托哌酮的组合物的制作方法

专利名称：：托哌酮的组合物的制作方法
技术领域：
：本公开主要涉及具有极低4-MMPP0(2-甲基-1-(4-甲基苯基)-丙烯酮)水平的托哌酮，2-甲基-1-(4-甲基苯基)-3-(-哌淀基)-l-丙酮)，以及其生产方法和与之相关的组合物。本发明还涉及在限制受试者暴露于可容许量的4-画PPO的情况下用托哌酮治疗受试者的方法，以及其它特征。
背景技术：
：托哌酮是中枢起作用的肌肉松弛药，其已经被用于痉挛状态和肌肉痉挛的对症治疗(Martindale，TheExtraPharmacopoeia,第30版，第1211页)。托哌酮还用于治疗包括痛经、更年期疾病、破伤风和山黧豆中毒(neurolatyrism)在内的病症。托哌酮的化学结构如下所示从前述结构可以看出，托哌酮包含一个手性中心(如星号所示)。外消旋的托哌酮可以以盐酸盐的形式购得，并作为商品名例如Mydeton、Mydocalm,Midocalm⑧和Muscalm⑧销售。将托哌酮手性分离为其R(-)和S(+)对映异构体已有描述(参见例如，JP+53-40779)。已经表明托哌酮表现出在中枢和外周神经系统中的膜稳定作用(Ono，H.等人，J.Pharmacobio.Dy譲.1984，7，171-178)。托哌酮及其盐不仅用于改善与痉挛性瘫痪有关的不同症状，而且用于改善来源于例如颈推综合征、关节炎症、和背痛的疾病或病症的肌紧张。最近，还描迷了托哌酮用于治疗神经性疼痛和与各种神经系统病症有关的疼痛的用途(参见例如，美国专利申请2006/0004050)。
发明内容托哌酮可以通过许多不同的合成方法制备。本发明人i人识到，由于副反应和存在于起始原料中的化学杂质，或在合成托哌酮期间或在制剂的储存期间形成的化学杂质，生产托哌酮的现有方法具有产生的最终产物包含对用托哌酮治疗的患者来说可能是有毒的杂质(即使在极小量存在时)水平的相关缺点。在一个方面中，本公开满足了对提供具有可以忽略水平的杂质例如遗传毒性剂4-MMPP0的托哌酮的改进方法的需要。在另一个方面中，本公开提供通过给予托哌酮治疗受试者的方法，其中尤其是使对包含托哌酮的药物组合物中的遗传毒性剂例如4_MMPPO的暴露最小化。具体地，在至少一个方面中，本公开涉及包括小于约10ppm的2-曱基-l-(4-曱基苯基)-丙酮(4-MMPP0)的托哌酮及其组合物。在特定的实施方案中，本文中提供的托哌酮包括低于约7ppm的4-MMPP0。在又一个实施方案中，托哌酮包括低于约3ppm的4-MMPP0。在又一个实施方案中，本文中提供的托哌酮包括约1.5-10ppm的4-MMPP0。另外，本文中提供的是包括前述托哌酮和一种或多种药学可接受的赋形剂的药物组合物。在前述的一个实施方案中，所述一种或多种药学可接受的赋形剂包括一种酸。在又一个方面中，本文中提供的是制备纯化的托哌酮組合物的方法。所述方法包括以下步骤(i)提供包括最初水平大于10ppm的4-醒PPO和任选的另外的杂质的托哌酮，和(ii)纯化所述托哌酮，以形成4-匪PP0水平低于约10ppm的纯化的托p底酮。在前述方法的一个实施方案中，所述纯化步骤使4-画PP0的水平有效降低到其最初水平的最多五分之一。在又一个实施方案中，通过所述方法生产的纯化托哌酮具有低于约7ppm的4-画PP0水平，例如具有如上所述的纯度。所述方法还可以包括在提供步骤之前鉴定托哌酮中作为污染物的4-MMPP0的存在，和可选地确定托哌酮中的4-MMPPO的最初水平。在所述方法的另外的实施方案中，该纯化包括从单一溶剂重结晶或从溶剂组合重结晶，以提供重结晶的托哌酮。在所述方法的另一个实施方案中，该重结晶包括一个或多个重结晶步骤。在又一个实施方案中，重结晶在混合有机溶剂系统中进行。在特定的实施方案中，溶剂系统包括低级酮和低级醇。在又一个实施方案中，溶剂系统包括2-丁酮(甲基乙基酮)和异丙醇。在另外的实施方案中，重结晶包括在任选的加热情况下将托哌酮溶解在酸化溶剂中，以形成托哌酮的溶液，并允许从所述溶液形成托哌酮的晶体。在所述方法的又一个可供选择的实施方案中，该纯化包括千燥步骤。所述干燥步骤可以在大气压下或减压下进行。干燥可以在环境温度或在高温进行，例如30'C到约60'C。在又一个方面中，本文中提供的是制备托哌酮的合成方法的改进，其中所述改进包括加入催化量的酸，由此使4-腦PP0的形成最小化。在前述改进的特定实施方案中，所述酸是无水氯化氢气体。本文中还提供通过前述方法及其所有和任何实施方案生产的纯化的托哌酮及其组合物。在又一个方面中，本文中提供的是对有需要的受试者给予托哌酮的方法的改进，其中所述改进包括给予包含低于约10ppm的2-甲基-l-(4-甲基苯基)-丙酮(4-MMPP0)(例如约1.5到约10ppm的4-MMPP0)的托哌酮的组合物。在前述的特定实施方案中，作为给药的结果，与4-MMPP0的存在有关的组合物对受试者的遗传毒性作用被减至最小。在又一个方面中，本文中提供的是被装在适合的容器中的、与千燥剂组合的、包含低于约10ppm4-MMPP0的托哌酮。在另外的方面中，本文中提供的是检测包括托哌酮的组合物中的4-醒PP0水平的方法。所述方法包括以下步骤(a)提供包括托哌酮和任选的一种或多种赋形剂的组合物，(b)将组合物溶解在酸化的醇中以形成托哌酮的酸化溶液，由此防止形成另外的卜固PPO，(c)通过用有机溶剂提取，将所述托哌酮与一种或多种赋形剂(如果存在)分离，以提供托哌酮的酸化提取物，(d)向(b)或(c)的溶液加入内标物，以量化4-羅PP0的量，得到样品溶液，和(e)通过液相色谱/质谱分析法分析样品溶液中的4-MMPP0的量，其中用于所述液相色谱的至少一种洗脱剂是被酸化的，由此检测所述样品中的可能低于500ppm的4-MMPP0水平。在前述方法的一个实施方案中，所述酸化的醇是用盐酸酸化的。在特定的实施方案中，所述酸化的醇是盐酸甲醇。在检测方法的又一个实施方案中，(c)中的有机溶剂是醚。在又一个实施方案中，所述溶剂是二异丙醚。在又一个实施方案中，所述内标物是氘化的MMPPO。本发明的方法、组合物等的另外的实施方案可以从以下描述、附图、实施例和权利要求变得显而易见。从前述和然后的描述可以理解，本文中所述的每个和所有特征、以及两种或更多种的这种特征的每种或所有组合都被包括在本发明范围内，条件是在这种组合中所包括的特征不互相矛盾。另外，可以从本发明的任何实施方案具体地排除任何特征或特征的组合。本发明的另外的方面和优点在以下描述和权利要求中阐述，特别是在考虑实施例和附图的情况下。图1表示通过p-消除反应从托哌酮形成4-固PP0的所提出的化学机制。图2表示通过托哌酮的副产物y-幾基酮的|3-消除而形成4-MMPP0的所提出的化学机制。具体实施例方式以下更完全地描述本发明。然而，本发明可以体现为许多不同的形式，不应将本发明限制于本文中阐述的实施方案；相反，提供这些实施方案是为了全面和完全地理解本公开，并且向本领域4支术人员完全地传递本发明的范围。本文中引用的所有的出版物、专利和专利申请，无论是在上文还是在下文中，都被全文并入本文作为参考。定义需要注意的是，如本文中使用的，单数形式"一"、"一个(种)"、"该"、"所述"包括复数的对象，除非上下文明确地限定不是这样。在描述和主张本发明时，以下术语根据如下所述的定义使用。术语托哌酮以及对本文中其它化合物的描述是指包括其任何药学可接受的形式的化合物，在适当的情况下，包括本文中所述化合物的异构体例如非对映体和对映异构体、盐、溶剂合物和多晶型物、特定的结晶形态、以及外消旋混合物和纯的异构体。"药学可接受的赋形剂或载体"是指可以任选地被包括在本发明的组合物中且在给药时不对患者产生显著的不良毒理学作用的赋形剂。"药学可接受的盐"包括但不限于氨基酸盐、与无机酸制备的盐(例如，氯化物、硫酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、溴化物、和硝酸盐)、或从任何前述的相应无机酸形式制备的盐(例如，盐酸盐等)、或与有机酸制备的盐(例如，苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、乙基丁二酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、对曱苯磺酸盐、棕榈酸盐(palmoate)、水杨酸盐和硬脂酸盐)，以及十二烷基硫酸盐、葡庚糖酸盐和乳糖酸盐。同样地，包含药学可接受的阳离子的盐包括但不限于钠、钾、钙、铝、锂、和铵(包括被取代的铵)。术语"烷基，，是指烃链，典型地具有约1-20个原子。这种烃链优选但不一定是饱和的，并且可以是支链或直链的，但是典型地优选直链的。示例性的烷基包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、戊基、l-甲基丁基、l-乙基丙基、3-甲基戊基等。如本文中使用的，在涉及三个或更多个碳原子时，"烷基"包括环烷基。用于特定的官能团的"低级"是指具有1-6个碳原子的基团。例如，"低级烷基，，是指具有1-6个碳原子的烷基，并且可以是直链或支链的，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、l-乙基丙基、1，2-二丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。"可选的"或"任选地"是指然后描述的情况可能发生或可能不发生，使得该描述包括其中该情况发生和情况不发生的情况。"基本上不含"或"实质上不含"某一特征或实体是指接近完全或完全地不含该特征或实体。如本文中使用的，基本上不含4-MMPP0的托派酮制剂包含低于约10ppm的4-MMPPO。已经在"干燥条件"下储存的托哌酮组合物是已经在受控湿度条件(5-25%相对湿度)和约18-25'C的温度范围储存的组合物。托哌酮组合物可以是活性药物成分(API)、或包括托哌酮和一种或多种药学可接受的赋形剂的药物组合物(粉末等)、或加工的产品(例如，胶嚢、片剂等)。组合物包含在密封容器中，例如瓶子、泡罩、小袋、或其组合。組合物还可以在干燥剂(例如二氧化硅)的存在下储存，典型地被包封在适合于吸收水蒸汽的包装中。"无水的"是指基本上不含水的物质。术语"受试者"、"个体"或"患者"在本文中可互换使用，是指脊推动物，优选哺乳动物。哺乳动物包括但不限于人。本文中提供的托哌酮组合物的术语"药理学有效量"或"治疗有效量，，是指无毒性的但是足以提供期望的响应(例如改进与痉挛性麻痹有关的症状、或用于治疗也已经存在的神经性疼痛和与各种神经系统病症有关的疼痛)的组合物或药物的量。需要的确切量随受试者而不同，取决于物种、年龄、和受试者的一般条件、要治疗的病症的严重程度、受试者服用的另外的药物、给药方式等。任何单独的情况中的适当的"有效量，，可以由本领域技术人员基于本文中提供的信息使用常规的实验来确定。术语"约，，特别是涉及给予量时，是指包括加减5%的偏差。另外的定义可以在然后的部分中找到。概述如上所述，本公开满足了对其中4-MMPP0的水平相对于商购制剂中的4-MMPP0水平显著并优选一致地降低的托p底酮制剂或前述那些制剂的需要。在制备或获得和分析托哌酮组合物时，特别是通过设计用于检测例如托哌酮制剂中的低水平4-画PPO的极高灵敏度的试验时，发明人认识到，需要提供具有改进纯度的托哌酮制剂，特别是在遗传毒性剂4-MMPPO方面需要改进。结果，将本文中所述的制剂对受试者给药用于治疗对用托哌酮治疗有响应的病症，通过这种给药，与所述托哌酮中4-MMPPO的存在有关的遗传毒性作用f皮最小化。以下更详细地描迷本发明的这些和其它方面。方法的特征托腺酮和相关杂质托哌酮，也称为2-曱基-1-(4-曱基苯基)-3-(-哌淀基)-1-丙酮，具有以下所示的化学结构。托哌酮包含一个手性中心(如前述结构中的星号所示)。外消旋的托哌酮可作为盐酸盐购得，并作为商品名例如Mydeton、Mydocalm,Midocalm⑧和Muscalm⑧销售。本文中提及托哌酮时是指包括外消旋的托哌酮，其每种对映异构体、其任何比例的混合物、以及其药学可接受的盐、各种结晶形态、和水合物。除了商购得到之外，托哌酮可以通过本领域中的多种已知方法合成。参见例如，美国专利申请公布2006/0(Ml"l;Ditriech等人，(1999)J.LabeledCpd.Radiopharm，42:1125-1134;Jap.'Pat.No.0400528319920109;Jap.Pat.No.5403248019790309;Jap.Pat.No.5403627419790316;Jap.Pat.No.5403017819790306;Jap.Pat.No.5402757119790301;Kazuharu等人，(1994)Chem.Pharm.Builetin42(8)1676;Jap.Pat.No.20,390(1965);和Hung.Pat.No.144,997(1956),所述文献都被全文并入本文作为参考。托哌酮可以例如根据以下单独步骤合成图解来制备其中使用4-曱基苯丙酮作为起始原料。在上述的示例性反应中，1，2-二氧戊环既是反应物又是溶剂。使用1，2-二氧戊环代替曱醛以及在直接分离托哌酮粗产物之后的高产率使得单级反应特别有利，例如，尤其是因为在工业规模时的其成本效益。参见例如，US2006/0041141。在期望特定的对映异构体的情况中，例如，可以将R(-)和S(+)对映异构体的任一种或其二者进行手性分离，例如，如JP-A-53-40779中所述。手性分离也可以如Velmurugan等人，Ch醒atorgraphia，56(3-4)，Aug.2002，229-232中所述进行。Velmurugan描述了将托哌酮采用反相HPLC法分离为其每种对映异构体。托哌酮的组成取决于所采用的合成策略，可以包括以下杂质的任何一种或多种哌啶盐酸盐、2-曱基-l-(3-甲基苯基)-3-(l-哌啶基)-丙酮盐酸盐(3-托哌酮盐酸盐)、1-(4-甲基苯基)-丙酮(4-甲基苯丙酮)、2-甲基-1-(4-甲基苯基)-丙烯酮(4-画PP0)、和2-甲基-1-(2-曱基苯基)-3-(l-哌啶基)-丙酮盐酸盐(2-托哌酮盐酸盐)。美国专利申请US2006/0041141描述了用于在4-托哌酮的制备中显著降低异构体(2-托哝酮和3-托哌酮)含量的合成方法，以形成在这些异构体方面有优于现有制剂的显著改进的托哌酮最终纯度。然而，就本发明人所知，在此以前，尚未提供或者还不能以可靠的、一致的方式提供本文中所述的制剂，即，基本上不含4-MMPPO、和/或具有不形成降解剂4-MMPPO的稳定性制剂。以前也没有意识到制剂(例如本文中提供的那些)的重要性。本发明的制剂对于给药极其有利，鉴于与4-MMPPO有关的遗传毒性作用，在经历托哌酮治疗的受试者中轩MMPPO的体内暴露应保持在低于严格的水平。不束繂于理论，认为化合物4-MMPP0可能是通过图1中所示的P-消除反应机制形成的。取决于合成条件，4-醒PP0还可以通过从可能的副产物Y-羟基酮(由图2所示的醛醇缩合反应形成)的P-脱水来形成。4-醒PP0的结构提供如下。2-甲基-l-(4-甲基苯基)-丙烯酮(4-MMPP0)因此，卜醒PPO可以在托哌酮的合成过程中作为副产物形成，或者可以在托哌酮的储存过程中形成，可以在单独储存(即，以活性剂本身的形式，通常称为"API"或"活性药物成分，，)时形成或在作为药物制剂的一部分(即，与一种或多种药学可接受的赋形剂组合)储存时形成。另外，4-MMPP0可以在用于纯化API的重结晶操作的溶解或加热过程中形成。典型地，形成的任何这种4-腿PP0的大部分会保留在母液中，但是少量可以保持与重结晶的托哌酮结合。在收集重结晶的托哌酮之后，然后的干燥步骤也可能促进4-MMPP0的形成，特别是在高温时。分析在得到本文中提供的托哌酮制剂时，本发明人设计了优化的分析方法来检测极低水平的4-MMPPO，其中所述方法能够检测低于约0.05重量％(500ppm)的4-國PP0水平。优选地，所述方法能够检测低于约400ppm、甚至低于300ppm的水平。更优选地，所述方法能够检测低于约200、甚至100ppm的4-羅PPO水平。认为本文中提供的方法能够检测极低水平的4-MMPPO,例如，低于约50ppm，甚至低于25ppm，更优选低于约10ppm的4-MMPPO。在本文中提供的实施例中，可检测低于约9ppm、低于约8ppm、低于约7ppm、低于约6ppm、寸氐于约5ppm、低于约4ppm、〗氐于约3ppm、<氐于约2ppm、4氐于约1.5ppm、低于约1ppm的水平。认为本发明的方法能够检测低到至少0.5ppm的4-MMPP07JC平。所用的方法是基于液质联用(LC-MS)。本发明的方法克服了现有技术方法的不能检测低于500ppm水平的4-MMPPO的缺点。因为4-固PPO是遗传毒性剂，对显著低于500ppm的水平的检测是极其重要的，因为托哌酮的生产者必须不仅能够量化药物制剂中的可能的遗传毒性剂例如4-MMPPO的含量，而且还必须能够证明包含可忽略量的这种遗传毒性剂的组合物在给药时没有遗传毒性的危险。通常，所述方法涉及提供托哌酮的组合物。托哌酮可以是在合成反应过程中形成的粗品托哌酮、经过一个或多个纯化步骤的纯化托哌酮、得自商业来源或原料药制造商的托哌酮、或从药物制剂例片齐'J(例3口，Mydeton⑧、Mydocalm⑧、Midocalm⑧和Muscalm⑧)或其它递送形式得到的托哌酮。对于诸如片剂的药物制剂来说，典型地首先用适合的溶剂匀化样品，以破坏片剂制剂和提供制剂组分的均匀的溶液或混悬液，由此使得托哌酮(和任何相关的4-MMPP0)的提取更容易。用于匀化的适合的溶剂包括用约1%HC1气体或约1%无水三氟乙酸(TFA)酸化的无水异丙醇。将托哌酮溶解于适合的溶剂系统中，例如酸化的醇。示例性的溶剂包括曱醇、异丙醇、丁醇和其它低级醇。可用于酸化溶剂的酸包括尤其是例如盐酸、氢渙酸、柠檬酸、曱酸、乙酸、甲磺酸和三氟乙酸。本发明人认识到，在进行分析的各种尝试中，酸化的条件可用于防止另外的碱催化的4-腿PP0形成，并且在分析过程中使托哌酮稳定化，由此提供了样品中4-MMPP0含量的更准确反映。优选地，用于溶解/混悬样品的溶剂是无水的，因为少量水的存在也可以增加4-MMPP0的形成。一种优选的酸化醇溶液是盐酸曱醇。醇中的酸浓度典型地为约10mM到约100mM,并且该浓度对于稳定化托哌酮以免进一步降解为4-MMPP0是有效的。当托哌酮是药物制剂(例如片剂)的一部分时，例如可以通过用有机溶剂提取将托哌酮从制剂可能包含的任何粘结剂、填料、赋形剂等中提取出来。可以使用的溶剂优选是酸化的醇溶剂，例如如上所述的，但是也可以使用其它溶剂，例如醚或亲脂性的酯。可能适合的具体溶剂包括二氯甲烷、氯仿、乙腈、醋酸戊酯、和二p恶烷。在分析之前，典型地向样品添加内标物。在本发明的方法中，优选的内标物是氘化的4-MMPP0，使得该内标物可以容易地与样品中所含的4-MMPP0区别开来。当然，所用的内标物随所用的检测方法而变化。优选地，向待分析的溶液添加緩沖剂以维持酸性溶液。示例性的緩沖剂包括柠檬酸盐、磷酸盐和乙酸盐。优选地，溶液的pH低于5.5,更优选低于4。待分析的溶液的适合的16pH是5.5或以下，5或以下，4.5或以下，4或以下，3.5或以下，3或以下，2.5或以下，2或以下，1.5或以下，或者1.0或以下。然后分析样品的4-MMPP0含量。尽管可以使用许多分析技术进行分析，例如，核磁共振(NMR)、气相色语法(GC)、质i瞽分析法(MS)、及其组合(例如LC(液体色谱法)/MS、GC/MS、GC/负化学电离的MS)、GC/MS/MS、MS/MS/LIT(线性离子阱)、高效液相色镨法、HPLC/MS/MS、FT/IR(傅里叶转换红外)等，优选的方法是液相色镨/质i普分析法/质镨分析法(LC/MS/MS),特别优选HPLC/MS/MS。可以使用不同的方法来得到质i普，包括飞行时间(TOF)法、四极质谱、离子阱质镨、扇形磁场质谱和前述的组合。优选串联的四极质谱分析法(MS/MS)，是因为其具有高的信噪比(S/N)。在本文中(例如实施例l)描述的方法能够实现低于500ppm到低至约0.2ppm的4-MMPP0检测水平。对于使用HPLC的分析方法，用作洗脱剂的溶剂包括水、醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈)、及其组合。优选地，用作流动相的至少一种溶剂被酸化，以使分析期间的另外的4-MMPP0形成最小化。适合的酸包括甲酸、盐酸、磷酸、三氟乙酸等。HPLC柱可以得自许多商业供应商，侈iJJi口PerkinElmer、EMScience、Phenomenex等。侈'J:i口，可以4吏用例如由Shiseido、ShodexAgilent(ZORBAX)、和LUNA制备的柱作为固相支持体。可以使用正相柱或反相柱；优选的固相支持体包括硅胶。用于分离各组分和量化污染物如4-MMPP0的条件可以由本领域技术人员来决定。本文中的实施例1提供了用于分析包含托哌酮的制剂以确定4-MMPP0含量的示例性实验条件(表1和2)。本文中描述的分析方法可以量化以前的方法所不能检测的水平的4-固PP0。通过表3提供的数值可以看出，各个代表性的制剂(包括API和商购的药物制剂)中的4-丽PP0的数值为约15ppm到超过400ppm。商购的制剂Mydeton和Mydocalm⑥都具有超过100ppm的4-MMPPO水平。由于与4-MMPP0有关的遗传毒性副作用，本发明人认识到需要提供具有比表3制剂所检测到的那些显著更低水平的4-國PP0的制剂，即，提供具有低于约10ppm的制剂。纯化本发明人认识到，需要提供与以前制备的托哌酮相比在4-MMPP0方面纯度更高的托哌酮组合物，并优选以一致的方式来提供。在这方面，研究了各种方法来实现包含低于约10ppm4-MMPPO的托哌酮制剂。本文中所述的方法能够提供具有低于约10ppm水平的4-MMPP0的托膝酮。因此，本文中提供的托哌酮制剂包含低于约10ppm的4-醒PP0、低于约9ppm的4-MMPP0、低于约8ppm的4-醒PP0、低于约7ppm的4-MMPP0、低于约6ppm的4-MMPPO、低于约5ppm的4-MMPP0、低于约4ppra的4-MMPPO、低于约3ppm的4-MMPPO、低于约2ppm的4-MMPPO。在优选实施方案中，本文中提供的托哌酮包含约1.5ppm到约10ppm的4-薩PP0。重结晶-单级典型地，用于如本文中所述纯化的"不纯的"托哌酮组合物包含大于约10ppm的4-MMMPPO。尤其可用于除去痕量4-MMPPO的一个方法是重结晶。实施例2描述了用于纯化托哌酮的常规的重结晶方法。可以看出，将托哌酮溶解于有机溶剂混合物(通过加热至回流来实现)中、然后热过滤并将滤液冷却，从而形成结晶托哌酮。分析重结晶产物中的4-MMPP0含量，显示占托哌酮的约0.14重量。/。(H00ppm)，其在然后的重结晶批料中降低到约500ppm或稍微更低。然而，4-匪PP0的这个水平对于托哌酮的药物组合物是不适合的。然而，在与本文后面部分所述的用于使4-MMPPO的形成最小化或抑制其形成的一种或多种另外的方法组合时，单级重结晶可适用于提供具有本文中所述纯度的托哌酮。多级重结晶可供选择的重结晶方法的研究揭示了提供基本上不含4-MMPPO的纯化托哌酮的以下方法。在一个重结晶方法中，进行了单级重结晶。在某些情况中，可以通过单独的重结晶实现具有期望纯度的托哌酮。参见例如，实施例3。在另一个方法中，进行了多级式重结晶。例如，将包含显著量(即，大于约IOppm)的4-MMPP0的托哌酮经过多次重结晶，即，不止1次重结晶、优选2次或更多次重结晶，以提供基本上不含4-MMPP0的托哌酮。典型地，重结晶的次数选自2、3、4、5、和6。理想地，通过2、3或4个重结晶步骤实现期望的纯度。用于重结晶托哌酮的溶剂包括单独的溶剂以及混合溶剂系统。混合溶剂系统可以包含两种溶剂、三种溶剂、四种溶剂、五种溶剂或更多种溶剂的组合，优选包含2-4种不同的溶剂。这种溶剂可以任选地被酸化。使用经过酸化的溶剂对于抑制P消除反应可能是有效的，因为这种反应是碱催化的。用于重结晶托哌酮的溶剂包括酯例如乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸戊酯，醚优选低级烷基醚例如乙醚、曱基叔丁基醚(MTBE)，酮优选低级烷基酮例如2-丁酮(甲基乙基酮、或MEK)、曱基异丁酮(MIBK)、甲基丙基酮、丙酮等，和醇类。优选的是低级醇，例如甲醇、乙醇、异丙醇等。可以使用任何前述溶剂的混合物。一个优选的溶剂系统将低级酮和低级醇组合起来，例如，将甲基乙基酮与异丙醇组合。典型地，首先将托哌酮溶解于一种或多种重结晶溶剂中。在某些情况中，取决于所用的溶剂，可以使用加热来帮助托哌酮在溶剂系统中的溶解。优选地，使用其中托哌酮以约100mg/ml到约20Qrag/ml的程度溶解的溶剂系统。取决于所用溶剂的沸点，如果需要，可以将托哌酮的溶液加热到约80X:。可以使用搅动来帮助溶解。然后，如果经过加热，典型地使得到的溶液冷却到室温或低于室温。理想地，冷却是慢慢进行的，在数分钟或一个或多个小时、最多几个小时的时间内进行。在某些情况中，可以使用冰浴来进一步冷却托哌酮溶液。在晶体形成期间，溶液任选地可以搅拌。还可以加入晶种来诱导晶体形成。收集晶体，然后用适合的溶剂洗涤，例如，采用不溶解托哌酮或仅具有可忽略的托哌酮溶解度的溶剂洗涤。使用的溶剂之一是2-丁酮，优选冷的2-丁酮。然后将晶体干燥。优选的干燥条件在以下的标题为"干燥，，的部分中描述。干燥典型地在环境温度或在略升高的温度进行，例如为约30'C到约45"C，优选约30'C到约401C。然后典型地如上所述分析得到的经过纯化的托哌酮，以确定4-MMPP0含量。对于具有大于约10ppm的4-MMPP0的托p底酮组合物，如上所述进行反复的重结晶。参见实施例3。酸处理由于认识到4-匪PP0形成可以在酸的存在下得到抑制，优选的纯化方法包括用酸处理托哌酮。例如，经过重结晶的托哌酮可以用酸性溶液洗涤，例如，用包含约10y。(v/v)到约0.5%酸、优选约7。/。(v/v)到约P/。(v/v)酸的溶液洗涤。可以使用无机酸例如盐酸、氢溴酸、和硫酸，也可以使用有机酸例如曱酸、草酸、乙酸、柠檬酸、三氟乙酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸、琥珀酸等。酸性溶液可以是酸的水溶液，或者，可以是酸化的溶剂(例如酸化的醇)，只要酸化的溶液是不溶解或仅微溶托哌酮的即可。这种示例性溶剂系统之一是HC1/异丙醇。参见例如，实施例4。已经发现，用酸处理托哌酮(在合成期间或在合成后)对于显著降低托哌酮产品中的4-画PP0水平是有效的，以便得到基本上不含4-MMPP0的托哌酮。作为酸洗涤的替代方案，可以使用酸化的溶剂/溶剂系统进行如上所述的重结晶。示例性的使用酸化溶剂系统进行的托哌酮重结晶提供在实施例5和6中。可以使用单级重结晶或多次重结晶。优选地，可以向重结晶溶剂/溶剂系统中添加例如上述那些中的一种或多种酸。使用对于酸化溶液是有效的但不以任何显著的程度破坏活性剂(托派酮)的酸的量。优选地，向重结晶溶液加入基于总重量/体积百分数为约10%到约0.5%的酸、优选约5%到约1。/。(w/v)的酸。示例性的酸的量包括5、4、3、2、和l。/。的酸(w/v)。典型地，使用的溶剂系统包含约1。/。(w/v)的酸。在酸化条件下重结晶有助于防止4-MMPP0形成，并提供基本上不含4-MMPP0的纯化托哌酮。在某些情况中，在托哌酮经过酸洗涤或从酸化的溶剂重结晶时，可能优选使用干燥(即基本上不含水)的酸化溶剂。例如，可以将干燥的HC1气体鼓泡到其中溶剂是基本上无水的溶剂系统中，以提供无水的或接近无水的酸化溶剂系统。另外的酸包括柠檬酸、三氟乙酸、和琥珀酸。在某些研究中，本发明人观察到4-醒PP0水平升高可归因于水的存在，因此，优选采用无水的条件。千燥在用于提供基本上不含4-MMPP0的托哌酮的又一个方法中，将托哌酮(优选已经如前所述纯化的托哌酮)长时间干燥，从l小时到若千个小时。典型的干燥期可以为1小时到若干个小时，例如72小时以上。干燥可以在室温和室压下进行，并且可以在干燥剂例如五氧化二磷上进行。干燥可以在高温进行，例如在干燥烘箱中，优选约30。C到约40。C的温度。干燥也可以在减压下进行(任选地伴随如上所述的柔和加热)，例如，在低真空(例如，约100，OOO到约3，000帕斯卡)、中真空(约3，000到0.1帕斯卡)、或甚至在高真空(约0.1到约0.0001帕斯卡)下进行。干燥过程对于通过蒸发(挥发)从托哌酮选择性地除去4-MMPP0是有效的。由于托哌酮和4-MMPP0之间的挥发度差异，可以选择性地从组合物中除去4-MMPPPO。借助挥发除去4_MMPPO可以同样地使用真空烘箱、叶片干燥器、流化床式千燥机、急骤干燥器、盘架干燥器、喷雾干燥器、或任何其它类似的干燥技术进行，任选地在略升高的温度下，例如，约3(TC到约40'C下进行。通过前述的纯化方法，在某些情况中，取决于托哌酮所含的4-MMPPO的最初量，除去的4-醒PPO的量相对于其最初水平显著降低，即，有至少5倍的降低。例如，参考实施例3,可以看出，包含大于约500ppm的4-MMPPO最初量的托旅酮组合物经过纯化形成了包含约1.5ppm到约10ppm4-MMPPO的纯化托艰酮，相对于原始的組合物，4-MMPPO减少了约50倍(50x)至约300倍(300x)。因此，取决于4-MMPPO的最初量，本文中提供的纯化方法可以使得到的纯化组合物中的4-MMPPO的量有效降低至少约5倍(或5x)、或至少约10倍、或至少约20倍、或至少约30倍、或至少约50倍、或至少约IOO倍或更多。合成期间做为选择，不是如上所述通过在合成后纯化托旅酮以除去4-MMPP0，可以在某些经过修饰(改进)的反应条件下进行改进合成。这种条件包括使用酸化的和/或无水的反应条件。例如，如上所述的托哌酮合成可以在催化量的酸的存在下进行。适合于这种应用的酸包括HC1(优选气态的)、硫酸、和硝酸、甲酸、草酸、乙酸、柠檬酸等。可以通过使用干燥溶剂促进无水的条件，所述干燥溶剂例如为直接得自蒸馏并在干燥剂上保持的那些、或储存在分子筛等上的溶剂、和在惰性的干燥空气下储存的溶剂。可以通过在干燥的惰性气氛(例如氮气或氩气)下进行合成而进一步促进无水的反应条件。也就是说，可以通过本文中所述的或以前已知的任何途径合成托旅酮，不同之处在于，作为改进，在催化量的酸的存在下和/或在无水条件下形成托哌酮。托哌酮的储存实施例7提供了用于生产片剂药物制剂的药物批次中所含的4-MMPP0的量与在储存3个月到近4年的时间段之后片剂中所含的4-画PP0的量之间的对比。在所研究的几乎所有制剂中，观察到4-MMPP0的量的显著增加。尽管4-MMPP0的形成可以至少部分地归因于制备片剂的条件，但是还有可能是在药物制剂的保存期限内(即，在储存时)形成4-MMPP0。无论4-MMPPO形成的起因如何，用于对受试者给药的托旅酮的药物制剂应该理想地包含与实施例7相比显著更低水平的4-MMPP0，并且优选应该包含低于约10ppm水平的4-醒PPO。更优选地，托哌酮的药物制剂包含低于约9ppra、低于约8ppm、低于约7ppm、寸氐于约6ppm、低于约5ppm、〗氐于4ppm、寸氐于约3ppm、寸氐于约2ppm、以及低于约1.5ppm的4-MMPP0。优选地，本文中所述的托哌酮和托哌酮组合物在干燥条件22下储存。本文中使用的干燥条件是指约18-23。C的温度范围和5-25°/。的相对湿度。本发明的制剂可以是API制剂、除API之外包括一种或多种药学可接受的赋形剂的药物组合物、或包含在密封容器(例如瓶子、泡罩包装、小袋、或其组合)中的用于给药的药物制剂。组合物还可以在干燥剂(例如二氧化硅)的存在下储存，典型地被包封在适合吸收水蒸汽的包装中。优选地，本文中提供的托哌酮组合物包括酸加成盐形式的托哌酮。在优选实施方案中，本文中提供的托哌酮组合物还包括附加量的酸性添加剂或赋形剂，以建立比由酸加成盐形式的托哌酮所提供的更具酸性的环境。这种添加剂包括乙酸、琥珀酸、己二酸、丙酸、柠檬酸、甲苯磺酸、甲磺酸等。优选的酸是具有不止一个酸性质子的二元酸或多元酸(例如，二酸类、三酸类等)。优选地，用作托哌酮组合物的稳定剂的酸具有小于约3的pKa。优选所述酸是无水的。特别优选的酸包括柠檬酸和琥珀酸。可以将托哌酮合并在玻璃状基质内，玻璃形成物(glassformers)为本领域中公知的，并且可以有效防止托哌酮化学降解为4-MMPP0。理想地，在储存期间将托哌酮(与其制剂无关)与干燥剂合并，使得其对水分的暴露最小化。4-MMPP0的遗传毒性4-MMPPO被认为是遗传毒性的，也就是说，能够引起遗传突变，且可能有助于肿瘤的发展。遗传毒性通常认为是某些化学试剂的固有特性。基于化合物的化学结构，化合物可以具有充分的亲电性以与细胞大分子例如DM中的亲核位置结合。理想地，在遗传毒理学研究中进行评价时，本文中提供的托旅酮组合物显示没有潜在的遗传毒性，至少部分是由于其中所含4-MMPP0的水平极低。适于评价遗传毒性危险的遗传毒理学研究包括以下啮齿动物的体外试验在细菌3B中的基因突变试验、使用哺乳动物细胞进行的染色体损伤体外评价或小鼠体外淋巴瘤tk+/—试验，和使用啮齿动物造血细胞进行的染色体损伤体内试验。用于评价致癌性的可供选择的模式可以在用于产业S1B:"药物致癌性的检验"的ICH指南中找到。体内试验也可以用于进一步显示不具遗传毒性潜力，特别是在体外研究的结果可能暗示存在潜在的遗传毒性危险时。可以用于显示本文中提供的托哌酮组合物没有遗传毒性的体内试验包括如下的试验。例如，可以使用得自小鼠中的重复剂量毒性研究的外周血涂片来评价微核诱导。可以培养得自大鼠或猴子的重复剂量研究的外周血淋巴细胞来评价分裂中期展开的染色体损伤。另外，可以在可能的靶组织中评价DNA损伤(例如，使用Comet或碱性洗脱试验进行MA加合物或DNA链的破坏)。转基因大鼠或小鼠也可以用于评价可能的靶组织中的诱变性。还可以使用叙利亚仓鼠胚胎(SHE)转化试验。另外，可以在短期致癌性研究中使用转基因小鼠品系例如p53单一不足小鼠(p53haploinsufficientmouse)。在以药学可接受的剂量对受试者给药时，基于在上述三种体外研究的至少一种的阴性结果来显示本文中提供的制剂(涉及包括低于约10ppm4-MMPP0的托哌酮组合物)基本上没有遗传毒性副作用(或基因毒性)。优选地，在基因毒性方面，所述体外试验中的至少两种是阴性的，甚至更优选所述体外试验的所有三种都是阴性的。在上述体外研究中的一种或多种在没有基因毒性方面提供阳性或不足以确实的结果时，可以根据上述体内研究的一种或多种阴性结果来证明没有基因毒性。药物制剂组分除了包括托哌酮之外，本发明的制剂可以任选地包含一种或多种另外的组分。除托哌酮之外，本发明的組合物可以包括一种或多种药学可接受的赋形剂或载体。示例性的赋形剂包括但不限于聚乙二醇(PEG)、氩化蓖麻油(HCO)、聚氧乙烯蓖麻油(聚乙氧基化的蓖麻油)、碳水化合物、淀粉(例如，玉米淀粉)、无机盐、抗微生物剂、抗氧化剂、粘结剂/填料、表面活性剂、润滑剂(例如，硬脂酸钓或硬脂酸镁)、助流剂例如滑石粉、崩解剂、稀释剂、緩沖剂、酸、碱、薄膜包衣、及其组合物等。本发明的组合物可以包括一种或多种碳水化合物，例如糖、衍生化的糖例如糖醇、糖醛酸、酯化的糖、和/或糖聚合物。具体的碳水化合物赋形剂包括例如单糖，例如果糖、麦芽糖、半乳糖、葡萄糖、D-甘露糖、山梨糖等；二糖，例如乳糖、蔗糖、海藻糖、纤维二糖等；聚糖，例如棉子糖、松三糖、麦芽糖糊精、右旋糖酐、淀粉等；和糖醇，例如甘露醇、木糖醇、麦芽糖醇、拉克替醇、木糖醇、山梨醇(葡糖醇)、吡喃糖基山梨醇、肌醇等。在本发明的组合物中还适用的是基于马铃薯和玉米的淀粉，例如淀粉羟乙酸钠和可直接压缩的改性淀粉。另外的代表性赋形剂包括无机盐或緩冲剂例如柠檬酸、氯化钠、氯化钾、硫酸钠、硝酸钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、及其组合物。托p底酮组合物还可以包才舌抗孩吏生物剂，例如，用于防止或制止微生物生长。适合于本发明的抗微生物剂的非限制性实例包括苯扎氯铵、苄索氯铵、苄醇、西吡氯铵、三氯叔丁醇、苯酚、苯乙醇、硝酸苯汞、>5克柳汞、及其组合物。本文中提供的组合物还可以包含一种或多种抗氧化剂。抗氧化剂用于防止氧化，从而防止制备物中的托哌酮或其它组分变质。用于本发明的适合的抗氧化剂包括例如抗坏血酸棕榈酸酯、丁羟茴醚、丁羟曱苯、次磷酸、硫代甘油、没食子酸丙酯、亚硫酸氢钠、甲醛合次硫酸钠、焦亚硫酸钠、及其组合物。另外的赋形剂包括表面活性剂例如聚山梨酯，例如，吐温20和吐温80、和泊洛沙姆类例如F68和F88(二者都得自BASF,MountOlive，NewJersey)、山梨糖醇酐酯、脂质(例如，磷脂例如卵磷脂和其它磷脂酰胆碱、和磷脂酰乙醇胺)、脂肪酸和脂肪酸酯、甾体例如胆固醇、和螯合剂例如EDTA、锌和其它这类适合的阳离子。另外，如前所述，本发明的组合物可以任选地包括一种或多种酸。可以使用的酸的非限制性实例包括选自以下的酸盐酸、乙酸、磷酸、柠檬酸、琥珀酸、己二酸、丙酸、甲苯磺酸、甲磺酸、苹果酸、乳酸、甲酸、三氯乙酸、硝酸、高氯酸、磷酸、硫酸、富马酸、及其组合物。在优选实施方案中，本文中提供的组合物不含碱性组分。组合物中任何单独的赋形剂的含量根据赋形剂的作用、活性剂(即，托哌酮)的剂量要求、和组合物的特定需要而变化。典型地，任何单独的赋形剂的最佳量通过常规的实验来确定，例如通过制备包含不同量(从低到高)的赋形剂的组合物，研究稳定性和其它参数，然后确定实现最佳性能而没有显著的副作用的范围。然而，通常，赋形剂以约1重量％到约99重量％、优选约5重量％到约98重量％、更优选约15到约95重量％的量存在于組合物中。一般说来，存在于本发明的托哌酮组合物中的赋形剂的量选自以下至少约2重量％、5重量％、10重量％、15重量％、20重量％、25重量％、30重量％、35重量％、40重量％、45重量％、50重量％、55重量°/。、60重量％、65重量％、70重量％、75重量％、80重量％、85重量％、90重量%、甚至95重量％。用于给药的示例性制剂是目前上市的那些，例如，Mydeton⑧、Mydocalm,Mydocalm和Muscalm,以及类似的这种制剂。用于口服给药的制剂可以包含例如从约50到约750ing的托哌酮、优选约IOO到约500mg的托哌酮。例如，在某些情况中，用于口服给药的制剂可以包含以下任一含量的托哌酮100mg，150mg，200mg，250mg，300mg，350mg，400mg，450mg,或500mg的托艰酮。托哌酮可以作为持续释放制剂提供。参见例如，实施例9和国际专利公布W02005/094825。控释释放制剂或持续释放制剂典型地通过将托哌酮并入到栽体或媒介物中来制备，所述载体或媒介物可举出例如脂质体、不可吸收性、不渗透性聚合物例如乙烯-乙酸乙烯酯共聚物和Hytrel⑧共聚物、可膨胀的聚合物例如水凝胶、或可吸收性聚合物例如胶原蛋白、和某些聚酸或聚酯，例如用于制备可吸收性缝线的那些聚酸或聚酯。—种示例性的控释制剂包括阴离子型和阳离子型聚合物的混合物，例如EudragitRS、EudragitL和EudragitS。另夕卜，可以将托哌酮包封、吸附于颗粒栽体或与颗粒载体结合。颗粒载体的实例包括衍生自聚甲基丙烯酸甲酯聚合物的颗粒、以及衍生自聚(丙交酯)和聚(丙交酯-共聚-乙交酯)(称为PLG)的微粒。参见例如，Jeffery等人，Pharm.Res.(1993)10:362-368;和McGee等人，J.Microencap.(1996)。片剂或嚢片(胶囊形片剂)也可以用水不溶性的聚合物包衣，例如，Aquacoat和Eudragit。前述药用赋形剂以及其它赋形剂描述在"Remington:TheScience&PracticeofPharmacy"，第19版，Williams&Williams,(1995);"Physician'sDeskReference"，第52版，MedicalEconomics,Montvale，NJ(1998)'，Andkibbe,A.H.,HandbookofPharmaceuticalExcipients，第3版,AmericanPharmaceuticalAssociation,Washington,D.C.，2000中。药物制剂/递送形式本文中所述的托哌酮可以配制为适合于给药的任何形式。口服剂型包括片剂、锭剂、胶嚢、糖浆、口服混悬液、乳剂、颗粒、和丸剂。可供选择的制剂包括气雾剂、透皮贴剂、凝胶剂、霜剂、膏剂、栓剂、粉末、或可以重构的冻干物、以及液体制剂。对于液体药物组合物，考虑了溶液和混悬液。优选地，托哌酮以适合于口服给药的形式被提供。例如，可以通过压制或模制生产片剂，任选地使用一种或多种助剂或添加剂。例如通过在适合的压片机中压缩任选与粘结剂(例如聚维酮、明胶、羟丙甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如淀粉羟乙酸钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠)和/(例如粉末或颗粒)的活性成分来制备压制片。可以通过在适合的压片机中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉末化合物的混合物来制备模制片。片剂可以任选地包衣或刻痕，并可以使用例如不同比例的羟丙曱基纤维素配制为用于提供活性成分的緩慢释放或控释释放，以提供期望的释放模式。可以任选地将片剂包衣，例如包薄膜衣、糖衣、或肠溶衣，以提供在不同于胃的肠部的释放。用于片剂和胶嚢的工艺、设备、和委托生产商(tollmanufacturers)是本领域中公知的。本发明的组合物还可以制备为适合于兽医学应用的形式。给药给予托哌酮的治疗用制剂的方法包括但不限于口服、动脉内、鞘内、脊柱内、肌内、腹膜内、静脉内、鼻内、和吸入途径。优选的给药途径是肌内、静脉内和口服。在特别优选的实施方案中，将托哌酮口服给药。然而，托哌酮可以通过任何适合的途径给药，包括但不限于口服给药、直肠给药、经鼻给药、局部给药(包括透皮给药、气雾剂给药、经颊给药和舌下给药)、阴道给药、非肠道给药(包括皮下给药、肌内给药、静脉内给药和皮内给药)、鞘内给药和经肺给药。当然，优选的途径随病症和接受者的年龄、所治疗的特定病症、和所用药物的特定组合(如果有的话)而变化。本文中提供的是在使4-醒PP0的暴露最小化的条件下用托哌酮治疗受试者的方法。在某些实施方案中，通过给予包含低于10ppm、优选低于约7ppm量的4-MMPP0的本发明的托哌酮组合物使4-MMPP0的暴露最小化。这种组合物可以通过本文中描述的任何方法来制备。在优选实施方案中，用包含约10ppm到约1.5ppm的4-MMPP0的托哌酮组合物治疗受试者。治疗托哌酮是作用于中枢神经系统的中枢肌松药，主要用于治疗肌紧张和张力升高，以及用于某些肢端的循环问题。已经发现托哌酮可降低实验性张力亢进和去大脑僵直，以及抑制网状脊髓反射易化(reticulospinalreflexfacilitation)而不影响皮层功負巨。它还改进外周血流动(Toperin药品说明书)。托哌酮可用于治疗许多病症。例如，可以将托哌酮对患有以下病症的一种或多种的受试者给药肌肉痉挛、痉挛性综合征、肌痛、肌强直、痛经、更年期疾病、破伤风、山黧豆中毒(neurolatyrism)、骨关节炎或类风湿性关节炎(与非甾体抗炎药组合给药时)、风湿性疾病、纤维肌痛综合症、与职业和运动相关的应激、背痛、由神经学疾病引起的痉挛状态、多发性硬化、脊髓病、脑脊髓炎、中风、肌肉张力过强、肌肉痉挛、脊髓自动症、闭塞性血管疾病(例如，闭塞性动脉硬化、糖尿病性血管病变、闭塞性血栓性血管炎、雷诺病、弥漫性硬皮病)、由于对血管的神经支配受损引起的病症(手足发绀、间歇性血管神经性步行困难)、神经性疼痛，并且在单独的情况中用于血栓形成后的静脉循环病症和淋巴循环病症、糖尿病性神经病变、疱渗后神经痛、和脚溃疡(Myolax⑧药品+兌明书)。可以给予托哌酮的受试者包括儿童(3个月大到18岁)和成人(18岁以上)。剂量托哌酮的治疗量可以凭经验确定，并且随所治疗的具体病症、受试者等而变化。给药的实际剂量取决于受试者的年龄、体重、和一般状况、以及要治疗的病症的严重程度、保健专业人员的判断、和给药的特定剂型而变化。托哌酮的治疗有效量可以由本领域技术人员来确定，并且根据每个具体情况的需要来调节。通常，用于成年人的托哌酮的治疗有效量为约10-3000mg/天、优选25-2000mg/天、更优选约50-1800mg/天的总日剂量。用于成人的典型的剂量范围包括约150-1000mg/天、优选约150-约750mg/天的总日剂量，其可作为单独的剂量或作为多剂量给药。在某些实施方案中优选的是在一天的时间中分开的剂量，例如，推荐的总日剂量被分为五个剂量、或四个剂量、或三个剂量、或两个剂量。优选的剂量包括从约50mg到450mg的剂量，每天给予两次或每天三次。也就是说，剂量可以选自50mg/天、100mg/天、150mg/天、200mg/天、250mg/天、300mg/天、350mg/天、400mg/天、450mg/天、500mg/天或500mg以上/天。取决于剂量和要治疗的确切病症，给药可以是每天一次、两次、或三次，持续一天到若干天、若干周、若干月、甚至若干年，甚至可以持续患者终生。示例性的剂量方案持续至少约一天、一周、约l-4周、1-3个月、1-6个月、1-50周、1-12个月或更久的时间段。用于3个月到18岁年龄范围的儿童的剂量为约l-25mg/kg/天、优选约2-15mg/天，分为2-4个分开的剂量，优选3个剂量。用于儿童的示例性的推荐剂量范围包括5-10mg/kg/天和2-4mg/kg/天，分为2-3个分开的剂量。实际上，可以将本发明的任何给定组合物或活性剂的单位剂量以不同的给药方案给药，这取决于临床医师的判断、患者的需要等等。具体的给药是本领域技术人员已知的，并且可以使用常规方法通过实验来确定。另外，对受试者给药的托哌酮组合物的剂量可以限于防止受试者过度暴露于4-醒PP0。在优选实施方案中，对受试者给予的每个托哌酮剂量中的4-MMPP0低于45jLig，并且每天对受试者给予低于135jag的4-MMPP0。用托哌酮治疗受试者的持续时间还可以保持为相对短(2周或更短)，以便保持4-MMPPO水平在对于受试者的容许极限内。实施例以下的实施例举例说明了本发明的某些方面和优点，然而，本发明不以任何方式局限于如下所述的特定的实施方案。除非另有陈述，本发明的实践釆用药物制剂、分离、药理学等技术，基于本文中提供的指导，所述技术都属于本领域中的常见4支負b。参见例i口，HandbookofPharmaceuticalManufacturingFormulations,S.K.Niazi(ed.)，CRCPress,2004;Goodman&Gilman，ThePharmacologicalBasisofTherapeutics,第9版，Hardman，J".G.，Gilman，A.G.，Limbird,L.E.(eds.)，McGraw-HiU，NewYork,1995;BasicandClinicalPharmacology,第18版，Katzung，B.G.(ed.)，Appleton&Lange,Norwalk，CN，2001。在以下实施例中，已经进行了尝试来确保所用数字(例如，数量、温度等)的准确性但是应该会有一些实验误差和偏差。认为以下实施例中的每一个对于本领域技术人员实施本文中所述的一个或多个实施方案都是指导性的。实施例1分析商购托派酮组合物中的4-丽PP0含量托哌酮组合物得自不同的商业来源，通过HPLC-MS/MS分析其4-醒PP0含量。用于分析程序的所有样品都如下进行准备用于分析。将样品匀质化(如有必要，例如，片剂)并称重。对于每个托哌酮样品，将大约20mg的样品加入到20ml烧瓶中。向烧瓶加入20ml的含50mMHCl的MeOH,然后置于超声波浴中约5分钟。将烧瓶的内容物在涡旋器上混合约20秒。在托哌酮样品最初为片剂形式时，将溶液以4000rpm离心2分钟。然后将200jaL的样品转移到小的锥形离心瓶中。向小瓶添加20juL的包含氘化4-醒PP0的内标物溶液、200uL的pHl的緩冲液、和0.4mL的二异丙醚(DIPE)。然后通过用DVX-MOO多管涡旋器进行涡流(2100rpm)来提取样品约2分钟(循环每次5秒，每次间歇1秒)，再以4000rpra离心(相分离)2分钟。将150mL的含50mMHC1的MeOH/DMSO(l/2)加入到空的指定的锥形自动取样瓶中。在离心之后，将100口L的上清液转移到这些锥形自动取样瓶中。将该瓶折边，并用DVX-2500多管涡旋器涡旋(2100rpm)约1分钟。然后立即将7|aL所制备的样品注射到HPLC-MS/MS系统中，或者在分析之前将样品在低于-20。C的温度储存。用于分析4-MMPPO的色谱条件和质谱分析参数分别显示在以下的表1和2中。表1:分析4-MMPP0的色谱条件<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>表2:4-MMPP0的MS-检观'j<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>表3:市售的托哌酮制剂的4-MMPP0含量<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>丰A-Merck公司；B=Viatris公司(现在是MedaAB，Sweden的分部)；C=Mydeton;D=Mydocalm。由于发明人开发的分析用4-丽PP0试验及其对极低水平的检测的灵敏度，上表中的数据揭示了研究的每个样品中的显著量的4-MMPP0，并且无疑超过了本文中所述的纯化托哌酮制剂以及然后的实施例中所含的水平。最显著的是样品1、2、3、5和10、11、12，其各自包含令人惊讶的高水平的4-丽PP0，即，高于50ppm的4-MMPP0。由于4-隨PP0的遗传毒性，本发明人认识到对获得其中的4-MMPP0水平显著低于当前市售制剂(例如上述那些)的托哌酮制剂的迫切需要。在认识到现有的托哌酮制剂的缺点之后，发明人研究并且获得了各种方法来提供4-醒PP0水平显著低于现有技术制剂(例如上述的那些以及在美国专利申请2006/0041141中描述的那些)中所发现的水平的纯的托哌酮组合物。本文中提供的制剂的优点在于，由于其较低(即，极低)的4-MMPPO水平，与现有技术制剂(例如上述说明性样品所代表的那些)相比，与4-MMPPO相关的遗传毒性副作用显著减少。实施例2托哌酮的标准重结晶将在生产过程中鉴定为包含高于0.5重量°/。的卜MMPPO水平的托哌酮样品用作起始原料(称为'粗品，)。通过回流30分钟将粗品托哌酮溶解于2-丁酮(曱基乙基酮)和异丙醇的85:15(v/v)混合物中。将得到的溶液冷却到son,并将溶液趁热过滤。将经过过滤的溶液冷却到5'C，并搅拌另外的7小时。通过过滤分离沉淀出来的晶体，然后用甲基乙基酮洗涤。经过重结晶的物质在45-85'C真空干燥。基于HPLC-MS/MS分析，经过重结晶的托哌酮具有0.M重量％的4-MMPPO，在然后的生产批次中，检测的4-MMPPO低于0.05%(500ppm)，在0.05%附近，但是离期望的10ppm或更低水平还很远。这可能是由于起始原料中所含的托哌酮的量，该量大于可以在单独的重结晶中基本上除去的量，或者是由于经过重结晶的产品中残余的甲基乙基酮的存在，其在产品的加热千燥时促进卜醒PP0的形成，或者是上述两种原因的组合。得到的经过重结晶的托哌酮所具有的4-MMPP0水平被认为对于对受试者给药来说不能令人满意，是因为与4-MMPP0水平有关的相关遗传毒性副作用的可能性。实施例3托哌酮的多级重结晶重复上述实施例2使用的方法，不同之处在于进行多级(反复)重结晶。表4:在反复重结晶之后的4-MMPP0含量，使用未经酸化的溶剂。批号[4-MMPP0],ppm[4-MMPP0],ppm[4-MMPP0],ppm[4-MMPP0],ppm津且品托p底酮笫l次重结晶后第2次重结晶后第3次重结晶后1107/51.1干燥前/干燥后<6.68.3<6.627/<6.67.36,2—从表4的结果可以看出，从溶剂/溶剂系统(例如曱基乙基酮和异丙醇)进行的多次重结晶可以有效提供基本上不含4-固PP0的托哌酮。实施例4托哌酮重结晶，然后酸洗涤通过回流12小时将4-醒PP0含量大于0.05重量％的粗品托哌酮溶解于2-丁酮(MEK)和异丙醇的85:15混合物中。使温度降低到80。C并将溶液趁热过滤。将经过过滤的溶液冷却到5'C并在5'C搅拌7小时。通过过滤分离晶体沉淀物并用1%HCl/异丙醇混合物洗涤，然后在45-85。C真空干燥。基于在图l和2中所证明的对托哌酮的潜在副反应的认识，发明人实现了在没有碱的存在下使托哌酮或其相应的oc-羟基酮副产物P-消除以形成4-MMPP0的发生最小化的优势，以及在酸的存在下重结晶和/或洗涤产物的价值。基于HPLC-MS/MS分析，在经过重结晶的产物中检测到1.S-10ppm范围的卜匪PPO含量，揭示了优于现有的托哌酮商业制剂的令人惊讶的和显著的改进。实施例5使用酸化溶剂系统进行托哌酮的重结晶通过回流12小时并添加1%的HC1，将粗品托哌酮溶解于2-丁酮(MEK)和异丙醇的85:15(v/v)混合物中。使温度降低到80。C并将溶液趁热过滤。将溶液冷却到5X:并在5'C搅拌7小时。通过过滤分离晶体沉淀物并用异丙醇洗涤，然后在45-85°C、优选在较低的干燥温度进行真空千燥。在酸的存在下，托哌酮在重结晶过程中表现出增强的稳定性。在向重结晶混合物添加1。/。(v/v)浓HCl时，最终的经过重结晶的托哌酮产品中的4-MMPP0水平降低到低于6.6ppm。实施例6使用酸化溶剂系统进行托哌酮的多次重结晶通过回流12小时并添加1%的HCI,将粗品托哌酮(批号SPH-3047，批料1和2)溶解于2-丁酮(MEK)和异丙醇的85:15(v/v)混合物中。使温度降低到80'C并将溶液趁热过滤。将溶液冷却到5'C并在5'C搅拌7小时。通过过滤分离晶体沉淀物并用异丙醇洗涤，然后在45-85'C、优选在较低的干燥温度进行真空干燥。重复上述重结晶工艺4次。表5:使用酸化溶剂进行反复重结晶后的4-MMPP0含量。<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>尽管在酸化条件下的第一次重结晶表现出最显著的4-MMPP0的除去和托哌酮的纯化，但是额外进行的重结晶与进一步降低最终药物产品中的4-MMPP0含量来说也是有效的。实施例7相对于生产的片剂研究托艰酮药物批次的4-MMPP0水平表6:药物批次和片剂制剂中的4-醒PP0的MS-检测<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>*A=Merck;B=Viatris(现在是MedaAB，Sweden的分部)从制造商A和B获得托哌酮批料，最终生产的片剂制剂也得自该制造商。如实施例1中所述进行分析，测定两个药物批次和最终生产的制剂中的4-醒PPO水平。从上述表5的检测可以看出，在接近90%的情况中，与药物批次(API,生产的药物本身，即，不含添加剂、稳定剂、赋形剂等)相比，观察到最终的药物制剂(此时为片剂)中的4-MMPP0显著增加。作为本研究的结果，发明人认识到不仅在药物批次中存在4-MMPP0的问题，而且在最终的药物制剂中也存在该问题。基于上述表中的结果，4-丽PP0似乎是不仅在托哌酮(API)的制备期间、和/或其纯化过程中、和/或制剂过程中(例如，共混)形成，而且在最终药物制剂的保存期限(即，在储存时)过程中形成降解物(degradant)。因此，基于这些数据，发明人进一步认识到不仅在托哌酮的制备过程中、或者在经过纯化的药物产品本身中，而且在最终的药物制剂的保存期中使4-MMPP0的形成最小化的利益。实施例8速释嚢片制剂制备无水柠檬酸、2-丁酮和异丙醇的溶液。将包含低于IOppm4-MMPPO的托哌酮盐酸盐转移到其中已经放置有上述所制备的溶液的制粒机中。将混合物匀化，然后在千燥器中在60"C干燥，更优选在40。C干燥。形成的颗粒通过1.8mm筛网过筛。加入二氧化硅和滑石粉并同样地混合。然后，将混合物进一步与硬脂酸镁混合。生产直径8mm和重量155.8-172.2g的片剂。在包衣罐中在55-60。C的温度下将加工的颗粒用羟丙曱纤维素/羟丙曱纤维素邻苯二曱酸酯在乙醇/水中的混悬液、染料和添加剂包衣。然后将经过包衣的片剂在室温下千燥。实施例9控释制剂在混合器中，在添加无水柠檬酸的情况下将如本文中所述的包含低于10ppm4-MMPP0的托哌酮以盐酸盐的形式在Eudragit(尤特奇)RS的丁酮溶液中造粒。然后，均匀地掺入EudragitS和EudragitL，将混合物干燥和过筛。向过筛的颗粒中加入压片助剂，并将颗粒压片。压成直径8mm和重量190mg的片剂。然后将片剂用膜材料包衣(薄膜包衣)，所述膜材料包括溶解于丁醇中的EudragUL、染料、和各种助剂。<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>权利要求1.托哌酮，包括低于约10ppm的2-甲基-1-(4-甲基苯基)-丙酮(4-MMPPO)。2.权利要求1的托哌酮，包括低于约7ppm的4-MMPP0。3.4又利要求1或2的托p底酮，包括低于约3ppm的4-MMPP0。4.药物组合物，包括权利要求1-3中任一项的托哌酮和一种或多种药学可接受的赋形剂。5.制备托哌酮的纯化组合物的方法，所述方法包括(i)提供包括大于10ppm的4-MMPP0最初水平和任选另外的杂质的托p底酮，和(ii)纯化所述托p底酮，以形成4-MMPP0水平低于约10ppm的纯化托旅酮。6.权利要求5的方法，其中所述纯化有效地使4-固PP0的水平降低至其最初水平的最多五分之一。7.权利要求5或6的方法，其中所述的纯化托哌酮具有低于约7ppm的4-固PP0水平。8.权利要求5的方法，还包括在所述提供步骤之前鉴定所述托哌酮中作为污染物的4一MMPP0的存在。9.权利要求9的方法，除了所述鉴定之外，还包括确定所述托哌酮中的4-画PP0的最初水平。10.权利要求5-9中任一项的方法，其中所述纯化包括从单一溶剂或溶剂组合进行重结晶。11.权利要求10的方法，其中所述重结晶包括一个或多个重结晶步骤。12.权利要求11的方法，其中所述重结晶在混合有机溶剂系统中进行。13.权利要求12的方法，其中所迷溶剂系统包括低级酮和低级醇。14.权利要求13的方法，其中所述溶剂系统包括曱基乙基酮和异丙醇。15.权利要求10-14中任一项的方法，其中所迷方法还包括收集从所述重结晶中产生的纯化托哌酮。16.权利要求10-15中任一项的方法，其中所迷重结晶包括将托哌酮溶解在酸化溶剂中，任选地加热，以形成托哌酮溶液，并允许从所述溶液形成托哌酮的晶体。17.权利要求5的方法，其中所述纯化包括干燥步骤。18.制备托哌酮的合成方法，改进包括加入催化量的酸，由此使4-MMPP0的形成最小化。19.权利要求18的方法，其中所述酸是无水氯化氢气体。20.通过权利要求5-17中任一项的方法生产的纯化托哌酮。21.对有需要的受试者给予托哌酮的方法，改进包括给予包含低于约10ppm的2-曱基-l-(4-甲基苯基)-丙酮(4-MMPP0)的托哌酮组合物。22.权利要求21的方法，作为所述给予的结果，与4-MMPP0的存在有关的组合物对受试者的遗传毒性作用被最小化。23.与干燥剂一起被包装在适合的容器中的权利要求1-3中任一项的托p底酮。24.组合物中的4-MMPP0水平的检测方法，所述方法包括(a)提供包括托哌酮和任选的一种或多种赋形剂的组合物，(b)将所述组合物溶解在酸化的醇中，从而防止另外的4-MMPP0形成，以形成托哌酮的酸化溶液，(c)通过用有机溶剂提取，将所述托哌酮与如果存在的所述一种或多种赋形剂分离，以提供托哌酮的酸化提取物，(d)向(b)或(c)的溶液加入用于量化4-画PP0量的内标物，以提供样品溶液，和(e)通过液相色i普/质谦分析法分析所述样品溶液中的4-羅PP0的量，其中用于所述液相色谱的至少一种洗脱剂是被酸化的，从而检测所述样品中的可能低于500ppm的4-MMPP0水平。25.权利要求24的方法，其中所述酸化的醇是用选自以下的酸酸化的盐酸、氢溴酸、三氟乙酸、和曱磺酸。26.权利要求25的方法，其中所述酸化的醇是盐酸曱醇。27.权利要求24-26中任一项的方法，其中(c)中的所述有机溶剂是醚或亲脂性的酯。28.权利要求27的方法，其中所述溶剂是二异丙醚。29.权利要求24-28中任一项的方法，其中所述内标物是氘化的4-MMPP0。30.权利要求1-3中任一项的組合物用于使被给予所述組合物的受试者的与4-MMPP0的存在有关的遗传毒性作用最小化的用途。全文摘要本公开涉及提供具有极低水平的4-MMPPO(2-甲基-1-(4-甲基苯基)-丙烯酮)的托哌酮、以及相关组合物的方法。本发明还涉及在限制受试者暴露于可容许量的4-MMPPO的情况下用托哌酮治疗受试者的方法，以及其它特征。文档编号A61K31/4453GK101679329SQ200880013487公开日2010年3月24日申请日期2008年4月24日优先权日2007年4月26日发明者B·克茨,F·加埃塔,J·古格尔,J·罗滕布格尔,K·格迪斯,S·韦尔齐格申请人:阿维根公司;萨诺化学药物股份公司