专利名称：一种菊米精油包合物的质量控制方法
技术领域：
本发明属于中药质量控制领域，具体涉及到菊米精油的包合物的质量评价方法。
背景技术：
菊米为菊科植物野甘菊(Chrysanthemum indicum)含荀未放的花蕾。其中含菊米内脂、野菊花素、黄酮、挥发油等成分，是一种卓越的保健用品。其叶片、花、花萼中的精油具有抗菌、抗病毒、驱虫等作用。通常采用超临界CO2萃取或水蒸气蒸馏法制备的精油，性质不稳定，且水溶性差，如果进行β -环糊精包合，可以防止精油的挥散和氧化，从而增加其稳定性及水溶性，并使之粉末化而改变其物理性状，以便于制备固体制剂。菊米精油通过β_环糊精包合的制剂工艺，获得的包合物使得精油粉末化且稳定性增加，有利于制剂。菊米精油包合物可以作为原料药应用于制备片剂、胶囊剂、冲剂等，菊米精油包合物的质量直
接影响到菊米精油应用于药物制备产品的药效作用的发挥，但是，目前还没有菊米精油包合物的质量评价方法，本发明建立了包合物与菊米精油主成分比较分析法，弥补了对菊米精油包合物质量评价方法的不足，并指导菊米精油包合物的生产工艺。为保证菊米精油的制剂发挥卓越的药效提供了一种合理、简便易行的质量控制方法。
发明内容
本发明的目的是提供超临界CO2萃取的菊米精油包合物新的质量控制方法，其内容如下I.高效液相测定包合物中的樟脑含量照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录)测定。I. I色谱条件与系统适用性试验色谱柱C18柱(4. 6mmX250mm,5ym);流动相甲醇-水(60 : 40, v/v);流速:O. 6mL/min ;检测波长289nm ;柱温28。0 ;进样量20μ L ;理论塔板数以樟脑计不低于2000，分尚度不少于1.5。1. 2对照品溶液的制备精密称取樟脑对照品，置容量瓶中，加甲醇(色谱纯)适量使其溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液，备用。I. 3供试品溶液制备精密称取包合物，置容量瓶中，加色谱纯甲醇超声处理后，冷却，定容，作为供试品溶液，备用。I. 4樟脑的含量测定分别取对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，测定，即得樟脑的含量。2.定性鉴别2.1 GC 条件毛细管柱HP-5(30mX0. 25mm，0. 25mm)，检测器和柱温均在 250°C。氦载气，流速是I. OmL/min。样品量为I μ L。程序升温初始温度为40°C，维持5min，然后从40°C至300°C，每分钟上升5°C，最终温度维持10分钟。2. 3 MS条件载气为氦气；分流比10 I ;进样量I μ L ;流速lmL/min ;电子轰击(EI)离子源；电子能量70eV;扫描范围33 600amu;GC-MS接口温度230°C ;倍增器电压IOOOeV02. 4对照物供试液的制备取超临界CO2萃取的菊米精油O. ImL,置IOmL的容量瓶中，加色谱纯的甲醇定容，备用。 2. 5样品供试液的制备取本品lg，精密称定， 置IOmL容量瓶中，超声处理5min，冷却，定容，备用。临用时稀释后进样。2. 6菊米精油与包合物组分比较分析分别在以上GC-MS条件下，注入对照物供试液和样品供试液。综合GC-MS分析，超临界CO2萃取的菊米精油与其包合物两者主要组分应基本一致。这些主要组分为相似度大于70%的组分。以上定量定性方法是菊米精油制成的β -CD包合物，不仅适合于菊米精油包合物的鉴别，还适合于以此包合物制成的任何产品的鉴别。本发明操作简单，具有以下特点①樟脑为菊米精油中的主要组分，通过樟脑含量的控制，可以评价包合工艺的参数是否合理，从而指导包合物的制备工艺，同时，考核包合物的质量状况。②菊米精油的组分是其药理药效作用的物质基础，本发明提供的方法可以方便、快捷的确定包合物的功效与菊米精油的一致性，替代了以往的药理实验验证法。③本发明弥补了对菊米精油包合物的质量控制方法的不足。
具体实施例实施例I制备菊米精油包合物采用超临界CO2萃取获得菊米精油。取菊米粉粹成粒度为50目的颗粒，置ΗΑ221-50-06型超临界CO2萃取仪的萃取釜中，按以下参数提取菊米精油萃取压力为21. IMPa，萃取温度为54. 5°C，萃取时间为I. 3h，分离釜I压力设为6. OMpa，温度设为40°C，分离釜II压力设为6. OMPa，温度设为40°C，C02流量为20L/h。在此条件下菊米精油的得率为9%。取超临界CO2萃取的菊米精油，β -环糊精(经50°C干燥I. 5h)按以下工艺条件进行包合菊米精油和β-⑶质量比为I : 10。将β-⑶加入蒸馏水，并加热溶解，制成饱和水溶液。冷却后，置于磁力搅拌器上，在50°c缓缓加入的精油，搅拌包合3小时，静置，冷藏24h滤过。用95%的乙醇洗涤滤过，晾置，在真空干燥箱内40°C干燥2h，即得。此条件下包合物收得率为89%，挥发油包合率为65%。本品为白色粉末，味淡，用于制备各种制剂。实施例2 HPLC法测定包合物中的樟脑含量I、色谱条件与系统适用性试验色谱柱C18柱(X Bridge) (4. 6mmX 250mm, 5 μ m);流动相甲醇-水(60 : 40, v/v);流速0. 6mL/min ;检测波长289nm ;柱温28°C ;进样量20 μ L ;理论塔板数以樟脑计不低于2000，分离度不少于I. 5。色谱图见图I和图2.
2、对照品溶液的制备精密称取樟脑对照品515. 9mg,置25mL量瓶中，加甲醇(色谱纯)适量使其溶解并稀释至刻度，使成浓度为19. 8mg/ml的溶液，作为对照品溶液，备用。3、供试品溶液制备样品供试溶液的制备精密称取包合物lg，置IOmL容量瓶中，加色谱纯甲醇20mL超声处理5min后,冷却,定容,作为供试品溶液,备用。4、分别取对照品溶液和供试品溶液20μ L，注入高效液相色谱仪中，测定，即得樟脑的含量。每克包合物含樟脑的量为O. 06mg。 实施例3 GC-MS法鉴别菊米包合物GC条件毛细管柱HP-5(30mX0. 25mm，0. 25mm)，检测器和柱温均在250°C。氦载气，流速是I. OmL/min。样品量为I μ L。程序升温初始温度为40°C，维持5min，然后从40°C至300°C，每分钟上升5°C，最终温度维持10分钟。MS条件载气为氦气；分流比10 I ;进样量I μ L ;流速lmL/min ；电子轰击(EI)离子源；电子能量70eV ;扫描范围33 600amu ;GC_MS接口温度230°C;倍增器电压IOOOeV ；NIST107 谱库。对照物供试液的制备取超临界CO2萃取的菊米精油O. ImL,置IOmL的容量瓶中，加色谱纯的甲醇定容，备用。样品供试液的制备取本品lg，精密称定，置IOmL容量瓶中，超声处理5min，冷却，定容，备用。临用时稀释10倍后进样。菊米精油与包合物组分比较分析分别在以上GC-MS条件下，注入对照物供试液和样品供试液。超临界CO2萃取的菊米精油与其包合物主要组分基本一致。见表I。表I菊米精油与包合物组分比较分析结果
权利要求
1.一种菊米精油包合物的质量控制方法，其特征在于包括如下含量测定 高效液相测定包合物中的樟脑含量 色谱柱ci8柱；流动相甲醇-水；检测波长289nm ； 对照品溶液的制备精密称取樟脑对照品，加甲醇(色谱纯)适量使其溶解并稀释至刻度，使成浓度为确定浓度的溶液，作为对照品溶液，备用； 供试品溶液制备精密称取包合物，置容量瓶中，加色谱纯甲醇超声处理5min后，冷却，定容，作为供试品溶液，备用； 测定法吸取上述溶液一定量，注入高效液相色谱仪中，测定，即得樟脑的含量。
2.一种菊米精油包合物的质量控制方法，其特征在于包括如下定性鉴别 GC条件毛细管柱，检测器和柱温均在250°C。氦载气，样品量为I μ L。柱温箱温度被设定为40°C维持O. 5min,然后从40°C至300°C，每分钟上升5°C。最终温度维持IOmin ； MS条件载气为氦气；分流进样；电子轰击(EI)离子源，电子能量70eV ;扫描范围33amu 600amu ;GC_MS 接口温度 230°C ;倍增器电压 IOOOeV ； 对照物的供试液制备取菊米精油，置容量瓶中，加色谱纯的甲醇定容，备用； 样品供试液的制备取本品精密称定，置容量瓶中，超声处理5min，冷却，定容，备用，临用时稀释后进样； 菊米精油对照物与样品组分比较分析分别在以上GC-MS条件下，注入对照物供试液和样品供试液，综合GC-MS分析，菊米精油与其包合物两者主要组分应一致。
3.根据权利要求I方法，其中所述的樟脑含量范围为O.01% -O. I %。
4.根据权利要求2方法，其中所述的主要化学组分，包括以下28种组分，见表I: 表I菊米精油与其包合物主要28种化学组分
5.根据权利要求I或2所述的方法，其中所述的取样品或溶解提取物及标准物质的溶剂的用量、定容、稀释或进样量可以所述具体值为基准改变，或按比例改变。
6.根据权利要求4，其所述的菊米精油包合物，其原料来自于菊科植物野甘菊(Chrysanthemum indicum)的花蕾及其叶片,采用超临界CO2萃取获得。
全文摘要
本发明涉及一种菊米精油包合物的质量控制方法。主要通过对该包合物中樟脑的含量测定，采用GC-MS法对包合物中的组分与菊米精油组分的比对，对该包合物进行定性测定。弥补了该产品的质量控制方法的缺失，并指导菊米精油包合物的生产工艺。为保证菊米精油包合物及其制剂发挥卓越的药效提供了一种合理、简便易行的质量控制方法。
文档编号A61K36/28GK102895277SQ201110128310
公开日2013年1月30日 申请日期2011年9月7日 优先权日2011年9月7日
发明者田薇, 陈磊, 王春荣, 余庆青 申请人:浙江农林大学