美洛昔康在兽医学中用于治疗炎性疼痛疾病中的用途的制作方法

专利名称：美洛昔康在兽医学中用于治疗炎性疼痛疾病中的用途的制作方法
技术领域：
本发明设涉及是美洛昔康在兽医学中的新用途，尤其用于治疗轻度和中度牛乳腺炎的疼痛病症。
背景技术：
乳腺炎是乳牛最重要的疾病之一，也是世界乳品产业损失的重要原因。US国家乳腺炎理事会(NMC)估计每年乳品产业损失总值达18至20亿US$，或每头乳牛185至200US$。仅丢弃的牛奶这一项导致的损失就估计高达十亿US$。高至所有乳牛(dairy cattle)的50％据信患有乳腺炎。除了显著的经济损失，乳腺炎影响乳牛(cow)的福利。
乳腺炎是乳腺的炎症，由于其导致减产或淘汰率增加使乳品工业受到显著损失。导致乳腺炎的病原体可划分为与乳房的接触感染相关的病原体(即金黄色葡萄球菌、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)和停乳链球菌(Streptococcus dysgalactiae))以及存在于乳牛环境中的环境病原体(大肠杆菌和除无乳链球菌以外的链球菌以及凝固酶阴性葡萄球菌)。
感染可以是临床上明显的具有严重疾病症状的急性乳腺炎，或为慢性临床或亚临床乳腺炎，其伴随轻度至中度全身症状和/或轻度至明显局部炎症症状。全身临床症状涉及直肠温度升高(至高烧)以及乳牛总体健康状况的严重恶化(饲料摄入减少或不摄入，受损害的综合状况)。局部临床症状包括肉眼可见的牛奶质量的改变并伴随被感染分房(quarter)的典型炎症反应(发红、肿胀、发热以及疼痛)。急性和慢性乳腺炎都将导致牛奶产量降低。此外，在伴随有严重的局部炎症症状的急性乳腺炎中，已证实该疾病影响动物的表现及健康。
对于牛奶产量损失最重要的是慢性乳腺炎，因为其导致慢性且不可逆的组织损伤。乳牛(dairy cow)的乳房感染程度通常通过测量牛奶中体细胞的数量来进行评价。
识别、减轻及控制疼痛和压力对保证产生食品的动物的健康是重要的。病症例如乳腺炎和跛行的病症在乳牛中非常普遍并且引起显著的健康忧虑。炎症诱导疼痛信息的处理发生改变，其可给动物带来严重后果。
异常性疼痛(对无害刺激的知觉认为是有害)以及痛觉过敏(hyperalgesia)(对有害刺激的夸大反应)是炎性疼痛的普遍特征。该超敏化的状态可能比炎症刺激物和临床症状消退持续得更长，其对健康有严重影响。
针对牛群中急性跛行的研究表明痛觉过敏(Whay HR，Waterman AE，Webster AJ，O′Brien JK.，1998，“The influence of lesion type on the duration ofhyperalgesia associated with hind limblameness in dairy cattle”.Vet J.1998 Jul；l56(1)，P23-29)比疾病的临床上消退更久，而在乳牛中针对急性乳腺炎(轻度或中度)的初级研究表明不正常的疼痛过程长达40天(Fitzpatrick和Nolan，未公布的观测结果)。乳腺炎是一种很可能诱发疼痛的炎性疾病；的确，缓激肽(bradykinin)，痛觉过敏的介质，在患有临床和亚临床乳腺炎的乳牛的牛奶中检测出(Eshraghi HR，Zeitlin IJ，Fitzpatrick JL，Ternent H，Logue D，1999，“The release of bradykinin in bovine mastitis”.Life Sci；64(18).P.1675-1687)。
抗生素普遍用于治疗和预防乳房感染并有许多产品可以买到。抗生素常常通过乳房内注射给药，在严重的感染中，可通过额外胃肠外给药。乳房内制剂以用完丢弃的单次使用的注射器或软管形式提供。
还已知炎症诱导正常疼痛信息处理的改变，其可能对动物产生严重后果，其可判断为痛觉过敏对伤害性刺激的夸大反应。为减少局部炎症病症(抗炎作用包括减轻肿胀、发红、发热、疼痛及功能损失)，甾体类抗炎药(SAID)已被证实与抗生素在乳房内组合使用。此外，SAID可全身给药并与胃肠外给药和/或乳房内给药的抗生素疗法组合。
最近，NSAID(非甾体类抗炎药)在治疗乳腺炎，尤其是急性临床乳腺炎中的价值变得非常重要，因为与SAID相比，NSAID不具有免疫抑制作用，并且其被证明具有减轻炎症(抗炎)、疼痛(止痛)、体温(退热)以及内毒素及临床症状的作用。
目前有几种牛用NSAID在市场上可购得，并在EU的几个国家得到许可，用于急性乳腺炎，即氟胺烟酸葡胺(FinadyneInjection，Schering-PloughAnimal Health)、酮洛芬(Ketofen10％，Merial)、美洛昔康(Metacam，Boehringer Ingelheim)以及tolfenamid acid(Tolfedine，Vetoquinol)。所有产品得到许可非肠胃道给药，在一些国家它们可“作为对急性临床乳腺炎的抗生素的辅助治疗”用于乳牛的适应症。
NSAID被证实可在急性爆发疾病中缓解疼痛；然而它们对疾病的慢性状态的价值在食品生产动物中未被评价。到目前为止，现有技术中的NSAID未被许可用于治疗轻度和中度乳腺炎中出现的疼痛病症。例如NSAID氟胺烟酸葡胺(FinadyneInjection，Schering-Plough Animal Health)当向乳牛乳房内给药时，不能达到长效止痛活性(Fitzpatrick等人，1998，“Recognizing andcontrolling pain and inflammation in mastitis”，Proc.British Mastitis Conference，P.34-44)。
目前在市场上不能买到用于治疗中度至轻度乳腺炎的NSAID，该疾病症状为直肠温度轻微增加作为疾病的单一的一般性症状，以及明显至轻度的局部炎症症状，即，腺体轻微肿胀以及牛奶质量改变牛奶凝块和/或体细胞数量增加。
此外，已知的现有技术涉及已知NSAID美洛昔康(Metacam)的药学用途或性质涉与下列不同方面有关EP-A-0002482公开了，除别的以外，2.0％可注射美洛昔康溶液由活性成分的葡甲胺盐、氯化钠和水组成。
EP-A-0945134公开了美洛昔康及其盐，即钠盐、铵盐和镁盐在水溶液中的pH依赖的溶解性质。
WO 99/59634 A1描述了包含0.5％美洛昔康的滴眼剂溶液。
此外，一种市场可购得的0.5％美洛昔康溶液用于小型动物，例如狗，小母牛和小牛，例如治疗呼吸系统疾病和炎症。
WO 03/049733描述了一种高浓度稳定的美洛昔康溶液用于无针注射，其包含35-100mg/ml溶解的美洛昔康盐以及一种或多种合适的添加剂，用于治疗哺乳动物的呼吸系统疾病和炎症。
最后，WO 01/97813 A2描述一种不含环糊精的美洛昔康水溶液用于胃肠外或口服给药，其包含一种药学上可接受的美洛昔康的有机或无机碱的盐以及一种或多种赋形剂使溶解了的美洛昔康盐含量大于10mg/ml。
尽管WO 03/049733和WO 01/97813 A2中描述的美洛昔康制剂应该用于治疗疼痛的药物组合物，除了治疗大型农场动物的炎症，高烧和呼吸道病症之外，缓解疼痛的作用清楚地仅限于急性乳腺炎。此外，在当时，不可能测定动物是否感觉疼痛或药物组合物是否对动物疼痛具有缓解作用。最近一种可确认并评估乳牛乳腺炎疼痛的可行的方法已被发现。因此，可用一种新的改进的方法测定动物是否感觉疼痛(“Preliminary results of a study on painassessment in clinical mastitis in dairy cows”，M.H.Milne，A.M.Nolan，P.J.Cripps and J.L.Fitzpatrick，Proceedings of the British Mastitis Conference(2003)Garstang，p.117-119)。
所述评估疼痛状态，即，在食品生产动物中的炎症慢性疼痛的方法，其使用机械装置系统，已发展并得到确认。该方法建立在患有轻度和中度乳腺炎的乳牛上，并确认有效。令人惊讶地，患有轻度和中度乳腺炎的牛遭受痛苦，从动物福利的角度说，需要预防和治疗。
因此，本发明的目的是提供一种药物组合物用于治疗炎性疼痛疾病，特别是轻度和中度乳腺炎，尤其是疾病的慢性状态。该组合物应还可作为抗生素的辅助治疗用于全身性或局部。

发明内容
令人惊奇地，美洛昔康制剂可用于治疗动物的疼痛症状。因此，本发明提供包含美洛昔康，或药理学上可接受的美洛昔康的有机或无机碱的盐，一种或多种载体以及任选一种或多种合适的添加剂的制剂，在制备用于治疗炎性疼痛疾病，特别是轻度和/或中度乳腺炎，尤其是其的慢性状态，以缓解与乳房的局部(慢性)炎性疼痛相关的高度敏感状态/炎性痛觉过敏，尤其是用于缓解疼痛的具有止痛作用的兽医药物组合物中的用途。
到目前为止，本发明的包含美洛昔康的制剂的用途未被描述为用于轻度和中度乳腺炎，但特别用于急性乳腺炎。然而大约70％乳腺炎为慢性的。
对疼痛的确认、缓解和控制对保证动物好的福利是很重要的。因此，如上所述，对乳牛进行研究来评估伴随中度和轻度乳腺炎的疼痛。基于上述针对新近确立的用于测量食品生产动物疼痛的方法的研究，临床现场研究被用于调查-除了患有轻度和中度乳腺炎的乳牛的慢性疼痛病症-美洛昔康的止痛作用和作用的长效性。在所述临床现场研究中，美洛昔康被作为乳房内抗生素疗法的辅助仅给药一次并与并与第二组动物相比较，所述的第二组在3-6天后接受美洛昔康再治疗。第三组仅接受抗生素疗法。
令人惊讶地，美洛昔康的单次给药的止痛效果可比得上美洛昔康的多次给药。因此，对患有轻度直至中度乳腺炎的乳牛的临床现场研究，用新确立和验证的疼痛测定方法证实了美洛昔康的止痛作用，其结果显示美洛昔康单次治疗可达到长效止痛效果。与之相反，只用抗生素的疗法并不能缓解动物的疼痛病症，显示其与美洛昔康治疗组的显著差别。
观察到的止痛效果发生非常迅速并且单次给药具有超过几天的长期持续效果，使患病动物的健康取得巨大的改善。
这些研究首次在该适应症中使用美洛昔康。尽管有少数现有技术文献提到用美洛昔康制剂治疗疼痛，然而仅仅是不可行的或不可再现的教导，新开发的方法第一次能够测定和评价该效果。
其他得到许可的胃肠外给药的NSAID，不太可能使用于慢性的轻度和中度乳腺炎，由于其较弱的止痛效果和/或作用时间短(12小时以下)。
后者将需要在短时间间隔内增加重复治疗，这不太可能适合用于食品生产动物中。药物用途的药学-经济学利益得不到证明。相反，美洛昔康由于其在牛中的长效活性而体现出独特的优点。向患有轻度和中度乳腺炎的乳牛使用本发明的美洛昔康制剂，可减退局部炎症症状(包括减少牛奶中体细胞的数量)、临床上的改善以及炎症介质浓度的降低和长效的疼痛缓解作用，这些都对动物的健康有益处。
在本

发明内容
中“轻度和中度乳腺炎”的表述符合对乳腺炎严重度的分级。轻度和中度乳腺炎表现为与急性乳腺炎相比缓和的疾病过程，并可理解为该乳腺炎感染，要么与急性乳腺炎相比临床上明显的症状更不严重，要么临床上不明显，没有或几乎没有明显临床症状。如果亚临床乳腺炎不治疗，不久之后就会产生慢性乳腺炎，其临床上比急性乳腺炎缓和。
一般草率地认为，患有中度乳腺炎的乳牛的平均心律、呼吸频率以及直肠温度比患有轻度乳腺炎的乳牛高，也比正常乳牛高。根据上述研究(现有技术“Preliminary results of a study on pain assessment in clinical mastitis indairy cows”，M.H.Milne等人，ibid.，以及本发明的临床现场研究)，乳腺炎进一步被分级为“轻度”，其中牛奶的外观有所改变，即体细胞数量增加有或没有絮片或凝块，但是乳房是正常的，以及“中度”，其中牛奶的外观有所变化并且乳房发热、肿胀或触痛，但是乳牛并没有“不舒服”和/或不需要全身抗生素治疗。疼痛测定的实验中精心设计的方法能够分辨乳腺炎的非典型病例，其症状为与轻度或中度乳腺炎的平均心律、呼吸频率和直肠温度相关(发表在British Mastitis Conference(2003)中介绍的论文上)。该定义也适用于本发明。
因此，根据本发明的临床研究结果表明，美洛昔康对乳牛的轻度或中度乳腺炎的止痛治疗是有益的，用美洛昔康治疗具有显著效果，并且用美洛昔康单次治疗可达到长效止痛效果。
根据本发明的制剂可包含美洛昔康或美洛昔康盐，浓度为10-30mg/ml，优选12-25mg/ml，更优选16-23mg/ml，特别优选18-22mg/ml，尤其是20mg/ml。尤其优选溶解的美洛昔康盐的含量小于35mg/ml。
本发明所用的包括美洛昔康的制剂可包括，除了美洛昔康或美洛昔康盐之外，一种或多种载体和任选一种或多种添加剂。根据载体选用相应的其他添加剂。载体可选自水和/或油形成含水或含油的体系；也可形成中间体系。术语“含水体系”或“含油体系”在本发明中应理解为载体的主要部分来源于水或油。“载体”应理解为介质或媒介物，其实质上分散活性物质，即，美洛昔康或其盐，以及添加剂，如果有的话，并如此形成制剂。
本发明所用的制剂可以是液体体系例如含水溶液、水凝胶、乳剂例如微乳剂、水包油乳剂或油包水乳剂，或混悬液等等。在本发明内容中“溶液”的表述应理解为包含分散系统以及真溶液和中间状态。该制剂可进一步为半固体或半液体体系，例如乳膏或软膏，或气态体系例如喷雾剂。
如果选用含水体系，美洛昔康优选以盐的形式应用。根据本发明所用的美洛昔康盐可以是葡甲胺盐、钠盐、钾盐或铵盐，优选美洛昔康葡甲胺盐。
葡甲胺的浓度可为12.5至16.5mg/ml，优选13-16mg/ml，更优选13.5-15.5mg/ml，最优选14-15mg/ml，尤其约14mg/ml。可能的钠、钾和铵的浓度可相应计算得出。
葡甲胺和美洛昔康的摩尔比为9∶8至12∶8，优选摩尔比为11∶8，但尤其摩尔比为10∶8。
添加剂可选用那些药品许可法允许的以及现有技术中已知的添加剂，但范例的添加剂可为缓冲剂、助溶剂(solubilisers)、胶凝剂、粘性增强剂、防腐剂、油类、抗氧化剂、乳化剂、发泡剂、等渗剂、气体推进剂和/或增稠剂。其他合适的添加剂例如柠檬酸、卵磷脂、葡萄糖酸、酒石酸、磷酸和EDTA或其碱金属的盐，优选酒石酸和EDTA或其碱金属的盐，尤其EDTA二钠。
在水性介质中，添加剂选自低浓度的助溶剂、防腐剂、使达到最佳pH范围的缓冲物质以及任选其他添加剂是有益的。体系可例如任选包含合适的胶凝剂和/或粘性增强剂形成粘稠的含水溶液或水凝胶。合适的体系可以是无菌的含水溶液或水凝胶、无菌乳液(例如水包油)，或无菌的含油混悬液。
如果选用含油体系，添加剂优选选自一种或多种油类，一种或多种抗氧化剂以及任选一种或多种增稠剂。当然其他添加剂也可使用。
出现在制剂中的添加剂将在下文中详细描述。
助溶剂可使用任何适合用于兽医学的已知助溶剂，例如聚乙二醇、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(例如泊洛沙姆188)、四氢呋喃聚乙二醇醚(glycofurol)、精氨酸、赖氨酸、蓖麻油、丙二醇、缩酮溶胶(solketal)、聚山梨酯、甘油、山梨醇、甘露醇、木糖醇、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、胆固醇、12-羟基硬脂酸-PEG660-酯、丙二醇单硬脂酸酯、聚氧-40-氢化蓖麻油、聚乙二醇-10-油烯基醚、聚乙二醇-20-十六十八烷基醚(polyoxyl-20-cetostearylether)和聚乙二醇-40-硬脂酸酯或山梨醇、甘露醇和木糖醇的混合物。优选为聚乙二醇、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、糖糠醛、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、胆固醇、12-羟基硬脂酸-PEG660-酯、丙二醇单硬脂酸酯、聚氧-40-氢化蓖麻油、聚乙二醇-10-油烯基醚、聚乙二醇-20-十六十八烷基醚和聚乙二醇40-硬脂酸酯。特别优选聚乙二醇、糖糠醛和聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物，但尤其是聚乙二醇(例如聚乙二醇300)和聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(例如泊洛沙姆188)。
助溶剂的浓度可为20-200mg/ml，优选30-150mg/ml，更优选40-130mg/ml，最优选50-120mg/ml，尤其70-100mg/ml。
可使用任何已知用于制药领域的防腐剂，例如，乙醇、苯甲酸和其钠或钾盐，山梨酸和其钠或钾盐、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、硝酸苯汞、甲基、乙基、丙基或丁基对羟苯酸酯、苯酚、间甲酚、对-氯-间-甲酚或苯扎氯铵。优选为乙醇、苯甲酸和其钠或钾盐，山梨酸和其钠或钾盐、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇和甲基、乙基、丙基或丁基对羟苯酸酯，但特别优选乙醇、苯甲酸和其钠或钾盐，山梨酸和其钠或钾盐，但特别是乙醇。
防腐剂乙醇的浓度可为100-200mg/ml，优选120-180mg/ml，更优选约150mg/ml。
防腐剂苯甲酸和其钠或钾盐的浓度、山梨酸和其钠或钾盐、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、苯酚、间甲酚、对-氯-间-甲酚的浓度可以为0.5-50mg/ml，优选1-10mg/ml，更优选3-5mg/ml。
防腐剂苯扎氯铵、硝酸苯汞和甲基、乙基、丙基或丁基对羟苯酸酯的浓度可为0.01-4mg/ml，优选0.02-3mg/ml，更优选0.1-0.5mg/ml。
如果制剂包含根据本发明具有碱性范围的pH值水性介质将是有益的。这样，pH至可调整为大约8至大约10，优选约8.5至约9，更优选约8.7至约8.9，特别约8.8。然而，尽管酸性范围的pH值也可能可行，但优选碱性pH值范围。在更大碱性范围内，包含美洛昔康的制剂倾向于优选为真水性溶液，而在更大酸性范围内，其倾向于混悬液。
因此，所用的使pH值保持在约8至约10的缓冲体系，例如为，甘氨酸、甘氨酸和HCl的混合物、甘氨酸和氢氧化钠溶液以及其钠和钾盐的混合物、邻苯二甲酸氢钾和盐酸的混合物、邻苯二甲酸氢钾和氢氧化钠的混合物或谷氨酸和谷氨酸盐的混合物。甘氨酸、甘氨酸和HCl的混合物以及甘氨酸/氢氧化钠溶液的混合物，尤其是甘氨酸，是特别优选的。
缓冲物质的浓度可为4-50mg/ml，优选5-20mg/ml，更优选8-10mg/ml。
上述其他添加剂的浓度，即EDTA、柠檬酸、卵磷脂、葡萄糖酸、酒石酸和磷酸或其盐，可为0.2-3mg/ml，优选0.3-2.5mg/ml，更优选0.5-2mg/ml，最优选0.6-1.5mg/ml，特别为0.7-1.0mg/ml。
本发明的一种优选的制剂包含，除美洛昔康的葡甲胺或钠盐之外，作为助溶剂的聚乙二醇、四氢呋喃聚乙二醇醚和/或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物，但特别是聚乙二醇(例如聚乙二醇300)和/或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(例如泊洛沙姆188)，作为防腐剂的乙醇、苯甲酸和其钠或钾盐或山梨酸和其钠或钾盐，但特别是乙醇，作为缓冲剂的甘氨酸、甘氨酸和HCl的混合物以及甘氨酸/氢氧化钠溶液的混合物，尤其是甘氨酸，以及任选的EDTA二钠作为其他的添加剂。
在本发明制剂中，美洛昔康和其他添加剂，尤其是EDTA二钠的重量比为25∶1至15∶1，优选24∶1至16∶1，优选23∶1至17∶1，更优选22∶1至18∶1，最优选21∶1至19∶1，特别为约20∶1。
在含油体系中，合适的油性组分为任何现有技术中已知的用于制备药物制剂的活性成分，例如，植物油，具体而言，例如棉籽油、花生油、玉米油、菜籽油、芝麻油和大豆油，或中等链长的甘油三酯，例如分馏椰子油、异丙基豆蔻酸酯、-棕榈酸酯或矿物油或油酸乙酯或其混合物。优选的油类选自植物油，例如玉米种子油、芝麻油和花生油。
含油体系中所用的抗氧化剂可为现有技术中已知的任何抗氧化剂，优选芝麻酚、α-生育酚(维生素E)、丁基羟甲苯(BHT)或丁基羟基茴香醚(BELA)。
也可使用增稠剂例如，单硬脂酸铝、氢化蓖麻油、羧甲基纤维素或其盐。
可加入乳化剂，如果需要的话。优选使用的乳化剂，除现有技术已知的乳化剂，包括蓖麻油的聚氧乙烯衍生物或聚氧乙烯烷基醚。
如果所选的给药形式需要发泡剂，可使用任何药品许可法允许的现有技术中已知的发泡剂，优选各种脂肪酸的聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯(聚山梨酯)。
合适的气体推进剂可为任何药品许可法允许的现有技术中已知的物质，例如CO2、N2O、N2、丙烷/丁烷混合物、异丁烷、氯五氟乙烷(CClF2-CF3)、八氟环丁烷(C4F8)。
当然，所有的通常使用的已知的和药物应用可接受的添加剂可以常用量存在于本发明的制剂中。
用于制备兽用医药组合物的基于水性的制剂通过实施例说明。然而，特别指出的是仅意味着作为说明，而不应当认为限制本发明。
实施例在下列实施例1-3中，本发明的制剂制备成用于乳房内使用(根据Ph.Eur.的需要量)，在含水或含油体系中含有美洛昔康或美洛昔康盐。该制剂在表1-3中列出。
实施例1本发明的制剂1制备成注射溶液的形式。
表1

实施例2本发明的制剂2制备成注射溶液的形式。
表2

实施例3本发明的制剂3制备成油性混悬液的形式。
表3

在以下实施例4-8中，本发明的含有美洛昔康或美洛昔康盐的制剂制备成用于口服或胃肠外(parental)应用。该制剂在下表4-8中列出。
表4

方法将20g的美洛昔康在90℃下溶解于500mL的葡甲胺含水溶液(14g/500mL)中。其它赋形剂陆续加入由上述配方得到溶液中。再使用1M的盐酸和1M的氢氧化钠溶液使得pH值为8.8。向溶液中加入水，直至获得1升的体积。
表5

方法将20g的美洛昔康在90℃下溶解于500mL的葡甲胺含水溶液(12.5g/500mL)中。其它赋形剂陆续加入由上述配方得到溶液中。再使用1M的盐酸和1M的氢氧化钠溶液使得pH值为8.8。向溶液中加入水，直至获得1升的体积。
表6

方法将25g的美洛昔康在90℃下溶解于500mL的葡甲胺含水溶液(17.5g/500mL)中。其它赋形剂陆续加入由上述配方得到溶液中。再使用1M的盐酸和1M的氢氧化钠溶液使得pH值为8.8。向溶液中加入水，直至获得1升的体积。
表7

方法将15g的美洛昔康在90℃下溶解于500mL的葡甲胺含水溶液(10.5g/500mL)中。其它赋形剂陆续加入由上述配方得到溶液中。再使用1M的盐酸和1M的氢氧化钠溶液使得pH值为8.8。向溶液中加入水，直至获得1升的体积。
表8

方法将20g的美洛昔康在90℃下溶解于500mL的葡甲胺含水溶液(14g/500mL)中。其它赋形剂陆续加入由上述配方得到溶液中。再使用1M的盐酸和1M的氢氧化钠溶液使得pH值为8.8。向溶液中加入水，直至获得1升的体积。
本发明所用的制剂适于制备具有镇痛作用的兽医用药物组合物，特别适于治疗轻度和中度的乳腺炎疾病。其适于治疗哺乳动物，特别是耕畜或家畜。进行该治疗可以结合全身和/或局部给药抗生素治疗。用美洛昔康制剂治疗大的家畜是有可能的，所述美洛昔康制剂适于治疗体重高至750kg的家畜。药物组合物以不含颗粒的溶液形式使用，特别是胃肠外给药的情况下是优选的。
因为一个单剂量是足够的，本发明的制剂的剂量应相当于0.2-1.0mg的活性物质/kg的体重，优选是0.3-0.8mg/kg的体重，更优选是0.4-0.7mg/kg的体重，特别优选是0.4-0.6mg/kg的体重，特别是约0.5mg/kg的体重。
本发明的制剂可以使用文献已知的配制的方法来制备。例如，可以向美洛昔康/美洛昔康盐制剂中加入适合的添加剂。
本发明的含美洛昔康的制剂可以以乳膏、软膏、洗液、凝胶、油包水或水包油乳液、气溶胶泡沫、例如以水、乙醇或其混合物为基础的溶液或混悬液的形式给药。特别优选的是任何种类的注射器和注射制剂，例如，如皮内或皮下无针注射或乳房内注射或现成的注射器用的钝的针头注射器制剂(injector formulateon)，或者胃肠外应用的注射制剂，如i.v.或i.m.注射。这类药物形式的制备是本领域技术人员熟知的。
可以使用已知或批准的美洛昔康制剂，如市场上可购得的注射液。由于美洛昔康在家畜(cattle)体内的长的作用持续时间，优选地单一治疗将提供持久的镇痛功效，其有助于动物健康。因此，单一治疗如单一注射或单剂量可提供超敏状态/炎性痛觉过敏即涉及轻度和中度的乳腺炎病例的疼痛病症的持久的减轻。兽用医药组合物的单一给药优选地足以治疗炎性的疼痛疾病，特别是减轻受侵袭分房(quarter)的局部的炎性体征，即减轻肿胀、发红、发热、疼痛并恢复正常的功能(体细胞计数减少的正常的产奶)，而且应当理解，因为用一次剂量的制剂治疗减轻了上述涉及的局部炎性体征并恢复了对于疼痛刺激的快速、有效和持久的的正常的行为反应。
对含活性物质的制剂的要求，除了包括少的给药体积或小的给药量，还包括与体重相关的剂量的可能性以及每个治疗对象作用过程的可能达到的最大灵活性。因此，例如每次注射50μl的注射体积在技术上是可行的。为了这个目的，如DE 100 10123 A1所述，无菌溶液在无菌条件下可以转入无菌的药筒，其再插入计量系统。
本发明所用的制剂使动物所有人自己向动物给药无菌制剂成为可能。本发明的制剂优选制备用于胃肠外或乳房内途径给药。因此，该制剂可以通过胃肠外途径全身给药，即活性物质存在于动物的血液中或者其可以通过乳房内途径局部地给药，即活性物质直接施用在感染的位置(乳房)上或进入感染的位置(乳房)。
优选使用的是制备成本领域技术人员已知的注射剂。注射剂优选地选自上述含水体系。
优选使用的还是注射器制剂。注射器包括能向乳房内注射制剂的工具，即，穿过条纹槽(streak canal)进入乳房，而制剂装在套管、容器、phiole、注射器或管子等中，其可丢弃并提供一次性使用，包含递送体系例如合适的开口(opening)、导管或钝的针。该乳房内给药形式可更好作用于靶器官并且提高活性。注射器制剂优选选自上述含油或含水体系。
开启后，在室温下制剂的通常的贮藏期是约数周或更多。在密封的原始包装中的制剂的贮藏期可以达到一个月或数月或更长。即使当制剂经受最后的灭菌过程，发现制剂是稳定的。
本发明的益处是多方面的一种评估生产食品的动物的疼痛病症新方法使治疗遭受轻度至中度乳腺炎病例的乳牛成为可能。基于所述方法的临床领域的研究表明美洛昔康的镇痛功效并证实结果，所述结果指出用美洛昔康制剂的单次治疗取得了持久的镇痛作用。观察到镇痛作用发生非常快。单次给药在数日之内具有持久的作用，使患病动物的健康得到巨大的改善，其中观察到疼痛的有力和快速的缓解。
因此，美洛昔康制剂可以用于治疗轻度和中度的乳腺炎病例。治疗有效持久地减轻了伴随轻度和中度乳腺炎病症中的炎性疼痛的超敏状态，特别是在慢性状态。
其它已知的仅能够胃肠外给药的NSAIDs不可以用于(慢性)轻度或中度的乳腺炎病例，因为它们的差的镇痛功效和/或12小时以下的短的作用持续时间。
此后描述的实验性发现提供了使用本发明的美洛昔康制剂成功治疗哺乳动物的中度或轻度乳腺炎的疼痛的清楚证明。
所述的本发明将通过根据各种的其它实施方案的实施例说明，并且根据本说明书对于技术人员是显而易见的。然而，清楚指出的是实施例和说明书仅为了说明，并不应当认为是对本发明的限制。
实施例实施例1描述了批准用于测量乳牛超敏感性的机械装置的方法。着手这个研究来评估临床和实验室参数的使用的范围，所述临床和实验室参数用于评估患有轻度和中度临床乳腺炎乳牛的疼痛。
实施例2描述了已经实施的现场(field)研究，表明2％的美洛昔康制剂在患有轻度和中度乳腺炎病症的乳牛中的持久的镇痛和抗炎性功效。
实施例1
-方法验证-患有轻和中度临床乳腺炎的乳牛中的疼痛，是使用调节乳牛中炎性痛觉过敏的外周炎性介质的特征来评估。
在诊断日，对乳牛进行临床上检查，收集牛奶样品用于细菌学培养和质量分析。
测量踝关节之间的距离并作为牛姿态改变的指标。在每条后肢上采用改进Nolan和其他人描述的的方法(Nolan，A.，Livingston，A.，Morris，R.和Waterman，A.，1987年，“Techniques for comparison of thermal and mechanicalnociceptive stimuli in the sheep”，J.Pharmacol.Methods，17卷，第39-49页)测量对于机械性刺激的反应阈值。
使用Kruskal-Wallis和单向ANOVA检验来比较从轻度和中度乳腺炎病例的乳牛和正常乳牛获得的参数。
总之，研究了117只患有临床的乳腺炎的泌乳的乳牛(lactating cow)(n＝61个轻度；n＝56中度)和45只正常乳牛。细菌学结果显示了，在28％的中度病例中分离出了大肠杆菌，在39％的中度病例中分离出了链球菌；而在轻度病例中，大肠杆菌(E.coli)和链球菌(S.uberis)分别占16％和18％的病例。正常乳牛的踝关节-踝关节距离和机械性刺激差异低于患乳腺炎的乳牛(轻度和中度二者的病例)(p＜0.001)。患有中度乳腺炎的乳牛的心率、呼吸频率和直肠温度高于(p＜0.001)患有轻度乳腺炎的乳牛和正常的动物。与患有乳腺炎的乳牛(轻度和中度二者的病例；p＜0.001)相比，正常动物的个体分房(quarter)体细胞计数(IQSCC)与奶的蛋白质含量是较低的；而与患有乳腺炎的病例(轻度和中度二者，p＜0.001)相比，正常动物的奶的乳糖含量是更高的。
结果显示，患有轻度和中度乳腺炎的乳牛表现出的机械性痛觉过敏表明改变了作为炎性疾病的结果的疼痛处理过程。这些结果表明技术可以用于间接地监测患有轻度和中度乳腺炎的家畜的疼痛。此外，在数量上可以评估对于镇痛治疗的响应。
实施例2-临床领域研究-美洛昔康(Metacam)对于患有临床乳腺炎的乳牛的超敏感性的影响的初级结果识别、缓解和控制疼痛和应激对于确保食品生产动物的良好健康是重要的。在100头患有临床上的轻度或中度乳腺炎的乳牛中进行研究，评估伴随临床乳腺炎的疼痛。根据常规兽医操作，用乳房内抗生素药物实施乳腺炎治疗。选择不含皮质类固醇的制剂，头孢喹肟(Cephaguard LC Intramammary，Intervet UK Limited，Milton Keynes)，对于各情况下的乳腺炎的三种治疗，其每12小时灌注。患有临床的乳腺炎的乳牛随机分配于3组中之一。
·第1组仅有抗生素第 2组抗生素和单剂量美洛昔康(Metacam，Boehringer-Ingelheim)；第3组在诊断日，第0日，和第3日和第6日给予抗生素和三剂量的美洛昔康。
·补充健康动物作为对照。
所有的乳牛在45天的期间内有6-8次机会的临床检查。在每条后肢上测量对于机械性刺激的反应阈值。Mintab统计软件(Minitab Inc.)中的一般线性模型(General liner model)和MLwiN(用于数据评估的多级因素分析模型)中的多级模型化，被用于考虑时间效应和治疗效应。
治疗对于阈值反应有显著的作用，仅接受抗生素的乳牛(第1组)与接受单剂量美洛昔康的乳牛(第2组)或三剂量美洛昔康的乳牛(第3组)显示了很大的差异(P＜0.001)。与接受三剂量美洛昔康的乳牛相比，在接受单剂量美洛昔康的乳牛中没有存在显著的差异。
对于患有轻度病症的乳牛，与诊断日相比而言，仅在第45日，时间对于阈值反应有显著的影响(P＜0.05)。
总之，机械性痛觉过敏存在于患有轻度和中度严重性的乳腺炎的动物中。采用单或三剂量的美洛昔康的治疗显示了恢复了对于机械性刺激的正常阈值反应。
这些结果表明，在乳牛的轻度和中度临床乳腺炎的治疗中美洛昔康是有益的。美洛昔康治疗恢复了对于疼痛刺激的正常的行为反应。
结论在遭受轻度和中度慢性乳腺炎的泌乳乳牛中使用美洛昔康2％注射液单一治疗表现出持久的镇痛功效。
权利要求
1.含有美洛昔康或药学上可接受的美洛昔康的有机或无机碱盐以及一种或多种载体的制剂在制备治疗炎性疼痛疾病中起止痛作用的兽医用药物组合物中的用途。
2.根据权利要求1所述的制剂的用途，其特征在于炎性疼痛疾病为轻度或中度乳腺炎。
3.根据权利要求1或2所述的制剂的用途，其特征在于美洛昔康或美洛昔康盐的含量为10-30mg/ml浓度。
4.根据权利要求1至3所述的制剂的用途，其特征在于兽医用药物组合物的单次给药足够治疗炎性疼痛疾病。
5.根据前述权利要求1至4任一项所述的制剂的用途，其相应剂量范围为0.2至1.0mg活性物质/kg体重。
6.根据前述权利要求1至5任一项所述的制剂的用途，其特征在于载体选自水和/或油。
7.根据前述权利要求1至6任一项所述的制剂的用途，其特征在于所述的制剂含有一种或多种合适的添加剂。
8.根据前述权利要求1至7任一项所述的制剂的用途，其特征在于所述的制剂包含美洛昔康盐、水、任选一种或多种选自缓冲剂、助溶剂、防腐剂和任选增稠剂的添加剂或基本上由上述组分组成。
9.根据前述权利要求1至8任一项所述的制剂的用途，其特征在于所述的制剂包含美洛昔康、葡甲胺、水、聚乙二醇、聚乙烯-聚氧丙烯共聚物、乙醇、甘氨酸以及任选氢氧化钠或盐酸以及EDTA二钠或基本上由上述组分组成。
10.根据前述权利要求1至7任一项所述的制剂的用途，其特征在于所述的制剂包含美洛昔康、一种或多种油、任选的一种或多种抗氧化剂和任选的一种或多种增稠剂或基本上由上述组分组成。
11.根据前述权利要求1至10任一项所述的制剂的用途，其特征在于该兽医用药物组合物经制备用于非肠胃道或乳房内途径给药。
全文摘要
本发明涉及含有美洛昔康或药学上可接受的有机或无机碱的美洛昔康盐以及一种或多种载体的制剂在制备治疗炎性疼痛疾病中起止痛作用的兽医用药物组合物中的用途，尤其用于治疗轻度或中度乳腺炎中的用途。该治疗具有减少伴随轻度或中度乳腺炎的炎性疼痛的高度敏感状态，特别是其慢性状态的有效长期作用。
文档编号A61P29/00GK1972690SQ200580020992
公开日2007年5月30日 申请日期2005年6月11日 优先权日2004年6月23日
发明者加布里埃尔·弗里顿, 欧内斯特·萨拉蒙 申请人:贝林格尔·英格海姆维特梅迪卡有限公司