经n－苯磺酰基取代的苯胺基嘧啶类似物的制作方法

专利名称：经n－苯磺酰基取代的苯胺基嘧啶类似物的制作方法
技术领域：
本发明涉及可用于抑制激酶活性的苯胺基嘧啶类似物。
背景技术：
核因子κB(NF-κB)是调控与细胞存活相关的重要基因的表达的转录因子。NF-κB的活化对发炎反应很重要，这是因为其调控诸如肿瘤坏死因子α(TNF-α)的促炎性细胞因子的表达。TNF-α不仅诱导炎症，而且还充当多种癌症的存活因子且可刺激血管生成因子的产生。已经在卵巢癌、乳癌、前列腺癌、膀胱癌和结直肠癌以及淋巴瘤和白血病中发现TNF-α。已经由显示NF-κB通过抑制细胞凋亡并刺激细胞增殖来促进肿瘤发生的研究进一步阐明NF-κB在癌症中的作用。Haefner，B.(2002)″NF-κBarresting a maiorculprit in cancer，″Drug Discovery Today，7，653-663。由于NF-κB在肿瘤发生和炎症中的作用，NF-κB抑制剂可证实适用于作为抗癌和抗炎症治疗剂。
NF-κB的主要形式是由NF-κB的抑制剂IκB保留在静止细胞的细胞质中。通过刺激被称为IκB激酶(“IKK”)复合体的包含亚单元IKKα、β和γ的细胞激酶复合体来活化NF-κB。在受到(例如)毒素、细胞因子(例如TNF-α)或电离辐射刺激后，IKK磷酸化IκB并引发经由蛋白酶体路径的泛素化依赖性降解。由于IκB破坏，NF-κB能够自由进入核中并活化转录。Hu，M.(2004)″IκB Kinase Promotes Tumorigenesis throughInhibition of Forkhead FOXO3a，″Cell，117，225-237。Haefner，B.(2002)″NF-KBarresting amajor culprit in cancer，″Drug Discovery Today，7，653-663。
已经将IKK的异常表达与NF-κB的活化联系起来，并且也与肿瘤发生和细胞增殖联系起来。高IKK含量也可通过负调控诸如FOXO因子的其它转录因子来促进肿瘤发生。Hu，M.(2004)″IKB Kinase Promotes Tumorigenesis through Inhibition of ForkheadFOXO3a，″Cell，117，225-237。因此，抑制IKK可抑制细胞增殖和肿瘤发生。已经显示其它苯胺基嘧啶衍生物抑制不当地高的激酶活性。例如参看美国专利第6,048,866号。然而，仍需要选择性抑制激酶活性(包括IKK)的药剂。本发明满足这一需求。

发明内容
在一实施例中，本发明提供式I化合物 其中R1为氢；R2选自由NR7R8、胍基、脲基、视情况经取代的咪唑基、视情况经取代的烷基、视情况经取代的烯基、视情况经取代的炔基、羟基和烷氧基组成的群组；R3选自由氢；视情况经取代的苯基；具有1到4个杂原子的视情况经取代的5或6元杂芳基环，只要所述杂芳基环不是吡啶、呋喃、异恶唑、吡唑、三唑、咪唑或噻唑即可；与含有0到4个杂原子的4到8元环稠合的苯环，所述4到8元环经0到2个C＝O、SO或SO2基团中断且视情况经取代；含有0到4个杂原子的视情况经取代的单环或多环；视情况经取代的烯基；视情况经取代的炔基；-NR7R8；-COOR9；-CONR7R8；和-SO2R10组成的群组；R4为氢；R5选自由氢、甲基、烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、烷基磺酰基、羟甲基和烷氨基甲基组成的群组；R6选自由氢；卤素；视情况经取代的苯基；具有1到4个杂原子的视情况经取代的5或6元杂芳基环；与含有0到4个杂原子的4到8元环稠合的苯环，所述4到8元环经0到2个C＝O、SO或SO2基团中断且视情况经取代；含有0到4个杂原子的视情况经取代的单环或多环；-NR7R8；-COOR9；-CONR7R8；和-SO2R10；视情况经取代的烷基；视情况经取代的烯基；视情况经取代的炔基；羟基；烷氧基；OR7；和SR7组成的群组；R7和R8独立选自由氢；视情况经取代的烷基；视情况经取代的烯基；视情况经取代的炔基；视情况经取代的芳基；视情况经取代的杂芳基；羟基；烷氧基；烷氨基；芳氨基；杂芳氨基；-NCOR9；-COR9；-CONR7R8；SO2R10；含有0到3个杂原子的视情况经取代的3到10元环胺组成的群组；视情况，R7和R8一起形成含有0到4个杂原子的视情况经取代的3到12元单环或双环；R9选自由氢、甲基、三氟甲基、视情况经取代的烷基、视情况经取代的芳基和视情况经取代的杂芳基组成的群组；R10选自由甲基、三氟甲基、视情况经取代的烷基、视情况经取代的芳基、视情况经取代的杂芳基和NR7R8组成的群组；和其盐、溶剂化物和水合物。
在另一实施例中，本发明提供优选的取代基和特定式I化合物。
在另一实施例中，本发明也提供包含本发明化合物和医药学上可接受的载剂的医药组合物。在另一实施例中，本发明提供一种通过提供本发明化合物而在细胞中抑制激酶作用、尤其是IKK的方法。本发明也提供一种通过投与本发明的化合物或医药组合物而在哺乳动物、尤其是人类中抑制激酶活性、尤其是IKK的方法。本发明也提供一种通过投与本发明化合物来治疗激酶依赖性病症、尤其是炎症或癌症的方法。
在另一实施例中，本发明提供通过投与本发明化合物来治疗与NF-κB活化相关的疾病的方法。
在其它实施例中，本发明提供通过投与本发明化合物来治疗癌症；发炎或自体免疫病症；心血管、代谢或缺血性病症；传染病、尤其是病毒感染；以及绝经前或绝经后病症、尤其是骨质疏松的方法。
本发明也提供进一步包含投与NF-κB路径的蛋白激酶的其它抑制剂的方法。
在另一实施例中，本发明提供用于制造如上所定义的式I化合物的方法。本发明也涵盖这些方法的中间体。


图1-8绘示示范性胍和烯胺酮反应。
图9-14绘示示范性卤素置换反应。
具体实施例方式
本发明涉及苯胺基嘧啶类似物、医药组合物和其使用方法。在一实施例中，本发明提供式I化合物
其中R1为氢；R2选自由NR7R8、胍基、脲基、视情况经取代的咪唑基、视情况经取代的烷基、视情况经取代的烯基、视情况经取代的炔基、羟基和烷氧基组成的群组；R3选自由氢；视情况经取代的苯基；具有1到4个杂原子的视情况经取代的5或6元杂芳基环，只要所述杂芳基环不是吡啶、呋喃、异恶唑、吡唑、三唑、咪唑或噻唑即可；与含有0到4个杂原子的4到8元环稠合的苯环，所述4到8元环经0到2个C＝O、SO或SO2基团中断且视情况经取代；含有0到4个杂原子的视情况经取代的单环或多环；视情况经取代的烯基；视情况经取代的炔基；-NR7R8；-COOR9；-CONR7R8；和-SO2R10组成的群组；R4为氢；R5选自由氢、甲基、烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、烷基磺酰基、羟甲基和烷氨基甲基组成的群组；R6选自由氢；卤素、视情况经取代的苯基；具有1到4个杂原子的视情况经取代的5或6元杂芳基环；与含有0到4个杂原子的4到8元环稠合的苯环，所述4到8元环经0到2个C＝O、SO或SO2基团中断且视情况经取代；含有0到4个杂原子的视情况经取代的单环或多环；-NR7R8；-COOR9；-CONR7R8；和-SO2R10；视情况经取代的烷基；视情况经取代的烯基；视情况经取代的炔基；羟基；烷氧基；OR7；和SR7组成的群组；R7和R8独立选自由氢；视情况经取代的烷基；视情况经取代的烯基；视情况经取代的炔基；视情况经取代的芳基；视情况经取代的杂芳基；羟基；烷氧基；烷氨基；芳氨基；杂芳氨基；-NCOR9；-COR9；-CONR7R8；SO2R10；含有0到3个杂原子的视情况经取代的3到10元环胺组成的群组；视情况，R7和R8一起形成含有0到4个杂原子的视情况经取代的3到12元单环或双环；R9选自由氢、甲基、三氟甲基、视情况经取代的烷基、视情况经取代的芳基和视情况经取代的杂芳基组成的群组；R10选自由甲基、三氟甲基、视情况经取代的烷基、视情况经取代的芳基、视情况经取代的杂芳基和NR7R8组成的群组；和其盐、溶剂化物和水合物。
在一些实施例中，本发明的R基团视情况经取代。除非另外说明，否则视情况经取代意谓具有0、1或1个以上取代基。除非另外说明，否则经取代意谓具有一个或一个以上取代基。取代基包括氢、卤素、氰基、硝基、烷氨基、羟基、烷氧基、烷酰基、羰基、氨甲酰基、三氟甲基、三氟甲氧基、芳基、杂芳基、芳烷基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、亚硫酰基(thioyl)、-COOR9、-CONR7R8、NR7R8(包括如下所述的环胺)、SR7和-SO2R10。当经取代基团为芳基或杂芳基时，取代基进一步包括甲基和视情况经取代的C2-10直链、支链或环状烷基、烯基或炔基。R基团上的取代基也可视情况经取代。
示范性卤素包括(但不限于)氟、氯、溴和碘。
除非另外说明，否则烷基、烯基和炔基具有1到10个碳原子且可为直链、支链或环状。
烷基意谓直链或支链、环状或非环状烃。
烯基意谓具有至少2个碳原子且包括至少一个碳碳双键的直链或支链、环状或非环状烃。
炔基意谓具有至少2个碳原子且包括至少一个碳碳三键的直链或支链烃。
杂原子意谓选自氮(其可经季铵化)、氧和硫(包括亚砜和砜)的原子。
烷氧基意谓-OR基团，其中R为可经一个或一个以上官能基视情况取代的烷基、烯基或炔基。
羟基意谓-OH。
羰基意谓以双键与氧键结的碳，意即C＝O。
氨基意谓-NH2基团。
水合物为含有以一定比率组合为晶体的组成部分的水分子的固体化合物。
溶剂化物为含有以一定比率组合为晶体的组成部分的溶剂分子的固体化合物。芳基的实例包括(但不限于)苯基和萘基。
杂芳基意谓包括单环、双环和三环系统的芳香族杂环，其中至少一个环系统的碳原子经独立选自氮、氧和硫的杂原子置换。杂芳基的实例包括(但不限于)吡啶基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基、咪唑基、三嗪基、恶唑基、异恶唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吡咯、吡嗪基和噻唑基。杂环基的实例包括(但不限于)饱和或部分饱和的杂芳基，其包括(但不限于)吡唑啉、恶唑酮、噻唑酮、噻二唑酮、哌嗪、吡咯烷、哌啶、吗啉、苯并咪唑酮、苯并恶唑酮、苯并二恶唑、苯并二恶唑酮、苯并[1，4]恶嗪-3-酮、3，4-二氢喹喔啉-2-酮、苯并[1，4]二氧杂环己烯-2-酮(benzo[1，4]dioxene-2-one)和1，2，3，4-四氢喹喔啉。与杂环稠合的苯环的实例包括(但不限于)苯并呋喃、异苯并呋喃、二氢苯并呋喃、二氢苯并吡喃、苯并恶唑烷酮、苯并咪唑烷酮、苯并恶嗪酮、吲哚、异吲哚、苯并噻吩、喹啉和异喹啉。除非另外说明，否则杂芳基和杂环基含有一个或一个以上选自由硫、氮和氧组成的群组的杂原子。
在一实施例中，R2选自由NR7R8、视情况经取代的咪唑基和视情况经取代的烷基组成的群组。在一优选实施例中，R2为NR7R8，且R7和R8独立选自由氢、烷基、氨基和烷氨基(包括环胺)、烷羟基、烷酰基、烷氧基、烷氧基羰基、羰基、羧基、芳烷基、视情况经取代的苯基、杂芳基和COR9(其中R9为烷基或芳烷基)组成的群组。在一优选实施例中，R2为NH2、-(二甲氨基)乙基或-(二甲氨基)丙基。
在另一实施例中，R7和R8一起形成含有0到4个杂原子的视情况经取代的3到12元单环或双环。在一实施例中，R2为含有至少一个氮原子和0到1个其它杂原子的视情况经取代的5到6元杂环基团。例如，R2可为视情况经取代的吗啉基、视情况经取代的哌嗪基或视情况经取代的吡咯烷基。
在一实施例中，R2为NR7R8，且R2选自作为组2a列举的基团组2a

在另一实施例中，R2选自作为组2b列举的基团组2b 在一实施例中，SO2R2基团是在苯基环的3位。在另一实施例中，SO2R2基团是在苯基环的4位，使得化合物为式II化合物
在一实施例中，R3选自由以下基团组成的群组视情况经取代的苯基、视情况经取代的噻吩基、视情况经取代的吡嗪基、视情况经取代的吡咯基、萘基、双环[2.2.1]庚烯和与含有1到2个杂原子的5到7元环稠合的苯环，所述5到7元环视情况经C＝O基团中断且视情况经取代。
在一实施例中，R3为视情况经取代的苯基。这一实施例的优选取代基包括烷氧基、三氟甲基、氟、羟基和NR7R8(其中R7为COR9且R8为氢)。在一实施例中，R3选自作为组3a列举的基团组3a



在一实施例中，R3为视情况经取代的噻吩基。这一实施例的优选取代基包括氢(意即未经取代的噻吩基)、溴和甲基。在一实施例中，R3选自作为组3b列举的基团组3b 在另一实施例中，R3选自作为组3c列举的基团组3c

在一实施例中，R5为氢或甲基。在一优选实施例中，R5为氢。
在一实施例中，R6为氢、甲基、乙基、氯、甲氧基、NH2或三氟甲基。在一优选实施例中，R6为氢。
本发明的示范性化合物包括以下化合物和其盐、溶剂化物和水合物





















在式I化合物中存在某些取代基可使得能够形成所述化合物的盐。合适的盐包括医药学上可接受的盐，例如衍生自无机酸或有机酸的酸加成盐和衍生自无机碱和有机碱的盐。如本文所用的短语“医药学上可接受的盐”为从医药活性剂的酸性和碱性氮基团形成的盐。说明性盐包括(但不限于)硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸性磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸性柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、鞣酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐(gentisinate)、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐(glucaronate)、糖酸盐(saccharate)、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、双羟萘酸盐(意即1，1-亚甲基-双(2-羟基-3-萘甲酸盐))和脂肪酸盐(诸如己酸盐、月桂酸盐、肉豆蔻酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、油酸盐、亚油酸盐和亚麻酸盐)。短语“医药学上可接受的盐”也是指由具有酸性官能基(例如羧酸官能基)的医药活性剂和医药学上可接受的无机碱或有机碱制备而来的盐。合适的碱包括(但不限于)诸如钠、钾和锂的碱金属的氢氧化物；诸如钙和镁的碱土金属的氢氧化物；诸如铝和锌的其它金属的氢氧化物；氨和有机胺，诸如未经取代或经羟基取代的单、二或三烷基胺；二环己胺；三丁胺；吡啶；N-甲基-N-乙胺；二乙胺；三乙胺；单、双或三(2-羟基-低碳数烷基胺)，诸如单、双或三(2-羟乙基)胺、2-羟基-叔丁胺或三(羟甲基)甲胺、N，N-二低碳数烷基-N-(羟基低碳数烷基)-胺(诸如N，N-二甲基-N-(2-羟乙基)胺)或三(2-羟乙基)胺；N-甲基-D-葡糖胺；和诸如精氨酸、赖氨酸的氨基酸等。
酸加成盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、烷基磺酸盐(例如甲磺酸盐、乙磺酸盐或羟乙基磺酸盐)、芳基磺酸盐(诸如对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐或萘磺酸盐)、磷酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、草酸盐、酒石酸盐和苯甲酸盐。
衍生自无机碱或有机碱的盐包括诸如钠盐或钾盐的碱金属盐、诸如镁盐或钙盐的碱土金属盐和诸如吗啉、哌啶、二甲胺或二乙胺盐的有机胺盐。
本发明化合物的尤其有用的盐包括医药学上可接受的盐，尤其是医药学上可接受的酸加成盐。
在另一实施例中，本发明提供用于制造如上所定义的式I化合物的方法。本发明也涵盖这些方法的中间体。在所述方法的描述中，有编号的R基团是如上文关于式I所定义，且普通(未编号)R基团表示如上所述的独立取代基。图中所示的化合物被标以图号，且适当时还包括表示对应通用结构的附带说明。术语“反应”包括(但不限于)加入、搅拌、加热、加热到回流、溶解、湿磨和其任何组合。所属领域技术人员将了解假定反应组份并假定本文所提供的实例的情况下反应的意义。所述方法优选包括分离式I化合物的步骤。
在一实施例中，本发明提供通过使烯胺酮与胍反应来制备式I化合物的方法(反应1)。在一实施例中，在1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)存在下使式G-1的烯胺酮与式G-2的胍反应。
反应1 在上文所示的示范性反应1中，所述方法产生式I化合物，其中R2为NR7R8，且R1、R4、R5各自为氢。
反应优选地是在诸如碳酸钾或氢氧化钾的碱存在下进行。
烯胺酮G-1可以所属领域中已知的任何方法制备，例如乙酰基衍生物与缩醛(优选为N，N-二甲基甲酰胺二甲缩醛)或叔丁氧基双(二甲氨基)甲烷的反应。参看图1。
胍G-2可通过使式G-3的胺与氰胺或1-H-吡唑-1-甲脒反应来制备。同样参看图1。

或者，胍G-2可通过使式G-4的卤化磺酰胺与胍反应来制备。参看图2。
在反应1的另一实施例中，在形成嘧啶后加入SO2R2基团。所述方法包括以下步骤使烯胺酮G-1与式3-1的胍衍生物和NMP反应以形成嘧啶；使嘧啶与氯磺酸反应以形成式3-3的磺酰氯；并使磺酰氯3-3与具有式HNR7R8的胺反应以形成式I化合物。参看图3。
在另一实施例中，本发明提供通过卤素置换来制备式I化合物的方法(反应2)。反应2反应可在溶剂、优选为二恶烷中进行。在反应2反应的优选实施例中，R3为视情况经取代的苯基或视情况经取代的噻吩基。
在一实施例中，使胺G-3与式G-5的卤化嘧啶反应。卤化嘧啶的卤素优选为氯。反应优选是在对甲苯磺酸存在下进行。
在反应2的另一实施例中，使式G-4的卤化磺酰胺与式G-6的嘧啶反应。卤化磺酰胺的卤素优选为溴。反应优选包括加入叔丁醇钠(NaOtBu)的步骤。同样，反应优选是在三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd2dba3)和2，2′-双(二苯膦基)-1，1′-联萘(BINAP)存在下进行。

在上文所示的示范性反应2中，所述方法产生式I化合物，其中R2为NR7R8，且R1、R4、R5各自为氢。
所用的原材料市面有售或者易于由所属领域技术人员制备。所属领域技术人员可对溶剂、温度、压力和其它反应条件进行修改。适当时，本文所述的方法可用与固体载体结合的原材料、中间体和/或试剂进行(例如参看Thompson，L.A.，Ellman，J.A.，ChemicalReviews，96，555-600(1996))。
在另一实施例中，本发明也提供包含本发明化合物和医药学上可接受的载剂的医药组合物。医药组合物是根据可接受的医药程序制备，诸如描述于RemingtonsPharmaceutical Sciences，第17版，Alfonoso R.Gennaro编，Mack Publishing Company，Easton，Pa.(1985)中的医药程序。医药学上可接受的载剂为那些与配方中的其它成份相容且在生物学上可接受的载剂。
在另一实施例中，本发明提供一种通过提供一种或一种以上本发明的化合物或医药组合物来抑制激酶作用、尤其是IKK的方法。提供包括(但不限于)通过所属领域技术人员已知的医药学上可接受的方法和投与途径进行投与。提供也意谓暴露或接触。本发明化合物可用于抑制激酶活性、尤其是IKK。抑制包括完全抑制以及降低或减少。不欲受理论束缚，认为本发明化合物通过阻断IKKβ与IκBα的缔合可抑制IKK复合体磷酸化IκB的能力。同样，NF-κB不被释放且不进入核中以活化转录。
各种检定证明本发明化合物可用作IKK抑制剂。举例而言，结合检定证明本发明化合物影响IKKβ与IκBα的缔合。通过使本发明化合物与IKKβ酶和IκBα底物接触且然后检测化合物是否抑制IKKβ与IκBα的缔合来进行结合检定。抑制IKKβ与IκBα的缔合的本发明化合物可抑制IKK磷酸化IκB的能力且因此可抑制NF-κB的释放和受NF-κB控制的基因的转录。
本发明也提供一种通过投与激酶抑制量、尤其是IKK抑制量的本发明的化合物或医药组合物而在哺乳动物、尤其是人类中抑制激酶活性、尤其是IKK的方法。投与包括所属领域技术人员已知的所有医药学上可接受的方法和投与途径。
因为IKK在炎症、细胞生长和肿瘤发生中起重要作用，所以抑制IKK的化合物可用作抗炎症和抗癌药剂。因此，一实施例提供一种治疗激酶依赖性病症、诸如IKK依赖性病症的方法，其包含对个体投与激酶抑制量、诸如IKK抑制量的本发明的化合物或医药组合物。包括IKK依赖性病症的激酶依赖性病症包括(但不限于)自体免疫疾病，诸如类风湿性关节炎、多发性硬化和全身性红斑狼疮；移植排斥；移植物抗宿主病(graftversus host disease)；增生病症，诸如肿瘤；牛皮癣；类风湿性关节炎中的血管翳形成；血管成形术后再狭窄和动脉粥样硬化；骨质疏松；和其中细胞接收促炎性信号的疾病，诸如哮喘、炎症性肠病和胰腺炎。
包含本发明化合物的医药组合物可抑制激酶活性、尤其是IKK。激酶抑制接着将抑制负责诸如炎症和癌症的激酶依赖性病症的基因的下游表达。举例而言，抑制IKK可抑制NF-κB的活化，这接着减少NF-κB依赖性基因的表达。因为NF-κB依赖性基因已与炎症和癌症相关联，所以包含抑制IKK的化合物的医药组合物可用于治疗炎症和癌症。
本发明也提供通过投与本发明的医药组合物来治疗与NF-κB活化相关的疾病的方法。治疗包括(但不限于)观察不到任何症状的完全治疗以及减少症状和缓解症状。短语“治疗(treating，treatment of)”等包括缓解或终止指定病症。与NF-κB活化相关的疾病包括(但不限于)炎症性病症，尤其是类风湿性关节炎、炎症性肠病和哮喘；皮肤病，包括牛皮癣和异位性皮炎；自体免疫疾病；组织和器官排斥；阿兹海默氏病；中风；癫痫；帕金森氏病；动脉粥样硬化；再狭窄；癌症，包括霍奇金氏病；和某些病毒感染，包括AIDS；骨关节炎；骨质疏松；和共济失调性毛细血管扩张症。
在一个实施例中，本发明提供通过投与本发明的医药组合物来治疗癌症的方法。癌症包括细胞的异常生长，所述细胞倾向于以不受控的方式增殖且在一些情况下转移(扩散)。治疗癌症涵盖(但不限于)抑制或减少肿瘤细胞增殖、肿瘤细胞生长和抑制肿瘤发生。癌症包括(但不限于)结肠癌、直肠癌、前列腺癌、肝癌、肺癌、支气管癌、胰腺癌、脑癌、头癌、颈癌、胃癌、皮肤癌、肾癌、宫颈癌、血癌、喉癌、食道癌、睾丸癌、膀胱癌、卵巢癌或子宫癌。
在另一实施例中，本发明提供通过投与本发明的医药组合物来治疗炎症性或自体免疫病症的方法。治疗炎症涵盖(但不限于)减少炎症和治疗炎症性病症。炎症性和自体免疫病症包括(但不限于)类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风、哮喘、支气管炎、过敏性鼻炎、慢性阻塞性肺病、囊肿性纤维化、炎症性肠病、肠易激综合症、粘液性结肠炎、溃疡性结肠炎、溃破性结肠炎、克罗恩氏病、胃炎、食管炎、肝炎、胰腺炎、肾炎、牛皮癣、湿疹、皮炎、荨麻疹、多发性硬化、鲁盖瑞氏病、败血症、结膜炎、急性呼吸窘迫综合症、紫癜、鼻息肉、红斑性狼疮、结膜炎、春季粘膜炎、慢性关节风湿病、全身炎症反应综合症(SIRS)、败血症、多肌炎、皮肌炎(DM)、结节性多动脉炎(Polyaritis nodoa，PN)、混合性结缔组织病(MCTD)和干燥综合症(Sjoegren′ssyndrome)。
在另一实施例中，本发明提供通过投与本发明的医药组合物来治疗心血管、代谢或缺血性病症的方法。心血管、代谢和缺血性病症包括(但不限于)动脉粥样硬化、血管成形术后再狭窄、左心室肥厚、胰岛素抵抗、I型糖尿病、II型糖尿病、高血糖、高胰岛素血症、血脂异常、肥胖、多囊卵巢疾病、高血压、X综合症、骨质疏松、勃起功能障碍、恶病质、心肌梗塞、心脏、肾、肝和脑的缺血性疾病、器官移植排斥、移植物抗宿主病、内毒素休克和多器官功能衰竭。
在另一实施例中，本发明提供通过投与本发明的医药组合物来治疗传染病、尤其是病毒感染的方法。病毒感染包括(但不限于)那些由人类免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类乳头状瘤病毒、人类T细胞白血病病毒和爱波斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus)引起的病毒感染。
在另一实施例中，本发明提供通过投与本发明的医药组合物来治疗绝经前或绝经后病症的方法。特定言之，本发明的医药组合物可用于治疗骨质疏松。治疗骨质疏松包括预防骨质疏松以及对抗现有病症。
本发明也提供进一步包含投与NF-κB路径的蛋白激酶的其它抑制剂的抑制和治疗方法。NF-κB路径的蛋白激酶的抑制剂包括(但不限于)IKK抑制剂和GSK-3抑制剂。IKK抑制剂包括(但不限于)杂环羧酰胺、经取代的苯并咪唑、经取代的吲哚、β-咔啉，诸如PS-1145、SPC0023579、SPC839/AS602868(AS2868)、NVPIKK004和NVPIKK005。GSK-3抑制剂包括(但不限于)马来酰亚胺(诸如SB410111、SB495052、SB517955、SB216763、SB415286)、二氨基-1，2，4-三唑羧酸衍生物和2，5-二氢-1H-吡咯-2，5-二酮衍生物、二氨基噻唑、双环化合物、吡嗪衍生物、嘧啶衍生物或吡啶衍生物和嘌呤衍生物(诸如CT98014、CT98023、CT99021)、2-氨基-3-(烷基)-嘧啶酮衍生物、1H-咪唑-4-胺衍生物和3-吲哚基-4-苯基-1H-吡咯-2，5-二酮衍生物。Haefher，B.(2002)″NF-KBarresting amajor culprit in cancer，″Drug Discovery Today，7，658。
本发明的医药组合物可包含单独的本发明化合物或其与其它激酶抑制化合物或化疗剂的组合。化疗剂包括(但不限于)依西美坦(exemestane)、福美斯坦(formestane)、阿那曲唑(anastrozole)、来曲唑(letrozole)、法曲唑(fadrozole)、紫杉烷(taxane)和衍生物(诸如太平洋紫杉醇(paclitaxel)或多烯紫杉醇(docetaxel))、封装紫杉烷(encapsulated taxanes)、CPT-11、喜树碱(camptothecin)衍生物、小红莓苷(anthracyclineglycoside)(例如多柔比星(doxorubicin)、伊达比星(idarubicin)、表柔比星(epirubicin)、依托泊苷(etoposide))、长春瑞滨(navelbine)、长春碱(vinblastine)、卡铂(carboplatin)、顺铂(cisplatin)、埃斯姆汀(estramustine)、塞来昔布(celecoxib)、它莫西芬(tamoxifen)、雷洛昔芬(raloxifen)、Sugen SU-5416、Sugen SU-6668和Herceptin。
本发明的医药组合物可含有一种或一种以上赋形剂。将赋形剂加入组合物中以用于多种目的。
稀释剂增加固体医药组合物的体积，且可使得含有组合物的医药剂型更易于被患者和护理者所处理。举例而言，用于固体组合物的稀释剂包括微晶纤维素(例如Avicel_)、微细纤维素、乳糖、淀粉、预胶化淀粉、碳酸钙、硫酸钙、糖、葡萄糖结合剂(dextrate)、糊精、右旋糖、磷酸二钙二水合物、磷酸三钙、高岭土、碳酸镁、氧化镁、麦芽糖糊精、甘露醇、聚甲基丙烯酸酯(例如Eudragit_)、氯化钾、粉状纤维素、氯化钠、山梨糖醇和滑石。
经压制成诸如片剂的剂型的固体医药组合物可包括赋形剂，其功能包括在压缩后帮助使活性成份和其它赋形剂结合在一起。用于固体医药组合物的粘合剂包括阿拉伯胶、褐藻酸、卡波姆(carbomer)(例如卡伯波(carbopol))、羧甲基纤维素钠、糊精、乙基纤维素、明胶、瓜尔胶(guar gum)、氢化植物油、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素(例如Klucel_)、羟丙基甲基纤维素(例如Methocel_)、液体葡萄糖、硅酸镁铝、麦芽糖糊精、甲基纤维素、聚甲基丙烯酸酯、聚维酮(povidone)(例如Kollidon_、Plasdone_)、预胶化淀粉、褐藻酸钠和淀粉。
经压制的固体医药组合物在患者胃中的溶解速率可通过向组合物中加入崩解剂来增加。崩解剂包括褐藻酸、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠(例如Ac-Di-Sol_、Primellose_)、胶状二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮(crospovidone)(例如Kollidon_、Polyplasdone_)、瓜尔胶、硅酸镁铝、甲基纤维素、微晶纤维素、波拉克林钾(polacrilinpotassium)、粉状纤维素、预胶化淀粉、褐藻酸钠、乙醇酸淀粉钠(例如Explotab_)和淀粉。
可加入助流剂以改进非压制固体组合物的流动性并改进给药精确性。可起助流剂作用的赋形剂包括胶状二氧化硅、三硅酸镁、粉状纤维素、淀粉、滑石和磷酸三钙。
当通过压制粉状组合物来制得诸如片剂的剂型时，使组合物经受来自冲头和冲模的压力。一些赋形剂和活性成份具有粘附到冲头和冲模的表面的倾向，这可引起产物具有凹陷和其它表面不规则。可将润滑剂加入组合物中以降低粘附并方便产物从冲模释放。润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸棕榈酸甘油酯、氢化篦麻油、氢化植物油、矿物油、聚乙二醇、苯甲酸钠、月桂基硫酸钠、硬脂基富马酸钠(sodium stearylfumarate)、硬脂酸、滑石和硬脂酸锌。
调味剂和增味剂(flavor enhancer)使得剂型对患者而言更美味。用于可包括在本发明组合物中的医药产物的常见调味剂和增味剂包括麦芽醇、香兰素(vanillin)、乙基香兰素、薄荷醇、柠檬酸、富马酸、乙基麦芽醇和酒石酸。
也可使用任何医药学上可接受的着色剂对固体和液体组合物进行染色以改进其外观和/或帮助患者鉴别产物和单位剂量水平。
在本发明的液体医药组合物中，式I化合物和任何其它固体赋形剂是溶解或悬浮于诸如水、植物油、醇、聚乙二醇、丙二醇或甘油的液体载剂中。
液体医药组合物可含有乳化剂以将不可溶于液体载剂中的活性成份或其它赋形剂均匀分散在组合物中。例如，可用于本发明的液体组合物中的乳化剂包括明胶、蛋黄、酪蛋白、胆固醇、阿拉伯胶、黄芪胶、角叉菜胶、果胶、甲基纤维素、卡波姆、十八十六醇和十六醇。
本发明的液体医药组合物也可含有粘度增强剂以改进产物的口感和/或涂布胃肠道的内层。所述药剂包括阿拉伯胶、褐藻酸膨润土、卡波姆、羧甲基纤维素钙或钠、十八十六醇、甲基纤维素、乙基纤维素、明胶瓜尔胶、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糖糊精、聚乙烯醇、聚维酮、碳酸丙二酯、褐藻酸丙二醇酯、褐藻酸钠、乙醇酸淀粉钠、淀粉黄芪胶和黄原胶。
也可加入诸如山梨醇、糖精、糖精钠、蔗糖、阿斯巴甜(aspartame)、果糖、甘露醇和转化糖的甜味剂以改进味道。
可以安全摄取含量加入诸如醇、苯甲酸钠、丁基化羟基甲苯、丁基化羟基苯甲醚和乙二胺四乙酸的防腐剂和螯合剂以改进储存稳定性。
根据本发明，液体组合物也可含有诸如葡糖酸、乳酸、柠檬酸或乙酸、葡糖酸钠、乳酸钠、柠檬酸钠或乙酸钠的缓冲剂。对赋形剂和用量的选择可由配方科学家基于所属领域中的标准程序和参考工作的经验和考虑来容易地确定。
本发明的固体组合物包括粉末、颗粒、聚集粒和压制组合物。剂量包括适于经口、经口腔、经直肠、不经肠(包括皮下、肌内和静脉内)、吸入和经眼投与的剂量。在任何给定情况下，最合适的投与将取决于所治疗的病症的性质和严重性。剂量适宜地可以单位剂型提供并且由医药学领域中众所周知的任何方法制备。
剂型包括固体剂型(诸如片剂、粉末、胶囊、栓剂、药囊、锭剂和糖锭)以及液体糖浆、悬浮液和酏剂。
本发明的剂型可为在硬质或软质外壳中含有组合物(诸如本发明的粉末状或颗粒状固体组合物)的胶囊。外壳可由明胶制得且视情况含有增塑剂(诸如甘油和山梨醇)和遮光剂或着色剂。
可根据所属领域中已知的方法将活性成份和赋形剂调配成组合物和剂型。
可由湿式制粒法制备用于压片或胶囊填充的组合物。在湿式制粒中，将一些或全部粉末形式的活性成份和赋形剂掺合，然后在液体、通常为水的存在下进一步混合，这导致粉末聚结成颗粒。将颗粒筛分和/或碾磨，干燥且然后筛分和/或碾磨到所要粒度。然后可对颗粒压片，或者可在压片前加入其它赋形剂，诸如助流剂和/或润滑剂。
可通过干式掺合常规制备压片组合物。举例而言，可将活性成份与赋形剂的掺合组合物压制成长条或薄板，然后粉碎成压制颗粒。可随后将压制颗粒压缩成片剂。
作为干式制粒的替代方法，可使用直接压缩技术将掺合组合物直接压缩成压制剂型。直接压缩产生不含颗粒的更均一片剂。尤其适于直接压缩成片的赋形剂包括微晶纤维素、喷雾干燥乳糖、磷酸二钙二水合物和胶状二氧化硅。这些赋形剂和其它赋形剂在直接压缩成片中的适当使用为关于直接压缩成片的特定调配挑战具有经验和技能的所属领域技术人员所已知。
本发明的胶囊填充可包括关于压片所描述的前述掺合物和颗粒中的任一种，然而，其不经受最终压片步骤。
本发明所涵盖的医药组合物的投与方法不受特别限制，且可视患者年龄、性别和症状以各种制剂形式投与。举例而言，可经口投与片剂、丸剂、溶液、悬浮液、乳液、颗粒和胶囊。注射制剂可经静脉内个别投与，或者与诸如葡萄糖溶液和氨基酸溶液的注射输注液经静脉内混合投与。必要时，注射制剂是经肌内、皮内、皮下或腹膜内单独投与。栓剂可投与直肠中。
本发明的医药组合物中所含的式I化合物的量不受特别限制，然而，其剂量应足以治疗、缓解或减少目标症状。本发明的医药组合物的剂量将取决于使用方法、患者年龄、性别和健康情形。
虽然已描述本发明，但是通过以下非限制性实例进一步说明本发明。
实例反应1胍与烯胺酮反应实例1制备4-[4-(5-氯-噻吩-2-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯磺酰胺(示范件化合物4)参看图1。
步骤1将2-乙酰基-5-氯噻吩(0.8g，5mmol)溶解于二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(6mL)中，并将溶液加热到回流维持3小时。蒸发溶剂以获得粗1-(5-氯-噻吩-2-基)-3-二甲氨基-丙烯酮。
步骤2将磺胺(0.86g，5mmol)和1-H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(0.73g，5mmol)于3mL硝基苯中的混合物加热到回流维持2小时。从所形成的固体中倾析溶液。将N-丁醇(8mL)、NaOH水溶液(0.73mL，10N)和粗1-(5-氯-噻吩-2-基)-3-二甲氨基-丙烯酮加入固体中。将反应加热到回流维持过夜。将反应冷却，并通过过滤收集产物且用乙醚清洗以获得8.3mg棕色固体状的标题化合物。LC/MS数据(条件A；分子离子和滞留时间)m/z 367(M+H)；2.85min。
也可根据本方法合成示范性化合物5-34。
HPLC条件(条件A)具有ChemStation软件的Hewlett Packard 1100 MSD；Xterra C18柱，30mm×2.1mm，5μ粒度，50℃；溶剂A水(0.02％甲酸缓冲液)；溶剂B乙腈(0.02％甲酸缓冲液)；梯度时间05％B；0.3min5％B；3.0min90％B；保持90％B 2min；流率1.0mL/min；检测254nm DAD；API-ES Scanning Mode Negative 150-700；Fragmentor 70mV。
实例1b制备4-[4-(5-吡啶-2-基乙炔基-噻吩-2-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯磺酰胺(示范性化合物35)参看图1。
步骤1以实例1a所述的程序制备4-[4-(5-溴-噻吩-2-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯磺酰胺。1H NMR(d6-DMSO，300MHz)δ7.19(s，1H)，7.39(d，J＝3.9Hz，1H)，7.45(d，J＝5.4Hz，1H)，7.75(s，1H)，7.86(s，1H)，7.90-7.96(m，3H)，8.58(d，J＝5.4Hz，1H)，10.12(s，1H)；LC/MS数据(条件A；分子离子和滞留时间)m/z 411和413(M+H)；2.59min。
步骤2具有搅拌棒的10mL玻璃微波反应容器含有乙酸钯(5mg，22μmol)、三邻甲苯膦(13mg，44μmol)和4-[4-(5-溴-噻吩-2-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯磺酰胺(80mg，200μmol)。将无水二甲基甲酰胺(DMF)(3.5mL)、2-乙炔基吡啶(46mg，450μmol)和三乙胺(50μL)加入反应容器中。将反应容器密封并在微波反应器(Emrys Microwave Reactor，personal Chemistry AB，Uppsala，Sweden)中加热到180C维持660秒。将反应物滤过硅藻土，浓缩，再溶解于二甲亚砜(DMSO)中并通过反相(RP)HPLC纯化以获得10mg标题化合物。LC/MS数据(条件A；分子离子和滞留时间)m/z 434(M+H)；2.52min。
也可根据本方法合成示范性化合物36-38。
实例2制备N-[4-(吗啉-4-基磺酰基)苯基]-4-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-2-胺(示范性化合物39)参看图2。
步骤1制备4-[(4-氟苯基)磺酰基]吗啉0℃下，在氮中于搅拌下向4-氟苯磺酰氯(3.97g，20mmol)于二氯甲烷(40ml)中的溶液中加入吗啉(4.4mL，50mmol)。将混合物在0℃下搅拌15min，然后温到室温维持18小时。过滤所得悬浮液，并将滤液与10％碳酸钾一起搅拌2小时。蒸发二氯甲烷，并过滤水性悬浮液，且用水洗涤沉淀物，然后真空干燥以得到5.0g白色固体；mp106-107℃；MS(APCI)m/z 246.1(M+H)。
步骤2A制备N-[4-(吗啉-4-基磺酰基)苯基]胍将4-[(4-氟苯基)磺酰基]吗啉(0.25g，1mmol)、碳酸铯(1.30g，4mmol)和碳酸胍(1.08g，6mmol)于2ml 1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)中的混合物在85到90℃下搅拌24小时。然后冷却到室温并用乙醚稀释。过滤所得悬浮液，并用四氢呋喃(THF)萃取沉淀物，蒸发溶剂以得到0.12g黄色固体；mp 102-105℃；MS(ESI)m/z 285.1(M+H)；HRMSC11H16N4O3S的计算值，284.0943；实验值(ESI_FT)，285.1011(M+H)。
步骤2B制备(2E)-3-(二甲氨基)-1-[4-(三氟甲基)苯基]丙-2-烯-1-酮将4′-(三氟甲基)苯乙酮(9.60g，50mmol)于25ml N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(DMF-DMA)中的溶液在105到110℃下搅拌20小时。然后冷却到室温并用己烷稀释。过滤所得悬浮液，并用己烷洗涤沉淀物以得到10.93g黄色固体；mp 96.5-98℃；MS(ESI)m/z 244.1(M+H)。
步骤3制备N-[4-(吗啉-4-基磺酰基)苯基]-4-[4-(三氟甲基)苯基]-嘧啶-2-胺将N-[4-(吗啉-4-基磺酰基)苯基]胍(85mg，0.3mmol)、(2E)-3-(二甲氨基)-1-[4-(三氟甲基)苯基]丙-2-烯-1-酮(43mg，0.18mmol)和碳酸钾(83mg，0.6mmol)于1ml of 1，3-二甲基-3，4，5，6-四氢-2(1H)-嘧啶酮(DMPU)中的混合物在105到110℃下搅拌18小时。然后冷却到室温并用水(15ml)稀释。过滤所得悬浮液，并用稀柠檬酸和水洗涤沉淀物，然后将其溶解于乙酸乙酯中。使有机溶液通过硅胶垫，并蒸发滤液。用二氯甲烷与己烷的混合物湿磨残余物以得到63mg黄色固体；mp 240-241℃；MS(ESI)m/z 465.2(M+H)；HRMSC21H19F3N4O3S的计算值，464.1130；实验值(ESI_FT)，465.11835。
也可根据本方法合成示范性化合物40-67。
实例3制备N-(3-羟丙基)-4-({4-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-2-基}氨基)-苯磺酰胺(示范性化合物68)参看3。
步骤1制备N-苯基-4-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-2-胺将(2E)-3-(二甲氨基)-1-[4-(三氟甲基)苯基]丙-2-烯-1-酮(0.49g，2mmol)和苯基胍碳酸盐(0.30g，2.2mmol)于NMP(4ml)中的溶液在120℃下搅拌2天。然后冷却到室温并用水(40ml)稀释。过滤所得悬浮液，并用50％氯化铵溶液、水和己烷洗涤沉淀物，然后真空干燥以得到0.56g灰白色固体；mp 162-163℃；HRMSC17H12F3N3的计算值，315.0983；实验值(ESI_FTMS，[M+H]1+)，316.1048。
步骤2制备4-({4-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-2-基}氨基)苯磺酰氯将N-苯基-4-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-2-胺(0.16g，0.5mmol)于1.5ml氯磺酸中的溶液在65到70℃下搅拌1小时。将其冷却到室温，并缓慢加入冰与水的搅拌混合物中。过滤所得悬浮液，并用水洗涤沉淀物，然后真空干燥以得到0.24g黄色固体；mp186-188℃；HRMSC17H11ClF3N3O2S的计算值，413.0213；实验值(ESI-FTMS，[M+H]1+)，414.02984。
步骤3制备N-(3-羟丙基)-4-({4-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-2-基}氨基)苯磺酰胺0℃下，于搅拌下向4-({4-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-2-基}氨基)苯磺酰氯(0.10g，0.25mmol)于2ml乙酸乙酯中的溶液中加入3-氨基-1-丙醇(0.19g，2.5mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后用水(10ml)中止反应。蒸发乙酸乙酯，过滤所得悬浮液，并用水和己烷洗涤沉淀物，然后真空干燥以得到0.10g白色固体；mp 204-205℃；HRMSC20H19F3N4O38的计算值，452.1130；实验值(ESI-FTMS，[M+H]1+)，453.12161。
也可根据本方法合成示范性化合物67。
实例4用于制备2-苯胺基-4-芳基/杂芳基嘧啶一级磺酰胺的一般实验。参看图4。
也可使用首先由Bredereck(Bredereck，H.等人.Ber.，Dtsch.Chem，Ges.1964，97，3397)所概述的程序制备结构(I)的苯胺目标分子。可根据Bernatowicz(Bernatowicz，M.S.等人.J.Org.Chem.1992，57，2497)的程序使用吡唑-1-甲脒将胺(G-3)转化为对应的芳基胍(G-2)。在碱(诸如KOH、NaOH或Et3N)或酸(诸如HOAC)存在下，于热EtOH或MeOH中将胍与3-二甲氨基-1-芳基/杂芳基-丙烯酮(G-1)(通过加热甲基酮(4-3)和DMF DMA而制备)组合以得到所要的2-氨基嘧啶(I)。
步骤1制备3-二甲氨基-1-芳基/杂芳基-丙烯酮(G-1)将甲基酮的0.1M溶液在130℃下加热12小时。冷却到23℃后，蒸发所有挥发物。将剩余材料溶解于最少的CH2Cl2中并使其通过用其它CH2Cl2洗提的短SPE硅胶筒。将洗提液浓缩到最小体积，并加入等量的己烷。冷却到5℃以产生黄色或橙色固体状的标题化合物晶体。
步骤2制备2-苯胺基-4-芳基/杂芳基嘧啶一级磺酰胺(I)
将苯胺(1当量)与1.5当量呈0.1M硝基苯溶液形式的1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐组合并加热到200℃维持6小时。冷却到23℃后，加入1当量3-二甲氨基-1-芳基/杂芳基-丙烯酮，随后加入1.25当量KOH、EtOH(与硝基苯体积相等的体积)和H2O(EtOH体积的1/10)。将混合物在120℃下加热12小时，冷却到23℃并在Speed-Vac中蒸发。将所述粗材料溶解于0.5ml DMSO1.5ml MeCN中，滤过0.45μm GMF并通过Gilson HPLC纯化，Gilson HPLC使用Phenomenex LUNA C18柱60mm×21.20mm内径，5μm粒度用ACN/水(含有0.2％TFA或Et3N)梯度洗提。通过LC/MS分析适当部分。为分离标题化合物，合并纯部分且在Speed-Vac中蒸发溶剂。
可根据本方法合成示范性化合物1、4、9、10、12、13、15、16、18-29、31、32、34、35、37、38、69和70。
HPLC条件仪器-Agilent 1100；柱KeystoneAquasil C18(如上)；流动相A10mMNH4OAC于95％水/5％CAN中；流动相B10mM NH4OAC于5％水/95％CAN中；流率0.800ml/min；柱温40℃；注射体积5μl；UV监视器215、230、254、280和300nm；除非另外提到，否则在254nm下报导纯度。
梯度表时间(min) ％B0.002.51004.01004.105.50MS条件仪器Agilent MSD；电离模式API-ES；气体温度350℃；干燥气体11.0L/min.；喷雾器压力55psig；极性50％正，50％负；VCap3000V(正)，2500V(负)；Fragmentor80(正)，120(负)；质量范围100-1000m/z；阈值150；步长0.15；增益1；峰宽0.15min。
实例5将烯胺酮加入经取代胍于NMP中的溶液中，并在105℃下加热混合物48小时。将反应冷却到室温。加入水，并用EtOAc萃取水层。通过蒸发除去溶剂，并通过具有DCM/EtOAc/MeOH(8∶8∶1)的预制平板(pre-plate)纯化残余物。
可根据本方法合成示范性化合物45-66和89-92。
也可根据本方法合成示范性化合物104、107、125、129、219、294、295、296、297。
也可根据本方法合成示范性化合物243-244。
实例6制备4-[(4-{4-[(1E)-3-羟基丙-1-烯-1-基]苯基)嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺(示范性化合物272)参看图6a和6b。
步骤1叔丁基(二甲基){[(2E)-3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)丙-2-烯-1-基]氧基}硅烷将叔丁基-二甲基-丙-2-炔氧基-硅烷(3.00g，17.6mmol)、4，4，5，5-四甲基-1，2，3-二杂氧戊硼烷(2.80ml，2.50g，19.4mmol)、双(环戊二烯基)锆(IV)氯氢化物(bis(cyclopentadienyl)zirconium(IV)chloride hydride)(0.454g，1.76mmol)和三乙胺(0.250ml，0.178g，1.76mmol)装入烧瓶中。将反应混合物在60℃下搅拌20小时。将反应混合物冷却到室温，用己烷稀释，并滤过硅胶以得到3.0g无色油状物。HRMSC15H31BO3Si+H+的计算值，299.22083；实验值(ESI-FTMS，[M+H]1+)，298.22459。
步骤24-{[4-(4-溴苯基)嘧啶-2-基]氨基}苯磺酰胺将1-(4-溴-苯基)-3-二甲氨基-丙烯酮(1.05g，4.10mmol)、4-胍基-苯磺酰胺(1.33g，6.20mmol)和NMP(30ml)装入烧瓶。将反应混合物在120℃下搅拌20小时。将反应混合物冷却到室温，用水稀释并过滤。用水洗涤固体残余物并干燥以得到1.66g白色固体。MS(ESI)m/z 405.1；HRMSC16H13BrN4O2S+H+的计算值，405.00153；实验值(ESI-FTMS，[M+H]1+)，405.00158。
步骤34-[(4-{4-[(1E)-3-羟基丙-1-烯-1-基]苯基}嘧啶-2-基)氨基]苯磺酰胺将4-{[4-(4-溴苯基)嘧啶-2-基]氨基}苯磺酰胺(0.681g，1.68mmol)、叔丁基(二甲基){[(2E)-3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二杂氧戊硼烷-2-基)丙-2-烯-1-基]氧基}硅烷(1.00g，3.35mmol)、(Ph3)4Pd(0.194g，0.168mmol)、碳酸钾(0.695g，5.03mmol)、乙醇(3.0ml)、水(3.0ml)和甲苯(25ml)装入烧瓶。将反应混合物在85℃下搅拌4小时。将反应混合物冷却到室温，并加入三氟乙酸(1.0ml)。然后在室温下将反应混合物搅拌16小时。浓缩反应混合物并通过制备型HPLC纯化以得到0.196g黄色固体。MS(ESI)m/z 383.2；HRMSC19H18N4O3S+H+的计算值，383.11724；实验值(ESI-FTMS，[M+H]1+)，383.11752。
可根据本方法合成示范性化合物269、270、272、280-285和298。
实例7将苯胺基-嘧啶、N，N-二乙基苯胺和NMP装入小瓶。将混合物冷却到0℃并加入酰基氯。将反应温到室温并搅拌4小时。加入水，并用乙醚、DCM洗涤沉淀物。
可根据本方法合成示范性化合物221-225。
实例8将醛溶解于THF中并冷却到0℃。加入胺，随后加入Na(OAc)3BH，并将反应在0℃下搅拌15分钟。逐滴加入HOAc，并将反应温到室温维持3小时。用水中止反应。将产物用乙酸乙酯萃取，用碳酸氢钠和盐水洗涤并用EtOAc/MeOH(10∶1)纯化。
可根据本方法合成示范性化合物132-134、141和143-149。
反应2卤素置换实例9用于制备2-苯胺基-4-芳基/杂芳基嘧啶二级磺酰胺和三级磺酰胺的一般实验。参看图9。
氨基磺酰胺(G-3)市面有售或者可由图9所示的方法制备可在受阻胺碱(诸如I-Pr2Net或Et3N和DMAP)存在下，在胺溶剂(诸如吡啶)或极性非质子溶剂(诸如CH2Cl2或THF)中经由与HNR7R8反应而将硝基苯磺酰氯(9-1)转化为对应的磺酰胺(9-2)。可使用诸如10％Pd/C、NH4HCO2、MeOH或SnCl2·H2O、EtOH、热或Fe、HCl、EtOH、H2O、热的条件将这些硝基苯磺酰胺(9-2)还原成对应的胺。
步骤1制备经取代的4-硝基-苯磺酰胺(9-2)将1.25当量i-Pr2Net、0.1当量DMAP和1.25当量胺加入1当量的呈0.1M CH2Cl2溶液形式的4-硝基苯磺酰氯中。将这一混合物在23℃下搅拌，直到通过TLC判断反应完全。用饱和NaHC03溶液中止反应并分离有机层和水层，随后蒸发有机层以得到近乎纯的灰白色到无色固体状的4-硝基苯磺酰胺(产率范围56-100％产率)。
步骤2制备4-氨基-苯磺酰胺二级和三级磺酰胺(G-3)将0.1重量当量的10％Pd/C和5当量的甲酸铵加入1当量的呈0.1M MeOH溶液形式的4-硝基苯磺酰胺中。将混合物在23℃下搅拌8小时。滤过硅藻土并蒸发以得到灰白色固体或无色固体状的标题化合物。
步骤3制备2-氯-4-芳基/杂芳基-嘧啶(G-5)经15min以2ml部分向Ar/HetLi(10.66mmol，1.08eq，经由对Li去质子化以用于Br交换而产生)于20ml Et2O中的-30℃溶液中逐份加入2-氯嘧啶(9.84mmol，1eq)于20ml Et2O中的悬浮液。将所得悬浮液在-30℃下搅拌30min并在0℃下搅拌60min。用THF(3ml)中的H2O(0.27ml，1.5当量)中止反应，然后加入THF(15ml)中的DDQ(2.95g，10.66mmol，1当量)。将所得悬浮液在23℃下搅拌15min，然后冷却到0℃。加入己烷(10ml)，随后加入NaOH的0℃溶液(10ml，3N)。将悬浮液在0℃下搅拌5min。加入100ml H2O并分离各层。将有机层干燥(Na2SO4)并真空浓缩。经由硅胶柱色谱纯化以得到标题化合物。
步骤4制备2-苯胺基-4-芳基/杂芳基嘧啶磺酰胺一级、二级和三级磺酰胺(I)使2-氯嘧啶(9-4)与芳基锂或杂芳基锂(通过使芳基溴/杂芳基溴与强碱(诸如n-BuLi、MeLi或PhLi)反应或经由用强碱(诸如n-BuLi、MeLi、PhLi、LDA或LiN(TMS)2)对芳基/杂芳基去质子化来制备)反应，随后根据Czarny和Harden的程序用DDQ氧化以得到4-芳基/杂芳基-2-氯嘧啶(G-5)，从而制备结构(I)的苯胺目标分子。(Strekowski，L等人，J.Heterocyclic，Chem.1990，27，1393，和Harden D.B.等人，J.Org.Chem.1988，53，4137)。随后基于Hattinger(Hattinger，G.等人，GB 2369359)的程序，在p-TsOH·H2O存在下在热二恶烷中与氨基磺酰胺(G-3)反应以得到所要的2-氨基嘧啶磺酰胺(I)。
将2-氯-4-芳基/杂芳基嘧啶(0.26mmol，1当量)、苯胺(0.26mmol，1当量)和1，4-二恶烷(2mL)溶液与p-TsOH(0.21mmol，0.8eq)和1，4-二恶烷(1ml)的溶液组合。将所得悬浮液在100℃下加热12-18小时。使用分析型HP Agilent 1100LC/MS监控反应进程。
HPLC分析方法和参数仪器HP Agilent 1100LC/MSUV检测器Agilent 1100二极管阵列检测器质谱仪检测器Agilent MSD柱Waters Xterra MS C1830mm×2.1mm，内径3.5μm流率1.00ml/min运行时间5.00min梯度洗提0min 90％水，10％乙腈；3min 10％水，90％乙腈柱温50℃UV信号215nm，254nmMS参数质量范围100-1000，Fragmentor 140，增益EMV 1.0冷却到23℃后，在Speed Vac中除去所有挥发物。将所述粗材料溶解于0.5ml DMSO1.5ml MeCN中，滤过0.45μm GMF并通过Gilson HPLC纯化，Gilson HPLC使用Phenomenex LUNA C18柱60mm×21.20mm内径，5μm粒度用ACN/水(含有0.2％TFA或Et3N)梯度洗提。通过LC/MS分析适当部分。通过合并纯部分且在Speed Vac中蒸发溶剂来分离标题化合物。
可根据本方法合成示范性化合物2、3、71-79、86和87。
HPLC条件仪器-Agilent 1100；柱Keystone Aquasil C18(如上)；流动相A10mMNH4OAC于95％水/5％CAN中；流动相B10mM NH4OAC于5％水/95％CAN中；流率0.800ml/min；柱温40℃；注射体积5μl；UV监视器215、230、254、280和300nm；除非另外提到，否则在254nm下报导纯度。
梯度表时间(min) ％B0.002.51004.01004.105.60MS条件仪器Agilent MSD；电离模式API-ES；气体温度350℃；干燥气体11.0L/min.；喷雾器压力55psig；极性50％正，50％负；VCap3000V(正)，2500V(负)；Fragmentor80(正)，120(负)；质量范围100-1000m/z；阈值150；步长0.15；增益1；峰宽0.15min。
实例10用于制备2-N(Me)-苯胺基-4-芳基/杂芳基嘧啶磺酰胺的一般实验 参看图10。
根据图10所示的方法制备4-甲基氨基苯磺酰胺(10-6)。可使用纯ClSO3H根据Stojanovic(Stojanovic，O.K.等人.Chem.Abstr.1973，3902)的程序将N-甲基乙酰胺(10-1)转化为磺酰氯(10-2)。使用胺、EtOH中的NaOAc将磺酰氯转化为对应的磺酰胺(10-3)，并根据Oinuma(Oinuma，H.等人.J.Med.Chem.1991，34，2260)的程序对乙酰基进行NaOH水解以产生所要的4-甲基氨基苯磺酰胺(10-4)。
可根据图10所示的方法制备N-甲基氨基磺酰胺类似物。在p-TsOH·H2O存在下，将4-芳基/杂芳基-2-氯嘧啶(10-5)与4-甲基氨基苯磺酰胺(10-4)在热二恶烷中组合以得到所要的N-甲基氨基磺酰胺(10-6)。
步骤14-(乙酰基-甲基-氨基)-苯磺酰氯(10-2)(基于O.K.Stojanovic等人.Chem.Abstr.1973，78，3902s的程序)在70℃下将N-甲基-N-苯基-乙酰胺(10.0g，67mmol)与50ml ClSO3H加热90min。将混合物倒入200ml冰中，并过滤所得产物且用2×25ml H2O洗涤以得到灰白色固体状的标题化合物。
步骤2N取代的N-(4-氨磺酰基-苯基)-乙酰胺(10-3)
(基于H.Oinuma等人.J.Med.Chem.1991，34，2260-7的程序)在0℃下将1当量4-(乙酰基-甲基-氨基)-苯磺酰氯加入1.1当量胺与2.7当量NaOAc的0.1M EtOH浆液中。将混合物在23℃下搅拌6小时。加入水，并用3×25ml EtOAc萃取混合物。将经合并的有机物用1×50ml H2O和1×50ml盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并蒸发以得到灰白色固体状或油状的标题化合物。
步骤34-甲基氨基-苯磺酰胺(10-4)将N取代的N-(4-氨磺酰基-苯基)-乙酰胺(1当量)与1N NaOH水溶液组合以制得乙酰胺中的0.1M溶液。使所得混合物回流12小时。冷却到23℃后，用1N HCl水溶液将反应混合物调节到pH值约为7，并用2×25ml EtOAc萃取。将经合并的有机物用1×50ml H2O和1×50ml盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并蒸发以得到灰白色固体状或油状的标题化合物。
步骤42-N(Me)-苯胺基-4-芳基/杂芳基嘧啶磺酰胺(10-6)使用实例9步骤4中所述的方案，但使用4-甲基氨基-苯磺酰胺代替伯氨基苯磺酰胺。
可根据本方法合成示范性化合物80-85。
HPLC条件仪器-Agilent 1100；柱Keystone Aquasil C18(如上)；流动相A10mMNH4OAC于95％水/5％CAN中；流动相B10mM NH4OAC于5％水/95％CAN中；流率0.800ml/min；柱温40℃；注射体积5μl；UV监视器215、230、254、280和300nm；除非另外提到，否则在254nm下报导纯度。
梯度表时间(min) ％B0.002.51004.01004.105.70MS条件仪器Agilent MSD；电离模式API-ES；气体温度350℃；干燥气体11.0L/min.；喷雾器压力55psig；极性50％正，50％负；VCap3000V(正)，2500V(负)；Fragmentor80(正)，120(负)；质量范围100-1，000m/z；阈值150；步长0.15；增益1；峰宽0.15min。
实例11将原材料组合在小瓶中的二恶烷中并在90℃下搅拌过夜，然后冷却到室温。加入50％NaHCO3，然后搅拌反应10分钟。将沉淀物过滤，然后溶解于THF中并用具有THF/MeOH(10∶1)的预制平板纯化。参看图11。
可根据本方法合成示范性化合物184。
实例12通过在三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd2dba3)和2，2′-双(二苯膦基)-1，1′-联萘(BINAP)存在下加入叔丁醇钠(NaOtBu)使卤化(Br)磺酰胺(G-4)与嘧啶(G-6)反应。
可根据本方法合成示范性化合物115-118、123、127和128。
实例13将叔丁醇钠加入苯胺基-嘧啶、经取代磺酰胺、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)和2，2′-双(二苯膦基)-1，1′-联萘于二恶烷中的搅拌悬浮液中。将混合物在80℃下加热50小时。将反应冷却到室温，并将混合物过滤且用THF和MeOH洗涤。通过蒸发除去溶剂并用具有EtOAc/MeOH(10∶1)的预制平板纯化残余物。
可根据本方法合成示范性化合物130、131、139、161-164、166-169、171-174和299。
实例14将叔丁醇钠加入苯胺基-嘧啶、经取代砜、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)和2，2′-双(二苯膦基)-1，1′-联萘于二恶烷中的搅拌悬浮液中。将混合物在80℃下加热72小时。将反应冷却到室温，并将混合物过滤且用THF和MeOH洗涤。通过蒸发除去溶剂，并用具有EtOAc/MeOH(10∶1.5)的预制平板纯化残余物。
可根据本方法合成示范性化合物98-103。
IKK激酶检定实例15Flag IKKβ的分子克隆和表达使用在IKKβ的C端并有FLAG抗原决定基的引物，通过反转录酶-聚合酶链式反应由人类胎盘RNA(CLONTECH)扩增人类IKKβcDNA。将FLAG-IKKβ插入杆状病毒表达质粒pFASTBAC(Life Technologies)中。遵循关于BAC-TO-BAC(Life Technologies)杆状病毒表达系统的制造商方案，制得表达IKKβ酶的重组杆状病毒。简言之，使用CellFECTINTM试剂以1μg miniprep bacmid DNA转染6孔板的每孔9×105个SF9细胞。在转染后72小时收集病毒，并进行病毒滴定，随后通过3到4轮感染来扩增高滴度病毒储液(2×108pfu/ml)。
实例16Flag-IKKβ蛋白的产生和纯化使用表达Flag-IKKβ的杆状病毒的高滴度储液，在27℃下于SF-900 II SFM培养基中以大约为5的感染复数(MOI)感染密度为1×106个细胞/毫升的200mL SF9细胞。在之后48-54小时通过在Sorvall离心机中于500×g下离心来收集细胞。将所得小球在-20℃下冷冻直到纯化。
为进行蛋白纯化，将小球在冰上解冻并再悬浮于细胞溶解缓冲液(50mM HEPES(pH7.5)、100mM NaCl、1％NP-40、10％甘油、1mM Na3VO4、1mM EDTA、1mM DTT和购自Pharmingen的蛋白酶抑制剂混合液)中。在Dounce均化后，将细胞置于旋转器上的冷藏室中维持30分钟。将NaCl浓度调节到250mM并通过在18000×g下离心来除去细胞残骸。将所得上清液在4℃下装载到抗FLAG M2琼脂糖亲和色谱柱(Sigma)上并用60mL洗涤缓冲液(50mM HEPES(pH 7.5)、300mM NaCl、10％甘油、1mM Na3VO4、1mM EDTA和1mM PMSF)洗涤柱。使用洗提缓冲液(50mM HEPES(pH 7.5)、100mMNaCl、10％甘油、1mM Na3VO4、1mM EDTA、1mM DTT和购自Pharmingen的蛋白酶抑制剂混合液)中的200μg/mL Flag肽(Sigma)洗提500μL等分试样形式的FLAG-IKKβ，使用SDS-PAGE随后使用库马斯蓝染色(Coomassie Blue staining)(BioRad)测试其蛋白含量。在如下所述测试活性后，将具有高IKK酶活性的部分合并，等分并在-80℃下储存。
实例17IKK激酶检定基于Wallac/Perkin Elmer的建议进行LANCE反应。在补充有0.0025％Brij溶液(Sigma)以帮助稳定酶的上述激酶反应缓冲液中通常使用经纯化的Flag-IKKβ酶(2nM最终浓度)。合成生物素基化底物IκBα(1-54)并加以纯化(＞95％纯)，且以500nM的最终浓度使用。以2μM的最终浓度使用ATP。总反应体积为25μL且将抑制剂化合物与酶一起预培育，接着加入底物和ATP。在黑色低结合板(Dynex)中于室温下进行反应维持30分钟。加入25μL 20mM EDTA以终止反应，然后加入100μL检测混合物
，30分钟后在Wallac VICTOR平板读取器中对板进行读数。使用能量转移信号数据来计算抑制率百分数和IC50值。
实例18IκBα的Western分析将海拉细胞(Hela cell)涂在6孔板上维持24小时并用化合物处理30min，然后加入TNFα(10ng/ml)。1小时后，在含有400mM NaCl的MPER试剂(Pierce，Rockford，IL)中收集海拉细胞。用Bradford方法对来自所有样本的蛋白进行定量。将含有30μg蛋白的细胞溶解产物在12％SDS-PAGE凝胶上进行电泳并使用Bio Rad液体转移装置将其转移到PVDF薄膜上。将PVDF薄膜与3％牛奶在TBST(含有0.1％Tween-20的TBS)中一起培育15分钟，然后加入一级抗体小鼠抗IκBα(Santa Cruz)。培育过夜后，将PVDF薄膜用TBST洗涤3次并与偶合辣根过氧化物酶(Transduction Labs)的二级抗体一起培育1小时。然后用TBST洗涤PVDF薄膜3次并使用增强型化学发光检测系统(Pierce)检测蛋白。
示范性化合物4、6-9、11、14、16、22、25、26、29、30、32、34、39-52、54-56、57、58-66、68、88-92、95、96、98、100-107、109-113、115-121、125、126、129-136、138-146、150、152、153、156-158、160-164、166、168-170、173、174、176-178、180-186、188-204、208-210、212、215、216、219-225、229、230、232-241、245、246、250、251、253、256-258、260、262-266、268、270、272、277、283-285、287和289给出阳性结果。
示范性化合物10、21、27、28、31、33、35、37、53、67、97、122、123、137、147-149、151、154、155、159、165、167、171、172、175、187、206、207、213、214、217、218、226、227、228、243、244、247-249、254、269、271、276和280-282给出略微阳性的结果。
权利要求
1.一种式I化合物 其中R1为氢；R2选自由NR7R8、胍基、脲基、视情况经取代的咪唑基、视情况经取代的烷基、视情况经取代的烯基、视情况经取代的炔基、羟基和烷氧基组成的群组；R3选自由氢；视情况经取代的苯基；具有1到4个杂原子的视情况经取代的5或6元杂芳基环，只要所述杂芳基环不是吡啶、呋喃、异恶唑、吡唑、三唑、咪唑或噻唑即可；与含有0到4个杂原子的4到8元环稠合的苯环，所述4到8元环经0到2个C＝O、SO或SO2基团中断且视情况经取代；含有0到4个杂原子的视情况经取代的单环或多环；视情况经取代的烯基；视情况经取代的炔基；-NR7R8；-COOR9；-CONR7R8；和-SO2R10组成的群组；R4为氢；R5选自由氢、甲基、烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、烷基磺酰基、羟甲基和烷氨基甲基组成的群组；R6选自由氢；卤素；视情况经取代的苯基；具有1到4个杂原子的视情况经取代的5或6元杂芳基环；与含有0到4个杂原子的4到8元环稠合的苯环，所述4到8元环经0到2个C＝O、SO或SO2基团中断且视情况经取代；含有0到4个杂原子的视情况经取代的单环或多环；-NR7R8；-COOR9；-CONR7R8；-SO2R10；视情况经取代的烷基；视情况经取代的烯基；视情况经取代的炔基；羟基；烷氧基；OR7；和SR7组成的群组；R7和R8独立选自由氢；视情况经取代的烷基；视情况经取代的烯基；视情况经取代的炔基；视情况经取代的芳基；视情况经取代的杂芳基；羟基；烷氧基；烷氨基；芳氨基；杂芳氨基；-NCOR9；-COR9；-CONR7R8；SO2R10；含有0到3个杂原子的视情况经取代的3到10元环胺组成的群组；视情况，R5和R8一起形成含有0到4个杂原子的视情况经取代的3到12元单环或双环；R9选自由氢、甲基、三氟甲基、视情况经取代的烷基、视情况经取代的芳基和视情况经取代的杂芳基组成的群组；R10选自由甲基、三氟甲基、视情况经取代的烷基、视情况经取代的芳基、视情况经取代的杂芳基和NR7R8组成的群组；和其盐、溶剂化物和水合物。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R2为NR7R8，且其中R7和R8独立选自由氢、烷基、氨基、烷氨基、烷羟基、烷酰基、烷氧基、烷氧基羰基、羰基、羧基、芳烷基、视情况经取代的苯基、杂芳基和其中R9为烷基或芳烷基的COR9组成的群组。
3.根据权利要求2所述的化合物，其中R2为NH2、-(二甲氨基)乙基或-(二甲氨基)丙基。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中R2为NR7R8，且其中R7和R8一起形成含有至少一个氮原子和0到1个其它杂原子的视情况经取代的5到6元杂环基团。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中R2选自由视情况经取代的吗啉基、视情况经取代的哌嗪基和视情况经取代的吡咯烷基组成的群组。
6.根据权利要求1所述的化合物，其中所述SO2R2基团是在所述苯基环的4位。
7.根据权利要求1所述的化合物，其中R3选自由以下基团组成的群组视情况经取代的苯基、视情况经取代的噻吩基、视情况经取代的吡嗪基、视情况经取代的吡咯基、萘基、双环[2.2.1]庚烯和与含有1到2个杂原子的5到7元环稠合的苯环，所述5到7元环视情况经C＝O基团中断且视情况经取代。
8.根据权利要求7所述的化合物，其中R3为视情况经取代的苯基。
9.根据权利要求8所述的化合物，其中R3为经一个或一个以上选自由烷氧基、三氟甲基、氟、羟基和其中R7为COR9且R8为氢的NR7R8组成的群组的取代基取代的苯基。
10.根据权利要求7所述的化合物，其中R3为视情况经取代的噻吩基。
11.根据权利要求10所述的化合物，其中R3为视情况经一个选自由氢、溴和甲基组成的群组的取代基取代的噻吩基。
12.根据权利要求1所述的化合物，其中R5为氢或甲基。
13.根据权利要求12所述的化合物，其中R5为氢。
14.根据权利要求1所述的化合物，其中R6选自由氢、甲基、乙基、氯、甲氧基、NH2和三氟甲基组成的群组。
15.根据权利要求14所述的化合物，其中R6为氢。
16.根据权利要求1所述的化合物，其中R1为氢；R2选自由NR7R8、视情况经取代的咪唑基和视情况经取代的烷基组成的群组；R3选自由以下基团组成的群组视情况经取代的苯基、视情况经取代的噻吩基、视情况经取代的吡嗪基、视情况经取代的吡咯基、萘基、双环[2.2.1]庚烯和与含有1到2个杂原子的5到7元环稠合的苯环，所述5到7元环视情况经C＝O基团中断且视情况经取代；R4为氢；R5为氢或甲基；且R6选自由氢、甲基、乙基、氯、甲氧基、NH2和三氟甲基组成的群组。
17.根据权利要求16所述的化合物，其选自由以下各物组成的群组
和其盐、溶剂化物和水合物。
18.一种在细胞中抑制激酶活性的方法，其包含使细胞与权利要求1所述的化合物接触，由此所述化合物抑制激酶活性。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述激酶为IKK。
20.一种在哺乳动物中抑制激酶活性的方法，其包含对哺乳动物投与激酶抑制量的权利要求1所述的化合物。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述哺乳动物为人类。
22.根据权利要求20所述的方法，其中所述激酶为IKK。
23.根据权利要求20所述的方法，其进一步包含对所述哺乳动物投与NF-κB路径的蛋白激酶的其它抑制剂。
24.一种医药组合物，其包含单独的权利要求1或权利要求17所述的化合物或其与其它激酶抑制医药组合物或化疗剂的组合以及医药学上可接受的载剂。
25.一种治疗激酶依赖性病症的方法，其包含对个体投与激酶抑制量的权利要求24所述的医药组合物。
26.根据权利要求25所述的方法，其中所述激酶为IKK。
27.根据权利要求25所述的方法，其中所述激酶依赖性病症选自由炎症、肿瘤细胞增殖、肿瘤细胞生长和肿瘤发生组成的群组。
28.根据权利要求25所述的方法，其进一步包含对所述个体投与NF-κB路径的蛋白激酶的其它抑制剂。
29.一种治疗与NF-κB活化相关的疾病的方法，其包含投与权利要求24所述的医药组合物。
30.根据权利要求29所述的方法，其进一步包含对所述个体投与NF-κB路径的蛋白激酶的其它抑制剂。
31.根据权利要求29所述的方法，其中所述与NF-κB活化相关的疾病选自由炎症性疾病、类风湿性关节炎、炎症性肠病、哮喘、皮肤病、牛皮癣、异位性皮炎、自体免疫疾病、组织和器官排斥、阿兹海默氏病(Alzheimer′s disease)、中风、癫痫、帕金森氏病(Parkinson′s disease)、动脉粥样硬化、再狭窄、癌症、霍奇金氏病(Hodgkinsdisease)、病毒感染、AIDS感染、骨关节炎、骨质疏松和共济失调性毛细血管扩张症(Ataxia Telangiestasia)组成的群组。
32.一种治疗肿瘤细胞增殖、肿瘤细胞生长或肿瘤发生的方法，其包含投与权利要求24所述的医药组合物。
33.一种减少炎症的方法，其包含投与权利要求24所述的医药组合物。
34.一种治疗炎症性或自体免疫病症的方法，其包含投与权利要求24所述的医药组合物。
35.根据权利要求34所述的方法，其中所述炎症性或自体免疫病症选自由类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风、哮喘、支气管炎、过敏性鼻炎、慢性阻塞性肺病、囊肿性纤维化、炎症性肠病、肠易激综合症、粘液性结肠炎、溃疡性结肠炎、溃破性结肠炎、克罗恩氏病(Crohn′s disease)、胃炎、食管炎、肝炎、胰腺炎、肾炎、牛皮癣、湿疹、皮炎、荨麻疹、多发性硬化、鲁盖瑞氏病(Lou Gehrig′s disease)、败血症、结膜炎、急性呼吸窘迫综合症、紫癜、鼻息肉、红斑性狼疮、结膜炎、春季粘膜炎(vernal catarrh)、慢性关节风湿病、全身炎症反应综合症(SIRS)、败血症、多肌炎、皮肌炎(DM)、结节性多动脉炎(Polyaritis nodoa，PN)、混合性结缔组织病(MCTD)和干燥综合症(Sjoegren′s syndrome)组成的群组。
36.一种治疗心血管、代谢或缺血性病症的方法，其包含投与权利要求24所述的医药组合物。
37.根据权利要求36所述的方法，其中所述心血管、代谢或缺血性病症选自由动脉粥样硬化、血管成形术后再狭窄、左心室肥厚、胰岛素抵抗、I型糖尿病、II型糖尿病、高血糖、高胰岛素血症、血脂异常、肥胖、多囊卵巢疾病、高血压、X综合症、骨质疏松、勃起功能障碍、恶病质、心肌梗塞、心脏、肾、肝和脑的缺血性疾病、器官移植排斥、移植物抗宿主病、内毒素休克和多器官功能衰竭组成的群组。
38.一种治疗传染病的方法，其包含投与权利要求24所述的医药组合物。
39.根据权利要求38所述的方法，其中所述传染病为病毒感染。
40.根据权利要求39所述的方法，其中所述病毒感染是由选自由人类免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类乳头状瘤病毒、人类T细胞白血病病毒和爱波斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus)组成的群组的病毒引起。
41.一种治疗绝经前或绝经后病症的方法，其包含投与权利要求24所述的医药组合物。
42.一种治疗骨质疏松的方法，其包含投与权利要求24所述的医药组合物。
43.一种方法，其包含a)使式G-1的烯胺酮 与式G-2的胍 和1-甲基-2-吡咯烷酮反应以形成式I化合物 其中R基团如权利要求1所定义，且其中R1、R4、R5各自为氢，R2为NR7R8；和b)分离所述式I化合物。
44.根据权利要求43所述的方法，其中使所述烯胺酮与所述胍反应是在碱存在下进行。
45.根据权利要求44所述的方法，其中所述碱为碳酸钾或氢氧化钾。
46.根据权利要求43所述的方法，其中使所述烯胺酮与所述胍反应进一步包含加热到至多约回流温度的温度。
47.根据权利要求43所述的方法，其中所述SO2R2基团是在4位。
48.根据权利要求43所述的方法，其进一步包含通过使式G-3的胺 与氰胺或1-H-吡唑-1-甲脒反应来制备式G-2的胍。
49.根据权利要求43所述的方法，其进一步包含通过使式G4的卤化磺酰胺 与胍反应来制备式G-2的胍。
50.根据权利要求43所述的方法，其中R3为视情况经取代的苯基或视情况经取代的噻吩基。
51.一种方法，其包含a)使式G-1的烯胺酮 与式3-1的胍衍生物 和1-甲基-2-吡咯烷酮反应以形成嘧啶；b)使所述嘧啶与氯磺酸反应以形成式3-3的磺酰氯 c)使所述式3-3的磺酰氯与具有式HNR7R8的胺反应以形成式I化合物 其中R基团如权利要求1所定义，且其中R1、R4、R5各自为氢，R2为NR7R8；和d)分离所述式I化合物。
52.一种方法，其包含a)使式G-3的胺 与式G-5的卤化嘧啶 反应以形成式I化合物 其中R基团如权利要求1所定义，且其中R1、R4、R5各自为氢，R2为NR7R8；和b)分离所述式I化合物。
53.根据权利要求52所述的方法，其中所述卤化嘧啶的卤素为氯。
54.根据权利要求52所述的方法，其中使所述胺与所述卤化嘧啶反应是在选自由二恶烷组成的群组的溶剂中进行。
55.根据权利要求52所述的方法，其中使所述胺与所述卤化嘧啶反应是在选自由对甲苯磺酸组成的群组的醇存在下进行。
56.根据权利要求52所述的方法，其中使所述胺与所述卤化嘧啶反应进一步包含加热到至多约回流温度的温度。
57.根据权利要求52所述的方法，其中所述SO2R2基团是在4位。
58.根据权利要求52所述的方法，其中R3为视情况经取代的苯基或视情况经取代的噻吩基。
59.一种方法，其包含a)使式G-4的卤化磺酰胺 与式G-6的嘧啶 反应以形成式I化合物 其中R基团如权利要求1所定义，且其中R1、R4、R5各自为氢，R2为NR7R8；和b)分离所述式I化合物。
60.根据权利要求59所述的方法，其中所述卤化磺酰胺的卤素为溴。
61.根据权利要求59所述的方法，其中使所述嘧啶与所述卤化磺酰胺反应是在选自由二恶烷组成的群组的溶剂中进行。
62.根据权利要求59所述的方法，其中使所述嘧啶与所述卤化磺酰胺反应进一步包含加入叔丁醇钠。
63.根据权利要求59所述的方法，其中使所述嘧啶与所述卤化磺酰胺反应是在三(二亚苄基丙酮)二钯(0)和2，2′-双(二苯膦基)-1，1′-联萘存在下进行。
64.根据权利要求59所述的方法，其中使所述嘧啶与所述卤化磺酰胺反应进一步包含加热到至多约回流温度的温度。
65.根据权利要求59所述的方法，其中所述SO2R2基团是在4位。
66.根据权利要求59所述的方法，其中R3为视情况经取代的苯基或视情况经取代的噻吩基。
67.一种式G-2的胍 其中R基团如权利要求1所定义。
68.一种式G-3的胺 其中R基团如权利要求1所定义。
69.一种式G-4的卤化磺酰胺 其中R基团如权利要求1所定义。
70.一种式3-3的磺酰氯 其中R基团如权利要求1所定义。
全文摘要
本发明涉及式(I)化合物，其中R
文档编号A61P35/00GK101039919SQ200580034935
公开日2007年9月19日 申请日期2005年10月13日 优先权日2004年10月13日
发明者富克－华·萨姆, 丹尼斯·威廉·鲍威尔, 张易贤, 陈利敬, 斯科特·李·金凯德, 李·D·詹宁斯, 胡永博, 阿达姆·马修·吉尔伯特, 马修·格雷戈里·布尔萨维奇 申请人:惠氏公司