溶解超滤-喷雾干燥-分子分散包衣-水化制粒-冷冻干燥生产脂质体组合药物的制作方法

专利名称：溶解超滤-喷雾干燥-分子分散包衣-水化制粒-冷冻干燥生产脂质体组合药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种大工业化生产脂质体组合药物制备方法，其特征是，发明主题是 用溶解超滤-喷雾干燥-分子分散包衣-水化制粒-冷冻干燥法，以统一的配方、工艺、设 备既可大工业化生产脂质体药物注射剂，又可大工业化生产脂质体药物口服制剂。
背景技术：
我国制药技术，原料药制备技术和国际先进水平差距仅5年以内，有的已达到或 超过国际先进水平，制剂技术要落后国际先进水平20年。现大量的是生产二代普通制剂， 而三代缓释、控释剂，尤其是四代脂质体等靶向制剂目前仅处于实验室研究阶段。原因有1、现有生产、科研制备脂质体药物技术注射剂与口服制剂配方、工艺、设备不统 一，既浪费资源、能源，投资大，又质量不高，污染环境。2、现有技术中可能使脂质体药物工业化生产的方法有高压勻质法、超声波法、有 机溶剂干燥法、喷雾干燥法、流化床包衣法、单相溶液冷冻干燥法。高压勻质法及超声波法 粒径可控，但是高能破碎，对原料药有破坏；后四种方法对粒径不可控且粒径分布不集中， 有机溶剂残留，有泄漏、沉淀、凝聚、磷脂腐败等质量问题；3、现有脂质体制备方法使脂质体药物载体的包封率不能达100%，各批次波动、变 化大；泄漏率大，失去脂质体药物意义；4、生产过程折腾多，耗能费时，设备投资大，处方、工艺不稳靠、不成熟，导致制剂 质量不可控、不稳定、重现性差；5、灭菌、除热原方法不当，全程无菌、无热原操作难以保障，对脂质体药物缺乏高 度无菌观念，致使脂质体药物在细菌侵蚀下腐败，包封率递降，泄漏率递增，有效期极短，几 乎失去药用价值；6、注射剂不溶解性粒子数及粒径超标；7、原料药、磷脂及辅料、溶剂选材大多没有国家药品质量标准，有专利也批不了新 药证书及生产批文，注册难度很大，时间很长；8、脱离中国实情，从开发到得到脂质体新药生产批文，花费近10年时间，耗资 2000万元以上，再好的药品发明专利，绝大多企业不敢投资开发。可见，在国家进行医疗改 革及国家基本药物制度时期，从已经进入国家基本药物二代制剂中选销量大产品提升到第 四代的脂质体制剂，进行制剂技术创新，消除其副作用及不良反应，这样药品销量大，投资 回收时间短。达到安全、有效、优质、经济这一基本原则。

发明内容
本发明目的是克服上述现有技术的缺陷。本发明的主题是用溶解超滤-喷雾干 燥-分子分散包衣-水化制粒-冷冻干燥法，以统一的配方、工艺、设备既可大工业化生产 脂质体药物注射剂，又可大工业化生产脂质体药物口服制剂。提供溶解超滤-喷雾干燥-分
5子分散包衣_水化制粒_冷冻干燥工业化生产脂质体组合药物的规范配方及规范制备方 法。形成二代药物制剂创新提升到四代靶向制剂。1、原料药0.05--0.20
2、磷脂原料0.50--4.00
3、抗氧剂0.01--0.06
4、磷脂膜分子态稀释剂1.00--6.00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂2.00--8.00
6、表面活性剂0.01--0.057、乙醇彡75%浓度(体积比，乙醇水彡75%，干燥时挥发至尽)适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. 01-0. 05M浓度pH值5. 0-8. 0(干燥时挥发至尽)适量9、注射用水(干燥时挥发至尽) 与注射用磷酸盐等体积所述原料药为强脂溶性强或水溶性强特性，配方剂量是现有二代对应口服或注射 剂制剂最小规格制剂量的三分之一到五分之一。优选奥美拉唑钠，或是泮托拉唑钠，或 是炎琥宁，或是甲磺酸培氟沙星，或是乳糖酸阿奇霉素，或是埃索美拉唑钠，或是异环磷酰 胺，或是盐酸妥拉唑林，或是兰索拉唑，或是头孢呋辛钠，或是前列地尔与吲达帕胺摩尔数 比1 30的组合物，或是头孢呋辛酯与前列地尔摩尔数比2500 1的组合物，或是氟康 唑，或是伏立康唑，或是硝酸异山梨酯，或是利巴韦林与头孢羟氨苄摩尔数比1 1的组合 物，或是紫杉醇与前列地尔摩尔数333 1的组合物，或是克林霉素磷酸酯，或是更昔洛韦， 或是黄芩苷元，或是前列地尔，或是丹参酮IIA，或是前列腺素A1,或是美罗培南，或是吡格 列酮，或是罗格列酮，或是辛伐他汀，或是阿糖胞苷，或是羟基喜树碱，或是硝普钠，或是伐 昔洛韦，或是多柔比星，或是依托泊苷，或是阿德福韦酯，或是利巴韦林与前列地尔重量比 1000 1组合物，或是川芎嗪磷酸盐、或是甲磺酸帕珠沙星，或是头孢匹胺钠，或是米托蒽 醌，或是盐酸昂丹司琼，或是醒脑静药成份，或是水溶性维生素药成份。所述磷脂原料的平均分子量都定义以800D计算，磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与 多烯磷脂酰胆碱的组合物，摩尔数比为1-5 0.5的组合物。所述磷脂的抗氧剂是还原型谷胱甘肽。所述磷脂膜分子态稀释剂，又是抗氧剂，是二巯丙醇。所述脂质体载药体分散剂，又为赋型剂，为木糖醇。所述表面活性剂是去氢胆酸钠。脂质体组合药物的各组份原料都应有国家标准，并且都是药用注射剂级的国家标 准。既符合国家GMP规范，又符合国家《药品注册管理办法》的规定，以利产业化开发。本发明还提供所述组质体组合药物的规范制备方法1、在溶解罐中，将木糖醇配料量在注射用磷酸盐缓冲液中溶解成木糖醇的10%的 重量百分比溶液，将此溶液在121°C蒸汽灭菌20分钟，当溶液温度为20-25°C时，用截留分 子量1000D的超滤膜的超滤柱超滤，除溶液中的热原及热原分子片段，取超滤得到的溶液；再在室温下，等分超滤得到的溶液，分为A、B溶液，将A、B溶液分别用5% -8%的分析纯氢 氧化钠溶液调pH值8. 5，将A、B溶液分别经0. 05 μ m以下孔径的膜滤过，除去不溶性粒子、 高价金属离子、金属离子的沉淀物，再将A、B溶液分别用8%的分析纯的盐酸溶液调pH值 为5. 0-8. 0。若是水溶性强的原料药用适量注射用水溶解完全，用截留分子量1000D的膜超 滤，除热原，所得超滤溶液合并到B溶液中搅拌均勻，再经0. 05 μ m孔径以下膜滤过，除去原 料药溶液中菌、不溶性粒子。原料药液要求检验热原及不溶性粒子合格才能允许加入B溶 液中。若是脂溶性的原料药溶解则按下面第3步处理。2、将A溶液在制备药用注射剂级的喷雾干燥机中，按喷雾干燥常法，A溶液由设备 顶部的喷雾喷咀中与洁净度100级压缩空气(由压缩机来，室温)混合喷出，与设备底部进 入的温度150°c -190°c 100级洁净空气(由引风机引来，高温)气液逆流混合，喷雾干燥成 120-150目左右多孔粒子干粉。干燥完毕，干燥物料存放在此设备底部备用。3、分别加入脂溶性的原料药、磷脂、磷脂分散剂到乙醇中搅拌溶解完全，制成比重 在1. 0至1. 2的溶液，经过截留分子量1000D的膜超滤，再经0. 05 μ m以下孔径膜滤过，除 去热原、细菌、不溶性粒子。4、将第2步制备的A溶液的组合物干燥颗粒，放到沸腾包衣机中，按沸腾包衣及沸 腾干燥常法操作，先将第3步制备的磷脂乙醇溶液等体积分三份。在设备底部改为引入无 水、无菌、无油、无0. 001 μ m以上粒径的粒子的室温纯氮气流，在40°C _65°C温度下，对第 2步制得的木糖干燥物粒子进行沸腾流化状态下包衣先将第一份的(三分之一体积的) 磷脂乙醇溶液，由泵输送到设备中部的包衣喷咀中与经压缩的洁净级别为100级纯氮气混 合，呈喷雾状喷到机中沸腾高度为400mm-450mm物料(木糖醇)流的最密集处，在沸腾物料 粒子表面包衣，沸腾下的物料同时高度均勻地混和及分散，并极快地使溶剂挥发，形成多孔 固体包衣薄层，第一个三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸腾干燥15分钟，再将第 一步制备的B溶液也等分三份，将第一份B溶液的体积的三分之一溶液在无水、无菌、无油、 无0. 001 μ m以上粒径的粒子的100级纯氮气流中，按上述操作包衣，包衣后，沸腾干燥20 分钟，这样进行了第一次包衣-干燥操作；重复上述包衣-干燥操作，分别进行第二、第三次 两种溶液的第二份、第三份的三分之一体积的溶液按上述操作进行磷脂液与B溶液的交替 包衣-干燥操作。最外层包衣层是木糖醇微孔干燥物层，或是溶于水的原料药、木糖醇的组 合物的微孔干燥物层，第三次包衣后，得到的包衣干燥物料中残留水份< 1.0%，残留的二 巯丙醇< 0. 2%。注意，若是水溶性的原料药，则是原料药及木糖醇在B溶液中对A溶液的 干燥颗粒三次包衣，其乙醇溶液中不含原料药。5、在配料罐中加入与第一步用的注射用磷酸盐溶液等体积的注射用水，在罐内充 氮气与罐外压持平，100转/分钟搅拌速度下，加热至60士5°C ；调搅拌转速为500-700转 /分钟，在罐内充氮气下，在30分钟至60分钟内把第4步制得的包衣干燥物加入到配料罐 中；加完包衣干燥物后，在罐内充氮气环境下，保持温度60士5°C，并在100转/分钟搅拌 下保持60-120分钟；再在100转/分钟搅拌下，把罐内药液冷却到30-40°C ；再在100转 /分钟搅拌下，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽及去氢胆酸钠溶解完全，并调整药液PH值 5. 0-8. O06、在保药液持温度在30士5°C范围内，在0. 1_0. 2Mpa氮气压下，用0. 15 μ m膜滤过 第5步制得的药液，取滤过的药液，得到粒径小于150nm的脂质体药液。按药剂学允许该药品的剂量分装脂质体药液到西林瓶中，并半加塞，在冷冻干燥机组的冷冻干燥箱中常法冷 冻干燥。至药品固体残留水分为小于2%，二巯丙醇残留量为小于0.2%。真空压塞，轧盖， 检验合格后进库。制成脂质体载药体的纳米粒径的冻干针剂。此冻干针剂还可配成无菌喷雾剂。7、在100级无菌级别下，将第6步滤过的滤膜上截留的大于150nm的脂质药物颗 粒洗到10%的按第1步操作灭菌、除热原新制备的10%木糖醇溶液中，测定药液中总磷脂 原料的含量，并用灭菌除热原合格新制备的10%木糖醇溶液调整药液体积，达到控制药液 中总磷脂含量在40-80mg/ml ；把这药液加入到另一配料灌中，冲氮气下，100转/分钟搅拌 速度，30-60分钟内加热到50士5°C，保持这温度范围搅拌60-120分钟；再保持冲氮气下， 100转/分钟转速，冷却药液至20-25°C，把药液分装到316L的不锈钢托盘中，放到另一台 冻干机组的冷冻干燥箱中，常法冷冻干燥，至药物固体中水分含量小于2%。二巯丙醇残留 量为小于0.2%。得到脂质体药物固体，把脂质体药物固体在100级无菌级别下，粉碎至 80-100目，按药剂学允许的剂量，常法制成该药的无菌肠溶口服制剂，无菌拴剂。8、所有操作都应严格按照国家GMP规范中注射剂无菌要求进行。口服制剂也得按 注射剂无菌要求进行。本发明的脂质体药物，无菌冻干针剂在使用时，当西林瓶内用输液水化溶解时，磷 脂分散剂把脂质体载药体迅速分散，并在木糖醇液表面张力及表面活性剂作用下，形成粒 径50nm-150nm范围单室纳米粒径的脂质体载药粒子均勻分散体系；口服制剂在肠内形成 150-1000nm粒径粒子。包封率都在100%。脂质体载药体分散在输液中6小时内泄漏率 5%以下，不沉淀、不凝聚、不分层，分散均勻。本发明的药物口服后在胃肠道液中分散组成 单室及多室混合脂质体药物，提高药物的治疗指数。本发明的优势有1、以统一的配方、工艺、设备既可大工业化生产脂质体药物注射剂，又可大工业化 生产脂质体药物口服制剂。2、用二代制剂的设备创新及二代制剂工艺的创新组合制备四代靶向制剂，使神秘 的脂质体药物从实验室实施工业化稳定生产。开拓了脂质体组合药物的规范配方、规范制 备方法，而且是注射剂、口服制剂、其它给药途径制剂有统一的核心配方及制备方法，在廉 价设备内生产，极大地节省厂房、设备、人力、时间、能源，也可实现三废零排放。3、本发明重在理念创新带来创新技术突破以安全、有效、优质、经济这一基本原 则，对发明药品从选料开始、到制备过程、到使用最终脂质体药物分散到输液中全程对药品 的无菌、热原、粒径、粒径分布、包封率、泄漏率、腐败率、沉降速率、凝聚率、有效期等等都是 高要求地、完善地符合这一基本原则，使本发明药品产业化开发上市风险小。4、本发明中的药品核心技术有磷脂原料摩尔数投入量突破现有技术用量，是现 有技术用量的5倍，是原料药的10倍，并且原料药是选脂溶性或水溶性强于分散剂木糖醇 的药物，磷脂对药物的包封率大大地大于对木糖醇的包封率，包封率达100% ；同时磷脂原 料用量大，存在大量空白脂质体，在体内空白脂质体被巨噬细胞吞噬，使载药脂质体少被吞 噬，疗效更高；表面活性剂溶于脂质体磷脂膜层中，对脂质体双分子层起“封堵”，加固作用， 这因为脂质体表面活性剂是钠盐，当溶解生理盐水及葡萄糖等PH值小于6输液中，部分其 钠盐变成不溶于水的酸分子，而进入磷脂双分子层中，代替胆固醇也起“封堵”、加固脂质体
8粒子作用，使泄漏率非常小，表面活性剂还有抗脂质体在输液中的沉淀、凝聚作用，还有加 强脂质体分散成均勻的脂质体输液作用；由于加入磷脂膜分散剂二巯丙醇，在包衣干燥时， 使磷脂膜呈分子态的微孔固态分散代替高压撞击破碎、超声波波碎磷脂膜粒子，比高压撞 击破碎的磷脂原料粒子小千万倍，在包衣时木糖醇取代挥发的二巯丙醇位置，组成磷脂与 木糖醇分子态微孔固体分散体系，使木糖醇成为脂质体的分散剂；本研究发现，木糖醇也和 甘露醇样具有保护脂质体载药体在冷冻干燥时不被小冰渣破坏的保护作用，但甘露醇在静 脉滴注时对血管有刺激作用；二巯丙醇在包衣时抗氧化作用，保护谷胱甘肽、磷脂、原料药 不被氧化，使谷胱甘肽在体内起抗氧化及抗过氧化组用，并保护肝脏不受药物损害；磷脂材 料本研究发现，氢化大豆卵磷脂这饱和磷脂和多烯磷脂酰胆碱组合物制成脂质体稳定、泄 漏率低，磷脂对人体无抗原及对肝脏无损害；本发明的脂质体冻干针剂是制成了脂质体均 勻分散体系再冷冻干燥，在重新水化时，保持脂质体物理及化学性质不变。5、由于上述作用本发明药物在输液中的粒径、粒径分布不变，包封率100%、泄漏 率< 5%、腐败率为0%、沉降率为0%、凝聚率为0%，消除了脂质体药物冰箱储运、含量及 包封率递降、泄漏率递升，有效期短于原料药的四大世界性难题。令人满意地成为优良的可 实用的四代制剂。6、本发明制备的脂质体药物，磷脂膜中磷脂是以分子状态成固态溶液分散于磷 脂膜吸释剂及表面活性剂中，且比超声波法、高压均勻质破碎磷脂粒子要小千万倍；在包 衣_干燥时溶剂及二巯丙醇的挥发使磷脂膜层形成无数微小孔层，这比冷冻干燥法形成网 状结构比表面积要大得多，因为冻干过程中固体中水分子升华挥发路程比包衣层路程长 千万倍，使网状结构溶解凝结；又由于磷脂膜层和木糖醇层是磷脂膜分散剂层，在水化时迅 速、高度分散磷脂。这三种优势，比现有技术形成的脂质体粒子粒径更稳定、更重现性好地 形成纳米粒径范围，且粒径呈正态分布。7、本发明组合药物由于选的磷脂是天然磷脂，是人体及微生物细胞膜组成物质， 对病菌、病毒细胞、肿瘤细胞及血管壁破坏处有更好靶向释药功能，治疗指数高，所以原料 药用量仅是二代药物的三分之一至五分之一，加上磷脂的包封，原料药的不良反应几乎没 有了。原料药的用量减少，加大磷脂用量，确保包封率达100%，并有“封堵”加固脂质体作 用的表面活性剂，所以泄漏率为零。8、本发明组合药物的磷脂膜分散剂又是磷脂膜包衣的支撑剂。又是与表面活性剂 共同控制前脂质体水化时脂质体粒子大小的物质，它们是由在水溶液中形成一定范围的表 面张力作用所致。木糖醇可对糖尿病、肝病患者供给能量，是理想的磷脂膜分散剂及赋型 剂。9、本发明的组合药物的磷脂膜稀释剂，由既溶于乙醇又溶于水，在喷雾干燥时挥 发，形成磷脂膜成分子态固体分散体系的微孔磷脂膜层，在水化时磷脂膜中磷脂是以分子 态破碎程度并和表面分散剂把磷脂分散到水中，形成均勻的纳米粒脂质体载药体，其中的 二巯丙醇又是优良的脂质体的抗氧剂，在包衣时保护磷脂及药物。10、本发明的组合药物的表面活性剂作用第一是在磷脂水化时把磷脂分散到水 中，第二在进入PH值4. 0-6. 0的输液中，它又由钠盐酸化为分子结构有机酸，又进入脂质体 双分脂层中，起到脂质体“封堵”加固作用，第三在脂质体表面起表面活性剂作用。11、本发明能使脂质体药物有效期达一年，采用四个有效措施一是加了抗氧剂，保护磷脂膜及原料药不氧化；二是在磷脂分散剂包衣层在磷脂膜包衣层外面，包护磷脂膜 层；三是口服制剂也是按注射剂选材、灭菌及无菌操作，消除细菌对磷脂的腐败分解，这是 所有现有脂质体口服制剂乃至注射剂技术重大失误的地方；四是在脂质体分散于输液中， 有0. 2%的二巯丙醇络合输液中金属离子，使输液中带来的金属离子不会破坏磷脂及脂质 体载药体，在维生素C-谷胱甘肽-二巯丙醇组合抗氧剂、在脂质体表面活性剂、分散剂共同 作用下不泄漏、不沉淀、不分层、不凝聚、不氧化、不腐败，从而使脂质体载约体真正过了有 实际使用价值难关。脂质体载药体分散在输液中，由于脂质体本身缺陷及输液的作用下，使 脂质体组合药物产生质变，也是本发明弥补现有技术的重大失误之处。
12、本发明的脂质体药物在制备过程中，磷脂液及磷脂分散剂液都经过0.05 μ m 孔径以下的膜滤过(通常注射剂制备都是经0. 22 μ m膜滤过)，使不溶解性粒子粒径降至允 许值的四分之一，使脂质体水化后粒径50nm至150nm粒子全为脂质体粒子。可精确测定脂 质体载药体的粒径及粒径分布。这也是本发明弥补现有技术重大失误的地方。
具体实施例方式
实施例1
原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
1、原料药是前列地尔与吲达帕胺
摩尔数1 30组合物0. 05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0.5的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ pH值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积
本实施例的规范制备步骤和方法
1、在溶解罐中，将木糖醇配料量在注射用磷麵■盐缓冲液中溶解成木糖醇的10%的
重量百分比溶液，将此溶液在121°C蒸汽灭菌20分钟，当溶液温度为20-25°C时，用截留分 子量1000D的超滤膜的超滤柱超滤除溶液中的热原及热原分子片段，取超滤得到的溶液； 再在室温下，等分超滤得到的溶液为A、B溶液，将A、B溶液分别用5% -8%的分析纯氢氧 化钠溶液调pH值8. 5，将A、B溶液分别经0. 05 μ m以下孔径的膜滤过，除去不溶性粒子、高 价金属离子、金属离子的沉淀物，再将A、B溶液分别用8%的分析纯的盐酸溶液调pH值为 5. 0-8. 0。原料溶液要求检验热原及不溶性粒子合格。 2、将A溶液在药用注射剂级喷雾沸腾干燥器中，按喷雾干燥常法，A溶液由设备顶 部的喷雾喷咀中与洁净度100级压缩空气(由压缩机来，室温)混合喷出，与设备底部进入 的温度150°C-190°C 100级洁净空气(由引风机引来，高温)气液逆流混合，喷雾干燥成 120-150目左右多孔粒子干粉。干燥完毕，干燥物料存放在此设备底部备用。
3、分别加入脂溶性的原料药、磷脂、磷脂分散剂到乙醇中搅拌溶解完全，若原料药 溶解不理想，可在乙醇中加入少量的二氯甲烷，至原料药溶解度理想为止，尽量不加及尽量 少加二氯甲烷，制成比重在1. 0至1. 2的溶液，经过截留分子量1000D的聚四氟乙烯材质膜 超滤，再经0. 05 μ m以下孔径钛膜滤过，除去热原、细菌、不溶性粒子。4、将第2步制备的A溶液的组合物干燥颗粒，放到喷雾沸腾包衣_沸腾干燥机中， 按沸腾包衣、沸腾干燥常法操作，先将第3步制备的磷脂乙醇溶液等体积分三份。在设备底 部改为引入无水、无菌、无油、无0. 001 μ m以上粒径的粒子的室温纯氮气流，在40°C -65°C 温度下，对第2步制得的木糖干燥物粒子进行沸腾流化状态下包衣先将第一份的(三分 之一体积的)磷脂乙醇溶液，由泵输送到设备中部的包衣喷咀中与经压缩洁净级别为100 级纯氮气混合，喷雾状喷到机中沸腾高度为400mm-450mm物料(果糖与甘露醇组合物)流 的最密集处，在沸腾物料粒子表面包衣，沸腾下的物料同时高度均勻地混和及分散，并极快 地使溶剂挥发，形成多孔固体包衣薄层，第一个三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸 腾干燥15分钟，再将第一步制备的B溶液也等分三份，将第一份B溶液的体积的三分之一 溶液在无水、无菌、无油、无0. 001 μ m以上粒径的粒子的100级纯氮气流中，按上述操作包 衣，包衣后，沸腾干燥20分钟，这样进行了第一次包衣_干燥操作；重复上述包衣_干燥操 作，分别进行第二、第三次两种溶液的第二份、第三份的三分之一体积的溶液按上述操作进 行磷脂液与B溶液的交替包衣_干燥操作。最外层包衣层是木糖醇微孔干燥物层，或是溶 于水的原料药、木糖醇的组合物的微孔干燥物层，第三次包衣后，得到的包衣干燥物料中残 留水份彡1. 0%，残留的二氯甲烷及乙醇为0%，残留的二巯丙醇彡0. 2%。5、在配料罐中加入与第一步用的注射用磷酸盐溶液等体积的注射用水，在罐内充 氮气与罐外压持平，100转/分钟搅拌速度下，加热至60士5°C，调搅拌转速为500-700转/ 分钟，在罐内充氮气下，在30分钟-60分钟内把第4步制得的包衣干燥物加入到配料罐中， 加完包衣干燥物后，在罐内充氮气环境下，保持温度60 士 5 °C，并在100转/分钟搅拌下保持 60-120分钟。再在100转/分钟搅拌下，把罐内药液冷却到30-40°C。再在100转/分钟搅 拌下，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽及去氢胆酸钠溶解完全，并调整药液PH值5. 0-8. 0。6、在保药液持温度在30士5°C范围内，在0. 1_0. 2Mpa氮气压下，用0. 15 μ m膜滤过 第5步制得的药液，取滤过的药液，得到粒径小于150nm的脂质体药液。按药剂学允许该药 品的剂量分装脂质体药液到西林瓶中，并半加塞，在冷冻干燥机组的冷冻干燥箱中常法冷 冻干燥。至药品固体残留水分为小于2%，二巯丙醇残留量小于0. 2%，乙醇及二氯甲烷残 留都为0%。真空压塞，轧盖，检验合格后进库。制成冻干针剂。此冻干针剂可配成无菌喷 雾剂。7、在100级无菌级别下，将第6步滤过的滤膜上截留的大于150nm的脂质药物颗 粒洗到10%的按第1步操作灭菌除热原合格的木糖醇溶液中，测定药液中总磷脂原料的含 量，并用灭菌除热原合格的10%木糖醇溶液调整药液体积，达到控制药液中总磷脂含量在 40-80mg/mL·把药液加入到另一配料灌中，冲氮气下，100转/分钟搅拌速度，30-60分钟内 加热到50士。C，保持这温度范围搅拌60-120分钟，再保持冲氮气下，100转/分钟转速，冷 却药液至20-25°C，把药业分装到316L的不锈钢托盘中，放到另一台冻干机组的冷冻干燥 箱中，常法冷冻干燥，至药物固体中水分残留量小于2%，二巯丙醇残留量小0. 2%，乙醇及 二氯甲烷残留为0%。得到脂质体药物固体，把脂质体药物固体在100级无菌级别下粉碎
11至80-100目，按药剂学允许的剂量，常法制成该药的无菌肠溶口服制剂，无菌拴剂。8、所有操作都应严格按照国家GMP规范中注射剂无菌要求进行。口服制剂也得按 注射剂无菌要求进行。实施例2原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下1、原料药是原料药是前列地尔与吲达帕胺摩尔数1 30组合物0. 202、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱摩尔数5 0. 5的组合物4. 003、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0.064、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇6.005、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇 8. 006、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 057、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积本实施例的规范制备步骤及方法同实施例1。实施例3原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下1、原料药是前列地尔与吲达帕胺摩尔数1 30组合物0. 052、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱摩尔数2 0. 5的组合物4. 003、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0.014、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇6.005、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇 2. 006、表面活性剂是去氢胆酸钠0.057、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽) 适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积本实施例的规范制备步骤及方法同实施例1。实施例4原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下1、原料药是前列地尔与吲达帕胺摩尔数1 30组合物0.052、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱摩尔数3 0.5的组合物0.503、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0.014、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1.00
125、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80%(ν/ν)(干燥时挥发至尽) 适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0.05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积 本实施例的规范制备步骤及方法同实施例1。
实施例5
原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
1、原料药是前列地尔与吲达帕胺
摩尔数1 30组合物0.20
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数4 0. 5的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 06
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇8. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80%(ν/ν)(干燥时挥发至尽) 适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0.05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积 本实施例的规范制备步骤及方法同实施例1。
实施例6
原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
1、原料药是兰索拉唑0.05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数5 0. 5的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80%(ν/ν)(干燥时挥发至尽) 适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0.05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积 本实施例的规范制备步骤及方法同实施例1。
实施例7
原料药是脂溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
1、原料药是兰索拉唑0.20
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 5的组合物4. 00
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 06
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1.005、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 006、表面活性剂是去氢胆酸钠0.017、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积本实施例的规范制备步骤及方法同实施例1。以上实施例所述脂溶性的原料药，或是头孢呋辛酯与前列地尔摩尔数比2500 1 的组合物，或是氟康唑，或是伏立康唑，或是硝酸异山梨酯，或是利巴韦林与头孢羟氨苄摩 尔数比1 1的组合物，或是紫杉醇杉醇与前列地尔摩尔数333 1的组合物，或是克林霉 素磷酸酯，或是氢蒿琥酯，或是黄芩苷元，或是前列地尔，或是丹参酮ΙΙΑ，或是前列腺素A1, 或是二高_ Y _亚麻酸、或是羟基喜树碱，或是辛伐他汀，或是吡格列酮，或是罗格列酮，或 是阿德福韦酯，或是利巴韦林与前列地尔重量比1000 1组合物，或是米托蒽醌。实施例11
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
1、原料药是奥美拉唑钠0. 05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 1的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积
本实施例的规范制备步骤及方法
1、在溶解罐中，将木糖醇配料量在注射用磷麵■盐缓冲液中溶解成木糖醇的10%的
重量百分比溶液，将此溶液在121°C蒸汽灭菌20分钟，当溶液温度为20-25°C时，用截留分 子量1000D的超滤膜的超滤柱超滤除溶液中的热原及热原分子片段，取超滤得到的溶液； 再在室温下，等分超滤得到的溶液为A、B溶液，将A、B溶液分别用5% -8%的分析纯氢氧 化钠溶液调ρΗ值8. 5，将A、B溶液分别经0. 05 μ m以下孔径的膜滤过，除去不溶性粒子、高 价金属离子、金属离子的沉淀物，再将A、B溶液分别用8%的分析纯的盐酸溶液调ρΗ值为 5. 0-8. 0。将水溶性强的原料药用适量注射用水溶解完全，用截留分子量1000D的膜超滤， 除热原，合并到B溶液中搅拌均勻，再经0. 05 μ m孔径以下膜滤过，除原料药中菌、除不溶性 粒子。原料药液要求检验热原及不溶性粒子合格才能允许加入B溶液中。
2、将A溶液在制备药用注射剂级喷雾干燥机中，按喷雾干燥常法，A溶液由设备顶 部的喷雾喷咀中与洁净度100级压缩空气(由压缩机来，室温)混合喷出，与设备底部进入 的温度150°c-190°c 100级洁净空气(由引风机引来，高温)气液逆流混合，喷雾干燥成 120-150目左右多孔粒子干粉。干燥完毕，干燥物料存放在此设备底部备用。
3、分别加入磷脂、磷脂分散剂到乙醇中搅拌溶解完全，制成比重在1. 0至1. 2的溶 液，经过截留分子量1000D的膜超滤，再经0. 05 μ m以下孔径膜滤过，除去热原、细菌、不溶
性粒子。4、将第2步制备的A溶液的组合物干燥颗粒，放到喷雾沸腾包衣_沸腾干燥机中， 按沸腾包衣、沸腾干燥常法操作，先将第3步制备的磷脂乙醇溶液等体积分三份。在设备底 部改为引入无水、无菌、无油、无0. 001 μ m以上粒径的粒子的室温纯氮气流，在40°C -65°C 温度下，对第2步制得的木糖醇干燥物粒子进行沸腾流化状态下包衣先将第一份的(三 分之一体积的)磷脂乙醇溶液，由泵输送到设备中部的包衣喷咀中与经压缩的洁净级别为 100级纯氮气混合，喷雾状喷到机中沸腾高度为400mm-450mm物料(果糖与甘露醇组合物) 流的最密集处，在沸腾物料粒子表面包衣，沸腾下的物料同时高度均勻地混和及分散，并极 快地使溶剂挥发，形成多孔固体包衣薄层，第一个三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成， 沸腾干燥15分钟，再将第一步制备的B溶液也等分三份，将第一份B溶液的体积的三分之 一溶液在无水、无菌、无油、无0. 001 μ m以上粒径的粒子的100级纯氮气流中，按上述操作 包衣，包衣后，沸腾干燥20分钟，这样进行了第一次包衣_干燥操作；重复上述包衣-干燥 操作，分别进行第二、第三次两种溶液的第二份、第三份的三分之一体积的溶液按上述操作 进行磷脂液与B溶液的交替包衣_干燥操作。最外层包衣层是溶于水的原料药、木糖醇的 组合物的微孔干燥物层，第三次包衣后，得到的包衣干燥物料中残留水份< 1.0%，残留的 二巯丙醇彡0. 2%，乙醇残留量为0%。5、在配料罐中加入与第一步用的注射用磷酸盐溶液等体积的注射用水，在罐内充 氮气与罐外压持平，100转/分钟搅拌速度下，加热至60士5°C，调搅拌转速为500-700转/ 分钟，在罐内充氮气下，在30分钟-60分钟内把第4步制得的包衣干燥物加入到配料罐中， 加完包衣干燥物后，在罐内充氮气环境下，保持温度60 士 5 °C，并在100转/分钟搅拌下保持 60-120分钟。再在100转/分钟搅拌下，把罐内药液冷却到30-40°C。再在100转/分钟搅 拌下，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽及去氢胆酸钠溶解完全，并调整药液PH值5. 0-8. 0。6、在保持药液温度在30士5°C范围内，在0. 1_0. 2Mpa氮气压下，用0. 15 μ m膜滤过 第5步制得的药液，取滤过的药液，得到粒径小于150nm的脂质体药液。按药剂学允许该药 品的剂量分装脂质体药液到西林瓶中，并半加塞，在冷冻干燥机组的冷冻干燥箱中常法冷 冻干燥。至药品固体残留水分为小于2%，二巯丙醇残留量小于0. 2%，乙醇残留量为0%。 真空压塞，轧盖，检验合格后进库。制成冻干针剂。此冻干针剂或可配成无菌喷雾剂。7、在100级无菌级别下，将第6步滤过的滤膜上截留的大于150nm的脂质药物颗 粒洗到10%的按第1步操作灭菌除热原合格的新制备的木糖醇溶液中，测定药液中总磷 脂原料的含量，并用灭菌除热原合格的10%木糖醇溶液调整药液体积，达到控制药液中总 磷脂含量在40-80mg/ml。把药液加入到另一配料灌中，冲氮气下，100转/分钟搅拌速度， 30-60分钟内加热到50士。C，保持这温度范围搅拌60-120分钟，再保持冲氮气下，100转/ 分钟转速，冷却药液至20-25°C，把药业分装到316L的不锈钢托盘中，放到另一台冷冻干燥 机组的冷冻干燥箱中，常法冷冻干燥，至药物固体中水分含量小于2%，二巯丙醇残留量为 0. 2%，乙醇残留量为0%。得到脂质体药物固体，把脂质体药物固体在100级无菌级别下， 粉碎至80-100目，按药剂学允许的剂量，常法制成该药的无菌肠溶口服制剂，无菌拴剂。8、所有操作都应严格按照国家GMP规范中注射剂无菌要求进行。口服制剂也得按
16注射剂无菌要求进行。
实施例12
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔荽文比如下
1、原料药是奥美拉唑钠0. 05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 1的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积
本实施例的规范制备步骤及方法同实施例11O
实施例13
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔荽文比如下
1、原料药是奥美拉唑钠0. 05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 1的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积
本实施例的规范制备步骤及方法同实施例11O
实施例14
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔荽文比如下
1、原料药是奥美拉唑钠0. 05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 1的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积本实施例的规范制备步骤及方法同实施例11。 实施例15
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
1、原料药是奥美拉唑钠0.05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 1的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80%(ν/ν)(干燥时挥发至尽) 适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0.05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积 本实施例的规范制备步骤及方法同实施例11。
实施例16
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
1、原料药是泮托拉唑钠0.05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱 摩尔数1 0. 1的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2.00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80%(ν/ν)(干燥时挥发至尽) 适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0.05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积 本实施例的规范制备步骤及方法同实施例11。
实施例17
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔数比如下
1、原料药是泮托拉唑钠0.05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 1的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0. 01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1. 00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2. 00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0. 01
7、乙醇80%(ν/ν)(干燥时挥发至尽) 适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0.05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐缓冲液等体积
18
本实施例的规范制备步骤及方法同实施例11O
实施例18
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔病文比如下
1、原料药是泮托拉唑钠0.05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 1的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0.01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1.00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2.00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0.01
7、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷丨酸盐缓冲液等体积
本实施例的规范制备步骤及方法同实施例11O
实施例19
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔病文比如下
1、原料药是泮托拉唑钠0.05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 1的组合物0. 50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0.01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1.00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2.00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0.01
7、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷丨酸盐缓冲液等体积
本实施例的规范制备步骤及方法同实施例11O
实施例20
原料药是水溶性强的脂质体组合药物规范的各原料组份摩尔病文比如下
1、原料药是泮托拉唑钠0.05
2、磷脂原料是大豆卵磷脂与多烯磷脂酰胆碱
摩尔数1 0. 1的组合物C.50
3、抗氧剂是还原型谷胱甘肽0.01
4、磷脂膜分子态稀释剂是二巯丙醇1.00
5、脂质体载药体分散剂及赋形剂是木糖醇2.00
6、表面活性剂是去氢胆酸钠0.01
7、乙醇80% (ν/ν)(干燥时挥发至尽)适量
8、注射用磷酸盐缓冲液0. 05Μ ρΗ值5. 0-8. 0适量
9、注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷丨酸盐缓冲液等体积
本实施例的规范制备步骤及方法同实施例11。实施例11至实施例20所述水溶性的原料药或是炎琥宁、或是甲磺酸培氟沙星、 或是乳糖酸阿奇霉素、或是埃索美拉唑钠、或是异环磷酰胺、或是盐酸妥拉唑林、或是头孢 呋辛钠、或是更昔洛韦、或是阿糖胞苷、或是硝普钠、或是伐昔洛韦、或是多柔比星、或是依 托泊苷、或是川芎嗪磷酸盐、或是盐酸左氧氟沙星、或是头胞匹胺钠、或是盐酸昂丹司琼、或 是醒脑静药成份、或是水溶性维生素药成份、或是美罗培南。技术经济及质量指标对比
本发明方法勻质冷冻干燥法流化床包衣法
1、可制剂型口服、注射剂注射剂、口服口服脂质体
脂质体载药体脂质体载药体载药体
2、IOOkg/ 批脂
质体设备投资1600万元2600万元1200万元
3、工时24小时/批48小时/批8小时/批
4、无菌率100%90%有限菌落
5、热原彡 50EU/ml彡 100EU/ml彡 300EU/100mg
6、包封率100%80% -90%80% -90%
7、泄漏率(5%^ 20%^ 20%
8、粒径nm^ 150彡200^ 2000
9、产生杂质3% -5%10% -20%5% -10%
结论本发明技术制备脂质体载药体与现有勻质冷冻干燥法、流化床包衣法技术
制脂质体载药体相比，本发明技术经济及主要质量指标都优越于勻质冷冻干燥法，质量指 标都优于流化床包衣法。药效学验证试验1、抗胃溃疡药物药效学验证试验实验动物选建康大鼠，性别不限，体重 200-250g，每组8只。使用药物及剂量见试验结果表。实验前，大鼠禁食24小时，自由饮 水，在乙醚麻醉下打开腹腔，将内径5mm、长30mm的玻璃管垂直放置于胃体部浆膜面上，向 管腔内加入冰乙酸0. 2ml, 1. 5分钟后用棉签蘸出冰乙酸，缝合手术切口。术后正常饮食，第 二天随机设立空白对照组1组及阳性对照组1组，空白对照组用生理盐水给药，0. 5ml/次， 腹腔注射给药，阳性对照组以法莫替丁用生理盐水溶解，取0. 5ml/次，本发明的脂质体药 物给药组设注射给药、口服给药组。脂质体药物注射给药，用生理盐水溶解脂质体药物，取 0.5ml/次。给药15天，每天给药2次，12小时一次。分为注射给药和口服給药。每实施例 制出样品分别连接给药3天。给药15天后，解剖取出胃，并用甲醛固定，测量溃疡面积mm2， 计算各组平均溃疡面积。药效学试验结果表
20 可见，本发明的上述药物比对照阳性药物疗效高。2、抗感染药物药效学试验(1)动物选择选择由实验动物中心制备的感染动物实验模型的小鼠，体重 18-22g，雌雄各半，随机分组，每组动物50只。(2)感染菌种金黄色葡萄球菌致肺炎的模型小鼠、肺炎链球菌致肺炎的模型小
鼠二个组。(3)感染菌量由实验动物中心测出所试菌株的100%最小致死量(100% MLD)，作 为感染菌量。(4)感染途径菌原液用5%胃膜素稀释至所需浓度(实验动物中心确定)，经尾 静脉注射。(5)试验方法将小鼠分A.金黄色葡萄球菌致肺炎的模型小鼠组、B.肺炎链球菌 致肺炎的模型小鼠组二个组。进行不给药对照、现有技术制备的注射用克林霉素磷酸酯对 照、本发明药物对照。每组模型动物50只。感染后立即静注给药或口服，每隔6小时再给 药一次。观察动物物反应，连续7天，记录小鼠死亡数。所用药物及剂量、效果见试验结果
表 3、1抗心肌缺血药药效学验证试验选用健康小鼠，性别不限，体重18_20g，每组10只。用异丙肾上腺素引起小鼠心肌 缺血(由实验动物中心制备心肌缺血小鼠模型)。设空白对照及阳性药物对照组。阳性对 照药物规定为硝酸甘油，每天给药一次，给药10天。10天后进行缺血或梗死心肌的双重染色，即N-BT或TTC染色；显微镜下定量心肌缺血和梗死面积，计算每组平均值与阳性对照组 平均值及与空白对照组平均值的比的百分数。所用药物、剂量、给药方式见药效学试验结果 表
3、2降血压药的药效学试验选用自发性高血压大鼠(SHR)，每组10只，肾血管狭窄型大鼠，每组10只。先测对 照期血压及心律，当血压稳定后给药，给药前2小时和给药后3小时分别测定血压，给药期 为2周。给药3小时后后血压下降到20mmHg以上为有效。所用药物、剂量、给药方法见药
效学试验结果表 4、抗肿瘤药物药效学试验选大鼠种瘤模型瓦克癌肉瘤(W256)型。体重50_70g，每组动物10只。设阴性 对照组和阳性对照组。阴性对照组注射生理盐水，阳性对照组采用现售紫杉醇药品。每天 1次给药，治疗时间15天。停药24小时后处死动物，解剖剥离瘤块，称瘤重，。计算疗效评 价公式为肿瘤抑制率(C-T)/CX 100%当抑制率大于30%，有效。试验结果表 5、降糖药物药效学试验本发明药物有刺激胰岛素分泌，所以选用正常健康小白 鼠，每组15只。实验小白鼠在禁食(可自由饮水)5小时后给药，每天给药一次。给药2小 时后取血，测定血清葡萄糖值。连接给药7天。计算血糖平均下降率(与空白对照组比)。 血糖下降率大于20%有效。所用药物及剂量、给药途径见试验结果表 6、抗病毒药药效学试验小鼠脑炎模型小鼠ll_13g体重，雌雄不分，每组15只。HSV-I型Sm44株，病毒 腹腔注射，可致脑炎死亡，计算LD5tlt5再HSV-I病毒腹腔依次注射病毒剂量LDJ/2、1/4、1/8 剂量各2天，每天一次。计算死亡率、平均生活日数，与药物治疗组对照病亡保护率、延长生 命率。治疗组给药15天，每天2次。所用药物、剂量、给药途径见试验结果表 7、抗真菌药药效学试验选健康小鼠，体重18_20g，雌雄各半。随机分组，6组，感 染后立即与6小时后尾静脉注射给药，每组10只，作全身感染真菌病模型用。采用隐球菌脑炎真菌株作感染菌株。先测出所使菌株对小鼠的100%最小致死量(100% MLD)作为感 染菌量。感染后立即与6小时后尾静脉注射给药，脸接给药7天，记录动物死亡率％与空白 对照组比较。试验结果如下 通过上述药效学试验结果可见，本发明的脂质体组合药物药物在安全性、稳定性、 疗效都全面优于现有技术制备的现售对应药物。
权利要求
一种脂质体大工业化无菌生产脂质体药物方法，其特征是，主题为溶解超滤 喷雾干燥 分子分散包衣 水化制粒 冷冻干燥法制备脂质体药物，可同时制备注射剂又可同时制备口服制剂的方法。
2.一种脂质体组合药物大工业化生产原料配方，其特征是，主题为溶解超滤_喷雾干 躁_分子分散包衣_水化制粒_冷冻干燥法大工业化生产脂质体组合药物规范配方，其各 组份原料摩尔数比如下(1)原料药(2)磷脂原料(3)抗氧剂(4)磷脂膜分子态稀释剂(5)脂质体载药体分散剂及赋形剂(6)表面活性剂(7)乙醇^ 75%浓度(体积比，乙醇水彡75%，干躁时挥发至尽)适量(8)注射用磷酸盐缓冲液'0. 01-0. 05M浓度PH值5. 0-8. 0 (干躁时挥发至尽)适量(9)注射用水(干燥时挥发至尽)与注射用磷酸盐等体积所述原料药为强脂溶性强或水溶性强特性，配方剂量是现有二代对应口服或注射剂制 剂最小规格制剂量的三分之一到五分之一。优选奥美拉唑钠，或是泮托拉唑钠，或是炎琥 宁，或是甲磺酸培氟沙星，或是乳糖酸阿奇霉素，或是埃索美拉唑钠，或是异环磷酰胺，或是 盐酸妥拉唑林，或是兰索拉唑，或是头孢呋辛钠，或是前列地尔与吲达帕胺摩尔数比1 30 的组合物，或是头孢呋辛酯与前列地尔摩尔数比2500 1的组合物，或是氟康唑，或是伏立 康唑，或是硝酸异山梨酯，或是利巴韦林与头孢羟氨苄摩尔数比1 1的组合物，或是紫杉 醇与前列地尔摩尔数333 1的组合物，或是克林霉素磷酸酯，或是更昔洛韦，或是黄芩苷 元，或是前列地尔，或是丹参酮II A，或是前列腺素A1，或是美罗培南，或是吡格列酮，或是 罗格列酮，或是辛伐他汀，或是阿糖胞苷，或是羟基喜树碱，或是硝普钠，或是伐昔洛韦，或 是多柔比星，或是依托泊苷，或是阿德福韦酯，或是利巴韦林与前列地尔重量比1000 1组 合物，或是川芎嗪磷酸盐、或是甲磺酸帕珠沙星，或是头孢匹胺钠，或是米托蒽醌，或是盐酸 昂丹司琼，或是醒脑静药成份，或是水溶性维生素药成份。所述磷脂原料的平均分子量都定义以800D计算，磷脂原料是氢化大豆卵磷脂与多烯 磷脂酰胆碱的组合物，摩尔数比为1-5 0.5的组合物。所述磷脂的抗氧剂是还原型谷胱甘肽。所述磷脂膜分子态稀释剂，又是抗氧剂，是二巯丙醇。所述脂质体载药体分散剂，又为赋型剂，为木糖醇。所述表面活性剂是去氢胆酸钠。脂质体组合药物的各组份原料都应有国家标准，并且都是药用注射剂级的国家标准。 既符合国家GMP规范，又符合国家《药品注册管理办法》的规定，以利产业化开发。
3.一种脂质体组合药物大工业化生产方法，其特征是，主题为溶解超滤_喷雾干躁_分 子分散包衣_水化制粒_冷冻干燥法大工业化生产脂质体组合药物的规范制备步骤及方法是(1)在溶解罐中，将木糖醇配料量用注射用磷酸盐缓冲液溶解成木糖醇的10%的重量 百分比溶液，将此溶液在121°c蒸汽灭菌20分钟，当溶液温度为20-25°C时，用截留分子量 1000D的超滤膜的超滤柱超滤，除溶液中的热原及热原分子片段，取超滤得到的溶液；再在 室温下，等分超滤得到的溶液，分为A、B溶液，将A、B溶液分别用5% -8%的分析纯氢氧化 钠溶液调pH值8. 5，将A、B溶液分别经0. 05 μ m以下孔径的膜滤过，除去不溶性粒子、高 价金属离子、金属离子的沉淀物，再将A、B溶液分别用8%的分析纯的盐酸溶液调pH值为 5. 0-8. 0。若是水溶性强的原料药用适量注射用水溶解完全，用截留分子量1000D的膜超 滤，除热原，所得超滤溶液合并到B溶液中搅拌均勻，再经0. 05 μ m孔径以下膜滤过，除去原 料药溶液中菌、不溶性粒子。原料药液要求检验热原及不溶性粒子合格才能允许加入B溶 液中。若是脂溶性的原料药溶解则按下面第3步处理。(2)将A溶液在制备药用注射剂级的喷雾干燥机中，按喷雾干燥常法，A溶液由设备顶 部的喷雾喷咀中与洁净度100级压缩空气(由压缩机来，室温)混合喷出，与设备底部进入 的温度150°C-190°C 100级洁净空气(由引风机引来，高温)气液逆流混合，喷雾干燥成 120-150目左右多孔粒子干粉。干燥完毕，干燥物料存放在此设备底部备用。(3)分别加入脂溶性的原料药、磷脂、磷脂分散剂到乙醇中搅拌溶解完全，制成比重在 1. 0至1. 2的溶液，经过截留分子量1000D的膜超滤，再经0. 05 μ m以下孔径膜滤过，除去热 原、细菌、不溶性粒子。(4)将第2步制备的A溶液的组合物干燥颗粒，放到沸腾包衣机中，按沸腾包衣及沸腾 干燥常法操作，先将第3步制备的磷脂乙醇溶液等体积分三份。在设备底部改为引入无水、 无菌、无油、无0. 001 μ m以上粒径的粒子的室温纯氮气流，在40°C _65°C温度下，对第2步 制得的木糖干燥物粒子进行沸腾流化状态下包衣先将第一份的(三分之一体积的)磷脂 乙醇溶液，由泵输送到设备中部的包衣喷咀中与经压缩的洁净级别为100级纯氮气混合， 呈喷雾状喷到机中沸腾高度为400mm-450mm物料(木糖醇)流的最密集处，在沸腾物料粒 子表面包衣，沸腾下的物料同时高度均勻地混和及分散，并极快地使溶剂挥发，形成多孔固 体包衣薄层，第一个三分之一磷脂的乙醇溶液料液包衣完成，沸腾干燥15分钟，再将第一 步制备的B溶液也等分三份，将第一份B溶液的体积的三分之一溶液在无水、无菌、无油、无 0. 001 μ m以上粒径的粒子的100级纯氮气流中，按上述操作包衣，包衣后，沸腾干燥20分 钟，这样进行了第一次包衣-干燥操作；重复上述包衣-干燥操作，分别进行第二、第三次两 种溶液的第二份、第三份的三分之一体积的溶液按上述操作进行磷脂液与B溶液的交替包 衣-干燥操作。最外层包衣层是木糖醇微孔干燥物层，或是溶于水的原料药、木糖醇的组合 物的微孔干燥物层，第三次包衣后，得到的包衣干燥物料中残留水份< 1.0%，残留的二巯 丙醇< 0. 2%。注意，若是水溶性的原料药，则是原料药及木糖醇在B溶液中对A溶液的干 燥颗粒三次包衣，其乙醇溶液中不含原料药。(5)在配料罐中加入与第一步用的注射用磷酸盐溶液等体积的注射用水，在罐内充氮 气与罐外压持平，100转/分钟搅拌速度下，加热至60士5°C;调搅拌转速为500-700转/分 钟，在罐内充氮气下，在30分钟至60分钟内把第4步制得的包衣干燥物加入到配料罐中； 加完包衣干燥物后，在罐内充氮气环境下，保持温度60 士 5 °C，并在100转/分钟搅拌下保持 60-120分钟；再在100转/分钟搅拌下，把罐内药液冷却到30-40°C ；再在100转/分钟搅拌下，分别加入抗氧剂还原型谷胱甘肽及去氢胆酸钠溶解完全，并调整药液PH值5. 0-8. 0。(6)在保药液持温度在30士5°C范围内，在0.1-0. 2Mpa氮气压下，用0. 15 μ m膜滤过第 5步制得的药液，取滤过的药液，得到粒径小于150nm的脂质体药液。按药剂学允许该药品 的剂量分装脂质体药液到西林瓶中，并半加塞，在冷冻干燥机组的冷冻干燥箱中常法冷冻 干燥。至药品固体残留水分为小于2%，二巯丙醇残留量为小于0.2%。真空压塞，轧盖，检 验合格后进库。制成脂质体载药体的纳米粒径的冻干针剂。此冻干针剂还可配成无菌喷雾 剂。(7)在100级无菌级别下，将第6步滤过的滤膜上截留的大于150nm的脂质药物颗粒 洗到10%的按第1步操作灭菌、除热原新制备的10%木糖醇溶液中，测定药液中总磷脂原 料的含量，并用灭菌除热原合格新制备的10%木糖醇溶液调整药液体积，达到控制药液中 总磷脂含量在40-80mg/ml ；把这药液加入到另一配料灌中，冲氮气下，100转/分钟搅拌速 度，30-60分钟内加热到50士5°C，保持这温度范围搅拌60-120分钟；再保持冲氮气下，100 转/分钟转速，冷却药液至20-25°C，把药液分装到316L的不锈钢托盘中，放到另一台冻干 机组的冷冻干燥箱中，常法冷冻干燥，至药物固体中水分含量小于2%。二巯丙醇残留量为 小于0. 2%。得到脂质体药物固体，把脂质体药物固体在100级无菌级别下，粉碎至80-100 目，按药剂学允许的剂量，常法制成该药的无菌肠溶口服制剂，无菌拴剂。(8)所有操作都应严格按照国家GMP规范中注射剂无菌要求进行。口服制剂也得按注 射剂无菌要求进行。
4.制备脂质体药物的剂型，其特征是，主题为溶解超滤_喷雾干燥_分子分散包衣_水 化制粒_冷冻干燥法大工业化生产脂质体药物的原料药为强脂溶性强或水溶性强特性，优 选奥美拉唑钠，或是泮托拉唑钠，或是炎琥宁，或是甲磺酸培氟沙星，或是乳糖酸阿奇霉 素，或是埃索美拉唑钠，或是异环磷酰胺，或是盐酸妥拉唑林，或是兰索拉唑，或是头孢呋辛 钠，或是前列地尔与吲达帕胺摩尔数比1 30的组合物，或是头孢呋辛酯与前列地尔摩尔 数比2500 1的组合物，或是氟康唑，或是伏立康唑，或是硝酸异山梨酯，或是利巴韦林与 头孢羟氨苄摩尔数比1 1的组合物，或是紫杉醇与前列地尔摩尔数333 1的组合物， 或是克林霉素磷酸酯，或是更昔洛韦，或是黄芩苷元，或是前列地尔，或是丹参酮IIA，或是 前列腺素A1,或是美罗培南，或是吡格列酮，或是罗格列酮，或是辛伐他汀，或是阿糖胞苷， 或是羟基喜树碱，或是硝普钠，或是伐昔洛韦，或是多柔比星，或是依托泊苷，或是阿德福韦 酯，或是利巴韦林与前列地尔重量比1000 1组合物，或是川芎嗪磷酸盐、或是甲磺酸帕珠 沙星，或是头孢匹胺钠，或是米托蒽醌，或是盐酸昂丹司琼，或是醒脑静药成份，或是水溶性 维生素药成份。按药剂学允许剂量，制成上述原料药脂质体载药体的无菌冻干针剂、无菌肠 溶口服制剂、无菌喷雾剂，无菌栓剂。
5.制备脂质体药物的设备，其特征是，主题为溶解超滤_喷雾干燥_分子分散包衣_水 化制粒_冷冻干燥法大工业化生产脂质体药物的设备是溶解罐_超滤柱_喷雾干燥机_沸 腾包衣机_冷冻干燥机的组合。
6.制备的脂质体药物用途，其特征是，主题为溶解超滤_喷雾干燥_分子分散包衣_水 化制粒-冷冻干燥法大工业化生产脂质体药物，用于抗胃溃疡、抗细菌感染、抗真菌感染、 抗病毒感染、抗肿瘤、降血糖及治心脑血管病用途。
全文摘要
本发明的主题是用溶解超滤-喷雾干燥-分子分散包衣-冷冻干燥法，以统一的配方、工艺、设备既可大工业化生产脂质体载药体注射剂，又可大工业化生产脂质体载药体口服制剂；本发明提供了制备脂质体载药体的各组分原料摩尔数比配方；本发明提供了制备的纳米脂质体冻干针剂及脂质体口服制剂工艺；本发明还提供20个制备脂质体载药体的实施例制备抗胃溃疡脂质体载药体、抗菌及抗真菌脂质体载药体、抗肿瘤脂质体载药体、抗病毒脂质体载药体、止吐药脂质体载药体、营养补充剂脂质体载药体、降糖药及心脑血管药脂质体载药体。
文档编号A61K9/19GK101912363SQ20101024018
公开日2010年12月15日 申请日期2010年7月29日 优先权日2010年7月29日
发明者刘会梅, 张连印, 蔡海德, 邓学峰 申请人:蔡海德