一种从仙茅属植物提取分离仙茅苷的方法
【技术领域】
[0001]本发明是一种从中草药中提取有效成分的方法，具体地说是一种从仙茅属植物中提取分离仙茅苷的方法。
【背景技术】
[0002]仙茅是一类应用广泛的中药，具有多种生物活性，仙茅的化学成分与生物药理活性等方面的研宄已经取得了一定的进展。目前可供药用的有仙茅、大叶仙茅和短葶仙茅。
[0003]仙茅作为一种传统中药材，其所含的复杂成分具有多种生物活性，临床上的应用剂型，多是以处方配伍的汤剂，其由仙茅为君药的不同处方能治疗诸如阳瘘、更年期综合征、乳腺增生等多种疾病。市场上也有诸如片剂、颗粒剂等其他剂型，用以治疗骨质疏松为主的疾病。仙茅中含有环菠萝蜜烷型化合物，与升麻中主要成分相似，故其对抗肿瘤活性的研宄也在进行。目前，人们对仙茅的活性研宄多集中在醇提物和水提物上，也只是一些仙茅的传统作用。对于具体的单体化合物的药理研宄并不深入，药理方面也没有深入到化合物与动物的量效、构效关系上。这些方面都值得进一步研宄。
[0004]从仙茅植物园中提取仙茅苷的方法，在专利申请方面有如《一种仙茅苷的提取方法》CN10234471A和《一种从仙茅中提取仙茅总苷物质的方法》CN103417762A，从文献中可知:从仙茅植物提取仙茅苷的第一歩浸出的方法多以水、甲醇或乙醇，但尚未见有直接用乙酸乙酯浸提的，水、甲醇、乙醇者都是极性较强的的溶剂，提取出的杂质较多，造成后面分离提纯困难，采用乙酸乙酯提取，不仅提取的杂质少，便于分离，产率高，而且在提取过程中不会破坏仙茅中的淀粉、蛋白质、多糖等成分，提取后的残渣可以用来生产仙茅多糖、淀粉、饮用酒或作饲料，提高仙茅属植物资源的利用率。
【发明内容】
[0005]本发明一种从仙茅属植物中分离仙茅苷及生产方法方，按下列步骤提取分离仙茅苷。(I)粉碎:仙茅药材烘干或晒干后，粉碎至100?120目，得仙茅药材粉碎料；(2)提取:仙茅药材粉碎料用乙酸乙酯回流提取得乙酸乙酯粗提物；(3)减压蒸馏回收乙酸乙酯得仙茅苷粗膏；(4)溶解:用水加热溶解仙茅苷粗膏，过滤得仙茅苷粗膏水溶液；(5)萃取:用乙酸乙酯萃取，保留乙酸乙酯相，得乙酸乙酯仙茅苷萃取物；(6)减压蒸馏回收乙酸乙酯得仙茅苷浸膏；(7)溶解:用乙酸乙酯溶解仙茅苷浸膏得仙茅苷乙酸乙酯溶液；(8)上硅胶柱:仙茅苷乙酸乙酯溶液转移上硅胶柱；(9)用乙酸乙酯加甲醇梯度洗脱得洗脱液；(10)减压蒸馏回收洗脱液得仙茅苷粗品；(11)乙醇重结晶得仙茅成品；(12)在70°C下真空干燥仙茅苷得产品。
步骤(2)按每公斤仙茅药材粉碎料加15 — 20L的乙酸乙酯，分三次回流提取，每次回流提取时间为50分钟至60分钟。
[0006]步骤(4)仙茅苷粗膏与水的得量比为1:2.2?2.5。
[0007]步骤(5)，用乙酸乙酯萃取的方法为逆流萃取；乙酸乙酯的用量为水溶液的4.5?5.5 倍。
[0008]步骤(9)，梯度洗脱时收集的是乙酸乙酯与甲醇的体积比为10:1?9:1的洗脱。
[0009]步骤(9)中梯度洗脱时是从纯乙酸乙酯开始，逐步增加甲醇的比例，直至无仙茅苷为止。
[0010]步骤(11)中重结晶所用的溶剂为浓度大于95%乙醇，重结晶过程中加入活性炭脱色。
[0011]本发明利用仙茅中各化学成分的特点，单独分离出仙茅苷，其中步骤(I)中乙酸乙酯提取后的残渣可以用来生产淀粉、饮用酒或作饲料，提高仙茅资源的利用率。
[0012]本发明的创新点在于:(1)不用水提，采用乙酸乙酯提取，在提取过程中不会破坏仙茅中的淀粉、蛋白质、多糖等成分，提取仙茅多苷后残渣可以用来生产仙茅多糖、淀粉、饮用酒或作饲料，提高仙茅资源的利用率；(2)提供了一种从仙茅属植物中分离仙茅苷的生产方法；(3)本发明结合逆流萃取、层析比传统工艺的步骤要少，传统工艺至少要两次层析，而本发明只需一次层析。(4)本发明结合逆流萃取、层析，工艺合理、收率高、能耗低、成本较低、产品质量稳定。(5)本发明原料利用率高；(6)本发明安全、环保，废渣废水极少。
【附图说明】
[0013]图1为本发明工艺流程示意图。
【具体实施方式】
[0014]实例1:仙茅药材10kg，粉碎成粗粉，投入提取罐，加入60L乙酸乙酯回流提取三次，每次I小时，乙酸乙酯提取液回收溶剂后得到粗膏130g ;粗膏用水300ml加热搅拌溶解，水溶液用1500ml乙酸乙酯逆流萃取，乙酸乙酯相回收溶剂；得浸膏10g ;浸膏加入乙酸乙酯150ml，充分溶解，过滤，滤液装入硅胶层析柱(湿法装柱)中，用乙酸乙酯与甲醇溶液梯度洗脱，用50ml的三角瓶接洗脱液，大约接20ml换一个三角瓶；收集10:1至9:1的洗脱液，回收溶剂得仙茅多苷粗品15g ;粗品用95%乙醇50ml加热搅拌溶解，加入3g活性回流碳脱色30分钟，过滤，滤液重结晶，抽滤，得结晶14g ;结晶在70°C以下真空干燥，粉碎得产品12g的仙茅苷。
[0015]实例2:仙茅药材50kg，粉碎成粗粉，投入提取罐，加入300L乙酸乙酯回流提取三次，每次2小时，乙酸乙酯提取液回收溶剂后得到粗膏650g ;粗膏用水1300ml加热搅拌溶解，水溶液用7500ml乙酸乙酯逆流萃取，乙酸乙酯相回收溶剂；得浸膏505g ;浸膏加入乙酸乙酯1000ml，充分溶解，过滤，滤液装入硅胶层析柱(湿法装柱)中，用乙酸乙酯与甲醇溶液梯度洗脱，用250ml的三角瓶接洗脱液，大约接10ml换一个三角瓶；收集10:1至9:1的洗脱液，回收溶剂得仙茅多苷粗品76g ;粗品用95%乙醇250ml加热搅拌溶解，加入15g活性回流碳脱色30分钟，过滤，滤液重结晶，抽滤，得结晶70.5g ;结晶在70°C以下真空干燥，粉碎得产品60.2g。
[0016]实例3:仙茅药材100kg，粉碎成粗粉，投入提取罐，加入600L乙酸乙酯回流提取三次，每次1.5小时，乙酸乙酯提取液回收溶剂后得到粗膏1350g ;粗膏用水3000ml加热搅拌溶解，水溶液用15000ml乙酸乙酯逆流萃取，乙酸乙酯相回收溶剂；得浸膏1050g ;浸膏加入乙酸乙酯1500ml，充分溶解，过滤，滤液装入硅胶层析柱(湿法装柱)中，用乙酸乙酯与甲醇溶液梯度洗脱，用500ml的三角瓶接洗脱液，大约接200ml换一个三角瓶；收集10:1至9:1的洗脱液，回收溶剂得仙茅多苷粗品160g ;粗品用95%乙醇500ml加热搅拌溶解，加入30g活性回流碳脱色30分钟，过滤，滤液重结晶，抽滤，得结晶148g ;结晶在70°C以下真空干燥，粉碎得产品125g。
【主权项】
1.一种从仙茅属植物提取分离仙茅苷的方法，其特征在于按下列步骤提取分离仙茅苷:(1)粉碎:仙茅药材烘干或晒干后，粉碎至100?120目，得仙茅药材粉碎料；(2)提取:仙茅药材粉碎料用乙酸乙酯回流提取得乙酸乙酯粗提物；(3)减压蒸馏回收乙酸乙酯得仙茅苷粗膏；(4)溶解:用水加热溶解仙茅苷粗膏，过滤得仙茅苷粗膏水溶液；(5)萃取:用乙酸乙酯萃取，保留乙酸乙酯相，得乙酸乙酯仙茅苷萃取物；(6)减压蒸馏回收乙酸乙酯得仙茅苷浸膏；(7)溶解:用乙酸乙酯溶解仙茅苷浸膏得仙茅苷乙酸乙酯溶液；(8)上硅胶柱:仙茅苷乙酸乙酯溶液转移上硅胶柱；(9)用乙酸乙酯加甲醇梯度洗脱得洗脱液；(10)减压蒸馏回收洗脱液得仙茅苷粗品；(11)乙醇重结晶得仙茅成品；(12)在70°C下真空干燥仙茅苷得产品。
2.按权利要求1所述的一种仙茅属植物提取分离仙茅苷的方法，其特征在于步骤(2)按每公斤仙茅药材粉碎料加15 — 20L的乙酸乙酯，分三次回流提取，每次回流提取时间为50分钟至60分钟。
3.按权利要求1所述的一种仙茅属植物提取分离仙茅苷的方法，其特征在于步骤(4)仙茅苷粗膏与水的得量比为1:2.2?2.5。
4.按权利要求1所述的一种仙茅属植物提取分离仙茅苷的方法，其特征在于步骤(5)，用乙酸乙酯萃取的方法为逆流萃取；乙酸乙酯的用量为水溶液的4.5?5.5倍。
5.按权利要求1所述的一种仙茅属植物提取分离仙茅苷的方法，其特征在于步骤(9)，梯度洗脱时收集的是乙酸乙酯与甲醇的体积比为10:1?9:1的洗脱。
6.按权利要求1所述的一种仙茅属植物提取分离仙茅苷的方法，其特征在于步骤(9)中梯度洗脱时是从纯乙酸乙酯开始，逐步增加甲醇的比例，直至无仙茅苷为止。
7.按权利要求1所述的一种仙茅属植物提取分离仙茅苷的方法，其特征在于步骤(11)中重结晶所用的溶剂为浓度大于95%乙醇，重结晶过程中加入活性炭脱色。
【专利摘要】本发明一种从仙茅属植物中提取分离仙茅苷的生产方法，主要步骤为乙酸乙酯提取、回收溶剂得粗膏，水溶、乙酸乙酯逆流萃取、层析、重结晶、干燥包装。本发明利用仙茅中各化学成分的特点，首先利用乙酸乙酯提取，提取分离出仙茅苷，其中乙酸乙酯提取后的残渣可以用来生产多糖、淀粉、饮用酒等，提高仙茅资源的利用率，本发明工艺合理、能耗少、成本低，安全环保。
【IPC分类】C07H15-203, C07H1-08
【公开号】CN104592322
【申请号】CN201410780382
【发明人】黄玉君, 石贵阳, 陈光强
【申请人】贵州芊芊园艺新技术发展公司
【公开日】2015年5月6日
【申请日】2014年12月17日