带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物及其制备方法和其应用的制作方法

专利名称：带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物及其制备方法和其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物化学研究领域，具体涉及一类新型的带有一氧化氮供体的芳香酸 前体药物，以及它的制备方法和在抗血栓或抗脑缺血疾病中的应用。
背景技术：
随着人口老龄化的加剧、生活节奏加快、生活环境和饮食习惯的改变，心脑血 管疾病的发病率和死亡率呈逐年上升趋势，日益危害着人类生命健康。血栓的形成在 心脑血管疾病、动脉粥样硬化、高血压和糖尿病并发症等的发病和发展过程中起着重要 的作用(Viles-Gonzalez JF, Fuster V, Badimon JJ. Links between inflammation and thrombogenicity inatherosclerosis[J]. Curr. Mol. Med. 2006,6 489-499.), 而 血小板聚集和凝血功能异常是血栓形成的主要诱因(Esmon CT. Regulation of blood coagulation[J] · Biochim. Biophys. Acta 2000，1477 :349_360.)。常用的活血化瘀中药如当归、川芎、干草以及黄芪中，含有多种芳香酸类成分，例 如阿魏酸、咖啡酸、肉桂酸、异阿魏酸以及香豆酸等。这些芳香酸具有重要的抗血栓活性，例 如阿魏酸能明显抑制血小板聚集、抑制羟色胺、血栓素(TXA2)样物质的释放，选择性抑制 TXA2合成酶活性，使前列环素PGi2/TXA2比率升高。其抑制血栓素的机制可能为一是选 择性抑制血栓素合成酶；二是拮抗血栓素的作用；三是通过抑制磷脂酶A2(PLA2)阻止花生 四烯酸游离，从而阻止TXA2的生成(胡益勇；徐晓玉.阿魏酸的化学和药理研究进展.中 成药，2006，28 (2) =253-255.)。另外，实验研究显示其它芳香酸类化合物包括咖啡酸、原儿 茶酸等都具有抗血小板聚集的作用(刘岱琳，王欣，王乃利，等.酚酸类化合物体外抗血小 板聚集活性探讨·沈阳药科大学学报，1998，15 (1) =25-28.)。尽管芳香酸类化合物具有多种药理活性，但是，由于他们的分子亲水性较强，较 难透过生物膜脂质双分子层而影响其药效作用(王汝涛，周四元，张峰，等.阿魏酸乙酯 对过氧化氢损伤人血管内皮细胞的保护作用[J].中国临床药理学与治疗学，2004，9(7) 763-765.)。一氧化氮(Nitric Oxide, NO)是一种具有多种生物学活性的气体小分子物质， 在体内由NO前体物质L-精氨酸(L-Arg)在一氧化氮合酶(NOS)的催化下与氧分子作用 产生 NO 禾口 L-月瓜氛酸(Marietta M A, Hurshman A R, Rusche KM. Catalysis by nitric oxide synthase [J], CurrOpin Chem Biol，1998，2 (5) :656_663.)。NO 存在于人体各种 组织和细胞中，广泛参与调节各种生理病理过程(Ignarro L J，Murad F. Nitric Oxide Biochemistry, Molecular Biology, andTherapeutic implications[Μ] · Academic :San Diego, CA, 1995.)。在心血管系统方面，NO具有扩张血管，抑制血小板聚集并粘附于血管内 皮的作用，因此在维持血管张力、血压及血流动力学方面起着重要作用。

发明内容
发明目的本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术的不足，对具有抗血栓作 用的天然芳香酸化合物进行结构修饰，将其羧酸基团与一氧化氮供体结合，得到脂溶性较 好的一氧化氮供体型芳香酸前药，本发明另一个目的是提供该带有一氧化氮供体的芳香酸 前体药物的制备方法和其在制备抗血栓或抗脑缺血疾病中的应用。技术方案为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物，它们是具有通式(I )所示的化合物 其中A代表下列官能团苯基、4-羟基苯基、3，4-二羟基苯基、3-甲氧基_4_羟基 苯基或3-羟基-4-甲氧基苯基，R1代表C2 C8烷基、C2 C8烯烃基、C2 C8炔烃基、苯基 或取代苯基、芳杂环或取代芳杂环。作为优选方案，以上R1所述的取代苯基是指由1个或多个选自于羟基、C1 C6 烷基、C1 C6烷氧基取代的苯基，各取代基可以相同或不同，作为更优的方案，取代苯基 为-PhCH2-(邻，间，对)；作为优选方案，所述芳杂基是指由1至4个杂原子组成的5至7元芳香杂环，所述 杂原子独立的选自0、S或N，如呋喃、批咯、吡啶、嘧啶、批唑、咪唑、哌啶、噻酚等；所述取代 芳杂基是指由1个或多个选自于C1 C6烷基、C1 C6烷氧基或卤素取代的芳杂基，各取代 基可以相同或不同。本发明提供的另一种带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物，它们是具有通式 (II )所示的化合物 其中A代表下列官能团苯基、4-羟基苯基、3，4-二羟基苯基、3-甲氧基_4_羟基 苯基或3-羟基-4-甲氧基苯基，R2代表-PhCH2-(邻，间，对)或-Ph-(间，对)。本发明提供的另一种带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物，它们是具有通式 (III)所示的化合物 其中A代表下列官能团苯基、4-羟基苯基、3，4-二羟基苯基、3-甲氧基_4_羟基 苯基或3-羟基-4-甲氧基苯基，R3代表-(CH2)n-,其中η为3 5 ；CH2C ^ CCH2 ；CH2CH = CHCH2 ； CH2CH (CH3) CH2CH2 ； CH2CH2OCH2CH2 ；-PhCH2-(邻，间，对)或-Ph-(间，对)。本发明提供的通式(I )所述的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物的制备方法， 具体包括以下步骤取芳香酸类化合物，如苯丙烯酸(肉桂酸)，4-羟基苯丙烯酸(4-香豆酸)、3， 4- 二羟基苯丙烯酸(咖啡酸)、3_甲氧基-4-羟基苯丙烯酸(阿魏酸)或3-羟基-4-甲 氧基苯丙烯酸(异阿魏酸)，在三乙胺的催化作用下，先与二溴代物BrR1Br反应得到缩合物 (I a)，缩合物(I a)再与硝酸银反应得到通式(I )所述的硝酸酯类前体药物，其中R1代表C2 C8烷基、C2 C8烯烃基、C2 C8炔烃基、苯基或取代苯基、芳杂 环或取代芳杂环。其中所述取代苯基是指由1个或多个选自于羟基、C1 C6烷基或C1 C6烷氧基 取代的苯基，各取代基可以相同或不同，作为更优的方案，取代苯基为-PhCH2-(邻，间，对)。作为优选方案，所述芳杂环取代基是指由1至4个杂原子组成的5至7元芳香杂 环，所述杂原子独立的选自0、S或N，如呋喃、吡咯、吡啶、嘧啶、吡唑、咪唑、哌啶、噻酚等；所 述取代芳杂环取代基是指由1个或多个选自于C1 C6烷基、C1 C6烷氧基或卤素取代的 芳杂环基，各取代基可以相同或不同。其反应方程式为 以上制备方法中，芳香酸和二溴代物BrR1Br的反应摩尔比为1 2 1 4，缩合 物(I a)与硝酸银反应的摩尔比为1 3 1 4。本发明提供的通式(II )所述的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物的制备方法， 具体包括以下步骤a、苯环上没有羟基的芳香酸类化合物，如苯丙烯酸(肉桂酸)，则直接与含羟基的 呋咱氮氧化合物(II P)在二环己基碳酰亚胺(DCC)催化下缩合反应制得；其中苯丙烯酸和 呋咱氮氧化合物(II P)的摩尔用量比为1 2 1 3。其反应方程式为 b、苯环上含有羟基的芳香酸类化合物，如阿魏酸、异阿魏酸、咖啡酸、4_香豆酸等， 首先用乙酰基或氯乙酰基等保护基团，优选氯乙酸乙酯和苯环上的羟基反应，把羟基保护 起来，得到化合物II a，然后化合物II a再与呋咱氮氧化合物(II ρ)在二环己基碳酰亚胺 (DCC)催化下缩合反应，得到中间产物II b，最后II b在醇钠、醇胺等碱性催化剂条件下，优 选乙醇胺，脱除酰基保护基得到通式(II )化合物，其中含有羟基的芳香酸类化合物和氯乙 酸乙酯保护基团的摩尔用量比为1 1 3，II a和呋咱氮氧化合物(II P)的摩尔用量比 为 1 1 1 3。
其反应方程式为 以上通式(II )所述化合物制备方法中所述的呋咱氮氧化合物(II P)的结构式
为 其中R2代表-PhCH2-(邻，间，对)或-Ph-(间，对)。本发明提供的通式(III )所述的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物的制备方法， 具体包括以下步骤a、苯环上没有羟基的芳香酸类化合物如苯丙烯酸(肉桂酸)，则直接与含羟基的 呋咱氮氧化合物(IIIp)在二环己基碳酰亚胺(DCC)催化下缩合反应制得；其中苯丙烯酸和 呋咱氮氧化合物(IIIp)的摩尔用量比为1 2 1 3。其反应方程式为
b、苯环上含有羟基的芳香酸类化合物，如阿魏酸、异阿魏酸、咖啡酸、4-香豆酸等， 首先用乙酰基或氯乙酰基等保护基团，优选氯乙酸乙酯和苯环上的羟基反应，把羟基保护 起来，得到化合物II a，然后化合物II a再与呋咱氮氧化合物(IIIp)在二环己基碳酰亚胺 (DCC)催化下缩合反应，得到中间产物Illb，最后IIIb在醇钠、醇胺等碱性催化剂条件下，优 选乙醇胺，脱除酰基保护基得到通式(III)化合物，其中含有羟基的芳香酸类化合物和氯乙 酸乙酯保护基团的摩尔用量比为1 1 3，II a和呋咱氮氧化合物(IIIp)的摩尔用量比 为 1 1 1 3。其反应方程式为 以上通式(III)所述化合物的制备方法中，所述的呋咱氮氧化合物(IIIp)的结构 式为 其中R3 代表 _ (CH2) η-，η 为 3 5 ；CH2C = CCH2 ；CH2CH = CHCH2 ；CH2CH (CH3) CH2CH2 ； CH2CH2OCH2CH2 ；-PhCH2-(邻，间，对)或-Ph-(间，对)。本发明提供的通式(I )、( II )或(III)所述的带有一氧化氮供体的芳香酸前体 药物的盐，它是将通式(I )、( II )或(III)所述的化合物与盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙 酸、三氟乙酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、马来酸、苯磺酸、琥珀酸、戊二酸或富马酸反应 制备得到。本发明提供的通式(I )、( II )或(III)所述的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物或其盐在制备抗血栓或抗脑缺血疾病药物中的应用。作为优选方案，将带有一氧化氮供体的芳香酸化合物或其盐和药学上可接受的载 体制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、喷雾剂、注射剂、微囊或透皮控释贴剂剂型的药物。本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物或其盐制成片剂时，把带有一氧 化氮供体的芳香酸化合物或其盐和载体乳糖或玉米淀粉，需要时加入润滑剂硬脂酸镁，混 合均勻，然后压片制成片剂。本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物或其盐制成 胶囊剂时把带有一氧化氮供体的芳香酸化合物或其盐和载体乳糖或玉米淀粉混合均勻，整 粒，然后装胶囊制成胶囊剂。本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物或其盐制成 颗粒剂时，把组合物和稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，干燥，制成颗粒剂。如把本发 明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物或其盐制成注射液时，取带有一氧化氮供体的 芳香酸化合物或其盐加入增溶剂，搅拌均勻，80°C加热30分钟，过滤，调节pH值，用垂熔玻 璃漏斗或其它滤器过滤至澄明，灌装，在100至115°C灭菌30分钟制成注射液。有益效果本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物和现有技术相比具 有以下优点1、本发明提供的系列带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物，对具有抗血栓作用强 的天然芳香酸化合物进行结构修饰，将其羧酸基团与一氧化氮供体结合，得到脂溶性好的 一氧化氮供体型芳香酸前药，本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物的溶解性 好，可有效透过生物膜脂质双分子层，可提高人体服用后生物利用度，并且前体药物在体内 分解为芳香酸化合物和释放出一氧化氮，可以有效发挥芳香酸化合物抗血栓、抗血小板聚 集、抗动脉粥样硬化等药理活性，且释放的一氧化氮能够协同芳香酸化合物扩张血管，抑制 血小板聚集，并具有维持血管张力、稳定血压等作用。本发明提供的带有一氧化氮供体的芳 香酸前体药物不良反应低，用药更安全，且带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物可以和多 种酸反应制备得到盐化物，并可制成多种药物剂型，方便临床用药。2、本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物的制备方法，以天然芳香酸 化合物和一氧化氮供体缩合反应制备得到，本发明提供的制备方法，可操作性强，工作效率 高，且成品得率高、纯度高。


图1为本发明所述的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物通式(I )、( II )和 (III)的结构示意图。
具体实施例方式根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实 施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限 制权利要求书中所详细描述的本发明。实施例11、制备(E)-3_(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_3_溴丙酯(I la)取阿魏酸5. 0g(25. 8mmol)和1，3_ 二溴丙烷(IOOmmol)溶于150mL丙酮中，加入 IOmL三乙胺，60°C加热搅拌4h，取反应液过滤，浓缩，浓缩物上硅胶柱色谱分离，以乙酸乙酯石油醚=1 4为洗脱剂洗脱，得到单溴代代产物I la，暗红色油状物，收率55.8%。1H 匪R(CDCl3) δ :2.26(m，2H，CH2), 3. 52 (t, J = 3·7Ηζ，2Η，CH2Br), 3. 94(s,3H, OCH3), 4. 34 (t, J = 3. 7Ηζ，2Η，COOCH2), 5. 83 (s, 1Η, 0Η), 6. 30 (d, J = 9. 5Hz, 1Η, C = CH)， 6. 92 (d, 1Η, Ar-H)，7· 06-7. 15 (m，2H，Ar-H) ,7. 65 (d, J = 9·5Ηζ，1Η，CH = C). ESI-MS 353[Μ+Κ]+。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_3_硝酰氧基丙酯(I 1)取由1 制备得到的 I Ia (0. 7mmol)溶于 20mL 乙腈中，加入 AgNO3O. 6g(2. 5mmol)， 50°C避光搅拌6h。取反应液过滤，浓缩，以硅胶柱色谱分离(洗脱剂为乙酸乙酯石油醚= 1 3 1 2)得到黄色油状产物，收率29.9%。1H NMR(CDCl3) δ :2· 13-2. 19(m，2H，CH2)，3· 94 (s，3H，OCH3) ,4. 33 (t, J = 6. IHz, 2H, COOCH2)，4. 59-4. 64 (m，2H，CH2ONO2), 5. 91 (brs, 1H, OH) ,6. 28 (d, J = 15·9Ηζ，1Η，C = CH), 6. 92 (d, 1Η, Ar-H), 7. 65 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS :320[M+Na] +。实施例21、制备(Ε)-3_(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_4_溴丁酯(I 2a)参照实施例1中I Ia制备方法，由阿魏酸与1，4_ 二溴丁烷反应制得白色固体，收 率 43. 0%,Μρ 81. 9-82. 3°C。1H NMR(CDCl3) δ :1· 87-2. 07 (m，4Η，CH2)，3· 47 (t, J = 6. 4Ηζ, 2Η, CH2Br)，3· 93(s，3H，OCH3) ,4. 24 (t, J = 6·4Ηζ，2Η，COOCH2)，5· 85 (s，1Η，OH) ,6. 28 (d, J = 15. 9Hz,1Η, C = CH),6. 92(d,1Η, Ar-H),7. 62 (d, J = 15. 9Hz,1Η, CH = C). ESI-MS 351[M+Na]+。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_4_硝酰氧基丁酯(I 2)参照实施例1中I 1制备方法，由I 2a和AgNO3反应制得白色粉末，收率91. 7%, Mp 58. 1-62. 7°C。1HNMr(CDCI3) δ 1. 81—1. 90 (m，4Η，CH2)，3. 93 (s，3Η，OCH3)，4. 24 (t，J = 5. 9Hz，2H，COOCH2)，4. 52 (t, J = 6. 2Hz，2H，CH2ONO2), 5. 90 (s, 1Η，0Η)，6· 28 (d, J = 15. 9Ηζ, 1Η, C = CH), 6. 92 (d, 1Η, Ar-H), 7. 62 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS :334[M+Na] +。实施例31、制备(Ε)-3_(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_5_溴戊酯(I 3a)参照实施例1中I Ia制备方法，由阿魏酸与1，5_ 二溴戊烷反应制得。白色固 体，收率 65. 8%，Mp :66. 3-66. 6°C。1H NMR(CDCl3) δ :1.58(m，2H，CH2)，1. 70 (m，2H，CH2), 1.90(m，2H，CH2), 3. 44(m，2H，CH2Br) ,3. 92(s,3H, OCH3), 4. 20 (m, 2H, COOCH2)，5· 91 (s，1H， OH), 6. 28 (d, J = 15. 9Hz，lH，C = CH)，6. 91 (d，1H，Ar-H), 7. 61 (d, J = 15. 9Hz，lH，CH = C). ESI-MS :365[M+Na] + 02、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_5_硝酰氧基戊酯(I 3)参照实施例1中I 1制备方法，由I 3a和AgNO3反应制得。青黄色结晶，收率 83. 0%，Μρ :51· 3-53. 7°C。1H 匪R(CDCl3) δ 1. 49-1. 63 (m，2Η，CH2)，1. 71-1. 84 (m，4Η，CH2)， 3. 93 (s，3H，OCH3)，4. 21 (t，J = 6. 4Hz，2H，COOCH2)，4. 47 (t，J = 6. 5Hz，2H，CH2ONO2)，5. 91 (s， 1H, 0H)，6. 28 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，6. 92 (d, 1H, Ar-H), 7. 61 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH =C). ESI-MS :348[M+Na]+。实施例41、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_6_溴己酯(I 4a)
参照实施例1中I Ia的制备方法，由阿魏酸与1，6_二溴己烷反应制得。淡黄色固 体，收率 52. 5%，Mp :50. 9-51. 4°C。1H NMR(CDCl3) δ :1. 39-1. 45 (m，4Η，CH2)，1. 65-1. 70 (m， 2H, CH2)，1. 85-1. 93 (m, 2H, CH2)，3. 41 (m, 2H, CH2Br)，3· 91 (s，3H, OCH3)，4. 19 (m, 2H, COOCH2)，
5.94 (s，ΙΗ,ΟΗ) ,6. 28 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH), 6. 91 (d, 1Η, Ar-H), 7. 61 (d, J = 15. 9Ηζ, 1Η, CH = C). ESI-MS :379[M+Na] +。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_6_硝酰氧基己酯(I 4)参照实施例1中I 1制备方法，由I 4a和AgNO3反应制得。白色粉末，收率89. 4%， Mp :64· 1-66. 6°C。1H 匪R(CDCl3) δ 1. 45—1. 49 (m，4Η，CH2)，1. 70—1. 78 (m，4Η，CH2)，3. 92 (s， 3H, OCH3), 4. 20 (t, J = 6. 5Hz，2H，COOCH2), 4. 46 (t, J = 6. 6Hz，2H，CH2ONO2), 5. 90 (s, 1H, OH), 6. 28 (d, J = 15. 9Ηζ，1Η，C = CH)，6. 91 (d，1H，Ar-H), 7. 61 (d, J = 15. 9Hz，lH，CH = C). ESI-MS :362[M+Na] + 0实施例51、制备(E)-3_(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸-(E)_4_溴_2_ 丁烯酯 (I 5a)参照实施例1中I Ia的制备方法，由阿魏酸与1，4_ 二溴_2_ 丁烯反应制得。青 白色固体,收率 10. 7%，Mp :69. 7-72. 8°C。1H NMR(CDCl3) δ :3. 92(s，3H，OCH3)，3. 97 (d，J =6. 9Hz,2H, CH2Br)，4. 71 (d，J = 5. 3Hz,2H, COOCH2)，5. 88 (s, 1H, OH)，5. 92-6. 05 (m, 2H, CH =CH)，6. 30 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，6. 91 (d, 1H, Ar-H), 7. 63 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :349[M+Na] +。2、制备(E)-3_(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_(E)_4_硝酰氧基_2_丁烯酯 (I 5)参照实施例1中I 1的制备方法，由I 5a和AgNO3反应制得。淡黄色固体，收 率 46. 2 %，Mp :71· 1-71. 9 °C。1H NMR(CDCl3) δ :3.93(s，3H，OCH3) ,4. 74(d, J = 5. IHz, 2Η, COOCH2)，4· 94 (d，J = 6·2Ηζ，2Η，CH2ONO2)，5· 92 (s，1H，OH)，6. 03-6. 12 (m，2H，CH = CH)，6. 30 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，6. 92 (d, 1H, Ar-H)，，7. 64 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C).ESI-MS :332[M+Na] + 0实施例61、制备(E)-3-[(3，4-二羟基)苯基]丙烯酸_3_溴丙酯(I 6a)参照实施例1中I Ia的制备方法，由咖啡酸与1，3_二溴丙烷反应制得。深褐色固 体，收率5%，Mp :117. 1-118. δ /Η NMR(CDCl3, 300ΜΗζ) δ :2. 13-2. 21 (m，2Η，CH2)，3. 62 (t， J = 6. 6Hz，2H，CH2Br), 4. 21 (t, J = 6. 2Hz，2H，COOCH2), 6. 26 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，
6.76 (d, 1H, Ar-H)，7. 00-7. 05 (m, 2H, 2Ar-H)，7. 50 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C) 9. 10 (s, 1H, OH),9. 57(s，1H, OH) ；ESI-MS :m/z301[M+H] +2、制备(E)-3-[(3，4-二羟基)苯基]丙烯酸_3_硝酰氧基丙酯(I 6)参照实施例1中I 1的制备方法，由I 6a和AgNO3反应制得。深黄色粉末，收率 87%，Mp :97· 2-99. 8 °C。1H WR(CDC13，300MHz)S :2.15(m，2H，CH2) ,4. 32 (t, J = 6. 4Hz, 2H，COOCH2)，4. 60 (t, J = 6. 4Hz，2H，CH20N02)，5. 62 (brs, 2H, 20H), 6. 26 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, C = CH), 6. 89 (d, lH，Ar-H)，7· 08 (m, 2Η, 2Ar-H), 7. 60 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C) ；ESI-MS m/z306[M+Na]+。
实施例71、制备(E)-3-[(3，4-二羟基)苯基]丙烯酸_3_硝酰氧基丙酯(I 7a)参照实施例1中I Ia的制备方法，由咖啡酸与1，4_ 二溴丁烷反应制得。咖啡色 粉末，收率 3. 9%，Mp :129· 7-131. 7°C。1H NMR(CDC13，300ΜΗζ) δ 1· 80-1. 93 (m，4Η，2CH2)，
3.47 (m, 2H, CH2Br), 4. 25 (m, 2H, COOCH2), 6. 25 (d, J = 15.9Hz，lH，C = CH)，6. 81 (d，1Η， Ar-H)，7. 01-7. 07 (m, 2H, 2Ar-H)，7. 59 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C) ； ESI-MS :m/z 337 [M+Na]+2、制备(E)-3-[(3，4-二羟基)苯基]丙烯酸_4_硝酰氧基丁酯(I 7)参照实施例1中I 1的制备方法，由I 7a和AgNO3反应制得。白色粉末，收率90%， Mp 108. 9-109. 1 °C。1H NMR(CDC13，300ΜΗζ) δ 1. 87 (m, 4Η, 2CH2), 4. 25 (t, J = 5. 9Ηζ,2Η, COOCH2), 4. 51 (t, J = 6. 1Ηζ，2Η，CH20N02)，5· 79-6. 09 (brs, 2Η, 20Η), 6. 25 (d, J = 15. 9Ηζ, 1Η, C = CH), 6. 83 (d, 1Η, Ar-H), 7. 01 (m, 2Η, 2Ar-H), 7. 59 (d, J = 15. 9Ηζ，1Η，CH = C)； ESI-MS :m/z320[M+Na] +实施例81、制备(E)-3-[(3，4-二羟基)苯基]丙烯酸-(E) _4_ 溴 _2_ 丁烯 酯(I 8a)参照实施例1中I Ia的制备方法，由咖啡酸与1，4_ 二溴_2_ 丁烯反应制得。深 褐色油状物，收率4. 3%。1H NMR(CDCl3, 300MHz) δ :3. 97 (d，J = 7. 0Hz，2Η，CH2Br)，4. 71 (d， J = 5. 5Hz，2H，COOCH2)，5. 95-6. 08 (m，2H，CH = CH) ,6. 28 (d, J = 15. 9Ηζ，1Η，C = CH)， 6. 88 (d, 1H, Ar-H)，7. 01-7. 07 (m, 2H, 2Ar-H)，7. 60 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C) ； ESI-MS :m/ ζ 335[M+Na]+。2、制备(E)-3_[(3，4-二羟基)苯基]丙烯酸-(E)_4_硝酰氧基_2_ 丁烯酯 (I 8)参照实施例1中I 1的制备方法，由I 8a和AgNO3反应制得。暗红色固体，收率 55. 3%, Mp 114. 7-115. I0C0 1H NMR(CDC13，300ΜΗζ) δ :4. 75 (d，J = 5. 1Hz，2Η，COOCH2),
4.94 (d, J = 6·0Ηζ，2Η，CH20N02) ,5. 82-5. 93 (m, 2Η, CH = CH)，6. 02-6. 09 (m，1Η，OH)，
6.28 (d, J = 15. 9Hz，lH，C = CH)，6. 88 (d，1H，Ar_H)，7. 06 (m，2H，2Ar_H)，7. 61 (d，J = 15. 9Hz,1H,CH = C) ；ESI-MS :m/z 318[M+Na]+。实施例91、制备(E)-3-苯丙烯酸-(E)-4-溴甲基-1-苯甲酯(I 9a)参照实施例1中I Ia的制备方法，由阿魏酸与1，4_ 二溴甲基苯反应制得。淡 黄色固体，收率 52. 5 %，Mp :84· 7-86. 8 °C。1H NMR(CDCl3) δ :3.95(s，3H，OCH3) ,4. 68 (s, 2H, BrCH2)，5· 63(s，2H，COOCH2), 6. 32 (d, J = 9. 5Hz，lH，C = CH)，6· 91 (d，1H，Ar-H),
7.03-7. 16(m，6H，Ar-H), 7. 63 (d, J = 9. 5Hz, 1H, CH = C). ESI-MS 399 [M+Na]+ D2、制备(E)-3-苯丙烯酸-(E)-4-硝酰氧甲基-1-苯甲酯(I 9)参照实施例1中I 1的制备方法，由I 9a和AgNO3反应制得。淡黄色固体，收率 68. 3%，Μρ :68· 5-69. 9°C。1H 匪R(CDCl3) δ 3. 93 (s, 3Η, OCH3), 4. 99 (s, 2H,BrCH2), 5. 61 (s, 2H, COOCH2)，6. 34 (d, J = 9. 5Hz, 1H, C = CH)，6. 93 (d, 1H, Ar-H), 7. 01-7. 18(m，6H，Ar-H)， 7. 61 (d, J = 9. 5Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :382[M+Na]+。实施例101、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸-(E) _5_溴_2_呋喃酯(I IOa)
参照实施例1中I Ia的制备方法，由阿魏酸与2，5_ 二溴呋喃(摩尔用量比为 1 4)反应制得。白色固体，收率57. 5%，Mp :100. 1-101. St^1H NMR(CDCl3) δ :3.92(s，3H， OCH3)，6. 58 (s，1H, C = CH)，6. 67 (s, sH, C = CH) ,6. 33 (d, J = 9. 5Hz, 1H, C = CH)，6. 92 (d, 1H, Ar-H), 7. 01-7. 14(m，2H，Ar-H), 7. 61 (d, J = 9. 5Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :361[M+Na] +。2、制备(E)-3-苯丙烯酸-(E)-5-硝酰氧基-2-呋喃酯(I 10)参照实施例1中I 1的制备方法，由I IOa和AgNO3反应制得。白色固体，收率 60. 3 %，Mp 105. 5-106. 9 °C。1H NMR(CDCl3) δ :3.93(s，3H，OCH3) ,6. 57 (s, 1H, C = CH),
6.69 (s，sH，C = CH), 6. 31 (d, J = 9. 5Hz, 1H, C = CH), 6. 94 (d, 1H, Ar-H), 7. 03-7. 16(m，2H， Ar-H), 7. 63 (d, J = 9. 5Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS :344[M+Na]+。实施例111、制备(E)-3-(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸(II a)取阿魏酸11. 6g(60mmol)溶解于75mL NaOH(Imo 1/L)中，加入氯甲酸乙酯
7.lmL(75mmol)，在50°C搅拌反应4h，反应结束后将反应液倾入水中，析出白色固体，过滤 得到产物。白色粉末，收率 90. 1%，Mp :177. 4-178. 4°C。1H NMR(CDCl3)S 1. 40(t, J = 7. 1Ηζ，3Η，CH3)，3.91(s，3H，OCH3), 4. 35 (q, J = 7. 1Ηζ，2Η，OCH2), 6. 48 (d, J = 15. 9Ηζ，1Η， C = CH), 7. 15-7. 19(m，3H，Ar-H), 7. 82 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS :289[M+Na]+.2、制备(E)-3-(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_3-[4_苯基_1，2，5_噁 二唑-2-氧-3-甲氧基]苯酯(Π bl)取由1 制备得到的 II a 2. Immol, II pi [3_(4_ 苯基-1，2，5_ 噁二唑-2-氧 _3_ 甲 氧基)-苯酚]2. lmmol，二环己基碳酰亚胺(DCC)433mg(2. lmmol)，和4-二甲氨基吡啶 (DMAP) 25. 5mg(0. 21mmol)溶于40mL CH2Cl2中，室温搅拌反应8小时，过滤，浓缩，浓缩物 上硅胶柱色谱分离(洗脱剂为乙酸乙酯石油醚=1 4)得黄色粉末，收率60.2%，Mp 109. 2-111. 2°C。1H NMR(CDCl3) δ 1. 40(t, J = 7. 1Hz，3H，CH3)，3· 91 (s，3H，OCH3)，4· 33 (q， J = 7. IHz，2Η，OCH2)，5. 11 (s，2H, CH2)，6. 45 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，6. 84-7. 82 (m, 12H, Ar-H), 7. 80 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :555[M+Na]+。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_3_[ (4_苯基-1，2，5_噁二 唑-2-氧-3-)甲氧基]苯酯(II 1)取IIbll.Ommol溶于20mL 95%乙醇中，滴加乙醇胺至pH为10，室温搅拌30分钟， 然后加入HCl溶液(2mol/L)，调整溶液至中性，浓缩，残渣用水溶解，乙酸乙酯萃取3次。合 并有机层干燥，浓缩，浓缩物上硅胶柱色谱分离(洗脱剂为乙酸乙酯石油醚=1 2)得 白色粉末，收率 63. 9%，Μρ :57· 3-59. 1°C。1H NMR(CDCl3) δ :3· 95 (s，3Η，OCH3)，5· 10 (s，2Η， CH2), 5. 92 (s，1Η, OH), 6. 45 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, C = CH), 6. 84-7. 86 (m, 12Η，Ar-H)，7. 80 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS :483[M+Na] +。实施例121、制备(E)-3-(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_4_[ (4_苯基_1，2， 5-噁二唑-2-氧-3-)甲氧基]苯酯(II b2)参照II bl合成方法，由II a和II p2 [4-(4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧-3-甲氧 基)苯酚]反应制得黄色固体，收率 66.6%，Mp :92· 7-93. 6°C。1H NMR(CDCl3) δ :1.40(t, J = 7·1Ηζ，3Η，CH3)，3.91(s，3H，OCH3) ,4. 33 (q, J = 7·1Ηζ，2Η，OCH2)，5· 08 (s，2H，CH2),6. 57 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，6. 76-7. 82 (m, 12H, Ar-H)，7. 81 (d，J = 15. 9Hz, 1H, CH = C).ESI-MS :555[M+Na] + 02、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_4_[ (4_苯基-1，2，5_噁二 唑-2-氧-3-)甲氧基]苯酯(II 2)参照II 1合成方法，由II b2在乙醇胺条件下反应制得青黄色粉末，收率78.9%， Mp 123. 2-126. 7°C。1H 匪R(CDCl3) δ :3· 95 (s，3Η，OCH3)，5· 10 (s，2Η，CH2)，5· 93 (s, 1Η，0Η)，
6.47 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, C = CH)，6. 94-7. 82 (m, 12Η, Ar-H)，7. 78 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS :483[M+Na] + 0实施例131、制备(E)-3_(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_3_[ (4_苯基_1，2， 5-噁二唑-2-氧-3-)甲氧基]苯甲酯(II b3)参照II bl的合成方法，由化合物II a和II p3[3-(4-苯基_1，2，5_噁二 唑-2-氧-3-甲氧基)苯甲醇]反应制得黄色油状物，收率54.8%。1H NMR(⑶Cl3) δ 1. 38 (t, J = 7. lHz，3H，CH3)，3. 88(s，3H，OCH3)，4. 33 (q, J = 7. 1Ηζ，2Η，OCH2), 5. 15(s，2H， CH2)，5· 22(s，2H，Ar-CH2)，6· 45(d，J = 15. 9Hz，lH，C = CH)，6. 90-7. 92 (m，12H，Ar_H)，
7.71 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :569[M+Na]+。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_3_[ (4_苯基-1，2，5_噁二 唑-2-氧-3-)甲氧基]苯甲酯(II 3)参照II 1合成方法，由II b3在乙醇胺条件下反应制得白色粉末，收率73. 0%,Μρ 118. 8-120. 4°Co 1H 匪R(CDCl3) δ :3· 92 (s，3Η，OCH3)，5. 13 (s，2Η，CH2)，5. 17 (s，2Η，COOCH2)，
5.91 (s，1H, OH), 6. 35 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, C = CH), 6. 90-7. 87 (m, 12Η, Ar-H), 7. 67 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS :497[M+Na] +。实施例141、制备(E)-3-(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_4_[ (4_苯基_1，2， 5-噁二唑-2-氧-3-)甲氧基]苯甲酯(II b4)参照II bl合成方法，由化合物II a和II p4[4-(4-苯基_1，2，5_噁二 唑-2-氧-3-甲氧基)苯甲醇]反应制得淡黄色固体，收率54.8%，Mp 50. 2-53. I0C0 1H NMR(CDCl3) δ :1.38(t，J = 7·1Ηζ，3Η，CH3)，3· 87 (s，3Η，OCH3), 4. 32 (q, J = 7. 1Hz, 2H, OCH2) ,5. 11 (s,2H, CH2) , 5. 19(s,2H, Ar-CH2) ,6. 41 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，
6.99-7. 89 (m, 12H, Ar-H), 7. 68 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :569[M+Na] +。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_4_[ (4_苯基-1，2，5_噁二 唑-2-氧-3-)甲氧基]苯甲酯(II 4)参照II 1合成方法，由II b4在乙醇胺条件下反应制得黄色油状物，收率91.4%。 1H 匪R(CDCl3) δ 3. 91(s,3H, OCH3), 5. ll(s，2H，CH2), 5. 18(s，2H，COOCH2), 5. 92 (br s, 1Η, OH), 6. 31 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, C = CH), 6. 89-7. 83 (m, 12Η, Ar-H), 7. 64 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS :497[M+Na] + 0实施例151、(E)-3-(3,4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸的制备咖啡酸溶解于150mLNa0H(lmol/L)中，加入氯甲酸乙酯14. 2mL (150mmol)，在50°C搅拌反应4h，反应结束后将反应液倾入水中，析出白色固体，过滤得到产物。白色粉末，收率 88%，Μρ :174· 4-175. 4°C。1H 匪R (CDCl3) δ 1. 39 (m，6Η，2CH3)，4. 34 (m，4Η，20CH2)，6. 40 (d， J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，7. 33 (s, 1H, Ar-H)，7. 43-7. 48 (m, 2H, Ar-H)，7. 72 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :347[M+Na] +。2、制备(E)-3_(3，4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_4_[ (4_苯基-1，2，5_噁二 唑-2-氧-3-)甲氧基]苯甲酯(II b5)参照IIbl合成方法，由(E)-3_(3，4-乙氧甲酰氧基苯基)和II p5[4-(4_苯 基-1，2，5-噁二唑-2-氧-3-甲氧基)苯甲醇]反应制得淡黄色油状物，收率33.9%。 1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ :1.38(t，J = 7. 1Hz，6H，2CH3)，4. 33 (q，J = 7. 1Hz，4H，20CH2)， 5. 12(s，2H，CH2)，5. 19 (s，2H，Ar-CH2), 6. 41 (d，J = 15. 9Hz，lH，C = CH)，6. 99-7. 89 (m, 12H, 12Ar-H),7. 68(d, J = 15. 9Hz,1H, CH = C) ；ESI-MS :m/z 627[M+Na] +3、制备(E)-3_(3，4- 二羟基苯基)丙烯酸_4_[(4-苯基_1，2，5_噁二 唑-2-氧-3-)甲氧基]苯甲酯(II 5)参照II 1合成方法，由II b5在乙醇胺条件下反应制得黄色油状物，收率16.4%。 1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ :5· 02 (s，2Η，CH2)，5· 15 (s，2Η，Ar-CH2)，6· 18 (d，J = 15. 9Hz，lH，C =CH)，6. 71-7. 77 (m, 12H, 12Ar-H) ,7. 53 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C) ,8. 22 (brs, 2H, 20H)； ESI-MS :m/z483[M+Na] +实施例161、制备(E)-3-(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_2_[4_苯磺酰基_1，2， 5-噁二唑-5-氧-3-氧基]乙酯(III bl)参照II bl合成方法，由化合物II a和III pi (4-苯磺酰基_1，2，5_噁二 唑-5-氧-3-氧基]乙醇)反应制得淡黄色粘稠物，收率37. 5%。屯NMR(CDCl3) δ :1.39(t， J = 7. IHz，3H，CH3), 3. 90(s，3H，OCH3), 4. 33 (q, J = 7. IHz，2Η，OCH2), 4. 62 (m, 2Η, COOCH2)， 4. 71(m，2H，CH2), 6. 41 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, C = CH), 7. 13-8. 07(m，8H，Ar-H), 7. 71 (d, J = 15. 9Hz,1Η,CH = C). ESI-MS :557[M+Na] +。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_2_[4_苯磺酰基-1，2，5_噁二 唑-5-氧-3-氧基]乙酯(III 1)参照II 1的合成方法，由IIIbl在乙醇胺条件下反应制得。淡红色粉末，收率 82. 3%, Mp :139. 2-141. 1°C。1H 匪R(CDCl3) δ :3. 94(s，3H，OCH3)，4. 61 (t，J = 2. 4Hz，2H， CH2O), 4. 71 (t, J = 2. 4Hz，2H，COOCH2), 5. 88 (s, 1H, OH), 6. 31 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)， 7. 05-7. 12(m，3H，Ar-H)，7. 63(d, J = 15. 9Hz, 1H，CH = C)，7. 54-7. 73 (m, 3H, Ar-H), 8. 06 (d, J = 7. 3Hz，2H，Ar-H). ESI-MS :485[M+Na] +。实施例171、制备(E)-3-(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_4_[4_苯磺酰基_1，2， 5-噁二唑-5-氧-3-氧基]-2- 丁酯(III b2)参照II bl合成方法，由II a和III p2 (4-苯磺酰基-1，2，5-噁二唑-5-氧-3-氧 基]-2-丁醇)反应制得无色粘稠物，收率 35.5%。1H NMR(CDCl3) δ 1.40 (m,6H, CH3), 2.20(m，2H，CH2)，3· 89 (s，3H，OCH3) ,4. 30 (q, J = 7·1Ηζ，2Η，OCH2) ,4. 50 (t, J = 6. 2Hz, 2H, CH2O)，5. 24 (m, 1H, C00CH)，6. 36 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，7. 02-8. 09 (m, 8H, Ar-H)，7. 61 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :585[M+Na]+。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_4_[4_苯磺酰基-1，2，5_噁二 唑-5-氧-3-氧基]-2- 丁酯(III 2)参照II 1合成方法，由III b2在乙醇胺条件下反应制得浅褐色固体，收率97. 7%， Mp 70. 1-73. 2°C。1H NMR(CDCl3) δ :1· 40(d, J = 6. 2Hz，3H，CH3)，2· 22 (m，2H，CH2)，3· 92 (s, 3Η, OCH3), 4. 53 (t, J = 6. 2Hz，2Η，CH2O)，5· 26 (q, J = 6. 2Hz, 1Η，C00CH)，5· 90(brs, 1Η, OH)， 6. 29 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, C = CH), 6. 90-7. 08 (m, 3Η, Ar-H), 7. 61 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C),7. 60-7. 77(m，3H，Ar-H), 8. 08 (m, 2Η, Ar-H). ESI-MS :513[M+Na]+。实施例181、制备(E)-3-(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_4_[4_苯磺酰基_1，2， 5-噁二唑-5-氧-3-氧基]-1- 丁酯(III b3)参照II bl合成方法，由II a和III p3 (4-苯磺酰基-1，2，5-噁二唑-5-氧-3-氧 基]-1-丁醇)反应制得。白色粉末，收率 38. 2%，Mp :107. 5-108. 0°C。1H NMR(CDCl3)S 1. 39 (t, J = 4. 2Hz,3H, CH3)，1. 91 (m, 2H, CH2)，2. 03 (m, 2H, CH2)，3. 89 (s, 3H, OCH3)，4. 30 (m, 4H, OCH2), 4. 50 (t, J = 3. 8Hz，2H，CH2O)，6. 42 (d, J = 9. 6Hz, 1H，C = CH), 7. 11-7. 16(m，3H， Ar-H)，7. 60-7. 76 (m, 3H, Ar-H)，7. 66 (d, J = 9. 6Hz, 1H, CH = C)，8. 05-8. 07 (m, 2H, Ar-H). ESI-MS :585[M+Na]+.2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_4_[4_苯磺酰基-1，2，5_噁二 唑-5-氧-3-氧基]-1- 丁酯(III 3)参照II 1合成方法，由III b3在乙醇胺条件下反应制得。浅褐色粉末，收率92.0%， Mp 143. 3-146. 9°C。1H 匪R(CDCl3) δ 1. 88-2. 05 (m，4Η，2CH2)，3. 91 (s，3Η，OCH3)，4. 30 (t，J =6. 2Hz，2H，CH20)，4· 50(t, J = 6. 2Hz，2H，COOCH2)，5. 88(brs, ΙΗ,ΟΗ) ,6. 29(d, J= 15. 9Hz, 1H, C = CH)，6. 91-7. 09 (m, 3H, Ar-H)，7. 62 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C)，7. 62-7. 77 (m, 3H, Ar-H), 8. 06(m，2H，Ar-H). ESI-MS :513[M+Na] +。实施例191、制备(E) -3- (3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_2_ {2_ [4_苯磺酰基_1， 2，5-噁二唑-5-氧-3-氧基]-乙氧基}乙酯(III b4)参照II bl合成方法，由II a和III p4 (2_[4_苯磺酰基-1,2,5-噁二唑_5_氧_3_氧 基]-乙氧基}乙醇)反应制得无色粘稠物，收率73. 5 %。1H NMR(⑶Cl3) δ :1.41(m, 3H, CH3)，3· 86(s，3H，OCH3)，3· 88—4. 61 (m，10H，OCH2) ,6. 39 (d, J = 15.9Hz，lH，C = CH)，7. 11-7. 15(m，3H，Ar-H)，7. 56-7. 63(m，3H，Ar-H)，7. 69(d，J = 15. 9Hz，lH，CH = C) 8. 05-8. 08(m，2H，Ar-H). ESI-MS :601[M+Na]+。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸-2_{2_[4-苯磺酰基_1，2，5_噁 二唑-5-氧-3-氧基]-乙氧基}乙酯(III 4)参照II 1合成方法，由IIIb4在乙醇胺条件下反应制得。白色粉末，收率82.8%，Mp 115. 5-115. S0C01H 匪R(CDCl3) δ :3· 86 (t，J = 4. 7Hz，2Η，OCH2)，3. 91 (s，3Η，OCH3)，3. 93 (t， J = 3. 5Hz,2H, CH2O)，4. 39 (t，J = 4. 7Hz，2H, CH2O)，4· 59 (t，J = 3. 5Hz，2H，COOCH2) ,5. 89 (br s, ΙΗ,ΟΗ) ,6. 29 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH), 6. 88-7. 09 (m, 3H, Ar-H), 7. 63 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C),7. 51-7. 74(m，3H，Ar-H), 8. 06 (m, 2Η, Ar-H). ES I -MS :529[M+Na] +。
实施例201、制备(E)-3_(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_2-{[4_苯磺酰基_1， 2，5-噁二唑-5-氧-3-氧基]苯甲酯(III b5)参照II bl合成方法，由化合物II a和IIIp5[2-(4-苯磺酰基-1，2，5-噁二 唑-5-氧-3-氧基)-苯甲醇]反应制得无色粘稠物，收率76. 3 %。1H NMR(⑶Cl3) δ 1. 38 (t, J = 7. lHz，3H，CH3)，3. 92(s，3H，OCH3)，4. 33 (q, J = 7. 1Ηζ，2Η，OCH2), 5. 25(s，2H， CH2), 6. 45 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH), 6. 90-7. 92 (m, 12H，Ar_H)，7. 71 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :619[M+Na] +。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_2_[4_苯磺酰基-1，2，5_噁二 唑-5-氧-3-氧基]-苯甲酯(III 5)参照II 1合成方法，由III b5在乙醇胺条件下反应制得。白色粉末，收率79.4%， Mp 115. 5-115. 8 °C。1H NMR(CDCl3) δ :3.92(s，3H，OCH3)，5· 23 (s，2H，CH2) ,6. 43 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH), 6. 92-7. 91 (m, 12H, Ar-H), 7. 70 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS 547[M+Na]+。实施例211、制备(E)-3_(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_3-{[4_苯磺酰基_1， 2，5-噁二唑-5-氧-3-氧基]苯甲酯(III b6)参照II bl合成方法，由化合物II a和IIIp6(3-(4-苯磺酰基-1，2，5-噁二 唑-5-氧-3-氧基)-苯甲醇)反应制得无色粘稠物，收率76. 5 %。1H NMR(⑶Cl3) δ 1. 39 (t, J = 7. lHz，3H，CH3)，3. 91(s，3H，OCH3)，4. 35 (q, J = 7. 1Ηζ，2Η，OCH2), 5. 23(s，2H， CH2), 6. 44 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH), 6. 89-7. 91 (m, 12H，Ar_H)，7. 68 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :619[M+Na] +。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_3_[4_苯磺酰基-1，2，5_噁二 唑-5-氧-3-氧基]-苯甲酯(III 6)参照II 1合成方法，由IIIbe在乙醇胺条件下反应制得。白色粉末，收率78.3%， Mp 115. 5-115. 8 °C。1H NMR(CDCl3) δ :3.91(s，3H，OCH3)，5· 22 (s，2H，CH2) ,6. 46 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH), 6. 94-7. 92 (m, 12H, Ar-H), 7. 74 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS 547[M+Na]+。实施例221、制备(E)-3_(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_3-{[4_苯磺酰基_1， 2，5-噁二唑-2-氧-3-甲氧基]苯酯(III b7)参照II bl合成方法，由化合物II a和IIIp7(3-(4-苯磺酰基-1，2，5-噁二 唑-5-氧-3-氧基)-苯酚)反应制得无色粘稠物，收率79. 5%。1H NMR(CDCl3) δ :1.43(m, 3H, CH3)，3. 90 (s，3H, OCH3)，4. 36 (m, 2H, CH2)，5. 11 (s，2H, CH2)，6. 43 (d, J= 15. 9Hz, 1H, C = CH)，6. 82-7. 81 (m, 12H, Ar-H), 7. 88 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :589[M+Na] +。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_3_[4_苯磺酰基-1，2，5_噁二 唑-5-氧-3-氧基]-苯酯(III 7)参照II 1合成方法，由III b7在乙醇胺条件下反应制得。白色粉末，收率82.6%， Mp 116. 5-116. 8 °C。1H NMR(CDCl3) δ :3.91(s，3H，OCH3)，5· 12 (s，2H，CH2) ,6. 45 (d, J =15. 9Hz, 1H, C = CH)，6. 81-7. 83 (m, 12H, Ar-H), 7. 85 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS 533[M+Na]+。实施例231、制备(E)-3_(3-甲氧基-4-乙氧甲酰氧基苯基)丙烯酸_4-{[4_苯磺酰基_1， 2，5-噁二唑-5-氧-3-氧基]苯酯(III b8)参照II bl合成方法，由化合物II a和IIIp8(4-(4-苯磺酰基-1，2，5-噁二 唑-5-氧-3-氧基)-苯酚)反应制得无色粘稠物，收率83. 5%。1H NMR(CDCl3) δ :1.45(m， 3H, CH3)，3. 92 (s，3H, OCH3)，4. 38 (m, 2H, CH2)，5. 12 (s, 2H, CH2)，6. 45 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH)，6. 81-7. 83 (m, 12H, Ar-H), 7. 85 (d, J = 15. 9Hz, 1H, CH = C). ESI-MS :589[M+Na] +。2、制备(E)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸_4_[4_苯磺酰基-1，2，5_噁二 唑-5-氧-3-氧基]-苯酯(III8)参照II 1合成方法，由IIIbS在乙醇胺条件下反应制得。白色粉末，收率84%， Mp 104. 5-105. 8 °C。1H 匪R(CDCl3) δ :3.92(s，3H，OCH3)，5· 14 (s，2H，CH2) ,6. 46 (d, J = 15. 9Hz, 1H, C = CH), 6. 82-7. 85 (m, 12H, Ar-H), 7. 86 (d, J = 15. 9Hz, 1Η, CH = C). ESI-MS 533[M+Na]+。实施例24药理实验1、抗血小板聚集实验取健康雄性家兔，30mg/kg家兔体重的戊巴比妥钠生理盐水溶液耳缘静脉注射麻 醉，手术分离颈总动脉取血，收集于塑料离心管中，3. 8%枸橼酸钠水溶液抗凝(血与抗凝 剂体积比为9 1)。800r/min离心lOmin，制备富血小板血浆(Platelet-rich plasma, PRP)，3000r/min 离心 lOmin，制备贫血小板血浆(Platelet-poor plasma, PPP)，按比浊法 进行血小板聚集实验。将以上实施例1 23所得化合物的样品溶于80%乙醇中，配成初始浓度分别为 10mmol/L、5mmol/L、2· 5mmol/L、l. 25mmol/L、0. 625mmol/L 的溶液。测试杯中加入 280 μ L PRP、溶媒或受试样品10 μ L，在37 °C预温孔内预温lmin，将测试杯转入测试通道，加入诱 导剂ADP (adenosine diphosphate,终浓度5umol/L) 10 μ L，观察记录6min内最大聚集率 (Maximumaggregation rate，MAR)。用80%乙醇作空白对照，以阿司匹林、阿魏酸和咖啡酸 作阳性对照，计算血小板聚集抑制率(Aggregation inhibition rate,AIR)及50%聚集抑 制浓度(IC5tl)。具体IC5tl计算结果如表1所示。聚集抑制率计算方法如下X (%) = A-B/A X100%X 血小板聚集抑制率；A 空白对照的最大聚集率；B 样品组的最大聚集率表1各受试样品抗血小板聚集实验结果(平均数士S. D. (η = 6).) 与空白对照组相比aP < 0. 05，bP < 0. 01，cP < 0. 001由表1实验结果表明阳性对照组阿司匹林、阿魏酸、咖啡酸对血小板的聚集抑制 率分别为12%、16. 89%和16. 60%，本发明提供的所有一氧化氮供体芳香酸类化合物对血 小板聚集抑制率都明显高于阿司匹林和结构未修饰的阿魏酸与咖啡酸，表明本发明提供的 具有通式(I)、(II)和(III)带有一氧化氮供体的芳香酸类化合物具有更好的抗血小板聚 集作用，可以有效防止血栓形成，从而可以应用与防治血栓性疾病。并且从表1实验结果对 比表明，本发明提供的具有通式III的化合物，即苯磺酰基呋咱氮氧化物类NO供体芳香酸类 化合物具有最强的活性，抗血小板聚集抑制率高达90 %以上，是一种很有开发前景的抗血 栓性疾病的药物。2、体外NO释放试验为了 了解目标化合物释放NO的情况，以及探讨NO释放量与抗血栓活性之间的量 效关系，进一步对NO供体类目标化合物进行Griess法体外NO释放实验。原理=Griess法间接测定NO含量。NO容易氧化，半衰期短，它能迅速转化为亚硝 酸盐(NCT2)和硝酸盐(NCT3)，可通过间接测定NCT2的含量来测得NO的含量。将待测液与等 体积的Griess反应液室温反应lOmin，以NaNO2为标准品，在550nm测吸光值。实施例1 24所得化合物的受试物均溶于二甲亚砜(DMSO)，配成lOmmol/L的溶 液。Griess试剂的配制由0. 1 % N-萘乙二胺盐酸盐、1 %对氨基苯磺酸溶解于5%的 磷酸溶液中组成的溶液，现用现配，使用时与样品1 1混合。标准曲线的制备标准液取NaNO2 13. 8mg定溶至IL水，浓度为200 μ Μ,依次稀 释得 100μΜ、50μΜ、25μΜ、12. 5μΜ、6. 25 μ Μ，备用。将标准液加于96孔板，每孔100 μ L，然后加入Griess反应液100 μ L/孔。同一水 平6孔并列。室温放置IOmin后，于紫外可见光微孔板检测仪550nm测吸光值。根据所得 数据绘制标准曲线，以吸收度(A)为纵坐标，以亚硝酸盐浓度(c，μΜ)为横坐标线性回归。测试方法所有受试物均先溶于DMSO中(0. 01mol/L)，取80 μ L用磷酸缓冲液(PH 7.4)缓慢滴加、振荡，稀释至8mL，终浓度为10_4mOl/L，缓冲液中含有过量的半胱氨酸 (5mmol/L)。将溶液置于37°C环境下孵化，于2h、4h取样品溶液加于96孔板，每孔100 μ L， 然后加入Griess反应液100 μ L/孔。同一水平6孔并列。室温放置lOmin，于紫外可见光 微孔板检测仪550nm测吸光值。NO的释放量以其相当于氧化产物亚硝酸盐(N02_)的浓度 μ M表示，具体实验结果如表2所示。实验结果亚硝酸盐-NO标准曲线，线性回归方程为A = 0.0097C+0.038，相关系 数 r = 0. 9979表2各受试样品体外一氧化氮释放结果 由表2实验结果表明所有NO供体芳香酸类化合物均可以不同程度的释放NO。表 明本发明提供的带有一氧化氮的芳香酸类化合物可以有效分解为芳香酸类化合物和释放 N0，发挥抗血栓等作用，并且由表2的实验结果表明本发明提供的具有通式III的化合物，即 苯磺酰基呋咱氮氧化物类NO供体芳香酸类化合物的NO释放量最大。根据上述抗血小板聚 集和NO释放实验测定结果，可以看出，具有最大NO释放量的苯磺酰基呋咱氮氧化物类NO 供体也具有最高的抗血小板聚集活性，表明芳香酸类化合物与释放的NO具有协同增效的 作用。通过血小板聚集抑制实验结果表明，本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸前 体药物具有比结构未修饰的阿魏酸、咖啡酸等天然芳香酸类化合物具有更好的抑制血小板 聚集的活性，因此，本发明对阿魏酸、咖啡酸等芳香酸结合上一氧化氮供体后，溶解性能增 强，抗血栓等药理活性增强。因此本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物及其 盐化物有望进一步开发成为治疗血栓性疾病和脑缺血性等疾病的药物。以上实施方式只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的 人了解本发明内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实 质所做的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。
权利要求
带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物，其特征在于，它们是具有通式(Ⅰ)所示的化合物其中A代表下列官能团苯基、4-羟基苯基、3，4-二羟基苯基、3-甲氧基-4-羟基苯基或3-羟基-4-甲氧基苯基，R1代表C2～C8烷基、C2～C8烯烃基、C2～C8炔烃基、苯基或取代苯基、芳杂环或取代芳杂环。FSA00000189259700011.tif
2.根据权利要求1所述的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物，其特征在于，所述的 取代苯基是指由1个或多个选自于羟基、C1 C6烷基、C1 C6烷氧基取代的苯基，各取代 基可以相同或不同；所述芳杂基是指由1至4个杂原子组成的5至7元芳香杂环，所述杂原 子独立的选自0、S或N ；所述取代芳杂基是指由1个或多个选自于C1 C6烷基、C1 C6烷 氧基或卤素取代的芳杂基，各取代基可以相同或不同。
3.带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物，其特征在于，它们是具有通式(II)所示的化 合物 其中A代表下列官能团苯基、4-羟基苯基、3，4- 二羟基苯基、3-甲氧基-4-羟基苯基 或3-羟基-4-甲氧基苯基，R2代表-PhCH2-(邻，间，对)或-Ph-(间，对)。
4.带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物，其特征在于，它们是具有通式(III)所示的化 合物 其中A代表下列官能团苯基、4-羟基苯基、3，4_ 二羟基苯基、3-甲氧基-4-羟基苯 基或 3-羟基-4-甲氧基苯基，R3 代表-(CH2) η-，η = 3 5 ；CH2C = CCH2 ；CH2CH = CHCH2 ； CH2CH (CH3) CH2CH2 ；CH2CH2OCH2CH2 ；-PhCH2-(邻，间，对)或-Ph-(间，对)。
5.权利要求1或2所述的通式(I)化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤 芳香酸类化合物在三乙胺的催化作用下，先与二溴代物BrR1Br反应得到缩合物，缩合物再与硝酸银反应得到通式(I)所述的硝酸酯类前体药物，其中R1代表C2 C8烷基、C2 C8烯烃基、C2 C8炔烃基、苯基或取代苯基、芳杂环或 取代芳杂环；其中所述取代苯基是指由1个或多个选自于羟基、C1 C6烷基或C1 C6烷氧基取代的苯基，各取代基可以相同或不同；所述芳杂基是指由1至4个杂原子组成的5至 7元芳香杂环，所述杂原子独立的选自0、S或N;所述取代芳杂基是指由1个或多个选自于 C1 C6烷基、C1 C6烷氧基或卤素取代的芳杂基，各取代基可以相同或不同。
6.权利要求3所述的通式(II )化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤a、苯环上没有羟基的芳香酸类化合物直接与含羟基的呋咱氮氧化合物(IIρ)在二环 己基碳酰亚胺催化下缩合反应制得；b、苯环上含有羟基的芳香酸类化合物首先用乙酰基或氯乙酰基保护苯环上的羟基，然 后再与呋咱氮氧化合物(II P)在二环己基碳酰亚胺催化下缩合反应，最后在碱性条件下脱 除酰基保护基得到通式(II )化合物， 其中R2代表-PhCH2-(邻，间，对)或-Ph-(间，对)。
7.权利要求4所述的通式(III)化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤a、苯环上没有羟基的芳香酸类化合物直接与含羟基的呋咱氮氧化合物(IIIp)在二环 己基碳酰亚胺催化下缩合反应制得；b、苯环上含有羟基的芳香酸类化合物首先用乙酰基或氯乙酰基保护苯环上的羟基，然 后再与呋咱氮氧化合物(IIIp)在二环己基碳酰亚胺催化下缩合反应，最后在碱性条件下脱 除酰基保护基得到通式(III)化合物， 其中 R3 代表-(CH2)n-, η = 3 5 ； CH2C = CCH2 ； CH2CH = CHCH2 ； CH2CH (CH3) CH2CH2 ； CH2CH2OCH2CH2、-PhCH2-(邻，间，对)或-Ph-(间，对)。
8.通式(I)、( II )或(III)所述的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物的盐，其特 征在于，通式(I )、( II )或(III)所述的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物与盐酸、氢 溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、马来酸、苯磺酸、琥珀酸、 戊二酸或富马酸反应制备得到。
9.通式(I)、( II )或(III)所述的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物或其盐和药 学上可接受的载体制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、喷雾剂、注射剂、微囊或透皮控释贴剂剂型的 药物。
10.通式(I)、( II )或(III)所述的带有一氧化氮供体的芳香酸化合物或其盐在制 备抗血栓或抗脑缺血疾病的前体药物中的应用。IIIp
全文摘要
本发明涉及药物化学研究领域，具体公开了一类新型的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物，以及它的制备方法和在防治血栓性疾病中的应用。本发明对具有抗血栓作用强的天然芳香酸化合物进行结构修饰，将其羧酸基团与一氧化氮供体结合，得到脂溶性好的一氧化氮供体型芳香酸前药，本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物的溶解性好，可有效透过生物膜脂质双分子层，可提高人体服用后生物利用度，并且前体药物能够分解为芳香酸类化合物和释放出一氧化氮，二者可以协同发挥抗血栓、抗血小板聚集等药理活性。本发明提供的带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物可用于防治血栓性疾病和脑缺血性疾病。
文档编号A61K31/216GK101885684SQ20101021404
公开日2010年11月17日 申请日期2010年7月1日 优先权日2010年7月1日
发明者唐于平, 李念光, 段金廒 申请人:南京中医药大学