专利名称：：皮肤病血毒制剂的质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及中药制剂的质量控制方法领域，具体涉及皮肤病血毒制剂的质量控制方法。二
背景技术：
：皮肤病血毒制剂原料药由中药材茜草、桃仁、荆芥穗(炭)、蛇蜕(酒炙)、赤芍、当归、白茅根、地肤子、苍耳子(炒)、地黄、连翘、金银花、苦地丁、土茯苓、黄柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防风、赤茯苓、白芍、蝉蜕、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鲜皮、熟地黄、大黄(酒炒)、忍冬藤、紫草、土贝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荆皮、鸡血藤、浮萍、红花等组成，为了有效地控制产品质量，我们建立了制剂的质量控制方法，该方法采用照薄层色谱法对黄柏、大黄、赤芍、白芍、牡丹皮、连翘、白茅根、桔梗、牛蒡子进行鉴别，并照高效液相色谱法以盐酸小檗碱为指标进行含量测定，该质量控制方法保证了皮肤病血毒制剂质量检测标准的准确性和先进性，能够有效确保皮肤病血毒制剂的质量，使该制剂在工业化大生产中质量得以有效控制。三
发明内容本发明的目的在于公开皮肤病血毒制剂的质量控制方法。本发明的质量控制方法包括以下鉴别和/或含量测定方法。本发明的鉴别方法是以下方法的一种或几种①.取皮肤病血毒制剂7.2g，研细，加甲醇1535ml，置水浴上加热回流10-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材0.1g，.加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(5~7:2~4:13:1~2:0.15-0.45)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。②.取皮肤病血毒制剂4.8g,研细，加甲醇525ml，超声处理1030分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水515ml使溶解，加盐酸0.51.5ml，置水浴上加热20-40分钟，取出，立即冷却，加乙醚提取13次，每次515ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，加甲醇同法制成对照药材^液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4(^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，,以石神醚'(石油醚3060。0-甲酸乙酯-甲酸(1446:4~6:0.5-1.5)的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯G65nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，M相同的五个相同颜色荧光斑点；置氨气中熏后，斑点变为红色。10③.取皮肤病血毒制剂21.6g，研细，加甲醇2040ml，超声处理20-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取茜草对照药材lg，加甲醇1030ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60卯。C)-丙酮(3~5:0.5-1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。④.取皮肤病血毒制剂14.4g，研细，加甲醇2040ml，置水浴上加热回流20~40分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各l(Htl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷一甲醇一乙酸乙酯(79:35:0.5-1.5)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于IOO'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。⑤.取皮肤病血毒制剂28.8g，研细，加乙醚2575ml，水浴上低温回流0.5-1.5小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚lml使溶解，作为供试品溶液；另取白茅根对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1(^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。(D.取皮肤病血毒制剂21.6g，研细，加甲醇2575ml，置水浴上加热回流0.5~1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇46ml使溶解，加活性炭0.51.5g，振摇5~15分钟，滤过，滤液浓縮至约2ml作为供试品溶液；另取连翘苷对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲垸-甲苯-甲醇(4~6:2~4:4~6:2~4)为展开剂，预饱和20-40分钟后展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点。⑦.取皮肤病血毒制剂7.2g，研细，加盐酸24ml与三氯甲烷2575ml，置水浴上加热回流0.5-1.5小时，滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇lml使溶解,作为供试品溶液；另取桔梗对照药材0.2g，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(3060。C)-乙酸乙酯-冰醋酸(1535:6~8:0.25~0.75)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8%香草醛乙醇溶液与硫酸溶液(7—10)的混合溶液(0.51.5:911)，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。11⑧.取皮肤病血毒制剂28.8g，研细，加乙酸乙酯5070ml，超声处理20-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取牛蒡子对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲垸-甲醇-水(30~50:9~11:0.5~1.5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明的含量测定方法是以下方法照高效液相色谱法测定；以十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(40-45:55~60，每1000ml溶液中加入十二烷基磺酸钠1.7g)为流动相，检测波长为265i2nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于6000;对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取皮肤病血毒制剂，研细，取细粉约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇-盐酸(100:1)25~75ml，称定重量，超声处理2040分钟，取出，放凉，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液用微孔滤膜(0.45pm)滤过，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10pl，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明提供了黄柏、大黄、赤芍、白芍、牡丹皮、连翘、白茅根、桔梗、牛蒡子的薄层色谱鉴别，选择了黄柏中有效成分盐酸小檗碱作为含量测定指标，建立了皮肤病血毒制剂的含量测定方法；经过多次重复试验，确认方法简便、重复性良好、结果准确可靠，可以作为皮肤病血毒制剂质量控制指标。本发明实验例中供试品所用制剂采用实施例1所述的皮肤病血毒片，也可用与实施例所述的皮肤病血毒片具有相同原料组成的其他制剂。实验例盐酸小檗碱的含量测定皮肤病血毒片为一大复方制剂，方中药材用量均较少，其成分的含量也较低。经试验研究，皮肤病血毒片中芍药苷的含量较高，但由于芍药苷在赤芍、白芍和牡丹皮中均含有，专属性不强，不宜选作含量测定的指标成分；皮肤病血毒片中盐酸小檗碱的含量亦较高，小檗碱成分为本方中黄柏所独有，专属性较强。黄柏其功在清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮。是本方中的主药，因此，可作为含量测定的指标成分。据文献资料报道，黄柏中小檗碱成分的含量差异较大，不同产地黄柏中的小檗碱含量范围为0.8~5.0%。为了更好地控制药材和成品药质量，我们采用高效液相色谱法对其中的小檗碱进行含量测定，并确定以盐酸小檗碱(C2()H17NCVHC1)计为皮肤病血毒片的含测指标成分。该方法具有灵敏度高，取样量少，测定结果准确，重现性好，回收率高等优点。以下为其方法学研究总结。1.仪器与试药仪器TSP型高效液相色谱仪，P2000型泵，UV1000型紫外检测器。试药乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。对照品盐酸小檗碱，由中国药品生物制品检定所购得。供试品皮肤病血毒片，规格每片重0.6g，由实施例l制得。2.色谱条件色谱柱KromasilC-18柱，100A，250x4.6mm;流动相乙腈一0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(42:58，每100ml溶液中加入十二垸基磺酸钠1.7g)。检测波长取盐酸小檗碱对照品溶液(Cz0.0105mg/ml)，用紫外分光光度计从200400nm进行连续波长扫描。结果表明，盐酸小檗碱对照品在230.0nm、265.0nm和350.0nm波长处有3个吸收峰，我们参照文献报导和分析认为，230.0nm处的光吸收虽强，但其波长较短，样品中在此波长下很多物质都有强吸收，干扰严重。在350.0nm波长处的吸收稍弱。故选用^265nm作为检测波长。在上述分析条件下，盐酸小檗碱峰与相邻杂质峰的分离度大于1.5以上，理论板数大于6000。3.对照品纯度检査配制一定浓度(C=0.0105mg/ml)的盐酸小檗碱对照品，注入液相色谱仪，依法测定，按面积归一化法计算，其含量为99.8%。4.提取条件选择及提取完全性考察(1)提取溶剂的选择盐酸小檗碱在热水中溶解，在水或乙醇中微溶，在甲醇中溶解，在氯仿中极微溶解，在乙醚中不溶。因此，我们设计了以甲醇、酸性甲醇回流，甲醇、酸性甲醇超声提取等方法进行对比试验。称取同一批样品，同法制成同体积的样品溶液，按上述色谱条件依法测定，试验结果请见表l表l提取溶剂的选择试验及结果试验号溶剂系统取样量(g)峰面积值含量(mg/g)1甲醇回流1.4903479753.80.33212酸性甲醇回流1.4803553317.50.3850、3甲醇超声1.4937489194.70.33504酸性甲醇超声1.4882566296.80.3931试验结果表明，酸性甲醇(盐酸-甲醇l:100)溶剂系统超声处理的测定结果较高，故选择酸性甲醇溶剂系统作为本方法的提取溶剂。选择超声处理作为本方法的提取方法。(2)提取完全性考察称取同一批样品约1.5g，精密加甲醇-盐酸(100:1)各50ml，分别超声处理IO、20、30、40分钟，按正文方法依法测定，试验结果请见表2表2提取完全性试验及结果试验号1234超声时间(分钟)10203040取样量(g)1.51101.50921.52011.4912峰面积值505264.2571576.9727276.0697066.4含量(mg/g)0.29120.33130.41770,4091试验结果表明，超声处理提取30分钟以后，其含量测定结果增加不明显，说明己基本提取完全，故选择酸性甲醇溶剂系统超声处理30分钟作为本方法的超声提取时间。5.方法学考察(1)线性关系及范围的考察精密吸取浓度为0.0105mg/ml的对照品溶液4、8、12、16、2(^1，分别注入液相色谱仪，依法测定。结果请见表3。以进样量为横坐标，峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，并进行直线回归，回归方程为Y=3598052.9X+8655.14，r=0.9996。试验结果表明，本方法进样量在0.0420.21(ag范围内呈良好的线性关系。表3线性关系考察结果试验号进样体积(W)进样量(Hg)峰面积积分值140.042152632.1280細313889.63120.126471240.04160.168614238.65200.21758048.7(2)精密度试验精密吸取浓度为C=0.0105mg/ml的对照品溶液10^1，连续重复进样5次，测定峰面积积分值，试验结果请见表4表4精密度试验及结果试验号峰面积积分值平均值RSD(%)1388705.02389751.73387712.2389325.70.294389861.15390598.5试验结果表明，盐酸小檗碱对照品重复进样5次，测得峰面积积分值的相对标准偏差RSD<2.0%，故认为本方法具有良好的精密度。(3)阴性空白对照试验取除去黄柏的模拟处方，制成不含黄柏的空白样品，按供试品溶液制法制成空白对照溶液。另取供试品溶液及对照品溶液(C=0.0105mg/ml)，按正文方法注入液相色谱仪，依法测定。试验结果表明，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的保留时间位置上，有一对应的单一色谱峰，而空白对照液色谱中，在该保留时间相应位置处无相对应的峰出现。说明阴性空白对其测定无干扰，其方法的专属性较好。(4)稳定性试验精密吸取供试品溶液及同一浓度(C=0.0105mg/ml)的盐酸小檗碱对照品溶液各10pl，分别按O、0.5、1、2、4、小时时间间隔，分别注入液相色谱仪中，依法进14行测定，试验结果请见表5__表5稳定性考察试验及结果^!j试验号放置时间(h)~~峰面积积分值平均值RSD(%)试验结果表明，对照品及样品中盐酸小檗碱经本方法测定，在4小时内相当稳定，其相对标准偏差分别为RSD-1.23。/。和RSD=1.78%。(5)重复性试验精密称取样品细粉约1.5g，重复5份，按正文含量测定方法依法分别进行测定，试验结果请见表6表6样品重现性试验及结果试验号取样量峰面积样品含量平均含量RSD11.6039449737.90.229821.5984448339.80.229931.6236456480.50.23040.22910.9741.6118452539.50.230151.6034440285.40.2251试验结果表明，5次重复测得该批样品的平均含量为0.2291mg/片，经统计其相对标准偏差为RSD=0.97%。结果说明本方法的重现性较好。(6)加样回收试验采用加样回收试验法。精密称取同一批(批号20020901)己知含量(0.229lmg/片，平均片重为0.6019g，折合0.3806mg/g)的皮肤病血毒片样品细粉约0.75g，分别精密加入盐酸小檗碱对照品约0.20.3mg，按正文含量测定方法依法进行测定，试验结果请见表7表7加样回收试验及结果试验取样量样品中含加入对照品测得总含回收率平均回收RSD号(g)量(mg)量(mg)量(mg)(%)率(％)(%)10.64590.24580.30.540998.3720,60540.23040.30.523597.700駕70.23170.30.522496.卯98.921.8540.87590.33340.20.530798.6550.78530.29890.20.5031102.1060.83040.31610.20.515799.80试验结果表明，本方法具有较高的回收率，其平均回收率为98.92%，相对标准偏差为1.85%。150359657.10.5357833.51351014.3354804.441.232355995.7_349521.6_"5435825.90.5438533.21435378.4433876.341.782420370.44439273.81234寸県n口又伊口口1234供试品6.样品中盐酸小檗碱含量测定<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>下述实施例均能达到上述实验例的效果。具体实施例方式实施例1:处方茜草16g、桃仁16g、荆芥穗(炭)16g、蛇蜕(酒炙)8g、赤芍16g、当归16g、白茅根32g、地肤子16g、苍耳子(炒)16g、地黄16g、连翘16g、金银花16g、苦地丁16g、土茯苓16g、黄柏8g、皂角刺16g、桔梗16g、益母草16g、苦杏仁(去皮炒)16g、防风8g、赤茯苓32g、白芍16g、蝉蜕8g、牛蒡子(炒)16g、牡丹皮16g、白鲜皮16g、熟地黄16g、大黄(酒炒)16g、忍冬藤16g、紫草8g、土贝母16g、川芎(酒炙)8g、甘草16g、白芷8g、天葵子16g、紫荆皮8g、鸡血藤16g、浮萍8g、红花8g制法以上三十九味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用单糖浆适量制粒，干燥，加滑石粉，混匀，压制成1000片，包衣，干燥，即得。鉴别(1)取本品12片，研细，加甲醇25ml，置水浴上加热回流20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材0.1g，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2ni，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(6:3:2:1.5:0.3)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本品8片，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸lml，置水浴上加热30分钟，取出，立即冷却，加乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材O.lg，加甲醇同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(石油醚3060。C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个橙色荧光斑点；置氨气中熏后，斑点变为红色。(3)取本品36片，研细，加甲醇30ml，超声处理.30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取茜草对照药材lg，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60~90°C)-丙酮(4:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4)取本品24片，研细，加甲醇30ml，置水浴上加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1(^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯(8:4:1)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于IO(TC加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的蓝紫色斑点。(5)取本品48片，研细，加乙醚50ml，水浴上低温回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚lml使溶解，作为供试品溶液。另取白茅根对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲垸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。(6)取本品36片，研细，加甲醇50ml，置水浴上加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，加活性炭lg，振摇约10分钟，滤过，滤液浓缩至约2ml作为供试品溶液。另取连翘苷对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1(^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己垸-三氯甲烷-甲苯-甲醇(5:3:5:3)为展开剂，预饱和30分钟后展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。(7)取本品12片，研细，加盐酸3ml与三氯甲垸50ml，置水浴上加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取桔梗对照药材0.2§，按供试品溶液制法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚G060'C)-乙酸乙酯-冰醋酸(25:7:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8%香草醛乙醇溶液与硫酸溶液(7—10)的混合溶液(1:10)，在105t加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(8)取本品48片，研细，加乙酸乙酯60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取牛蒡子对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(40:10:1)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检查应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录ID)。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(43:57，每1000ml溶液中加入十二烷基磺酸钠1.7g)为流动相，检测波长为265nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于6000。对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品10片，研细，取细粉约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇-盐酸(100:1)50ml，称定重量，超声处理30分钟，取出，放凉，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液用微孔滤膜(0.45nm)滤过，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各l(Hil，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含黄柏以盐酸小檗碱(C2QH17N04，HC1)计，不得少于0.2mg。实施例2:处方茜草16g、桃仁16g、荆芥穗(炭)16g、蛇蜕(酒炙)8g、赤芍16g、当归16g、白茅根32g、地肤子16g、苍耳子(炒)16g、地黄16g、连翘16g、金银花16g、苦地丁16g、土茯苓16g、黄柏8g、皂角刺16g、桔梗16g、益母草16g、苦杏仁(去皮炒)16g、防风8g、赤茯苓32g、白芍16g、蝉蜕8g、牛蒡子(炒)16g、牡丹皮16g、白鲜皮16g、熟地黄16g、大黄(酒炒)16g、忍冬藤16g、紫草8g、土贝母16g、川芎(酒炙)8g、甘草16g、白芷8g、天葵子16g、紫荆皮8g、鸡血藤16g、浮萍8g、红花8g制法以上三十九味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用单糖浆适量制粒，干燥，加滑石粉，混匀，装胶囊，即得。该药物的质量控制方法同实施例1。18权利要求1、皮肤病血毒制剂的质量控制方法，其中所述的制剂由中药材茜草、桃仁、荆芥穗(炭)、蛇蜕(酒炙)、赤芍、当归、白茅根、地肤子、苍耳子(炒)、地黄、连翘、金银花、苦地丁、土茯苓、黄柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防风、赤茯苓、白芍、蝉蜕、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鲜皮、熟地黄、大黄(酒炒)、忍冬藤、紫草、土贝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荆皮、鸡血藤、浮萍和红花组成，其特征在于该方法中鉴别方法是以下方法的一种或几种①.取皮肤病血毒制剂7.2g，研细，加甲醇15～35ml，置水浴上加热回流10～30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材0.1g，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(5～7∶2～4∶1～3∶1～2∶0.15～0.45)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；②.取皮肤病血毒制剂4.8g，研细，加甲醇5～25ml，超声处理10～30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5～15ml使溶解，加盐酸0.5～1.5ml，置水浴上加热20～40分钟，取出，立即冷却，加乙醚提取1～3次，每次5～15ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g，加甲醇同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(石油醚30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(14～16∶4～6∶0.5～1.5)的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个相同颜色荧光斑点；置氨气中熏后，斑点变为红色；③.取皮肤病血毒制剂21.6g，研细，加甲醇20～40ml，超声处理20～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取茜草对照药材1g，加甲醇10～30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-丙酮(3～5∶0.5～1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；④.取皮肤病血毒制剂14.4g，研细，加甲醇20～40ml，置水浴上加热回流20～40分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯(7～9∶3～5∶0.5～1.5)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，于100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；⑤.取皮肤病血毒制剂28.8g，研细，加乙醚25～75ml，水浴上低温回流0.5～1.5小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚1ml使溶解，作为供试品溶液；另取白茅根对照药材1g，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；⑥.取皮肤病血毒制剂21.6g，研细，加甲醇25～75ml，置水浴上加热回流0.5～1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇4～6ml使溶解，加活性炭0.5～1.5g，振摇5～15分钟，滤过，滤液浓缩至约2ml作为供试品溶液；另取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-甲苯-甲醇(4～6∶2～4∶4～6∶2～4)为展开剂，预饱和20～40分钟后展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点；⑦.取皮肤病血毒制剂7.2g，研细，加盐酸2～4ml与三氯甲烷25～75ml，置水浴上加热回流0.5～1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材0.2g，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯-冰醋酸(15～35∶6～8∶0.25～0.75)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8％香草醛乙醇溶液与硫酸溶液(7→10)的混合溶液(0.5～1.5∶9～11)，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；⑧.取皮肤病血毒制剂28.8g，研细，加乙酸乙酯50～70ml，超声处理20～40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取牛蒡子对照药材1g，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(30～50∶9～11∶0.5～1.5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2、如权利要求1所述的皮肤病血毒片的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法是以下方法的一种或几种①.取皮肤病血毒片12片，研细，加甲醇25ml，置水浴上加热回流20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材O.lg，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(6:3:2:1.5:0.3)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；②.取皮肤病血毒片8片，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸lml，置水浴上加热30分钟，取出，立即冷却，加乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材O.lg，加甲醇同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(石油醚30~60°0-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个相同颜色荧光斑点；置氨气中熏后，斑点变为红色；③.取皮肤病血毒片36片，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液u另取茜草对照药材lg，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60卯'C)-丙酮(4:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯G65nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；④.取皮肤病血毒片24片，研细，加甲醇30ml，置水浴上加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲垸一甲醇一乙酸乙酯(8:4:1)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于IO(TC加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(D.取皮肤病血毒片48片，研细，加乙醚50ml，水浴上低温回流l小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚lml使溶解，作为供试品溶液；另取白茅根对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲垸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；(g).取皮肤病血毒片36片，研细，加甲醇50ml，置水浴上加热回流l小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，加活性炭lg，振摇10分钟，滤过，滤液浓縮至约2ml作为供试品溶液；另取连翘苷对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己垸-三氯甲烷-甲苯-甲醇(5:3:5:3)为展开剂，预饱和30分钟后展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；⑦.取皮肤病血毒片12片，研细，加盐酸3ml与三氯甲烷50ml，置水浴上加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材0.2§，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚G060'C)-乙酸乙酯-冰醋酸(25:7:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8%香草醛乙醇溶液与硫酸溶液(7—10)的混合溶液(1:10)，在105r加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；⑧.取皮肤病血毒片48片，研细，加乙酸乙酯60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取牛蒡子对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5nl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(40:10:1)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。3、皮肤病血毒制剂的质量控制方法，其中所述的制剂由中药材茜草、桃仁、荆芥穗(炭)、蛇蜕(酒炙)、赤芍、当归、白茅根、地肤子、苍耳子(炒)、地黄、连翘、金银花、苦地丁、土茯苓、黄柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防风、赤茯苓、白芍、蝉蜕、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鲜皮、熟地黄、大黄(酒炒)、忍冬藤、紫草、土贝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荆皮、鸡血藤、浮萍和红花组成，其特征在于该方法中的含量测定方法是以下方法照高效液相色谱法测定；以十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(40~45:55~60，每1000ml溶液中加入十二烷基磺酸钠1.7g)为流动相，检测波长为265i2nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于6000;对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取皮肤病血毒制齐U，研细，取细粉约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇-盐酸(100:1)2575ml，称定重量，超声处理2040分钟，取出，放凉，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液用微孔滤膜(0.45nm)滤过，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10^1，注入液相色谱仪，测定，即得。4、如权利要求3所述的皮肤病血毒片的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法是以下方法照高效液相色谱法测定；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(43:57，每1000ml溶液中加入十二垸基磺酸钠1.7g)为流动相，检测波长为265nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于6000;对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取皮肤病血毒片10片，研细，取细粉约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇-盐酸(100:1)50ml，称定重量，超声处理30分钟，取出，放凉，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液用微孔滤膜(0.45nm)滤过，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10^1，注入液相色谱仪，测定，即得。5、皮肤病血毒制剂的质量控制方法，其中所述的制剂由中药材茜草、桃仁、荆芥穗(炭)、蛇蜕(酒炙)、赤芍、当归、白茅根、地肤子、苍耳子(炒)、地黄、连翘、金银花、苦地丁、土茯苓、黄柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防风、赤茯苓、白芍、蝉蜕、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鲜皮、熟地黄、大黄(酒炒)、忍冬藤、紫草、土贝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荆皮、鸡血藤、浮萍和红花组成，其特征在于该方法包括以下方法鉴别①.取皮肤病血毒制剂7.2g，研细，加甲醇1535ml，置水浴上加热回流10~30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材0.1g，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2nl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(57:2~4:1~3:1~2:0.15~0.45)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，置紫外光灯G65nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；②.取皮肤病血毒制剂4.8g，研细，加甲醇525ml，超声处理1030分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水515ml使溶解，加盐酸0.51.5ml，置水浴上加热20~40分钟，取出，立即冷却，加乙醚提取13次，每次515ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.1g,加甲醇同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(石油醚306(TC)-甲酸乙酯-甲酸(1416:4~6:0.5~1.5)的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365rnn)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个相同颜色荧光斑点；置氨气中熏后，斑点变为红色；③.取皮肤病血毒制剂21.6g，研细，加甲醇2040ml，超声处理2040分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取茜草对照药材lg，加甲醇1030ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60~90°C)-丙酮(3~5:0.5-1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯G65nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；④.取皮肤病血毒制剂14.4g，研细，加甲醇2040ml，置水浴上加热回流20~40分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10|il，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲垸一甲醇一乙酸乙酯(7~9:3~5:0.5-1.5)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于IO(TC加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；⑤.取皮肤病血毒制剂28.8g，研细，加乙醚2575ml，水浴上低温回流0.5-1.5小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚lml使溶解，作为供试品溶液；另取白茅根对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各l(Hil，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；⑥.取皮肤病血毒制剂21.6g，研细，加甲醇2575ml，置水浴上加热回流0.5~1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇46ml使溶解，加活性炭0.51.5g，振摇515分钟，滤过，滤液浓縮至约2ml作为供试品溶液；另取连翘苷对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己垸-三氯甲烷-甲苯-甲醇(4~6:24:46:2~4)为展开剂，预饱和2040分钟后展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点；⑦.取皮肤病血毒制剂7.2g，研细，加盐酸24ml与三氯甲烷2575ml，置水浴上加热回流0.5-1.5小时,滤过,滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材0.2g,按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5^1，分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(3060。C)-乙酸乙酯-冰醋酸(1535:6~8:0.25~0.75)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8%香草醛乙醇溶液与硫酸溶液(7—10)的混合溶液(0.51.5:911)，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；⑧.取皮肤病血毒制剂28.8g，研细，加乙酸乙酯5070ml，超声处理2040分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取牛蒡子对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(30-50:9~11:0.5~1.5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；喷以10%硫酸乙醇溶液，在105"C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法测定；以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(40~45:55~60，每1000ml溶液中加入十二垸基磺酸钠1.7g)为流动相，检测波长为265i2nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于6000;对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取皮肤病血毒制剂，研细，取细粉约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇-盐酸(100:1)25:75ml，称定重量，超声处理20:40分钟，取出，放凉，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液用微孔滤膜(0.45pni)滤过，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各l(Htl,注入液相色谱仪，测定，即得。6、如权利要求5所述的皮肤病血毒片的质量控制方法，其特征在于该方法中包括以下方法鉴别①.取皮肤病血毒片12片，研细，加甲醇25ml，置水浴上加热回流20分钟，滤过，滤液蒸千，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材0.1g，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(6:3:2:1.5:0.3)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；②.取皮肤病血毒片8片，研细，加甲醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸lml，置水浴上加热30分钟，取出，立即冷却，加乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材O.lg，加甲醇同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各化l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(石油醚30~60°0-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯.(365nm)..下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的五个相词颜色荧光斑点；置氨气中熏后，斑点变为红色；③.取皮肤病血毒片36片，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取茜草对照药材lg，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5nl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60~90°C)-丙酮(4:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；④.取皮肤病血毒片24片，研细，加甲醇30ml，置水浴上加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各l(Hd，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷一甲醇一乙酸乙酯(8:4:1)为展开剂，在氨蒸气饱和下展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于IO(TC加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；⑤.取皮肤病血毒片48片，研细，加乙醚50ml，水浴上低温回流l小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚lml使溶解，作为供试品溶液；另取白茅根对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各lOpl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105卩加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；⑥.取皮肤病血毒片36片，研细，加甲醇50ml，置水浴上加热回流l小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，加活性炭lg，振摇约10分钟，滤过，滤液浓縮至约2ml作为供试品溶液；另取连翘苷对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1(^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-甲苯-甲醇(5:3:5:3)为展开剂，预饱和30分钟后展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；.⑦.取皮肤病血毒片12片，研细，加盐酸3ml与三氯甲烷50ml，置水浴上加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材0.2g，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5jxl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚G060。C)-乙酸乙酉旨-冰醋酸(25:7:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8%香草醛乙醇溶液与硫酸溶液(7—10)的混合溶液(1:10)，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；⑧.取皮肤病血毒片48片，研细，加乙酸乙酯60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取牛蒡子对照药材lg，按供试品溶液制法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(40:10:1)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干；喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点;含量测定照高效液相色谱法测定；以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(43:57，每1000ml溶液中加入十二垸基磺酸钠1.7g)为流动相，检测波长为265nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于6000;对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含O.Olmg的溶液，即得；供试品溶液的制备取皮肤病血毒片10片，研细，取细粉约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇-盐酸(100:1)50ml，称定重量，超声处理30分钟，取出，放凉，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液用微孔滤膜(0.45pm)滤过，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10^1，注入液相色谱仪，测定，即得。全文摘要本发明公开了皮肤病血毒制剂的质量控制方法，其中所述的制剂由中药材茜草、桃仁、荆芥穗(炭)、蛇蜕(酒炙)、赤芍、当归、白茅根、地肤子、苍耳子(炒)、地黄、连翘、金银花、苦地丁、土茯苓、黄柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防风、赤茯苓、白芍、蝉蜕、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鲜皮、熟地黄、大黄(酒炒)、忍冬藤、紫草、土贝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荆皮、鸡血藤、浮萍和红花组成，该方法采用照薄层色谱法对黄柏、大黄、赤芍、白芍、牡丹皮、连翘、白茅根、桔梗、牛蒡子进行鉴别，并照高效液相色谱法以盐酸小檗碱为指标进行含量测定。该方法保证了皮肤病血毒制剂质量检测的准确性和先进性，为本制剂工业化大生产的质量起到控制作用，从而确保该制剂的临床疗效。文档编号A61K35/58GK101513467SQ20081001752公开日2009年8月26日申请日期2008年2月19日优先权日2008年2月19日发明者赵朝群申请人:赵朝群