专利名称：肿瘤组织的绘图方法
肿瘤组织的绘图方法本发明涉及肿瘤组织的绘图(Abbildimg)方法。此外，本发明还涉及新表位，其由 肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白酶的蛋白水解分解而生成。此外，本发明还涉及 用于通过肿瘤特异性蛋白酶生成新表位的蛋白或肽。转移期的癌症通常具有不良的预后，且经常是有生命威胁的。导致形成转移的病 理代谢过程，特征在于两个关键的步骤冲破基膜，从而转移的细胞能从原发性肿瘤转移 至其他的组织，以及引起肿瘤血管发生(参见例如Hanahan，D. and Weinberg, R. A. =The Hallmarks of cancer. CelllOO，57-70 (2000))。这两个步骤均是基于组织的细胞组分和周 围基质之间的复杂相互作用的失调。目前公认的是，蛋白酶，例如基质金属蛋白酶(MMP)， 特别是由转移的肿瘤细胞分泌的基质金属蛋白酶，作用于多聚的和非纤维状的基质组分的 蛋白水解，这对于转移过程是重要的(参见例如McCawly，L.J.，Matrisian，L. Μ. =Matrix metalloproteases :They' re not justfor matrix anymore. Curr. Opin. Cell Biol 13, 534-540(2001))ο肿瘤产生的多种蛋白酶的病理学机能和特异性表达已经得到很好的描述。因此对 于新的化疗法这是有吸引力的潜在目标(“药物靶标”)。此外，肿瘤蛋白酶对于体内检测 和原发性肿瘤及转移肿瘤的分子成像(“moleculare imaging")是有吸引力的目标(参见 例如 McEntyre，J. 0. undMatrisian L. Μ. :Molecular imaging of proteolytic activity in cancer. Journal ofCellular Biochemistry 90, S.1087-1097(2003))。为了通过成像技术检测体内肿瘤蛋白酶的活性，已研制出新型的造影剂，即所谓 的智能造影剂(Smart Contrast Agent)，其为肽和荧光团的缀合物(参见例如Kumar，S. und Richards—Kortum, R. Optical molecularimaging agents for cancer diagnostics and therapeutics. Nanomedicinel,23-30(2006))。这些物质是肿瘤蛋白酶的底物，并且通过 蛋白水解分解从不活泼状态(“淬灭状态”)转化至发荧光状态(参见例如Weisleder， R. undNtziachristos, V. Shedding light onto live molecular targets. NatureMed. 9, 123-128(2003))。这个方法的优势是蛋白酶的各底物的接近性好、蛋白酶的表达的肿瘤特 异性以及如下事实多种底物分子通过单个蛋白酶分子分解的随时间的信号得以增强。然 而这个方法的主要问题如下，该方法是基于荧光检测的，因此和成像技术(例如非常灵敏 的和在临床实践中经常使用的MRI、PET和SPECT)是不兼容的。此外，该方法因为上述问题 在临床实践中不值得被采用。其他的方法基于肿瘤特异性金属蛋白酶的放射性标记抑制剂 的应用。虽然这种抑制剂的结合能通过在临床上使用的成像技术如PET进行跟踪，但是测 量到的信号是微弱的，因为单个酶分子只能结合单个抑制剂分子(参见例如WP LI und CJ Anderson Imaging Matrix Metalloproteinase expression in tumors. Q J Nucl Med47, 201-208(2003))。另外，在肿瘤显示中应用单克隆抗体(mAks)作为高特异性试剂的基础是普遍 接受的(参见例如 Stipsanelli, E. und Valsamaki, P. :01d and newtrends in breast cancer imaging and therapeutic approach· Hell· J· Nucl· med· 8，103—108(2005))。 $ 这些方法中，对肿瘤产生的目标分子呈特异性的mAks —般与放射性核素缀合。放射性核素-mAk-缀合物在施用给病人之后富集在潜在的肿瘤组织中，因此例如可以通过PET或 SPECT可见。这个方法的主要问题是大多数肿瘤抗原的浓度低，这经常导致检测非常困难。 此外，大多数的肿瘤特异性抗原是细胞内蛋白，其通过放射性核素-mAk-缀合物是难接近 的。这里的一种特例是人抗体C0U-1，其结合经加工的细胞内细胞角蛋白8/18(参见例如 Ditzel H. J. et al. :Cancer-associatedcleavage of Cytokeratin 8/18 heterotypic complexes exposes a neoepitope inhuman adenocarcinomase. J. Biol. Chem. 277， 21712-21722(2002))。这个抗体已成功地用于各种腺癌如结肠癌的免疫闪烁成像术中。负 责加工细胞内细胞角蛋白的蛋白酶是未知的，但是推测该蛋白酶仅在细胞凋亡的癌细胞中 是活性的。然而细胞角蛋白8/18的表达局限于上皮细胞，因此C0U-1仅可以用于检测腺癌。 除了现今主要用作人源化变体的单克隆抗体之外，适合这个方法的还有其他特异性结合肿 瘤抗原的分子，例如结合蛋白或适体。因此，存在对可靠并灵敏地显示转移性肿瘤组织的方法的需求。尤其是该方法应 该是易实施的，并适合作为一般医疗诊所中的常规方法。此外，该方法应该适合显示尽可能 多的肿瘤类型。该方法还应该实现对转移可能性或肿瘤转移的扩散的说明(Aussage)。此 外，该方法应该通过检查癌症的种类、癌症的阶段和癌症转移的可能性及癌症的扩散实现 可靠的诊断。出人意料地发现，肿瘤诊断和成像技术的组合实现了高特异性地、灵敏和可信地 显示肿瘤组织，特别是转移性肿瘤组织，在该肿瘤诊断中，由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤 特异性蛋白酶的蛋白水解分解而生成的一种或多种新表位通过特异性结合该新表位的分 子得以识别和结合。因此，本发明涉及肿瘤组织的绘图方法，其特征在于，a)使肿瘤组织与单克隆抗 体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子接触，所述的单克隆抗体、 单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子识别或结合至少一种新表位， 所述新表位已经由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白酶的蛋白水解分解而生成，b) 用成像方法显示由新表位和单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体 或其他分子形成的复合物。本发明的主题进一步涉及肿瘤组织的绘图方法，其特征在于，对与结合或识别至 少一种新表位的单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子 接触的肿瘤组织使用成像方法，该新表位已经由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白 酶的蛋白水解分解而生成。其中该肿瘤组织可以是在体内或在体外。该方法之前的使肿瘤 组织接触特异性结合待检测新表位的单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合 蛋白、适体或其他分子的步骤可以在体内或体外根据已知的方法实现。本发明的主题进一步涉及肿瘤组织的绘图方法，其特征在于，用成像方法显示由 至少一种新表位和至少一种单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体 或其他结合分子形成的复合物，该新表位已经由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白 酶的蛋白水解分解而生成，该至少一种单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合 蛋白、适体或其他结合分子对于待检测的新表位是特异性的。由至少一种新表位和至少一 种单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他结合分子形成的复 合物可以存在于体内或体外的组织或组织试样中，并且在实施该方法之前根据已知的方法
5而制备，该至少一种单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他 结合分子对于新表位是特异性的，其中该新表位由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋 白酶的蛋白水解分解而生成。本发明的主题进一步涉及识别或结合至少一种新表位的单克隆抗体、单克隆抗体 的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他结合分子的应用，该应用为与成像方法一起用 于绘图肿瘤组织，该新表位已经由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白酶的蛋白水解 分解而生成。此外，本发明还涉及下式的由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白酶的 蛋白水解分解而生成的新表位的应用，该应用为与单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片 段、重组结合蛋白、适体或其他结合分子一起，以及与成像方法一起用于转移性肿瘤组织的 绘图，该单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他结合分子识 别或结合至少一种新表位。本发明进一步涉及下文所述的蛋白或多肽的应用，为通过肿瘤特异性蛋白酶和单 克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他结合分子一起生成新表 位，以及与成像方法一起用于转移性肿瘤组织的绘图，该单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结 合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子识别至少一种通过肿瘤特异性蛋白酶蛋白水解分 解上述蛋白或肽而生成的新表位。本发明进一步涉及由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白酶的蛋白水解分 解而生成的新表位，例如通过由MMP-7分解生成的C-末端序列为Lys-Pro-Leu-Glu的表 位，或通过由MMP-7分解生成的C-末端序列为Lys-Leu-Pro-Ala的表位。本发明进一步涉及用于通过肿瘤特异性蛋白酶生成新表位的细胞外蛋白或肽，该 新表位例如以下蛋白或由其衍生的肽序列的新表位胶原I-IV、胶原IV-X、纤连蛋白、层粘 蛋白、弹性蛋白、蛋白聚糖核心蛋白(Proteoglycan Core Protein)、Pro_MMP2、Pro_MMP9、 聚集蛋白聚糖、明胶和类似的底物分子，以及合成的底物分子，其在识别由它们分解生成的 新表位的方面通过同源结合物(kognate Binder)、在体内的半衰期、生物利用度和药代动 力学及药效学而优化。本发明进一步涉及检测肿瘤特异性蛋白酶，例如MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、 MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、uPA、tPA 和其他蛋白酶。以上描述的用于肿瘤组织的绘图方法也可以检测参与蛋白水解分解肿瘤组织周 围蛋白的蛋白酶。其中，由新表位与特异性结合某些新表位的单克隆抗体、单克隆抗体的抗 原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子形成的复合物可以说明关于特异性蛋白酶的 存在；由此得到关于肿瘤特性的暗示。本发明是基于如下的事实，由肿瘤引发的和分泌的蛋白酶特异性地分解内源基质 底物或外源(例如静脉内、口服或吸入施用)的肽底物或蛋白底物。然后，该已分解的肽或 蛋白具有新的N-末端和新的C-末端，为所谓的新表位。在健康的组织中不存在这种新表 位，或者该新表位在健康的组织中相比较在肿瘤组织中以更小的浓度存在，因此这种新表 位对于包围肿瘤尤其是转移瘤的组织是特征性的。这里，术语“肿瘤”既包括良性肿瘤也包 括恶性肿瘤。尤其是，术语“肿瘤”包括癌症，和特别是转移癌或者癌瘤。术语“肿瘤组织”不仅表示已知的含有肿瘤的组织，而且表示怀疑含有肿瘤的组 织。肿瘤组织优选地位于人体中，也可以存在于动植体中。
如上述形成的新表位可以被之前施用或加入的特异性的单克隆抗体、单克隆抗体 的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他结合分子识别。接着，这些分子在相应的肿瘤 周围富集，并与已有的新表位形成复合物。这种分子将在实施按照本发明的方法之前根据 怀疑肿瘤的特性和结合新表位的分子的类型施用给病人。该施用以已知的方式实现，例如 以静脉内、口服或吸入方式。优选的是静脉内或口服施用。特异性结合由蛋白酶生成的新表位的单克隆抗体在本领域中是众所周知的(例 如 在 Hughes C. Ε. et al. :Monoclonal antibodies recogniζingprotease-generated neoepitopes from cartilage proteoglycan degradation. Application to studies of human link protein cleavage by stromelysin, J.Biol.Chem.,267,23, 16011-16014(1992))，且应用于现今市市场上销售的诊断测试(例如，西门子公司的 Enygnost Fl+2mono Test)中。同样地，用于确定的表位或识别确定表位的重组结合蛋白、 适体或其他特异性结合分子的抗原结合片段在本领域内是众所周知的，可以根据已知的方 法制备。单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他特异性结合 分子识别至少一种由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白酶的蛋白水解分解而生成 的新表位。单特异抗体特异性结合它们指向的表位。因为肿瘤蛋白酶通过多次分解形成多 个新表位，并因此形成了多个新表位-抗体-复合物，从而由此产生信号放大步骤。代替单 克隆抗体，也可以应用合适的且与新表位上的抗原结合的抗体片段或特异性重组结合蛋白 用于新表位，或应用适体或特异性结合待检测新表位的其他分子用于新表位。为了通过成像方法以合适的方式进行检测，前面提及的分子偶联至可检测标记物 上。可检测标记物例如是荧光团(FITC、GFP)、放射性同位素(F18，I-124，C-11)、镧系元素 螯合物(例如钆GTPA)或氧化铁纳米颗粒(USPI0，ΜΙ0Ν, SP10)。前面提及的结合新表位的分子也可以识别两种或更多种新表位，这就是说，其为 双特异性和双价分子。这里例如是双价单特异抗体和双价双特异抗体或其片段，但是也可 以是三特异抗体或四特异抗体。双特异抗体包括在同一多聚肽链上结合抗体轻链可变域 的单克隆抗体重链上的可变域，并通过肽接头连接所述的两个域，该肽接头是如此的短，以 至于不允许在同一链上的两个域之间发生配对。由此得以与另一链上的互补域进行配对， 这样生成了二聚体分子，其具有两个带有功能的抗原结合位点。双特异性抗体也可以是单 链。通过应用双特异性和双价抗体可得到由这些分子和新表位之间的聚集体形成的结合 (Verbaende) 0该聚集体可以作为无特异性标记的聚集体通过成像方法来检测。但是这些 分子和可检测标记物发生偶联也是有可能的。也可以使用抗原结合片段，例如Fab、F(ab' )2或Fv，代替完整的抗体分子。重组结合蛋白可以是任一识别新表位的结合蛋白。优选地，重组蛋白为sFv分子、 人源化抗体或特异性结合新表位的重组蛋白。另外可以使用适体或特异性结合新表位的其 他分子。该类型的分子是本领域技术人员已知的，可以以已知的方式及用各种表位的知识 而制备。也可以使用这些分子的合适组合。本发明使用的分子所结合的新表位在本领域内是众所周知的。然而该新表位在其 序列方面的表征差，大多通过其上结合的抗体来定义(例如，CE Hughes et al. Monoclonal antibodies that specifically recognizeneoepitope sequences generated by‘aggrecanase‘ and matrixmetalloproteinase cleavage of aggrecan !application to catabolism in situ andin vitro. Biochem J. 1995 ；305 :799_804)。此外，按照本发明有利地识别以下新表位来自胶原I-IV、胶原IV-X、纤连蛋白、 层粘蛋白、弹性蛋白、蛋白聚糖核心蛋白、Pro-MMP2、Pro_MMP9、聚集蛋白聚糖、明胶和类似 的底物分子的新表位。本发明的目标新表位或结合新表位通过特异性的、由肿瘤组织分泌的蛋白酶分 解内源基质组分而形成。相对应的蛋白酶的例子是MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-10、 MMP-11、MMP-12、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、uPA、tPA 和其他的在本领域内已知的蛋白酶。另外，新表位也可以由有目标地向待检查的患者或组织施用的蛋白或肽或其他的 待检测酶的底物来形成。该蛋白或肽可以在待检测的肿瘤蛋白酶的可分解性或由它们分解 生成的新表位的识别方面通过同源结合物及其他的标准如在体内的半衰期、生物利用度和 药代动力学及药效学等进行优化。应用这种外源加入的底物来检测肿瘤蛋白酶相比较内源 底物的优势在于通过根据上述标准选择或优化底物物质而改进的分解的检测能力。由于结合通过肿瘤特异性蛋白酶生成的新表位而在肿瘤组织中富集的抗体、结合 抗原的片段、重组结合蛋白、适体或其他的特异结合分子或由此形成的复合物通过成像方 法而显示。这里，例如MRI方法、PET方法、SPECT方法、CT-PET方法、MR方法、MR-PET方法、 US或IR方法。该类方法是本领域技术人员所熟知的。相应的设备是可购买的。本领域技术人员也能够选择具体的方法并以合适的方式结合标记的抗体、抗原结 合片段、重组结合蛋白、适体或特异性结合待检测新表位的其他分子。例如，可以通过PET或SPECT对识别新表位的单克隆抗体的放射性核素缀合物进 行检测，而没有缀合的结合临近新表位的双特异和双价单克隆抗体形成更大的聚集体，能 对其直接进行检测。其中，与独立的表位的T2值相比较，该缀合物的T2值发生改变，从而 可以通过MRI便利地进行测量。通过该种成像方法与特异性结合通过肿瘤蛋白酶形成的新表位的诊断分子的组 合能非常高效地检测肿瘤细胞。根据信号的大小也可以推出关于攻击力即转移可能性或转 移进一步发展的说明。本发明的方法尤其适合于实体瘤类型的绘图，例如肉瘤、癌瘤、母细胞瘤、恶性黑 色素瘤及其他。按照本发明方法得到的癌组织的绘图能用于诊断和治疗各种肿瘤。如此得到的图 像信息也可以与外科方法和/或癌病的靶向治疗联合使用，例如在外科手术中作为实时成 像方法。此外，该信息也可以用于监视疾病的发展或实施治疗的效果。可以既由医生也由 计算机对该图像信息进行评估。本发明方法具有在现有技术中已知的智能造影剂在以下方面的优点对于具体的 应用来说，在待检测肿瘤蛋白酶的可分解性、在体内的半衰期、生物利用度、药代动力学及 药效学方面的性能优化；以及蛋白酶易接近底物，通过单个蛋白酶分子分解多个底物分子 的信号增强。但是本发明方法与这种方法不同的是，本发明方法与临床实践中经常应用的 成像技术如PET、SPECT和MRT是兼容的。除了通过蛋白酶活性放大信号以外，还消除了传 统的应用单克隆抗体的成像方法的主要问题，即抗原浓度低。因为通过肿瘤蛋白酶生成的
8新表位存在于细胞外空间，所以该新表位对于所用的抗体或抗原结合片段或重组结合蛋白 是容易接近的，这跟基于位于细胞上或细胞内的其他肿瘤抗原的诊断学是相反的，这是本 发明方法的另一个优势。因为根据本发明还可以施用细胞外底物，所以能对分泌的肿瘤蛋白酶的完整谱的 作用进行验证，甚至能对在周围组织中没有合适底物的肿瘤蛋白酶的作用进行验证。由此 可以考虑更宽的新表位-目标-谱，这使得更强新表位的鉴别成为可能，从而不局限于由内 源存在的底物生成的新表位。因此，本发明方法的诊断潜力不局限于已知其新表位的肿瘤 种类上(例如前面所述的与检测腺癌相关的C0U-1-表位)。因此，按照本发明，每个任意的 实体瘤组织是可成像化的，并能对其转移可能性或扩散进行评估。因此，本发明方法实现了 可靠的转移肿瘤或癌组织的诊断或预后。通过乳腺癌的实施例更进一步地举例说明本发明。乳腺癌的金属蛋白 酶MMP-2的强表达和不良预后是有关联的(例如Talvensaari-Mattila A.，Matrix metalloproteinase-2(MMP-2)is associated with survival in breastcarcinoma. Br J Cancer 89，1270-1275，2003)。为了匹配相应的治疗(例如从一开始就引用高剂量的化疗 或组合化疗)，对于初级诊断的治疗而言，知道乳腺癌MMP-2是否表达和在哪个范围内表达 是重要的。此外，检查是否有分泌MMP-2的转移以及对其进行精确绘图是重要的。为此，例 如给一个女性患者静脉施用缀合放射性核素的人源化单克隆抗体，该单克隆抗体特异性结 合通过MMP-2分解的基质蛋白的新表位。或者，可以在给予抗体前的一段时间向该女性患 者注射由MMP-2特异性分解的合成肽。在这两种情况中，通过肿瘤细胞分泌的MMP-2分解 从外部引入的底物或内部已存在的基质蛋白，跟未分解的分子相比由此形成了新表位。在 另一步骤中，现在向女性患者施用缀合放射性核素的结合分子，其特异性结合所形成的新 表位。这接着可以通过PET或另一种成像方法进行检测。由此能够可视化显示体内与新 表位结合的标记结合分子的分布，以及因此间接地可视化显示分泌MMP-2的肿瘤细胞的分 布。由此，一方面可以检测原发性肿瘤是否生成MMP-2 (这通过实验方法是不可能的)，另一 方面可以定位可能的转移。这里，相互影响因素也是可能的，其中原发性肿瘤不分泌或只分 泌很少的MMP-2，但是由该肿瘤产生的转移生成了 MMP-2。除了本文开头所述的与(化学或者免疫)治疗相关的初步诊断和疾病的诊断分类 之外，该方法对于女性患者的外科和/或核医学方法而言还用于定位原发性肿瘤和转移。 另外，该方法在时间上的重复应用可以说明在外科、化疗、免疫疗法或核医学疗法中原发性 肿瘤或转移的扩散的变化，因此可以用相关的结果对疗效进行评估。
权利要求
肿瘤组织的绘图方法，其特征在于a)使肿瘤组织与单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子接触，所述的单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子识别或结合至少一种新表位，所述新表位已经由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白酶的蛋白水解分解而生成；b)用成像方法显示由新表位与单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子形成的复合物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肿瘤组织周围的蛋白为内源基质组分。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述肿瘤组织周围的蛋白为外源肽或 蛋白底物。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述抗体为双价抗体和/或 双重特异性抗体(双特异抗体)。
5.根据权利要求1至4任一项所述的方法，其特征在于，所述抗原结合片段是Fab、 F(ab，)2 或 Fv。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述重组结合蛋白是sFv、 人源化抗体或包括抗体可变域的重组蛋白。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，特异性结合待检测新表位的 所述单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子识别通过肿 瘤或转移分泌的蛋白酶从以下基质蛋白形成的新表位胶原I-IV、胶原IV-X、纤连蛋白、层 粘蛋白、弹性蛋白、蛋白聚糖核心蛋白、Pro-MMP2、Pro-MMP9、聚集蛋白聚糖。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其特征在于，特异性结合待检测新表位的 所述单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子偶联至可检 测标记物上。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述可检测标记物是荧光团、放射性同位 素、酶、镧系元素螯合物或生色团。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其特征在于，所述成像方法选自MRI、 PET、SPECT, CT-PET, MR、MR-PET、UR 或 IR。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其特征在于，所述肿瘤组织是实体瘤， 尤其是肉瘤、癌瘤、母细胞瘤或恶性黑色素瘤。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其特征在于，所述肿瘤组织为转移性肿 瘤组织。
13.通过肿瘤特异性蛋白酶对肿瘤组织周围的蛋白进行蛋白水解分解而在下列基质蛋 白中生成的新表位胶原ι-iv、胶原IV-X、纤连蛋白、层粘蛋白、弹性蛋白、蛋白聚糖核心蛋 白、Pro-MMP2、Pro-MMP9、聚集蛋白聚糖。
14.蛋白、肽或其他分子，所述蛋白、肽或其他分子在识别从它们分解生成的新表位方 面通过同源结合物、在体内的半衰期、生物利用度和药物代谢动力学及药效学而优化，所 述蛋白、肽或其他分子用于生成以下肿瘤特异性蛋白酶的新表位ΜΜΡ-1、ΜΜΡ-2、ΜΜΡ-3、 MMP-7、MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、uPA、tPA。
15.根据权利要求1至12中任一项所述的方法用于检测肿瘤特异性蛋白酶的用途。
全文摘要
本发明涉及肿瘤组织的绘图方法，其特征在于，a)使肿瘤组织与单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子接触，所述的单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子识别或结合至少一种新表位，该新表位已经由肿瘤组织周围的蛋白通过肿瘤特异性蛋白酶的蛋白水解分解而生成，b)用成像方法显示由新表位与单克隆抗体、单克隆抗体的抗原结合片段、重组结合蛋白、适体或其他分子形成的复合物，以及，本发明涉及通过肿瘤特异性蛋白酶对肿瘤组织周围的蛋白进行蛋白水解分解而生成的新表位，还涉及用于通过肿瘤特异性蛋白酶生成新表位的蛋白或肽。
文档编号A61K101/02GK101927007SQ20101021542
公开日2010年12月29日 申请日期2010年6月24日 优先权日2009年6月24日
发明者安德烈亚斯·卡佩尔, 阿恩·亨格勒 申请人:西门子公司;西门子保健诊断产品有限责任公司