式(III)所示 式中R4为氢、碱金属(如钠、钾等)、碱土金属(如镁)、铵(包括生理上可耐受的有机铵)。
该化合物是丙二腈酰胺家族成员之一，似乎导致了来氟米特的活性和毒性。尽管作用机制还不十分清楚并且希望不受任何理论的束缚，据信A771726在体内至少有两个生化特性在体内抑制三磷酸嘧啶核苷从头合成过程中的二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)；抑制T细胞、B细胞、血管平滑肌细胞、上皮细胞、成纤维细胞、肿瘤细胞信号传导级联中选定的酪氨酸激酶。据报道，在体外A771726还能阻断外周血淋巴细胞NF КB和AP-1活性。其他的作用机制仍有待于发现。
作为A771726类似物的合适的丙二腈酰胺化合物，可用于本发明并且可用式(IV)表示
式中，R1和R2独立地选自下组-CF3、-H、-Cl、-F、-Br、-CN、-COOH、-OCH3、-NH-CO-CH2Cl和NH-CO-CH2Br，R3选自下组C1-5羟基，C2-5炔基，和C3-6环炔基；R4为氢、碱金属(如钠、钾等)、碱土金属(如镁)、铵(包括生理上可耐受的有机铵)。
式IV的化合物包括FK778和FK779，其中R1是-H，R2是-CF3和R3是丁炔基，以及R1是-H，R2是氰基和R3是环丙基。
本发明的某些实施例中，来氟米特化合物作为一种受移植者服用的前体药物，随后在体内转化为它的活性成分-丙二腈酰胺。然而，应理解，丙二腈酰胺也可以被直接服用，因而前文所定义的术语“来氟米特化合物”也指丙二腈酰胺化合物。应理解，本文中讨论的来氟米特化合物给药方法包括给予丙二腈酰胺，如果合适的话。
来氟米特及其类似物可用已知的方法制备，比如美国专利号6723855；6727272；6133301；5905090；4087535；4351841；4965276中所述的方法。所有这些文献引入本文作为参考。来氟米特也可从化学品供应商(如SynQuest Corp.)处购得。
如本文所用，“可生物利用的”嘧啶化合物指在使用后至少有20％可以被生物利用。“可口服生物利用”指嘧啶化合物口服后至少有20％的生物利用度。
“药学上可接受的载体”意味着制药上可接受的材料、组分或载体(vehicle)，如液体或固体填料、稀释剂、赋形剂、溶剂或胶囊材质，这些物质用于携带或运输有关化学物质来往于体内部分或器官之间。每个载体必须是合适的，即不损害药物的有效成分而与其他成分相容。可作为药学上可接受的载体的一些例子包括(1)糖类，如乳糖、蔗糖、葡萄糖；(2)淀粉，如玉米淀粉、土豆淀粉；(3)纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素及纤维素醋酸盐；(4)黄芪胶粉末；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石粉；(8)赋形剂，如可可牛油、栓蜡；(9)油类，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、玉米油和大豆油；(10)二醇，如丙二醇；(11)多醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯类，如油酸乙酯、月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，如氢氧化镁、氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)去热源水；(17)等渗盐；(18)林格氏液；(19)乙醇；(20)磷酸盐缓冲液；和(21)用于药物制剂的其他无毒相容的物质。湿化剂、乳化剂、润滑剂(比如十二烷基硫酸钠盐和硬脂酸镁)以及染料、释放介质、包衣剂、甜味剂、调味剂、香味剂，防腐剂、和抗氧化剂也可存在于组合物中。
如本文所用，“预防”、“减少风险”或“减少的风险”对于某一特定的状况或疾病过程来说，指的是相对于没有接受该方法治疗或对照组的人群来说，该特定疗法可以起到明显的降低特定状况或疾病过程的发生率的作用。如果至少50％的受治疗者不受折磨，即称之为风险减少，情况改善。
“嘧啶化合物”指的是一种可生物利用的特别是可口服生物利用的化合物，该化合物能直接提供或者作为途径中的中间体提供嘧啶核苷酸。合适的嘧啶化合物是，比如，乳清酸。其他的嘧啶化合物包括乳清酸盐、三乙酰基尿甙及其盐、胞啶(cytidine)、酰化胞啶及其盐。
这里指的药物组分的“盐类”指药学上可接受的生理上相容的盐。合适的盐的例子是碱金属(如钠)盐，碱土金属(如钙、镁)盐和铵盐，包括生理上可耐受的有机铵。
“治疗”指的是能够明显减少任何不需要的作用或症状或者任何不需要的效果。适宜的是，患者治疗能够减少至少50％的症状或副作用。
应理解，本文所提到的数据包括从较低值至较高值之间所有的数值，即在最低值和最高值之间的所有可能的数值组合都被认为本申请中明白地列出。例如，如果浓度范围在1％-50％，那么诸如2％-40％，10％-30％，或者1-3％等都在本申请中明白地列举了。这仅仅是一个例子而已。
在一个实例中，本发明为移植排斥的治疗提供了一个有效的方法，来减少来氟米特化合物的毒性危险。具体地，本发明涉及改善来氟米特毒副作用危险的治疗方法，从而允许扩大来氟米特的剂量。本发明提供了一种新的治疗方案，口服有生物活性的嘧啶化合物能使患者耐受来氟米特的毒副作用。合适的嘧啶化合物是乳清酸及其盐类(如乳清酸盐)，或三乙酰基尿甙。嘧啶化合物显著减少病人的毒副作用，如贫血、腹泻，导致红细胞比容的减少和体重下降。这些特性是通过嘧啶化合物的特殊性能和前文所描述的新颖治疗方案而达到的。
一种合适的嘧啶化合物是乳清酸。在健康人的血液中有很小的浓度的乳清酸。在人或动物体内，较高浓度的乳清酸不会引起可察觉的并发症。然而有些症状是已知的，在某些乳清酸血药浓度升高的个体中没有特别的损害，如尿素(urea)合成缺陷、个体遗传性乳清酸尿症(在用尿苷治疗数年后)、接受别嘌呤醇治疗的病人。此外，已认识到在肾衰病人血中的乳清酸水平可提高数倍，但不导致特别的毒性。
乳清酸的制备，可通过在甲醇中将草酸乙酸单乙酯与尿素缩合。其他制备方法，包括利用生物技术手段也可以。乳清酸可能在游离酸状态下给药，或以药学上可接受的盐形式给药。适合的盐形式是碱金属(如乳清酸钠)，碱土金属(如乳清酸铁或乳清酸钙)和铵盐，包括生理上可接受的有机铵。乳清酸也能够经由化学品供应商(如Aldrich(Milwaukee，Wisconsin))处购得。
还包括在本发明的可生物利用的嘧啶化合物中的是这样一些物质，包括某些已知的尿甙的酰基衍生物(即酰化尿甙)，如2′，3′-5′三-O-乙酰基尿甙(或三乙酰基尿甙(TAU))、2′，3′-5′三-O-丙酰基尿甙，或2′，3′，5′-三-O-丁酰尿甙。例如，TAU是可口服生物利用的。TAU和其他尿甙的酰基衍生物能用已知的技术制备(参见美国专利号6316426；美国已公布的专利申请2002/0035086和此处引用的参考文献，所有这些文献在此引入作为参考)。TAU也可以从化学制剂商处购得，例如从SP-Chemicals，Ludwigshofen，DK购得。
本发明中嘧啶化合物也包含胞啶及其酰基衍生物，即酰化胞啶，如2′，3′-5′-三-O-乙酰基胞啶(或三酰基胞啶或TAC)、2′，3′-5′三-O-丙酰胞啶，或2′，3′-5′三-O-丁酰胞啶。TAC和胞啶的其他酰基衍生物能够用已知方法制备(参见如美国已公布的专利申请2002/0035086和此处引用的参考文献，所有这些文献引入本文作为参考)。
适合的是，嘧啶化合物的给药量大约＝每日所需的嘧啶合成所需的数量-通过补救途径所通过的数量。。成人总的嘧啶合成估计是4-12mmol/天，或每天约450-700mg尿苷。(Bono VH，Weissaman SM，Frei E.6-氮尿苷给药从头途径嘧啶合成在慢性骨髓白血病的影响(J.Clin Invest 1964；431486；Smith LH Jr.嘧啶在人体的代谢。New Engl J of Med 1973；288764-772.)。对于乳清酸，这大概相当于1000mg/天，然而，提供全部的每天所需的嘧啶被认为是不必要的，因为补救途径可提供总体所需的嘧啶的一部分。据认为，乳清酸的生物利用度约50％。因此成人口服途径给药，乳清酸的有效量是约500-2000mg/天。TAU可参考相似的剂量。
对于用来氟米特化合物治疗的病人，活性代谢物(A771726)的合适目标血药浓度是50-100ug/ml之间，维持剂量可以用常用的技术手段来调节，从而达到所需的活性代谢物血药浓度范围。如果以嘧啶化合物联合给药方式避免嘧啶缺乏，目标活性代谢物的血药浓度可能维持在较高水平，如约200ug/ml或约600μM。
哺乳动物类移植受体，如肾移植受体或骨髓受体，可合适地用本发明治疗。典型的是，一个人类移植受者接受剂量为100mg/天的治疗5天，然后用40mg/天的维持量。来氟米特化合物和嘧啶化合物联合给药可提高来氟米特化合物的治疗量至大于200mg/人/天。此方法能防止病情发展或减少毒性(如贫血、腹泻、肝损)，且能达到来氟米特治疗排斥反应的浓度。该方法据期望能提高10倍的来氟米特的血药浓度并能达到对病人的最小损害。也就是，本发明提供了一种有效量的嘧啶化合物和致毒剂量的来氟米特化合物联合给药的方法。“致毒剂量”、“大剂量”指将来氟米特化合物给予哺乳动物(如人)经常得到有毒的结果(如贫血和腹泻及其他病理变化)的剂量。在人类，大剂量可以是大于200mg/天。
在来氟米特化合物给药中，可联合施用减少毒性有效量的可生物利用的嘧啶化合物，从而治疗异种和同种异体移植的排斥，进而减轻来氟米特化合物的毒副作用(比如增加体重，稳定红细胞压积)，这比单独服用来氟米特化合物的毒性小的多。联合给药来氟米特和嘧啶化合物能减少大剂量服用来氟米特的毒性，特别是可口服生物利用的嘧啶化合物。所以，该联合疗法的发明提供了一种与传统治疗-单独给予来氟米特化合物相关的改良的治疗指标。本发明的治疗方法减少了毒性(如，体重增加，稳定红细胞压积)等，很少或没有临床毒性症状或指征。
因此，在所述的剂量范围内，本发明的嘧啶化合物能克服来氟米特化合物的毒性，并对于对照组和单用来氟米特化合物的治疗组来说，它被认为是有益的药物。在联合治疗中，来氟米特化合物与嘧啶化合物可以同时服用，依次服用，或做成同一剂型服用。为了效率、服药方便和患者依从，尤为合适的是后者。
来氟米特化合物和有生物利用度的嘧啶化合物的药物组合物可以合适地配制成单元剂型，每个单元剂型有大约500毫克至2000毫克的嘧啶化合物和约20毫克至100毫克的来氟米特化合物。对于孩子或嘧啶清除率降低的人，比如肾功能下降或有其他的嘧啶消除率下降情况的人，较低剂量的嘧啶化合物是适当的。
本发明组合物的剂型没有特别限制，任何适于口服给药的形式可根据本领域已知的配制程序进行使用。适合口服的剂型包括(但不局限于)固体形式和液体形式。固体形式适合于口服给药的包括胶囊、片剂、粉剂或颗粒剂，并可包括赋形剂如葡萄糖、乳糖或甘露醇；崩解剂如淀粉或藻酸钠；润滑剂如硬脂酸镁或滑石粉；粘合剂如聚乙烯乙醇、羟丙纤维素或明胶；表面活性剂如硬脂酸镁；增塑剂如甘油等。适合于口服的液体剂型包括溶液剂、乳剂、糖浆剂和混悬液。这些成分可含有糖如蔗糖、山梨醇或果糖；二醇如聚乙二醇或丙二醇；油如芝麻油、橄榄油或大豆油；防腐剂如P-羟苯酸盐；香料如草莓或薄荷。
那些比口服剂型不方便的剂型，也可根据本领域已知的标准配制程序进行配制，以便用于直肠给药。经直肠给药的合适剂型包括固体栓剂、粘膜粘着栓剂、溶化剂、混悬剂、保留灌肠剂、胶体剂和软膏剂。
与本发明的组合物剂型还可配制成即刻释放、缓释或者控释形式。许多控释系统是本领域中已知的(参见美国专利5529991)。可以配制持续的、受控的或直接释放的组合物，如位于脂质体(具有经激光形成的孔洞)等中，其中活性化合物受到不同降解时间的包衣的保护(如通过微包裹形式、多包衣等)。
举例来说，在弥散系统中，药物的释放率受水溶性多聚体的释放率影响。总的来说有两种释放模式一种是药物中心被多聚体膜包裹的剂型；一种是基质型，其中溶解的或分散的药物基本均一地分散在这个惰性的聚合物基质中。在实际操作中，可利用众多分散系统的溶解率来决定释放率。
普通材料可单独或联合用作膜屏障包衣，包括但并不局限于，硬化明胶，甲基纤维素和乙基纤维素，多羟基异丁烯、聚乙烯乙酸酯和各种蜡。
在基质系统中，有三种材料是经常使用的，其中包括不溶性塑料、亲水聚合物和脂类化合物。使用的塑料基质包括甲基丙烯酸酯-甲基异丁烯酸，聚氯乙烯和聚乙烯。亲水性聚合体包括甲基纤维素、羟丙纤维素，羟丁纤维素，羟乙基纤维素及其衍生物以及羧甲基纤维素。脂类化合物包括各种不同的蜡如棕榈蜡和三硬酯酸甘油酯，这些基质系统可用本领域技术人员已知的方法制备。制备方法通常包括步骤混合药物和基质材料，然后将混合物压制成合适的药物层。使用蜡基质，药物可分散到融化的蜡质中，随后凝结、粒化并被压入核心。
微缩胶囊的最普通方法是凝聚法，包括在胶体中添加亲水物质。亲水物质作为包衣材料，可选择的范围广，可选用天然或合成的聚合体，包括虫胶、蜡、淀粉、纤维素醋酸盐、肽类或丁酸盐、聚乙烯吡咯烷酮和聚氯乙烯。包衣材料溶解后，微胶囊内部的药物直接溶解吸收，因此，可通过调节包衣的厚度来控制溶解的特性。举例来说，通过使用在3-30wt％之间的包衣材料，可以形成从小于1um至200um的厚度。通过使用不同厚度、类型的材质，活性药物可在不同的、预先设定的时间内释放而起到缓释的作用。
为了达到更好的减少溶解率，例如，可用缓慢溶解的材料包裹药物，或将药物装进缓慢溶解屏障中。这样，胶囊的溶解系统的制备，可通过用不同厚度或缓慢溶解的聚合物来包涂药物粒子或颗粒，或者通过微胶囊技术。
尽管含有来氟米特化合物和可生物利用的嘧啶化合物的单元口服剂型便于给药和患者的服用，然而应理解，也可以将化合物分开但包装在一起，如透明罩包装，并附服用说明。
尽管提供了合适的药物剂量范围，应理解，剂量还需要根据所施用的化合物、待治疗的病情、个体的病症以及其他可能影响来氟米特活性的相关因素、个体的反应或所需的可生物利用的嘧啶数量，这些是本领域技术人员熟知的。比如，特定病人的具体剂量取决于年龄、体重、总体健康状况、饮食、服药时间和方式、排泄率、联合使用的药物以及由该治疗引起的特殊不适。可以用常规方法确定给药剂量，举例来说，就用传统的合适的给药方案，通过比较本发明化合物与已知药物的活性来确定给药剂量。
提供下面的实施例以助进一步理解本发明。所用具体的材料和条件是用于进一步阐述本发明的，而不用于限制本发明的合理范围。
实施例1乳清酸对于来氟米特治疗急性排异效果的影响Lewis大鼠接受Brown-Norway大鼠的心脏移植，观察移植物存活以及感染情况(分数0-3，0为无感染)。治疗包括0、5、10、或15mg/kg来氟米特并联用0或100mg/kg的乳清酸。结果列表如下

炎症指数说明，来氟米特能够减轻排斥反应，且呈剂量相关性。乳清酸对于来氟米特抗排斥的作用没有显著影响。
实施例2乳清酸对于来氟米特减轻体重的影响正如先前所提到的，实验性来氟米特毒性中最明显的症状是贫血和腹泻，导致消瘦。同种或异种移植的Lewis大鼠体重在200-235mg被分成5个治疗组。1组不给予任何药物治疗。2、3、4、5组，每组接受大量、致毒量的30mg/kg/d来氟米特2组只给予来氟米特；3组给予来氟米特和36mg/kg/d的乳清酸钠喂饲；4组给予来氟米特和100mg/kg/d的乳清酸钠喂饲；5组给予250mg/kg/d尿甙腹膜内注射。每只大鼠在治疗开始的第一周和第四周测量体重。
结果列表如下组1(不用来氟米特)

组2(只用来氟米特)

组3

组4

组5

注“来30”指给予来氟米特30mg/kg/天；“乳36”指给予乳清酸(或乳清酸钠)36mg/kg/天；“乳100”指给予乳清酸(或乳清酸钠)100mg/kg/天；“尿250”指腹腔内注射尿苷250mg/kg/天。
由于乳清酸的溶解性较差，因此为了增加生物利用度，可用乳清酸钠。
上述结果显示，与单独应用来氟米特比较，来氟米特与乳清酸或其盐联合应用能明显增加体重，尤其是在使用100mg/kg/天的剂量下效果更为明显。
实施例3乳清酸对于来氟米特红细胞比容毒性的影响重复实施例2的实验，并对Lewis大鼠在每周测量红细胞比容，连续4周。接受治疗的大鼠分成5组，每组接受来氟米特大量、致毒量30mg/kg/天。第1组只用来氟米特治疗；第2组来氟米特与乳清酸钠36mg/kg/天联合给药；第3组用来氟米特和乳清酸钠100mg/kg/天联合给药；第4组用来氟米特和乳清酸88mg/kg/天联合给药；第5组用来氟米特和腹腔内注射尿甙250mg/kg/天。测定红细胞比容基线，然后在给药后的1-4周测定每只大鼠的红细胞比容。结果列表如下组1

组2

*乳钠36表示乳清酸钠36mg/kg/天。
组3

*乳钠100表示乳清酸钠100mg/kg/天。
组4

组5

结果证明联合应用来氟米特和乳清酸或乳清酸钠，与单独使用来氟米特比较可以明显提高红细胞比容。
实施例4乳清酸对于来氟米特治疗幼年大鼠关节炎的影响Wistar大鼠接受II型胶原乳剂注射，制备成胶原性关节炎大鼠模型，观察治疗后1、2、3、4周关节炎指数和足掌体积。治疗包括0.4mg/kg/天的来氟米特与100mg/kg/天的乳清酸联合给药。结果列表如下


关节炎指数和足掌体积说明，来氟米特治疗幼年大鼠关节炎有明显疗效。乳清酸不会影响来氟米特抗的疗效，且起效快，毒性低。
实施例5乳清酸对于来氟米特改善肾功能的影响Lewis大鼠经制模后，被分成3个治疗组。1组未治疗，对照组。2组给予来氟米特0.4-0.8mg/kg/天；3组给予来氟米特和100mg/kg/天的乳清酸钠喂饲。每只大鼠在治疗开始的第1、3、6和12月测量血红蛋白和肌酐清除率。结果列表如下


血红蛋白和肌酐清除率表明，来氟米特能明显改善肾脏功能，控制病情活动，且呈时间依赖性。乳清酸能明显增加来氟米特的疗效，且副作用较小，较轻。
实施例6乳清酸对于来氟米特治疗银屑病的影响Lewis大鼠经制模后，被分成3个治疗组。1组未治疗，对照组。2组给予来氟米特0.4-0.8mg/kg/天；3组给予来氟米特和100mg/kg/天的乳清酸钠喂饲。每只大鼠在治疗开始的第3月测量银屑病面积和严重指数和表皮厚度。结果列表如下

银屑病面积和严重指数和表皮厚度表明，来氟米特能明显减低银屑病面积和严重指数和表皮厚度，是有效的单用治疗药物。乳清酸能明显增加来氟米特的疗效和耐受性。
实施例7乳清酸对于来氟米特改善肝功能的影响Lewis大鼠经制模后，被分成3个治疗组。1组未治疗，对照组。2组给予来氟米特2mg/kg/d；3组给予来氟米特和100mg/kg/d的乳清酸钠喂饲。每只大鼠在治疗开始的第1、4、8和12周测量谷丙转氨酶(ALTumol.s-1/L)和谷草转氨酶(ASTumol.s-1/L)。结果列表如下


谷丙转氨酶和谷草转氨酶表明，来氟米特能明显增加肝脏负担，使肝脏转氨酶升高。乳清酸能明显降低来氟米特的肝脏副作用，使副作用较小，较轻。
在该说明和所附的权利要求中，除了特别指出的以外，“一个”和“这个”的含义包括了复数。如，成分中“一种嘧啶化合物”实际上包括了2种或以上的化合物。此外还需注意的是，除了特别指出的以外，术语“或”大多数情况下包括“和/或”两种含义。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
权利要求
1.一种药物组合物，其特征在于，它包含有效量的来氟米特化合物；可生物利用的嘧啶化合物、或其盐类或其组合；以及药学上可接受的载体。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的嘧啶化合物选自下组乳清酸及其盐；三乙酰尿苷及其盐；胞啶及其盐；酰化胞啶及其盐，或其组合。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物包含500毫克至2000毫克的嘧啶化合物。
4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，来氟米特化合物选自下组来氟米特、A771726、FK778、或FK779。
5.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的组合物是控释剂型或直肠给药剂型、或口服剂型。
6.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的组合物是单元剂型。
7.一种嘧啶化合物的用途，其特征在于，它用于制备降低施用来氟米特化合物的毒性和/或副作用的药物，或者制备扩大来氟米特给药剂量范围的药物。
8.一种来氟米特化合物和可生物利用的嘧啶化合物构成的混合物的用途，其特征在于，用于制备药物，所述的药物用于治疗银屑病或关节炎，用于改善肾功能、或用于改善肝功能。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述的嘧啶化合物选自下组乳清酸及其盐；三乙酰尿苷及其盐；胞啶及其盐；酰化胞啶及其盐，或其组合。
10.一种药物组合产品，其特征在于，它包括一包装，所述的包装内具有多个容器，其中至少一个容器内有来氟米特化合物，至少一个容器内有可生物利用的嘧啶化合物，还具有将来氟米特化合物与嘧啶化合物联合施用于作为移植受体的对象的说明书。
全文摘要
本发明涉及减轻或减少与服用来氟米特相关的毒性而不降低其生物利用度(如不降低其免疫抑制作用)的方法和组合物，即利用有可生物利用的嘧啶化合物来改善来氟米特引起的毒副作用。
文档编号A61P19/00GK1775211SQ20051002553
公开日2006年5月24日 申请日期2005年4月29日 优先权日2005年4月29日
发明者肖飞 申请人:肖飞