专利名称：一种车前子提取物及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种车前子提取物及其应用，属于中药技术领域。
背景技术：
当前，糖尿病已成为严重危害现代人类健康的三大慢性疾病之一。糖尿病主要表现为饭量大，饮水多，排尿多，体重减少的“三多一少”的症状，同时随着得病时间的延长，可导致多种组织、器官的并发症。目前用于治疗糖尿病的药物主要有磺脲类、格列奈类、双胍类、噻唑烷二酮类化合物及α-糖苷酶抑制剂等。这些药物对糖尿病具有一定的治疗作用， 但同时也伴随着许多副作用，如消化道的不良反应及一定的肝肾毒性等。同时由于糖尿病是体内几个系统代谢发生紊乱的结果，是多原因的慢性终身性疾病，在长期治疗的过程中患者和政府付出了经济和精神上的巨大代价，因此在中药中寻找治疗糖尿病的新方法具有较大的社会效益。车前子为常用中药，《中国药典》QOlO版)以车前科车前属植物车前Plantago asiatica L.或平车前Plantago depressa Willd.的干燥成熟种子作为车前子的基源， 具有清热利尿，渗湿通淋，明目祛痰等功效，传统上用于治疗急性肾小球肾炎、咳喘和黄疸性肝炎等。车前子也可配伍其他中药使用，例如复方龙胆泻肝汤中配伍车前子起到清热利湿的作用。近年来发现车前科植物平车前的变种毛平车前(P. cbpressa var. montata Kitag.)的醇提取物对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠具有一定降血糖调血脂的作用，对其化学成分进行研究后发现，主要为熊果酸、齐墩果酸、芹菜素、木犀草素、梓醇、martynoside、高车前苷、高车前素等。另有研究者发现，车前(P. asiatica L.)的甲醇提取物对糖基化终末产物的形成也有抑制作用，显示出其潜在的糖尿病治疗作用，并提出该提取物中主要的糖基化抑制物是大车前苷(plantamajoside)。同时，欧车前(P. ovata)的籽壳具有通便、降低胆固醇、改善糖尿病患者的血糖水平，并已被开发成营养品。
发明内容
本发明的目的是提供一种车前子提取物及其应用。所述的车前子提取物，是由车前子经过2 6倍体积的体积分数为60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次得到，含有麦角留苷、异麦角留苷、京尼平苷酸、阿魏酸、车前素 A和车前素B。进一步，所述的车前子提取物，是由车前子经过3 5倍体积的体积分数为70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次得到。更进一步，所述的车前子提取物，是由车前子经过4倍体积的体积分数为75%的乙醇水溶液回流提取4次得到。所述的车前子推荐为车前科植物车前(Plantago asiatica L.)和/或平车前 (Plantago depressa ffilld.)的干燥成熟种子。所述的车前子推荐粉碎成直径小于或等于6mm的颗粒。
3
所述的车前子提取物在制备治疗糖尿病药物制剂中的应用。所述的车前子提取物与药学上可接受的药物载体组成的组合物在制备治疗糖尿病药物制剂中的应用。所述的糖尿病为I型和/或II型糖尿病。所述的药物制剂形式可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括片剂、糖衣片剂、 薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂；优选口服剂型，如胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等。所述的口服剂型可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色齐U、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。适宜的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂；适宜的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠；适宜的润滑剂包括，例如硬脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。本发明利用HepG2细胞进行体外葡萄糖消耗试验，同时利用四氧嘧啶导致的I型糖尿病小鼠，链脲佐菌素导致的I型糖尿病小鼠，链脲佐菌素加高脂饲料导致的II型糖尿病大鼠进行体内药效实验，结果表明本发明提供的车前子提取物在体内试验中可促进葡萄糖的消耗，且对细胞的毒性低，同时在体外试验中可明显提高血清胰岛素水平，降低空腹血糖水平，显示出良好的治疗糖尿病(I型和II型)的药用价值。
图1为实施例1得到的车前子提取物在正离子模式下得到的指纹图谱。图2为实施例1得到的车前子提取物在负离子模式下得到的指纹图谱。图3为实施例1得到的车前子提取物在正离子模式下得到的质谱图。图4为实施例1得到的车前子提取物在负离子模式下得到的质谱图。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步详细、完整的说明。实施例1去除沙石及杂质，将车前子粉碎为4mm的小颗粒，过筛，用4倍体积的75%乙醇回流提取4次，提取液过滤后回收溶剂至干，使用前用生理盐水混悬。称取车前子提取物样品适量，用0.1% (V V)甲酸的水溶液与甲醇按体积比为 90 10混合的溶液溶解在容量瓶中，稀释至刻度，摇勻，制成每ImL溶液含Ig样品，并利用超高效液相色谱-质谱联用仪(UPLC-MQ进行分析，分析条件如下色谱条件=Waters, Acquity UPLC BEH C18 (50 X 2. 1讓)色谱柱；流动相A相为含 0. 1 % (V V)甲酸的水溶液，流动相B相为甲醇；流速为0. 3min ；柱温为40°C ；进样量为 2μ L ；检测模式为正负离子全扫描监测。质谱条件采用电喷雾离子源，正离子全扫描检测模式进行数据采集时，离子源温度为120°C ；去溶剂温度为300°C ；氮气为去溶剂和锥孔气，流速分别为500L/h和50L/h ；毛细管电压为2. 2千伏；锥孔电压为23伏。负离子全扫描检测模式进行数据采集时，离子源温度为120°C ；去溶剂温度为300°C ；氮气为去溶剂和锥孔气，流速分别为500L/h和50L/h ； 毛细管电压为2. 5千伏；锥孔电压为32伏。图1为得到的车前子提取物在正离子模式下得到的指纹图谱，其中主要色谱峰鉴定为阿魏酸、车前素B、车前素A和麦角留苷，图2为得到的车前子提取物在负离子模式下得到的指纹图谱，其中主要色谱峰鉴定为京尼平苷酸、车前素A、麦角留苷和异麦角留苷；图3 为得到的车前子提取物在正离子模式下得到的质谱图，图4为得到的车前子提取物在负离子模式下得到的质谱图；结合图1至图4可见得到的车前子提取物中含有麦角留苷、异麦角甾苷、京尼平苷酸、阿魏酸、车前素A和车前素B。实施例2将!fepG2细胞接种于96孔板，待细胞长至60%融合，换上含0. 2%牛血清白蛋白 (BSA)的不同浓度车前子提取物的培养液，温育24h后，检测培液中的葡萄糖残量，按下式计算24h各孔细胞的葡萄糖消耗率。葡萄糖消耗率=(实验孔Oh实测值-实验孔24h实测值)/ (对照孔Oh实测值-对照孔24h实测值)X 100%。表1车前子提取物对HepG2细胞糖代谢的促进作用
权利要求
1.一种车前子提取物，其特征在于是由车前子经过2 6倍体积的体积分数为60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次得到，含有麦角留苷、异麦角留苷、京尼平苷酸、阿魏酸、车前素A和车前素B。
2.根据权利要求1所述的车前子提取物，其特征在于是由车前子经过3 5倍体积的体积分数为70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次得到。
3.根据权利要求2所述的车前子提取物，其特征在于是由车前子经过4倍体积的体积分数为75%的乙醇水溶液回流提取4次得到。
4.根据权利要求1所述的车前子提取物，其特征在于所述的车前子为车前科植物车前和/或平车前的干燥成熟种子。
5.根据权利要求1所述的车前子提取物，其特征在于所述的车前子粉碎成直径小于或等于6mm的颗粒。
6.权利要求1所述的车前子提取物在制备治疗糖尿病药物制剂中的应用。
7.权利要求1所述的车前子提取物与药学上可接受的药物载体组成的组合物在制备治疗糖尿病药物制剂中的应用。
8.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于所述的糖尿病为I型和/或II型糖尿病。
全文摘要
本发明公开了一种车前子提取物及其应用。所述的车前子提取物，是由车前子经过2～6倍体积的体积分数为60～90％的乙醇水溶液回流提取2～6次得到，含有麦角甾苷、异麦角甾苷、京尼平苷酸、阿魏酸、车前素A和车前素B。本发明提供的车前子提取物在体内试验中可促进葡萄糖的消耗，且对细胞的毒性低，同时在体外试验中可明显提高血清胰岛素水平，降低空腹血糖水平，显示出良好的治疗糖尿病的药用价值，可单一或与药学上可接受的药物载体组成的组合物应用于制备治疗糖尿病药物制剂中。
文档编号A61K36/68GK102228517SQ20111017251
公开日2011年11月2日 申请日期2011年6月23日 优先权日2011年6月23日
发明者季光, 廖立平, 杨莉, 王峥涛, 祁萌, 耿放 申请人:上海中医药大学