专利名称：：牛黄消炎片的质量控制方法牛黄消炎片的质量控制方法
技术领域：
：本发明属于中药
技术领域：
，具体涉及牛黄消炎片的质量控制方法。
背景技术：
：牛黄消炎片是由牛黄、蟾酥等7味中药组成的中药复方制剂，具有清热解毒、消肿止痛的功效.临床上用于治疗咽喉肿痛、疔、痈、疥疮各证.具有服用剂量少，疗效肯定等优点。牛黄消炎片的处方为牛黄4.8g，珍珠母9.6g，蟾酥2.9g，青黛3.8g，天花粉9.6g，大黄9.6g，雄黄9.6g。牛黄消炎片具体制法为以上七味，雄黄、珍珠母分别水飞或粉碎成极细粉；大黄、天花粉粉碎成细粉；青黛研细；蟾酥加白酒研成糊状，与上述粉末及辅料适量混匀，制成颗粒，干燥；将牛黄研细，加入上述颗粒中，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。牛黄消炎片性状为糖衣片，除去糖衣后显黄棕色；味苦，有麻辣感。重金属检査取本品适量，除去糖衣，研细，精密称取1.0g，加乙醇洗涤2次，每次10毫升，离心分离，弃去乙醇液，沉淀加稀盐酸20毫升，不断搅拌30分钟，滤过，残渣用稀盐酸洗涤2次，每次10毫升，搅拌10分钟。洗液与滤掖合并，置500毫升量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取2毫升，加盐酸5毫升与水21毫升，照砷盐检査法(中国药典2005年版一部附录KF第一法)检查，所显砷斑颜色不得深于标准砷斑。其他应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录ID)。目前采用的质控方法为取本品，置显微镜下观察淀粉粒类球形、半圆形或盔帽形，直径27-48iim，脐点点状、短缝状、人字状或星状，层纹隐约可见。草酸钙簇晶大，直径60-140um。不规则片状或颗粒蓝色。不规则碎块金黄色或橙黄色，有光泽。本品的质量标准收载于《卫生部药品标准-中药成方制剂》第7册中。此标准只用显微鉴别方法控制其中药的内在质量，现行的牛黄消炎片的质量标准，在实验检验因加工等方面的原因，有时个别药材组织的显微特征无法看到，很难对其下定不符合规定判断，这达不到监督药品安全的目的。蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍或黑眶蟾蜍等的耳后腺及皮肤腺分泌的白色浆液，经加工干燥而成。
发明内容本发明的目的在于提供牛黄消炎片的质量控制方法。蟾酥的皮肤刺激性很强，本发明通过对蟾酥中中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的参数控制，对牛黄消炎片的安全性提供了有益的安全指标。具体地说，本发明所述质控方法采用以下方法取本品20片，除去糖衣，研细，加甲醇40毫升，超声处理30分钟，滤过，滤液浓縮至5毫升，作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加乙醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己垸一乙酸乙酯一醋酸一甲醇一甲酸(20:25:2:3:o.i)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明所述质控方法也可以采用以下方法取本品15片，除去糖衣，研细，加三氯甲烷50毫升，加热回流提取30分钟，滤过，滤液浓缩至l毫升，作为供试品溶液。另取靛蓝和靛玉红对照品，分别加三氯甲烷制成每l毫升各含l毫克的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各10微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲垸一丙酮(19:2)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明所述质控方法也可以采用以下方法取本品20片，除去糖衣，研细，加甲醇30毫升，加热回流提取30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水15毫升溶解，再加盐酸l毫升，置热水浴中加热30分钟，立即冷却，用乙醚提取两次，每次10毫升，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取大黄酚、大黄素对照品，加甲醇制成每l毫升中各含l毫克的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(30-6(TC)—甲酸乙酯一甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。上述质控方法优选采用以下方法照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；乙腈一O.5%磷酸二氢钾溶液(50:50)为流动相；检测波长为296nm。理论板数按华蟾酥毒基峰、脂蟾毒配基峰计算应分别不低于4000。对照品溶液的制备精密称取华蟾酥毒基、脂蟾毒配基对照品适量，加甲醇制成每l毫升含华蟾酥毒基、脂蟾毒配基各50微克的混合溶液，即得。供试品溶液的制备取本品10片，除去糖衣，研细，取细粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20毫升，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20微升，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含蟾酥以华蟾酥毒基(C26H3406)和脂蟾毒配基((:2晶204)总量计，应为0.10-0.30毫克，优选O.10-0.20毫克，更优选O.10-0.15毫克。具体实施方式随机挑选7个批号的牛黄消炎片(批号为20070712-1、20070814-1、20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)和3个特别生产的牛黄消炎片(批号为20080314-2、20080316-2、20080319-2)，其蟾酥投料比正常投料增加80%，其余处方和工艺不变。实验例l取本品20片，除去糖衣，研细，加甲醇40毫升，超声处理30分钟，滤过，滤液浓縮至5毫升，作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加乙醇制成每l毫升含l毫克的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷一乙酸乙酯一醋酸一甲醇一甲酸(20:25:2:3:o.i)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。采用本方法重复10个批次的牛黄消炎片测试，均显阳性。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>实验例2取本品15片，除去糖衣，研细，加三氯甲烷50毫升，加热回流提取30分钟，滤过，滤液浓縮至1毫升，作为供试品溶液。另取靛蓝和靛玉红对照品，分别加三氯甲烷制成每l毫升各含l毫克的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各10微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲垸一丙酮(19:2)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。采用本方法重复10个批次的牛黄消炎片测试，均显阳性。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>实验例3取本品20片，除去糖衣，研细，加甲醇30毫升，加热回流提取30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水15毫升溶解，再加盐酸l毫升，置热水浴中加热30分钟，立即冷却，用乙醚提取两次，每次10毫升，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙酸乙酯l毫升使溶解，作为供试品溶液。另取大黄酚、大黄素对照品，加甲醇制成每1毫升中各含1毫克的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(30-6(TC)—甲酸乙酯一甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。采用本方法重复10个批次的牛黄消炎片，均显阳性。<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>实验例4三氧化二砷含量取本品适量，除去糖衣，研细，精密称取1.0g，加乙醇洗涤2次，每次10毫升，离心分离，弃去乙醇液，沉淀加稀盐酸20毫升，不断搅拌30分钟，滤过，残渣用稀盐酸洗涤2次，每次10毫升，搅拌10分钟。洗液与滤掖合并，置500毫升量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取2毫升，加盐酸5毫升与水21毫升，照砷盐检査法(中国药典2005年版一部附录KF第一法)检査，所显砷斑颜色不得深于标准砷斑。其他应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录ID)。采用本方法重复10个批次的牛黄消炎片，均显阳性。批号检测结果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>实验例5照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈一O.5%磷酸二氢钾溶液(50:50)为流动相；检测波长为296nm。理论板数按华蟾酥毒基峰、脂蟾毒配基峰计算应分别不低于4000。对照品溶液的制备精密称取华蟾酥毒基、脂蟾毒配基对照品适量，加甲醇制成每l毫升含华蟾酥毒基、脂蟾毒配基各50微克的混合溶液，即得。供试品溶液的制备取本品10片，除去糖衣，研细，取细粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20毫升，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20微升，注入液相色谱仪，测定，即得。采用本方法重复IO个批次的牛黄消炎片，折算后每片牛黄消炎片中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基合计含量如下<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>实验例6由于牛黄消炎片还可外用，为了验证本发明的安全性。挑选5只家兔，雌性，体重(2.5-3.0公斤)剪去家兔腹部的毛，将家兔腹部等分为IO个等面积的区域，每个区域内正中取0.5X0.5厘米皮肤内，涂用10个批号片剂研磨后的粉末各0.3克，兔保持翻转状态60分钟。观察皮肤用药部位是否出现红斑、水肿等皮肤刺激反应。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由此可以看出，后3个扣:号的牛黄消炎片的外用安全性有隐患，而在前7个批号的片剂安全性更有保证。蟾酥的皮肤刺激性很强，本发明通过对蟾酥中中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的参数控制，对牛黄消炎片的安全性提供了有益的指标。权利要求1.一种牛黄消炎片的质量控制方法，其特征在于采用以下方法取本品20片，除去糖衣，研细，加甲醇40毫升，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5毫升，作为供试品溶液；另取胆酸对照品，加乙醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇-甲酸按照20∶25∶2∶3∶0.1配比的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2.—种牛黄消炎片的质量控制方法，其特征在于采用以下方法-取本品15片，除去糖衣，研细，加三氯甲垸50毫升，加热回流提取30分钟，滤过，滤液浓缩至1毫升，作为供试品溶液；另取靛蓝和靛玉红对照品，分别加三氯甲垸制成每1毫升各含1毫克的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各10微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲垸一丙酮按照19:2配比为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。3.—种牛黄消炎片的质量控制方法，其特征在于采用以下方法取本品20片，除去糖衣，研细，加甲醇30毫升，加热回流提取30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水15毫升溶解，再加盐酸l毫升，置热水浴中加热30分钟，立即冷却，用乙醚提取两次，每次10毫升，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙酸乙酯l毫升使溶解，作为供试品溶液；另取大黄酚、大黄素对照品，加甲醇制成每l毫升中各含l毫克的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚一甲酸乙酯一甲酸按照15:5:1配比的上层溶液为展开剂，展开，取出，凉干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。4.根据权利要求1-3任一所述的质量控制方法，其特征在于采用以下方法-照高效液相色谱法测定用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；乙腈一0.5%磷酸二氢钾溶液按照50:50配比为流动相；检测波长为296nm，理论板数按华蟾酥毒基峰、脂蟾毒配基峰计算应分别不低于4000;对照品溶液的制备精密称取华蟾酥毒基、脂蟾毒配基对照品适量，加甲醇制成每1毫升含华蟾酥毒基、脂蟾毒配基各50微克的混合溶液，即得；供试品溶液的制备取本品10片，除去糖衣，研细，取细粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20毫升，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20微升，注入液相色谱仪，测定，即得。5、根据权利要求4所述的质量控制方法，其特征在于所述片剂每片含蟾酥以华蟾酥毒基(C26H3406)和脂蟾毒配基((:24仏204)总量为0.10-0.30毫克。6、根据权利要求5所述的质量控制方法，其特征在于所述片剂每片含蟾酥以华蟾酥毒基(C26H3406)和脂蟾毒配基((:2凡204)总量为0.10-0.20毫克。7、根据权利要求6所述的质量控制方法，其特征在于所述片剂每片含蟾酥以华蟾酥毒基(C』m06)和脂蟾毒配基((:2晶204)总量为0.10-0.15毫克。全文摘要牛黄消炎片是由牛黄、珍珠母、蟾酥、青黛、天花粉、大黄、雄黄7味中药组成的中药复方制剂，具有清热解毒、消肿止痛的功效。临床上用于治疗咽喉肿痛、疔、痈、疥疮各证，具有服用剂量少，疗效肯定等优点，但是由于该制剂中动物药和毒性药较多，其临床使用上需要非常谨慎，现行的牛黄消炎片的质量标准尚不能完全达到监督药品安全的目的。本发明的目的在于从定性和定量方面提供更加完善的质控方法。文档编号A61P11/04GK101249148SQ200810089490公开日2008年8月27日申请日期2008年4月3日优先权日2008年4月3日发明者杨文龙申请人:杨文龙