心脑血管及眼科药物及其制备和用途的制作方法

专利名称：心脑血管及眼科药物及其制备和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体地说是提供心脑血管及眼科药物及其制备和用 途。
背景技术：
目前尚无公开的文献仅报道了葛根素[8_β -D-葡萄吡喃糖-4'，7- 二羟基异黄 酮，分子式=C21H20O9,分子量416. 37，CAS :3681-99_0]，到目前为止，国内外尚无公开的文 献报道葛根素结晶水合物[C21H20O9 · η H2O, η = 0. 8 1. 3]及其制备方法和用途。

发明内容
本发明所涉及的是报道用于高血压、冠心病、肺心病、心衰、心绞痛、心肌梗死、心 源性休克、心律失常、心肌炎、缺血性脑病、脑梗塞、脑血栓及其后遗症、改善脑循环、椎-基 底动脉供血不足性眩晕、下肢深静脉血栓后综合征、糖尿病、糖尿病并发症糖尿病肾病，糖 尿病周围神经病变、视网膜病变、视网膜动脉阻塞、静脉阻塞、突发性耳聋、降低眼内压，防 治青光眼，调节血脂等疾病预防或治疗的心脑血管及眼科药物及其制备和用途。其化学名 称为其分子式为C21H20O9 · η H2O, η = 0. 8 1. 3，η可以是0. 85、1、1· 1,1. 25或其之间的 数字。令人惊奇的是，不含结晶水的葛根素引湿性远高于本发明获得的含有结晶水的葛 根素，本发明的含有结晶水的葛根素的水合物比不含结晶水的更能稳定的存在，便于储存 和运输，并在室温下具有良好的流动性，易于用于制剂的制备。特征性的，本发明的水合物 的热分析(TG-DSC或者TG-DTA)图谱可以看出不同的、近似水平的台阶状态间的特征性的 失重平台(大约60-150°C之间)具有强烈的对应的吸热峰，热分析图谱显示出葛根素1水 合物(C21H20O9 · H2O)、葛根素1. 25水合物(C21H20O9 · 1. 25H20)等，用卡尔费休法测定水分结 果与热分析结果相一致。本发明的葛根素结晶水合物，能稳定存储。将上述葛根素的水合物和葛根素无水 物样品分别密闭与西林瓶中进行加速稳定性试验(色谱条件色谱柱C18(150mmX4. 6mm, 5ym)；流动相；0. 的枸橼酸溶液-甲醇(75 25)；流速lml/min ；温度室温；检测波 长250nm)，出人意料地发现，本发明的葛根素的水合物的含量和有关物质没有明显变化， 葛根素无水物加速试验6个月与0月相比(40°C，RH75%)，有关物质增加的高于葛根素1 水合物。按中国药典要求进行引湿性试验取葛根素无水物和本发明的结晶水合物约5g， 置于干燥恒重的表面皿中，精密称重。25°C、相对湿度为75%，分别于试验Oh和48h取样， 计算引湿增重的百分率，结果显示，无水物引湿性比本发明的水合物高得多，说明本发明的 葛根素结晶水合物具有更好的存储稳定性。结果见表1 3。此外，无水物的潮解使得在处理时要隔绝空气防止粘连等，不似水合物具有良好 的滑动性，改善制剂的可操作性。表1.本发明葛根素1水合物加速稳定性试验结果
表 2.
取样时间(月)性状标示含量(%)有关物质(%)0类白色粉末99. 5<2%1类白色粉末99. 3<2%2类白色粉末99. 6<2%3类白色粉末99. 4<2%6类白色粉末99. 3<2%本发明葛根素1水合物长期稳定性试验结果取样时间(月)性状标示含量(%)有关物质(%)0类白色粉末99. 5<2%3类白色粉末99. 6<2%6类白色粉末99.5<2%9类白色粉末99.4<2%12类白色粉末99.4<2% 表3.引湿试验结果
取样时间(48小时)与O小时相比，增重％
葛根素1水合物0. 12葛根素无水物4. 26
心脑血管及眼科药物制备方法包括
方法A.在反应容器中，将葛根粉用水或C1-C6的低分子醇一种或几种进行冷提、 超声提取、微波提取或回流提一次至数次合并，过滤，微孔滤膜或者陶瓷膜过滤，滤液浓缩， 浓缩得葛根浸膏，加水，用酸调节PH3-5，再用碱或者碳酸钠或者碳酸氢钠一种或者数种调 节PH为6-9之间，过滤，然后用C3-C6的低分子醇或C3-C8的低级酮，如异己酮、或C2-C8的 低级酯的一种或几种为溶剂进行萃取，萃取液蒸干得固体，加水，再用C3-C6的低分子醇或 C3-C8的低级酮，如异己酮、或C2-C8的低级酯的一种或几种为溶剂进行萃取，浓缩，静置， 过滤，以水、C1-C6的低级卤代烃、C3-C8的低级酮，如丙酮、C2-C8的低级酯、C1-C6的低分 子醇如甲醇、乙醇、异丙醇，C1-C6的低级脂肪酸、四氢呋喃、乙腈的一种或几种为结晶溶剂， 进行重结晶一次或数次，过滤，水洗，将所得的固体干燥，即得葛根素结晶水合物；或者方法B.葛根浸膏或葛根总黄酮或葛根的水提浓缩物或葛根的醇水提取浓缩 物，加水或C1-C6的低分子醇一种或几种，微孔滤膜(包括陶瓷膜)过滤，过中性氧化铝层 析柱、硅胶层析柱及大孔树脂、或聚酰胺柱层析或葡萄糖凝胶树脂，用水或C1-C6的低分 子醇、C1-C6的低级卤代烃、一种或几种进行洗脱，浓缩或者超滤膜浓缩，静置，过滤，以水、 C1-C6的低级卤代烃、C3-C8的低级酮，如丙酮、C2-C8的低级酯、C1-C6的低分子醇如甲醇、 乙醇、异丙醇，C1-C6的低级脂肪酸、四氢呋喃、乙腈的一种或几种为结晶溶剂，进行重结晶 一次或数次，过滤，水洗，将所得的固体干燥，即得葛根素结晶水合物；或者方法C.葛根浸膏或葛根总黄酮或葛根的水提浓缩物或葛根的醇水提取浓缩 物，加水或C1-C6的低分子醇一种或几种，经过微孔滤膜、中空纤维的膜、陶瓷膜、超滤膜、 纳滤膜的一种或几种的一次或数次过滤或浓缩，以水、C1-C6的低级卤代烃、C3-C8的低级 酮，如丙酮、C2-C8的低级酯、C1-C6的低分子醇如甲醇、乙醇、异丙醇，C1-C6的低级脂肪酸、 四氢呋喃、乙腈的一种或几种为结晶溶剂，进行重结晶一次或数次，过滤，水洗，将所得的固体干燥，即得葛根素结晶水合物；或者方法D.葛根浸膏或葛根黄酮或葛根的水提浓缩物或葛根的醇水提取浓缩 物，经过中空纤维的膜、陶瓷膜、超滤膜、纳滤膜的一种或几种的一次或者多次过滤或浓缩， 以水、氯仿、C3-C6的低级酮，如丙酮、C2-C8的低级酯、C1-C6的低分子醇如甲醇、乙醇、异丙 醇，C1-C6的低级脂肪酸、四氢呋喃、乙腈的一种或几种为溶剂，置于磁通量为0. 1-5特斯拉 的磁场下进行一次或多次结晶，过滤，水洗，干燥，即得葛根素结晶水合物；上述各方法中的不同步骤可以交替使用，以便制备葛根素结晶水合物。上述不同方法得到的相同的葛根素水合物或葛根素1水合物其晶型有所不同，在 X粉末衍射上的表现有所不同。心脑血管及眼科药物的用途在于在制备注射用冻干粉针制剂、或者小水针注射 剂，大输液制剂(包括葛根素结晶水合物的葡萄糖、氯化钠的大输液制剂)、经肠道给药制 剂，包括片剂、胶囊、颗粒剂、经眼部给药制剂(滴眼液、眼用凝胶)上的应用。心脑血管及眼科药物的用途在于在制备高血压、冠心病、肺心病、心衰、心绞痛、 心肌梗死、心源性休克、心律失常、心肌炎、缺血性脑病、脑梗塞、脑血栓及其后遗症、改善脑 循环、椎-基底动脉供血不足性眩晕、下肢深静脉血栓后综合征、糖尿病、糖尿病并发症糖 尿病肾病，糖尿病周围神经病变、视网膜病变、视网膜动脉阻塞、静脉阻塞、突发性耳聋、降 低眼内压，防治青光眼，调节血脂等疾病预防或治疗的药物中的应用。葛根素结晶水合物可以与环糊精形成的水溶性的包合物(亦为复合物)，环糊精 优选2-羟丙基β-环糊精(2-HP-i3-CYD)、3-羟丙基β-环糊精(3-ΗΡ-β-CYD)、磺丁 醚-β-环糊精(SBE-i3-CD)等中的一种或多种，并由此制备能够更稳定存放的制剂，这在 已公开文献中未曾报道过。葛根素结晶水合物与环糊精或环糊精衍生物形成水溶性的包合 物，其中葛根素结晶水合物与环糊精或环糊精衍生物的质量或重量比为1 5至1 60。用于制备经肠道给药制剂的片剂，胶囊，颗粒剂，其中可含有药学上可接受的填充 剂，如淀粉、变性淀粉、乳糖、蔗糖、微晶纤维素、环糊精、山梨醇、甘露醇、磷酸钙、氨基酸等； 药学上可接受的崩解剂，如淀粉、变性淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷 酮、低取代羟丙基纤维素、羟丙基淀粉、羧甲基纤维素钠、瓜尔树胶、甲基纤维素、表面活性 剂；药学上可接受的润湿剂和粘合剂，如胶化淀粉、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维 素、聚乙烯吡咯烷酮、海藻酸及其盐；药学上可接受的润滑剂和助流剂，如硬脂酸、硬脂酸 镁、硬脂酸锌、微粉硅胶、滑石粉、聚乙二醇2000-8000、十二烷基硫酸镁的一种或数种；药 学上可接受的甜味剂，如甜蜜素、阿斯巴甜、糖精钠、甜叶菊素、木糖醇、山梨醇、木糖、乳糖、 甘草甜素、蔗糖、三氯蔗糖等；药学上接受的混悬稳定剂，如黄原胶、瓜尔树胶、甲基纤维素、 乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、聚乙二醇2000-8000、表面活性剂、海藻酸及 其盐等；粘合剂为聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、预胶化淀 粉、淀粉、明胶、阿拉伯胶中的一种或数种，粘合剂可以由水或乙醇或者两者混合物为溶剂。葛根素结晶水合物滴眼液制备中，各组分的重量份数可以为葛根素结晶水合物 0. 2-2、助溶剂1-10、抗氧化剂0. 02-0. 5、金属络合剂0. 01-0. 2、渗透压调节剂0. 5_10、防腐 剂0. 002-0. 4，水为10-100份，另加PH调节剂适量。其制备方式可以是将葛根素水合物加入适量注射用水中，加助溶剂，搅拌，试溶 解，加抗氧剂、防腐剂、渗透压调节剂、稳定剂、PH调节剂，水，搅拌均勻，成溶液状，使pH =5. 0-7. 0，以微孔滤膜或超滤等方式过滤，检测，无菌分装于已灭菌的干净塑料眼药水瓶中 即得。葛根素结晶水合物眼用凝胶，100份凝胶中各组分的重量份数可以为葛根素结 晶水合物0. 2-2、凝胶基质0. 05-1、渗透压调节剂1-8、抗氧化剂0. 01-0. 5、金属络合剂 0. 01-0. 2、防腐剂0. 002-0. 4，其余为水，另加PH调节剂适量。葛根素水合物眼用的凝胶制备葛根素水合物与50-95%基质混勻，基质可以 是水、乙醇、甘油、三乙醇胺、甘油明胶、甲基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、黄原 胶、聚乙二醇 200-8000 (包括 PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG800、1000、PEG1540、 PEG4000等)，泊洛沙姆系列(可以是泊洛沙姆-188，泊洛沙姆-237，泊洛沙姆-338，泊洛沙 姆-407)、聚乙烯吡咯烷酮、半合成硬脂肪酸脂、水溶性单甘酯、卡波姆系列(如卡波姆931、 934、940、974、AA-1、1342等)等中的一种或数种，可含有药学上可接收的抑菌剂和稳定剂， 药学上可接收的PH调节剂。制备时可先将凝胶基质卡波姆或甘油明胶、甲基纤维素、羟丙 基纤维素、羧甲基纤维素、黄原胶、泊洛沙姆、聚乙二醇等用水分散，加入甘油、水浴加热，搅 拌混勻，加处方量的葛根素水合物、渗透压调节剂、抗氧化剂、药学上可接收的抑菌剂和稳 定剂，搅拌，用药学上可接收的PH调节剂调节pH = 5. 0-7. 0左右，加水至全量、搅拌至勻、 过滤、灭菌、分装，即得。或将葛根素水合物、渗透压调节剂、抗氧化剂、药学上可接收的抑菌剂和稳定剂， 药学上可接收的PH调节剂，搅拌，使溶解，以微孔滤膜或超滤等方式过滤，，将滤液加入到 注射用水分散的凝胶基质中，搅拌，混勻，调节PH = 5. 0-7. 0，加水至足量，搅拌均勻，灭菌、 分装即得葛根素水合物的眼用凝胶。葛根素结晶水合物的注射剂，其制备方法为冻干粉针制剂的制备方法为取葛根素水合物，加药学上可接受的助溶剂、冻干支 持剂或辅形剂，加注射用水搅拌使溶解，用药学上可接受的酸碱调节pH为4. 0 7. 5，加活 性碳0. 005-0. 5% (W/V)搅拌15 45min,过滤，补水，无菌过滤，按50 600mg/瓶分装， 冷冻干燥，压塞，得成品。药学上可接受的冻干支持剂或辅形剂可以含有乳糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、木 糖醇、右旋糖酐、抗坏血酸、氨基酸、甘氨酸、牛磺酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、去氧胆酸钠 等的一种或几种。葛根素水合物小容量注射液及其制备工艺葛根素水合物加注射用水和药学上可 接受的附加剂，例如加药学上可接受的助溶剂、药学上可接受的PH调节剂、药学上可接受 的抗氧剂、惰性气体，过滤、除菌制成灭菌小容量注射液，使得其规格为50 SOOmg/支，其 pH值在3. 5 7. 5之间。葛根素水合物输液及其制备工艺葛根素水合物加注射用水和药学上可接受的附 加剂，例如加药学上可接受的助溶剂、药学上可接受的等渗调节剂、药学上可接受的PH调 节剂、药学上可接受的抗氧剂、惰性气体，过滤、除菌制成灭菌大容量注射液，使得其规格为 100 800mg/瓶，其pH值在3. 5 7. 5之间。在本发明的葛根素水合物的制剂制备中，所使用的药学上可接受的增溶剂或助溶 剂可为水、乙醇、丙二醇、丙三醇、1，3-丁二醇、吐温20-80、聚乙二醇200-1000、聚乙烯吡咯 烷酮、十二烷基硫酸钠、药学上可接受的酰胺(如烟酰胺、硫脲、乌拉坦等)、胺类化合物(如
7乙二胺、二乙胺、二乙醇胺、三乙醇胺、葡甲胺、葡乙胺等)、碱性氨基酸(L型、D型的或消旋 的精氨酸、赖氨酸、组氨酸、瓜氨酸等)、环糊精、环糊精优选B-环糊精、2-羟丙基β -环糊 精(2-ΗΡ- β -CYD)、3_ 羟丙基 β -环糊精(3-ΗΡ- β -CYD)、磺丁醚-β -环糊精(SBE- β -CD) 等的一种或几种。葛根素结晶水合物与环糊精或环糊精衍生物形成水溶性的包合物，其中葛根素结 晶水合物与环糊精或环糊精衍生物的质量或重量比为1 5至1 60;药学上可接受的抑菌剂可以是苯扎氯铵、苯扎溴铵、苄乙胺、西白林、乙醇、硝酸苯 汞、硫柳汞、苯甲醇、苯乙醇、苯氧乙醇、三氯叔丁醇、度米酚、对羟基苯甲酸酯类(对羟基苯 甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丁酯等)、山梨酸或其药用盐等的一种或几种。其药学上可接受的PH调节剂可以是药学上可接受的无机酸或有机酸、无机碱或 有机碱，也可以是广义的路易斯酸或碱，可以含有一种或者几种，可以是盐酸、磷酸、丙酸、 醋酸及醋酸盐、如醋酸钠等，乳酸以及乳酸药用盐、枸橼酸药用盐、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸 氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸盐、酒石酸及其药用盐、硼砂、硼酸、丁二酸、己酸、己二酸、 反丁烯二酸、顺丁烯二酸、三羟基氨基甲烷、二乙醇胺、乙醇胺、异丙醇胺、二异丙醇胺、2_氨 基-2_(羟甲基)1，3_丙二醇胺、1，2_己二胺、N-甲基葡萄胺、二异丙胺以及它们的盐，多羟 基羧酸及药用盐，如葡萄糖醛酸、葡萄糖酸、乳糖酸、苹果酸、苏糖酸、葡庚糖酸、牛磺酸、氨 基酸及氨基酸盐、磷酸盐缓冲液、硼酸缓冲液等中的一种或者几种。其药学上可接受的抗氧剂和稳定剂(包括络合剂)可以是亚硫酸、亚硫酸盐、亚硫 酸氢盐、焦亚硫酸盐、连二亚硫酸盐、硫代硫酸盐，有机硫化合物硫脲、谷胱甘肽、二巯基丙 醇、巯基乙酸及盐、硫代乳酸及盐、硫代二丙酸及盐、苯酚类化合物，如没食子酸及盐、咖啡 酸、咖啡酸盐、阿魏酸、阿魏酸盐、二叔丁基对苯酚、2，5_ 二羟基苯甲酸、2，5_ 二羟基苯甲酸 盐、苯酚或其衍生物、水杨酸或其盐；氨基酸以及其盐；抗坏血酸及抗坏血酸盐、异抗坏血 酸及异抗坏血酸盐、烟酰胺、酒石酸、硝酸盐、磷酸盐、醋酸药用盐、柠檬酸盐、牛磺酸、EDTA 及EDTA盐、如EDTA 二钠、EDTA四钠、N-二(2-羟乙基)甘氨酸、环糊精，环糊精优选B-环 糊精、2-羟丙基β-环糊精(2-HP-i3-CYD)、3-羟丙基β-环糊精(3-ΗΡ-β-CYD)、磺丁 醚-β-环糊精(SBE-β-⑶)等，以上等中的一种或者几种。其药学上可接受的渗透压调节剂可以是葡萄糖、果糖、木糖醇、山梨醇、甘露醇、转 化糖、麦芽糖、右旋糖酐、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、硼酸等中的一种或几种。去热源和除菌方式可以是加入配液量0.005 3%的活性炭去热源，微孔滤膜除 菌和热压灭菌，也可以采用超滤除菌、去热源。超滤方法中，超滤器可选用平板式、卷式、管 式、中空纤维式或圆盒式等，优选卷式和中空纤维式超滤器，可采用截留相对分子质量为5 万至30万的滤膜除去大部分发热性物质和细菌后，再采用截留相对分子质量1000 30000 的滤膜除去剩余热源，优选截留相对分子质量4000 20000的滤膜。本发明的心脑血管及眼科药物，适用于制备下列对所引起的人和动物感染的治疗 或预防的药物中的应用在制备用于高血压、冠心病、肺心病、心衰、心绞痛、心肌梗死、心源 性休克、心律失常、心肌炎、缺血性脑病、脑梗塞、脑血栓及其后遗症、改善脑循环、椎-基底 动脉供血不足性眩晕、下肢深静脉血栓后综合征、糖尿病、糖尿病并发症糖尿病肾病，糖尿 病周围神经病变、视网膜病变、视网膜动脉阻塞、静脉阻塞、突发性耳聋、降低眼内压，防治 青光眼，调节血脂等治疗或预防的药物中的应用。
用量用法一般情况下，于成人，取本发明葛根素水合物0. 020 0. 6g的冻干粉针 制剂或小水针于0. 9%氯化钠或者5 10%葡萄糖20 500毫升中，作静脉推注或滴注， 每日1 2次，葛根素水合物的0. 9%氯化钠或者5 10%葡萄糖大输液制剂的给药途径 为静脉注射，给药剂量同前；肌内注射取本发明药物0. 020 0. 6g冻干粉针制剂溶于注 射用水中，肌内注射，每日1 2次；儿童减半量以上使用。经胃肠道给药剂量，一般情况下 为0. 020 0. 6g/次，每日1 3次。滴眼剂的用法成人常用量1 %葛根素滴眼液一次1 2滴，滴入眼睑内，闭目3 5分钟。每天1-3次。眼用凝胶的给药剂量参照滴眼液的剂量。


图1为葛根素1水合物的热分析图谱。图2为葛根素水合物的热分析图谱。图3为葛根素1水合物的热分析图谱。测试条件=Setaram公司Setsys 16，样品量约5mg,升温速度:10K/min，N2流速 50ml/min，室温 400°C左右。
具体实施例方式实施例1葛根素1水合物的制备在反应容器中，将干葛根粉80g用乙醇80%水 溶液400ml回流提3次，合并提取液，粗滤，再以0. 22 μ m微孔滤膜过滤，滤液浓缩，得葛 根浸膏，加水，用稀盐酸调节PH = 3-5，再用碳酸氢钠溶液调节PH为6-7之间，过滤，然后 用正丁醇和异己酮为溶剂进行萃取，萃取液蒸干得固体，以水、甲醇、甲酸、乙腈为结晶溶 剂，进行重结晶3次，过滤，水洗，固体80°C左右干燥4小时，得类白色结晶性粉末1. Sg ；熔 点208· 4 212. 5°C分解(未校正)，紫外光谱λ CH3OHfflax250nm, [a]D21+18. 14°C (c = 1，甲 醇)，ESI-MS :m/z :417[M+1]+；红外光谱ν ■ max 1^3381、1627、1588、1515、1446，卡氏法 测定水分为4. 19%,TG-DTA 平台失重约4. 13%，这与样品含有1个结晶水的结果(理论值 4. 15% )在误差范围内(见附图1)；元素分析实测值C 57. 99,H 5. 26 ；理论值C 58. 06， H 5. 10。实施例2葛根素结晶水合物的制备葛根浸膏或葛根总黄酮30g，加水，加热约至 50-700. 15-0. 24 μ m的陶瓷膜过滤，滤液过中性氧化铝层析柱、洗脱，DlOl大孔树脂吸 附、用水洗，TLC监测，再用30-75%乙醇水溶液进行洗脱，直到其洗脱完毕，过滤，减压浓 缩，静置，以水、丙酮、乙醇、乙腈为结晶溶剂，进行重结晶2次，放置，过滤，水洗，将所得的 固体干燥；80°C左右干燥4-6小时，得类白色固体6. 6克，熔点227. 8 231. 8°C (未校 正)，紫外光谱λ CH3OHmax250nm ； [a]D21+18. 14°C (c = 1，甲醇)，ESI-MS :m/z :417[M+1]+ ；红 外光谱 -Vmrmax 1^3380、1626、1586、1516、1446 ；卡氏法测定水分为 4. 01%, TG-DTA 平台 失重约3. 49%，这与样品含有1个结晶水的结果(理论值4. 15%)在误差范围内(见附图 2)；元素分析实测值=C 58. 13，H 5. 21 ；理论值=C 58. 06，H 5. 10。实施例3葛根素1水合物的制备40目左右的干葛根粉90g，加水400ml超声并 回流提取3次，合并提取液，经粗滤，再经0. 22 μ m的微孔滤膜或陶瓷膜过滤，滤液然后在 25-65°C之间，0. 15-2MPa下(压力可动态调节，或随着试验进行而增加压差)，采用截留相
9对分子质量4000 50000的超滤膜(聚砜中空纤维膜组件，纤维孔径0. 011 μ m,内径为 1. Imm)过滤，滤液再经截留相对分子质量200以上的纳滤膜过滤，浓缩，以90%甲醇水溶 液溶解，加乙酸、乙腈为结晶溶剂，放置，结晶，抽滤，水洗；如上法，以甲醇、水、乙酸、乙腈为 溶剂重结晶3次，将所得的固体80°C左右干燥4 6小时，得类白色结晶固体1. 6克，熔 点215· 5 218. 60C (未校正)，紫外光谱λ CH3°Hmax250nm，[a]D21+18. 14°C (c = 1，甲醇)， ESI-MS :m/z :416，399，360，350，297，267，254 ；红外光谱:vKBrmaxcm_13380U625U587U515, 1446 ；卡氏法测定水分为4. 21%,TG-DTA 平台失重约4. 07%，这与样品含有1个结晶水的 结果(理论值4. 15% )在误差范围内(见附图3)；元素分析实测值C 58. 15，H 5. 02 ；理 论值=C 58. 06，H 5. 10。CH3OH实施例4葛根素水合物的制备20-60目左右的干葛根粉90g，加水400ml超声提 取3次，合并提取液，经砂型泵粗滤，再经0. 22 μ m的微孔滤膜或陶瓷膜过滤，滤液然后在 25-65°C之间，0. 15-2MPa下(压力可动态调节，或随着试验进行而增加压差)，采用截留相 对分子质量3000 50000的超滤膜(聚砜中空纤维膜组件，纤维孔径0. 011 μ m,内径为 1. Imm)过滤，滤液再经截留相对分子质量200以上的纳滤膜过滤，浓缩，以90%甲醇水溶 液溶解，加甲酸、乙酸、水为结晶溶剂，放置，结晶，抽滤，水洗；如上法，以甲醇、水、乙酸、乙 腈为溶剂重结晶3次，将所得的固体50°C左右干燥4 6小时，得类白色结晶固体1. 6克， 再50°C干燥2 4小时左右，得类白色结晶性粉末，易溶于水，熔点226.5°C (分解，未校 正)，紫外光谱λ CH3。Hmax250nm，[a]D21+18. 14°C (c = 1，甲醇)，ESI :m/z 416 [M]+, 399, 360, 350，297，267，254 ；；红外光谱ν KBr max 1^3378、1624、1585、1516、1446，卡氏法测定水分 为5. 22%，热分析TG-DTA :150°C之前的平台失重约5. 32%，这与样品含有1. 25个结晶水 的结果(理论值5. 13% )在误差范围内。实施例5取葛根素1水合物20g，加精氨酸10g、甘露醇或木糖醇2. 0 5g加新鲜 的注射用水400ml搅拌使溶解，用枸橼酸或枸橼酸钠溶液调节pH值在4. 0 6. 8的范围内， 加活性碳0.01 0.5% (W/V)搅拌15 45min，过滤，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用 截留相对分子质量3000 8000的超滤膜过滤，按100、200mg/瓶或300mg/瓶或400mg/瓶 或600mg/瓶(以葛根素计)分装、加塞、冷冻干燥、压塞、检验、得成品。实施例6取葛根素水合物20g，加甘露醇10g，葡甲胺12g、吐温802g，加40 60°C 注射用水320ml搅拌使溶解，用葡萄糖酸或枸橼酸钠溶液调节pH值在4. 0 6. 5的范围内， 加活性碳0. 01 0. 5% (W/V)搅拌15 45min,过滤，补加注射用水至400ml，用0. 22微米 微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量2000 8000的超滤膜过滤，按100、200mg/瓶或 300mg/瓶或400mg/瓶或600mg/瓶(按葛根素计)分装、加塞、冷冻干燥、压塞、检验合格、 得成品。实施例7将葛根素水合物IOg加到丙二醇90ml中、再加吐温_802ml，搅拌使溶，加 80ml新鲜的注射用水，搅拌，搅拌中加焦亚硫酸钠0. lg、EDTA 二钠0. lg，2M乳酸和乳酸钠 调节PH值在4. 0 6. 3的范围内，加活性碳0. 5% (W/V)搅拌15 45min，过滤，测定含量 及PH，补水至溶液总量为200ml左右，用0. 22微米微孔滤膜过滤过滤，通氮、按2 20ml/ 瓶灌封、灭菌、检验合格后得成品。实施例8葛根素1水合物(按葛根素计)10g，甘油100ml、吐温_802ml、盐酸半胱 氨酸0. 2g，甘氨酸0. 4g、牛磺酸0. 5g、3-羟丙基β -环糊精2g、EDTA 二钠0. Ig,加到250ml新鲜的注射用水中，搅拌使溶解，2M葡萄糖酸和葡萄糖酸钠调节pH值在4. 0 6. 6的范围 内，加活性碳0. 5% (W/V)搅拌15 45min,过滤，补水至溶液总量为400ml，用0. 22微米微 孔滤膜过滤，通氮、按2 IOml/瓶灌封、灭菌、检验合格后得成品。实施例9葛根素水合物大容量注射液的制备将葛根素水合物(以干品计)10. Ig 用4. 5L新鲜的注射用水溶解完全后，加焦亚硫酸钠lg、葡萄糖250g，牛磺酸2g，EDTA 二钠 0. 2g，用4M的磷酸二氢钠或磷酸氢二钠溶液调节pH值在4. 0 6. 8的范围内，加配液量 0. 02 0. 5% (W/V)的活性炭，加热搅拌15 30分钟左右，过滤脱炭，测含量、pH值，补水 至溶液为5L，再经0. 22um微孔滤膜精滤或者采用截留相对分子质量4000 8000的超滤膜 过滤，经半成品化验，待其含量、PH值和澄明度合格后，通氮灌封于50ml或IOOml或200ml 或250ml的玻璃瓶中，热压灭菌30分钟，放冷，成品检查，包装即得。实施例10葛根素水合物氯化钠输液的制备将葛根素水合物(以葛根素计)10g、 氯化钠45g、盐酸L-半胱氨酸lg、焦亚硫酸钠lg、甘氨酸2g、EDTA 二钠0. 2g，加入到4. 5L新 鲜的注射用水中，控制温度在80°C以内，搅拌使溶解完全，用2M的枸橼酸或枸橼酸钠溶液 调节PH值在4. 0 7. 0的范围内，加配液量0. 1 %的活性炭，加热搅拌15 30分钟左右， 过滤脱炭，测含量、PH值，补水至溶液为5L，再经0. 22um微孔滤膜精滤或者采用截留相对分 子质量4000 8000的超滤膜过滤，检测澄明度、不溶性微粒等合格后，通氮灌封于50ml或 IOOml或200ml或250ml的玻璃瓶中，灭菌，成品检查，包装即得。实施例11葛根素1水合物片剂(200mg/片)处方葛根素1水合物200g微晶纤维素80g羧甲基淀粉钠20g10%聚维酮K-30乙醇水(7 3)溶液 适量微粉硅胶Ig将葛根素1水合物、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠过100目筛，用10%的聚维酮K-30 乙醇水(7 3)溶液适量制软材，过18-24目筛制粒，干燥，过14-20目筛整粒后，加微粉硅 胶混勻、压片、检验、包装。实施例12葛根素1水合物胶囊(IOOmg/粒)处方葛根素1水合物 IOOg微晶纤维素50g乳糖IOg胶化淀粉10%适量硬脂酸镁2g将葛根素1水合物、微晶纤维素、乳糖过100目筛，用10%的胶化淀粉适量制软材， 过18-24目筛制粒，干燥，过14-20目筛整粒后，加硬脂酸镁混合，灌装胶囊。实施例13葛根素结晶水合物的颗粒剂(200mg/包)处方葛根素结晶水合物200g甘露醇IOOg乳糖20g甜蜜素2g
固体食用香精Ig黄原胶2g8%聚维酮K-30乙醇水溶液 适量将葛根素结晶水合物、甘露醇、乳糖、甜蜜素、食用香精过100目筛，用8%的聚维 酮K-30乙醇水溶液适量制软材，过18-24目筛制粒，60°C以下干燥，加过100目筛的黄原 胶，过14-20目筛整粒后，混勻，加过100目筛的黄原胶，分包装。实施例14葛根素1水合物的滴眼液将葛根素1水合物5. 23g、甘油50ml、聚维酮K_305g加入适量的注射用水，搅拌使 其溶解后，再将亚硫酸钠0. 6g、EDTA 二钠0. 3g、5%苯扎氯铵溶液1ml、氯化钠3. Ig加入到 上述溶液中，搅拌使溶解，以磷酸氢钠和磷酸氢二钠溶液调至6. 0-7. 0，然后加入注射用水 至500ml，搅拌均勻，检测，用0. 45-0. 2 μ m微孔滤膜过滤至澄明，分装于已灭菌的干净眼药 水瓶中，灭菌，放冷，即得。实施例15将葛根素1水合物5. 23g、甘油50ml、聚维酮K_305g加入适量的注射用 水，搅拌使其溶解后，再将焦亚硫酸钠0. 6g、EDTA 二钠0. 3g、甘露醇4g加入到上述溶液中， 搅拌使溶解，以硼酸缓冲液调至6. 0-7. 0，然后加入注射用水至500ml，搅拌均勻，检测，用 0. 45-0. 2 μ m微孔滤膜过滤至澄明，分装于已灭菌的干净单剂量的眼药水瓶中，灭菌，放冷， 即得。实施例16葛根素1合物的眼用凝胶处方葛根素1水合物5. 2g、卡波姆934或卡波姆971 2g、甘油10ml、甘露醇6g、 EDTA二钠0. lg、硼砂2g、硼酸lg、对羟基苯甲酸乙酯0. 3g、磷酸氢钠和磷酸氢二钠溶液适量 调节PH值、加注射用水到500ml。将卡波姆934用适量注射用水使其分散、溶胀，加入甘油、水浴加热，搅拌混勻，加 处方量的葛根素水合物、甘油、甘露醇、EDTA 二钠、硼砂、硼酸、对羟基苯甲酸乙酯加入到适 量注射用水中，搅拌，用PH调节剂调节pH = 6. 0-6. 7左右，使溶解，将其加入到水分散的凝 胶基质中，搅拌，加水至全量、搅拌至勻、过滤、灭菌、分装，即得。药效学试验1、对乌头碱诱发大白鼠心律失常的作用SD大鼠20只，雌雄不拘，体重185士 19g，随机分为2组，分别静脉注射给予生理 盐水、葛根素1水合物(加助溶剂等配置成可注射的溶液UOOmg^kgA 3%戊巴比妥钠 40mg· kg—1麻醉后，仰卧位固定于手术台上。舌下静脉注射给药，6min后，恒速静脉注射 0. 0025%乌头碱，Zyg.min-1^). 08ml ^irT1)，记录出现室早(VP)、室速(VT)、室颤(VF)及 死亡(CA)的时间，计算相应的剂量。结果表明，葛根素1水合物组能显著增加乌头碱致大鼠VP、VT、VF和CA的用量， PW组与生理盐水组相比有显著差异，见表4。表4.葛根素1水合物对乌头碱诱发大白鼠心律失常的作用(I±s,n = 10) Pff组与生理盐水组相比(t检验)p < 0. 052、葛根素1水合物对ACE活性的抑制作用Wistar大鼠280 300g 24只，随机分为3组，每组8只，一组为对照组，另两组分 别为剂量100mg/kg，200mg/kg的给药组(加助溶剂等配置成可注射的溶液)，腹腔注射给 药，对照组给予的生理盐水，给药60min后用戊巴比妥钠腹腔麻碎，开胸心脏取血，血样 室温静置30min，3500r/min低温离心lOmin，取上清液_65°C左右保存，待测。ACE活性的测定参考文献[王赋敏，等.中华医学检验杂志，1983，6 (3) :145
151]，结果统计学处理结果以is表示，数据作方差分析和t检验。实验表明大鼠血清 ACE活性，葛根素1水合物与对照组相比，试验组中大鼠血清ACE活性呈浓度依赖性降低(P < 0. 01)，不同浓度的葛根素1水合物明显抑制ACE活性。结果见表5。表5.葛根素1水合物对ACE活性的抑制作用 上世纪八十年代以来，由于血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)在临床心血管方面 的广泛应用，以及局部肾素-血管紧张素系统(RAS)的发现和研究，使人们认识到RAS，尤其 是心血管局部RAS在许多心血管疾病中起着至关重要的作用。ACE位于RAS的中心，是RAS 活性的限速酶，能将血管紧张素I (Ang I)转变为血管紧张素II (Ang II)。现已证实Ang II 对心脏具有冠脉收缩和正性心肌力作用；可直接或间接通过促进儿茶酚胺释放使血管平滑 肌收缩；并能刺激平滑肌细胞增生，促使心肌细胞肥大；参与缺血-再灌注损伤，引起心律 失常。ACE还能水解缓激肚，后者为扩血管物质。正常生理条件下，体内的血管紧张素II是维持循环血压、心脏和血管形态的重要 调节性物质。在高血压或胰岛素抵抗等病理状态下，血压升高血浆或胰岛素水平升高等，并 刺激肾素-血管紧张素系统(RAS)活动增强，使得血浆和局部组织中血管紧张素H生成过 多。过多的血管紧张素II促进平滑肌细胞肌球蛋白轻链磷酸化，直接收缩血管平滑肌，并 刺激机体组织产生过多的活性氧，灭活内皮细胞释放的一氧化氮(NO)，使NO浓度下降，同 时增加交感神经活动，使得外周循环阻力增加而引起血压升高。另一方面，过多的Ang II通过破坏胰岛素信号转导和对血流动力学的影响，减少 骨骼肌细胞对葡萄糖的转运，促进胰岛素抵抗的形成，形成恶性循环。此外，过多的AngII 刺激转化生长因子-bl(TGF-bl)和I型纤溶酶原激活物抑制因子的表达，这些物质的形 成与胰岛素抵抗的多种严重并发症如高血压、心脏重塑和动脉粥样硬化的发生有着密切关
13系。研究表明ACEI的药理作用是多方面的，主要包括1)、抑制循环中血管紧张素II 转化酶系统；2)、抑制组织及血管紧张素系统；3)、减少末梢神经元释放去甲肾上腺素；4)、 减少内皮系统形成内皮素；5)、增加缓激肽及扩血管的前列环素的形成；6)、减少醛固酮的 分泌，使水钠潴留减少。血管紧张素转换酶抑制剂通过上述作用可起到以下效应降低血压；逆转心脏及 血管结构，减轻左心室肥厚及重量，使阻力血管中层/管腔径比值减小，从而减少高血压、 心肌梗塞后及心功能障碍的心肌细胞过度增生及肥厚，改善心肌梗塞后的预后，减少意外 发生率及死亡率，减少或防止高血压病靶器官的损害，治疗充血性心力衰竭及心功能障碍， 降低充血性心力衰竭的发生及死亡率，增加大血管的顺从性，减少动脉粥样硬化形成及抗 心肌缺血；减低胰岛素抵抗，改善对胰岛素的敏感性；具有保护肾脏的作用，特别是在糖尿 病高血压患者，由于入球小动脉的压力增高、进入的血流也多，必然导致肾小球的高滤过状 态，血管紧张素II生成减少，达到保护肾功能的作用。本发明实验表明葛根素结晶水合物不仅有抗心律失常作用，而且对ACE活性均有 抑制作用，提示葛根素结晶水合物可减少AngII的生成和缓激肽的降解，因此，应用葛根素 结晶水合物有助于防治心律失常、高血压、充血性心力衰竭、心肌缺血和心肌梗死等以及上 述原因引起的心室重构、心肌肥大、高脂血症、非糖尿病肾病、1型糖尿病肾病以及蛋白尿， 保护肾脏功能，并防止动脉粥样硬化发生发展等作用。3、葛根素结晶水合物对大鼠脑缺血的影响Wistar雄性大鼠36只，体重250 300g，随机分为3组假手术组、缺血再灌组 和本发明药物组，每组12只。本发明药物组采用葛根素1水合物的生理盐水的混悬液灌 胃，剂量为400mg/kg，体积为2ml，每天两次，连续7天，最后一次给药60min后实施脑缺血 手术；假手术组和缺血再灌组分别给以等容积的生理盐水2ml。大鼠用10%水合氯醛(3.5ml/kg)腹腔注射麻醉，仰卧位固定，参照文献用Zea Longa线拴改良法造模[上海交通大学学报(医学版)2007，27 (10) :1218_1222]；假手术组 栓线只插入10mm，其余步骤同模型组，动物苏醒后出现手术侧Homer征和对侧体运动障碍 即为模型制备成功。造模成功后本发明药物组一天给药2次，剂量同前，假手术组和缺血再 灌组分别给以等容积的生理盐水2ml。造模后2h抽出线，再灌注24小时后处死大鼠，迅速 取脑称重。低温下用生理盐水制成10%脑组织勻浆液，低温离心，3000r/min离心lOmin，弃 沉淀，取上清液，按市售测试S0D、MDA、N0、N0S相应试剂盒的说明书分别测定S0D、MDA、N0、 NOS含量或活性，结果见表6。表6.本发明药物对大鼠脑缺血字啊灌注脑组织中NO、NOS, MDA、SOD的影响 结果表明，与假手术组相比，缺血再灌模型组大鼠脑组织中SOD活性明显降低， MDA、NO含量及NOS活性明显增加(P<0.01)；与缺血再灌模型组相比，本发明药物组大鼠脑组织中SOD活性明显升高，NOS活性降低，MDA、NO含量明显减少(P < 0. 01)研究表明，NO是具有生物活性信使小分子，可自由穿过细胞膜，作用于胞内的靶分 子。在生物体内，NO生成后很快被氧化灭活，以硝酸根和亚硝酸根的形式存在于细胞的内 外液中。低浓度的NO能使血管扩张，抑制血小板集聚与粘附，使谷氨酸调控的离子通道下 调，防止细胞内钙超载，因而对细胞有保护作用；但在高浓度下，NO可与超氧阴离子反应生 成超氧亚硝酸根离子，超氧亚硝酸根离子可以降解为0H—和NO2—自由基，使细胞膜发生脂质 过氧化作用，在细胞的膜水平造成强烈的神经毒性，甚至导致神经元死亡等。研究表明，NO在脑缺血性损伤的发病中起重要作用，缺血后数分钟NO含量明显增 高，之后缓慢下降，于再灌注期NO再次升高。其机制可能为脑缺血后神经元受损，细胞膜 去极化过程增强，突触前谷氨酸等兴奋性氨基酸生成大量增加，使胞外谷氨酸浓度升高，激 活N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体，NMDA受体激活后使突触后Ca2+内流增加，激活一 氧化氮合酶N0S，促进NO的生成；其二，脑缺血后，ATP大量消耗，导致能量代谢障碍及cAMP 依赖的蛋白激酶活性下降，由于NOS脱磷酸化使得NOS的活性增强，从而促进NO的生成。一氧化氮合酶是一氧化氮合成的限速酶NOS。在脑缺血早期，NOS介导生成的NO通 过扩张血管改善缺血区的血液供应，具有短时保护性作用，但随着NO的大量产生，在缺血 区NOS因介导神经毒性效应并很快占优，使脑缺血损伤加剧；到晚期，脑缺血脑组织损伤、 炎症反应刺激巨噬细胞、神经小胶质细胞、神经元等可大量产生诱导型N0S，诱导型NOS可 缓慢而持久大量地产生N0，过量的NO产生和释放，加重神经元损害。因此，降低诱导型NOS 的产生可明显减少NO的释放，从而降低NO的细胞毒性作用，起到保护脑细胞的作用。本实验的研究结果表明，大鼠脑缺血再灌注损伤后，脑组织中NO和NOS含量显著 增加，说明NO和NOS参与了脑缺血再灌注损伤的发病机制，给予本发明药物治疗后，NO和 NOS含量明显下降。表明本发明药物通过对NOS活性和NO含量进行调节从而发挥脑缺血再 灌注损伤的保护作用。脑缺血及再灌注损伤可导致脑细胞膜脂质过氧化反应，产生过多的氧自由基，损 伤脑细胞膜。脑缺血时由于组织氧和能量代谢的物质供应不足，ATP生成减少，离子泵失效， Na+-K+-ATP酶活性降低，使大量Na+内流、K+外流，Cl_和H20被动进入细胞内，引起神经细胞 急性渗透性肿胀死亡。Na+内流和K+外流导致细胞膜电位下降产生去极化，电压依赖性Ca2+ 通道开放，Ca2+大量内流；同时由于K+、蛋白激酶C及递质的释放等作用，受体依赖性Ca2+通 道开放，Ca2+大量内流。细胞内钙超载可导致氧自由基产生增加、花生四烯酸代谢增强、兴奋 性氨基酸递质释放增加等，兴奋性氨基酸又可引起细胞内Ca2+超载造成神经细胞凋亡。其 中氧自由基增加是缺血再灌注损伤的一个重要因素。各种氧自由基攻击生物膜中的不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用，形成一系列 的脂质自由基及其降解产物MDA。MDA作为氧自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧 化反应的代谢产物，其含量的变化可间接地反映组织中氧自由基含量变化。SOD是细胞内主要的对抗氧自由基的酶促防御系统，它通过歧化方式清除超氧阴 离子自由基，保护生物体免受自由基的攻击。SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基 的能力。因此，本发明药物可显著减少缺血区脑组织的过氧化脂质MDA，NO含量，提高大鼠 脑组织中SOD含量，增加清除自由基的能力，降低NOS活性，可减轻自由基反应对脑组织的
15损害。由此可见，本发明药物抑制自由基的生成等多种途径，保护细胞膜性结构，有助于降 低脑血管通透性以及改善血液流变学指标.改善脑部微循环，对抗脑缺血再灌注后氧自由 基对脑组织的损害作用而发挥其对脑的保护作用。可用于治疗或预防缺血性脑病、脑梗塞、 脑血栓及其后遗症、改善脑部微循环以及潜在的防治白内障的作用，并用于制备治疗和预 防相应疾病的药物或健康用品。葛根素结晶水合物的β受体阻滞作用葛根素结晶水合物溶解适当的溶媒中、或 在体内失去结晶水释放出葛根素、或者在体内直接作用相应靶器官或部位。而葛根素能阻 滞异丙肾上腺素使猫的股静脉对甲氧明引发的收缩所产生的舒张作用，呈剂量依赖性，与 普奈洛尔作用相似，表明葛根素对猫离体血管的作用是β受体阻滞作用。另外，葛根素对 离体豚鼠心房肌β 1受体也有较显著的拮抗作用，对豚鼠气管条β 2受体拮抗则需较大浓 度，显示其对β 1受体的选择性强于β2受体。动物实验分别从离体器官和整体动物水平 表明葛根素为一种β受体拮抗剂。已知β受体的效应器为腺苷酸环化酶，受体激动剂使 之激活，拮抗剂则使之抑制，葛根素与β受体结合后能完全抑制肾上腺素对腺苷酸环化酶 的激活作用。葛根素对正常和高血压动物都有一定的降压作用。静注葛根素，可使麻醉狗出现 剂量依赖性的血压快速下降，作用维持左右。腹腔注射葛根素能明显降低清醒自发高血压 大鼠的血压并减慢心率。葛根素对由眼球结膜下注射地塞米松引起的家兔眼高压模型有降低眼内压的作 用，作用强度和药物浓度之间有相关性。而且葛根素滴眼液对兔耳缘静脉快速注射葡萄糖 而引起的眼压升高有抑制作用，与噻吗洛尔滴眼液相比作用相似，表明葛根素滴眼液一种 较为理想的抗青光眼药物。有临床实验发现，葛根素治疗青光眼对绝大多数原发性开角型、 闭角型和继发性青光眼均有降低眼内压的作用；葛根素还能通过改善微循环和视网膜功能 来防治白内障。葛根素的β受体阻滞作用使得葛根素结晶水合物表现出对高血压的降压作用、 降低青光眼的眼内压作用以及抗心律失常作用等的用途。滴注葛根素能对抗肾上腺素引起的麻醉小鼠肠系膜微循环障碍；对视网膜动脉阻 塞患者在应用葛根素治疗同时进行视网膜荧光造影可见微循环时间缩短，同时发现葛根素 有明显的增进视力，扩大视野等作用，另外，葛根素还通过改善血液流变学指标如降低全血 比粘度，红细胞电泳，血球压积和纤维蛋白原来防治视网膜动脉阻塞。用葛根素注射液治疗 突发性耳聋的70%患者在用药，2周内甲皱微循环一直处于良好状态，听力有不同程度的 提尚。60例静滴葛根素的椎-基底动脉供血不足的患者，症状改善明显。葛根素可抑制 动脉粥样硬化，促使血管软化，还可通过对ΤΧΒ2、NO、ET等的影响，调节脑血流量，改善脑循 环。改善血液流变学的指标，防治颈椎病葛根素可降低血液粘滞度，减少红细胞压积，缩短 红细胞电泳时间，减慢血沉和降低纤维蛋白原含量。有人应用葛根素注射液辅助治疗颈椎病，结果治疗组临床总有效率为98%，与 对照组比较差异非常显著；治疗组用药后症状与体征消失时间缩短，血液流变学检测指标 全血粘度、血浆粘度、纤维蛋白原和血沉降水平治疗后明显降低。葛根素改善脑微循环障碍、防治椎-基底动脉缺血性眩晕、治疗颈椎病，这使得葛根素结晶水合物将表现出改善脑微循环障碍，防治椎_基底动脉缺血性眩晕、治疗颈椎病 的作用。研究发现，葛根素腹腔注射可显著降低大鼠酒精摄入量，机制可能与其抑制线粒 体醛糖还原酶有关。另外，有人发现葛根素是苯二氮卓受体的拮抗剂或部分激动剂，乙醇的 一些药理作用是通过脑细胞苯二氮卓受体发挥的。葛根素静注于麻醉或清醒狗的冠状动脉，均能使冠状血管血流量增加，血管阻力 降低，其作用随着剂量的增加而加强。葛根素可使心脏搏动的速率减慢，心肌收缩力降低， 但并不会使缺血区侧支冠状动脉的血流量减少，葛根素对缺血心肌的作用是通过降低外侧 支冠状动脉阻力而产生的。另外，它可对抗垂体后叶素引起的大鼠急性心肌缺血，可能是扩 张冠状动脉血管的结果。葛根素能明显降低缺血再灌注时心肌乳酸的生成，降低氧耗量和 肌酸磷酸激酶释放量，对缺血再灌注后心肌的超微结构亦有所改善。有人应用葛根素治疗 冠心病，着重观察血液流变学，动态心电图、常规导联心电图，结果各项指标较治疗前有明 显改善，表明葛根素能有效降低冠心病患者血液流变性，扩张血管，改善心肌缺血，是一种 安全有效的抗心肌缺血的药物。由于葛根素结晶水合物的在体内体外的释放，将表现出苯二氮卓受体的拮抗剂或 部分激动剂的特性，也将显著降低大鼠酒精摄入量；也将有效降低冠心病患者血液流变性， 扩张血管，改善心肌缺血，成为一种安全有效的抗心肌缺血的药物，这从本发明的试验中也 有相应的证据。文献报道以葛根素静注治疗II型糖尿病患者，发现葛根素有助于改善血栓源性 微量清蛋白尿的滤出，延缓或阻止糖尿病肾微血管病变的发生发展。于健等应用葛根素治 疗的48例II型糖尿病患者进行观察，葛根素具有明显的降低血糖、改善胰岛素抵抗作用， 认为葛根素注射液不仅是治疗II型糖尿病患者胰岛素抵抗较为理想的药物；对糖尿病周 围神经病变也有较好的疗效。葛根素一方面可能是通过扩张血管，改善微循环，增加血流， 增强血液循环的能力而促进胰岛素的生物效能，即改善胰岛素的敏感性；另一方面，葛根素 通过有效降低全血粘度，增强红细胞的变形能力，提高红细胞膜弹性，使其结构和物理性能 改善，进而加快物质运输及使葡萄糖和胰岛素跨膜能力，进一步改善II型糖尿病患者的胰 岛素敏感性面起到降糖作用。葛根素的糖尿病及其并发症的治疗作用使得葛根素结晶水合物表现出相应的治 疗作用以及制备相应预防和治疗药物等的用途。此外，本发明的药物对胃癌等肿瘤的多药耐药的逆转等作用也将可用于制备相应 的治疗或预防疾病的药物。可以理解，很多细节的变化是可能的，这并不因此限制本发明范围和精神，本发明 并不限于上述实施例。
1权利要求
一种心脑血管及眼科药物，其特征在于葛根素结晶水合物，分子式为C21H20O9·n H2O，n＝0.8～1.2。
2.根据权利要求1所述的心脑血管及眼科药物，其特征在于葛根素结晶水合物，分子 式为 C21H2tlO9 · η H2O, η = 0. 95 1. 0。
3.根据权利要求1所述的心脑血管及眼科药物，其特征在于葛根素结晶水合物为葛 根素1水合物，分子式为C21H2tlO9 · H2O0
4.心脑血管及眼科药物制备方法，其特征在于其制备方法包括如下方法，方法Α.在反应容器中，将葛根粉用水或C1-C6的低分子醇一种或几种进行冷提、超 声提取、微波提取或回流提一次至数次合并，过滤，微孔滤膜或者陶瓷膜过滤，滤液浓缩，浓 缩得葛根浸膏，加水，用酸调节ΡΗ3-5，再用碱或者碳酸钠或者碳酸氢钠一种或者数种调节 PH为6-9之间，过滤，然后用C3-C6的低分子醇或C3-C8的低级酮，如异己酮、或C2-C8的 低级酯的一种或几种为溶剂进行萃取，萃取液蒸干得固体，加水，再用C3-C6的低分子醇或 C3-C8的低级酮，如异己酮、或C2-C8的低级酯的一种或几种为溶剂进行萃取，浓缩，静置， 过滤，以水、C1-C6的低级卤代烃、C3-C8的低级酮，如丙酮、C2-C8的低级酯、C1-C6的低分 子醇如甲醇、乙醇、异丙醇，C1-C6的低级脂肪酸、四氢呋喃、乙腈的一种或几种为结晶溶剂， 进行重结晶一次或数次，过滤，水洗，将所得的固体干燥即得葛根素结晶水合物；或者方法B.葛根浸膏或葛根总黄酮或葛根的水提浓缩物或葛根的醇水提取浓缩物， 加水或C1-C6的低分子醇一种或几种，微孔滤膜(包括陶瓷膜)过滤，过中性氧化铝层析 柱、硅胶层析柱及大孔树脂、或聚酰胺柱层析或葡萄糖凝胶树脂，用水或C1-C6的低分子 醇、C1-C6的低级卤代烃、一种或几种进行洗脱，浓缩或者超滤膜浓缩，静置，过滤，以水、 C1-C6的低级卤代烃、C3-C8的低级酮，如丙酮、C2-C8的低级酯、C1-C6的低分子醇如甲醇、 乙醇、异丙醇，C1-C6的低级脂肪酸、四氢呋喃、乙腈的一种或几种为结晶溶剂，进行重结晶 一次或数次，过滤，水洗，将所得的固体干燥即得即得葛根素结晶水合物；或者方法C.葛根浸膏或葛根总黄酮或葛根的水提浓缩物或葛根的醇水提取浓缩物， 加水或C1-C6的低分子醇一种或几种，经过微孔滤膜、中空纤维的膜、陶瓷膜、超滤膜、纳滤 膜的一种或几种的一次或数次过滤或浓缩，以水、C1-C6的低级卤代烃、C3-C8的低级酮，如 丙酮、C2-C8的低级酯、C1-C6的低分子醇如甲醇、乙醇、异丙醇，C1-C6的低级脂肪酸、四氢 呋喃、乙腈的一种或几种为结晶溶剂，进行重结晶一次或数次，过滤，水洗，将所得的固体干 燥即得葛根素结晶水合物；或者方法D.葛根浸膏或葛根黄酮或葛根的水提浓缩物或葛根的醇水提取浓缩物，经 过中空纤维的膜、陶瓷膜、超滤膜、纳滤膜的一种或几种的一次或者多次过滤或浓缩，以水、 氯仿、C3-C6的低级酮，如丙酮、C2-C8的低级酯、C1-C6的低分子醇如甲醇、乙醇、异丙醇， C1-C6的低级脂肪酸、四氢呋喃、乙腈的一种或几种为溶剂，置于磁通量为0. 1-5特斯拉的 磁场下进行一次或多次结晶，过滤，水洗，干燥，即得葛根素结晶水合物；上述各方法中的不同步骤可以交替使用，以便制备葛根素水合物。
5.心脑血管及眼科药物的用途，其特征在于在制备注射用冻干粉针制剂、或者小水 针注射剂，大输液制剂、经肠道给药制剂，包括片剂、胶囊、颗粒剂、经眼部给药制剂，包括滴 眼液、眼用凝胶上的应用。
6.心脑血管及眼科药物的用途，其特征在于在制备用于高血压、冠心病、肺心病、心衰、心绞痛、心肌梗死、心源性休克、心律失常、心肌炎、缺血性脑病、脑梗塞、脑血栓及其后 遗症、改善脑循环、椎-基底动脉供血不足性眩晕、下肢深静脉血栓后综合征、糖尿病、糖尿 病并发症糖尿病肾病，糖尿病周围神经病变、视网膜病变、视网膜动脉阻塞、静脉阻塞、突发 性耳聋、降低眼内压，防治青光眼，调节血脂的治疗或预防的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及具有抗高血压、冠心病、脑梗塞、脑血栓及其后遗症、改善脑循环、椎-基底动脉供血不足性眩晕、下肢深静脉血栓后综合征、糖尿病、糖尿病并发症糖尿病肾病，糖尿病周围神经病变、视网膜病变、视网膜动脉阻塞、静脉阻塞、突发性耳聋、防治青光眼等疾病的心脑血管及眼科药物——葛根素结晶水合物及其制备和用途，该衍生物具有较好的存储稳定性，适用于制备对制备心脑血管及眼科的治疗或预防的药物中的应用。
文档编号A61P3/10GK101926788SQ200910062770
公开日2010年12月29日 申请日期2009年6月18日 优先权日2009年6月18日
发明者刘力 申请人:刘力