生脉注射剂的质量控制方法

专利名称：生脉注射剂的质量控制方法
技术领域：
本发明是一种生脉注射剂的质量控制方法，属于质量控制的技术领域、特别是一种对于中药注射制剂的质量控制方法。
背景技术：
生脉注射剂以人参、麦冬、五味子为原料制成，具有益气养阴、复脉固脱的功效，用于气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气虚、四肢厥冷及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克，目前临床上还用于治疗冠心病心绞痛、脾胃虚弱证、急性病毒性心肌炎、恶性肿瘤、小儿重症肺炎、病毒性肺炎、病毒性肝炎、视神经萎缩、糖尿病、颈椎病、银屑病、突发性耳聋等疾病；是由传统的生脉散改剂而成，它克服了传统制剂起效慢的缺点，许多发明人及药品企业对其做了大量的研究工作，如专利申请号为“93110807.1”，名称为“生脉注射液及其制备工艺”的申请、专利申请号为“96117457.9”，名称为“一种生脉注射液及其制备方法”的申请；申请人于文勇也曾经向中国专利局申请了名称为“一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法”、专利申请号为02153312.1的发明专利，但是药物制剂必须要在保证产品质量稳定可控安全的基础之上，才能不断的更新发展，为了更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地，需要研究控制该注射液质量的方法；目前，在生脉制剂的相关药物制剂中，一般仅以人参皂苷Re、Rb1为检测指标，但是它根本不能全面反应产品的质量，仅以此用来控制注射液的质量不是十分合理；如果用别的指标进行控制，由于没有现成的检测方案、检测条件等等，所以比较难于实施。

发明内容
本发明的目的在于提供一种生脉注射剂的质量控制方法，这种方法向相关的生产、检测机构提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等等；以便更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地。
本发明是这样构成的生脉注射剂的质量控制方法，包括以下全部或部分内容(1)生脉注射剂的指纹图谱测试，包括以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱和以五味子成分特征为主的指纹图谱中的一种或几种；(2)红参或人参药材、麦冬药材、五味子药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′、假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分成分的鉴别测试方法；(3)人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′、假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、总皂苷、总木脂素、总多糖中全部或部分成分的含量测试方法。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，该方法包括如下指纹图谱中的一种或两种a、采用液相色谱法测试红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备取待测生脉注射制剂适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备取适量红参或人参和麦冬药材中的主要活性成分对照品，包括人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元、麦冬皂苷D′中的一种，用水或甲醇或乙醇溶解，定容至合适浓度，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相A为0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钠水溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钾水溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸氢二钠水溶液或水或0.1％～5％冰醋酸溶液或0.1％～5％甲酸溶液或0.02％～5％磷酸溶液；B为10％～100％乙腈溶液或10％～无水甲醇溶液，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～50个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测注射剂的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部
I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00；II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；III.待测注射剂指纹图谱中有30％～80％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土50％；b、采用液相色谱法测试以五味子成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备取待测生脉注射制剂适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备取适量五味子药材中的主要活性成分对照品，包括五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中的一种，用水或甲醇或乙醇溶解，定容至合适浓度，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为乙腈或甲醇，流动相B为水或0.01％～3％磷酸溶液或0.1％～5％冰醋酸溶液或0.1％～5％甲酸溶液，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190-410nm范围内的一个或几个，柱温在20～60℃范围内；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～50个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中五味子成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测注射剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00；II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；III.待测注射剂指纹图谱中有30％～80％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土50％。
(共有峰面积的比值是指以参照物峰面积作为1，计算各共有指纹峰面积与参照物峰面积的比值)所述的生脉注射剂的质量控制方法，该方法包括如下指纹图谱中的一种或两种a、采用液相色谱法测定以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱
(1)供试品溶液的制备精密称取待测生脉注射制剂适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1适量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈-水80∶20，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，流动相B的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由80％降至25％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～30个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测生脉注射剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％；III.待测注射剂指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土30％；b、采用液相色谱法测定以五味子成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备精密称取待测生脉注射制剂适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取五味子醇甲对照品适量，加水制成每1ml含0.1mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为甲醇-水，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至6分钟，甲醇的比例为68％，从6分钟至8分钟，甲醇的比例由68％上升至76％，从8分钟至10分钟，甲醇的比例为76％，从10分钟至15分钟，甲醇的比例由76％降至68％，从15分钟至60分钟，甲醇的比例为68％；流速为1.0ml/min，检测波长为250±2nm，柱温为30℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～30个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中五味子成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测生脉注射剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％；III.待测注射剂指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土30％。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容a、注射剂中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五昧子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷或乙醚或醋酸乙酯或正己烷或10％～无水乙醇或10％～无水甲醇提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷或醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五昧子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中的一种或几种制备对照溶液；五味子对照药材溶液的制备取五味子对照药材适量，加三氯甲烷或乙醚或醋酸乙酯或正己烷或10％～无水乙醇或10％～无水甲醇提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷或醋酸乙酯溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种对照品；分别加三氯甲烷或醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以石油醚(30～60℃)或石油醚(60～90℃)∶甲酸乙酯或醋酸乙酯∶甲酸或乙酸＝2～40∶0.2～15∶0.1～5的上层溶液或苯或甲苯∶醋酸乙酯或甲酸乙酯＝1～30∶0.2～10或正己烷∶苯或甲苯∶甲酸乙酯或醋酸乙酯∶甲酸或乙酸＝0.2～5∶0.5～10∶1～15∶0.1～5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm或254nm检视或喷以2％～20％变色酸-浓硫酸溶液或2％～20％磷钼酸乙醇溶液或茴香醛硫酸溶液，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰或碘熏显色，供试品色谱中，在与对照药材色谱或者对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；b、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～80％∶95％～20％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱中的主峰有保留时间一致的色谱峰；c、注射剂中麦冬的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷-甲醇混合溶液或正丁醇或三氯甲烷或醋酸乙酯或二氯甲烷提取，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，加三氯甲烷-甲醇混合溶液或醋酸乙酯或正丁醇或三氯甲烷或二氯甲烷提取，滤过，蒸干，残渣加三氯甲烷或二氯甲烷溶解，作为对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯或三氯甲烷或二氯甲烷∶甲醇或乙醇∶冰醋酸或甲酸或水＝8～300∶0.5～100∶0.01～30或醋酸乙酯或甲酸乙酯∶吡啶∶水＝0.2～10∶0.1～5∶0.2～10为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm或254nm下检视或喷以1％～50％硫酸或香草醛试剂或1％～25％香荚兰醛试剂或茴香醛试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点；d、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，用水溶解后用正丁醇或乙醚或醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品，分别加甲醇或乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷∶甲醇或乙醇∶水＝3～50∶1～15∶0.1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％～50％硫酸乙醇试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；e、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝1％～99％∶99％～1％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；f、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加硫酸或盐酸水解后调节pH至中性，蒸干，残渣用三氯甲烷或二氯甲烷或醋酸乙酯或甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品，分别加三氯甲烷或二氯甲烷或醋酸乙酯或甲醇或乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以正己烷或环己烷或甲醇或乙醇∶醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或甲酸乙酯∶水＝0.2～15∶0.2～40∶0.1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％～50％硫酸乙醇试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后加硫酸或盐酸水解，取出，放至室温，调pH至中性后用三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解后用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～95％∶95％～5％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
h、注射剂中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，用正丁醇或乙醇或甲醇或醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷或二氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷或二氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种对照品，分别加甲醇或乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷或正己烷或环己烷∶醋酸乙酯或甲酸乙酯∶甲醇或乙醇或丙酮∶水＝5～40∶10～100∶5～50∶0.2～30在10℃以下放置的下层溶液或正丁醇∶醋酸乙酯或甲酸乙酯∶水＝1～10∶0.2～2∶1～15的上层为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％～50％硫酸乙醇试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；i、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸溶液＝5％～40％∶95％～60％为流动相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容a、注射剂中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五昧子酯乙中一种或几种，制备对照溶液；五味子对照药材溶液的制备取五味子对照药材适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(30～60℃)∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇∶水＝65％∶35％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；c、注射剂中麦冬的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷-甲醇7∶3混合溶液提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，同法制成对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯∶甲醇∶冰醋酸＝80∶5∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰；d、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，用水溶解后用正丁醇萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；e、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的液相色谱鉴别
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；f、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加3％硫酸水解4小时，取出，放至室温，调节pH至中性，滤过，滤液挥干，残渣用三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯∶水＝1∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，90℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后用3％硫酸回流4小时，取出，放至室温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，提取液挥干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；按以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；h、注射剂中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，用正丁醇提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照药材溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶40∶22∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；i、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂含量的测试方法应包括以下全部或部分内容a、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸溶液＝5％～40％∶95％～60％为流动相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；以外标法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于0.8mg；每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.4mg；每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于0.5mg；(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于1.7mg；b、注射剂中总皂苷的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加蒸馏水或甲醇或乙醇适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取适量，置量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加1％～50％香草醛-冰醋酸溶液0.1ml～10ml，高氯酸0.1ml～15ml，摇匀，30℃～80℃水浴上加热3～50分钟，取出，立即以冰水浴或流水冷却，精密加冰醋酸至刻度，摇匀，作为供试品溶液，以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf或麦冬皂苷B或麦冬皂苷D或麦冬皂苷D′为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547±10nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf或麦冬皂苷B或麦冬皂苷D或麦冬皂苷D′计，不得少于10mg；c、注射剂中总多糖含量测定单糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水溶解后用氢氧化钠试液调节pH至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；总糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解后加稀硫酸25ml，加热回流1～4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不得少于50mg；d、注射剂中总木脂素含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，和并提取液，挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇甲或五味子醇乙的甲醇或乙醇溶液为对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在254±10nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇甲或五味子醇乙计，不得少于1.5mg；
e、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～80％∶95％～20％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个，柱温在20～60℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.2mg；(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.025mg；(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.075mg；(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.3mg；f、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中的一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝1％～99％∶99％～1％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项。
(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.05mg；(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.05mg；(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.01mg；(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.11mg；g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后加硫酸或盐酸水解，取出，放至室温，调pH至中性后用三氯甲烷或正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～95％∶95％～5％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.01mg；(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.01mg；(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.01mg；(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于0.03mg。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂含量的测试方法应包括以下全部或部分内容a、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温为30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg；(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于3.4mg；b、注射剂中总皂苷的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml，摇匀，60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，用冰醋酸定至刻度，摇匀，作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1计，不得少于20mg；c、注射剂中总多糖含量测定单糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；总糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不得少于100mg；d、注射剂中总木脂素含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用醋酸乙酯提取，和并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇甲为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在254nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇甲计，不得少于3mg；e、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水65％∶35％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.4mg；(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.05mg；(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.10mg；(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.55mg；f、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90％∶10％为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.1mg；(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.1mg；(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.22mg；g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解，用3％硫酸回流4小时，取出，放至室温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.02mg；(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.02mg；(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于0.06mg。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂中的皂苷类、多糖类、木脂素类的全部或部分可测成分的总含量占制剂中扣除辅料量和水分量的总固体量的25％以上。
(总固体量是指内容物的重量减去辅料量和水分量后的重量)与现有技术相比，本发明能更加完善的控制以红参或人参、麦冬和五味子制成的中药注射剂产品的质量。本中药制剂的成分比较复杂，如果只用其中一、两种成分来说明其内在质量，具有一定的片面性，更无法判断其药效的指标成分。因此本申请人制定了以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱和以五味子成分特征为主的指纹图谱来全面控制注射剂的质量。但是由于生脉注射剂中的各药材之间所含的化学成分复杂，对指纹图谱的制定造成干扰，导致各部分指纹图谱特征不稳定，所以必须控制流动相等色谱条件，才能得到良好的指纹图谱。也就是说，生脉制剂的指纹图谱不是将红参或人参、麦冬和五味子药材或制剂的指纹图谱简单叠加就能得到的，由于处方中三种药材所含成分相互之间的干扰影响，导致生脉制剂中红参或人参和麦冬部分、五味子部分的指纹图谱特征峰发生改变，而只有采用本发明的条件，才能得到理想的指纹图谱。
通过实验证明，本发明质量控制方法对以红参或人参、麦冬和五味子制成的中药注射剂产品的质量控制更为有效，方法精密度、稳定性均较高。
实验例1 以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱的制备a、实验仪器、试剂及样品对照品人参皂苷Rg1中国药品生物制品检定所b、色谱条件与系统适应性实验1.色谱柱的选择研究过程中，选用了常规的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱，分别试用了Zorbax、Inertsil ODS-3、Diamonsil ODS(均为C18，4.6mm×200mm，5μm)三种牌号的色谱柱，结果显示三种牌号的色谱柱均可达到较好的分离效果，其中Diamonsil ODS色谱柱分离效果最好，柱效最高，可以达到5400(以参照物人参皂苷Rg1计算)。故最终选用DiamonsilODS色谱柱(4.6mm×200mm，5μm)为实验研究柱。
2.流动相的选择研究过程中分别考察了(1)甲醇-水(20∶80)，(2)乙腈-水(10∶90)，(3)乙腈-水(梯度洗脱)(4)A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水(80∶20)(梯度洗脱体积配比为从0分钟至5分钟，流动相B的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由80％降至25％)四种流动相系统。结果显示流动相(1)条件下，峰形较差，1小时内出峰较少，仍有不少组分滞留在后出峰；流动相(2)流动相条件下，峰形较差，分离不好；(3)条件下，峰拖尾严重，出峰不完全；流动相(4)条件下，峰形较好，出峰完全且分布均匀，故而最终被选用。
3.检测波长的确定研究中在A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水(80∶20)(梯度洗脱)流动相条件下，分别考察了在不同波段典型波长203、210、230、254下的色谱峰情况，结果显示，在203nm下色谱峰较多，峰形较好，故最终选用203nm作为检测波长。
4.仪器、色谱柱及积分参数4.1仪器参数选用了液相色谱分析领域主流配置和性能良好的Agilent 1100系列高效液相色谱仪，Chemstation色谱工作站。色谱柱为Diamonsil ODS(4.6mm×200mm，5μm)；柱温40℃，流速1.0ml/min。
4.2积分参数Slope Sensitivity1，peak width0.05，最小峰面积为参照物(S)峰峰面积的5％，最小峰高为S峰峰高的5％。如此设定可以避免一些很小面积的色谱峰(单峰面积占总峰面积小于0.5％)的计算，同时保证与参照物的相关性。
5.供试品溶液的制备精密称取本品适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，即得。
6.参照物溶液的制备人参皂苷Rg1为红参或人参主要活性成分之一，其积分面积在指纹图谱中所占比例较大且较稳定，同时兼顾中间体和药材的研究，因此选定人参皂苷Rg1作为参照物。
7.指纹图谱及技术参数根据10批样品制定标准指纹图谱，将供试品指纹图谱与标准指纹图谱比较，相似度均在0.90～1.00之间。
实验例2 以五昧子成分特征为主的指纹图谱的制备a、实验仪器、试剂及样品对照品五味子醇甲中国药品生物制品检定所。
b、色谱条件与系统适应性实验1.色谱柱的选择研究过程中，选用了常规的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱，分别试用了Zorbax、Inertsil ODS-3、Diamonsil ODS(均为C18，250mm×4.6mm，5μm)三种牌号的色谱柱，结果显示三种牌号的色谱柱均可达到较好的分离效果，其中Diamonsil ODS色谱柱分离效果最好，柱效最高，可以达到5400(以参照物五昧子醇甲计算)。故最终选用DiamonsilODS色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)为实验研究柱。
2.流动相的选择研究过程中分别考察了(1)甲醇-水(20∶80)，(2)乙腈-水(10∶80)，(3)乙腈-水(梯度洗脱)(4)甲醇-水(梯度洗脱体积配比为从0分钟至6分钟，甲醇的比例为68％，从6分钟至8分钟，甲醇的比例由68％上升至76％，从8分钟至10分钟，甲醇的比例为76％，从10分钟至15分钟，甲醇的比例由76％降至68％，从15分钟至60分钟，甲醇的比例为68％)四种流动相系统。结果显示流动相(1)条件下，峰形较差，1小时内出峰较少，仍有不少组分滞留在后出峰；流动相(2)流动相条件下，峰形较差，分离不好；(3)条件下，峰拖尾严重，出峰不完全；流动相(4)条件下，峰形较好，出峰完全且分布均匀，故而最终被选用。
3.检测波长的确定研究中在甲醇—水(梯度洗脱)流动相条件下，分别考察了在不同波段典型波长203、210、230、250、300nm下的色谱峰情况，结果显示，在250nm下色谱峰较多，峰形较好，故最终选用250nm作为检测波长。
4.仪器、色谱柱及积分参数4.1仪器参数选用了液相色谱分析领域主流配置和性能良好的Agilent 1100系列高效液相色谱仪，Chemstation色谱工作站。色谱柱为Diamonsil ODS(4.6mm×200mm，5μm)；柱温30℃，流速1.0ml/min。
4.2积分参数Slope Sensitivity1，peak width0.05，最小峰面积为参照物(S)峰峰面积的5％，最小峰高为S峰峰高的5％。如此设定可以避免一些很小面积的色谱峰(单峰面积占总峰面积小于0.5％)的计算，同时保证与参照物的相关性。
5.供试品溶液的制备精密称取本品适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，即得。
6.参照物溶液的制备五味子醇甲为五味子中主要活性成分之一，其积分面积在指纹图谱中所占比例较大且较稳定，同时兼顾中间体和药材的研究，因此选定五味子醇甲作为参照物。
7.指纹图谱及技术参数根据10批样品制定标准指纹图谱，将供试品指纹图谱与标准指纹图谱比较，相似度均在0.90～1.00之间。
实验例3 生脉注射剂中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的薄层色谱鉴别方法为了突出五味子的特征，选择了五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五昧子酯甲、五味子酯乙作为其特征斑点，但是由于药材中存在较多与五味子醇甲、五味子醇乙、五昧子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层板和展开条件对五味子五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙进行了展开

经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，在此条件下，五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例4 生脉注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别方法为了突出五味子的特征，除了薄层鉴别方法以外，选择了五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下色谱柱和流动相对五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素进行了分离


经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，甲醇-水(65∶35)为流动相，在此条件下，五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素保留时间适中，峰行尖锐，对称，阴性无干扰。
实验例5 生脉注射剂中麦冬的薄层色谱鉴别方法为了突出麦冬的特征，选择了麦冬对照药材作为其特征斑点，但是由于药材中存在较多结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层板和展开条件对麦冬进行了展开

经过筛选，确定了以硅胶GF254薄层板为固定相，以甲苯-甲醇-冰醋酸(80∶5∶0.1)为展开剂，在此条件下，主斑点的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例6 生脉注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的薄层色谱鉴别方法为了突出麦冬皂苷的特征，选择了麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′作为其特征斑点，但是由于药材中存在较多与麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层板和展开条件对麦冬进行了展开


经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以醋酸乙酯-甲醇-水(15∶5∶1)为展开剂，在此条件下，麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′斑点的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例7 生脉注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的液相色谱鉴别方法为了突出麦冬皂苷的特征，除了薄层鉴别方法以外，选择了麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下色谱柱和流动相对麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′进行了分离

经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，乙腈-水(90∶10)为流动相，在此条件下，麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′保留时间适中，峰行尖锐，对称，阴性无干扰。
实验例8 生脉注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的薄层色谱鉴别方法为了突出麦冬皂苷元的特征，选择了假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元作为其特征斑点，但是由于药材中存在较多与假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层板和展开条件对麦冬进行了展开

经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以正己烷-醋酸乙酯-水(1∶1∶1)为展开剂，在此条件下，假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例9 生脉注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的液相色谱鉴别方法为了突出麦冬皂苷元的特征，除了薄层鉴别方法以外，选择了假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下色谱柱和流动相对假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元进行了分离

经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，乙腈-水(90∶10)为流动相，在此条件下，麦假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元保留时间适中，峰行尖锐，对称，阴性无干扰。
实验例10 生脉注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf的薄层色谱鉴别方法为了突出红参或人参的特征，选择了人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf作为其特征斑点，但是由于药材中存在较多与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层板和展开条件对麦冬进行了展开

经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，在此条件下，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例11 生脉注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的液相色谱鉴别方法为了突出红参或人参的特征，除了薄层鉴别方法以外，选择了人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下色谱柱和流动相对人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re进行了分离


经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％，在此条件下，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re保留时间适中，峰行尖锐，对称，阴性无干扰。
实验例12 生脉注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定方法1.仪器与试药(1)仪器Agilent1100高效液相色谱仪，chemstationsys工作站。TU-1800SPC紫外分光光度计。
(2)试药人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中国药品生物制品检定所；2.检测波长的选择精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re，分置10ml量瓶中，加甲醇稀释制成每1ml含0.5mg的溶液，在200-400nm波长范围扫描。人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re均在203nm处有最大吸收，因此选择203nm作为含量测定的检测波长。
3.色谱条件Dikma ODS(4.6mm×250mm，5um)；流动相乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；检测波长为203nm；流速1.0ml/min。
4.对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re适量，精密称定，加甲醇制成1ml含人参皂苷Rg10.30mg，人参皂苷Rb10.30mg，人参皂苷Re 0.2mg的混合溶液。
5.供试品溶液的制备取装量差异项下本品5瓶，取内容物，混匀，从中取约0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
在此条件下，阴性样品不干扰样品中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re的测定，且分离度好。
6.人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re的线性关系 精密称取人参皂苷Rg110.24mg、人参皂苷Rb110.09mg、人参皂苷Re7.54mg，共置10ml量瓶中，加流动相定至刻度，摇匀，作为对照品溶液(每1ml中含人参皂苷Rg11.024mg，人参皂苷Rb11.009mg，含人参皂苷Re0.754mg)，精密量取2.5ml，置10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为对照品稀释溶液。(每1ml中含人参皂苷Rg10.256mg，含人参皂苷Rb10.25225mg，含人参皂苷Re0.1885mg)精密吸取对照品溶液3μl、6μl、10μl；对照品稀释溶液2μl、5μl、10μl；注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的量为横坐标做图，绘制标准曲线。
人参皂苷Rg1线性关系

回归方程Y＝345.01X+1.20；决定系数γ＝0.9996；人参皂苷Rg1在0.512～10.240μg范围内线性关系良好。
人参皂苷Rb1线性关系

回归方程Y＝282.95X-0.44；决定系数γ＝0.9999；
人参皂苷Rb1在0.5045～10.090μg范围内线性关系良好。
人参皂苷Re线性关系

回归方程Y＝490.12X+1.11；决定系数γ＝0.9999；人参皂苷Re在0.3770～7.5400μg范围内线性关系良好。
7.对照品精密度和稳定性试验精密吸取标准曲线项下人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re对照品稀释溶液(每1ml中含人参皂苷Rg10.256mg，参皂苷Rb10.25225mg，含人参皂苷Re0.1885mg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，在0、6、12、24、48小时进样测定。
对照品溶液精密度试验

结果表明，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re对照品溶液精密度和稳定性良好。
8供试品溶液稳定性试验取 重量差异项下本品5瓶，取内容物，混匀，从中取约0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加流动相使溶解并定至刻度，摇匀，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，分别在0、6、12、24、48小时进样测定。
供试品溶液稳定性试验结果


结果表明，供试品溶液稳定性良好。
9.重复性试验 取本品装量差异项下粉针5瓶，取内容物，研细，从中取约0.5g(共5份)，精密称定，分置5ml量瓶中，加流动相使溶解并定至刻度，摇匀，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
重复性试验

10.加样回收率试验 采用加样回收法，取重量差异项下本品，取丙容物，混匀，从中取约250mg(共5份)，精密称定，分置5ml量瓶中；精密称取人参皂苷Rg111.58mg，人参皂苷Rb110.84mg，人参皂苷Re5.76mg，共置25ml量瓶中，加流动相适量超声处理使溶解，取出，放至室温，加流动相至刻度，摇匀，精密量取1ml(共5份)，分置上述5ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射剂中人参皂苷Rg1含量0.1812％；生脉注射剂中人参皂苷Rb1含量0.1695％；生脉注射剂中人参皂苷Re含量0.0897％；人参皂苷Rg1加样回收率试验


人参皂苷Rg1平均回收率＝97.72％；RSD＝0.93％人参皂苷Rb1加样回收率试验

人参皂苷Rb1平均回收率＝98.08％；RSD＝1.16％人参皂苷Re加样回收率试验

人参皂苷Re平均回收率＝96.93％；RSD＝1.15％11.三批中试样品含量测定取注射用生脉样品三批，按正文所述方法处理。
三批样品含量测定结果

从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例13 生脉注射剂中人参总皂苷含量测定方法仪器、试药(1)仪器普析通TU-1810SPC紫外/可见分光光度仪SARTORIUS BP211D电子分析天平(2)试药香草醛 分析纯 天津市光复精细化工研究所甲醇 色谱纯 J.T.Baker冰醋酸 分析纯 上海试剂一厂高氯酸 分析纯 天津市鑫源化工厂2检测波长的选择 精密称取人参皂苷Rg16.11mg，置100ml量瓶中，加适量甲醇超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取1.2ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，在700～400nm波长范围内进行扫描，结果表明，人参皂苷Rg1在547nm处有最大吸收，空白无干扰，因此选择547nm为分光光度法测定生脉注射剂中人参总皂苷的检测波长。
3线性关系的考察 精密称取人参皂苷Rg1对照品6.85mg，置100ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率250W，频率33KHZ)使溶解，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml，分置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VA)，在547nm的波长处测定吸收度。以吸收度为纵坐标，人参皂苷Rg1的量(μg)为横坐标，绘制标准曲线。
回归方程Y＝0.0049X-0.0077；r＝0.999人参皂苷Rg1在27.4～137.0μg范围线性良好。
人参皂苷Rg1标准曲线测定数据

4精密度试验 精密量取人参皂苷Rg1对照品溶液(0.0685mg/ml)1.2ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版-部附录VA)，在547nm的波长处测定吸收度，连续测定5次。
精密度实验

5稳定性试验5.1对照品溶液的稳定性试验 精密量取人参皂苷Rg1对照品溶液(0.0727mg/ml)1.2ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VA)，在547nm的波长处测定吸收度，分别在0、10、20、40、60分钟时测定。
对照品溶液稳定性实验

5.2供试品溶液的稳定性实验 取本品装量差异项下粉针5瓶，取内容物，研细，从中取约100mg，精密称定，置10ml量瓶中，加水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取0.2ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VA)，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，分别在0、10、20、40、60分钟时测定。
供试品溶液稳定性实验

6重复性试验 取本品装量差异项下粉针5瓶，取内容物，研细，从中取约100mg(共5份)，分置10ml量瓶中，加水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取0.2ml，分置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VA)，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，即得。
重复性实验

7回收率试验 采用加样回收法，取本品装量差异项下粉针5瓶，取内容物，研细，从中取约50mg(共5份)，精密称定，分置10ml量瓶中；另取人参皂苷Rg1对照品约1.8mg(共5份)，精密称定，分置上述10ml量瓶中，加水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取0.2ml，置10ml具塞试管中，按正文测定法项下进行操作，以随行溶剂为空白，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷Rg1的含量，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射剂中总皂苷的含量3.666％人参总皂苷加样回收率实验

平均回收率＝99.53％RSD＝1.88％8三批中试样品含量测定取本品样品三批，按正文所述方法处理。
三批样品含量测定结果

从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射剂中人参总皂苷的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例14 生脉注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定方法1.仪器与试药(1)仪器Agilent1100高效液相色谱仪，chemstationsys工作站；TU-1800SPC紫外分光光度计；AE240电子天平。
(2)试药五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中国药品生物制品检定所；2.检测波长的选择 精密称取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品适量，分别加甲醇稀释至刻度，摇匀，得每1ml分别含五味子醇甲0.10mg，五味子甲素0.10mg，五味子乙素0.10mg的溶液，分别在200-400nm波长范围扫描。结果表明五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素均在250nm处有最大吸收，因此选择250nm作为含量测定的检测波长。
3.色谱条件Dikma ODS(4.6×250mm，5um)；流动相甲醇-水(65∶35)为流动相；检测波长为250nm；流速1.0ml/min。
4.系统适用性试验4.1对照品溶液的制备 精密称取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品适量，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲0.02mg，五味子甲素0.003mg，五味子乙素0.005mg的对照品混合溶液，即得。
4.2供试品溶液的制备 取生脉注射液作为供试品溶液。
4.3阴性供试品溶液的制备 称取不含五味子的阴性样品，照供试品溶液的制备方法制备，作为阴性供试品溶液。
分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。由图可知，供试品中五味子醇甲、五味子乙素、五味子甲素峰分离良好，与相近峰分离清晰，完全，阴性供试品中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素峰无干扰。
5.线性关系考察 精密称取五味子醇甲对照品10.27mg，五味子甲素对照品10.03mg，五味子乙素对照品9.86mg，分置50ml量瓶中，分别加甲醇适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取五味子醇甲对照品溶液2ml，五味子甲素对照品溶液0.3ml，五味子乙素对照品溶液0.6ml，共置10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，精密吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10μl，注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，进样量(μg)为横坐标做图，绘制标准曲线。
五味子醇甲线性关系考察


回归方程Y＝1472.5X-0.495；决定系数γ＝0.9998；五味子醇甲在0.08216～0.4108μg范围内线性关系良好。
五味子甲素线性关系考察

回归方程Y＝10191X+0.749；决定系数γ＝0.9999；五味子甲素在0.012036～0.060180μg范围内线性关系良好。
五味子乙素线性关系考察

回归方程Y＝7993.2X-0.331；决定系数γ＝0.9999；五味子乙素在0.023664～0.11832μg范围内线性关系良好。
6.精密度试验 精密吸取对照品混合溶液(每1ml分别含五味子醇甲20.54μg，五味子甲素3.009μg，五味子乙素5.916μg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，连续测定5次，考察对照品溶液的精密度。
对照品精密度试验

结果表明，对照品溶液精密度良好。
7.稳定性试验精密吸取生脉注射液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、6、12、24、48小时进样，以外标一点法进行计算，即得。
对照品溶液稳定性试验

结果表明，对照品溶液稳定性良好。
8.重复性试验 精密吸取生脉注射液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
重复性试验

结果表明，重复性良好。
9.加样回收率试验 采用加样回收法，精密量取生脉注射液5ml，分置10ml量瓶中；精密量取对照品混合溶液(每1ml分别含五味子醇甲0.1044mg，五味子甲素0.01446mg，五味子乙素0.02552mg)1ml(共5份)，分置上述10ml量瓶中，加甲醇约6ml，振摇，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射液中五味子醇甲含量0.2535mg/支；生脉注射液中五味子甲素含量0.0344mg/支；生脉注射液中五味子乙素含量0.0668mg/支。
五味子醇甲加样回收率试验

五味子醇甲平均回收率＝98.70％；RSD＝1.00％。
五味子甲素加样回收率试验

五味子甲素平均回收率＝97.65％；RSD＝1.01％。
五味子乙素加样回收率试验

五味子乙素平均回收率＝96.62％；RSD＝1.19％。
10.三批中试样品含量测定取本品样品三批，按正文所述方法处理。
三批样品含量测定结果

从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射液中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例15 生脉注射剂中总木脂素的含量测定1仪器与试药(1)主要仪器紫外分光光度计 TU-1810SPC 北京普析通用仪器有限责任公司电子分析天平BP211D SARTORIUS超声波清洗机KQ250DB 昆山市超声仪器有限公司(2)试药五味子醇甲中国药品生物制品检定所乙醇 分析纯阿托兹精细化工有限公司2检测波长的选择 取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，作为对照品溶液。量取生脉注射液4ml，置50ml量瓶中，加甲醇溶液适量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，用甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。吸取五味子醇甲对照品溶液，供试品溶液，按正文总木脂素测定项下拟定的方法，在200～400nm波长范围内进行扫描，结果表明，对照品溶液与供试品溶液均在250nm有最大吸收，溶剂无干扰，因此选择250nm作为分光光度法测定生脉注射液中总木脂素含量的检测波长。
3对照品溶液的制备 取五味子醇甲对照品15mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶液适量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，加甲醇溶液至刻度，摇匀，即得(每1ml中含五味子醇甲0.3mg)。
4标准曲线的制备 精密量取对照品溶液(C＝0.2908mg/ml)0.1ml，0.2ml，0.4ml，0.6ml，0.8ml、1.0ml，分置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在250nm波长处测定吸收度，以浓度(μg/ml)为横坐标，吸收度为纵坐标做图，绘制标准曲线。
总木脂素标准曲线测定结果


回归方程Y＝0.0418x+0.0003；相关系数γ＝0.9999；结果表明五味子醇甲在2.908～29.080μg/ml范围内线性良好。
经计算，五味子醇甲的标准曲线过原点，因此选用外标一点法测定生脉注射剂中总木脂素的含量。
5精密度试验 精密吸取五味子醇甲对照品溶液(浓度0.2908mg/ml)0.6ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在250nm波长处测定吸收度，重复测定5次。
精密度试验

结果表明，对照品溶液精密度良好。
6稳定性试验6.1对照品溶液稳定性试验 精密吸取五味子醇甲对照品溶液(浓度0.2908mg/ml)0.6ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在250nm波长处测定吸收度，分别在0、2、4、8、12小时重复测定一次。
对照品溶液稳定性试验

结果表明，对照品溶液稳定性良好。
6.2供试品溶液稳定性试验 精密量取生脉注射液4ml，置50ml量瓶中，加甲醇溶液适量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，用甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在250nm波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，分别在0、2、4、8、12小时重复测定一次。
供试品溶液稳定性试验

结果表明，供试品溶液在30min内稳定性良好。
7重复性试验 精密量取生脉注射液4ml(共5份)，分置50ml量瓶中，加甲醇溶液适量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，用甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在250nm波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，即得。
重复性试验

结果表明，重复性良好。
8加样回收率试验 采用加样回收法，精密量取生脉注射液2ml(共5份)，精密称定，分置50ml量瓶中，精密量取对照品溶液(C＝0.2722mg/ml)1.5ml，分置上述50ml量瓶中，加甲醇溶液适量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，用甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，在250nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射液中总木脂素的含量为2.04mg/支。
加样回收率试验

平均回收率＝97.91％，RSD＝0.95％。
9样品的含量测定 取本品三批样品，按照正文供试品溶液的制备和测定法项下的操作，测定样品含量。
总木脂素的含量测定


从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射剂中总木脂素的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例16 生脉注射剂中总多糖的含量测定方法单糖 取装量差异项下本品5瓶，取内容物，混匀，从中取约500mg，精密称定，置碘量瓶中，加蒸馏水60ml使溶解，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖(C6H12O6)，由此折算出每瓶单糖的含量。
总糖 取装量差异项下本品5瓶，取内容物，混匀，从中取约500mg，精密称定，置碘量瓶中，加蒸馏水20ml使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖(C6H12O6)，以此计算出样品每瓶中总糖的含量。
标准曲线 精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品50.24mg、101.87mg、149.58mg、201.36mg、252.81mg、300.79mg，分置碘量瓶中，加蒸馏水60ml使溶解，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖(C6H12O6)。以样品消耗滴定液体积(ml)为横坐标，以无水葡萄糖的量(mg)为纵坐标做图，绘制标准曲线。
无水葡萄糖标准曲线


回归方程Y＝8.9093x+0.3139；相关系数γ＝0.9999；结果表明无水葡萄糖在50.24～300.79μg范围内线性良好。
经计算，无水葡萄糖的标准曲线过原点，因此选用外标一点法测定生脉注射剂中总多糖的含量。
重复性实验 取装量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约500mg(5份)，按正文测定法项下操作，测定，即得。
重复性实验

回收率实验 采用加样回收法，取装量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约250mg(6份)，分置碘量瓶中；取在105℃干燥至恒重的无水葡萄糖约35mg，精密称定，分置上述碘量瓶中，加蒸馏水60ml使溶解，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖(C6H12O6)。
生脉注射剂单糖含量87.34mg/瓶。
无水葡萄糖加样回收率试验


平均回收率＝98.34％；RSD＝1.01％。
样品的含量测定 取本品中试样品三批，按正文供试品溶液的制备和测定法项下操作。
总多糖含量测定结果

从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射剂中总多糖的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例17 生脉注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的含量测定方法1.仪器与试药(1)仪器SHIMADZU 2010Aht高效液相色谱仪；TU-1810SPC紫外分光光度计；SARTORIUS BP211D电子分析天平。
(2)试药麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′2.检测波长的选择 精密称取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品适量，分别加甲醇制成每1ml各含0.1mg的溶液，分别在200-400nm波长范围扫描。结果表明麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′均在203nm处有最大吸收，因此选择203nm作为含量测定的检测波长。
3.色谱条件Dikma ODS(4.6×250mm，5um)；流动相乙腈-水(90∶10)为流动相；检测波长为203nm；流速1.0ml/min。
4.系统适用性试验4.1对照品溶液的制备 精密称取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品适量，加甲醇制成每1ml含麦冬皂苷B 0.007mg，麦冬皂苷D 0.007mg，麦冬皂苷D′0.002mg的对照品混合溶液，即得。
4.2供试品溶液的制备 取生脉注射液作为供试品溶液。
4.3阴性供试品溶液的制备 称取不含麦冬的阴性样品，照供试品溶液的制备方法制备，作为阴性供试品溶液。
分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。由图可知，供试品中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′峰分离良好，与相近峰分离清晰，完全，阴性供试品中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′峰无干扰。
5.线性关系考察 精密称取麦冬皂苷B对照品10.14mg，麦冬皂苷D对照品10.06mg，麦冬皂苷D′对照品6.59mg，分置50ml量瓶中，分别加甲醇适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取麦冬皂苷B对照品溶液0.7ml，麦冬皂苷D对照品溶液0.7ml，麦冬皂苷D′对照品溶液0.4ml，共置10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，精密吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10μl，注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，进样量(μg)为横坐标做图，绘制标准曲线。
麦冬皂苷B线性关系考察

回归方程Y＝774556.21X+69.80；决定系数γ＝0.9999；麦冬皂苷B在0.028392～0.14196μg范围内线性关系良好。
麦冬皂苷D线性关系考察

回归方程Y＝654544.16X-58.80；决定系数γ＝0.9999；
麦冬皂苷D在0.028168～0.14084μg范围内线性关系良好。
麦冬皂苷D′线性关系考察

回归方程Y＝1790354.70X+56.10；决定系数γ＝0.9999；麦冬皂苷D′在0.010544～0.052720μg范围内线性关系良好。
6.精密度试验 精密吸取对照品混合溶液(每1ml分别含麦冬皂苷B8.112μg，麦冬皂苷D8.048μg，麦冬皂苷D′2.636μg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，连续测定5次，考察对照品溶液的精密度。
对照品精密度试验

结果表明，对照品溶液精密度良好。
7.稳定性试验 精密吸取生脉注射液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得，分别在0、6、12、24、48小时进样测定。
对照品溶液稳定性试验

结果表明，对照品溶液稳定性良好。
8.重复性试验 精密吸取生脉注射液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
重复性试验

结果表明，重复性良好。
9.加样回收率试验采用加样回收法，精密量取生脉注射液5ml，分置10ml量瓶中；精密量取对照品混合溶液(每1ml分别含麦冬皂苷B0.03728mg，麦冬皂苷D0.03564mg，麦冬皂苷D′0.00928mg)1ml(共5份)，分置上述10ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率250W，频率33KHz)10分钟，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液10μ1，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射液中麦冬皂苷B含量0.0828mg/支；生脉注射液中麦冬皂苷D含量0.0825mg/支；生脉注射液中麦冬皂苷D′含量0.0209mg/支。
麦冬皂苷B加样回收率试验

麦冬皂苷B平均回收率＝98.48％；RSD＝0.70％。
麦冬皂苷D加样回收率试验


麦冬皂苷D平均回收率＝98.57％；RSD＝0.74％。
麦冬皂苷D′加样回收率试验

麦冬皂苷D′平均回收率＝98.07％；RSD＝1.58％。
10.三批中试样品测定取本品样品三批，按正文所述方法处理。
三批样品含量测定结果

从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射液中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例18 生脉注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的含量测定方法1.仪器与试药(1)仪器SHIMADZU 2010Aht高效液相色谱仪；TU-1810SPC紫外分光光度计；SARTORIUS BP211D电子分析天平。
(2)试药假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元2.检测波长的选择 精密称取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品适量，分别加甲醇制成每1ml各含0.1mg的溶液，分别在200-400nm波长范围扫描。结果表明假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元均在203nm处有最大吸收，因此选择203nm作为含量测定的检测波长。
3.色谱条件Dikma ODS(4.6×250mm，5um)；流动相乙腈-水(90∶10)为流动相；检测波长为203nm；流速1.0ml/min。
4.系统适用性试验4.1对照品溶液的制备 精密称取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品适量，加甲醇制成每1ml含假叶树皂苷元0.002mg，薯蓣皂苷元0.002mg，鲁斯可皂苷元0.002mg的对照品混合溶液，即得。
4.2供试品溶液的制备 精密量取生脉注射液10ml，置圆底烧瓶中，加3％硫酸10ml回流4小时，取出，放至室温，用3％氢氧化钠溶液调pH至中性，用三氯甲烷提取3次，每次15ml，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇适量使溶解并定量转移至10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液即得。
4.3阴性供试品溶液的制备 称取不含麦冬的阴性样品，照供试品溶液的制备方法制备，作为阴性供试品溶液。
分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。由图可知，供试品中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元峰分离良好，与相近峰分离清晰，完全，阴性供试品中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元峰无干扰。
5.线性关系考察 精密称取假叶树皂苷元对照品6.71mg，薯蓣皂苷元对照品6.94mg，鲁斯可皂苷元对照品6.63mg，共置50ml量瓶中，加甲醇适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取0.4ml，置10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，精密吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10μl，注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，进样量(μg)为横坐标做图，绘制标准曲线。
假叶树皂苷元线性关系考察

回归方程Y＝1469578.99X-42.60；决定系数γ＝0.9999；假叶树皂苷元在0.010736～0.053680μg范围内线性关系良好。
薯蓣皂苷元线性关系考察


回归方程Y＝1493533.86X-13.20；决定系数γ＝0.9999；薯蓣皂苷元在0.011104～0.055520μg范围内线性关系良好。
鲁斯可皂苷元线性关系考察

回归方程Y＝1934822.78X-7.60；决定系数γ＝0.9999；鲁斯可皂苷元在0.010608～0.053040μg范围内线性关系良好。
6.精密度试验精密吸取对照品混合溶液(每1ml分别含假叶树皂苷元2.684μg，薯蓣皂苷元2.776μg，鲁斯可皂苷元2.652μg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，连续测定5次，考察对照品溶液的精密度。
对照品精密度试验

结果表明，对照品溶液精密度良好。
7.稳定性试验 精密量取生脉注射液10ml，置圆底烧瓶中，加3％硫酸10ml回流4小时，取出，放至室温，用3％氢氧化钠溶液调pH至中性，用三氯甲烷提取3次，每次15ml，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇适量使溶解并定量转移至10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，滤过，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得，分别在0、6、12、24、48小时进样测定。
对照品溶液稳定性试验

结果表明，对照品溶液稳定性良好。
8.重复性试验 精密量取生脉注射液10ml(共5份)，精密称定，分置圆底烧瓶中，加3％硫酸10ml回流4小时，取出，放至室温，用3％氢氧化钠溶液调pH至中性，用三氯甲烷提取3次，每次15ml，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇适量使溶解并定量转移至10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，滤过，精密吸取10μl，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
重复性试验

结果表明，重复性良好。
9.加样回收率试验 采用加样回收法，精密量取生脉注射液5ml(共5份)，分置圆底烧瓶中；精密量取对照品混合溶液(每1ml分别含假叶树皂苷元0.00904mg，薯蓣皂苷元0.00948mg，鲁斯可皂苷元0.00848mg)1ml(共5份)，分置上述圆底烧瓶中，分别加3％硫酸10ml回流4小时，取出，放至室温，用3％氢氧化钠溶液调pH至中性，用三氯甲烷提取3次，每次15ml，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇适量使溶解并定量转移至10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射液中假叶树皂苷元含量0.0223mg/支；生脉注射液中薯蓣皂苷元含量0.0209mg/支；生脉注射液中鲁斯可皂苷元含量0.0226mg/支。
假叶树皂苷元加样回收率试验

假叶树皂苷元平均回收率＝97.70％；RSD＝1.13％。
薯蓣皂苷元加样回收率试验

薯蓣皂苷元平均回收率＝98.22％；RSD＝1.06％。
鲁斯可皂苷元加样回收率试验

鲁斯可皂苷元平均回收率＝97.82％；RSD＝1.06％。
10.三批中试样品测定取本品样品三批，按正文所述方法处理。
三批样品含量测定结果

从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射液中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
具体实施例方式实施例1采用液相色谱法测定以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备精密称取待测冻干粉针适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1适量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈-水80∶20，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，流动相B的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由80％降至25％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有11个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测冻干粉针中红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测冻干粉针指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测冻干粉针的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测冻干粉针指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；III.供试品指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各共有峰面积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例2采用液相色谱法测定以五味子成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备精密称取待测冻干粉针适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取五味子醇甲对照品适量，加水制成每1ml含0.1mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为甲醇-水，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至6分钟，甲醇的比例为68％，从6分钟至8分钟，甲醇的比例由68％上升至76％，从8分钟至10分钟，甲醇的比例为76％，从10分钟至15分钟，甲醇的比例由76％降至68％，从15分钟至60分钟，甲醇的比例为68％；流速为1.0ml/min，检测波长为250±2nm，柱温为30℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有17个(5)以(1)～(3)所述方法作为待测冻干粉针五味子成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测冻干粉针指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测冻干粉针的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测冻干粉针指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；III.待测冻干粉针指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各共有峰面积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例3采用液相色谱法测定以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备精密称取待测冻干粉针适量，加甲醇制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取人参皂苷Rb1适量，加乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸二氢钠溶液，流动相B为乙腈-水85∶15，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至4分钟，流动相B的比例为22％，从4分钟至40分钟，流动相B的比例由22％升至60％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为60％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由60％升至77％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由77％降至22％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有13个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测冻干粉针中红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测冻干粉针指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测冻干粉针的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测冻干粉针指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；III.待测冻干粉针指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各共有峰面积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例4采用液相色谱法测定以五味子成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备精密称取待测冻干粉针适量，加甲醇制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取五味子醇乙对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为乙腈-0.1％磷酸，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，乙腈的比例为60％，从5分钟至10分钟，乙腈的比例由60％上升至70％，从10分钟至12分钟，乙腈的比例为70％，从12分钟至20分钟，乙腈的比例由70％降至62％，从12分钟至60分钟，乙腈的比例为62％；流速为1.0ml/min，检测波长为250±2nm，柱温为30℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有20个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测冻干粉针中五味子成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测冻干粉针指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测冻干粉针的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测冻干粉针指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；III.待测冻干粉针指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各共有峰面积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例5采用液相色谱法测定以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备取注射液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取人参皂苷Rf适量，加乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为1％冰醋酸水溶液，流动相B为甲醇-水95∶5，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至10分钟，流动相B的比例为30％，从10分钟至35分钟，流动相B的比例由30％升至85％，从35分钟至55分钟，流动相B的比例为85％，从55分钟至70分钟，流动相B的比例由85％降至30％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有15个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射液中红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测注射液指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测注射液的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测注射液指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；III.待测注射液指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各共有峰面积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例6采用液相色谱法测定以五味子成分特征为主的指纹图谱
(1)供试品溶液的制备取注射液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取五味子甲素对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为乙腈-1％冰醋酸水溶液，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，乙腈的比例为60％，从5分钟至10分钟，乙腈的比例由60％上升至70％，从10分钟至15分钟，乙腈的比例为70％，从15分至60分钟，乙腈的比例由70％降至54％；流速为1.0ml/min，检测波长为250±2nm，柱温为30℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有14个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射液中五味子成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测注射液指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测注射液的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测注射液指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；III.待测注射液指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各共有峰面积的比值比较，其差值不大于30％。
实施例7冻干粉针中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的薄层色谱鉴别方法取待测冻干粉针适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；五味子对照药材溶液的制备取五味子对照药材适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(30～60℃)∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例8冻干粉针中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水65％∶35％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例9冻干粉针中麦冬的薄层色谱鉴别方法取待测冻干粉针适量，加三氯甲烷-甲醇7∶3混合溶液提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，同法制成对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯∶甲醇∶冰醋酸＝80∶5∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
实施例10冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的薄层色谱鉴别方法取待测冻干粉针适量，用水溶解后用正丁醇萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例11冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的液相色谱鉴别取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例12冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的薄层色谱鉴别方法取待测冻干粉针适量，加3％硫酸水解4小时，取出，放至室温，调节pH至中性，滤过，滤液挥干，残渣用三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯∶水＝1∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，90℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例13冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的液相色谱鉴别取待测冻干粉针适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后用3％硫酸回流4小时，取出，放至室温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，提取液挥干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例14冻干粉针中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf的薄层色谱鉴别方法取待测冻干粉针适量，用正丁醇提取，滤过，滤液作为供试品溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶40∶22∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例15冻干粉针中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的液相色谱鉴别取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例16冻干粉针中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的薄层色谱鉴别方法取待测冻干粉针适量，加醋酸乙酯提取，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；五味子对照药材溶液的制备取五味子对照药材适量，加醋酸乙酯提取，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五昧子酯乙对照品，分别加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(60～90℃)∶醋酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例17冻干粉针中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水60％∶40％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例18冻干粉针中麦冬的薄层色谱鉴别方法取待测冻干粉针适量，加醋酸乙酯提取，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，同法制成对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯∶甲醇∶甲酸＝85∶5∶0.3为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
实施例19冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的薄层色谱鉴别方法取待测冻干粉针适量，用水溶解后用醋酸乙酯萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝25∶4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例20冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的液相色谱鉴别取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1％冰醋酸90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例21冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的薄层色谱鉴别方法
取待测冻干粉针适量，加15％盐酸水解4小时，取出，放至室温，调节pH至中性，滤过，滤液挥干，残渣用二氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以环己烷∶甲酸乙酯∶水＝1∶1∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，90℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例22冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的液相色谱鉴别取待测冻干粉针适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后用15％盐酸回流4小时，取出，放至室温，调pH至中性，用二氯甲烷提取，提取液挥干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水96∶4为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例23冻干粉针中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf的薄层色谱鉴别方法取待测冻干粉针适量，用醋酸乙酯提取，滤过，滤液作为供试品溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加二氯甲烷回流提取，弃去二氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf对照品，分别加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯∶丙酮∶水＝20∶30∶15∶15在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例24冻干粉针中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的液相色谱鉴别取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至30分钟，乙腈的比例为20％，从30分钟至50分钟，乙腈的比例由20％上升至25％，从50分钟至70分钟，乙腈的比例为25％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由25％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例25注射液中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的薄层色谱鉴别方法取待测注射液适量，加乙醚提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；五味子对照药材溶液的制备取五味子对照药材适量，加醋酸乙酯提取，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五昧子酯乙对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(60～90℃)∶甲酸乙酯∶乙酸＝15∶5∶3的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例26注射液中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别取待测注射液适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液57％∶43％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例27注射液中麦冬的薄层色谱鉴别方法取待测注射液适量，加二氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，同法制成对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷∶乙醇∶甲酸＝70∶10∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
实施例28注射液中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的薄层色谱鉴别方法取待测注射液适量，用二氯甲烷萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品，分别加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以二氯甲烷∶乙醇∶水＝20∶8∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例29注射液中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的液相色谱鉴别取待测注射液适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的乙醇醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1％磷酸水溶液87∶13为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例30注射液中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的薄层色谱鉴别方法取待测注射液适量，加5％硫酸水解3小时，取出，放至室温，调节pH至中性，滤过，滤液挥干，残渣用醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品，分别加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲醇∶二氯甲烷∶水＝2∶1∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，90℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例31注射液中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的液相色谱鉴别取待测注射液适量，置圆底烧瓶中，用5％硫酸水解3小时，取出，放至室温，调pH至中性，用醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用乙醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.2％冰醋酸水溶液95∶5为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例32注射液中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf的薄层色谱鉴别方法取待测注射液适量，用醋酸乙酯提取，滤过，滤液作为供试品溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加二氯甲烷回流提取，弃去二氯甲烷液，残渣加醋酸乙酯提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf对照品，分别加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正丁醇∶甲酸乙酯∶水＝20∶30∶15在的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例33注射液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的液相色谱鉴别取待测注射液适量，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至20分钟，乙腈的比例为15％，从20分钟至45分钟，乙腈的比例由15％上升至22％，从45分钟至60分钟，乙腈的比例为22％，从60分钟至80分钟，乙腈的比例由22％升至35％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例34冻干粉针中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温为30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg；(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg；(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于3.4mg。
实施例35冻干粉针中总皂苷的含量测定取待测冻干粉针适量，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml，摇匀，60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，用冰醋酸定至刻度，摇匀，作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1计，不得少于20mg。
实施例36冻干粉针中总多糖含量测定单糖取待测冻干粉针适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；总糖 取待测冻干粉针适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不得少于100mg。
实施例37冻干粉针中总木脂素含量测定取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用醋酸乙酯提取，和并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇甲为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在254nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇甲计，不得少于3mg。
实施例38冻干粉针中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水65％∶35％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.4mg；(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.05mg；
(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.10mg；(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.55mg。
实施例39冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的含量测定取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90％∶10％为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.1mg；(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.1mg；(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.22mg。
实施例40冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的含量测定取待测冻干粉针适量，置圆底烧瓶中，加水溶解，用3％硫酸回流4小时，取出，放至室温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.02mg；(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.02mg；(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于0.06mg。
实施例41冻干粉针中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至30分钟，乙腈的比例为20％，从30分钟至50分钟，乙腈的比例由20％上升至25％，从50分钟至70分钟，乙腈的比例为25％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由25％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg；(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于3.4mg。
实施例42冻干粉针中总皂苷的含量测定取待测冻干粉针适量，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml，摇匀，60℃水浴上加热30分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，用冰醋酸定至刻度，摇匀，作为供试品溶液；以人参皂苷Rb1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rb1计，不得少于20mg。
实施例43冻干粉针中总多糖含量测定单糖取待测冻干粉针适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；总糖取待测冻干粉针适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流2小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不得少于100mg。
实施例44冻干粉针中总木脂素含量测定取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用三氯甲烷提取，和并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇乙为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在254nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇乙计，不得少于3mg。
实施例45冻干粉针中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水60％∶40％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.4mg；(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.05mg；(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.10mg；(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.55mg。
实施例46冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的含量测定取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1％冰醋酸90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.1mg；(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.1mg；(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.22mg。
实施例47冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的含量测定取待测冻干粉针适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后用15％盐酸回流4小时，取出，放至室温，调pH至中性，用二氯甲烷提取，提取液挥干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水96∶4为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.02mg；(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.02mg；(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于0.06mg。
实施例48注射液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定取待测注射液适量，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至20分钟，乙腈的比例为15％，从20分钟至45分钟，乙腈的比例由15％上升至22％，从45分钟至60分钟，乙腈的比例为22％，从60分钟至80分钟，乙腈的比例由22％升至35％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg；(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg；(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于3.4mg。
实施例49注射液中总皂苷的含量测定取待测注射液适量，置10ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加10％香草醛-冰醋酸溶液0.3ml，高氯酸3.0ml，摇匀，60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却，用冰醋酸定至刻度，摇匀，作为供试品溶液；以人参皂苷Re为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Re计，不得少于20mg。
实施例50注射液中总多糖含量测定单糖 取待测注射液适量，置碘量瓶中，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖)，由此计算单糖的含量；总糖取待测注射液适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流3小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；待测注射液以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不得少于100mg。
实施例51注射液中总木脂素含量测定取待测注射液适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用二氯甲烷提取，和并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇甲为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在254nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇甲计，不得少于3mg。
实施例52注射液中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定取待测注射液适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液57％∶43％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.4mg(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.05mg；(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.10mg；
(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.55mg。
实施例53注射液中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的含量测定取待测注射液适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的乙醇醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1％磷酸水溶液8713为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.1mg；(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.1mg；(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.22mg。
实施例54注射液中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的含量测定取待测注射液适量，置圆底烧瓶中，用5％硫酸水解3小时，取出，放至室温，调pH至中性，用醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用乙醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.2％冰醋酸水溶液95∶5为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.02mg；(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.02mg；(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于0.06mg。
权利要求
1.一种生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于该方法包括以下全部或部分内容(1)生脉注射剂的指纹图谱测试，包括以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱和以五味子成分特征为主的指纹图谱中的一种或几种；(2)红参或人参药材、麦冬药材、五味子药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′、假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中全部或部分成分的鉴别测试方法；(3)人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′、假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、总皂苷、总木脂素、总多糖中全部或部分成分的含量测试方法。
2.按照权利要求1所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于该方法包括如下指纹图谱中的一种或两种a、采用液相色谱法测试红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备取待测生脉注射制剂适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备取适量红参或人参和麦冬药材中的主要活性成分对照品，包括人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元、麦冬皂苷D′中的一种，用水或甲醇或乙醇溶解，定容至合适浓度，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相A为0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钠水溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钾水溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸氢二钠水溶液或水或0.1％～5％冰醋酸溶液或0.1％～5％甲酸溶液或0.02％～5％磷酸溶液；B为10％～100％乙腈溶液或10％～无水甲醇溶液，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～50个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测注射剂的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00；II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；III.待测注射剂指纹图谱中有30％～80％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土50％；b、采用液相色谱法测试以五味子成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备取待测生脉注射制剂适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备取适量五味子药材中的主要活性成分对照品，包括五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中的一种，用水或甲醇或乙醇溶解，定容至合适浓度，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为乙腈或甲醇，流动相B为水或0.01％～3％磷酸溶液或0.1％～5％冰醋酸溶液或0.1％～5％甲酸溶液，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190-410nm范围内的一个或几个，柱温在20～60℃范围内；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～50个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中五味子成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测注射剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00；II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；III.待测注射剂指纹图谱中有30％～80％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土50％。
3.按照权利要求2所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于该方法包括如下指纹图谱中的一种或两种a、采用液相色谱法测定以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备精密称取待测生脉注射制剂适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1适量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈-水80∶20，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，流动相B的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由80％降至25％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～30个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测生脉注射剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％；III.待测注射剂指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土30％；b、采用液相色谱法测定以五味子成分特征为主的指纹图谱(1)供试品溶液的制备精密称取待测生脉注射制剂适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；(2)参照物溶液的制备精密称取五味子醇甲对照品适量，加水制成每1ml含0.1mg的溶液，作为参照物溶液；(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为甲醇-水，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至6分钟，甲醇的比例为68％，从6分钟至8分钟，甲醇的比例由68％上升至76％，从8分钟至10分钟，甲醇的比例为76％，从10分钟至15分钟，甲醇的比例由76％降至68％，从15分钟至60分钟，甲醇的比例为68％；流速为1.0ml/min，检测波长为250±2nm，柱温为30℃；(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～30个；(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中五味子成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；(6)将待测生脉注射剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％；III.待测注射剂指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土30％。
4.按照权利要求1所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于所述注射剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容a、注射剂中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷或乙醚或醋酸乙酯或正己烷或10％～无水乙醇或10％～无水甲醇提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷或醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中的一种或几种制备对照溶液；五味子对照药材溶液的制备取五味子对照药材适量，加三氯甲烷或乙醚或醋酸乙酯或正己烷或10％～无水乙醇或10％～无水甲醇提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷或醋酸乙酯溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种对照品；分别加三氯甲烷或醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以30～60℃的石油醚或60～90℃的石油醚∶甲酸乙酯或醋酸乙酯∶甲酸或乙酸＝2～40∶0.2～15∶0.1～5的上层溶液或苯或甲苯∶醋酸乙酯或甲酸乙酯＝1～30∶0.2～10或正己烷∶苯或甲苯∶甲酸乙酯或醋酸乙酯∶甲酸或乙酸＝0.2～5∶0.5～10∶1～15∶0.1～5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm或254nm检视或喷以2％～20％变色酸-浓硫酸溶液或2％～20％磷钼酸乙醇溶液或茴香醛硫酸溶液，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰或碘熏显色，供试品色谱中，在与对照药材色谱或者对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；b、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液5％～80％∶95％～20％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱中的主峰有保留时间一致的色谱峰；c、注射剂中麦冬的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷-甲醇混合溶液或正丁醇或三氯甲烷或醋酸乙酯或二氯甲烷提取，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，加三氯甲烷-甲醇混合溶液或醋酸乙酯或正丁醇或三氯甲烷或二氯甲烷提取，滤过，蒸干，残渣加三氯甲烷或二氯甲烷溶解，作为对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯或三氯甲烷或二氯甲烷∶甲醇或乙醇∶冰醋酸或甲酸或水＝8～300∶0.5～100∶0.01～30或醋酸乙酯或甲酸乙酯∶吡啶∶水＝0.2～10∶0.1～5∶0.2～10为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm或254nm下检视或喷以1％～50％硫酸或香草醛试剂或1％～25％香荚兰醛试剂或茴香醛试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点；d、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，用水溶解后用正丁醇或乙醚或醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品，分别加甲醇或乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷∶甲醇或乙醇∶水＝3～50∶1～15∶0.1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％～50％硫酸乙醇试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；e、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝1％～99％∶99％～1％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；f、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加硫酸或盐酸水解后调节pH至中性，蒸干，残渣用三氯甲烷或二氯甲烷或醋酸乙酯或甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品，分别加三氯甲烷或二氯甲烷或醋酸乙酯或甲醇或乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以正己烷或环己烷或甲醇或乙醇∶醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或甲酸乙酯∶水＝0.2～15∶0.2～40∶0.1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％～50％硫酸乙醇试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后加硫酸或盐酸水解，取出，放至室温，调pH至中性后用三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解后用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～95％∶95％～5％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；h、注射剂中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，用正丁醇或乙醇或甲醇或醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷或二氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷或二氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种对照品，分别加甲醇或乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷或正己烷或环己烷∶醋酸乙酯或甲酸乙酯∶甲醇或乙醇或丙酮∶水＝5～40∶10～100∶5～50∶0.2～30在10℃以下放置的下层溶液或正丁醇∶醋酸乙酯或甲酸乙酯∶水＝1～10∶0.2～2∶1～15的上层为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％～50％硫酸乙醇试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；i、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸溶液＝5％～40％∶95％～60％为流动相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
5.按照权利要求4所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于所述注射剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容a、注射剂中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种，制备对照溶液；五味子对照药材溶液的制备取五味子对照药材适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以30～60℃的石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇∶水＝65％∶35％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；c、注射剂中麦冬的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷-甲醇7∶3混合溶液提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，同法制成对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯∶甲醇∶冰醋酸＝80∶5∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰；d、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，用水溶解后用正丁醇萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；e、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈∶水＝90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；f、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，加3％硫酸水解4小时，取出，放至室温，调节pH至中性，滤过，滤液挥干，残渣用三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯∶水＝1∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，90℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后用3％硫酸回流4小时，取出，放至室温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，提取液挥干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；按以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈∶水＝90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；h、注射剂中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法取待测生脉注射制剂适量，用正丁醇提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照药材溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶40∶22∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；i、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
6.按照权利要求1所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于所述注射剂含量的测试方法应包括以下全部或部分内容a、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸溶液＝5％～40％95％～60％为流动相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；以外标法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于0.8mg；(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.4mg；(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于0.5mg(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于1.7mg；b、注射剂中总皂苷的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加蒸馏水或甲醇或乙醇适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取适量，置量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加1％～50％香草醛-冰醋酸溶液0.1ml～10ml，高氯酸0.1ml～15ml，摇匀，30℃～80℃水浴上加热3～50分钟，取出，立即以冰水浴或流水冷却，精密加冰醋酸至刻度，摇匀，作为供试品溶液，以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf或麦冬皂苷B或麦冬皂苷D或麦冬皂苷D′为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547±10nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf或麦冬皂苷B或麦冬皂苷D或麦冬皂苷D′计，不得少于10mg；c、注射剂中总多糖含量测定单糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水溶解后用氢氧化钠试液调节pH至中性，精密加入0.1mol/L的碘液25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得；每1ml0.1mol/L的碘液相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；总糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解后加稀硫酸25ml，加热回流1～4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入0.1mol/L碘液25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得；每1ml 0.1mol/L的碘液相当于9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不得少于50mg；d、注射剂中总木脂素含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，和并提取液，挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇甲或五味子醇乙的甲醇或乙醇溶液为对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在254±10nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇甲或五味子醇乙计，不得少于1.5mg；e、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～80％∶95％～20％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个，柱温在20～60℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.2mg；(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.025mg；(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.075mg；(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.3mg；f、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中的一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝1％～99％∶99％～1％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项。(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.05mg；(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.05mg；(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.01mg；(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.11mg；g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后加硫酸或盐酸水解，取出，放至室温，调pH至中性后用三氯甲烷或正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～95％∶95％～5％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.01mg；(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.01mg；(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.01mg；(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于0.03mg。
7.按照权利要求6所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于所述注射剂含量的测试方法应包括以下全部或部分内容a、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温为30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg；(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg；(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于3.4mg；b、注射剂中总皂苷的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml，摇匀，60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，用冰醋酸定至刻度，摇匀，作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1计，不得少于20mg；c、注射剂中总多糖含量测定单糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加氢氧化钠试液至中性，精密加入0.1mol/L的碘液25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得；每1ml 0.1mol/L的的碘液相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；总糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入0.1mol/L的碘液25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得；每1ml 0.1mol/L的碘液相当于9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不得少于100mg；d、注射剂中总木脂素含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用醋酸乙酯提取，和并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇甲为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在254nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇甲计，不得少于3mg；e、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水65％35％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.4mg；(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.05mg；(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.10mg；(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.55mg；f、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90％10％为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.1mg；(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.1mg；(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.22mg；g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的含量测定取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解，用3％硫酸回流4小时，取出，放至室温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.02mg；(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.02mg；(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.02mg；(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于0.06mg。
8.按照权利要求6或7所述的生脉注射剂的质量控制方法，其特征在于所述注射剂中的皂苷类、多糖类、木脂素类的全部或部分可测成分的总含量占制剂中扣除辅料量和水分量的总固体量的25％以上。
全文摘要
本发明提供了一种生脉注射剂的质量控制方法，该方法包括指纹图谱测试、鉴别和含量测定等项目；制定了以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱和以五味子成分特征为主的指纹图谱来全面控制注射剂的质量，但生脉制剂的指纹图谱不是将红参或人参、麦冬和五味子药材或制剂的指纹图谱简单叠加就能得到的，只有采用本发明的条件，才能得到理想的指纹图谱。本发明质量控制方法对以红参或人参、麦冬和五味子制成的中药注射剂产品的质量控制更为有效，方法精密度、稳定性均较高。
文档编号A61P1/16GK1836717SQ200510200759
公开日2006年9月27日 申请日期2005年12月2日 优先权日2004年12月13日
发明者于文勇 申请人:贵阳云岩西创药物科技开发有限公司