具有独特性质的化合物、含有该化合物的组合物及其制备方法和用途的制作方法

专利名称：：具有独特性质的化合物、含有该化合物的组合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及具有独特性质的药用化合物或其水合物，具体涉及二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物，还涉及含有该化合物的药物组合物，及其制备方法和用途。
背景技术：
：中国国家药品标准[WS-10001-(HD-0786)-2002]法定的二丁酰环磷腺苷钙的是二丁酰环磷腺苷钙2.3个结晶水的水合物。它在水或乙醇中易溶，在乙醚中几乎不溶；干燥失重的范围为7.015.0%;理论水分为7.82%。按照该标准[WS-lOOOl-(HD-0786)-2002]生产的产品的说明书报道为二丁酰环磷腺苷钙2.3水合物，该产品符合现行国家药品标准[WS-10001-(HD0786)-2002]。中国专利公开号为CN1554358A的说明书中所述的二丁酰环磷腺苷钙的存在形式均为二丁酰环磷腺苷钙2.3个结晶水的水合物，该水合物在水或乙醇中溶解，取水合物O.lg，加水10ml溶解后，依法测定，pH值在3.05.0,这说明在本发明完成前，在长期以来，人们认为溶于水和乙醇、pH值在3.05.0、含有2.3个结晶水的二丁酰环磷腺苷钙的水合物是二丁酰环磷腺苷钙的稳定存在的形式。文献报道含有2.3个结晶水的二丁酰环磷腺苷钙的国家标准[WS-10001-(HD-0786)-2002]的酸度范围为3.05.0，到目前为止，尚没有公开的文献报道与上述报道的性质不同的、pH值在5.07.2之间的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物。
发明内容令人惊奇的是，我们通过研究发现，含02.5个水的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物[C18H23Ns08Pl/2Ca*nH20(n=02.5)]具有与现有文献报道的含有2.3个结晶水的二丁酰环磷腺苷钙根本不同的性质。第一，本发明的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物在室温下是略溶或微溶于水，第二，本发明的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物在室温下在乙醇中几乎不溶；第三，本发明的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物的pH值范围与后者有明显差异；第四，本发明的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物比现有文献报道的二丁酰环磷腺苷钙2.3水合物具有更好的稳定性。因此，一方面，本发明提供具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物本发明具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物通过卡氏法测定，其水分为8.45%以内。现有文献公开报道的含有2.3个结晶水的二丁酰环磷腺苷钙的国家标准[WS10001(HD0786)2002]的酸度范围为3.05.0,对于本发明具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物的酸度范围，室温下，取0.lg溶解于新沸放冷的蒸馏水2025ml，其pH值在5.07.2之间，也完全不同于中国专利CN1554358A说明书中所述的pH值在3.05.0之间的二丁酰环磷腺苷钙2.3水合物的原料。具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物l/2Ca*nH20(n=02.5)，有特臭，有吸湿性;具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物可以是C18H23N508P*l/2Ca*nH20(n=02),具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷转水合物可以是C18H23Ns08P*l/2Ca*2.3H20，具有独特性质的化合物为二丁酷环磷腺苷钙水合物和无水物可以是(:^2美0^*l/2Ca*nH20(n=01.5),具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙水合物可以是C18H23N508P*l/2Ca1.9H20，具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙水合物也可以是C18H23N508P'l/2Ca，1.5H20，易吸湿，有特臭；具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物也可以是C18H23N508Pl/2Ca*nH20(n=0l),具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙水合物可以是C18H23Ns08P*l/2Ca*H20，该水合物易吸湿具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙水合物可以是C18H23N508P，l/2Ca0.5H20，该水合物易吸湿，有特臭；具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙无水物CwH2美08P，1/2Ca，该无水物有特臭，易吸湿。具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物的水分含量在8.45%以内；具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物的水分含量可以在6.99%以内；具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物的水分含量也可以在5.0%以内；进一步，具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物的水分含量可以在3.0%以内，进一步，具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物的水分含量可以在2.0%以内。另一方面，提供了制备本发明具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物的方法。可以通过如下方法制备本发明具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物A、在干燥的三颈烧瓶中，加cAMP三乙胺盐、无水吡啶、重蒸丁酐，氯仿，207(TC不断搅拌，使海绵状物全部溶解，反应完毕，减压蒸去溶剂后，缓慢加入蒸馏水，在低温下使反应完全，然后减压浓缩成浆状物，即为二丁酰环磷酸腺苷；取二丁酰环磷酸腺苷浆状物用乙醇溶解，加入到适量的氯化钙的乙醇或无水乙醇和丙酮水溶液中，搅拌，充分混合，减压抽干溶剂，无水乙醚或丙酮润洗，抽干，再加无水乙醇或无水乙醇和精制丙酮混匀，低温下加无水乙醚，放置，过滤，固体物用无水乙醚润洗，抽干，在五氧化二磷存在下，580'C减压干燥得类白色粉末到淡黄色粉末。或者B、在干燥的三颈烧瓶中，加cAMP三乙胺盐、无水吡啶、重蒸丁酐，氯仿，2070TC不断搅拌，使海绵状物全部溶解，反应完毕，减压蒸去溶剂后，缓慢加入蒸馏水，在低温下使反应完全，用异己酮提取，弃有机层，然后减压浓縮成浆状物，用氯仿提取，即为二丁酰环磷酸腺苷；取二丁酰环磷酸腺苷浆状物用乙醇溶解，加入氯化钙的乙醇或无水乙醇和丙酮水溶液中，搅拌，充分混合，减压抽干溶剂，无水乙醚或精制丙酮润洗，抽干，再加无水乙醇或无水乙醇和精制丙酮混匀，低温下加无水乙醚，放置，过滤，固体物用无水乙醚润洗，抽干，58(TC干燥得成品。再一方面，本发明提供一种药物组合物，它含有本发明具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物，以及药物上可接受的赋形剂或载体。本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷麪水合物和无水物用于制备注射用冻干粉针制剂、无菌分装粉针制剂。冻干粉针制剂的制备方法为取二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物原料(按无水物计)，加药学上可接受的冻干支持剂或辅形剂，加注射用水搅拌使溶解，药学上可接受的酸碱调节pH为5,07.5,加活性碳0.010.5%(W/V)搅拌1545min,过滤，补水，用0.22微米微孔滤膜过滤，按10迈g/瓶80mg/瓶(以主药计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品。本发明的具有独特性质的化合物二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物制备注射用冻干粉针制剂、无菌分装粉针制剂，一个单位剂量的制剂(1080rag)溶解于10~15ml水中，其pH值为5~7.5之间。具有独特性质的化合物二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物制备的注射用冻干粉针制剂、无菌分装粉针制剂，其水分为5.0%以内。再一方面，本发明所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物可以用作蛋白激酶激活剂；用于治疗肺心病、心衰、缺血性心肌病、心绞痛、冠心病、心肌梗死、心源性休克、心律失常；用于治疗缓慢性心律失常、快速心律失常、伴有缓慢性心律失常的心力衰竭、心肌炎、牛皮癣、风湿性心脏病、白血病等疾病；用于治疗脑缺血、脑梗塞、脑血栓及其后遗症；用于改善麻醉期间手术病人心肌缺血，改善心功能，减少肌松药对心血管的副作用，降低手术风险；用于老年慢性支气管炎、各种肝炎辅助治疗和损伤细胞的修复；以及用于调节哺乳类动物的生长发育的药物中的用途。具体实施例方式根据中国药典2005版规定药物溶解的特性，本发明的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物在室温下是略溶或微溶于水，在乙醇中几乎不溶，完全不同于中国专利CN1554358A说明书中所述的二丁酰环磷腺苷钙2.3水合物的原料，在水或乙醇中溶解的理化性质。来源于本发明的样品，其pH值可以是5.1、5.2、5.3、5.5、5.6，5.8、5.9、6.0，也可以是6.1、6.2、6.4、6.5、6.6、6.8、7.0，其pH值范围在5.07.2之间。本发明的原料[UH23N508P'1/2Ca'nH20(n-02.5)]与文献报道的溶于水、pH值在3.05.0之间的含有2.3个结晶水的二丁酰环磷腺苷钙的原料(即符合现行国家药品标准样品[WS10001(HD0786)2002]}相比，更能稳定存储。分别将上述样品密封于西林瓶中，进行影响因素试验，结果见表1。表1.原料的影响因素试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>601C*该样品真空干燥至水分为5.81%，**将符合现行国家药品标准样品真空千燥至水分为1.95%,**彿本发明样品喷水至水分为8.12%.我们用不同的原料进行影响因素试验，用HPLC法(0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液-乙腈(75:25)为流动相，检测波长为273nra)检测有关物质的变化情况。结果表明，本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物纯度下降的绝对值明显低于PH=3.05.0之间的国家标准的原料。因此，说明具有本发明性质的原料具有突出的存储稳定性。具有本发明性质的原料，按实施例的方式制成冻千粉针制剂，出人意料地发现，pH值在5.07.5之间的制剂，比国家药品标准规定的pH值在3.05.0之间的制剂，具有更好的稳定性。具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙水合物可以是C18H23N508P*l/2CaH20,该水合物易吸湿；具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙水合物可以是(:18仏扎08*1/2Ca0.5H20,该水合物易吸湿，有特臭；该化合物在室温下，在潮湿程度不同的空气中放置2、8h,其吸湿水分可以到4%、5%，8%，9%，甚至达到12%。但是该化合物的性质在室温下还是略溶或微溶于水，在乙醇中几乎不溶，酸度范围，室温下，取O.lg溶解于新沸放冷的蒸馏水2025ml，其pH值在5.07.2之间。具有独特性质的化合物为二丁酰环磷腺苷钙无水物C18H23N508P1/2Ca，该无水物可为无定形，有特臭，易吸湿，按照中国药典规定，不含结晶水的化合物并非绝对无水，该化合物通过卡氏法进行水分测定，其水分一般在1.5%以内；该化合物在室温下，在潮湿程度不同的空气中放置广48h，其吸湿水分可以到2%、3%,4%、5%，8%,9%,甚至达到12%,但是该化合物的性质在室温下还是略溶或微溶于水，在乙醇中几乎不溶，酸度范围，室温下，取0.lg溶解于新沸放冷的蒸馏水2025ral，其pH值在5.07.2之间。根据本发明，药学上可接受的赋形剂可为右旋糖酐、甘露醇、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、乳糖、一水乳糖、乳糖醇、海藻糖、麦芽糖、木糖、木糖醇、糖类物质、氯化镁、氯化钠、硫酸钠、琥珀酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、葡萄糖酸及盐，葡萄糖醛酸及盐，乳糖酸盐、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇1000-4000、烟酰胺、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、组氨酸、组氨酸等及其盐，胆酸盐、甘草酸、甘草酸盐、葡甲胺或其盐、注射用水、水解明胶、可溶性淀粉、可溶性纤维素类物质，环糊精或环糊精衍生物，可含其中的一种或多种。其中赋形剂优选甘露醇、木糖醇、山梨醇、葡甲胺、盐酸赖氨酸、盐酸L-精氨酸、注射用水等中的一种或几种。其药学上可接受的pH调节剂可以是药学上可接受的无机酸或有机酸、无机碱或有机碱，也可以是广义的路易斯酸或碱，可以含有一种或者几种，可以是盐酸、硫酸、醋酸及醋酸盐、乳酸、乳酸药用盐、乳酸钠、枸橼酸、枸橼酸盐、枸橼酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、丁二酸、三羟基氨基甲烷、三乙醇胺、N-甲基葡萄胺、以及它们的盐，多羟基羧酸及盐，葡萄糖醛酸、葡萄糖酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、蛋氨酸，等氨基酸及氨基酸盐等中的一种或者几种。在制备注射用冻千粉针制剂时，可加入药学上可接受的抗氧剂和稳定剂可以是亚硫酸、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、焦亚硫酸盐、连二亚硫酸盐、硫代硫酸盐，有机硫化合物硫脲、谷胱甘肽、巯基乙酸及盐、苯酚类化合物，如没食子酸及盐，甘氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、氨基酸以及其盐，柠檬酸盐、EDTA及EDTA二钠、EDTA四钠、依地酸钙钠等中的一种或者几种。由于本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物(DBCAC)是人体"第二信使"环磷腺苷的衍生物，细胞内被细胞内之磷酸二酯酶水解成环磷腺苷cAMP,可同时激活蛋白激酶A和蛋白激酶C，蛋白激酶是一种别构酶，由两个催化亚基和两个调节亚基组成，催化亚基具有催化蛋白质(或酶)的磷酸化作用。环磷腺苷为蛋白激酶激活剂，是在人体内广泛存在的一种具有生理活性的重要物质，能调节细胞的多种功能活动。作为激素的第2信使，在细胞内发挥激素调节生理机能和物质代谢作用，能改变细胞膜的功能，促使网织肌浆质内的钙离子进入肌纤维，从而增强心肌收縮，并可促进呼吸链氧化酶的活性，改变心肌缺氧，缓解冠心病症状及改善心电图。二丁酰环磷腺苷钙通过催化人体内最基本的生化代谢磷酸化反应和三羧酸循环，使大多数蛋白质和酶类产生活性，激活人体各种反应，同时产生大量ATP，改善细胞代谢和能量代谢，抑制自由基产生，降低血小板活性，减少血栓形成，改善微循环，扩张血管平滑肌，减小心脏收縮后负荷，扩张冠脉改善心肌细胞代谢和保护缺血的心肌细胞，改善心脏窦房结P细胞功能抗心律失常，增加心肌收縮力，提高心输出量，减小心室腔特别是心室舒张末期压力，降低冠心病心衰患者血浆脑钠肽浓度。此外，对糖、脂肪代谢、核酸、蛋白质的合成调节等起着重要的作用。部分作用测定如下1、具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙对缺血再灌注损伤心肌细胞活力的影响测定将新生的SD大鼠乳鼠心肌细胞分离纯化后，以DMEM为培养基参照文献(生理学报1995,47:357;JMolCellCardiol，1995:27:453-8)进行细胞培养，并将二丁酰环磷腺苷钙无水物以硫氮卓酮(DIL)为阳性对照对心肌细胞进行预处理，通过台盼蓝排斥试验进行DBCAC对缺血再灌注损伤心肌细胞活力的影响测定。结果见表2。表2DBCAC对培养的心肌细胞活力影响的台盼蓝排斥试验组别缺氧前缺氧后复氧后60min120min30min60min模型组95.0±2.582.5±3.777.3±2.768.5±3.860.3±2.2DIL10Hmol/L95.7±2.1卯.2±3.485.6±1.682.7±3.378.7±3.5DBCAClOPmol/L95.8±2.392.1±2.687.8±4.184.8±1.581.8±2.0DBCACl卿mol/L96.2士1.894.2±2.292.5±3.4卯,4±3.488.1±4.6结果表明，在缺氧60min、120rain及再给氧30min、60rain后，模型组细胞存活率，明显低于缺氧前正常细胞，各给药组的细胞存活率显著高于模型组，高剂量DBCAC组的细胞存活率显著高于DIL组，表明对心肌细胞的保护作用具有浓度依赖性。2、对家兔窦性心动过缓的作用家兔20只，雌雄不拘，体重2.09土0.32kg，随机分为2组，分别静脉注射给予生理盐水lml，kg—'、用生理盐水溶解的二丁酰环磷腺苷钙(DBCAC)无水物2.2mg*kg—'。3W戊巴比妥钠40mg*kg—'麻醉后，仰卧位固定于手术台上。耳缘静脉注射给药，7min左右后，恒速静脉注射0.25%维拉帕米，lmg，rain—1(0.4ml，min—1),记录出现II度房室传导阻滞，III度房室传导阻滞的时间(min)，计算相应的剂量(mg，kg—')。表3二丁酰环磷腺苷钙(DBCAC)无水物对家兔窦性心动过缓的作用<table>complextableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>结果表明本发明的DBCAC能明显延长II、ni度房室传导阻滞时间，其阻滞时间和阻滞剂量与生理盐水组明显的差异，两组比较P<0.01。3、对氯化钙诱发大鼠心律失常的作用SD大鼠30只，雌雄不拘，体重215土18g，随机分为3组，分别静脉注射给予生理盐水、二丁酰环磷腺苷钙(DBCAC)无水物(生理盐水溶解)12.4mg*kg—'。3劣戊巴比妥钠40mg'kg-'麻醉后，仰卧位固定于手术台上。舌下静脉注射给药，6min左右后，快速静脉注射(5s内推完)2.5%氯化钙100mg'kg一'(0.4ml/100g)，记录出现室颤(VF)及死亡(CA)动物数。结果显示，DBCAC组可明显抑制氯化钙诱发大鼠VF(p<0.05),DBCAC组和奎尼丁组可明显抑制氯化钙导致的大鼠心律失常死亡。DBCAC组在预防大鼠由于氯化钙所致严重心律失常而死亡上的作用有强于奎尼丁组的趋势。见表4。表4二丁酰环磷腺苷钙(DBCAC)无水物对氯化钙诱发大白鼠心律失常的作用<table>complextableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>4、对乌头碱诱发大鼠心律失常的作用SD大鼠20只，雌雄不拘，体重179土17g,随机分为2组，分别静脉注射给予生理盐水、DBCAC(生理盐水溶解)12.4mg'kg1。3%戊巴比妥钠40mg*kg—'麻醉后，仰卧位固定于手术台上。舌下静脉注射给药，6min后，恒速静脉注射0.0025%乌头碱，2ng'mirT1(0.08ral*roin—0,记录出现室早(VP)、室速(VT)、室颤(VF)及死亡(CA)的时间，计算相应的剂量。结果表明，DBCAC组能显著增加乌头碱致大鼠VP、VT、VF和CA的用量。见表5。表5二丁酰环磷腺苷钙(DBCAC)无水物对乌头碱诱发大白鼠心律失常的作用(S±s,n-10)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>DBCAC组与生理盐水组相比(t检验)p〈0.05本发明目标物的临床应用慢性肺原性心脏病本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙可促进心肌细胞的存活，增强心肌细胞抗损伤、抗缺血和缺氧能力，增强磷酸化作用，促进兴奋一收縮偶联，提高心肌收缩力，并可扩张外周血管，降低心脏射血阻抗，减轻心脏前后负荷，增加心输出量。同时，对支气管平滑肌也有较强的扩张作用，对缺氧状态下肺动脉高压病人则显示对肺血管选择性扩张作用，可以增加氧输送量，有助于提高血氧浓度。对于20例慢性肺原性心脏病患者，在常规治疗基础上加用二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物40160mg/d静脉点滴，714d为一疗程。90%的患者咳嗽，喘憋、气促，紫绀、肝肿大、下肢水肿等症状明显减轻，肺部罗音消失或显著减少。肺动脉平均压明显下降。慢性充血性心力衰竭二丁酰环磷腺苷钙在细胞内被细胞内之磷酸二酯酶水解成环磷腺苷cAMP,环磷腺苷能扩张外周血管，降低心脏射血阻抗，减轻心脏前后负荷，增加心脏排血量，降低心肌耗氧量，保护心肌，降低冠脉阻力，改善冠脉循环，增加供氧量。对于12例患者，常规治疗基础上加用本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物40-80mg/天，静脉点滴，14天一个疗程。结果95%的患者心前区疼痛、夜间阵发呼吸困难等临床症状缓解，心电图示ST-T缺血型改变消除或显著改善，左室舒张末期内径，左室射血分数及心胸比例均明显改善。扩张型心肌病心力衰竭由于心肌损害严重，患者通常对地黄类药物不敏感。对于12例患者，常规治疗基础上加用本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物40-80mg/天，静脉点滴，714天一个疗程。结果治疗后90%的患者的症状、体征、心功能及LAD、LVSD、LVDD、LVEF均有明显改善。本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物可用于风湿性心脏病、心绞痛、心肌梗死、心律失常、心肌炎、心源性休克等的治疗:二丁酰环磷腺苷钙在细胞内被细胞内之磷酸二酯酶水解成环磷腺苷，cAMP作为第二信使，可使细胞膜上的ATP—Ca2+复合物中Ca2+释放，有促进呼吸链氧化酶的活化，改善心肌缺氧的作用，故可用于冠心病、心肌炎、风心病、心律失常病人的治疗。对冠心病引起的心绞痛，胸闷等症状有缓解的作用。台盼蓝排斥试验表明，本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙无水物对缺血再灌注损伤心肌细胞具有保护作用，可用于冠心病、心绞痛等的治疗。静脉注射时，可用于急性心肌梗塞的抢救，不但可帮助其迅速渡过危险期，且可縮短恢复期，使病情早日稳定。其作用基础与cAMP的扩张血管，特别是扩张冠状动脉作用有关。降低麻醉期间手术风险本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物在细胞内被细胞内之磷酸二酯酶水解成环磷腺苷，cAMP能改善麻醉期间手术病人心肌缺血，改善心功能，同时能减少肌松药对心血管的副作用，降低手术风险，有利于患者术后机体恢复。肿瘤治疗本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物在细胞内被细胞内之磷酸二酯酶水解成环磷腺苷，环磷腺苷有明显身升高白细胞的作用，可用于急性白血病的治疗并可对抗放疗引起的白细胞减少。对急性白血病结合化疗可提高疗效，亦可用于急性白血病的诱导缓解。因肿瘤组织中的cAMP均比正常组织少，应用二丁酰环磷腺苷钙后可使cAMP增多，从而抑制恶化细胞增殖，使肿瘤细胞向正常方面转化。另外，对放化疗引起的肝肾功能损伤能给予营养支持。本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物可用于脑缺血、脑梗塞、脑血栓及其后遗症本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物在细胞内被细胞内之磷酸二酯酶水解成环磷腺苷，环磷腺苷通过扩张血管的作用，促进血液循环，减少血栓形成，抑制自由基产生，防止再灌注损伤，对脑缺血、脑梗塞、脑血栓及其后遗症均有较好疗效。同时cAMP还可以促进神经细胞内磷酯，核酸和蛋白质的合成代谢，调节神经细胞生物膜的合成与改建，而起到营养神经、活化神经细胞，促进神经细胞的修复与再生，对脑血管意外及脑外伤导致的意识障碍、昏迷、神经细胞损伤有较好的促进恢复作用。本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物可用于损伤细胞的修复二丁酰环磷腺苷钙在细胞内被细胞内之磷酸二酯酶水解成环磷腺苷，环磷腺苷能促进损伤细胞的修复，促进伤口愈合。各种骨科手术、颅脑手术、器官移植等大型手术病人，环磷腺苷有明显帮助康复作用。而且环磷腺苷对感觉神经和运动神经有再生有作用，可运用于断肢再植手术。本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物可用于治疗银屑病二丁酰环磷腺苷钙在细胞内被细胞内之磷酸二酯酶水解成环磷腺苷，增高内源性环磷腺苷有抑制表皮细胞分裂和增殖的作用，故二丁酰环磷腺苷钙可使病人瘙痒明显减轻或消失，鳞屑减少或消退，皮损变薄变平或恢复正常。本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物在细胞内被细胞内之磷酸二酯酶水解成环磷腺苷，环磷腺苷能舒张支气管平滑肌，稳定肥大细胞膜，可治疗慢性支气管炎等各种气喘病。对肝炎和肝硬化病人，可通过影响人体新陈代谢，改善肝功能，并且减少肝细胞损伤，促进肝细胞修复。其适应症有用于肺心病、慢性充血性心力衰竭、缺血性心肌病、扩张型二心肌病心力衰竭、心绞痛、冠心病、心肌梗死、心肌炎、心源性休克、心律失常、牛皮癣、风湿性心脏病、白血病等疾病的治疗，也用于脑缺血、脑梗塞、脑血栓及其后遗症治疗；可用于改善麻醉期间手术病人心肌缺血，改善心功能，减少肌松药对心血管的副作用，降低手术风险，并可用于老年慢性支气管炎、各种肝炎辅助治疗和损伤细胞的修复。缓慢性心律失常的治疗目前多用阿托品或异丙肾上腺素，或者起搏治疗。前者疗效较差，不良反应较多，后者价格较贵。令人惊讶的是，我们发现具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物一个具有双相作用的抗心律失常药物，既又可以治疗缓慢性心律失常，又对快速心律失常有治疗作用。而乙胺碘呋酮、盐酸普鲁卡因、盐酸利多卡因、盐酸普罗帕酮、盐酸美西律、e-阻滞剂、钙拮抗剂(如异搏定、硫氮卓酮)等只具有治疗快速心律失常作用，实际上，洋地黄、e-阻滞剂、钙拮抗剂(如异搏定、硫氮卓酮)、乙胺碘呋酮、I类抗心律失常药物，如奎尼丁、普鲁卡因酰胺、双异丙吡胺、氟卡胺、英卡胺等反而可引起和加重缓慢性心律失常。各种器质性心脏病最终会发生心力衰竭(CHF),心力衰竭一且发生，就离不开强心剂的应用。长期以来，多数情况下还依赖着洋地黄制剂，而洋地黄制剂有负性频率作用，过于缓慢的心率可使心衰进一步加重。所以对充血性心力衰竭伴心动过缓者，洋地黄制剂的应用受到一定的限制，本发明为心力衰蝎伴有缓慢性心律失常的疾病提供新的治疗方法。其用量用法一般情况下，10160mg二丁酰环磷腺苷钙可溶于生理盐水中，作肌内注射，每日二次；或取本发明制剂10160mg(以二丁酰环磷腺苷钙计)于5%葡萄糖或者生理盐水501000亳升中，作静脉滴注，每曰1-2次。本发明的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物和无水物也可用于哺乳类动物的生长发育的调节。环磷腺苷是多种激素作用的第二信使，具有广泛的营养代谢调节作用，是动物生长的重要调节因子。外源cAMP对动物生长有明显促进作用，是一种有良好应用前景的动物生长调节剂。然而，由于cAMP只能以注射使用，限制了其在动物生产领域的应用。二丁酰环磷腺苷钙是cAMP的衍生物，与cAMP具有相似的生理功能和作用机制。由于其具有亲脂性，可通过细胞膜在细胞内发挥作用，因而可通过饲料添加使用，克服了cAMP使用上的缺陷。二丁酰环磷腺苷钙可显著提高生长肥育猪日增重，料重比明显降低，促进蛋白质合成，提高生长速度，促进脂肪分解，减少胴体脂肪沉积，改善胴体组成。较好的给药剂量为皮下注射1.0mg/kg和词料添加20mg/kg。实施例l二丁酰环磷腺苷钙无水物在干燥的三颈烧瓶中，加环磷腺苷三乙胺盐6.5g、无水吡啶8.5ml、重蒸丁酐33ml，氯仿200ml，20—70'C不断搅拌，使海绵状物全部溶解，反应完毕，减压蒸去溶剂后，缓慢加入蒸馏水，在低温下使反应完全，然后减压浓缩成浆状物，即为二丁酰环磷酸腺苷；取二丁酰环磷酸腺苷浆状物用乙醇溶解，加入到适量的氯化钙的乙醇和丙酮水溶液中，搅拌，充分混合，减压抽干溶剂，无水乙醚和丙酮润洗，抽干，再加无水乙醇和精制丙酮混匀，低温下加无水乙醚，放置，过滤，固体物用无水乙醚润洗，抽干，在五氧化二磷存在下，5080'C减压干燥72小时得类白色粉末。有特臭，略溶或微溶于水，在乙醇中几乎不溶，熔点291.5'C(未校正)，水分(卡氏法)0.79%，HPLC分析样品主峰与二丁酰环磷腺苷钠的主峰的保留时间一致。取0.1g溶解于蒸馏水25ml，其pH值为5.3。元素分析实测值C44.23%,H4.82%，N14.30%，P6.31%，Ca4.06%;理论值C44.26%，H4.75%，N14.34%，P6.34%，Ca4.10%;IR(KBr):3417cm"vN.H,2965cm"v，1749cm"v"，1705cm-1v)，1610cnT1vC=N,1588cm'1vC=N,1464cm-1Sc—H，1252cm"v1024cm"vP+c。'HNMR(D20,DMSO):0.91S(3H，t，d),0.95S(3H，t,C18)，1.58S(lH,m，C2)，1.64S(lH，ni,C")，2.418(lH，ra，C3)，2.578(3H,t，C化)，4.026(lH，m,C13)，4.24S(2H，C14)，5.13S(1H,s，C12),5.788(1H，d，Cu)，6.28S(1H，s,C10)，8.72S(lH，s，CJ，8.766(IH，s,C9),10.788(lH,s，HN-)。DEPT谱显示:"CH3,2个;哉5个;-CH，6个。'CNMR(DMSO)14.025(-Ot,d)，14.22S(_CH3,Cl8)，18.43S(-Qt'G),18.8S(C"),35.73S(C3)，38.69S(-CH2,C16)，66.30S(C14),73.358(C13)，73.65S(Cu),75.88S(C12)，89.406(d。)，124.18S(C8)，144.03S(C*)，150.51S(C5),151.88S(C7)，152.78S(GO,172,266(C15),172.695(C4)。实施例2二丁酰环磷腺苷钙1水合物在干燥的三颈烧瓶中，加环磷腺苷三乙胺盐6.5g、无水吡啶8.5ml、重蒸丁酐33ml，氯仿220ml,28—55'C不断搅拌，使海绵状物全部溶解，反应完毕，减压蒸去溶剂后，缓慢加入蒸馏水，在低温下使反应完全，然后减压浓縮成浆状物，即为二丁酰环磷酸腺苷酸；取二丁酰环磷酸腺苷浆状物用乙醇溶解，加入到适量的氯化钙的乙醇和丙酮水溶液中，搅拌，充分混合，减压抽干溶剂，无水乙醚和丙酮润洗，抽干，再加无水乙醇和精制丙酮混匀，低温下加无水乙醚，放置，过滤，固体物用无水乙醚润洗，抽干，减压干燥30小时得类白色粉末。熔点289.5'C未校正，水分(卡氏法)3.93%，HPLC分析纯度97.3%,样品主峰与二丁酰环磷腺苷钠的主峰的保留时间一致。热分析TG-DTA表明210'C前失重为3.889t，取O.lg溶解于蒸馏水22ml，其pH值为5.28。元素分析实测值C42.61%,H5.05%，N13.88%，P6.06%,Ca3.88%;理论值C42.69%,H4.98%,N13.93%，P6.12%，Ca3.96%。IR(KBr):3417cnT1vN.H,2965cm-1vc—H，，1749cm"vc=o，1705cm"vc=o,1610cm"v问，1588cnT1vc=N,1464cnf16C—H，1252em"vp^，1024cnf1vP+c。'HNMR(D20，DMSO):0.91S(3H,t,C,),0.95S(3H,t,C18)，1.58S(lH,m,C2),1.64S(lH，m,C"),2.416(1H,m,C3),2.57S(3H,t,C16),3.43S(肌s)，4.02S(lH，m,C13),4.248(2H，C14),5.13S(IH，s，C12),5.785(1H，d,C")，6.28S(IH，s,Cw)，8.72S(lH,s,Co)，8.768(1H，s，G),10.786(lH，s,HN-)。DEPT谱显示:-CHs,2个；-湿,5个;-CH,6个。'CNMR(DMSO)14.02S(-Cft,d)，14.226(_CH3,C18)，18.43S(~CH2，C2),18.8S(C")，35.73S(G)，38.698("Cft,"),66.30S(C14)，73.35S(C13)，73.656(C")，75.88S(C12)，89.40S(d。)，124.185(Cs),144.036(")，150.51S(C5),151.88S(CO,152.786(C6)，172.26S(C15)，172.698(C,)。实施例3二丁酰环磷腺苷钙1.5水合物在干燥的三颈烧瓶中，加环磷腺苷三乙胺盐6.5g、无水吡啶8.6ml、重蒸丁酐35ml，氯仿200ml，20—70C不断搅拌，使海绵状物全部溶解，反应完毕，减压蒸去溶剂后，缓慢加入蒸馏水，在低温下使反应完全，然后减压浓縮成浆状物，即为二丁酰环磷酸腺苷；取二丁酰环磷酸腺苷浆状物用乙醇溶解,加入到适量的氯化钙的乙醇和丙酮水溶液中，搅拌，充分混合，减压抽千溶剂，无水乙醚和丙酮润洗，抽干，再加无水乙醇和精制丙酮混匀，低温下加无水乙醚，放置，过滤，固体物用无水乙醚润洗，抽干，减压干燥12小时得淡黄色粉末。略溶或微溶于水，在乙醇中几乎不溶，熔点286.5'C未校正，水分(卡氏法):5.58%，MS:[M-Ca]—m/e468,5，HPLC分析样品主峰与二丁酰环磷腺苷钠的主峰的保留时间一致。热分析TG-DTA表明210'C前失重为5.76%,取0.1g溶解于蒸馏水20ml，其pH值为5.25。元素分析实测值C41.84%，H5.13%，N13.51%，P5.92%,Ca3.82%;理论值C41.94%,H5.08%，N13.59°/。，P6.01%，Ca3.89%。IR(KBr):3417cm"v關，2965cnT1v，1749cm-1v0=0，1705cm-1v问，1610ctrf1vc=N，1588cm"vc=N,1464cm-1Sc—H，1252cnT1v阿，1024cm"vNMR(D20，DMSO):0.91S(犯，t，d),0.956(3H,t,C18)，1.58S(lH，m,G)，1.64S(lH,m,C"),2.41S(IH，m,C3),2.57S(3H，t，C16)，3.43S(H20，s)，4.02S(lH，m,C13),4.248(2H，C")，5.13S(1H,s，Cl2),5.785(1H，d,Cu)，6.28S(1H,s，U)，8.72S(1H,s,C6),8.768(IH，s，C9)，10.78S(lH,s,HN-)。DEPT谱显示:~CH3，2个；-Ok5个；~CH，6个。^NMR(DMSO)14.02S(_CH3,C')'14.22S(~CH3，C18),18.43S(~CH2，C2),18.8S(C"),35.73S(C3)，38.69S("Qb,Cui)，66.30S(C"),73.35S(C13)，73.65S(Cu),75.88S(C12),89.40S(C10),124.18S(C8),144,03S(Cs)，150.518(C5)，151.88S(C7),152.78S(C6),172.268(C15),172.696(C4)。实施例4在干燥的三颈烧瓶中，加环磷腺苷三乙胺盐6.5g、无水吡啶9ml、重蒸丁酐35ml,氯仿220ml，25—65'C不断搅拌，使海绵状物全部溶解，反应完毕，减压蒸去溶剂后，缓慢加入蒸馏水，在低温下使反应完全，然后减压浓縮成浆状物，即为二丁酰环磷酸腺苷；取二丁酰环磷酸腺苷浆状物用乙醇溶解，加入到适量的氯化钙的乙醇和丙酮水溶液中，搅拌，充分混合，减压抽干溶剂，无水乙醚和丙酮润洗，抽干，再加无水乙醇和精制丙酮混匀，低温下加无水乙醚，放置，过滤，固体物用无水乙醚润洗，抽干，减压干燥5—8小时得淡黄色粉末。略溶或微溶于水，有特臭，在乙醇中几乎不溶，熔点285.6'C未校正，水分(卡氏法)7.96%,MS:[M-Ca]—m/e468.5，HPLC分析样品主峰与二丁酰环磷腺苷钠的主峰的保留时间一致。取0.1g溶解于蒸馏水25ml，其pH值为5.26。实施例5取二丁酰环磷腺苷钙一水合物原料2.0g(按无水物计)，加甘露醇2.06.0g加注射用水380450ml搅拌使溶解，调节pH为5.07.5，加活性碳0.010,5%(W/V)搅拌1545min，过滤，补水至420520ml，用0.22微米微孔滤膜过滤，按20mg/瓶或40mg/瓶(以主药计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品100~200瓶。实施例6取二丁酰环磷腺苷钙无水物2.08，加甘露醇2,06.0g加注射用水380450ml搅拌使溶解，调节pH为5.06.0，加活性碳0.010.5%(W/V)搅拌1545min，过滤，补水至420520rnl，用0.22微米微孔滤膜过滤，按20mg/瓶或40mg/瓶(以主药计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品100~200瓶，卡氏法测其水分为1.83%。实施例7取二丁酰环磷腺苷钙水合物原料2.0g(以无水物计)，加木糖醇2.0~6.0g加注射用水l卯350ml搅拌使溶解，调节pH为5.06.5，加活性碳0.01~0.5%(W/V)搅拌1545miA过滤，补水至220380ml，用0.22微米微孔滤膜过滤，按20mg/瓶或40mg/瓶(以主药计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品100200瓶，卡氏法测其水分为4.03%。实施例8取二丁酰环磷腺苷钙无水物2.0g,加木糖醇2.0~6.0g，右旋糖酑70100400mg加注射用水190350ml搅拌使溶解，调节pH为5.07.1，加活性碳0.010.5%(W/V)搅拌1545min，过滤，补水至220380ml,用0.22微米微孔滤膜过滤，按20mg/瓶或40mg/瓶(以主药计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品100200瓶。实施例9取二丁酰环磷腺苷钙无水物l.Og，加木糖醇L0g，右旋糖酐70100400mg加注射用水200ml搅拌使溶解，调节pH为5.07.5，加活性碳0.010.5%(W/V)搅拌1545min,过滤，补水至250ml，用0.22微米微孔滤膜过滤，按5ml/瓶分装，得成品50瓶。具有本发明性质的原料，按实施例的方式制成粉针或冻干粉针制剂，出人意料地发现，一个单位剂量的制剂(一般每瓶分装剂量10—80mg),当溶解于10—15ml水中，其pH值在5.07.5之间，比国家药品标准规定的pH值在3.05.0之间的制剂，具有更好存储稳定性，结果见表6。表6.不同制剂的影响因素试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>冻干制剂可以是按实施例5—实施例9的方法得到的制剂本发明并不限于上述实施例。权利要求1、具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物C18H23N5O8P·1/2Ca·nH2O，其中n＝0～2.5，它在室温下在水中略溶或微溶，在乙醇中几乎不溶，0.1g溶解于蒸馏水20～25ml时，pH值为5.0～7.2。2、根据权利要求1所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物，其特征在于其中n=02。3、根据权利要求1或2所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物，其特征在于其中n=01.5。4、根据权利要求1或3所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物，其特征在于其中n=0l。5、根据权利要求1或4所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙无水物，其特征在于该无水物有引湿性，易吸湿。6、根据权利要求1或4所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物，其特征在于二丁酰环磷腺苷钙水合物为类白色至淡黄色粉末，室温下在水中略溶或微溶，在乙醇中几乎不溶。7、根据权利要求1或4所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物，其特征在于室温下取二丁酰环磷腺苷钙水合物0.lg溶解于蒸馏水2025ml，其pH值在5.07.2之间。8、根据权利要求1或5所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙无水物，其特征在于该二丁酰环磷腺苷钙无水物为类白色至淡黄色粉末，室温下在水中略溶或微溶，在乙醇中几乎不溶。9、根据权利要求1或5所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙无水物，其特征在于室温下，取二丁酰环磷腺苷钙无水物0.lg溶解于蒸馏水20~25ml,其pH值为5.07.2之间。10、根据权利要求1或5所述的具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物，其特征在于该水合物或无水物的水分含量在8.45%以内。11、根据权利要求1或5所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物，其特征在于该水合物或无水物的水分含量在6.99%以内。12、制备具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物的方法，其包括如下步骤使环磷腺苷三乙胺盐、无水吡啶、丁酐，氯仿在2070℃全部溶解并反应完毕，减压蒸去溶剂后，缓慢加入蒸馏水，在低温下使反应完全，然后减压浓縮成浆状物，得到二丁酰环磷酸腺苷酸；取二丁酰环磷酸腺苷酸浆状物用乙醇溶解，加入到适量的氯化钙的乙醇或无水乙醇和丙酮水溶液中，搅拌，充分混合，减压抽干溶剂，无水乙醚或丙酮润洗，抽干，再加无水乙醇或无水乙醇和精制丙酮混匀，低温下加无水乙醚，放置，过滤，固体物用无水乙醚润洗，抽干，可在五氧化二磷存在下，减压干燥得成品。13、制备具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物的方法，其包括如下步骤使环磷腺苷三乙胺盐、无水吡啶、丁酐，氯仿在207(TC全部溶解并反应完毕，减压蒸去溶剂后，缓慢加入蒸馏水，在低温下使反应完全，用异己酮提取，弃有机层，然后减压浓縮成桨状物，得到二丁酰环磷酸腺酸；取二丁酰环磷酸腺苷酸浆状物用乙醇溶解，加入氯化钙的乙醇或无水乙醇和丙酮水溶液中，搅拌，充分混合，减压抽干溶剂，无水乙醚或精制丙酮润洗，抽干，再加无水乙醇或无水乙醇和精制丙酮混匀，低温下加无水乙醚，放置，过滤，固体物用无水乙醚润洗，抽干，干燥得成品。14、一种药物组合物，它含有权利要求1至11任一项所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物，以及药物上可接受的赋形剂或载体。15、根据权利要求13的药物组合物，其特征在于该药物组合物呈注射用冻干粉针制剂或无菌分装粉针制剂形式，一个单位剂量的药物组合物溶解于10至15ml水中，其pH值在5.0至7.5之间。16、根据权利要求13的药物组合物，其特征在于该药物组合物呈注射用冻干粉针制剂或无菌分装粉针制剂形式，含水量为5%以内。17、权利要求1至11任一项所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物在制备用作蛋白激酶激活剂；用于治疗肺心病、心衰、缺血性心肌病、心绞痛、冠心病、心肌梗死、心源性休克、心律失常；用于治疗缓慢性心律失常、快速心律失常、伴有缓慢性心律失常的心力衰竭、心肌炎、牛皮癣、风湿性心脏病、白血病等疾病；用于治疗脑缺血、脑梗塞、脑血栓及其后遗症；用于改善麻醉期间手术病人心肌缺血，改善心功能，减少肌松药对心血管的副作用，降低手术风险；用于老年慢性支气管炎、各种肝炎辅助治疗和损伤细胞的修复；以及用于调节哺乳类动物的生长发育的药物中的用途。18、权利要求1至11任一项所述具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物用于治疗肺心病、心衰、缺血性心肌病、心绞痛、冠心病、心肌梗死、心源性休克、心律失常；用于治疗缓慢性心律失常、快速心律失常、伴有缓慢性心律失常的心力衰竭、心肌炎、牛皮癣、风湿性心脏病、白血病等疾病；用于治疗脑缺血、脑梗塞、脑血栓及其后遗症；用于改善麻醉期间手术病人心肌缺血，改善心功能，减少肌松药对心血管的副作用，降低手术风险；用于老年慢性支气管炎、各种肝炎辅助治疗和损伤细胞的修复；以及用于调节哺乳类动物的生长发育的方法。全文摘要本发明具有独特性质的化合物、含有该化合物的组合物及其制备方法和用途，提供具有独特性质的二丁酰环磷腺苷钙水合物或无水物、含有该化合物的药物组合物，及其制备方法和用途。其分子式为C₁₈H₂₃N₅O₈P·1/2Ca·nH₂O，n＝0～2.5，为类白色至淡黄色粉末，室温下在水中略溶或微溶，在乙醇中几乎不溶，其优点为具有突出的存储稳定性，为蛋白激酶激活剂，主要用于心脑血管疾病治疗，也可用于哺乳类动物的生长发育的调节。文档编号A61K31/7076GK101172112SQ200710108088公开日2008年5月7日申请日期2007年5月25日优先权日2007年5月25日发明者力刘,珍刘,吴志刚,力张,静戴,曾繁典,玲李,杨晓燕,祺陈申请人:武汉安士医药科技有限公司