专利名称：一种车前子有效部位及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种车前子有效部位及其制备方法和应用，具体说，是涉及一种用于治疗糖尿病和高血压的车前子有效部位及其制备方法和在制备糖尿病和高血压药物中的应用，属于中药技术领域。
背景技术：
当前，糖尿病和高血压已成为严重危害现代人类健康的慢性疾病，其发病原因和机理目前并不是十分清楚，但有一点是比较公认的，即高血压和糖尿病均是多原因的慢性终身性疾病，是体内几个系统代谢发生紊乱的结果。目前用于治疗糖尿病和高血压的药物主要是化学合成药物，这些药物对糖尿病和高血压具有一定的治疗作用，但同时也伴随着许多副作用，如消化道的不良反应、血脂和血糖水平的异常、心率过缓以及咳嗽哮喘、一定的器官毒性等。同时，由于糖尿病和高血压的发生往往是相关的，需要长期跟踪治疗，这样就给予政府和患者以巨大的精神和物质压力。因此，从中药中寻找治疗糖尿病和高血压的新办法，将会产生良好的社会效益和经济效益。车前子为常用中药，《中国药典》QOlO版)以车前科车前属植物车前Plantago asiatica L.或平车前Plantago depressa Willd.的干燥成熟种子作为车前子的基源，具有清热利尿，渗湿通淋，明目祛痰等功效，传统上用于治疗急性肾小球肾炎、咳喘和黄疸性肝炎等。车前子也可配伍其他中药使用，例如复方龙胆泻肝汤中配伍车前子起到清热利湿的作用。但目前还没有关于车前子提取物用于治疗糖尿病和高血压的有效部位及其制备方法的相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于治疗糖尿病和高血压的车前子有效部位及其制备方法和其在制备糖尿病和高血压药物中的应用。本发明所述的车前子有效部位，是车前子乙醇提取物经过大孔树脂分离纯化得到，含有车前素A和麦角留苷，且车前素A与麦角留苷的重量之比为1 1 1 5，两者重量之和占有效部位总重量的40 80%。进一步，所述的车前素A与麦角甾苷的重量之比为1 2 1 4，两者重量之和占有效部位总重量的50 70%。所述的车前子乙醇提取物推荐为车前子经过2 6倍体积的体积分数为60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次得到的提取物；优选为车前子经过3 5倍体积的体积分数为70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次得到的提取物。所述的车前子有效部位的制备方法，包括如下具体步骤a)将车前子用2 6倍(优选3 5倍)体积的体积分数为60 90 % (优选 70 80% )的乙醇水溶液回流提取2 6次(优选3 5次)，收集提取液，过滤、浓缩干溶剂；
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b)将步骤a)制备的浓缩提取液用5 1 1 5(优选为3 1 1 3)的重量/体积比的水稀释得到的混悬水溶液加入HPD-100大孔树脂柱，再用体积分数为20 60% (优选30 50%)的乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干溶剂。所述的车前子推荐为车前科植物车前(Plantago asiatica L.)和/或平车前 (Plantago depressa ffilld.)的干燥成熟种子。所述的车前子推荐粉碎成直径小于或等于6mm的颗粒。所述的车前子有效部位在制备治疗糖尿病和/或高血压药物制剂中的应用。所述的车前子有效部位与药学上可接受的药物载体组成的组合物在制备治疗糖尿病和/或高血压药物制剂中的应用。所述的药物制剂形式可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括片剂、糖衣片剂、 薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂；优选口服剂型，如胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等。所述的口服剂型可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色齐U、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。适宜的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂；适宜的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠；适宜的润滑剂包括，例如硬脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。本发明得到的车前子有效部位可以促进胰岛素分泌，降低空腹血糖，同时可有效降低动物血压值，降低血清中血管紧张素II的含量，显示出良好的治疗糖尿病和高血压的药用价值。
图1为本发明得到的车前子有效部位在正离子模式下得到的指纹图谱。图2为本发明得到的车前子有效部位在正离子模式下得到的质谱图。图3为车前素A的化学结构式图。图4为本发明得到的车前子有效部位在负离子模式下得到的指纹图谱。图5为本发明得到的车前子有效部位在负离子模式下得到的质谱图。图6为麦角甾苷的化学结构式图。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步详细、完整的说明。实施例1将车前子粉碎成平均直径为4mm的颗粒，过筛，用4倍体积的体积分数为75%的乙醇水溶液回流提取4次，收集提取液，过滤、浓缩干溶剂；用1 1重量/体积比的水稀释上述浓缩提取液，得到混悬水溶液；将得到的混悬水溶液加入HPD-100大孔树脂柱，用体积分数为40%的乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干溶剂，即得车前子有效部位。称取制得的车前子有效部位样品适量，用0.1% (V V)甲酸的水溶液与甲醇按
4体积比为90 10混合的溶液溶解在容量瓶中，稀释至刻度，摇勻，制成每ImL溶液含Ig样品，并利用超高效液相色谱-质谱联用仪(UPLC-MQ进行指纹图谱分析，分析条件如下色谱条件Waters，Acquity UPLC BEH C18 (50 X 2. 1謹)色谱柱；流动相A相为含 0. 1% (V V)甲酸的水溶液；流动相B相为甲醇；流速为OJmin;柱温为40°C ；进样量为 2μ L ；检测模式为正负离子全扫描监测。质谱条件采用电喷雾离子源，正离子全扫描检测模式进行数据采集时，离子源温度为120°C ；去溶剂温度为300°C ；氮气为去溶剂和锥孔气，流速分别为500L/h和50L/h ；毛细管电压为2. 2千伏；锥孔电压为23伏。负离子全扫描检测模式进行数据采集时，离子源温度为120°C ；去溶剂温度为300°C ；氮气为去溶剂和锥孔气，流速分别为500L/h和50L/h ； 毛细管电压为2. 5千伏；锥孔电压为32伏。图1为得到的车前子有效部位在正离子模式下得到的指纹图谱，图2为得到的车前子有效部位在正离子模式下得到的质谱图；结合图1和图2可见得到的车前子有效部位中含有车前素A(其化学结构式图见图3所示)。图4为得到的车前子有效部位在负离子模式下得到的指纹图谱，图5为得到的车前子有效部位在负离子模式下得到的质谱图；结合图4和图5可见得到的车前子有效部位中含有麦角甾苷(其化学结构式图见图6所示)。另外，分析测得本实施例制备的车前子有效部位中含有的车前素A与麦角留苷的重量之比为1 3，两者重量之和占有效部位总重量的60%。实施例2将车前子粉碎成平均直径为Imm的颗粒，过筛，用3倍体积的体积分数为60%的乙醇水溶液回流提取5次，收集提取液，过滤、浓缩干溶剂；用1 3重量/体积比的水稀释上述浓缩提取液，得到混悬水溶液；将得到的混悬水溶液加入HPD-100大孔树脂柱，用体积分数为50%的乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干溶剂，即得车前子有效部位。经分析得知本实施例所制备的车前子有效部位中含有的车前素A与麦角留苷的重量之比为1 2，两者重量之和占有效部位总重量的50%。实施例3将车前子粉碎成平均直径为6mm的颗粒，过筛，用5倍体积的体积分数为80%的乙醇水溶液回流提取3次，收集提取液，过滤、浓缩干溶剂；用1 2重量/体积比的水稀释上述浓缩提取液，得到混悬水溶液；将得到的混悬水溶液加入HPD-100大孔树脂柱，用体积分数为30%的乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干溶剂，即得车前子有效部位。经分析得知本实施例所制备的车前子有效部位中含有的车前素A与麦角留苷的重量之比为1 4，两者重量之和占有效部位总重量的70%。实施例4选用健康雄性小鼠，(22±》g，随机分为正常组和造模组，造模组腹腔注射链脲佐菌素150mg/kg，4a!后剪尾测随机血糖，筛选血糖值超过10. lmmol/1的小鼠进入实验，并分为模型组和给药组。给药组每日给药车前子有效部位90mg/kg。连续口服灌胃给药4周，给药结束后，测定小鼠血清胰岛素和空腹血糖值。实验数据进行方差分析，结果以χ士s表示。
表1车前子有效部位对I型糖尿病小鼠的降糖作用
权利要求
1.一种车前子有效部位，其特征在于由车前子乙醇提取物经过大孔树脂分离纯化得到，含有车前素A和麦角留苷，且车前素A与麦角留苷的重量之比为1 1 1 5，两者重量之和占有效部位总重量的40 80%。
2.根据权利要求1所述的车前子有效部位，其特征在于所述的车前素A与麦角甾苷的重量之比为1 2 1 4，两者重量之和占有效部位总重量的50 70%。
3.根据权利要求1所述的车前子有效部位，其特征在于所述的车前子乙醇提取物为车前子经过2 6倍体积的体积分数为60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次得到的提取物。
4.根据权利要求3所述的车前子有效部位，其特征在于所述的车前子乙醇提取物为车前子经过3 5倍体积的体积分数为70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次得到的提取物。
5.一种权利要求1所述的车前子有效部位的制备方法，其特征在于，包括如下具体步骤a)将车前子用2 6倍体积的体积分数为60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次， 收集提取液，过滤、浓缩干溶剂；b)将步骤a)制备的浓缩提取液用5 1 1 5的重量/体积比的水稀释得到的混悬水溶液加入HPD-100大孔树脂柱，再用体积分数为20 60%的乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干溶剂。
6.根据权利要求5所述的车前子有效部位的制备方法，其特征在于，包括如下具体步骤a)将车前子用3 5倍体积的体积分数为70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次， 收集提取液，过滤、浓缩干溶剂；b)将步骤a)制备的浓缩提取液用3 1 1 3的重量/体积比的水稀释得到的混悬水溶液加入HPD-100大孔树脂柱，再用体积分数为30 50%的乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，浓缩干溶剂。
7.根据权利要求5所述的车前子有效部位的制备方法，其特征在于所述的车前子为车前科植物车前和/或平车前的干燥成熟种子。
8.根据权利要求5所述的车前子有效部位的制备方法，其特征在于所述的车前子粉碎成直径小于或等于6mm的颗粒。
9.权利要求1至8中任一项所述的车前子有效部位在制备治疗糖尿病和/或高血压药物制剂中的应用。
10.权利要求1至8中任一项所述的车前子有效部位与药学上可接受的药物载体组成的组合物在制备治疗糖尿病和/或高血压药物制剂中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种车前子有效部位及其制备方法和应用。所述的车前子有效部位是由车前子乙醇提取物经过大孔树脂分离纯化得到，含有车前素A和麦角甾苷，且车前素A与麦角甾苷的重量之比为1∶1～1∶5，两者重量之和占有效部位总重量的40～80％。本发明得到的车前子有效部位可以促进胰岛素分泌，降低空腹血糖，同时可有效降低动物血压值，降低血清中血管紧张素II的含量，显示出良好的治疗糖尿病和高血压的药用价值，可单一或与药学上可接受的药物载体组成的组合物应用于制备治疗糖尿病和/或高血压药物制剂中。
文档编号A61P9/12GK102225095SQ20111017251
公开日2011年10月26日 申请日期2011年6月23日 优先权日2011年6月23日
发明者季光, 杨莉, 王峥涛, 祁萌 申请人:上海中医药大学