伐伦克林标准品及杂质控制的制作方法

专利名称：：伐伦克林标准品及杂质控制的制作方法伐伦克林标准品及杂质控制
背景技术：
：人们致力于制备存在最少杂质量的高等级药物产品。杂质的控制需要研究各种选择以便对为确保给予公众的药物是纯的所必需的反应条件及测试方案。包括美国食品药品管理局(FDA)在内的管理机构所给出的指导原则表明，对于剂量为2克/天或更低的药物物质，如果药物中的杂质(如果存在)以0.1o/o(即1000ppm)或更高的量存在，则应当被识别出来。(注意ppm是百万分之一份，因此1%=10,000ppm;0,1%=1000ppm;0.01%=100ppm;0.001%=10ppm)。例如，FDA已表明，对于剂量为2克/天的药物物质，通常认为识别表观含量低于0.1%的杂质是不必要的(Fecfera/iegW^^(140),45085-45090，45086和45089(2000年7月20日))。然而，FDA还指出对于某些杂质而言，根据其具体性质，可能需要更严格的控制(同前，见第45086页)。此外，对于剂量为2克/天或更j氐的药物物质，如果杂质的建i义量(aproposedquantityofanimpurity)超过0.05%(500ppm)的质控限度，则推荐进行研究以获得关于杂质建议量的安全信息(/^/#，见第45087页及第45089页)。伐伦克林(5,8,14-三氮杂四环[10.3丄02，11.04'9]-十六碳-2(11),3，5，7，9-五烯)具有以下结构式已知其与神经烟碱性乙酰胆碱特异性受体位点结合并且可用于调节胆碱功能。该化合物可用于治疗炎性肠病(包括但不限于溃疡性结肠炎、坏疽性脓皮症及克罗恩氏病(Crohn'sdisease))、应激性肠综合征(irritablebowelsyndrome)、痉挛性肌张力障碍、慢性疼痛、急性疼痛、腹泻、嚢炎、血管收缩、焦虑症、恐慌症、抑郁症、躁郁症(bipolardisorder)、自闭症、睡眠障碍、时差症J几萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)、认知功能障碍、药物/毒素引发的认知缺陷(例如，由酒精、巴比妥类药物、维生素缺乏、软性毒品、铅、砷、汞引发)、由疾病引发的认知缺陷(例如，由阿尔茨海默氏症(老年性痴呆)、血管性痴呆、帕金森氏病、多发性硬化、AIDS、脑炎、创伤、肾性及肝性脑病、曱状腺功能减退、皮克氏病(Pick'sdisease)、科尔萨科夫综合征(Korsakoffssyndrome)、以及额叶型和皮质下型痴呆症引发)、高血压、食欲过盛、厌食症、月巴胖症、心律失常(cardiacarrhythmias)、胃酸分泌过多、溃疡、嗜铬细胞瘤、进行性肌上性麻痹、化学药品依赖及成瘾(例如，对尼古丁(和/或烟草产物)、酒精、苯并二氮杂卓、巴比妥类药物、鸦片或可卡因的依赖或成瘾)、头痛、偏头痛、中风、创伤性脑损伤(TBI)、强迫症(OCD)、精神病、亨廷顿舞蹈症(Huntington'schorea)、迟发性运动障碍、运动过度、诵读障碍、精神分裂症、多梗塞性痴呆、与年龄相关的认知衰退、包括小发作失神癲痫在内之癫痫、注意力缺损型多动症(ADHD)、图雷特综合征(Tourette'sSyndrome),尤其是尼古丁依赖、成瘾及戒断；包括用于戒烟治疗。与神经烟碱性受体位点结合的化合物包括5,8,14-三氮杂四环[10.3丄02'u.()4'9]-十六碳-2(ll)，3,5，7,9-五烯及其盐酸盐，参见于1999年7月15日/^开的WO99/35131(对应于在1999年9月28日4是交的美国专利第09/402,010号和在2000年2月25日提交的美国专利第09/514，002号)。PCT国际专利申请第PCT/IB06/001207号披露了l-(4,5-二氨基-十氮杂-三环[6.3.1.02'7]-十二碳-2-(7)，3,5-三烯-10-基)-2，2,2-三氟乙酮的衍生化。PCT国际专利申请案第PCT/IB05/000351号披露了在合成过程中控制杂质的方法。与本申请共同拥有且以引用方式整体并入本文中的上述申请大体上描述了其中所提及的化合物的药学可接受的酸加成盐。有机化合物的硝化和还原方法通常得到产物混合物。已经发现该化学品可产生若干单硝基、单氨基、混合氨基硝基(mixedaminonitro)、二氨基或二硝基中间体中的一种或多种的混合物，其中的一种或多种可包括合成路径中携带的未反应起始材料。可以通过改变各反应条件来控制不希望的硝化和还原以提供优化的纯度。在缺少合成标准品情况下，优化该过程化学品的过程将明显更加繁瑣。因此，本发明涉及本发明人开发的用于控制伐伦克林药物物质以确保所关注的杂质的含量处于可接受的低含量的技术，包括用于优化生产伐伦克林及其药学可接受的盐的工艺的合成标准品的制备。
发明内容本发明提供了一种组合物，其包括伐伦克林或其药学可接受的盐以及一定量的选自下列的化合物方案l:与伐伦克林合成有关的杂质和中间体H2I4567其中R是H、乙酰基或CF3CO-,该化合物浓度大于0ppm且不大于约500ppm、不大于约100ppm或不大于约10ppm。本发明还提供了一种组合物，其中伐伦克林是伐伦克林游离碱，或者其中伐伦克林盐是伐伦克林盐酸盐、伐伦克林柠檬酸盐、伐伦克林琥珀酸盐、伐伦克林酒石酸盐或伐伦克林-L-酒石酸盐。在一个具体实施方式中，本发明提供了组合物，其中伐伦克林盐是伐伦克林-L-酒石酸盐。本发明还提供了一种用于治疗哺乳动物的选自下组的疾病或病症的药物组合物炎性肠病(包括但不限于溃疡性结肠炎、坏疽性脓皮症及克罗恩氏病)、应激性肠综合征、痉挛性肌张力障碍、慢性疼痛、急性疼痛、腹泻、嚢炎、血管收缩、焦虑症、恐慌症、抑郁症、躁郁症、自闭症、睡眠障碍、时差症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)、认知功能障碍、药物/毒素引发的认知缺陷(例如，由酒精、巴比妥类药物、维生素缺乏、软性毒品、铅、砷、汞引发)、疾病引发的认知缺陷(例如，由阿尔茨海默氏症(老年性痴呆)、血管性痴呆、帕金森氏病、多发性硬化、AIDS、脑炎、创伤、肾性及肝性脑病、曱状腺功能减退、皮克氏病、科尔萨科夫综合征、以及额叶型及皮质下型痴呆症引发)、高血压、食欲过盛、厌食症、肥胖症、心律失常、胃酸分泌过多、溃疡、嗜铬细胞瘤、进行性肌上性麻痹、化学药品依赖及成瘾(例如，对尼古丁(和/或烟草产品)、酒精、苯并二氮杂卓、巴比妥类药物、鸦片或可卡因的依赖或成瘾)、头痛、偏头痛、中风、创伤性脑损伤(TBI)、强迫症(OCD)、精神病、亨廷顿舞蹈症、迟发性运动障碍、运动过度、诵读障碍、精神分裂症、多梗塞性痴呆、与年龄相关的认知衰退、包括小发作失神癫痫在内之癫痫、注意力缺损型多动症(ADHD)、图雷特综合征，该药物组合物包括有效治疗本文所述疾病或病症的量的本文所公开的组合物及药学可接受的载体。本发明还提供了用于其中疾病或病症是尼古丁依赖、成瘾及戒断(包括用于戒烟治疗中)的药物组合物。在一个具体实施方式中，本发明提供了用于戒烟治疗的药物组合物，其中伐伦克林盐是伐伦克林酒石酸盐。本发明还提供了用于戒烟治疗的药物组合物，该药物组合物包括戒烟治疗有效量的上文所述组合物及药学可接受的载体。本发明还提供了这样的药物组合物其中伐伦克林盐是伐伦克林酒石酸盐。本发明还提供了一种治疗需要进行这种治疗的哺乳动物的选自下组的疾病或病症炎性肠病(包括但不限于溃疡性结肠炎、坏疽性脓皮症及克罗恩氏病)、应激性肠综合征、痉挛性肌张力障碍、慢性疼痛、急性疼痛、腹泻、嚢炎、血管收缩、焦虑症、恐慌症、抑郁症、躁郁症、自闭症、睡眠障碍、时差症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)、认知功能障碍、药物/毒素引发的认知缺陷(例如，由酒精、巴比妥类药物、维生素缺乏、软性毒品、铅、砷、汞引发)、疾病引发的认知缺陷(例如，由阿尔茨海默氏症(老年性痴呆)、血管性痴呆、帕金森氏病、多发性硬化、AIDS、脑炎、创伤、肾性及肝性脑病、曱状腺功能减退、皮克氏病、科尔萨科夫综合征及额叶型及皮质下型痴呆症引发)、高血压、食欲过盛、厌食症、肥胖症、心律失常、胃酸分泌过多、溃疡、嗜铬细胞瘤、进行性肌上性麻痹、化学药品依赖及成瘾(例如，对尼古丁(和/或烟草产品)、酒精、苯并二氮杂卓、巴比妥类药物、鸦片或可卡因的依赖或成瘾)、头痛、偏头痛、中风、创伤性脑损伤(TBI)、强迫症(OCD)、精神病、亨廷顿氏舞蹈症、迟发性运动障碍、运动过度、诵读障碍、精神分裂症、多梗塞性痴呆、与年龄相关的认知衰退、包括小发作失神癫痫在内之癫痫、注意力缺损型多动症(ADHD)、图雷特综合征，尤其尼古丁依赖性、成瘾及戒断；包括用于戒烟治疗中的方法，该方法包括对所述哺乳动物给予有效治疗所述疾病或病症量的本文所披露的组合物。在一具体实施方式中，本发明提供了用于治疗尼古丁依赖、成瘾及戒断(包括戒烟治疗)的方法。在一实施方式中，实施该方法，其中伐伦克林盐是伐伦克林酒石酸盐。本发明进一步提供选自下列的化合物方案2:与伐^r克林合成有关的杂质其中R是H(标为a)、乙酰基(标为b)或CF3CO-(标为c),所有这些杂质均可用作伐伦克林控制合成的标准品。一批伐伦克林的样品中每种杂质的含量可使用本领域技术人员已知的标准分析技术来测定。例如，上述若干单硝基、单氨基、混合氨基硝基、二氨基或二硝基中间体杂质中的一种或多种的含量可由正相HPLC、反相HPLC或气相色谱方法来测定。术语"治疗"是指逆转、减轻或抑制该术语所施加的疾病或病症的发展或者这些疾病或病症中的一种或多种症状。才艮据患者病况，本文所用的这些术语还涵盖防止疾病或病症或者与疾病或病症有关的症状的发作，包括在患有疾病或病症前降^f氐该疾病或病症或与其有关的症状的严重程度。因此，本文所用的"治疗"可指将本发明化合物给予在给予时尚未患有该疾病或病症之受试者。因此"治疗(treating)"还涵盖防止疾病或病症或与其有关的症状的复发。本文所用的"哺乳动物"(除非另有说明)意指任一哺乳动物。术语"哺乳动物"包括，例如但不限于狗、猫及人类。当本文中使用术语"约"时，例如"小于'约，500ppm"，其意指在该术语所使用的数值的±10%的范围内。具体实施例方式一种如上所述用于合成伐伦克林的方法是美国专利第6,410,550号中所教导的方法，该专利的内容通过引用的方式并入本文。一种由本清除，随后对用于合成伐伦克林的起始反应物的质量设定足够的限制。在伐伦克林合成过程中，在反应处理过程中使一种或多种中间体经受萃取及结晶。尽管各中间体及其相应的杂质在结构上相似且具有相似的溶解性，但它们在物化性质上仍存在轻微的差异。因此，可进行清除实验(purgingexperiment)以测定通过萃取、结晶和再结晶、以及其它处理操作去除的杂质量。方案3:掺入实验(spikingexperiment)以提供过程清除数据例如，参照方案3，化合物3(R^COCF3)(即一批起始材料化合物8制得的伐伦克林中产生相应的杂质化合物3(R=H)。在合成过程的反应及分离条件过程中，发现大于2倍清除量的化合物3a(R^COCF3)及其后续类似物。类似地，对方案3中所示的每种其它杂质进行相同的掺入实验设计。如上所述，当上文所述的杂质以大于500ppm的量存在时，其可由标准分析技术检测。本发明涉及这些含量不大于500、100或10ppm的杂质的检测。测定低含量(不大于约500、IOO或IOppm)的方法如下所述。用于在经保护的中间体中4企测含量不大于约500ppm、或不大于约100ppm、仪器HPLC柱柱温注射体积:流动相梯度具有单个四极质谱仪;险测器的HPLCPhenomenexPolarRP2.0毫米xl50毫米；4微米粒径40°C25微升A:0.2%曱酸，用氨水调至pH3B:乙腈时间%A%B080205802034505035505035.18020检测MSD,选择性离子监测(对于每种化合物来说，最佳SIM离子是会变化的；但对于每一质谱仪而言必须是确定的)样品制备在50/50的乙腈/水中制备2毫克/毫升的经保护中间体标准品制备制备0.0002毫克/毫升(100ppm,相对于样品浓度)及0.00002毫克/毫升(10ppm,相对于样品浓度)的杂质方法范围10ppm至1000ppm方法LOQ:10ppm方法LOD:1ppm用于^r测活性药物成^f分中含量不大于约500ppm、或不大于约IOOppm或不大于约10ppm的杂质的分析方法概述于下文系统l(用于检测化合物3(R=H)、4(R-H)和6(R=H))仪器具有单个四极质谱仪;险测器的HPLCHPLC柱WatersAtlantisdds4.6毫米x250毫米；5孩i米粒径柱温30°C流速1.0毫升/分钟注射体积100樣i升流动相A:20mM乙酸铵乙腈(95:5，v/v)B:20mM乙酸铵乙腈(50:50,v/v)时间%A%B0100022100022.01010027010027.011000341000检测MSD,选择性离子监测(对于每种化合物来说，最佳SIM离子是会变化的；但对于每一质谱仪而言必须是确定的)样品制备在95/5的100mM乙酸铵/乙腈中制备15mgA/毫升的API标准品制备使用15mgA/毫升API工作标准品，在95/5的100mM乙酸铵/乙腈中制备0.00015毫克/毫升(10ppm,相对于样品浓度)的杂质方法范围10ppm至100ppm方法LOQ:10ppm方法LOD:1ppm系统2(用于检测化合物l(R=H)、2(R=H)、5(11=印和7(R=H))仪器具有单个四极质谱仪检测器的HPLCHPLC柱WatersAtlantisdCi84.6毫米x250毫米；5孩史米粒径柱温30°C流速1.0毫升/分钟注射体积IO(M鼓升流动相20mM乙酸铵乙腈(76:24,v/v)运行时间22分钟检测MSD，选择性离子监测(对于每种化合物来说，最佳SIM离子是会变化的；但对于每一质谱仪而言必须是确定的)样品制备在系统2流动相中制备15mgA/毫升的API标准品制备使用15mgA/毫升的API工作标准品在系统2流动相中制备0.00015毫克/毫升(10ppm,相对于样品浓度)的杂质方法范围10ppm至100ppm方法LOQ:10ppm方法LOD:1ppm如签署(例如)美国专利第6，410,550号中所阐述，本发明的伐伦克林药物物质可以如本文所示作为医药药物给予。根据标准医药规范，可以将其单独给予包括人类在内之哺乳动物受试者，或者优选在药物组合物中与药学可接受的载体或稀释剂组合给予。这些药物組合物可以经口或者通过包括静脉内或肌内的非经肠方式来给予。合适的医药载体包括固体稀释剂或填充剂、以及无菌水溶液和多种有机溶剂。然后这种药物组合物可方便地以多种剂型给予，例如片剂、粉剂、锭剂、糖浆及注射溶液。这些药物组合物如果需要可以包含其它成份，如矫味剂、粘合剂及赋形剂。因此，为经口给予，可以将包含各种赋形剂(如柠檬酸钠、碳酸4丐及磷酸钙)的片剂与各种崩解剂(如淀粉、海藻酸及某些络合硅酸盐)和粘合剂(如聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖、明胶及阿拉伯胶)一起施用。另外，润滑剂(如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠及滑石粉)常用于制片目的。类似形式的固体材料也可以在软和硬填充胶嚢中用作填充剂。对此，优选的材料包括乳糖(lactose或milksugar)和高分子量聚乙二醇。当经口给予需用水性悬浮液或酏剂时，其中伐伦克林药物物质可与各种甜味剂或矫味剂、着色物质或染料以及(若需要)乳化剂或悬浮剂、连同稀释剂(如水、乙醇、丙二醇、甘油及其组合)一起组合使用。对于非经肠给予而言，可以使用伐伦克林药物物质在芝麻油或花生油、丙二醇水溶液中或者在无菌水溶液中的溶液或悬浮液。这种水溶液应适当地加以緩沖(若需要)，并用足量盐水或葡萄糖使液体稀释剂首先呈等渗性。这种特定水溶液尤其适合静脉内、肌内、皮下及腹膜腔内给予。所施用的无菌水媒介均可容易地通过本领域技术人员已知的标准技术得到。众所周知，伐伦克林的有效剂量取决于预期的给予路径及其它因素，例如所治疗的适应症及受试者年龄和体重。一般而言，日剂量可以为约0.25毫克至约200毫克伐伦克林药物物质，以单剂给予或分为多剂给予，优选约0.5毫克/天至约20毫克/天。对于体重为约70掮客的患者来说，典型的日剂量优选为每天两次给予约0.5毫克至每天两次给予约2毫克伐伦克林药物物质，更优选每天两次给予约0.5毫克至每天两次给予约l毫克。然而，应了解伐伦克林药物物质的剂量及剂量安排(doseregiment)可由本领域技术人员根据任何特定患者的特定状况在前述范围及疗程内变化。以下实施例说明本发明。然而，应了解，如本文所全面阐述且如权利要求中所述的本发明不表示受以下实施例的细节所限。实施例A部分实施例清除实验清除倍数的实验测定伐伦克林的合成将化合物8在曱苯中浆化，并将其添加至NaOH(3.1当量)的水溶液中。将两相混合物加热至37-40。C，由此产生两个浅黄色澄清层。此时，将50ppm化合物3(R-H)掺入(spike)反应混合物中。然后进行化合物8至伐伦克林(9)的转化，包括用DarcoKB-B处理曱苯相/水相两相，并回收化合物9/曱苯溶液。使化合物9/曱苯溶液与MeOH共沸蒸馏。将所产生的化合物9/曱醇溶液添加至L-(+)-酒石酸/MeOH溶液中以形成盐10。颗粒形成后，过滤盐10并干燥。分析经分离材料的残余化合物3(R=H)。当达到37-4(TC的温度时，将50ppm掺入物3引入反应混合物中。由于溶液中的化合物8批料已包含6ppm的3，因此3的总量为56ppm。在去保护过程中，将包含在进入的(ingoing)化合物8中的化合物3(!^COCF3)转化为相应的化合物3(R=H)。分析所产生的最终盐10中是否存在化合物3(R-H)。检测发现Uppm的化合物3(!^H)对应于《7x清除倍数(purgefactor)。B部分标准品的合成2.2，3，4，5-四氢-lH-l，5-亚曱基-3-氮杂卓-7-胺的合成2a.7-硝基-3-(三氟乙酰基)-2，3，4，5-四氢-lH-l，5-亚甲基-3-氮杂卓的合成将三氟曱磺酸(19.8克)溶于CH2Cl2(275毫升)中并冷却至0。C。逐滴添加发烟HN03(2.8毫升)。溶液在短时间内浑浊，然后又变为澄清的黄色溶液。在单独的容器中，将3-(三氟乙酰基)-2，3，4,5-四氢-lH-l,5-亚曱基-3-氮杂卓(15.3克)溶于CH2Cl2(350毫升)中，并转移至另一漏斗中。经过约1小时逐滴添加该溶液。在整个添加过程中4吏反应温度保持在0-5。C。完成添加后，使罐在0-5。C下保持2小时，緩慢加热至室温，然后搅拌过夜。在通过TLC(洗脱液=1:1EtOAc:Hex)确定反应完成后，将反应混合物緩慢添加至冰水中以淬灭反应，并搅拌20分钟。将两相系统转移至分液漏斗中进行相分离。收集CH2Cl2/产物溶液，用Na2SCU及DarcoKB-B同时处理，用硅藻土垫进行过滤，并用CH2CV中洗。收集滤液，并抽真空得到暗黄色油，将其静置固化形成蜡状黄色固体。使该固体在45。C下在真空炉中干燥过夜。由此得到黄色固体粗产物(17.9克，90%纯度，由HPLC测定)。将粗产物(17.9克)加入EtOH(卯毫升)中并使其回流，由此产生澄清的黄色溶液。使溶液緩慢冷却至室温并搅拌过夜。由此得到奶油色浆料。将浆料在#2Whatman纸滤器上过滤，并用EtOH沖洗。然后使固体在45。C下于真空炉中干燥过夜。由此得到14.6克(81.1%产率)奶油色固体。b.3-(三氟乙酰基)-2，3，4，5-四氢-lH-l，5-亚甲基-3-氮杂卓-7-胺的合成。在500毫升玻璃Parr瓶中，将7-硝基-3-(三氟乙酰基)-2,3,4,5-四氢-1H-1，5-亚曱基-3-氮杂卓(10克)在MeOH(200毫升)中浆化。添加50%润湿的5%Pd/C(0.3克)，并将该系统置于Parr振荡器氢化设备上。用^(3x20psi)吹扫系统。然后用H2(3x20psi)吹扫系统。使系统加压至45-50psiH2,并使其氢化3小时。使系统减压并检查反应完成情况。在通过薄层层析(洗脱液=1:1EtOAc:Hex)确定反应完成后，用硅藻土垫过滤产物混合物，随后用0.45微米微孔过滤器过滤以去除残余碳。收集滤液，并抽真空得到橙色油。使该油在45。C下于真空炉中干燥过夜。由此得到8.9克(98.9%产率)橙色油。c.2，3，4，5-四氢-lH-l，5-亚曱基-3-氮杂卓-7-胺的合成将得自上述反应的产物(S"克)溶于CH3CN(卯毫升)中。添加NaOH(7"克)的H20("毫升)溶液，将该溶液加热至？0。C并保持4小时。在通过薄层层析(洗脱液=7:3EtOAc:Hex)确定反应完成后，对产物混合物实施抽真空得到浅褐色固体。添加CH2Cl2(200毫升)，并将混合物剧烈搅拌l小时以萃取所需产物。过滤除去固体(NaOH)并收集滤液。用Na2S04干燥滤液，过滤并再次抽真空得到^f登褐色油。添加CH2Cb(25毫升)并将混合物搅拌l小时，产生棕褐色浆料。用#2Whatman滤纸过滤浆料并用少量CH2Cl2冲洗。使该棕褐色固体在45。C下于真空中干燥过夜。由此得到3.0克(52.3°/。产率)棕褐色固体。3.7，8-二硝基-2，3，4，5-四氢-lH-l，5-亚曱基-3-氮杂卓的合成将由该化合物供货商获得的7,8-二硝基-3-(三氟乙酰基)-2,3，4，5-四氢-lH-l,5-亚曱基-3-氮杂卓(15克)溶于CH3CN(150毫升)中。添加NaOH(10.4克)的H2O(45毫升)溶液。将混合物加热至70。C并保持4小时，缓慢冷却至室温，然后搅拌过夜。在通过薄层层析(洗脱液=7:3EtOAc:Hex)确定反应完成后，对产物混合物进行真空蒸馏，直至得到含水浆料(此时pH二12.5)。添加2MHC1(水溶液)以将pH调节至7.5。然后使浆料粒化l小时，在#2Whatman纸滤器上过滤，并用^0沖洗。使铁锈色固体在N2流下干燥1小时，随后在45°C下于真空炉中干燥过夜。由此得到9.1克(84.2%产率)铁锈色固体。4.8-硝基-2，3，4,5-四氢-lH-l，5-亚曱基-3-氮杂卓-7-胺的合成4a.3-(三氟乙酰基)-8-硝基-23,4^四IUH-l，5"亚甲基-3-氮杂各7-胺的合成根据以上实施例2B中所示的程序，将7，8-二硝基-3-(三氟乙酰基)-2，3，4,5-四氢-lH-l,5-亚曱基-3-氮杂卓还原，不同之处在于在清除后将系统加压至25psiH2并使其氬化2小时。使系统减压并用#2Whatman滤纸过滤浆料。收集固体。重复该程序3次，并收集和合并这种粗产物(共5.6克)。将其溶解于CH3CN中，用硅藻土垫过滤以去除废催化剂。收集滤液并抽真空得到黄褐色固体。分析表明，所需的3-(三氟乙酰基)-8-硝基-2,3,4，5-四氢-lH-l,5-亚曱基-3-氮杂卓-7-胺中包含约3%的化合物6c。产率5.6克。4b.合成8-硝基-2，3，4，5-四氢-lH-l，5-亚曱基-3-氮杂卓-7-胺使3-(三氟乙酰基)-8-硝基-2，3,4,5-四氢-1^1-1，5-亚甲基-3-氮杂卓-7-胺(5.6克)在CH3CN(56毫升)中浆化。添加NaOH(4.3克)的1120(40毫升)溶液。将混合物加热至70。C并搅拌3小时(在整个反应期间混合物保持浆料状态)。在通过薄层层析(洗脱液=7:3EtOAc:Hex)确定反应完成后，使产物混合物冷却并粒化l小时。将黄橙色固体在#2Whatman滤纸上过滤并用H20沖洗。使该固体在N2流下干燥过夜。由此得到3.6克(92.3%产率)黄橙色固体。5.2，3，4，5-四氢-lH-l，5-亚曱基-3-氮杂卓-6，8-二胺的合成5a.3-(三氟乙it^)-6，8-^^基-23，4，5-四iUH-l，5-亚甲基-3-氮杂卓的分离根据美国专利第6,410，550号所述的合成方法，在形成7,8-二硝基-3-(三氟乙酰基)-2,3,4,5-四氢-lH-l，5-亚曱基-3-氮杂卓的反应中形成作为杂质的间二硝基区域异构体(regio-isomer)。通过分步结晶来纯化得自反应的母液废料，以提供53.8克的奶油色固体样品，3-(三氟乙酰基)-6,8-二硝基-2,3,4,5-四氢-lH-l,5-亚曱基-3-氮杂卓。5b.6，8-二硝基-2，3，4，5-四氢-lH-l，5-亚曱基-3-氮杂卓的合成以类似于上述实施例2c中所示的方式，通过石威水解去除三氟乙酰基，随后过滤得到滤液，收集滤液并抽真空得到湿黄色固体。添加&0(50毫升)并使该混合物粒化1小时。使黄色固体在#2Whatman滤纸上过滤，用H20冲洗并使其在45。C下于真空炉中干燥过夜。由此得到7.5克(90.4%产率)黄色固体。5c.2，3，4，5-四氳-lH-l，5-亚曱基-3-氮杂卓-6，8-二胺盐酸盐的合成通过如上文实施例2b中所述的还原，使8.0克6,8-二硝基-2,3,4,5-四氬-lH-l,5-亚甲基-3-氮杂卓还原。过滤后收集滤液，用Na2S04及DarcoKB-B同时处理，并用硅藻土垫再次过滤。对滤液进行真空蒸馏，得到橙色的粘性半固体(6.1克，理论值)，由于该固体呈粘性，因此通过添加由鼓泡入冰冷的异丙醚(35毫升)中而制备的HC1(克)来使该固体自MeOH(5毫升)及CH2Cl2(35毫升)中再次分离，以产生盐酸盐(浅褐色固体)。所制备的每种标准品均通过标准HPLC和本文所述的各种LC/MS方法评价，并且发现其适合用作标准品。权利要求1.一种组合物，其包括伐伦克林、经保护形式的伐伦克林或它们的药学可接受的盐以及一定量的选自下列的化合物其中R是H、乙酰基或CF3CO-，且所述化合物浓度大于0ppm且不大于约500ppm、不大于约100ppm或不大于约10ppm。2.如权利要求l所述的组合物，其中伐伦克林是伐伦克林游离碱，或者其中伐伦克林盐是伐伦克林盐酸盐、伐伦克林柠檬酸盐、伐伦克林琥珀酸盐或伐伦克林酒石酸盐。3.如权利要求l所述的组合物，其中伐伦克林盐是伐伦克林酒石酸盐。4.一种药物组合物，其用于治疗罹患选自下组的疾病或病症的哺乳动物炎性肠病、溃疡性结肠炎、坏疽性脓皮症、克罗恩氏病、应激性肠综合征、痉挛性肌张力障碍、慢性疼痛、急性疼痛、腹泻、嚢炎、血管收缩、焦虑症、恐慌症、抑郁症、躁郁症、自闭症、睡眠障碍、时差症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)、认知功能障碍、药物/毒素引发的认知缺陷、疾病引发的认知缺陷、高血压、食欲过盛、厌食症、肥胖症、心律失常、胃酸分泌过多、溃疡、嗜铬细胞瘤、进行性肌上性麻痹、化学药品依赖及成瘾、尼古丁依赖、成瘾及戒断；对酒精、苯并二氮杂卓、巴比妥类药物、鸦片或可卡因之依赖或成瘾、头痛、偏头痛、中风、创伤性脑损伤(TBI)、强迫症(OCD)、精神病、亨廷顿舞蹈症、迟发性运动障碍、运动过度、诵读障碍、精神分裂症、多梗塞性痴呆、与年龄相关的认知衰退、包括小发作失神癫痫在内的癲痫、注意力缺损型多动症(ADHD)及图雷特综合征，所述组合物包括有效治疗所述疾病或病症的量的如权利要求l所述的组合物及药学可接受的载体。5.如权利要求4所述的药物组合物，其中所述疾病或病症是尼古丁依赖、成瘾或戒断。6.如权利要求5所述的药物组合物，其中伐伦克林盐是伐伦克林酒石酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>。7.—种用于戒烟治疗的药物组合物，所述组合物包括对戒烟治疗有效的量的如权利要求1所述的组合物及药学可接受的载体。8.如权利要求7所述的药物组合物，其中伐伦克林盐是伐伦克林酒石酸盐。9.如权利要求1所述的组合物在制造用于治疗罹患选自下组的疾病或病症的哺乳动物的药物中的用途所述疾病或病症选自炎性肠病、溃疡性结肠炎、坏疽性脓皮症、克罗恩氏病、应激性肠综合征、痉挛性肌张力障碍、慢性疼痛、急性疼痛、腹泻、嚢炎、血管收缩、焦虑症、恐慌症、抑郁症、躁郁症、自闭症、睡眠障碍、时差症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)、认知功能障碍、药物/毒素引发的认知缺陷、疾病引发的认知缺陷、高血压、食欲过盛、厌食症、肥胖症、心律失常、胃酸分泌过多、溃疡、嗜铬细胞瘤、进行性肌上性麻痹、化学药品依赖及成瘾、尼古丁依赖、成瘾及戒断；对酒精、苯并二氮杂卓、巴比妥类药物、鸦片或可卡因之依赖或成瘾、头痛、偏头痛、中风、创伤性脑损伤(TBI)、强迫症(OCD)、精神病、亨廷顿舞蹈症、迟发性运动障碍、运动过度、诵读障碍、精神分裂症、多梗塞性痴呆、与年龄相关的认知衰退、包括小发作失神癫痫在内之癫痫、注意力缺损型多动症(ADHD)及图雷特综合征。10.如权利要求9所述的用途，其中所述疾病或病症是尼古丁依赖、成瘾及戒断。11.如权利要求9所述的用途，其中伐伦克林盐是伐伦克林酒石酸盐。12.如权利要求1所述的组合物在制造用于戒烟治疗的药物中的用途。13.如权利要求12所述的用途，其中伐伦克林盐是伐伦克林酒石酸盐。14.一种化合物，其选自其中R是H、乙酰基或CF3CO-。15.如权利要求14所述的化合物，其中R是H，且存在氨基基团或其酸加成盐，其中所述盐选自盐酸盐和酒石酸盐。16.如权利要求14所述的化合物，其中所述化合物在伐伦克林酒石酸盐的制造中作为分析标准品。17.如权利要求14所述的化合物，其中R是CF3CO-，所述化合物在伐伦克林酒石酸盐的制造中作为分析标准品。全文摘要本发明提供一种伐伦克林组合物，其包含伐伦克林或其药学可接受的盐以及一定量的选自若干单硝基、单氨基、混合氨基硝基、二氨基或二硝基中间体中的一种或多种的化合物，该化合物的浓度大于0ppm且不大于约500ppm、不大于约100ppm或不大于约10ppm。本发明还提供了这种伐伦克林组合物的合成和使用方法。文档编号A61P1/00GK101410110SQ200780011163公开日2009年4月15日申请日期2007年3月15日优先权日2006年3月27日发明者卡伦·S·布朗克,弗兰克·R·布希,格雷戈里·J·威思布罗,特里·G·西奈申请人:辉瑞产品公司