专利名称：含有山楂(叶)总黄酮和叶酸类化合物的复方药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含有山楂(叶)总黄酮和叶酸类化合物的复方药，尤指一种防治动脉粥 样硬化及其相关疾病的复方药，以及该复方药在制备药物中的用途。属于药学领域。
背景技术：
动脉硬化是动脉管壁增厚、变硬、管腔縮小等各种退行性和增生性病变。动脉粥样硬化 是动脉硬化的最常见类型，是心肌梗死和脑梗死的主要病因。动脉粥样硬化相关疾病包括冠 心病、心绞痛、心肌梗死、猝死、脑动脉供血不足引起的眩晕、头痛、昏厥、脑卒中、脑溢 血、肾动脉粥样硬化引起的顽固性高血压、肢体动脉供血不足。
本病的致病原因很多，如高血脂、高血压、吸烟、糖尿病、超重、饮食和遗传等， 一般 认为本病的发生与脂质代谢失常密切相关，其本质是动脉壁对从血浆侵入的脂质的反应。实 验中发现长期采用高脂饮食在造成动物高血脂的基础上能够形成动脉粥样硬化。
心血管疾病在我国居于死亡原因的首位，其中冠心病(CHD)的发病与死亡率呈上升趋势， 高脂血症、高血压、吸烟和糖尿病等若干危险因素在冠心病的发病中起重要作用。高胆固醇 (TC)以及高甘油三酯(TG)血症可引起和加速动脉粥样硬化，作为冠心病的主要危险因素， 早已引起广泛重视。流行病学研究证实，总胆固醇水平的升高和冠心病死亡的危险度成正相 关TC〈5.2mmol/L患者冠心病患病率为4.8%，而〉5. 2誦ol/L患者为10. 7%，较前者高一倍。 而越来越多的研究资料提示高甘油三酯血症和冠心病之间存在相关性，特别是循环中富含甘 油三酯的脂蛋白的量和质的异常可能是冠心病发展过程中的关键因子(陈红，等.高血压杂 志.2003， ll(s叩pl): 41-3)。我国成人血脂异常患病率为18.6%,估计全国血脂异常现患人 数为1. 6亿，不同类型的血脂异常患病率分别为高胆固醇血症2. 9%，高甘油三酯血症11. 9%， 低高密度脂蛋白血症7. 4%，另有3. 9%的人血胆固醇边缘升高(中国居民营养与健康现状调查， 2004)。因此，高脂血症的防治成为动脉粥样硬化防治的重要环节。
合理的饮食与生活调节对防治高脂血症极为重要，近年新发展的调脂药物已能部分地控 制饮食治疗。临床上常用的调节血脂的药物为HMG-CoA还原酶抑制剂(他汀类)、氯贝丁酯类 (贝特类)、胆酸螯合剂、烟酸类等。大量研究表明内皮受损和内皮功能减退是动脉粥样硬化 发病的始动因素，内皮细胞的损伤或功能变化在AS的发生、发展具有始动因子的作用。因此， 在利用调脂药降脂的同时，有必要对血管内皮功能进行保护，进一步有效的防治动脉粥样硬 化及冠心 3多年实践和研究表明，我国传统中医药在治疗高脂血症及其并发症方面具有独特的优势， 可从调节脂质代谢、抑制脂质过氧化、改善血液流变学、抑制平滑肌细胞增殖等方面，多途 径、多环节、多靶点对疾病产生影响。近年来通过对中药单味药防治高脂血症进行筛选，发 现许多中药有降血脂的作用。临床上可在辨证论治上，选择用药可对本病的治疗大有裨益。 如选用以降TC为主的山楂、何首乌、枸杞、杜仲、银杏叶、桑寄生、葛根、甘草等以降TG 为主的金银花、冬青子；对降TC、 TG均有效的绞股蓝、人参、女贞子、茵陈、虎杖、蒲黄、 决明子、东虫夏草、泽泻、花粉、黄精、绿豆等。
在单味药中，山楂最为常用。山楂始载于《本草衍义补遗》，为蔷薇科植物山里红 (Crataegus pinnatifida Bge. Var.major N. E. Br)或山楂(Crataegus pinnatifida Bge.) 的干燥成熟果实。其味酸甘，性微温，归脾、胃、肝经，祖国医学认为山植有消积化滞、补 脾健胃、活血化瘀等功用。而现代国内外研究资料证明山楂含的有机酸及黄酮类化合物，具 有更多方面的药理作用，尤其对于消化系统、脂质代谢和心血管系统的作用较为显著。实验 研究表明，山楂不同提取部位对不同动物造成的各种高血脂模型均有肯定的降脂作用。
动脉粥样硬化及其相关疾病等都是由多种危险因素造成的，单味药山楂及其提取物常常 难以达到理想的防治效果。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种在血管内皮保护方面和抗动脉粥样硬化方面优于山楂 (叶)总黄酮，而毒性不增加的复方药。
本发明的目的之二是提供上述复方药在制备预防、治疗、延缓动脉粥样硬化及其相关 疾病的药物中的应用。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种复方药，含有山楂(叶)总黄酮、叶酸类化合物及药学上可接受的载体。
所述山楂(叶)总黄酮为从山楂果实中提取的总黄酮或从山楂叶中提取的总黄酮，含量
为30 120mg，优选30 60mg。所述药用剂量的叶酸类化合物为叶酸、亚叶酸钙或左旋亚叶
酸钙，剂量为0.05 1.6mg，优选O. 1 1.0mg。
本发明提供该组合物中的山楂(叶)总黄酮包括从山楂果实中提取的总黄酮或从山楂叶
中提取的总黄酮，具体地包括金丝桃苷(hyperoside)，牡荆素鼠李糖苷(vitexin rhamnoside)(即
5， 7， 4'-三羟基黄酮-8-C-a-L-吡喃鼠李糖基-(1—2)-P-D-吡喃葡萄糖苷)，枸橼酸(citric acid)，
牡荆素(vitexin)，槲皮素(quercetin)，熊果酸(ursolic acid)等。
本发明所述的山楂(叶)总黄酮按《中药成方制剂》第九册"山楂精降脂片"项下的"山楂提取物质量标准"项下的工艺制备，即得。
含量测定按"山楂提取物质量标准"项下的含量测定方法，以干燥品计，含总黄酮以 无水槲皮素(Cl5Hl0O7)计算，不得少于8.0%。
本发明所述的山楂叶总黄酮按《中国药典》2005年版一部"益心酮片"项下的"山楂
叶提取物"项下的工艺制备，即得。
含量测定按"山楂叶提取物"项下的含量测定方法，以干燥品计，含总黄酮以无水芦 丁 (C27H30O16)计，不得少于80.0%;含金丝桃苷(C21H20Ol2)，不得少于0.40%。
本组合物制剂的制备方法包括以下步骤
A. 取山楂(叶)总黄酮、叶酸与适量药剂学上可接受的载体粉碎过筛，混合均匀；
B. 用适宜的溶剂制成软材，制粒、干燥，至含水量为3%左右；
c.取出，整粒，与适量润滑剂混合均匀，按常规方法压成或填充成制剂。
该复方药中药剂学可接受的载体，包括有助于将活性化合物配制成药用制剂的赋形剂和 辅药，如淀粉、微晶纤维素、无机盐类、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、葡萄糖、氯化钠、半胱 氨酸、柠檬酸和亚硫酸钠等的一种或几种物质的组合物，属于本领域常识。该复方药可制成 普通片、口腔速崩片、分散片、双层片、多层片、缓释片、单室控释片、双室控释片、微孔 型控释片、舌下含片、肠溶片、颗粒剂、丸剂、肠溶胶囊、延迟释放片、定时/位释放片、普 通胶囊、软胶囊、缓释胶囊、控释胶囊、缓释微球，含有微丸或小片的胶囊、含有微丸或小
片的pH依赖型胶囊、颗粒剂、口服液、膜剂或贴剂等剂型。
本发明制剂根据病人实际情况确定用法用量，可以每天服用2 3次，或者以缓释或控释 方式每天服用l次。
本发明的有益效果-
(1) 本发明提供的复方药对动脉粥样硬化家兔、高血脂症大鼠具有显著的协同降脂作用；
(2) 本发明提供的复方药对高脂词料词喂引起动脉粥样硬化家兔具有显著的协同抗动脉 粥样硬化作用；
(3) 本发明提供的复方药可以协同保护内皮细胞、抗脂质过氧化、延缓靶器官损害，降 低动脉粥样硬化斑块形成，全面控制心血管疾病危险因素。
(4)本发明提供的复方药无需煎煮、服用方便、无苦涩感，副作用小，费用低，患者依 从性好。
具体实施例方式
下面结合具体实施方式
对本发明做进一步说明，并非对本发明的限定，凡依照本发明内容进行的任何本领域的等同替换，均属于本发明的保护范围。 实施例1山楂提取物(总黄酮)60mg+叶酸0.4mg制剂
(1) 片剂取山楂提取物60g、叶酸0.4g、微晶纤维素40g、淀粉40g，混合均匀，加 乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，压制成1000片，包薄膜衣， 即得。本品含总黄酮以无水槲皮素(C15H1()07)计算，每片不得少于4.5mg。
(2) 胶囊剂取山楂提取物60g、叶酸0.4g、微晶纤维素40g、淀粉40g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，装入胶囊，制成1000粒，即得。本 品含总黄酮以无水槲皮素(C15Hlfl07)计算，每粒不得少于4.5mg。
(3) 颗粒剂取山楂提取物30g、叶酸0.2g、糊精300g、蔗糖粉640g，混合均匀，加 70%乙醇适量制成颗粒，制成1000g，包装，每袋装2g，即得。本品含总黄酮以无水槲皮素
(C15H1Q07)计算，每袋不得少于4.5mg。
(4) 软胶囊剂取山楂提取物60g、叶酸0.4g、大豆色拉油280g、蜂蜡3g，将大豆色 拉油加热至85'C左右，加入蜂蜡使熔化，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35'C时，将微粉 化的山楂提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气，旋 转模压法压制成1000粒，即得。本品含总黄酮以无水槲皮素(C15H1()07)计算，每粒不得少 于4.5mg。
实施例2山楂提取物(总黄酮)30mg+叶酸0.1mg制剂
(1) 片剂取山楂提取物30g、叶酸0.1g、微晶纤维素55g、淀粉55g，混合均匀，加 乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，压制成1000片，包薄膜衣， 即得。
(2) 胶囊剂取山楂提取物30g、叶酸0.1g、微晶纤维素55g、淀粉55g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，装入胶囊，制成1000粒，即得。
(3) 颗粒剂取山楂提取物15g、叶酸0.05g、糊精300g、蔗糖655g，混合均匀，加70% 乙醇适量制成颗粒，制成1000g，包装，每袋装2g，即得。
(4) 软胶囊剂取山楂提取物30g、叶酸O.lg、大豆色拉油210g、蜂蜡3g，将大豆色 拉油加热至85。C左右，加入蜂蜡使熔化，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35'C时，将微粉 化的山楂提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气，旋 转模压法压制成1000粒，即得。
实施例3山楂提取物(总黄酮)60mg+叶酸0.8mg制剂
6(1) 片剂取山楂提取物60g、叶酸0.8g、微晶纤维素55g、淀粉55g，混合均匀，加 乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，压制成1000片，包薄膜衣， 即得。
(2) 胶囊剂取山楂提取物60g、叶酸0.8g、微晶纤维素55g、淀粉55g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，装入胶囊，制成1000粒，即得。
(3) 颗粒剂取山楂提取物30g、叶酸0.4g、糊精300g、蔗糖655g，混合均匀，加70% 乙醇适量制成颗粒，制成1000g，包装，每袋装2g,即得。
(4) 软胶囊剂取山楂提取物60g、叶酸0.8g、大豆色拉油210g、蜂蜡3g，将大豆色 拉油加热至85-C左右，加入蜂蜡使熔化，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35t:时，将微粉 化的山楂提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气，旋 转模压法压制成1000粒，即得。
实施例4山楂提取物(总黄酮)30mg+叶酸0.4mg制剂
(1) 片剂取山楂提取物30g、叶酸0.4g、微晶纤维素70g、淀粉70g，混合均匀，加 乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，压制成1000片，包薄膜衣'， 即得。
(2) 胶囊剂取山楂提取物30g、叶酸0.4g、微晶纤维素70g、淀粉70g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，装入胶囊，制成1000粒，即得。
(3) 颗粒剂取山楂提取物15g、叶酸0.2g、糊精300g、蔗糖670g，混合均匀，加70% 乙醇适量制成颗粒，制成1000g，包装，每袋装2g，即得。
(4) 软胶囊剂取山楂提取物30g、叶酸0.4g、大豆色拉油240g、蜂蜡3g，将大豆色 拉油加热至85t:左右，加入蜂蜡使熔化，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35'C时，将微粉 化的山楂提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气，旋 转模压法压制成1000粒，即得。
实施例5山楂叶总黄酮30mg+叶酸0.8 mg制剂 '
(1) 片剂取山楂叶总黄酮30g、叶酸0.8g、微晶纤维素70g、淀粉40g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，压制成1000片，包薄膜 衣，即得。本品每片含金丝桃苷(C21H20O12)，不得少于0.12mg。
(2) 胶囊剂取山楂叶总黄酮30g、叶酸0.8g、微晶纤维素70g、淀粉40g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，装入胶囊，制成1000粒即得。本品每粒含金丝桃苷(C21H2C)012)，不得少于0.12mg。
(3) 颗粒剂取山楂叶总黄酮15g、叶酸0.4g、糊精400g、蔗糖555g，混合均匀，加 700/。乙醇适量制成颗粒，制成1000g，包装，每袋装2g，即得。本品每袋含金丝桃苷(C2!H2oOu)， 不得少于0.12mg。
(4) 软胶囊剂取山楂叶总黄酮30g、叶酸0.8g、大豆色拉油207g、蜂蜡3g，将大豆 色拉油加热至85'C左右，加入蜂蜡使熔化，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35"时，将微 粉化的山楂叶提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气， 旋转模压法压制成IOOO粒，即得；或山楂叶总黄酮30g、叶酸0.8g、液态聚乙二醇180g、 10g 聚乙二醇4000、甘油20g，将液态聚乙二醇加热至90'C左右，加入聚乙二醇4000使熔化， 待温度降至40'C时加入甘油，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35。C时，将微粉化的山楂叶 提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气，旋转模压法 压制成1000粒，即得。本品每粒含金丝桃苷(C21H20O12)，不得少于0.12mg。
实施例6山楂叶总黄酮60mg+叶酸0.4mg制剂
(1) 片剂取山楂叶总黄酮60g、叶酸0.4g、微晶纤维素70g、淀粉40g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，压制成1000片，包薄膜 衣，即得。
(2) 胶囊剂取山楂叶总黄酮60g、叶酸0.4g、微晶纤维素70g、淀粉40g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，装入胶囊，制成1000粒， 即得。
(3) 颗粒剂取山楂叶总黄酮30g、叶酸0.2g、糊精300g、蔗糖655g，混合均匀，加 70%乙醇适量制成颗粒，制成1000g，包装，每袋装2g，即得。
(4) 软胶囊剂取山楂叶总黄酮60g、叶酸0.4g、大豆色拉油207g、蜂蜡3g，将大豆 色拉油加热至85。C左右，加入蜂蜡使熔化，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35"时，将微 粉化的山楂叶提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气， 旋转模压法压制成1000粒，即得；或山楂叶总黄酮60g、叶酸0.4g、液态聚乙二醇180g、 10g 聚乙二醇4000、甘油20g，将液态聚乙二醇加热至9(TC左右，加入聚乙二醇4000使熔化， 待温度降至4(TC时加入甘油，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35。C时，将微粉化的山楂叶 提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气，旋转模压法 压制成1000粒，即得。
8实施例7 山楂叶总黄酮60mg+叶酸0.2mg制剂
(1) 片剂取山楂叶总黄酮60g、叶酸(K2g、微晶纤维素40g、淀粉40g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，压制成1000片，包薄膜 衣，即得。
(2) 胶囊剂取山楂叶总黄酮60g、叶酸0.2g、微晶纤维素40g、淀粉40g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，装入胶囊，制成1000粒， 即得。
(3) 颗粒剂取山楂叶总黄酮30g、叶酸0.1g、糊精300g、蔗糖640g，混合均匀，加 70%乙醇适量制成颗粒，制成1000g，包装，每袋装2g，即得。
(4) 软胶囊剂取山楂叶总黄酮60g、叶酸0.2g、大豆色拉油280g、蜂蜡4g，将大豆 色拉油加热至85。C左右，加入蜂蜡使熔化，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35'C时，将微 粉化的山楂叶提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气， 旋转模压法压制成1000粒，即得；或山楂叶总黄酮60g、叶酸0.8g、液态聚乙二醇240g、 20g 聚乙二醇4000、甘油20g，将液态聚乙二醇加热至9(TC左右，加入聚乙二醇4000使熔化， 待温度降至4(TC时加入甘油，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35t:时，将微粉化的山楂叶 提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气，旋转模压法 压制成1000粒，即得。
实施例8山楂叶总黄酮30mg+叶酸0.4mg制剂
(1) 片剂取山楂叶总黄酮30g、叶酸0.4g、微晶纤维素70g、淀粉70g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，压制成1000片，包薄膜 衣，即得。
(2) 胶囊剂取山楂叶总黄酮30g、叶酸0.4g、微晶纤维素70g、淀粉70g，混合均匀， 加乙醇适量制成颗粒，加入硬脂酸镁2g或微粉硅胶2g，混合均匀，装入胶囊，制成1000粒， 即得。
(3) 颗粒剂取山楂叶总黄酮15g、叶酸0.2g、糊精300g、蔗糖670g，混合均匀，加 70%乙醇适量制成颗粒，制成1000g，包装，每袋装2g，即得。
(4) 软胶囊剂取山楂叶总黄酮30g、叶酸0.4g、大豆色拉油237g、蜂蜡3g，将大豆 色拉油加热至85'C左右，加入蜂蜡使熔化，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35'C时，将微 粉化的山楂叶提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气， 旋转模压法压制成1000粒，即得；或山楂叶总黄酮30g、叶酸30g、液态聚乙二醇210g、 10g聚乙二醇4000、甘油20g，将液态聚乙二醇加热至9(TC左右，加入聚乙二醇4000使熔化， 待温度降至4(TC时加入甘油，搅拌使混合均匀；待温度降至25 35'C时，将微粉化的山楂叶 提取物、叶酸加至混合溶液中，搅拌均匀使降至室温，过胶体磨，放置使脱气，旋转模压法 压制成1000粒，即得。
实施例9制备山楂叶总黄酮叶酸缓释片
称取山楂叶总黄酮卯g、叶酸0.4g、聚乙烯基吡咯烷酮K9o35g和243g羟丙基甲基纤维素， 混合均匀，作为混合粉，用50%乙醇制粒，干燥，整粒后，加入硬脂酸镁10g和羟丙基甲基纤 维素42g,混合均匀，压制成1000片，即得。本品每片含金丝桃苷(C^H2()0u)，不得少于0.12mg。
实施例IO制备山楂总黄酮叶酸缓释片
称取山楂总黄酮180g、叶酸1.0g、聚乙烯基吡咯烷酮K9o45g和239g羟丙基甲基纤维素，混 合均匀，作为混合粉，用50%乙醇制粒，干燥，整粒后，加入硬脂酸镁13g和羟丙基甲基纤维 素43g，混合均匀，压制成1000片，即得。本品含总黄酮以无水槲皮素(C15H1()07)计算，每 片不得少于13.5mg。
实施例ll叶酸与山楂总黄酮合用对家兔动脉粥样硬化的影响
健康雄性新西兰大耳白兔，体重2 2.5kg，饲喂高脂饲料(含96%基础饲料、0.5%胆 固醇、3.5%猪油、0.05%胆盐)，另取正常家兔作为正常对照组，正常对照组家兔饲喂普通饲 料。4周后，采血测血清CHO、 TG、 HDL、 LDL。根据血脂水平(主要为CHO、 LDL)将家兔随 机分为正常对照组、模型组、叶酸组(0.02 mg/kg)、山楂总黄酮组(18mg/kg)、叶酸+山楂 总黄酮组(0.02 + 18 mg/kg)，每组12只。灌胃给药，每日2次，连续13周，第13周末禁 食12小时，水合氯醛麻醉，取血测定血清脂质，血清内皮素(ET)和一氧化氮(NO)水平； 采集主动脉样本，测定主动脉MDA、 S0D水平，用图像分析法检测主动脉脂质斑块面积，光镜 下观察主动脉壁的变化。
结果与正常组比较，模型组家兔血清TC、 TG、 LDL均显著增高，而HDL显著降低。 与模型组比较，叶酸组家兔血脂无明显变化，山楂总黄酮组家兔血清TC、 TG、 LDL降低， HDL升高；与山楂总黄酮组比较，叶酸+山楂总黄酮组家兔血清TC、 TG、 LDL进一步降低， 结果有显著性差异。表明两者合用可以进一步改善动脉硬化家兔血脂的异常改变。见表l。表1叶酸与山楂总黄酮合用对动脉硬化家兔血清脂质的影响(又:ts， n=9~ll)
组别剂量 (mg/kg)TC (mmol/L)TG (mmol/L)LDL (mmol/L)HDL (mmol/L)
正常组— 1.78±0. 390. 93 ±0. 290. 55 ±0. 341. 27±0. 34
模型组— 12. 91 ±3. 94"3. 52±1. 31"11. 21±3. 02"0. 81±0. 11"
叶酸0.02 11.25±3. 173. 26 ±0. 6310. 72±1. 590. 85±0. 13
总黄酮18 9.61±2.32"2.67±0. 47A8. 73±2. 12A0. 89 ±0. 26
叶酸+ 总黄酮0.02+18 7.22±2. 01A"2. 22土0. 38"《7. 04土1.44"※0. 94±0.15A
与正常组比较，"P〈0.01;与模型组比较，AP<0.05，▲▲P<0.01;
与总黄酮组比较，※P〈0.05
表2叶酸与山楂总黄酮对动脉硬化家兔主动脉MDA、 SOD、血清N02—'、 ET的影响(X土s， n=9~ll)组别剂量 (mg/kg)MDA (Mmol.g,SOD (kU.g-')N(V1含量 一ol丄—')ET含量 (Pg.ml')
正常组一1.42±0.3673.5±10.286.5±11.3365.6±56.4
模型组—3.16士0.77"49.2±7.6"46.3士10.8"552.7士57.4"
叶酸0. 022.37±0.59A52.4±6.859.4±12.1AA501.6±68.6
总黄酮182.29士0.52"57.8±7.4A56.9士10.7"487.5士49.8"
叶酸+ 总黄酮0. 02+181.81±0.37"#《68.4±10.4"fl《65.2土12.7"397.5士57.4""
与正常组比较，"P〈0.01;与模型组比较，Ap〈0.05，▲▲P<0. 01;
与叶酸组比较，SP〈0.05，与总黄酮组比较，《P<0.05
与正常组比较，模型组家兔主动脉MDA水平显著升高，SOD含量显著降低，山楂总黄酮 组、叶酸组家兔主动脉MDA水平明显降低，SOD含量升高，与模型组相比有显著性差异；叶 酸与山楂总黄酮合用，其效果优于叶酸或山楂总黄酮单用组，表明叶酸与山楂总黄酮合用可 以显著增强抗脂质过氧化作用。见表2。
与正常组比较，模型组家兔血清N02—'含量显著降低，血浆ET含量明显升高，叶酸组与 山楂总黄酮组均能使N02-'含量升高，ET含量降低；而叶酸与山楂总黄酮合用，其效果优于 叶酸或山楂总黄酮单用组，表明叶酸与山楂总黄酮合用可以进一步调节NO/ET平衡。结果见 表2。
正常组主动脉内壁光滑，未见脂质斑点、脂质条纹及粥样斑块。模型组主动脉弓至腹主 动脉处具有明显的粥样斑块。斑块几乎覆盖整条主动脉，尤其主动脉弓处斑块色黄且明显隆
11起。叶酸组与山楂总黄酮组主动脉弓处有粥样斑块，腹主动脉粥样斑块少，与模型组比较斑 块所占覆盖面积小且斑块较薄。叶酸+山楂总黄酮组的家兔主动脉壁斑块面积低于叶酸组和与 山楂总黄酮组。结果见表3。
光镜观察正常组内皮细胞扁平，内膜平坦，中层平滑肌细胞与弹力板近似平行相间排 列；模型组动脉壁可见大量泡沫细胞，呈镶嵌型排列，内皮细胞脱落，弹力板增厚并发生断 裂，中膜层平滑肌断裂，排列紊乱，各给药组均有不同程度以SMC为主的内膜增厚，弹力板 厚薄不均，有断裂分离现象，中膜浅层SMC轻度增生和排列紊乱。
模型组主动脉内膜增生，泡沫细胞数量增加，与模型组比较，各给药组均能降低中膜厚 度，而以叶酸+山楂总黄酮组明显，优于各单药组。见表3。
表3叶酸与山楂总黄酮对动脉硬化家兔主动脉动脉粥样硬化斑块面积、内膜厚度、中膜厚
度及内膜泡沫细胞数的影响0^s， n=9~ll)
组别剂量 (mg/kg)主动脉壁斑块面 积(％)内膜厚度(mm)中膜厚度(mm)泡沫细胞数/mm2
正常组_0. 0±0. 00, 15±0. 070. 31±0. 063.5±2. 1
模型组—52. 6 ±7. 7**0. 37 ±0. 05"0. 44 ±0. 06"25. 3 ±4. 7"
叶酸0. 0248. 5±8. 70. 32 ±0. 04A0. 40 ±0. 0721.4±3. 6A
总黄酮1844. 9 ±5. 5"0. 30±0. 05A0. 40±0. 0621.7±3. 4A
叶酸+ 总黄酮0.02+1839. 4±4. 2""※0. 25±0. 04"共※0. 34±0. 05森"※16.6±3.7"#i"
与正常组比较，"P〈0.01;与模型组比较，AP〈0.05， "P〈0.01;
与叶酸组比较，#P<0.05，与山楂总黄酮组比较，※P〈0.05
综上所述，叶酸与山楂总黄酮合用，可以协同调节血脂，保护内皮细胞、抗脂质过氧化、 延缓靶器官损害，降低动脉粥样硬化斑块形成，全面控制心血管疾病危险因素。
实施例9叶酸与山楂总黄酮合用对高血脂大鼠血脂的影响 雄性SD大鼠90只，适应性喂养7天后，词喂高脂饲料(配方为7.5%猪油，0.8%胆固 醇，0.2%胆酸钠，0.1%丙基硫氧嘧啶，基础饲料91.4%)，同时饮用2%糖水。另取15只为 正常对照组，喂饲普通饲料，于第4周末，禁食12小时后，取血测定大鼠血清TC、 TG，血 清TC、 TG均显著升高的大鼠为高脂血症大鼠。
将高脂血症大鼠随机分为模型组、山楂总黄酮组(18mg/kg)、叶酸组(0.4mg/kg)、山 楂总黄酮+叶酸组(18mg/kg+0.4mg/kg)，每组15只。继续饲喂高脂饲料，灌胃给药，正常对照组与模型组给予等量0.5%CMC_Na溶液，每日2次，连续8周，于第8周末测定血 清TC、 TG、 LDL、 HDL。
结果与正常组比较，模型组大鼠血清TC、 TG、 LDL水平显著升高，HDL水平降低。山 楂总黄酮组大鼠血清TC、 TG、 LDL明显降低，HDL水平升高，与模型组相比有显著性差异； 叶酸单用对大鼠血脂无明显影响，叶酸与山楂总黄酮合用，大鼠血清TC、 TG、 LDL进一步降 低，HDL水平进一步升高，且具有统计学差异。
表明饲喂高脂饲料可以成功复制大鼠高血脂模型，山楂总黄酮灌胃给药，显著改善高 脂血症大鼠血脂异常，叶酸与山楂总黄酮合用对血脂调节有显著的协同作用。
权利要求
1.一种复方药，含有山楂(叶)总黄酮、叶酸类化合物及药学上可接受的载体。
2. 根据权利要求1中所述的复方药，其特征在于所述山楂(叶)总黄酮为从山楂果实中提取的总黄酮或从山楂叶中提取的总黄酮，含量为30 120mg，优选30 60mg。
3. 根据权利要求1所述的复方药，其特征在于所述药用剂量的叶酸类化合物为叶酸、亚叶酸钙或左旋亚叶酸钙，剂量为0. 05 1. 6mg,优选0. 1 1. Omg。
4. 根据权利要求1所述的复方药，其特征在于其制药剂型为口服液、片剂、胶囊、软胶囊、颗粒剂、口含片、冲剂、微丸剂、丸剂、缓释微球剂、散剂、混悬剂、粉剂、滴剂或溶液剂。
5. 含有山楂(叶)总黄酮、叶酸类化合物及药学上可接受的载体的复方药在制备预防、治疗、延缓动脉粥样硬化及其相关疾病的药物中的用途。
6. 根据权利要求5所述的用途，其特征在于所述的动脉粥样硬化相关疾病包括冠心病、心绞痛、心肌梗死、猝死、脑动脉供血不足引起的眩晕、头痛、昏厥、脑卒中、脑溢血、肾动脉粥样硬化引起的顽固性高血压、肢体动脉供血不足。
7. 根据权利要求5所述的用途，其特征在于所述的山楂(叶)总黄酮含量为30 120mg，优选30~60mg。
8. 根据权利要求5所述的用途，其特征在于所述药用剂量的叶酸类化合物为叶酸、亚叶酸钙或左旋亚叶酸钙，剂量为0. 05 1.6mg，优选O. 1 1.0mg。
全文摘要
本发明公开了一种含有山楂(叶)总黄酮、叶酸类化合物及药剂学上可接受的载体的复方药物，以及该复方药物在制备用于防治动脉粥样硬化及其相关疾病药物中的用途。通过本发明的实施，提供给患者这种特定用途的复方药物不但疗效确切，而且还可以提高患者依从性，使患者服药方便，降低医疗费用，具有较好市场前景。
文档编号A61K9/00GK101590127SQ200810114219
公开日2009年12月2日 申请日期2008年5月30日 优先权日2008年5月30日
发明者吕红霞, 飞 孔, 聪 孙, 莉 李, 段玉光, 王媛媛, 王滨燕, 甘亚丽, 芳 程, 陈光亮 申请人:北京奥萨医药研究中心有限公司;安徽省现代中药研究中心