专利名称：用于治疗慢性阻塞性肺病和哮喘的组合物和方法
技术领域：
本发明涉及用于治疗慢性阻塞性肺病(COPD)和哮喘的方法，具体而言，本发明涉及通过给予V型胶原(COlV)或其耐受原性片段来治疗COPD和哮喘。相关技术的描述慢性阻塞性肺病(COPD)是一类其中气道变窄的肺部疾病。这导致进出肺部的气流受限，引起气短。与哮喘不同，气流受限可逆性较差，并通常随时间持续恶化。COPD也被称为慢性阻塞性肺部疾病(COLD)、慢性阻塞性气道疾病(COAD)、慢性气流通气受限(CAL) 和慢性阻塞性呼吸道疾病。术语“C0PD”包括两种主要的疾病状态一肺气肿和慢性阻塞性支气管炎。肺气肿中，很多肺泡之间的壁被损伤，导致它们丧失其形状并变得松软。这种损伤还能破坏肺泡壁，导致更少和更大的肺泡替代很多微小的肺泡。慢性阻塞性支气管炎中，气道内壁时常发炎和红肿。这导致内壁增厚。在气道中形成很多厚的黏液，使其呼吸艰难。大多数患有COPD的人既患肺气肿又患慢性阻塞性支气管炎。因此，通用术语 “ COPD ”是更精确的。慢性支气管炎和肺气肿最常由吸烟引起；大约90%患有COPD的患者目前或者过去是吸烟者。尽管大约50%的吸烟者发展为慢性支气管炎，但是仅有15%的吸烟者发展为不可逆的气道阻塞。某些其它哺乳动物，尤其是马同样会患C0PD。与COPD相关的气道阻塞是进行性的，可以伴随气道高反应性，并且可以是部分可逆的。非特异的气道高反应还可能在COPD的发展中起作用，并且可以预示吸烟者肺部功能的衰退速率加速。COPD是死亡和伤残的主要原因。当前其是美国和欧洲的第四大死亡原因。治疗方针倡导早期检测并执行戒烟行动以帮助降低由该疾病导致的发病率和死亡率。然而，由于诸多原因，早期检测和诊断很难。COPD的发展需要花费数年，并且吸烟者通常否认由吸烟引起的任何有害效应，将呼吸困难增强的早期警告信号归因于年龄信号。同样，支气管炎的急性发作通常不被全科医生认为是COPD的早期信号。很多患者表现出多于一种疾病(例如，慢性支气管炎或哮喘性支气管炎)的特征，使得精确诊断成为一种挑战，尤其是在早期疾病时。同样，很多患者并不寻求医疗帮助，直到他们遭受更严重的与肺功能减弱相关的症状时，例如呼吸困难、持续咳嗽和产生痰。因此，绝大多数患者没有被诊断或治疗直到他们处于更晚期的疾病阶段时。哮喘是折磨数百万人群的气道异质性障碍。气道炎症、高反应性和梗阻可以表征该疾病状态。该疾病通常引起支气管平滑肌系统的痉挛，并且影响上呼吸道和下呼吸道。有数种形式的哮喘，特征为严重程度不同。例如，轻度哮喘被界定为哮鸣的短暂发作，具有或不具有呼吸困难或咳嗽。中度哮喘被界定为哮鸣和呼吸困难，并且可以具有或不具有咳嗽和咳痰，但是通常会干扰日常活动和/或睡眠。重度哮喘的特征为由于呼吸困难导致能力丧失，并且受影响的患者通常无法正常进食或睡眠，极其焦虑并且经常会疲惫不堪。被称为哮喘持续状态的疾病状态是最严重的哮喘形式，通常需要加强住院治疗，并且甚至会致命。 该疾病的发生可能是由于过敏性和非过敏性两种机制。尽管有数种可用来缓解与哮喘相关的症状和不适的治疗，但是都没有治愈。此外， 目前的治疗通常会引起副作用，使不适加重并发生其他致人虚弱的疾病状态。轻度哮喘通常用肾上腺素药以及抗组胺药来治疗，尤其对于儿童而言，从而预防或抑制间歇性发作。中度和重度哮喘通常用肾上腺素药剂和支气管扩张药以及皮质类固醇来治疗。由抗哮喘性药剂导致的其它作用限制了它们的广泛应用，所述其它影响包括头痛、疲劳、口干、神经质以及某些情况下的成瘾和物质滥用。理解哮喘的发病机理和治疗的最新进展在Am J Respir Crit Care Med. 2008 May 15 ；177(10) 1068-73 中更全面地讨论。由于哮喘在儿童和成年人中如此普遍，因此一直需要能治疗这种疾病或至少能缓解这种疾病所伴随的症状而不会引起不需要的副作用的药剂。同样，一直需要用于治疗 COPD的组合物和方法。本发明提供了用于治疗COPD和哮喘的组合物和方法以及详细描述中所描述的其它优势。发明概述本发明一方面提供了治疗慢性阻塞性肺病的方法，包括给予COPD患者治疗有效量的V型胶原或其耐受原性片段。在本文所述方法的一个实施方案中，COPD患者患有肺气肿和/或慢性阻塞性支气管炎。在本发明的另一实施方案中，V型胶原或其耐受原性片段通过口服给药，并且可以以0. lmg-0. 5mg的剂量给药。在另一实施方案中，V型胶原或其耐受原性片段通过静脉内给药、通过肺内灌注给药、通过吸入给药或通过肌内给药。在某些实施方案中，还可以使用不同途径的组合。在本发明的另一实施方案中，所述方法还包括给予 COPD患者支气管扩张药、皮质类固醇或用于COPD的其它已知治疗。本发明另一方面提供了治疗哮喘的方法，包括给予哮喘患者治疗有效量的V型胶原或其耐受原性片段。在所述方法的一个实施方案中，V型胶原或其耐受原性片段通过口服给药，并且可以以0. lmg-o. 5mg的剂量给药。在其它实施方案中，V型胶原或其耐受原性片段通过静脉内给药、通过肺内灌注给药、通过吸入给药或通过肌内给药。在另一实施方案中，所述方法还包括给予哮喘患者皮质类固醇、支气管扩张药和/或白三烯调节剂或用于哮喘的其它已知治疗。
本发明另一方面提供了在有发展成慢性阻塞性肺病风险的个体中预防慢性阻塞性肺病的发展的方法，包括给予所述个体治疗有效量的V型胶原或其耐受原性片段。在一个实施方案中，V型胶原或其耐受原性片段通过口服给药，并且可以以0. lmg-o. 5mg的剂量给药。在其它实施方案中，V型胶原或其耐受原性片段通过静脉内给药、通过肺内灌注给药、 通过吸入给药或通过肌内给药，并且可以通过这些途径的组合来给药。本发明另一方面提供了在有发展成哮喘风险的个体中预防哮喘的发展和恶化的方法，包括给予所述个体治疗有效量的V型胶原或其耐受原性片段。在一个实施方案中， V型胶原或其耐受原性片段通过口服给药，并且在某些实施方案中，可以以0. lmg-o. 5mg的剂量给药。在另一实施方案中，V型胶原或其耐受原性片段通过静脉内给药、通过肺内灌注给药、通过吸入给药、通过肌内给药或通过这些途径中一种或多种的组合来给药。本发明一方面提供了将COPD或哮喘患者鉴定为用于V型胶原耐受疗法的候选者的方法，包括将来自所述患者的血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触； 以及测量与V型胶原或其抗原性片段结合的抗体的水平(即测量V型胶原特异性抗体的水平)；其中与V型胶原结合的抗体的存在指示COPD或哮喘。在这方面中，V型胶原特异性抗体的水平可以与本文所述的其它临床因素联合用于诊断COPD和哮喘。在一个实施方案中， 将V型胶原或其抗原性片段结合于珠子上。在另一实施方案中，所述测量包括将与V型胶原或其抗原性片段结合的抗体与荧光标记的抗IgG抗体接触；以及通过流式细胞术检测与结合于V型胶原上的抗体结合的荧光标记的抗IgG抗体的量。本发明另一方面提供了鉴定有发展成COPD或哮喘风险的个体的方法，包括将来自所述个体的血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触；以及测量与V型胶原或其抗原性片段结合的抗体的水平(即测量V型胶原特异性抗体的水平)；其中与V型胶原结合的抗体的存在与更高的风险相关，所述更高的风险比在没有与V型胶原结合的抗体的个体中所预期的风险更高。在一个实施方案中，将V型胶原或其抗原性片段结合于珠子上。在另一实施方案中，所述测量包括将与V型胶原或其抗原性片段结合的抗体与荧光标记的抗IgG抗体接触；以及通过流式细胞术检测与结合于V型胶原上的抗体结合的荧光标记的抗IgG抗体的量。在诊断或测量发展成COPD或哮喘的风险的方法的某些实施方案中，所述方法中所用的抗IgG抗体检测所有IgG亚型。在其它实施方案中，所述抗IgG抗体特异性地检测 IgGl亚型、或IgG2亚型、或IgG3亚型或IgG4亚型。在这方面中，在疾病进展中可能发生一种亚型至另一种亚型的转变，并且这可能指示疾病的恶化。因此，一种亚型随时间增加可能指示疾病的恶化。本发明另一方面提供了监测个体中COPD或哮喘进展的方法，包括将来自所述个体的第一血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触；测量第一血液样品中与 V型胶原或其抗原性片段结合的抗体的水平；将在较晚时间点采自所述个体的第二血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触；测量第二血液样品中与V型胶原或其抗原性片段结合的抗体的水平；以及将第二血液样品中与V型胶原或其抗原性片段结合的抗体的水平与第一血液样品中与V型胶原或其抗原性片段结合的抗体的水平进行比较；其中与第一样品相比，第二样品中与V型胶原结合的抗体的水平增加指示COPD或哮喘在恶化， 并且与第一样品相比，第二样品中与V型胶原结合的抗体的水平降低指示COPD或哮喘的改善。COPD和哮喘的其它临床指征可以与本文所提供的方法联合使用。在某些实施方案中， 特定IgG亚型(例如，IgGU IgG2、IgG3或IgG4)的抗V型胶原抗体的增加指示COPD或哮喘的进展。在某些实施方案中，将V型胶原或其抗原性片段结合于珠子上。在另一实施方案中，所述测量包括将与V型胶原或其抗原性片段结合的抗体与荧光标记的抗IgG抗体接触；以及通过流式细胞术检测与结合于V型胶原上的抗体结合的荧光标记的抗IgG抗体的量。在用于监测进展的方法的某些实施方案中，所述抗IgG抗体检测所有IgG亚型。在其它实施方案中，所述抗IgG抗体特异性地检测IgGl、IgG2、IgG3或IgG4亚型。结合以下详细描述和附图，本发明的这些方面和其它方面将变得明显。附图简要说明
图1是显示COPD患者中抗V型胶原抗体升高的柱形图。图2是显示哮喘患者中抗V型胶原抗体升高的柱形图。图3显示在静脉内给予V型胶原之后，对小鼠中卵白蛋白诱导的气道高反应的预防。除了 col V(每个数据点η = 2-5)之外所有组中的η = 5。图4Α-4Ε是显示通过静脉内给予col (ν)而在肺单核细胞中诱导IFN- γ转录本的柱形图。进行定量PCR来显示IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ和IL-10细胞因子。只有Col (V) IV在肺单核细胞中诱导IFN-Y转录本。数据表示从每组5只小鼠合并的肺单核细胞的 RNA。发明的详细描述V型胶原胶原蛋白是主要由羟脯氨酸(Hyp)、甘氨酸(Gly)和脯氨酸(Pro)组成的重复氨基酸序列所形成的多肽链。胶原是人体中所见的最丰富的蛋白之一，在正常(非受伤)皮肤组织的真皮层中包含约80-85%的细胞外基质(ECM)。基于序列同一性和功能，将胶原分成数种类型。I型、II型和III型胶原分子构成大多数动物细胞外结构的主要纤维。I型形成约90%的身体胶原，并且是骨、皮肤和腱的主要成分。II型构成软骨的主要纤维。胶原纤维以刚性板状排列于骨中，以平行束状排列于腱中，并以致密网状排列于软骨中。I型和较少量的III型构成腱和皮肤。IV型胶原分子构成存在于基膜中的非常纤细、平滑的纤维。V型胶原(colV)是存在于肺中的小胶原 (Madri and Furthmayr, Human Pathology，11 :353_366，1980)，并且位于细支气管周的结缔组织(Madri and Furthmayr，Am. J. Pathol.，94 :323_332，1979)、肺泡间质组织(Konomi et al. ,1984)和毛细血管基膜(Madri and Furthmayr，1979，同上)中。已知的其它胶原类型超过12种，但是还没有得到很好的表征。胶原多肽链的特征为由重复甘氨酸-X-Y三联体和球状N-末端和C-末端结构域构成核心螺旋结构域。三条这样的链以超螺旋彼此环绕，从而产生单个绳子样的胶原分子。以前的工作已经表明，对colV的自身免疫性与慢性同种移植异常(包括闭塞性细支气管炎、闭塞性细支气管炎综合征(BOS))、肺同种移植排斥和具有患IPF的风险相关(参见例如，美国专利7，348，005和WO 2007/120947)。此外，这项工作表明colV的给予能诱导对同种抗原和colV的耐受(参见例如，WO 2007/120947 ；图10)。然而，在本发明之前，在哮喘或COPD中没有表明colV与自身免疫性的关联。事实上，以前的发现表明，患COPD的患者没有抗col (V)的DTH应答，这显著不同于没有患已知肺病的正常个体中所见的情况(参见TO 2007/120947，实施例2 ；图3)。因此，本发明是意料不到的，在于尽管以前观察到患 COPD的患者与正常对照相比没有升高的抗colV的DTH应答，但是目前已经发现，COPD患者具有升高的抗colV抗体(参见例如，实施例1、图1)。因此，本发明涉及在COPD和哮喘患者中或有发展成这些疾病风险的个体中诱导对colV的耐受。ColV多核苷酸和多肽序列是本领域技术人员已知的，且可在公共数据库获得。 本发明的示例性colV多核苷酸和多肽包括但不限于，智人胶原，V型，α 1 (C0L5A1)，mRNA NCBI 参照序列:NM_000093. 3GI :89276750 版本(SEQ ID NO 1) ； α IV 型胶原前蛋白原[智人]登录号 NP_000084，GI :89276751 版本(SEQ ID NO 2)；智人胶原，V 型，α 2 (C0L5A2)， mRNA，登录号NM_000393，GI :89363016版本(SEQ ID NO 3) ； α 2V型胶原前蛋白原[智人]， 登录号 NP_000384，GI :89363017 版本(SEQ ID NO 4)；智人胶原，V 型，α 3 (C0L5A3) ,mRNA, 登录号 NM_015719、NM_015719. 3，GI 110735434 (SEQ ID NO 5)；胶原，V 型，α 3 前蛋白原 [智人]，登录号 ΝΡ_056534，ΝΡ_056534. 2 版本，GI 110735435 (SEQ ID NO 6)。如本领域技术人员所认识到的，前原胶原在细胞中被加工成原胶原，该原胶原从细胞输出并最终形成胶原原纤维和纤维。因此，本发明明确考虑原胶原和本文所述的已加工的或成熟形式的胶原蛋白。在这方面中，例如，SEQ ID NO :4的氨基酸1-26对应于信号肽，其在加工期间被切割，氨基酸27-1229是胶原α -2 (V)链，且氨基酸1230-1499对应于 C"末端前肽。本文具体公开的序列中的这些位置可被本领域技术人员识别，并且可通过其中提供序列批注的各种公共数据库获取。还应当注意，胶原蛋白的某些氨基酸在加工期间被修饰(例如，脯氨酸成为羟脯氨酸)。成熟的、修饰形式的V型胶原链，尤其是α-2链是本文明确考虑的。如其它地方所指出的，本发明中所用的V型胶原及其α链可以从多种来源纯化或重组产生。本文所用的术语“多肽”以其常规含义使用，即作为氨基酸的序列。多肽并不限制于特定长度的产物，因此，多肽定义包括肽、寡肽和蛋白，并且这类术语本文可互换使用，除非明确指出不是这样。该术语还不指或排除多肽的表达后修饰，例如，天然存在的或非天然存在的糖基化、乙酰化、磷酸化等以及领域内已知的其它修饰。多肽可以是整个蛋白或其子序列。本发明背景下的特定目的多肽是包含耐受原性片段的氨基酸子序列。另一方面，本发明提供了这样的多肽片段，该多肽片段包含本文所示的胶原多肽组合物的至少约5、10、15、20、25、50或100个连续氨基酸或更多，包括所有中间长度，所述胶原多肽组合物例如SEQ ID NO :2、4或6所示的那些或SEQ ID NO :1、3或5序列中所示的多核苷酸序列所编码的那些。另一方面，本发明提供了本文所述的多肽组合物的变体。本发明通常包括的多肽变体沿其长度与本文所示的多肽序列通常表现出至少约70%、75%、80%、85%、90%、 91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或 99%或更高的同一性(按下述确定)。在一个实施方案中，本发明提供的多肽片段和变体是本文所述的免疫学上耐受原性的。本文所用的术语多肽“变体”是通过一个或多个取代、缺失、添加和/或插入而通常不同于本文具体公开的多肽的多肽。这类变体可以是天然存在的或可以是合成产生的， 例如通过修饰一个或多个本发明的上述多肽序列，并按本文所述评价它们的耐受原活性和/或利用领域内公知的任何技术。在很多情况下，变体含有保守型取代。“保守型取代”是指氨基酸被具有相似性质的另一个氨基酸所取代，使得肽化学领域内的技术人员可预料到该多肽的二级结构和亲水性基本未改变。可以在本发明的多核苷酸和多肽结构中进行修饰，并仍能获得编码具有期望特性(例如，具有耐受原性特性)的变体或衍生多肽的功能性分子。当希望改变多肽的氨基酸序列来产生等同的甚至改进的本发明多肽的耐受原性变体或部分时，本领域技术人员通常按照表1改变编码DNA序列的一个或多个密码子。例如，在蛋白结构中，某些氨基酸可以被其他的氨基酸取代，而不会造成与诸如抗体的抗原结合区或基底分子的结合位点的结构的相互结合能力的明显损失。由于是蛋白的相互作用能力和性质限定了该蛋白的生物学功能活性，因此可以在蛋白序列中进行某些氨基酸序列的取代，以及当然也可在其基础DNA编码序列中进行取代，并仍可获得具有相似性质的蛋白。因而已考虑到，可以在所公开的组合物的肽序列或编码所述肽的相应DNA序列中进行各种改变，而不会造成它们的耐受原性功效或活性的明显损失。表 权利要求
1.用于治疗慢性阻塞性肺病(COPD)患者的慢性阻塞性肺病的组合物，其包含治疗有效量的V型胶原或其耐受原性片段。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所述COPD患者患有肺气肿或慢性阻塞性支气管炎。
3.如权利要求1所述的组合物，其中所述V型胶原或其耐受原性片段被制备成用于口服给药。
4.如权利要求3所述的组合物，其包含0.lmg-0. 5mg的V型胶原。
5.如权利要求1所述的组合物，其中所述V型胶原或其耐受原性片段被制备成用于静脉内给药、肺内灌注、通过吸入给药或用于肌内给药。
6.如权利要求1所述的组合物，还包含支气管扩张药或用于与支气管扩张药一起使用。
7.如权利要求1所述的组合物，还包含皮质类固醇或用于与皮质类固醇一起使用。
8.用于治疗哮喘的组合物，其包含治疗有效量的V型胶原或其耐受原性片段。
9.如权利要求8所述的组合物，其中所述V型胶原或其耐受原性片段被制备成用于静脉内给药、肺内灌注、通过吸入给药或用于肌内给药。
10.如权利要求9所述的组合物，其中以0.lmg-o. 5mg的剂量给予所述V型胶原。
11.如权利要求8所述的组合物，还包含皮质类固醇或用于与皮质类固醇一起使用。
12.如权利要求8所述的组合物，还包含支气管扩张药或用于与支气管扩张药一起使用。
13.如权利要求8所述的组合物，还包含白三烯调节剂或用于与白三烯调节剂一起使用。
14.用于在有发展成慢性阻塞性肺病风险的个体中预防慢性阻塞性肺病的发展的组合物，其包含治疗有效量的V型胶原或其耐受原性片段。
15.如权利要求14所述的组合物，其中所述V型胶原或其耐受原性片段被口服给药。
16.如权利要求15所述的组合物，其中以0.lmg-0. 5mg的剂量给予所述V型胶原。
17.如权利要求14所述的组合物，其中所述V型胶原或其耐受原性片段被制备成用于静脉内给药、肺内灌注、通过吸入给药或用于肌内给药。
18.用于在有发展成哮喘风险的个体中预防哮喘的发展和恶化的组合物，其包含治疗有效量的V型胶原或其耐受原性片段。
19.如权利要求18所述的组合物，其中所述V型胶原或其耐受原性片段被口服给药。
20.如权利要求19所述的组合物，其中以0.lmg-0. 5mg的剂量给予所述V型胶原。
21.如权利要求18所述的组合物，其中所述V型胶原或其耐受原性片段被制备成用于静脉内给药、肺内灌注、通过吸入给药或用于肌内给药。
22.将COPD或哮喘患者鉴定为V型胶原耐受疗法的候选者的方法，包括将来自所述患者的血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触；以及测量与所述V型胶原或其抗原性片段结合的抗体的水平；其中与所述V型胶原特异结合的抗体的存在指示所述COPD或哮喘患者会从V型胶原耐受疗法受益。
23.如权利要求22所述的方法，其中将所述V型胶原或其抗原性片段结合于珠子上。
24.如权利要求22所述的方法，其中所述测量包括将与所述V型胶原或其抗原性片段特异结合的抗体与荧光标记的抗IgG抗体接触；以及通过流式细胞术检测与结合于所述V型胶原上的抗体结合的荧光标记的抗IgG抗体的量。
25.鉴定有发展成COPD或哮喘风险的个体的方法，包括将来自所述个体的血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触；以及测量与所述V型胶原或其抗原性片段结合的抗体的水平；其中与所述V型胶原特异结合的抗体的存在与更高的风险相关，所述更高的风险比在没有与所述V型胶原结合的抗体的个体中所预期的风险更高。
26.如权利要求25所述的方法，其中将所述V型胶原或其抗原性片段结合于珠子上。
27.如权利要求25所述的方法，其中所述测量包括将与所述V型胶原或其抗原性片段结合的抗体与荧光标记的抗IgG抗体接触；以及通过流式细胞术检测与结合于所述V型胶原上的抗体结合的荧光标记的抗IgG抗体的量。
28.如权利要求24或27所述的方法，其中所述抗IgG抗体检测所有IgG亚型。
29.如权利要求24或27所述的方法，其中所述抗IgG抗体特异性地检测IgGl亚型。
30.如权利要求24或27所述的方法，其中所述抗IgG抗体特异性地检测IgG2亚型。
31.如权利要求24或27所述的方法，其中所述抗IgG抗体特异性地检测IgG3亚型。
32.如权利要求24或27所述的方法，其中所述抗IgG抗体特异性地检测IgG4亚型。
33.监测个体中COPD进展的方法，包括将来自所述个体的第一血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触； 测量所述第一血液样品中与所述V型胶原或其抗原性片段特异结合的抗体的水平； 将在较晚时间点采自所述个体的第二血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触；测量所述第二血液样品中与所述V型胶原或其抗原性片段特异结合的抗体的水平；以及将所述第二血液样品中与所述V型胶原或其抗原性片段特异结合的抗体的水平与所述第一血液样品中与所述V型胶原或其抗原性片段特异结合的抗体的水平进行比较；其中与所述第一样品相比，所述第二样品中与所述V型胶原结合的抗体的水平增加指示COPD在恶化，并且与所述第一样品相比，所述第二样品中与所述V型胶原结合的抗体的水平降低指示COPD的改善。
34.如权利要求33所述的方法，其中将所述V型胶原或其抗原性片段结合于珠子上。
35.如权利要求33所述的方法，其中所述测量包括将与所述V型胶原或其抗原性片段结合的抗体与荧光标记的抗IgG抗体接触；以及通过流式细胞术检测与结合于所述V型胶原上的抗体结合的荧光标记的抗IgG抗体的量。
36.监测个体中哮喘进展的方法，包括将来自所述个体的第一血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触；测量所述第一血液样品中与所述V型胶原或其抗原性片段特异结合的抗体的水平； 将在较晚时间点采自所述个体的第二血液样品的至少一部分与V型胶原或其抗原性片段接触；测量所述第二血液样品中与所述V型胶原或其抗原性片段特异结合的抗体的水平；以及将所述第二血液样品中与所述V型胶原或其抗原性片段特异结合的抗体的水平与所述第一血液样品中与所述V型胶原或其抗原性片段特异结合的抗体的水平进行比较；其中与所述第一样品相比，所述第二样品中与所述V型胶原结合的抗体的水平增加指示哮喘在恶化，并且与所述第一样品相比，所述第二样品中与所述V型胶原结合的抗体的水平降低指示哮喘的改善。
37.如权利要求36所述的方法，其中将所述V型胶原或其抗原性片段结合于珠子上。
38.如权利要求37所述的方法，其中所述测量包括将与所述V型胶原或其抗原性片段结合的抗体与荧光标记的抗IgG抗体接触；以及通过流式细胞术检测与结合于所述V型胶原上的抗体结合的荧光标记的抗IgG抗体的量。
39.如权利要求35或38所述的方法，其中所述抗IgG抗体检测所有IgG亚型。
40.如权利要求35或38所述的方法，其中所述抗IgG抗体特异性地检测IgGl亚型。
41.如权利要求35或38所述的方法，其中所述抗IgG抗体特异性地检测IgG2亚型。
42.如权利要求35或38所述的方法，其中所述抗IgG抗体特异性地检测IgG3亚型。
43.如权利要求35或38所述的方法，其中所述抗IgG抗体特异性地检测IgG4亚型。
全文摘要
本发明提供了用于治疗或预防包括COPD和哮喘在内的肺病的化合物和方法。具体而言，本发明提供了用于治疗COPD和哮喘的包含V型胶原或其耐受片段的化合物。
文档编号A61P11/06GK102458446SQ201080027629
公开日2012年5月16日 申请日期2010年4月22日 优先权日2009年4月22日
发明者大卫·S·威尔克斯 申请人:印第安那大学科技研究公司