专利名称：：一种桑黄提取物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及药用真菌提取物，具体地说涉及一种桑黄提取物及其制备方法。背景资料桑黄是一种珍稀的药用真菌，20世纪前，桑黄主要来源于野生资源，由于野生资源稀少，导致子实体的售价很贵，每公斤在千元以上。近年来，随着食药用菌栽培技术的发展，桑黄已获得人工驯化的成功，使其后期开发成本降低。由于人工栽培桑黄的药效研究尚未深入，相关深加工技术和产品的开发研究不多，使得国内桑黄的种植未能进一步发展，研究基础少，且不深入，尤其对国内人工栽培的桑黄缺乏全面深入的研究。现代药理研究表明桑黄具有抗肿瘤、抗氧化、抗肝纤维化、增强免疫等作用，但以桑黄为原料开发的产品在国内还是空白。对人工培植的桑黄进行生物活性的研究，针对其主要的功能活性成份开发相应的产品，是对其进行深度利用的良好途径，也是填补我国珍稀药用真菌桑黄开发利用的空白。糖尿病是一种常见的内分泌代谢疾病，常伴随多种慢性并发症，造成多器官、多系统的广泛损伤，具有较高的致残率，是继心脑血管疾病、癌症之后危害人类身体健康的第三大疾病。我国糖尿病患者约4000万人，是糖尿病患者最多的国家之一，且发病率呈逐年上升趋势。口服降糖药物和胰岛素治疗虽然能有效地控制高血糖，但对慢性并发症的预防和治疗仍缺乏有效措施，连续服用口服降糖药物会出现药物失效、高胰岛素血症和胰岛素抵抗等问题
发明内容-本发明是基于一令人惊喜的发现，桑黄的提取物能够降低小鼠血糖浓度。本发明首先提供了一种桑黄提取物，该提取物是采用桑黄菌种进行椴木栽培的桑黄子实体进行提取加工得到，含有黄酮和多糖，其提取物干粉中黄酮的重量百分百含量为20—30%，多糖的重量百分百含量5—10%。本发明所用的桑黄菌种(户/ze〃/m^6aw7wm7Pilat)来自中国微生物菌种保藏中心上海食用菌分中心，编号为PhellinusbaumiiPilat3249。具体的提取方法为桑黄原料的选择选用i^e///mkmmwz7Pilat菌种进行椴木栽培的子实体。将桑黄子实体用75%-90%的乙醇浸泡，取上清液，浓縮干燥得到提取物l;上述剩余残渣挥发掉乙醇后，水浸泡，取上清液，浓縮干燥得到提取物2;将提取物1和提取物2混合，得到本发明的桑黄提取物。更具体一点的制备方法为将桑黄子实体于75%-90%室温下浸泡24_48小时，料液比1:10-20(重量公斤比体积升)，过滤后保留上清液，残渣再用80%乙醇浸泡24一48小时；合并两次浸提液，于4(TC下减压浓縮，待蒸去大部分乙醇后，再加水继续减压浓縮，浓缩罐温度50—55。C，压力小于0.1MPa，浓縮到比重1.050~1.080(50°C热测)，浓縮液冷冻干燥得桑黄提取物1;将乙醇浸泡提取后的桑黄子实体残渣风干，挥去乙醇，加水于90一10(TC提取2时，料液比l:5-15(重量公斤比体积升)；过滤收集提取液，残渣再加水提取一次，合并两次提取液，提取液泵入减压浓縮罐中，进行减压浓縮，浓縮罐温度65。C，压力小于0.1MPa，浓縮到比重1.0501.080(50。C热测)，浓縮液喷雾干燥，得提取物2;将提取物1和提取物2混合、混匀，得到桑黄提取物。本发明还提供了一种药学组合物，该药学组合物包含上述桑黄提取物以及药学上可接受的载体。该药学组合物可制备成口服制剂、注射制剂、直肠栓剂、膏霜剂等多种剂型，可以口服、肌肉注射、静脉注射、皮下注射、直肠给药等方式给药。动物试验证明，本发明的桑黄提取物可明显降低糖尿病小鼠体内的血糖浓度。因此，本发明的桑黄提取物可用于制备降血糖的药物，因为糖尿病的治疗主要依据的就是降血糖，因此，本发明的桑黄提取物可用于制备治疗糖尿病的药物。桑黄作为药用真菌，具有天然无毒副作用的特点，本发明通过先乙醇提、残渣继续水提的方法，充分利用了桑黄子实体全草，富含黄酮类和多糖类的有效成份，具有明显的降血糖效果。图1桑黄提取物制备方法工艺路线图下面通过具体实施例对本发明做一详细的叙述，但是本发明并不仅仅限于具体实施例。应理解为，凡与本发明技术特征相似、等效的技术特征均为本发明所涵盖的范围。具体实施例方式实施例1桑黄提取物的制备1.原料去杂质清洗将桑黄子实体去除杂质，用原料粗粉碎机进行粗粉碎成小粒状。2.提取物1的制备采用80%食用级酒精室温下浸泡24—48小时，料液比l:15(重量公斤比体积升)，过滤后保留上清液，残渣再用80%乙醇浸泡24—48小时；合并两次浸提液，于4(TC下减压浓縮，待蒸去大部分乙醇后，再加水继续减压浓縮，浓縮罐温度50—55。C，压力小于0.1MPa，浓縮到比重1.0501.0S0(50。C热测)，浓縮液冷冻干燥得桑黄提取物1。3.提取物2的制备将乙醇浸泡提取后的桑黄子实体残渣风干，挥去乙醇，加水于90—10(TC提取2小时，料液比l:10(重量公斤比体积升)；过滤收集提取液，残渣再加水提取一次，合并两次提取液，提取液泵入减压浓縮罐中，进行减压浓縮，浓縮罐温度65°C，压力小于O.lMPa，浓縮到比重1.0501.080(50。C热测)，浓縮液喷雾干燥，得提取物2。4.两提取物混合将提取物1和提取物2混合，在混合搅拌机中混匀，得到桑黄提取物，该提取物中黄酮的含量为26.7%，多糖的含量为7.2。/^。5.灭菌包装桑黄提取物用胶囊自动灌装机灌装，装瓶辐照灭菌，备用。实施例2桑黄提取物的降血糖作用1.实验材料1.1动物清洁级雄性ICR小鼠，18~22g，由扬州大学比较医学中心提供，合格证号SCXK(苏)2007-0001。1.2药物及试剂四氧嘧啶，美国sigma公司，Lot37H1381;葡萄糖测定试剂盒，上海荣盛生物技术有限公司，批号20080413;盐酸二甲双胍片，昆山双鹤药业有限责任公司，批号0604193;桑黄提取物l、桑黄提取物2、桑黄提取物，为按照实施例l方法制备得到的。1.3仪器BS110S电子天平，北京赛多利斯天平有限公司；KUBOTA-5800离心机，KUBOTACorporation;MultiskanSpectrumMSS1500-320,ThermoElectronCorporation。2.实验方法随机取出小鼠10只作为正常组，其余小鼠禁食14-16h后，尾静脉注射四氧嘧啶60mg/kg，注射后72小时眼眶后静脉丛取血，分离血清，预测血糖，选空腹血糖>12mmol/L的小鼠90只，随机分为9组，其中5组分别按10ml/kg体重经口给予桑黄提取物1200、400mg/kg，桑黄提取物2200、400mg/kg，桑黄提取物200、400mg/kg，二甲双胍200mg/kg，模型组经口给予等体积的水。每日一次，连续给药14天。其中，第7次给药前各组禁食4h，给药后继续禁食2h，然后小鼠眼眶后静脉丛取血，分离血清，测定血糖。末次给药前禁食4h，给药后继续禁食2h，小鼠摘眼球取血，分离血清，以试剂盒方法测定空腹血糖。3.统计实验数据以7土5D表示，并用t检验统计表示组间差异。4.试验结果与正常组相比，四氧嘧啶糖尿病小鼠的空腹血糖极明显升髙(尸O.Ol)。与模型组相比，在给药后第7天，桑黄提取物l和桑黄提取物在200mg/kg和400mg/kg剂量时均能极明显地降低糖尿病小鼠的空腹血糖CPO.01);桑黄提取物2在200mg/kg能明显地降低糖尿病小鼠的空腹血糖(尸<0.05)，在400mg/kg剂量时均能极明显地降低糖尿病小鼠的空腹血糖CPO.Ol)。给药后14天，桑黄提取物及提取物1和2在200mg/kg和400mg/kg剂量时都均能极明显地降低糖尿病小鼠的空腹血糖CPO.Ol)。表l桑黄提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>尸O.Ol与正常组比较；*尸<0.05，**P<0.01与模型组比较试验证明，桑黄提取物l、桑黄提取物2和桑黄提取物均具有明显的降血糖作用，二甲双胍为阳性对照药物，是一种治疗糖尿病的药物，能有效降低空腹血糖水平。本试验结果表明，桑黄提取物与二甲双胍均能降低糖尿病小鼠的空腹血糖，在统计学上同比无显著性差异。从结果来看，二甲双胍的降血糖效果更显著一些，但这是一种化学药物，长期服用对肝、肾功能会有影响，尤其肝、肾功能不全的患者就不宜服用。而桑黄提取物是一种天然制品，无毒副作用，对患者不会产生不良影响。权利要求1.一种桑黄提取物，含有黄酮和多糖，其中黄酮的重量百分百含量为20—30％，多糖的重量百分百含量为5—10％。2.—种制备权利要求1所述提取物的方法，该方法包括如下步骤将桑黄子实体用75%-90%的乙醇浸泡，取上清液，浓縮干燥得到提取物l;上述剩余残渣挥发掉乙醇后，水浸泡，取上清液，浓縮干燥得到提取物2;将提取物1和提取物2混合，得到桑黄提取物。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于该方法包括如下步骤将桑黄子实体于75%-90%室温下浸泡24—48小时，料液比1:10-20，过滤后保留上清液，残渣再用80%乙醇浸泡24—48小时；合并两次浸提液，于4(TC下减压浓縮，待蒸去大部分乙醇后，再加水继续减压浓縮，浓縮罐温度50—55°C，压力小于0.1MPa，浓縮到比重1.050~1.080，浓縮液冷冻干燥得桑黄提取物1;将乙醇浸泡提取后的桑黄子实体残渣风干，挥去乙醇，加水于90_10(TC提取2时，料液比l:5-15;过滤收集提取液，残渣再加水提取一次，合并两次提取液，提取液泵入减压浓縮罐中，进行减压浓縮，浓縮罐温度65t，压力小于0.1MPa，浓縮到比重1.050~1.080，浓縮液喷雾干燥，得提取物2;将提取物1和提取物2混合、混匀，得到桑黄提取物。4.一种桑黄提取物，是由下述方法制备得到的将桑黄子实体用75%-90%的乙醇浸泡，取上清液，浓縮干燥得到提取物l;上述剩余残渣挥发掉乙醇后，水浸泡，取上清液，浓縮干燥得到提取物2;将提取物1和提取物2混合，得到桑黄提取物。5.—种药学组合物，其特征在于包含权利要求1或3任一项所述桑黄提取物以及药学上可接受的载体。6.权利要求1或3任一项所述桑黄提取物用于制备治疗糖尿病药物的用途。全文摘要本发明公开了一种桑黄提取物，该提取物包含黄酮20-30％，多糖5-10％。该桑黄提取物具有明显的降血糖作用，可用于制备降血糖的药物。文档编号A61K36/06GK101474211SQ200810201798公开日2009年7月8日申请日期2008年10月27日优先权日2008年10月27日发明者刘艳芳,帅周,唐庆九,张劲松,焱杨,郝瑞霞申请人:上海市农业科学院