专利名称：：用于静脉和脑内注射的两元溶液型制剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种药物的溶液型制剂，具体地说是替莫唑胺(Temozolomide)和溶解替莫唑胺的溶剂组成的供静脉和脑内局部应用的新制剂。技术背景替莫唑胺(Temozolomide)化学名3，4-二氢-3-甲基-4-氧代咪哇并[5，l-d]-l，2，3，5-四嗪-8-酰胺，由Schering-Plough公司开发。1999年FDA批准其口服胶囊制剂，用于治疗成人胶质细胞瘤和黑色素瘤，特别是多形性胶质母细胞瘤或间变性星形细胞瘤的一线治疗。据欧美的临床统计表明，颅内原发恶性肿瘤的发病率为21/10万，胶质瘤约占60%,其中高度恶性的胶质瘤占70%-85%，由于恶性的胶质细胞瘤分化不全，且深入神经细胞深处，手术不可能全部切除，复发率100%。替莫唑胺的出现是治疗恶性神经胶质瘤一大进展。目前替莫唑胺只有口服胶囊制剂，虽然口服制剂使用方便，但口服药物影响吸收的因素较多，文献报道替莫唑胺口服给药后吸收呈明显的个体差异，其生物利用度在70-9()%，这是由于在口服后7/29的病人出现恶心，胃肠遒功能紊乱所致。而且对于口服制剂在临床应用的治疗方案是一次150mg/m2，一日一次连续28天为一个疗程，治疗时间长，每日的恶心和呕吐的强烈反应极大的影响了患者的适应性。另外，口服制剂冷藏(2-10'C)保存，使用不方便。静脉给药不直接刺激胃肠道，而且可调节经脉给药的速度，控制血中药物浓度，改变给药周期，如每周一次，给四次，提高疗效和减少毒性。静脉给药在体内可以获得稳定的、最佳的药物浓度，不存在生物利用度的问题(在研究生物利用度时，静脉给药作为100%，非静脉途径给药存在吸收多少的问题)。替莫唑胺是治疗脑肿瘤和黑色素瘤的有效药物，脑瘤手术后的病人往往有神志不清，口服困难，因此不能及时服用药物从而拖延治疗时间，而静脉给药可及时治疗，提高病人治疗效果，在术后和术中的脑瘤病人可将静脉注射药物直接用到肿瘤部位，以提高治疗作用。黑色素瘤常引起肝转移，静脉注射剂可用于肝动脉给3药。替莫唑胺是药前药物，本身没有药物活性，因此静脉给药对血管没有刺激性，适合作静脉注射剂。但由于替莫哇胺特殊的理化性质，开发液体制剂十分具有难度。由于替莫唑胺在水溶液中极不稳定，按常规制剂技术不能制成静脉注射液。先灵公司对该品的后续开发也进行了不懈的努力，在usp6251886中公开了一种以微粒化的悬浮液形式给药的替莫唑胺，但是因为容易导致血管堵塞该制剂并不理想。Usp005018(CN1685371)公开了该品的一种冻干粉针剂，用于静脉注射。冷冻干燥一般是将药物各种赋型成份和溶剂，预先进行低温冻结成固体，然后在真空的条件下使水蒸汽直接升华出来，而物质本身剩留在冻结时的冰架中，因此真空干燥技术费工费时，成本高昂，且过多的赋型成份不能用于脑内的局部治疗。研究发现，按常规方法配制替莫唑胺注射液，即用注射用水，0.9%氯化钠配制替莫唑胺注射液，替莫唑胺极不稳定，在室温放置1小时含量下降达0.5-2%,5小时后即可下降达5%以上，而在4(TC半小时含量即可下降3(m以上。所以普通的溶剂配制的替莫唑胺，在输注期间，短短几小时内，药物含量下降，很难满足替莫唑胺质量稳定性的要求，因此需要研究使替莫唑胺稳定且无刺激的溶剂技术。
发明内容本发明是研制一种供静脉和脑内局部应用的注射液，研究内容是发明替莫唑胺的稳定剂。冻干粉制剂含多种赋型成份，仅可供静脉注射，不能脑内局部应用，且生产工艺复杂和成本高。本发明①采用二元制剂方法，即药物和溶剂分别装在两个不同制剂瓶中，使用时将溶剂注射药物中，溶解后使用，二元制剂方法可解决药物长期稳定性问题(2年以上)；本发明②是发现使替莫唑胺稳定的溶剂，解决了替莫唑胺在输液过程中不稳定的问题，且溶剂对人体无毒无刺激，可于脑内局部应用。本发明的替莫唑胺溶剂为对人体无毒无害酸性物质，如醋酸，乳酸，磷酸等。更为重要的是本发明酸性物质用于稳定替莫唑胺的用量极微，酸碱度符合制剂的要求，因此没有刺激性。具体研究方法和内容通过研究替莫唑胺溶液剂化学稳定性来完成的，化学稳定性是测定替莫唑胺的含量变化和有关物质的变化情况，HPLC测定替莫唑胺含量，流动相甲醇水=80:20，pH4，检测波长254nm。替莫唑胺和稳定剂均配置成分子浓度(mmol)，在一定量替莫唑胺中加入不同量的稳定剂，具体试验是替莫唑胺10ml，分别加入稳定剂40、20、10、5、2.5、L25ml，按分子浓度计算，稳定剂分别是替莫唑胺的4、2、1、0.5、0.25、0.125倍。为了比较本发明和冻干粉在脑内使用的可行性，在小鼠脑内注射观察药物溶剂毒性反应。_一、混合酸对替莫唑胺稳定性影响_表l稳定剂混合酸(柠檬酸+醋酸)对替莫唑胺稳定性的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>以上结果表明，混合酸(柠檬酸与醋酸或磷酸)最佳的稳定用量是替莫唑胺的0.25倍，在此浓度下，加盐酸的替莫唑胺溶液pH不符合药物制剂要求，加醋酸、磷酸酸的替莫唑胺溶液符合制剂要求，所以醋酸，磷酸酸优于盐酸。在室温条件下10天放置，混合酸比单酸作用好(表l、2)，且用量仅是替莫唑胺的O.125—0.5倍，pH符合要求，剌激性最小。口服和静脉给药对小鼠抑瘤作用，昆明种小鼠，雄性，S180肿瘤，0.2ml接种小鼠右侧前肢体下，第二天给药，静脉给药为300mg/kg，每三次一次，给药两次,总药量600mg/kg;口服给药为100mg/kg，每天一次，给药六次。总药量600mg/kg，结果表明，在总剂量相同的情况下，静脉给药作用明显好于口服给口服和静脉给药对小鼠抑瘤作用<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>脑内注射的毒性比较本发明制剂，混合酸柠檬酸+醋酸(1:1)作为稳定剂，用量为替莫唑胺的0.25倍，替莫哇胺配制浓度为50mg/ml。替莫唑胺粉针剂。按专利200510014962.3配制，先将冻干支撑剂溶解在注射用溶剂理，再加入替莫唑胺，用冷冻干燥技术制备出符合静脉注射要求的冻干粉针剂，配制浓度为50mg/ml。昆明种小鼠，分生理水组，本制剂组，粉针剂组，每组动物10只，脑内注射50微升药物，观察一周动物死亡数。结果表明，生理盐水组死亡2/10,本制剂组2/10，粉针组8/10。实施例:_<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>权利要求1.一种替莫唑胺二元溶液剂型，其组成的特征描述如下①替莫唑胺粉针和②溶解药物的溶剂。2.权利要求1中溶解药物溶剂为注射用水和酸性物质组成。3.权利要求2的酸性物质为柠檬酸与醋酸或磷酸的混合酸，总量与药物替莫唑胺的比例为0.125-0.5:1(按分子量计算)。4.权利要求3的酸性物质即混合酸的总量与药物替莫唑胺的比例优选0.25:l(按分子量计算)。5.权利要求2的混合酸中，柠檬酸所占的比例为0.125-0.25(按分子量计算)。全文摘要本发明公开了一种用于静脉和脑内注射的二元溶液型制剂。该制剂的主要活性成分为替莫唑胺，其组成为二元体系，包括替莫唑胺无菌粉和溶解药物的溶剂。利用该溶剂的组合配伍可获得使用型替莫唑胺溶液剂。本发明的特点是①二元制剂在室温稳定两年以上；②配制使用的药液在室温至少稳定10天，可以满足注射给药的使用要求；③溶剂无毒无刺激，配制药物可用于手术中脑内给药，立体定位瘤内注射局部化疗。文档编号A61K9/08GK101559037SQ20081010416公开日2009年10月21日申请日期2008年4月16日优先权日2008年4月16日发明者冯志媛,尹永祥,张秀国申请人:北京京卫燕康药物研究所有限公司