一种预防和治疗早期糖尿病肾病的中药的制作方法

专利名称：一种预防和治疗早期糖尿病肾病的中药的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种预防和治疗糖尿病肾病的中药，特别是涉及一种以中草药为原料制成的具有益气养阴、补肾健脾、活血化瘀、利水消肿、清解余毒功效之内服药物，并对神疲乏力、腰酸腿软、面浮肢肿、头晕及蛋白尿等有极好疗效的中药制剂。
背景技术：
糖尿病肾病又称糖尿病性肾小球硬化症，是糖尿病特有的严重微血管并发症，也是糖尿病人死亡的主要原因。
中医学认为，糖尿病肾病是在糖尿病气阴两虚基础上发展而来，久病必瘀，久病必虚，久病及肾，脾肾两虚，水液输布失常，气化不利。本病的基本病机特点是“本虚标实”，本虚以肾虚为主，标实为瘀血、水湿、浊毒等；从糖尿病肾病分期认识其病机，认为该病早期阴虚热结为主要病机，日久则伤阴耗气，而致气阴两虚，肾气不固，气阴不足，经脉失养，由虚致瘀，成血脉不通、络脉瘀阻。
目前，已公开的关于治疗糖尿病肾病的中药以含黄芪益气者居多，例如，由虎杖、黄芪、肉桂组成的“治疗糖尿病及其血管并发症的药物及该药物的制备方法(申请号，200410027181.3)”，由黄芪、太子参、女贞子、枸杞子、水蛭、大黄组成的“治疗糖尿病肾病的中药组合物及其制备方法(申请号，01108448.0)”，由黄芪、山茱萸、地黄、酒大黄、葛根、泽泻、丹参、益母草、桃仁、太子参、枸杞子组成的“一种治疗糖尿病肾病的药物及其制备方法(申请号，03113559.5)”等；另外还有以清解浊毒为主者，例如，由山茱萸、地黄、虎杖、白花蛇舌草、黄连、鬼箭羽组成的“一种治疗和预防糖尿病肾病的药物(申请号，02159195.4)”。糖尿病肾病属于“本虚标实”的疾病，病因病机错综复杂，像类似以上公开的纯中药虽然有一定疗效，但毕竟针对该病的病因病机用药配伍还不全面，针对性不强，影响了长期稳定的疗效；而且对于糖尿病肾病而言预防该病发生意义重大，所以现有技术在本病的预防和临床应用中存在着局限性。

发明内容
本发明目的是克服现有技术的不足，用精心选择的中药材公开一种能够有效预防和治疗早期糖尿病肾病的中药。
本发明药物可由下列组分制成(用量为重量份)药剂生地黄80-120份 山药80-160份泽泻40-60份土茯苓50-150份 桔梗50-150份白茅根100-200份杜仲50-100份益母草80-160份 西洋参20-40份人参6-20份 丹参40-120份黑豆80-160份白花蛇舌草40-80份本发明药物的最佳重量配比是生地黄100份山药100份 泽泻50份 土茯苓100份桔梗100份 白茅根150份 杜仲60份 益母草100份西洋参30份 人参10份 丹参50份 黑豆100份白花蛇舌草50份本发明药物其特征在于所说的药剂是任何一种药剂学上所说的剂型。
本发明药物其特征在于所说的药剂是片剂、胶囊剂、颗粒剂。
一种预防和治疗早期糖尿病肾病的中药，其制备方法是取组方中山药、土茯苓、桔梗粉碎成细粉，将组方中丹参、人参、西洋参分别粉碎成细粉；剩余生地黄、杜仲、白花蛇舌草、黑豆、益母草、白茅根、泽泻用水提取二次，第一次1.5小时，加水8倍量，第二次1小时，加水7倍量，每次提取水温98-102℃，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.35-1.40(60±5℃热测)的浸膏；浸膏加入山药、土茯苓、桔梗细粉，混匀，制成大颗粒，真空干燥，干固物粉碎成细粉，混匀，分别加入丹参、人参、西洋参细粉，混合均匀，制成任何一种药剂学上所说的剂型。
本发明的中药，方中西洋参补气养阴清热，人参可大补元气，二者共为君药，有培元固本益气养阴之功；山药能补脾益肾涩精，杜仲补肝肾，两药合用补肾健脾，地黄清热益阴与白花蛇舌草、土茯苓、白茅根甘淡解毒之品配伍共奏清解余毒之功，以上共为臣药；丹参、益母草活血化瘀，黑豆、泽泻利水消肿，共为佐药；桔梗宣肺气，肺为水之上源，开肺气利水湿为使药；全方标本兼顾，通补兼施、扶正祛邪，共奏益气养阴、补肾健脾、活血化瘀、利水消肿、清解余毒之功效。本发明适用于早期糖尿病肾病的预防和治疗，对症见神疲乏力、腰酸腿软、面浮肢肿、头晕及蛋白尿等有极好的效果，且无毒副作用；兹将实验研究介绍如下。
本发明动物急性毒性试验急性毒性试验研究，取体重18-20g昆明种健康小鼠雌雄各半，按体重随机分组，给药剂量分别为48克生药/kg/日、24克生药/kg/日、12克生药/kg/日三个剂量组及一个对照组，共计四组，每天2ml/每只，分两次给予，空白对照组给等量水，给药后连续观察一周，观察指标包括，小鼠的活动、饮食、体重及死亡情况。结果表明给药后7天内动物活动自如，一般情况较好，毛色、生长发育、摄食均正常，各组未见动物死亡。小鼠体重及解剖后肉眼观察比较心、肺、肾、脾、胃等脏器，各组间未见异常变化。本发明中药48克生药/kg/日相当于临床治疗用药量的170倍，可见本发明中药临床剂量是安全的。
本发明动物长期毒性试验一、方法长期毒性试验研究，选用80只体重均为100-115g，7-8周龄健康Wistar种大鼠，随机分成四组，每组20只，雌雄各半。对照组灌胃给予同体积水，本发明小剂量组12g生药/kg体重，中剂量组24g生药/kg体重，大剂量组48g生药/kg体重。
实验动物室采用空调调节温度20±5℃，每日固定时间灌胃给药，每周给药6天，停药1天，每周称重一次，调整给药量，在给药过程中随时记录饮食量及动物的行为，实验结束后，取血测定各项指标见表。
二、结果表1 本发明中药对大鼠血象的影响

表2 本发明中药对大鼠肝、肾功能的影响 X±SD

表3 本发明中药对大鼠体重的影响

由表1、表2、表3所见本发明中药对大鼠血象、肝肾功能、体重均无明显影响。在给药过程中，各剂量组动物均未出现任何毒性反应，毛光泽、饮食、饮水、眼睛、呼吸、循环及四肢活动均正常，也未出现任何动物死亡，对心、肝、脾、肾、肺、胃肠等内脏组织进行病理学观察均未发现有特异性病变。
三、结论本发明中药长期毒性实验表明，高(相当于临床常用量的170倍)、中、低(相当于临床常用量的42.5倍)三个剂量组生化、病理均无明显变化，故可以认为常用量下长期服用安全、可靠、无毒性反应。
本发明与治疗作用有关的药效研究资料一、对糖尿病大鼠肾脏的保护作用1实验材料1.1实验动物北京大学医学部实验动物科学部 合格证号SCXK-(京)2002-0051.2药品与试剂链脲佐菌素Streptozocin，STZ，美国 sigma公司。
洛汀新北京诺华制药有限公司市售 批号040504本发明中药天津同仁堂股份有限公司提供 批号0407161.3给药剂量及分组情况空白对照组 等量水。
糖尿病模型组 等量水。
洛汀新组 0.015g/kg.
本发明中药I 4.2g生药/kg.
本发明中药II 2.1g生药/kg.
本发明中药III1.0g生药/kg.
1.4实验仪器TBA-40FR自动生化分析仪(日本东芝)强生血糖仪(美国)JEM-1010透射电镜(日本)2实验方法2.1糖尿病模型的制备将80只雄性大鼠，分组前先经尾血测血糖三天，选出血糖稳定动物随机分为空白对照组10只。除空白对照组外，实验大鼠均腹腔注射链脲佐菌素STZ(55mg/kg体重)。STZ注射前溶于0.1mmol/L柠檬酸缓冲液中。空白对照组只注射等量柠檬酸缓冲液。注射STZ3天后经尾血测血糖，凡空腹血糖≥16.7mmol/L者为糖尿病模型动物，备用于本实验。随机分为糖尿病组(模型组)、洛汀新治疗组(阳性药组)、本发明中药治疗组(4.2g生药/kg；2.1g生药/kg；1.0g生药/kg)，每组10只。
2.2给药方法本发明(4.2g生药/kg；2.1g生药/kg；1.0g生药/kg)高、中、低三个剂量组和洛汀新(15mg/kg)阳性药组。灌胃给药量均按1ml/100g体重。空白对照组和糖尿病模型组灌胃给予等量水，以上各组均每日灌胃一次，连续灌胃给药8周。实验期间所有大鼠自由饮水、饮食。
2.3主要观察指标于第8周末，收集24h尿液，测定尿量及尿蛋白排泄率。测量体重，戊巴比妥纳麻醉(40mg/kg)后腹主动脉取血，测定血糖、肌酐、尿素氮。摘取双侧肾脏称重、常规制备石蜡切片HE染色光镜观察，摄片。每个动物的肾切片随机选择正切肾小球10个，用显微测量尺测定肾小球直径。取部分皮质常规制备肾脏透射电镜标本，用日本JEM—1010型透射电镜重点观察肾小球病变，摄片。
2.4统计方法所有数据均用Spss10.0统计软件进行组间T检验统计学处理。
3实验结果3.1对各组大鼠血糖的影响本发明中药(4.2g生药/kg)治疗4周后血糖与治疗前及模型组有较明显的降低(P＜0.05)。其结果可见表1。
表1 对各组大鼠血糖的影响(mmol/L) X±SD N＝10


注各受试药组均与模型组相比较*P＜0.053.2对大鼠肾功能的影响模型组与空白对照组比较大鼠尿蛋白排泄率、尿量、血肌酐和尿素氮均明显升高。本发明中药4.2g生药/kg这4项指标均明显降低，本发明中药2.1g生药/kg也有下降的趋势，结果见表(2～3)表2 对各组大鼠血肌酐、尿素氮的影响(umol/L) X±SD

注各受试药组与模型组相比较*P＜0.05表3 对各组大鼠尿蛋白、尿量的影响 X±SD

注各受试药组与模型组相比较*P＜0.05**P＜0.013.3对肾指数和肾小球体积的影响模型组与空白对照组相比较大鼠肾指数(K/BW)和肾小球体积显著增大，本发明中药4.2g生药/kg、2.1g生药/kg与模型组相比较肾指数和肾小球体积明显降低。结果见表(4～5)
表4 对各组大鼠体重、肾指数的影响 X±SD

注各受试药组与模型组相比较**P＜0.01*P＜0.05表5 对各组大鼠肾小球体积的影响 X±SD

注各受试药组与模型组相比较**P＜0.01*P＜0.053.4肾脏形态的检查光镜模型组大鼠肾小球系膜区PAS染色阳性物质明显增多，系膜基层增加，系膜区明显扩宽。部分肾小管上皮细胞肿胀脱落、少数肾小管腔内可见蛋白样管型。本发明中药I、II组大鼠肾脏病变均有不同程度改善，肾小球系膜区PAS染色阳性物质有所减少，系膜区无明显增宽，肾小管上皮细胞病变有所改善。
电镜模型组大鼠肾小球基膜呈节段性增厚，系膜基质明显增多，上皮呈不同程度融合，无正常排列。内皮细胞及系膜细胞，其异染色结，呈斑块状分布不匀，细胞器结构不清。各受试药组肾小球造血微结构均有一定改善，其中洛汀新、本发明中药4.2g生药/kg组作用最明显。
4结论本研究结果表明本发明中药组(4.2g生药/kg、2.1g生药/kg)对糖尿病大鼠血糖相关指标有明显降低作用，这可能是其改善糖尿病肾脏病变的机制之一。因为高血糖是糖尿病肾病发生发展的重要诱发因素，所以降低血糖水平能有效地延缓和减轻糖尿病肾病的发生和发展。本实验证实，本发明中药具有降低血糖作用，同时也能降低血肌酐和尿素氮水平，减少尿蛋白及尿量。减轻肾脏病变程度。这与临床对糖尿病肾病患者肾脏起到保护和改善作用密切相关。
5参考文献[1]于德民，等.实验性链脲佐菌素糖尿病动物模型的研究.中国糖尿病杂志，1995，2105-109. 刘志红，等.糖尿病肾病发病机理病[J].中华肾脏病杂志，1999，15(2)120. 张均田.现代药理实验方法学[M].北京北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1998.981.
二、对大鼠实验性慢性肾炎的作用1实验材料1.1实验动物北京大学医学部实验动物科学部合格证号SCXK(京)2002-0051.2药品与试剂盐酸阿霉素浙江海正药业股份有限公司批号20030902醋酸泼尼松片天津力生制药股份有限公司 批号20040303本发明中药天津同仁堂股份有限公司提供 批号20040716尿蛋白、血尿素氮、血肌酐、血总蛋白试剂盒由中生北控生物科技股份有限公司生产1.3给药剂量及分组情况空白对照组等量水。
肾炎模型组等量水。
醋酸泼尼松组 13.3mg/kg.
本发明中药I 4.2g生药/kg.
本发明中药II 2.1g生药/kg.
本发明中药III1.0g生药/kg.
1.4实验仪器TBA-40FR 自动生化分析仪日本东芝JEM-1010 日本电子公司透射电镜2实验方法2.1阿霉素肾损伤模型的制备取60只大鼠，♀♂各半，体重220～±20g，随机分为6组，每组10只，即空白对照组、肾炎模型组、阳性醋酸泼尼松(13mg/kg)组、本发明中药组(4.2g生药/kg；2.1g生药/kg；1.0g生药/kg)三个剂量组。除空白对照组外，其余各大鼠均一次性尾静脉注射阿霉素(7.5mg/kg)，于次日开始给药。
2.2给药方法灌胃给药量均按1m1/100g体重。空白对照组和肾炎模型组灌胃给予等量水，以上各受试组均每日灌胃一次连续4周。实验期间所有大鼠自由饮水、饮食。
2.3主要观察指标于第4周末，收集24h尿液，测定尿蛋白。称体重戊巴比妥钠40mg/kg腹腔麻醉，腹主动脉取血，分离血清测定血肌酐、尿素氮、血白蛋白含量，结果见表1-2。最后将大鼠处死，取肾组织用10％甲醛固定，HE染色，光镜观察。另取活体肾皮质2.5％(v/v)戊二醛先固定，1％(m/m)锇酸后固定，Epon618包埋，超薄切片，1％(m/m)醋酸铀染色，透射电镜观察。
2.4统计方法所有数据均用Spss10.0统计学软件作T检验统计处理。
3实验结果3.1对各组大鼠尿蛋白、血尿素氮含量的测定本发明中药(4.2g生药/kg；2.1g生药/kg)给药4周后与肾炎模型组比较均有明显地降低大鼠尿蛋白、血尿素氮的作用。结果见表1。
3.2对各组大鼠血肌酐、白蛋白含量的测定本发明中药治疗4周后，与肾炎模型相比较有明显地降低肾炎大鼠血肌酐、白蛋白的含量。结果见表2。
表1 对各组大鼠尿蛋白、血尿素氮的测定 X±SD n＝10

注各受试组与模型组相比较*P＜0.05)**P＜0.01表2 对各组大鼠血肌酐、白蛋白的测定X±SD N＝10

注与模型组比较*P＜0.05**P＜0.013.3肾脏形态的检查光镜模型大鼠肾小球肿大，球囊间隙增宽，镜下可见系膜细胞增生，炎性细胞浸润，部分视野下可见肾小管内蛋白管型。治疗各组肾小球病理改变较模型组减轻。模型组肾小球基底膜明显增厚，部分肾小球中可见到增厚的基底膜呈双轨状，本发明中药高、中、低剂量组、基底膜增厚较模型组减轻，其中本发明中药高剂量组作用较明显。
电镜模型组可见上皮下大量电子致密物沉积，肾小球基底膜明显增厚，足细胞肿胀、足突融合，可见内皮细胞肿胀、破坏。本发明中药高、中剂量组上皮下电子致密物明显减少，部分有吸收现象，基底膜增厚程度减轻，足细胞肿胀减轻、足突部分恢复，未见内皮细胞破坏。本发明中药低剂量组基底膜增厚明显，但较模型组减轻，仍可见大量钉突，足突部分恢复，未见内皮细胞破坏。
4结论本研究结果表明本发明中药组(4.2g生药/kg、2.1g生药/kg)对肾炎模型大鼠具有明显降低尿蛋白，血肌酐和尿素氨水平及增加血白蛋白作用。能显著减轻肾炎模型大鼠所致的肾小球毛细血管增厚的基膜。由此可见，本发明中药对大鼠实验性肾炎有较显著的改善作用，通过本试验可对其临床应用提供理论依据。
5参考文献[1]徐叔云.药理实验方法学[M].北京人民卫生出版社，1982.1071. 陈奇.中药药理研究方法[M].北京人民卫生出版社，1993.712. 谢强敏，等.肾康宁片对大鼠实验性肾炎的作用[J].
中药药理与临床，1998，14(4)3具体实施方式
实施例1 制备片剂按下述重量配比称取原料生地黄100g 山药100g 泽泻 50g 土茯苓100g 桔梗100g白茅根150g 杜仲60g 益母草100g 西洋参30g 人参10g丹参 50g 黑豆100g 白花蛇舌草50g制备方法取组方中山药、土茯苓、桔梗粉碎成细粉，将组方中丹参、人参、西洋参分别粉碎成细粉；剩余生地黄、杜仲、白花蛇舌草、黑豆、益母草、白茅根、泽泻用水提取二次，第一次1.5小时，加水8倍量，第二次1小时，加水7倍量，每次提取水温98-102℃，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.35-1.40(60±5℃热测)的浸膏；浸膏加入山药、土茯苓、桔梗细粉，混匀，制成大颗粒，真空干燥，干固物粉碎成细粉，混匀，分别加入丹参、人参、西洋参细粉，混合均匀，制粒，压片，包薄膜衣制成约1076片(每片0.48g，含生药0.92g)，即得。用法用量，口服，一次5片，一日3次。
实施例2 制备胶囊剂按下述重量配比称取原料生地黄120g 山药160g 泽泻 60g 土茯苓150g 桔梗150g白茅根200g 杜仲100g 益母草160g 西洋参40g 人参20g丹参 120g 黑豆160g 白花蛇舌草80g制备方法取组方中山药、土茯苓、桔梗粉碎成细粉，将组方中丹参、人参、西洋参分别粉碎成细粉；剩余生地黄、杜仲、白花蛇舌草、黑豆、益母草、白茅根、泽泻用水提取二次，第一次1.5小时，加水8倍量，第二次1小时，加水7倍量，每次提取水温98-102℃，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.35-1.40(60±5℃热测)的浸膏；浸膏加入山药、土茯苓、桔梗细粉，混匀，制成大颗粒，真空干燥，干固物粉碎成细粉，混匀，分别加入丹参、人参、西洋参细粉，混合均匀，制粒，装胶囊，制成1310粒(每粒0.6g，含生药1.16g)，即得。用法用量，口服，一次4粒，一日3次。
实施例3 制备片剂按下述重量配比称取原料生地黄80g 山药80g 泽泻 40g 土茯苓50g 桔梗50g白茅根100g 杜仲50g 益母草80g 西洋参20g 人参6g丹参 40g 黑豆80g 白花蛇舌草40g制备方法取组方中山药粉碎成细粉，将组方中丹参、人参、西洋参分别粉碎成细粉；剩余生地黄、杜仲、白花蛇舌草、黑豆、益母草、白茅根、泽泻、桔梗用水提取二次，第一次1.5小时，加水8倍量，第二次1小时，加水7倍量，每次提取水温98-102℃，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.35-1.40(60±5℃热测)的浸膏；土茯苓乙醇提取两次，每次提取1.5小时，提取温度78-82℃，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.30-1.35(60±5℃热测)的浸膏；两种浸膏加入山药细粉及适量淀粉或糊精，混匀，制成大颗粒，真空干燥，干固物粉碎成细粉，混匀，分别加入丹参、人参、西洋参细粉及适量糖粉，混匀，制成颗粒770g(每g含生药0.92g)，即得。用法用量，口服，一次5g，一日3次。
权利要求
1.一种预防和治疗早期糖尿病肾病的中药，其特征在于是由下列重量配比的原料制成的制剂生地黄 80-120份 山药 80-160份泽泻40-60份土茯苓 50-150份 桔梗 50-150份白茅根 100-200份杜仲50-100份 益母草 80-160份西洋参 20-40份人参6-20份丹参 40-120份黑豆80-160份白花蛇舌草40-80份。
2.根据权利要求1所述一种预防和治疗早期糖尿病肾病的中药及其制剂，其中各原料最佳重量配比是生地黄 100份 山药 100份 泽泻 50份 土茯苓 100份桔梗 100份 白茅根 150份 杜仲 60份 益母草 100份西洋参 30份 人参 10份丹参 50份 黑豆100份白花蛇舌草50份。
3.根据权利要求1所述一种预防和治疗早期糖尿病肾病的中药及其制剂，其特征在于所说的制剂是任何一种药剂学上所说的剂型。
4.根据权利要求3所述一种预防和治疗早期糖尿病肾病的中药及其制剂，其特征在于所说的药剂是片剂、胶囊剂、颗粒剂。
5.根据权利要求1所述一种预防和治疗早期糖尿病肾病的中药及其制剂，其制备方法是取组方中山药、土茯苓、桔梗粉碎成细粉，将组方中丹参、人参、西洋参分别粉碎成细粉；剩余生地黄、杜仲、白花蛇舌草、黑豆、益母草、白茅根、泽泻用水提取二次，第一次1.5小时，加水8倍量，第二次1小时，加水7倍量，每次提取水温98-102℃，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.35-1.40(60±5℃热测)的浸膏；浸膏加入山药、土茯苓、桔梗细粉，混匀，制成大颗粒，真空干燥，干固物粉碎成细粉，混匀，分别加入丹参、人参、西洋参细粉，混合均匀，制成任何一种药剂学上所说的剂型。
全文摘要
本发明涉及一种预防和治疗早期糖尿病肾病的中药，发明的目的是克服现有技术的不足，依据祖国医学辩证论治原则，公开一种具有益气养阴、补肾健脾、活血化瘀、利水消肿、清解余毒功效之内服药物；本发明是以西洋参、人参、丹参、生地黄、山药、泽泻、土茯苓、桔梗、白茅根、杜仲、益母草、黑豆及白花蛇舌草共十三味原料组成，并根据每味中药不同特性，分别以粉碎成细粉，用水提取等预处理后，再按比例混合制成片剂、胶囊剂、颗粒剂等剂型；本发明配方独特，药效研究资料证明适用于预防和治疗早期糖尿病肾病，对症见神疲乏力、腰酸腿软、面浮肢肿、头晕及蛋白尿等有极好的效果，且无毒副作用，值得推广使用。
文档编号A61P13/12GK1981856SQ20051012236
公开日2007年6月20日 申请日期2005年12月15日 优先权日2005年12月15日
发明者邵世宏 申请人:天津同仁堂股份有限公司