专利名称：一种牙痛清火药物的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物的质量控制方法，更具体地说是一种具有清热泻火， 消肿止痛功效的牙痛清火药物的质量控制方法，属医药技术领域。
背景技术：
牙痛是多种牙病和牙周病症常见的症状之一。牙病发作时疼痛难耐，如果不能及 时治疗既影响正常的饮食又可引发口腔、食道、胃肠病等30多种疾病。中国人的牙齿健康 堪称世界难题，按人口比例计算，中国人牙病为世界第二大国。然而，市场上现有的用于治 疗牙痛病症药物疗效不确定、易复发，且毒副作用较大。中医认为齿为骨之余，为肾所主，并为足阳明胃经所络，故牙病与胃、肾关系十分 密切，尤其以胃火牙痛最为常。风邪郁于阳明而化火，热蕴胃腑而上冲而致虚火上浮，均可 导致牙的病变，根据“痛则不通”之原理，来自肾、胃的虚、实之火邪必然遏阻阳明经络之流 通。因此，中医认为牙痛是人体实、虚火上升引起的。实火引起的，痛程短，疼痛厉害；虚火 引起的，痛程长，疼痛绵绵，牙齿松动，可见牙痛之病因主要责之于风、火、虚、瘀四端，其中 瘀为后果，风、火为原因。本发明药物系由不同性味、归经、功效的内服中药，针对胃火引起的牙痛、牙龈红 肿等症，直接作用于病变部位，标本兼治。本发明药物临床应用多年，疗效显著。
发明内容
本发明的目的在于提供一种牙痛清火药物的质量控制方法，可增强该药的有效 性、质量可控性及稳定性。本发明的目的是通过以下技术方案实现的 本发明药物的质量控制方法为
鉴别方法
A.取本品5ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇20ml使溶解，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣 加水IOml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流20 40分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每 次10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对 照药材0. 2g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐 酸1ml，置水浴中回流20 40分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次10ml，合并提取液，挥 去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两 种溶液各3 8 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以比例 为10 20 :3 8 :0. 5 2的30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂， 展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置 上，显相同的橙红色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
B.取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇20ml，浸渍1 3小时，时时搅拌，滤 过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇提取三次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶 液；另取芍药苷、桅子苷对照品，分别加乙醇制成每Iml含lmg、4mg的溶液，作为对照品溶 液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3 8 1，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制 备的硅胶G薄层板上，以比例5 12 :2 5 :0. 5 2 :0. 05 0. 2的三氯甲烷-甲醇-醋 酸乙酯-二乙胺为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加热至斑点 显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C.取本品20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩 至2ml，作为供试品溶液；另取玄参对照药材5g，加水约IOOml煎煮30分钟，滤过，取滤液 20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶 解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩至2ml，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取 上述两种溶液各8 15 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为3 5 :1 3 :0. 5 2正丁醇-甲酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以临用时混合的比例为1 :1的1% 香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色 谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定方法
照高效液相色谱法测定
色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以70 90 10 30甲醇一0. 1%磷酸为流动相；检测波长200 300nm ；理论板数按大黄酚峰计算应不低于 2500 3500 ；
对照品溶液的制备分别精密称取大黄素、大黄酚对照品适量，各加甲醇制成每Iml含 大黄素12. 5 g、大黄酚50 g的溶液，即得；
供试品溶液的制备精密量取本品10ml，置150ml烧瓶中，加无水乙醇5ml，再加盐酸 1. 5ml，摇勻，置水浴中回流水解20 40分钟，立即冷至室温，转移至分液漏斗中，加三氯甲 烷提取二至四次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移入25ml量瓶中， 加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
测定法分别精密吸取上述三种溶液各10 1，注入液相色谱仪，测定，即得； 这种牙痛清火药物每Iml含总蒽醌以大黄素和大黄酚的总量计，不得少于0. 06mgo优选方案
本发明药物的质量控制方法为 鉴别方法
A.取本品5ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇20ml使溶解，滤过，取滤液5ml，蒸干，残 渣加水IOml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流30分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次 10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照 药材0. 2g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐酸 Iml，置水浴中回流30分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次IOml，合并提取液，挥去乙醚， 残渣加三氯甲烷Iml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各 5 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以比例15 5 1的30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下 检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色斑点；置氨蒸气中 熏后，斑点变为红色；
B.取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇20ml，浸渍2小时，时时搅拌，滤过，滤 液蒸干，残渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，弃去醚液，水液用水饱和的正 丁醇提取三次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液； 另取芍药苷、桅子苷对照品，分别加乙醇制成每Iml含lmg、4mg的溶液，作为对照品溶液；照 薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 1，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的硅胶G 薄层板上，以比例8 :4 :1 :0. 1三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-二乙胺为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C.取本品20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩 至2ml，作为供试品溶液；另取玄参对照药材5g，加水约IOOml煎煮30分钟，滤过，取滤液 20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶 解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩至2ml，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取 上述两种溶液各10 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例4 2 1的正丁醇-甲酸乙 酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以临用时混合配置比例为1 :1的1%香草醛乙醇溶 液和3%高氯酸水溶液的混合溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照 药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定方法
照高效液相色谱法测定
色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以85 15甲醇一 0. 1%磷酸为流动相；检测波长254nm ；理论板数按大黄酚峰计算应不低于3000 ；
对照品溶液的制备分别精密称取大黄素、大黄酚对照品适量，各加甲醇制成每Iml含 大黄素12. 5 g、大黄酚50 g的溶液，即得；
供试品溶液的制备精密量取本品10ml，置150ml烧瓶中，加无水乙醇5ml，再加盐酸 1.5ml，摇勻，置水浴中回流水解30分钟，立即冷至室温，转移至分液漏斗中，加三氯甲烷提 取三次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇稀 释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
测定法分别精密吸取上述三种溶液各10 1，注入液相色谱仪，测定，即得； 这种牙痛清火药物每Iml含总蒽醌以大黄素和大黄酚的总量计，不得少于0. 06mg。本发明的质量控制方法对制剂产品的质量控制十分有效，方法精密度高、灵敏度、 稳定性都很高。以下实验例用于进一步说明本发明质量控制方法的有益效果，但不仅限于本发 明。实验例1鉴别
(一)大黄薄层鉴别1、供试品溶液的制备取本品5ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇20ml使溶解，滤过，取 滤液5ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流30分钟，立即冷却，用乙 醚提取二次，每次10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶 液。2、对照药材溶液的制备取大黄对照药材0. 2g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过，取 滤液5ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流30分钟，立即冷却，用乙 醚提取二次，每次10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为对照药材 溶液。3、缺大黄阴性对照溶液的制备按处方比例及制法，制成缺大黄的阴性样品，取 5ml，按供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液。4、薄层层析照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 1，分别点于同一以羧 甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30 60°C)-甲酸乙酯-甲酸(15 5 1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在 与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。阴 性对照色谱在与对照药材色谱相应的位置上无干扰。(二)赤芍、桅子的薄层鉴别
1、供试品溶液的制备取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇20ml，浸渍2小时， 时时搅拌，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，弃去醚液， 水液用水饱和的正丁醇提取三次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解， 作为供试品溶液。2、对照药材溶液的制备取芍药苷、桅子苷对照品，分别加乙醇制成每Iml含lmg、 4mg的溶液，作为对照品溶液。3、缺赤芍、桅子阴性对照溶液的制备按处方比例及制法，制成缺赤芍、桅子的阴 性样品，取10ml，按供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液。4、薄层层析照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 1，分别点于同一用4% 醋酸钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-二乙胺(8 410. 1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加热至斑点显色清晰。供试 品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照色谱在与对照品色 谱相应的位置上无干扰。(三)玄参的薄层鉴别
1、供试品溶液的制备取本品20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁 醇液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，弃去醚液，水液用水饱和的 正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶解，并加活性炭少 许，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；
2、对照药材溶液的制备取玄参对照药材5g，加水约IOOml煎煮30分钟，滤过，取滤液 20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶 解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；
3、缺玄参对照溶液的制备按处方比例及制法，制成缺玄参的阴性样品，取20ml，按供 试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液；4、薄层层析照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以正丁醇-甲酸乙酯-甲醇(4 2 :1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%香草醛乙 醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液(1 :1，临用时混合)，在105°C加热至斑点显色清晰。 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照色谱在与对 照药材色谱相应的位置上无干扰。实验例2含量测定
按照高效液相色谱法的测定方法，对三批样品(080201、080202、080203)进行含量测定。计算方法如下
X (mg/ml) = X1 (大黄素含量)(mg/ml)+ X2 (大黄酚含量)(mg/ml)
X1(大黄素含量)(mg/ml)= (A样品峰面积xC大黄素对照品浓度XV定容体积)/ (A大黄素对照品峰面积X 1000X 10) X2(大黄酚含量)(mg/ml)= (Α样品峰面积XC大黄酚对照品浓度XV定容体积)/ (A大黄酚对照品峰面积X 1000X 10)
试验结果如下
批号大黄酚含量 大黄素含量样品含量
■_, (Pig/ml)_, (mg/ml)_ _
0802010. 5218 . 25 240. 7742。
080202^ 0.55 720. 2644^ 0.8216
0802030. 561 20. 25 810. 81 9具体实施例方式以下用实施例对本发明的牙痛清火药物的质量控制方法作进一步的说明，这将有 助于对本发明及其效果进一步的了解，实施例不限定本发明的保护范围，其保护范围由权 利要求来决定。实施例1本发明药物的质量控制方法 鉴别方法
Α.取本品5ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇20ml使溶解，滤过，取滤液5ml，蒸干，残 渣加水IOml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流20分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次 10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照 药材0. 2g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐 酸1ml，置水浴中回流20分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次10ml，合并提取液，挥去乙 醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶 液各3 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30 60°C)-甲酸乙酯-甲酸(10 3 0. 5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色斑点； 置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
B.取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇20ml，浸渍1小时，时时搅拌，滤过，滤 液蒸干，残渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，弃去醚液，水液用水饱和的正 丁醇提取三次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷、桅子苷对照品，分别加乙醇制成每Iml含lmg、4mg的溶液，作为对照品溶液。照 薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3 1，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷_甲醇_醋酸乙酯_ 二乙胺(5 :2 0. 5 0. 05)为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C.取本品20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩 至2ml，作为供试品溶液。另取玄参对照药材5g，加水约IOOml煎煮30分钟，滤过，取滤液 20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶 解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩至2ml，制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上 述两种溶液各8 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-甲酸乙酯-甲醇(3 1 :0. 5) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液(1 :1， 临用时混合)，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置 上，显相同颜色的斑点； 含量测定方法 照高效液相色谱法测定
色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇一0. 1%磷酸 (70 30)为流动相；检测波长200nm。理论板数按大黄酚峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备分别精密称取大黄素、大黄酚对照品适量，各加甲醇制成每 Iml含大黄素12. 5 g、大黄酚50 g的溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取本品10ml，置150ml烧瓶中，加无水乙醇5ml，再加盐 酸1.5ml，摇勻，置水浴中回流水解20分钟，立即冷至室温，转移至分液漏斗中，加三氯甲烷 提取二次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇 稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液。测定法分别精密吸取上述三种溶液各10 1，注入液相色谱仪，测定，即得。 这种牙痛清火药物每Iml含总蒽醌以大黄素(C15HltlO5)和大黄酚(C15HltlO4)的总量计，不
得少于0. 06mg。实施例2本发明药物的质量控制方法 鉴别方法
A.取本品5ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇20ml使溶解，滤过，取滤液5ml，蒸干，残 渣加水IOml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流40分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次 10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液，另取大黄对照 药材0. 2g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐 酸Iml，置水浴中回流40分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次IOml，合并提取液，挥去乙 醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶 液各8 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30 60°C)-甲酸乙酯-甲酸(20:8:2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。B.取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇20ml，浸渍3小时，时时搅拌，滤 过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，弃去醚液，水液用水饱和 的正丁醇提取三次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶 液；另取芍药苷、桅子苷对照品，分别加乙醇制成每Iml含lmg、4mg的溶液，作为对照品溶 液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各8 1，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的 硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-二乙胺(12 :5 :2 0. 2)为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。C.取本品20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残 渣加水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇提取三 次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶解，并加活性炭少许，滤过，滤液 浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取玄参对照药材5g，加水约IOOml煎煮30分钟，滤过，取滤 液20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使 溶解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩至2ml，制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸 取上述两种溶液各15 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-甲酸乙酯-甲醇(5 3 2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液 (1 :1，临用时混合)，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应 的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定方法
照高效液相色谱法测定
色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇一0. 1%磷酸 (90 10)为流动相；检测波长300nm。理论板数按大黄酚峰计算应不低于3500。对照品溶液的制备分别精密称取大黄素、大黄酚对照品适量，各加甲醇制成每 Iml含大黄素12. 5 g、大黄酚50 g的溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取本品10ml，置150ml烧瓶中，加无水乙醇5ml，再加盐 酸1. 5ml，摇勻，置水浴中回流水解40分钟，立即冷至室温，转移至分液漏斗中，加三氯甲烷 提取四次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇 稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液。测定法分别精密吸取上述三种溶液各10 1，注入液相色谱仪，测定，即得。 这种牙痛清火药物每Iml含总蒽醌以大黄素(C15HltlO5)和大黄酚(C15HltlO4)的总量计，不
得少于0. 06mg。实施例3本发明药物的质量控制方法 鉴别方法
A.取本品5ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇20ml使溶解，滤过，取滤液5ml，蒸干，残 渣加水IOml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流30分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次 10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液，另取大黄对照 药材0. 2g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐 酸1ml，置水浴中回流30分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶 液各5 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30 60°C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5 1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色斑点； 置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
B.取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇20ml，浸渍2小时，时时搅拌，滤过，滤 液蒸干，残渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，弃去醚液，水液用水饱和的正 丁醇提取三次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液； 另取芍药苷、桅子苷对照品，分别加乙醇制成每Iml含lmg、4mg的溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 1，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的硅胶 G薄层板上，以三氯甲烷_甲醇_醋酸乙酯_ 二乙胺(8 4 1 0. 1)为展开剂，展开，取出，晾 干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色 谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C.取本品20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩 至2ml，作为供试品溶液。另取玄参对照药材5g，加水约IOOml煎煮30分钟，滤过，取滤液 20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶 解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩至2ml，制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上 述两种溶液各10 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-甲酸乙酯-甲醇(4 2 1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液(1 :1， 临用时混合)，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置 上，显相同颜色的斑点。含量测定方法
照高效液相色谱法测定
色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇一0. 1%磷酸 (85 15)为流动相；检测波长254nm。理论板数按大黄酚峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备分别精密称取大黄素、大黄酚对照品适量，各加甲醇制成每 Iml含大黄素12. 5 g、大黄酚50 g的溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取本品10ml，置150ml烧瓶中，加无水乙醇5ml，再加盐 酸1.5ml，摇勻，置水浴中回流水解30分钟，立即冷至室温，转移至分液漏斗中，加三氯甲烷 提取三次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇 稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液。测定法分别精密吸取上述三种溶液各10 1，注入液相色谱仪，测定，即得。 这种牙痛清火药物每Iml含总蒽醌以大黄素(C15HltlO5)和大黄酚(C15HltlO4)的总量计，不
得少于0. 06mg。上述质量控制方法，可以应用于这种牙痛清火药物的中药制剂的处方按照现有技 术制成丸剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液中任何一种现有临床适用剂型的质量控制方法。
权利要求
一种牙痛清火药物的质量控制方法，其特征在于该方法包括如下步骤A.取本品5ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇20ml使溶解，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流20～40分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.2g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流20～40分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3～8 l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以比例为10～203～80.5～2的30～60℃石油醚 甲酸乙酯 甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色； B.取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇20ml，浸渍1～3小时，时时搅拌，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇提取三次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷、栀子苷对照品，分别加乙醇制成每1ml含1mg、4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3～8 l，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以比例5～122～50.5～20.05～0.2的三氯甲烷 甲醇 醋酸乙酯 二乙胺为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.取本品20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮10ml使溶解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取玄参对照药材5g，加水约100ml煎煮30分钟，滤过，取滤液20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮10ml使溶解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩至2ml，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各8～15 l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为3～51～30.5～2正丁醇 甲酸乙酯 甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以临用时混合的比例为11的1%香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液的混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.如权利要求1所述的一种牙痛清火药物的质量控制方法，其特征在于该方法包括如 下步骤A.取本品5ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇20ml使溶解，滤过，取滤液5ml，蒸干，残 渣加水IOml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中回流30分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次 10ml，合并提取液，挥去乙醚，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄对照 药材0. 2g，加甲醇20ml浸渍1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，加盐酸 lml，置水浴中回流30分钟，立即冷却，用乙醚提取二次，每次10ml，合并提取液，挥去乙醚， 残渣加三氯甲烷Iml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各 5 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以比例15 5 :1的30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色斑点；置氨蒸气中 熏后，斑点变为红色；B.取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇20ml，浸渍2小时，时时搅拌，滤过，滤 液蒸干，残渣加水IOml使溶解，用乙醚提取三次，每次10ml，弃去醚液，水液用水饱和的正 丁醇提取三次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液； 另取芍药苷、桅子苷对照品，分别加乙醇制成每Iml含lmg、4mg的溶液，作为对照品溶液；照 薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 1，分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的硅胶G 薄层板上，以比例8 :4 :1 :0. 1三氯甲烷-甲醇-醋酸乙酯-二乙胺为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在100°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.取本品20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加 水20ml使溶解，用乙醚提取三次，每次20ml，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇提取三次， 每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩 至2ml，作为供试品溶液；另取玄参对照药材5g，加水约IOOml煎煮30分钟，滤过，取滤液 20ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加丙酮IOml使溶 解，并加活性炭少许，滤过，滤液浓缩至2ml，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取 上述两种溶液各10 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例4 :2 1的正丁醇-甲酸乙 酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以临用时混合配置比例为1 :1的1%香草醛乙醇溶 液和3%高氯酸水溶液的混合溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照 药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.一种牙痛清火药物的质量控制方法，其特征在于该方法包括如下步骤照高效液相色谱法测定色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以70 90 10 30甲醇一0. 1%磷酸为流动相；检测波长200 300nm ；理论板数按大黄酚峰计算应不低于 2500 3500 ；对照品溶液的制备分别精密称取大黄素、大黄酚对照品适量，各加甲醇制成每Iml含 大黄素12. 5 g、大黄酚50 g的溶液，即得；供试品溶液的制备精密量取本品10ml，置150ml烧瓶中，加无水乙醇5ml，再加盐酸 1. 5ml，摇勻，置水浴中回流水解20 40分钟，立即冷至室温，转移至分液漏斗中，加三氯甲 烷提取二至四次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移入25ml量瓶中， 加甲醇稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取上述三种溶液各10 1，注入液相色谱仪，测定，即得；这种牙痛清火药物每Iml含总蒽醌以大黄素和大黄酚的总量计，不得少于0. 06mg。
4.如权利要求3所述的一种牙痛清火药物的质量控制方法，其特征在于该方法包括如 下步骤照高效液相色谱法测定色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以85 15甲醇一 0. 1%磷酸为流动相；检测波长254nm ；理论板数按大黄酚峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备分别精密称取大黄素、大黄酚对照品适量，各加甲醇制成每Iml含大黄素12. 5 g、大黄酚50 g的溶液，即得；供试品溶液的制备精密量取本品10ml，置150ml烧瓶中，加无水乙醇5ml，再加盐酸 1. 5ml，摇勻，置水浴中回流水解30分钟，立即冷至室温，转移至分液漏斗中，加三氯甲烷提 取三次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移入25ml量瓶中，加甲醇稀 释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取上述三种溶液各10 1，注入液相色谱仪，测定，即得； 这种牙痛清火药物每Iml含总蒽醌以大黄素和大黄酚的总量计，不得少于0. 06mgo
全文摘要
本发明属于中药技术领域，具体说涉及是一种具有清热泻火，消肿止痛功效的牙痛清火药物的质量控制方法。本发明经过多次试验后采用薄层色谱法对处方中大黄、赤芍、栀子、玄参进行鉴别，且采用高效液相法进行含量测定。本发明质量控制方法对产品的质量控制更为有效，方法精密度、灵敏度、稳定性更高，能有效地保证药品的质量。
文档编号G01N30/90GK101926884SQ201010277690
公开日2010年12月29日 申请日期2010年9月9日 优先权日2010年9月9日
发明者唐德江, 陈犁 申请人:重庆希尔安药业有限公司