专利名称：唾液酸(α-(2→6))-D-吡喃糖衍生物及其合成方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及糖类缀合物，尤其涉及唾液酸(α - O — 6)) -D-氨基吡喃糖衍生物以及由该衍生物与蛋白质或多肽所形成的缀合物以及上述化合物的合成方法，本发明还涉及这些化合物在制备抗肿瘤药物中的用途，属于抗肿瘤糖疫苗领域。
背景技术：
近年来，基于糖抗原的抗肿瘤疫苗成为一个研究的热点(Keding，S. Carbohydrate vaccines. Chem. Eng. News. 2004，82，31-35.)。其中抗原 STn 是一个含有唾液酸的二糖结构，在人类乳腺癌、结直肠癌、卵巢癌、前列腺癌多有表达，而在正常组织中表达极少 (Holmberg, L. ExpertRev. Vaccines 2004，3，655—663.)，因而成为月中瘤免疫治疗的重要靶点。加拿大Biomira公司以此为基础研发了 STn-KLH(钥孔虫戚血蓝蛋白)偶联物 Theratope (后来被Merk收购)，用于预防结直肠癌和乳腺癌转移。但是在进行III期临床试验时发现单独应用Theratope 不能改善疾病进展时间和总体存活率，而仅当将其和激素合用时才可以改善疾病进展时间，使其由单独应用激素的5. 8个月提高到8. 3个月。 由于Theratope 的抗肿瘤活性依赖于激素的存在，使其抗肿瘤活性打了折扣(Holmberg， L. ExpertRev. Vaccines 2004，3，655-663.)。和Theratope 遇到的困难类似，现在抗肿瘤糖疫苗遇到的普遍问题就是疫苗不能在体内产生满意的免疫应答，目前采用的最普遍的方法是将糖抗原偶联在载体蛋白上，但这种方法对于肿瘤抗原并不太有效，Theratope 就是这样的一个例子。
发明内容
本发明首先所要解决的技术问题是克服抗肿瘤糖疫苗所普遍存在的免疫活性较低等缺陷，提供新的肿瘤相关糖抗原修饰物，从而提供一类对于肿瘤的治疗具有较好活性的糖-蛋白(多肽)缀合物。本发明所要解决的另一技术问题是提供一种合成上述糖-蛋白(多肽)缀合物的方法。本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的本发明首先提供了唾液酸(a— 氨基吡喃糖衍生物，其结构式为式(I)
所示
权利要求
1.唾液酸(α-O —6))-D-氨基吡喃糖衍生物或其盐，其结构式为式(I)所示其中，R1选自酰胺基、-ΝΗ2、43或-0Η;优选的，所述的酰胺基选自-NH C(O) CHxCly, -NHC (0) CHxFy, -NHC (0) CHxBry, -NHC (0) H、-NHC (0) CaH2a+1、-NHC (0) CaH2aOH, -NHC (0) CbH21ri、-NHC (0) CbHa_3 ；其中，χ或y选自0、1、2或3，且x+y等于3;a选自1至20中的任一整数；b选自2至20中的任一整数；&选自酰胺基、-NH2, -N3或-OH ；优选的，所述酰胺基选自-NHC(O)CHpCltp -NHC(O) CHpFq, -NHC (0) CHpBrq, -NHC(O) H、-NHC (0) CaH2a+1、-NHC (0) CaH2aOH, -NHC (O)CbH2b^1, -NHC(O) CbH2b_3;其中，P或q选自0、1、2或3，且p+q等于3;a选自1至20中的任一整数；b选自2 至20中的任一整数；R3选自_C02H、-CH2OH, -CO2M, -C(O)NHOH或氢，其中，M为烷基、芳基或杂环；R3的空间取向为平伏键或直立键；R4选自带有双键、炔键、叠氮、醛基、保护缩醛、马来酰亚胺基、巯基、保护巯基、硒基、保护硒基、-NH2或-ONH2的取代基；优选的，R4是烯丙基；R5为OH ；其空间取向为直立键或者平伏键；&选自氢或β-半乳糖基。
2.一种糖缀合物，其特征在于由权利要求1所述的唾液酸(α-O —6))-D-氨基吡喃糖衍生物或其盐与多肽或蛋白质相缀合而得到。
3.按照权利要求1所述的唾液酸(a- — 6))-D-氨基吡喃糖衍生物或其盐，其特征在于所述的盐是碱加成的盐。
4.一种合成权利要求1所述唾液酸(α-O —6))-D-氨基吡喃糖衍生物或其盐的方法，包括以唾液酸5-位氨基裸露和/或氨基半乳糖(葡萄糖)的2-位氨基裸露的化合物为原料，在反应助剂作用下，在溶剂中使用酸酐、羧酸或羧酸酯进行酰化反应，即得。
5.按照权利要求4所述的方法，其特征在于所述原料包括烯丙基4-0-(5-氨基-3， 5- 二去氧-α -D-吡喃神经氨酸基)-2-乙酰氨基-2-去氧-α -D-吡喃半乳糖苷，烯丙基 4-0- (5-乙酰氨基-3，5- 二去氧-α -D-吡喃神经氨酸基)_2_氨基_2_去氧-α -D-吡喃半乳糖苷或烯丙基4-0- (5-氨基-3，5- 二去氧-α -D-吡喃神经氨酸基)_2_氨基_2_去氧- a -D-吡喃半乳糖苷；所述酸酐包括脂肪酸的酸酐，其脂肪链上含有氟原子、氯原子或溴原子的取代基；所述羧酸包括脂肪酸的羧酸，其脂肪链上含有氟原子、氯原子或溴原子的取代基；所述羧酸酯包括脂肪酸的羧酸酯，其脂肪链上含有氟原子、氯原子和溴原子的取代基；所述反应助剂采用有机碱或无机碱；所述溶剂是水或是有机溶剂。
6.按照权利要求5所述的方法，其特征在于所述的酸酐包括乙酸酐、丙酸酐、正丁酸酐、异丁酸酐或正己酸酐；所述的羧酸包括单氟乙酸、二氟乙酸、三氟乙酸、单氯乙酸或二氯乙酸；所述羧酸酯包括单氟乙酸甲酯、二氟乙酸甲酯、三氟乙酸甲酯或二氯乙酸甲酯。
7.-种合成权利要求2所述糖缀合物的方法，包括(1)将权利要求1所述的唾液酸(a - — 6))-D-氨基吡喃糖衍生物或其盐经臭氧氧化得到含有醛基的二糖；( 将步骤(1)所得到的产物在还原胺化的条件下与载体蛋白质或多肽进行偶联，即得。
8.权利要求1所述的唾液酸(α-O—6))-D-氨基吡喃糖衍生物或其盐在制备抗肿瘤药物中的用途。
9.权利要求2所述糖缀合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
10.一种治疗肿瘤的疫苗，由有效量的权利要求2所述的糖缀合物和药学上可接受的载体或辅料组成。
全文摘要
本发明公开了N-酰基修饰的唾液酸(α-(2→6))-D-氨基吡喃糖衍生物及其合成方法和应用。本发明以D-氨基半乳糖(葡萄糖)和唾液酸为原料，合成了式(I)所示的唾液酸(α-(2→6))-D-氨基吡喃糖衍生物，并将其与载体蛋白质或多肽进行偶联得到了糖蛋白(糖肽)缀合物。本发明化合物的结构中用衍生的酰基代替了乙酰基，结构新颖，在抗肿瘤疫苗方面表现出了很好的活性。小鼠实验表明，通过结构衍生，基于糖抗原的疫苗能够产生更有效的免疫反应，产生更多的抗体，IgG/IgM也明显的提高，这些抗体特异地识别表达STn的肿瘤细胞，从而达到抗肿瘤的作用。由于STn抗原表达在多种肿瘤上，本发明应用的范围是广泛的。
文档编号A61K31/385GK102276662SQ201010202388
公开日2011年12月14日 申请日期2010年6月9日 优先权日2010年6月9日
发明者叶新山, 杨帆, 郑秀静 申请人:北京大学