专利名称：能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种肠组织愈合用药，尤其是一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药。
背景技术：
创伤愈合是外科学中古老而又基本的问题，尽管已经取得了不少的进展和突破，但在腹部外科中仍遵循着这样一条公认的格言，即“有脓液时，不作(肠)缝合(no suture in pus)”，因为腹腔感染严重影响肠吻合口的愈合。腹腔有明显感染时，腹膜的巨噬细胞与细菌产生的蛋白酶，以及炎症反应常阻碍吻合口、缝合口的愈合。肠外瘘是导致严重腹腔感染最主要原因之一。
肠外瘘是肠外伤、腹部手术后的一种严重并发症，由于它常发生在肠吻合口，修补处，或隐匿的损伤部。它的发生机制有别于十二指肠溃疡、肠道病变的急性穿孔。术后肠外瘘先发生吻合、修补等部位小裂隙，肠液外溢局部形成小感染灶，逐渐扩大直到破裂大量肠液溢出，出现局限性或弥漫性腹膜炎，或是穿破腹壁的薄弱部(如切口、引流口)溢至腹腔外并伴有一系列症状。此时，症状虽是首次在临床上呈现，但从肠瘘发生的局部而言，已有5～10天的时间，腹腔内肠瘘邻近组织已有明显的充血、水肿等炎性感染改变。这时进行手术处理，组织脆弱又有炎症与蛋白酶(protease)的作用，机体处于分解代谢状况，组织愈合受到影响，导致很高的手术失败率。20世纪70年代前，由于营养，水、电解质平衡，感染等无有效的调控方法，早期确定性手术被认为是肠外瘘的首选治疗措施，但失败率高达80％，死亡率50％～60％。自70年代始，肠外营养成功地应用于临床，加之水、电解质维持，感染控制有所改善，瘘可能自愈，肠外瘘的治疗策略为之改变，争取提高瘘的自愈率，确定性手术由首选改为最后的治疗措施。经30年来的临床实践，肠外瘘的自愈率可达40％～50％，确定性手术成功率达到98％，总治愈率提高到80％～90％，相关文献中报告的死亡率在10％～20％。但是，这种治疗方法总的治疗程多在2～4月，甚至更长，治疗费用也随之增加。因此进一步进步改善治疗措施，在部分肠外瘘病人施行早期确定性手术时配以适当的药物治疗以缩短疗程，降低医疗费用是当务之急。
发明内容
本发明的目的是在大量的临床试验的基础上，提供一种有利于促进肠组织愈合的手术配套用复合药物，以提高腹腔感染条件下肠组织手术的成功率和愈合的速度，减少复发率，大幅度减轻患者的经济负担。
本发明的技术方案是一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，其特征是由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶2.2IU～3.6IU。其最佳范围为2.6IU～3.0IU所述的纤维蛋白胶由组分A和组分B组成，其中组分A主要由纤维蛋白原、第XIII因子及主体胶溶解液组成，组分B主要由凝血酶原和含Ca++的催化剂溶解液组成。
生长激素的浓度为0.2～4.0IU/ml，最佳范围为2.4～3.6IU/ml。
本发明的有益效果1、解决了腹腔感染条件下肠道一期吻合及愈合的问题，使多数临床腹腔感染病人得到及时、优良、快速的治疗。过去传统的治疗方法，此类病人需要先行手术引流，控制腹腔感染，继续肠外或肠内营养支持，再经过3～6个月，甚至长达一年余的治疗，如果能够自行愈合，则不需要再次手术，如果肠瘘不能自行愈合，再需要再次确定性手术治疗。经过营养支持和手术治疗，此类病人平均费用高达40～60万元。而采用本发明的药物配以手术治疗，则总费用可控制在5万元以下。
2、进一步减少了此类病人的经济负担。严重腹腔感染的病人多数是由于手术后肠外瘘或创伤病人没有得到及时治疗，因此，此类病人多数已花费了数万、甚至数十万的治疗费用，这类病人多数不能够承担继续治疗的巨额费用，配用本发明的药物治疗可以节约80％的以上的医疗费用。
3、由于本发明中使用的生长激素仅应用于局部，同时纤维蛋白胶能控制生长激素缓慢释放，对病人生长、发育无影响，也不会增加肿瘤发生和复发的机会，使肠道快速愈合技术应用由仅限于非肿瘤病人扩大到各种腹腔感染病人。
4、扩大了适应证。临床中不能实施一期吻合的病人甚多，除了上述肠外瘘病人外，尚包括为数众多的疾病，如腹部创伤(交通伤、枪伤、刀刺伤等)、肠道(尤其是结肠)息室自发性穿孔合并腹腔感染、延误诊断的肠道肿瘤穿孔病人等一系列存在腹腔感染而又需要行肠切除吻合治疗的病人均可以采用本发明的药物配以手术吻合术得到快速的治愈。
5、临床效果明显。在动物实验研究和临床中应用的基础上，对腹腔感染条件下行腹腔冲洗，同时辅助应用本发明的药物在严重腹腔感染时行肠组织吻合。其中的纤维蛋白胶可粘合组织有利于愈合，动物实验证实纤维蛋白胶能封闭肠吻合口增加抗张力与爆破力，但至术后第4天组织尚未愈合胶已开始被吸收，吻合口的抗张力减弱，而应用生长激素却是另一种情况，吻合的初期，生长激素尚未对吻合口的愈合发生作用，术后第4天，吻合口组织愈合逐渐进入坚实的阶段。纤维蛋白胶与生长激素的联合应用，可起互补作用，使肠吻合口始终保持在完好的状态。经对37例肠外瘘患者使用，在瘘发生后10天以内剖腹处理腹膜炎的同时，即行确定性手术，37例中35例获得治愈，2例发生再瘘，其中一例经非手术治愈，另1例系晚期胃癌术后3月死亡。瘘的手术治愈率为94.5％，无手术死亡。
图1是本发明的药物使用24小时后其组份中的生长激素含量对吻合口破裂压力的影响曲线图。
图2是本发明的药物使用24小时后其组份中的生长激素含量对吻合口抗张力强度的影响曲线图。
图3是本发明的药物使用24小时后其组份中的生长激素含量对吻合口羟脯氨酸含量的影响曲线图。
图4是本发明的药物使用7天后其组份中的生长激素含量对吻合口破裂压力的影响曲线图。
图5是本发明的药物使用7天后其组份中的生长激素含量对吻合口抗张力强度的影响曲线图。
图6是本发明的药物使用天后其组份中的生长激素含量对吻合口羟脯氨酸含量的影响曲线图。
具体实施例方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明。
实施例一。
一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶2.2IU。
所述的纤维蛋白胶由组分A和组分B组成，其中组分A主要由纤维蛋白原、第XIII因子及主体胶溶解液组成，组分B主要由凝血酶原和含Ca++的催化剂溶解液组成。
生长激素的浓度为0.2～4.0IU/ml，最佳范围为2.4～3.6IU/ml。
其中纤维蛋白胶是由经病毒灭活处理的哺育动物纤维蛋白原、人凝血酶、纤溶抑制剂和氯化钙组成的止血剂。以模拟血凝的最后阶段反应，用凝血酶激活纤维蛋白原形成纤维蛋白，粘合于创口，起止血作用，其中的特殊成分还能减少感染、促进愈合。整个过程约10多秒，3～5分钟明显强化产生较理想的止血、封闭作用。
纤维蛋白胶分组分A和组分B，其中组分A由纤维蛋白原、第XIII因子等及主体胶溶解液组成；组分B由凝血酶原、催化剂溶解液(含Ca++)组成。
本实施例的纤维蛋白胶可采用广州倍绣生物工程公司生产的2.5ml规格的产品，生长激素采用雪兰诺公司，5IU规格的产品。可现场配制使用，使用时首选由组分A中的主体胶稀释液稀释生长激素粉剂，再将含有生长激素的主体胶稀释液再按操作规范稀释主体胶，使用时严格按不含生长激素的纤维蛋白胶使用说明操作，肠吻合后将纤维蛋白胶涂抹或喷洒在肠吻合口。
实施例二。
一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶3.6IU。
所述的纤维蛋白胶由组分A和组分B组成，其中组分A主要由纤维蛋白原、第XIII因子及主体胶溶解液组成，组分B主要由凝血酶原和含Ca++的催化剂溶解液组成。
生长激素的浓度为0.2～4.0IU/ml，最佳范围为2.4～3.6IU/ml。
其中纤维蛋白胶是由经病毒灭活处理的哺育动物纤维蛋白原、人凝血酶、纤溶抑制剂和氯化钙组成的止血剂。以模拟血凝的最后阶段反应，用凝血酶激活纤维蛋白原形成纤维蛋白，粘合于创口，起止血作用，其中的特殊成分还能减少感染、促进愈合。整个过程约10多秒，3～5分钟明显强化产生较理想的止血、封闭作用。
纤维蛋白胶分组分A和组分B，其中组分A由纤维蛋白原、第XIII因子等及主体胶溶解液组成；组分B由凝血酶原、催化剂溶解液(含Ca++)组成。
本实施例的纤维蛋白胶可采用广州倍绣生物工程公司生产的2.5ml规格的产品，生长激素采用雪兰诺公司，5IU规格的产品。可现场配制使用，使用时首选由组分A中的主体胶稀释液稀释生长激素粉剂，再将含有生长激素的主体胶稀释液再按操作规范稀释主体胶，使用时严格按不含生长激素的纤维蛋白胶使用说明操作，肠吻合后将纤维蛋白胶涂抹或喷洒在肠吻合口。
实施例三。
一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶2.6IU。
所述的纤维蛋白胶由组分A和组分B组成，其中组分A主要由纤维蛋白原、第XIII因子及主体胶溶解液组成，组分B主要由凝血酶原和含Ca++的催化剂溶解液组成。
生长激素的浓度为0.2～4.0IU/ml，最佳范围为2.4～3.6IU/ml。
其中纤维蛋白胶是由经病毒灭活处理的哺育动物纤维蛋白原、人凝血酶、纤溶抑制剂和氯化钙组成的止血剂。以模拟血凝的最后阶段反应，用凝血酶激活纤维蛋白原形成纤维蛋白，粘合于创口，起止血作用，其中的特殊成分还能减少感染、促进愈合。整个过程约10多秒，3～5分钟明显强化产生较理想的止血、封闭作用。
纤维蛋白胶分组分A和组分B，其中组分A由纤维蛋白原、第XIII因子等及主体胶溶解液组成；组分B由凝血酶原、催化剂溶解液(含Ca++)组成。
本实施例的纤维蛋白胶可采用广州倍绣生物工程公司生产的2.5ml规格的产品，生长激素采用雪兰诺公司，5IU规格的产品。可现场配制使用，使用时首选由组分A中的主体胶稀释液稀释生长激素粉剂，再将含有生长激素的主体胶稀释液再按操作规范稀释主体胶，使用时严格按不含生长激素的纤维蛋白胶使用说明操作，肠吻合后将纤维蛋白胶涂抹或喷洒在肠吻合口。
实施例四。
一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶3.0IU。其余与实施例一相同。
实施例五。
一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶2.9IU。其余与实施例一相同。
实施例六。
一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶2.4IU。其余与实施例一相同。
实施例七。
一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶3.2IU。其余与实施例一相同。
实施例八。
一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶2.8IU。其余与实施例一相同。
下面通过具体的试验和使用过程及其药物作用机理对本发明作进一步的说明。
一、纤维蛋白胶凝固活力和稳定性测定凝固活力测定法(依照中国生物制品规程中“冻干人纤维蛋白原制造及检定规程”)，于小试管内加入凝血酶溶液(3IU/ml)0.5ml，置37℃水浴预热1分钟，再加入用生理盐水溶液稀释成1ml含3mg纤维蛋白原样品0.5ml，摇匀。置37℃水浴中观察其凝固时间。不超过60秒。
二、肠组织愈合测定方法雄性Wistar大鼠，体重230-270g。
手术方法腹腔内注射1％氯胺酮10ml/kg，麻醉成功后，取腹部正中切口，距回盲部15cm，切断肠段并行肠吻合，断端用6-0医用无损伤可吸收缝合线行端端吻合，共12针，按上述方法使用纤维蛋白胶。关闭系膜，1号丝线分两层关闭腹腔。术后自由进食饮水。术后24h再次剖腹测定肠组织愈合。
1.吻合口破裂压力距吻合口近、远端各3cm切断肠袢，置于林格液中，肠袢一端与微量输液泵连接，另一端与压力测试仪连接。用微量输液泵以3ml/min向肠管内注入亚甲蓝溶液，观察到有亚甲蓝溢出时，即吻合口破裂压力(单位mmHg)。
2.吻合口抗张力强度与吻合口破裂压力测定一样获取肠袢，吻合口肠段垂直固定于Instron4466万能材料测试仪(4466；Instron，London，UK)10N的气动夹头之间，拉伸速度为40mm/min直至断裂。抗张力强度定义为吻合口断裂时的最大负荷力量，单位牛顿(Newton)。
3.吻合口羟脯氨酸含量测定破裂压力测定后取包括吻合口周围0.5cm长的肉芽组织(剔除周围粘连组织)，保存于-80℃深低温冰箱待测，以高效液相色谱法测定吻合口组织中羟脯氨酸含量。仪器Waters高效液相色谱系统(包括486紫外检测仪、510双泵、PICO-TAG色谱工作站、PICO-TAG游离氨基酸分析柱)，Waters色谱数据工作站。试剂和流动相羟脯氨酸标准品为BDH产品，PITC及三乙胺为Sigma产品，三水醋酸钠为分析纯，乙腈、甲醇均为色谱纯。A缓冲液9.54三水醋酸钠，溶于1L水中，pH6.5，取25ml乙腈加入至975ml上述溶液中，内含250μl的10mmol/LEDTA，充分混合脱气。衍生试剂(需新鲜配制)将PITC、甲醇、乙醇、三乙胺和水，按1∶6∶1∶1∶1体积比例配制。样品稀释液710mg的Na2HPO4加高纯水溶至1L，pH7.4。样品采取及处理从液氮罐中取出肉芽组织，称取100mg左右置碾钵中，倒入液氮，待组织冷冻坚硬后进行碾磨，粉碎后再加入液氮碾磨，如此反复进行3次。组织完全粉碎后，加0.2ml样品稀释液，经超滤后，取滤液10μl注入0.5cm×5cm的玻璃样品小管中，经2次冷冻干燥后，再加20μl衍生试剂，室温下衍生20min，再经干燥后置冰箱保存。分析时，加50μl样品稀释液涡旋搅拌，进样10μl。
色谱条件1、色谱柱PICO-TAG柱(300mm×3.9mmid，5μm，Waters公司)；2、检测波长UV254nm；3流速1.0ml/min；4柱温46℃。
三、不同生长激素浓度对纤维蛋白胶凝固活力及组织愈合能力的影响组分A溶解液2.5ml+生长激素0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0，9.0，10.0IU(生长激素浓度0.2，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0，2.4，2.8，3.2，3.6，4.0IU/ml)。
(一)不同生长激素浓度对纤维蛋白胶凝固活力的影响在纤维蛋白胶中加入上述浓度的生长激素后，纤维蛋白胶凝固活力均不超过60秒。
(二)不同生长激素浓度对纤维蛋白胶对组织愈合能力的影响
1.吻合口破裂压力随着溶解液中生长激素浓度的增加，肠组织吻合口破裂压力逐渐增加，当生长激素浓度增加至2.4IU/ml后，肠吻合口破裂压力呈缓慢增加，至3.6IU/ml达到峰值。如图1所示。
2.吻合口抗张力强度随着溶解液中生长激素浓度的增加，肠组织吻合口抗张力强度逐渐增加，当生长激素浓度增加至2.8IU/ml后，肠吻合口吻合口抗张力强度达到峰值。如图2所示。
3.吻合口羟脯氨酸含量术后24h吻合口羟脯氨酸含量与生长激素浓度无关。如图3所示。
结论在纤维蛋白胶中加入不同浓度的生长激素，对纤维蛋白胶凝固活力没有影响，而随着生长激素浓度的增加，肠组织愈合亦增加，当生长激素浓度达到2.4IU/ml左右时，肠组织吻合口破裂压力和抗张力强度达到较高水平。为了便于应用，采用生长激素浓度为2.0IU/ml(相当于在规格2.5ml溶解液中加入规格5IU的生长激素)。
四、加入生长激素后对腹腔感染肠组织愈合的影响1.实验动物及实验方法雄性Wistar大鼠(中国科学院上海实验动物中心提供)，体重200g(188-216g)左右，实验前适应环境一周。采用我们已建立的中度大鼠腹腔感染模型制作腹腔感染，术前禁食8小时，自由饮水，腹腔内注射氯胺酮(10ml/kg)麻醉，腹部正中切口入腹，距回盲部20cm，切开对系膜缘小肠壁周径1/3(4mm)，距肠破损处上下各1cm用3-0缝线将肠壁悬吊于右侧腹壁，形成中度腹腔感染模型。3号丝线两层关腹。术后大鼠自由进食、饮水。
肠切除、吻合术麻醉同上，原切口进入腹腔。取腹腔液1ml行细菌培养和计数，如培养结果阴性，则剔除该只动物。分离粘连肠袢，暴露瘘口，拆除悬吊肠壁的缝线，距瘘口中心两端各3cm处切除该肠袢，肠吻合则采用6-0无损伤线一层间断缝合3针。
2、动物分组将雄性20只Wistar大鼠行肠吻合后随机分为二组，在肠吻合后分别应用应用含有或不含生长激素的纤维蛋白胶，分别于术后7d处死动物，测定肠吻合口破裂压力、抗张力强度及羟脯氨酸含量。
3、实验结论(1)肠吻合口破裂压力在纤维蛋白胶中加入生长激素后能够明显提高术后第7d肠吻合口破裂压力。如图4所示。
(2)肠吻合口抗张力强度在纤维蛋白胶中加入生长激素后能够明显提高术后第7d肠吻合口抗张力强度。如图5所示。
(3)吻合口羟脯氨酸含量在纤维蛋白胶中加入生长激素后能够明显提高术后第7d肠吻合口羟脯氨酸含量。
结论在纤维蛋白胶中按适当比例加入生长激素素后能够促进感染状态下肠组织愈合，使原来需要分期手术病人行确定性手术治疗。如图6所示。
权利要求
1.一种能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，其特征是由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml∶2.2IU～3.6IU。
2.根据权利要求1所述的能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，其特征是所述的复配比为1ml∶2.6IU～3.0IU
3.根据权利要求1所述的能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，其特征是所述的纤维蛋白胶由组分A和组分B组成，其中组分A主要由纤维蛋白原、第XIII因子及主体胶溶解液组成，组分B主要由凝血酶原和含Ca++的催化剂溶解液组成。
4.根据权利要求1所述的能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，其特征是生长激素的浓度为0.2～4.0IU/ml。
5.根据权利要求1所述的能够促进腹腔感染条件下肠组织愈合的复配药，其特征是生长激素的浓度为2.4～3.6IU/ml。
全文摘要
本发明在大量的临床试验的基础上，公开了提供一种有利于促进肠组织愈合的手术配套用复合药物，其特征是由纤维蛋白胶和生长激素复配而成，其复配比为1ml2.2IU～3.6IU。可以提高腹腔感染条件下肠组织手术的成功率和愈合的速度，减少复发率，大幅度减轻患者的经济负担。
文档编号A61K38/27GK1683007SQ20051003846
公开日2005年10月19日 申请日期2005年3月17日 优先权日2005年3月17日
发明者李幼生, 黎介寿 申请人:中国人民解放军南京军区南京总医院