专利名称：一种从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法
技术领域：
本发明涉及一种从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法。
背景技术：
西洋参(Panaxquinquefolium L.)是五加科(Araliaceae)人参属(Panax)多年生草本植物，原产于美国东部和加拿大。又名美国人参、花旗参、洋参和广州参。在我国始载于《本草纲目拾遗》，已有200多年的药用历史。具有益肺阴、清虚火、生津止渴等作用，治肺虚久咳、失血、咽干口渴、虚热烦倦等。《医学衷中参西录》载“西洋参，性凉而补，凡欲用人参而不受人参之温补者，皆可以此代之。”正因为西洋参具有人参的补性，而无人参的燥性，誉为名贵补药而闻名于世。
西洋参中含有皂苷类、聚乙炔类、挥发油类、多糖和氨基酸类化合物，其中主要的活性成分为皂苷类化合物。大量研究表明，由于结构的不同，各种人参皂苷都有其独特的药理活性，因而药理活性呈多样性人参皂苷具有抗疲劳，延缓衰老，调节中枢神经系统，提高机体免疫力，改善心脑血管供血不足,抑制肿瘤细胞生长等作用。近年来公开了一些西洋参总皂苷的提取、纯化的发明专利。中国专利申请号03127613. X公开了一种从西洋参果中提取、精制人参总皂苷的方法，将西洋参果进行水提、大孔吸附树脂除杂、脱色、干燥，此方法虽然简单，但是颜色较深、收率和纯度不高。中国专利申请号03127632. 6公开了一种从西洋参和西洋参茎叶精制总皂苷的生产工艺，将西洋参过西洋参茎叶粉碎为粗粉，水提、醇沉、碱沉、大孔吸附树脂除杂、活性炭脱色、冻干。此方法所得总皂苷的纯度较高，但是步骤繁琐、收率低。中国专利申请号200610014229. 6公开了一种西洋参总皂苷的制备方法，将西洋参加入溶剂，调碱后提取，大孔型阴离子交换树脂除杂、脱色，此方法可能使某些人参皂苷结构发生变化。中国专利申请号200610109414. 3公开了一种从西洋参或西洋参茎叶中提取总皂苷的制备方法，逆流循环超声提取、醇沉、大孔树脂柱除杂、脱色柱脱色、喷雾干燥等，此方法步骤较繁琐。
发明内容
本发明提供一种从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法，该方法包括如下步骤
a、提取称取西洋参粗粉，每次加入6-12倍量30%-70%乙醇溶液，加热回流提取2_3次，每次lh-3h,首次浸泡60min-90min,过滤；滤液合并,减压浓缩至无醇味,定容至药液药材体积重量比为1:2-2:1，得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至3飞倍，摇匀，放置冰箱12tT24h，过滤，弃去滤渣，得提取
液；
C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为1:2-1.6:1称取大孔吸附树脂，装入径高比为1:3-1:13的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为
4.5-9倍柱体积/小时，饱和lh-3h;用5倍-10倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为4. 5-12倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为4. 5-12倍柱体积/小时；用5-15倍柱体积70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为4. 5-12倍柱体积/小时，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ；
d、第二次纯化按照药材量树脂量的重量比为3:1-1:1称取弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:3-1:6的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至PH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小时，收集流出液；用3倍-5倍柱体积70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ；
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。本发明从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法优选为包括如下步骤
a、提取称取西洋参粗粉，每次加入6倍量70%乙醇溶液，加热回流提取3次，每次3h，首次浸泡60min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容至药液药材体积重量比为1:2，得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至5倍，摇匀，放置冰箱12h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为1:2称取大孔吸附树脂，装入径高比为I 13的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为4. 5倍柱体积/小时，饱和3h;用5倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为12倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为4. 5倍柱体积/小时；用15倍柱体积70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为4. 5倍柱体积/小时，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ；
d、第二次纯化按照药材量树脂量的重量比为1:1称取弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:3的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至pH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小时，收集流出液；用5倍柱体积70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ;
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。本发明从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法还优选为包括如下步骤
a、提取称取西洋参粗粉，每次加入12倍量30%乙醇溶液，加热回流提取2次，每次lh，首次浸泡90min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容至药液药材体积重量比为2:1，得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至3倍，摇匀，放置冰箱24h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为1.6:1称取大孔吸附树脂，装入径高比为1:3的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为9倍柱体积/小时，饱和Ih;用10倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为4. 5倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为12倍柱体积/小时；用5倍柱体积70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为12倍柱体积/小时，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ；
d、第二次纯化按照药材量树脂量的重量比为2:1称取弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:6的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至pH值为
7;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小时，收集流出液；用3倍柱体积70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ;e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。本发明从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法还优选为包括如下步骤
a、提取称取西洋参粗粉，每次加入9倍量50%乙醇溶液，加热回流提取3次，每次2h，首次浸泡75min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容至药液药材体积重量比为1:1，得浓缩液； b、水沉将浓缩液加水稀释至4倍，摇匀，放置冰箱18h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为I: I. 5称取大孔吸附树脂，装入径高比为1:8的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为6倍柱体积/小时，饱和2h;用7. 5倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为6倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为6倍柱体积/小时；用10倍柱体积70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为6倍柱体积/小时，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ；
d、第二次纯化按照药材量树脂量的重量比为3:2称取弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:4. 5的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至pH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小时，收集流出液；用4倍柱体积70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ;
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。本发明从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法中所使用的大孔吸附树脂优选为HPD100、HPD100A、HPD300、HPD450、AB-8或DlOl树脂中的一种，所使用弱碱性离子交换树脂为330树脂。本发明从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法进一步优选为包括如下步骤
a、提取称取西洋参粗粉，每次加入10倍量50%乙醇溶液，加热回流提取3次，每次lh，首次浸泡60min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容至药液药材体积重量比为1:1，得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至5倍，摇匀，放置冰箱12h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为1:1称取AB-8大孔吸附树脂，装入径高比为1:6的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为4. 5倍柱体积/小时，饱和Ih;用10倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为12倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为12倍柱体积/小时；用5倍柱体积70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为12倍柱体积/小时，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ；
d、第二次纯化按照药材量树脂量的重量比为3:1称取330弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:6的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至pH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小时，收集流出液；用3倍柱体积70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ;
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。本发明从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法中的原料中药材西洋参的拉丁学名PANACIS QUINQUEFOLII RADIX，为五加科植物西洋参 Panax quique folium L.的干燥根。
本发明所述的西洋参粗粉是指中国药典凡例中规定的“粗粉”，即指能全部通过二号筛。但混有能通过四号筛不超过40%的粉末。本发明提取过程中的溶剂的体积是根据药材的重量计算出来的，如使用6倍量的70%乙醇，是指每公斤药材，加入常温下6升70%的乙醇，即重量体积比，浓缩的药液与药材的体积重量比也是指每公斤药材多少升，比如“定容至药液药材体积重量比为1:2”即每公斤药材浓缩至2L。采用本发明从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法，按照实施例I的参数连续生产五批人参总皂苷，HPLC分析总皂苷包括人参皂苷Rgl、人参皂苷Re、人参皂苷Rbl、人参皂苷Re、人参皂苷Rd，其中人参皂苷Rgl、人参皂苷Re和人参皂苷Rbl的总纯度为74. 0%以上。详细结果见表I
表I连续五批生产黄芪甲苷的纯度和转移率结果
>比号I人参阜苷1^1含量％I人参阜苷Re含量％I人参阜苷Rbl含量％I转移率％ 07110112219 0253.95100.0 ~
071112J. 121972952.6999. I ~
0711242^2619 2753.09100.0 ~
0712032^2419 1453.7399.8 ~
071219\2. 28|l9. 20丨53. 28丨99. 4
由此可见，本发明精制方法，工艺稳定可靠，易于工业化生产，生产出的人参皂苷Rgl、
人参皂苷Re和人参皂苷Rbl的总纯度为74. 0%以上。并且具有以下优点此生产工艺简单
易行，无污染，适合于大生产；并且所得到的人参总皂苷的纯度和收率都较高。
具体实施例方式下述实施例用于举例说明本发明从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法，但其不能对本发明的范围构成任何限制。实施例I :
a、提取称取西洋参粗粉10kg，每次加入60L70%乙醇溶液，加热回流提取3次，每次3h，首次浸泡60min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容20L，得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至100L，摇匀，放置冰箱12h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化称取HPD100大孔树脂6. 25kg，装入直径为9. 4cm,高度为122cm，体积
为8. 5L的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为38L/h，饱和3h;用42. 5L的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为102L/h ;用60L20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为38L/h ;用127L70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为38L/h，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ；
d、第二次纯化称取330弱碱性阴离子交换树脂10kg，装入直径为18.2cm,高度为54. 6cm，体积为14. 2L的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至PH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为71L，收集流出液；用71L 70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ；
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。结果人参皂苷Rgl含量为2. 15%、人参皂苷Re含量为19. 03%和人参皂苷Rbl含量为53. 77%,转利率为99. 6%o实施例2:a、提取称取西洋参粗粉15Kg，每次加入180L30%乙醇溶液，加热回流提取2次，每次Ih,首次浸泡90min,过滤；滤液合并,减压浓缩至无醇味,定容至30L,得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至90L，摇匀，放置冰箱24h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化称取HPD100A大孔吸附树脂15kg，装入直径为20cm，高度为60cm，体积为19L的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为171L/h 9倍柱体积/小时，饱和Ih;用190L的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为86L/h ;用133L20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为228L/h ;用190L70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为95L/h，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ; d、第二次纯化称取D900弱碱性阴离子交换树脂7.5kg，装入直径为13cm，高度为80cm,体积为IlL的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至pH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为55L/h，收集流出液；用33L70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ；
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。结果人参皂苷Rgl含量为2. 20%、人参皂苷Re含量为19. 25%和人参皂苷Rbl含量为53. 12%,转利率为99. Tl。实施例3:
a、提取称取西洋参粗粉20kg，每次加入180L50%乙醇溶液，加热回流提取3次，每次2h，首次浸泡75min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容至20L，得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至80L，摇匀，放置冰箱18h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化称取HPD300大孔吸附树脂13Kg，装入直径为14cm，高度为112cm，体积为17L的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为102L/h，饱和2h;用127. 5L的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为102L/h ;用119L20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为102L/h ;用170L70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为102L/h，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ;
d、第二次纯化称取335弱碱性阴离子交换树脂13kg，装入直径为17.5cm,高度为80cm，体积为19L的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至pH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为95L/h，收集流出液；用76L70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ；
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。结果人参皂苷Rgl含量为2. 17%、人参皂苷Re含量为19. 23%和人参皂苷Rbl含量为53. 06%,转利率为99. 0%。实施例4:
a、提取称取西洋参粗粉10kg，每次加入100L50%乙醇溶液，加热回流提取3次，每次Ih,首次浸泡60min,过滤；滤液合并,减压浓缩至无醇味,定容至10L,得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至50L，摇匀，放置冰箱12h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化称取AB-8大孔吸附树脂10kg，装入直径为15cm，高度为85cm，体积为15L的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为67. 5L/h，饱和Ih;用150L的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为180L/h ;用7倍柱体积20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为180L/h ;用75L70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为180L/h，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ;
d、第二次纯化称取330弱碱性阴离子交换树脂3.3kg，装入直径为10cm，高度为65cm,体积为5L的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至pH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为25L/h，收集流出液；用15L70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ；
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。结果人参皂苷Rgl含量为2. 29%、人参皂苷Re含量为19. 32%和人参皂苷Rbl含量为53. 54%,转利率为100. 0%。
实施例5
a、提取称取西洋参粗粉10kg，每次加入60L70%乙醇溶液，加热回流提取3次，每次3h，首次浸泡60min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容20L，得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至100L，摇匀，放置冰箱12h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化称取HPD450大孔树脂6. 25kg，装入直径为9. 4cm,高度为122cm，体积
为8. 5L的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为38L/h，饱和3h;用42. 5L的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为102L/h ;用60L20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为38L/h ;用127L70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为38L/h，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ；
d、第二次纯化称取D900弱碱性阴离子交换树脂10kg，装入直径为18.2cm,高度为54. 6cm，体积为14. 2L的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至PH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为71L，收集流出液；用71L 70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ；
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。结果人参皂苷Rgl含量为2. 37%、人参皂苷Re含量为18. 81%和人参皂苷Rbl含量为52. 91%,转利率为99. 87%。实施例6
a、提取称取西洋参粗粉10kg，每次加入100L50%乙醇溶液，加热回流提取3次，每次Ih,首次浸泡60min,过滤；滤液合并,减压浓缩至无醇味,定容至10L,得浓缩液；
b、水沉将浓缩液加水稀释至50L，摇匀，放置冰箱12h，过滤，弃去滤渣，得提取液；
C、第一次纯化称取DlOl大孔吸附树脂10kg，装入直径为15cm，高度为85cm，体积为15L的层析柱，用95%乙醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为67. 5L/h，饱和Ih;用150L的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为180L/h ;用7倍柱体积20%乙醇溶液除杂，洗脱流速为180L/h ;用180L70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为180L/h，收集70%的乙醇洗脱液，得纯化液A ;
d、第二次纯化称取330弱碱性阴离子交换树脂3. 3kg，装入直径为10cm，高度为65cm,体积为5L的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最终用蒸馏水冲洗至pH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为25L/h，收集流出液；用15L70%乙醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ；
e、冻干将纯化液B冻干，即得人参总皂苷。
结果人参皂苷Rgl含量为2. 48%、人参皂苷Re含量为19. 85%和人参皂苷Rbl含量为54. 68%,转利率为99. 95%。
权利要求
1.ー种从西洋參中提取分离人參总皂苷的方法，该方法包括如下步骤 a、提取称取西洋參粗粉，每次加入6-12倍量30%-70%こ醇溶液，加热回流提取2_3次，姆次lh-3h,首次浸泡60min-90min,过滤；滤液合并,减压浓缩至无醇味,定容至药液药材体积重量比为1:2-2:1，得浓缩液； b、水沉将浓缩液加水稀释至:T5倍，摇匀，放置冰箱12tT24h，过滤，弃去滤渣，得提取液； C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为1:2-1.6:1称取大孔吸附树脂，装入径高比为1:3-1:13的层析柱，用95%こ醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为4.5-9倍柱体积/小时，饱和lh-3h;用5倍-10倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为4. 5-12倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%こ醇溶液除杂，洗脱流速为4. 5-12倍柱体积/小时；用5-15倍柱体积70%的こ醇溶液进行洗脱，洗脱流速为4. 5-12倍柱体积/小吋，收集70%的こ醇洗脱液，得纯化液A ； d、第二次纯化按照药材量树脂量的重量比为3:1-1:1称取弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:3-1:6的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最終用蒸馏水冲洗至PH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小吋，收集流出液；用3倍-5倍柱体积70%こ醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ； e、冻干将纯化液B冻干，即得人參总皂苷。
2.根据权利要求I所述的从西洋參中提取分离人參总皂苷的方法，其特征在于该方法包括如下步骤 a、提取称取西洋參粗粉，毎次加入6倍量70%こ醇溶液，加热回流提取3次，毎次3h，首次浸泡60min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容至药液药材体积重量比为1:2，得浓缩液； b、水沉将浓缩液加水稀释至5倍，摇匀，放置冰箱12h，过滤，弃去滤渣，得提取液； C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为1:2称取大孔吸附树脂，装入径高比为I 13的层析柱，用95%こ醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为4. 5倍柱体积/小时，饱和3h;用5倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为12倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%こ醇溶液除杂，洗脱流速为4. 5倍柱体积/小时；用15倍柱体积70%的こ醇溶液进行洗脱，洗脱流速为4. 5倍柱体积/小时，收集70%的こ醇洗脱液，得纯化液A ； d、第二次纯化按照药材量树脂量重量比为1:1称取弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:3的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最終用蒸馏水冲洗至pH值为7 ；将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小时，收集流出液；用5倍柱体积70%こ醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ; e、冻干将纯化液B冻干，即得人參总皂苷。
3.根据权利要求I所述的从西洋參中提取分离人參总皂苷的方法，其特征在于该方法包括如下步骤 a、提取称取西洋參粗粉，毎次加入12倍量30%こ醇溶液，加热回流提取2次，毎次lh，首次浸泡90min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容至药液药材体积重量比为2:1，得浓缩液； b、水沉将浓缩液加水稀释至3倍，摇匀，放置冰箱24h，过滤，弃去滤渣，得提取液； C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为1.6:1称取大孔吸附树脂，装入径高比为1:3的层析柱，用95%こ醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为9倍柱体积/小时，饱和Ih;用10倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为4. 5倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%こ醇溶液除杂，洗脱流速为12倍柱体积/小时；用5倍柱体积70%的こ醇溶液进行洗脱，洗脱流速为12倍柱体积/小时，收集70%的こ醇洗脱液，得纯化液A ； d、第二次纯化按照药材量树脂量的重量比为2:1称取弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:6的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最終用蒸馏水冲洗至pH值为·7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小吋，收集流出液；用3倍柱体积70%こ醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ; e、冻干将纯化液B冻干，即得人參总皂苷。
4.根据权利要求I所述的从西洋參中提取分离人參总皂苷的方法，其特征在于该方法包括如下步骤 a、提取称取西洋參粗粉，毎次加入9倍量50%こ醇溶液，加热回流提取3次，毎次2h，首次浸泡75min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容至药液药材体积重量比为1:1，得浓缩液； b、水沉将浓缩液加水稀释至4倍，摇匀，放置冰箱18h，过滤，弃去滤渣，得提取液； C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为I: I. 5称取大孔吸附树脂，装入径高比为1:8的层析柱，用95%こ醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为6倍柱体积/小时，饱和2h;用7. 5倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为6倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%こ醇溶液除杂，洗脱流速为6倍柱体积/小时；用10倍柱体积70%的こ醇溶液进行洗脱，洗脱流速为6倍柱体积/小时，收集70%的こ醇洗脱液，得纯化液A ； d、第二次纯化按照药材量树脂量的重量比为3:2称取弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:4. 5的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最終用蒸馏水冲洗至pH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小吋，收集流出液；用4倍柱体积70%こ醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ; e、冻干将纯化液B冻干，即得人參总皂苷。
5.根据权利要求1-4任ー项所述的从西洋參中提取分离人參总皂苷的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂为HPD100、HPD100A, HPD300、HPD450、AB-8或DlOl树脂中的ー种，所述弱碱性离子交換树脂为330树脂。
6.根据权利要求5所述的从西洋參中提取分离人參总皂苷的方法，其特征在于包括如下步骤 a、提取称取西洋參粗粉，毎次加入10倍量50%こ醇溶液，加热回流提取3次，毎次lh，首次浸泡60min，过滤；滤液合并，减压浓缩至无醇味，定容至药液药材体积重量比为1:1，得浓缩液； b、水沉将浓缩液加水稀释至5倍，摇匀，放置冰箱12h，过滤，弃去滤渣，得提取液；C、第一次纯化按照药材量树脂量的重量比为1:1称取AB-8大孔吸附树脂，装入径高比为1:6的层析柱，用95%こ醇和蒸馏水处理干净；将提取液上样，吸附流速为4. 5倍柱体积/小时，饱和Ih;用10倍柱体积的蒸馏水进行洗脱除糖，洗脱流速为12倍柱体积/小时；用7倍柱体积20%こ醇溶液除杂，洗脱流速为12倍柱体积/小时；用5倍柱体积70%的こ醇溶液进行洗脱，洗脱流速为12倍柱体积/小时，收集70%的こ醇洗脱液，得纯化液A ； d、第二次纯化按照药材量树脂量的重量比为3:1称取330弱碱性阴离子交换树脂，装入径高比为1:6的层析柱，用酸碱处理弱碱性阴离子交换树脂，最終用蒸馏水冲洗至pH值为7 ;将纯化液A流过弱碱性阴离子交换树脂床，流速为5倍柱体积/小吋，收集流出液；用3倍柱体积70%こ醇溶液流过弱碱性阴离子树脂柱，收集流出液；将两部分的流出液合并浓缩至无醇味，得纯化液B ; e、冻干将纯化液B冻干，即得人參总皂苷。
全文摘要
本发明公开了一种从西洋参中提取分离人参总皂苷的方法。本发明采用乙醇回流提取，水沉，大孔吸附树脂除杂，离子交换树脂脱色等一系列高效的提取、分离和纯化的技术手段，得到的人参总皂苷为白色粉末，该人参总皂苷包括人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd，其中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的总纯度为74.0%以上。此生产工艺简单易行，无污染，适合于大生产。
文档编号A61K125/00GK102772462SQ201110120199
公开日2012年11月14日 申请日期2011年5月11日 优先权日2011年5月11日
发明者侯素云, 宋剑, 杨超, 王宗权, 贾继明, 马静 申请人:河北以岭医药研究院有限公司