专利名称：一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物的检测方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物的检测方法，特别是涉及一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的胶囊剂，如痫愈胶囊的检测方法。
背景技术：
痫愈胶囊由黄芪、党参、丹参、柴胡、酸枣仁、远志、天麻、钩藤、石菖蒲、胆南星、当归、僵蚕、六神曲、郁金、甘草、白附子(制)十六味中药材组成，具有协同作用，符合中药组方原则，能够达到标本兼治的目的。该制剂吸收了经典古方之精华，具有豁痰开窍，安神定惊，熄风解痉之功效，用于治疗风痰闭阻所致的癫痫抽搐、小儿^(风、面肌痉挛。在全国各地医院临床应用过程中，证明其具有显著的临床疗效，深得广大医务工作者和患者的信任。在现有的痫愈胶囊的检测方法中，仅对黄芪药材中黄芪甲苷进行了薄层色谱(TLC)鉴别，未制定丹参的薄层色谱(TLC)鉴别方法。为进一步控制该产品的质量，需要对该产品的质量控制方法进行完善，从而更进一步保证该产品的质量和疗效。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物的检测方法，该检测方法能够有效控制药物的质量，使药物质量稳定可控，从而更好地满足医疗需要。本发明的目的是采用如下技术方案来实现的。一种用于治疗癫 痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参，其中，所述薄层色谱的条件包括采用硅胶G薄层板和体积比为2 6 0.5 2，优选为4 I的A、B混合溶液为展开剂，其中所述A溶液选自60-90°C沸程的石油醚、30-60°C沸程石油醚、乙醚、环己烷、甲苯和苯，优选为60_90°C沸程的石油醚；所述B溶液选自乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、氯仿和甲醇，优选为乙酸乙酯。上述检测方法中，所述展开剂为体积比为2 6 0.5 2，优选为4 I的60-90°C沸程的石油醚-乙酸乙酯。上述检测方法中，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的丹参包括如下步骤(I)取所述药物，加乙醚振摇，放置，滤过，残渣用乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液；(2)取丹参对照药材，以与供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；(3)取供试品溶液、对照药材溶液点于同一薄层色谱板上，以体积比为2
6 O. 5 2，优选为4 I的60-90°C沸程的石油醚-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，检视。优选地，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的丹参包括如下步骤
(I)取所述药物3g，加乙醚15ml，振摇，放置I小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；(2)取丹参对照药材lg，以与供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液；(3)吸取上述溶液各5 μ 1，点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4 I的60_90°C沸程的石油醚-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，检视。上述检测方法中，所述药物可以是痫愈胶囊，该胶囊由黄芪、党参、丹参、柴胡、酸枣仁、远志、天麻、钩藤、石菖蒲、胆南星、当归、僵蚕、六神曲、郁金、甘草、制白附子十六味中药材组成，其配比如下黄芪100-200重量份、党参100-200重量份、丹参100-200重量份、柴胡30-120重量份、酸枣仁70-150重量份、远志30-120重量份、天麻70-150重量份、钩藤70-150重量份、石菖蒲70-150重量份、胆南星30-120重量份、当归100-200重量份、僵蚕50-200重量份、六神曲30-120重量份、郁金30-120重量份、甘草30-120重量份、制白附子10-60重量份。优选地，所述药物由以下十六味药材制备而成黄芪140重量份、党参140重量份、丹参140重量份、柴胡70重量份、酸率仁105重量份、远志70重量份、天麻105重量份、钩藤105重量份、石菖蒲105重量份、胆南星70重量份、当归140重量份、僵蚕105重量份、六神曲70重量份、郁金70重量份、甘草70重量份、制白附子35重量份。在一个具体实 施方案中，所述药物的一个处方量(即制1000粒)配比如下黄芪140g、党参140g、丹参140g、柴胡70g、酸率仁105g、远志70g、天麻105g、钩藤105g、石菖蒲105g、胆南星70g、当归140g、僵蚕105g、六神曲70g、郁金70g、甘草70g、制白附子35g。上述痫愈胶囊的制备方法如下以上十六味，僵蚕、六神曲粉碎成细粉，过筛，备用；其余黄芪等十四味加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1. 5小时，第三次I小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.36(60°C )的稠膏，加入上述细粉，混合均匀，真空干燥，粉碎成细粉，用80%乙醇适量制粒，在70°C干燥，装入胶囊，即得。在一个具体实施方案中，本发明提供一种治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛药物，例如上述痫愈胶囊的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所述药物中的丹参，其中，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的丹参包括如下步骤取痫愈胶囊(该胶囊可以购自西安千禾药业有限责任公司)内容物3g，加乙醚15ml，振摇，放置I小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参对照药材lg，同法制成对照药材溶液；再取按上述的痫愈胶囊处方比例和工艺制备的不含丹参的阴性对照样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(参见《中国药典》2010版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μ1，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90°C)-醋酸乙酯(4 I)为展开剂，展开，取出，晾干，检视。上述检测方法中，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点；上述鉴定方法阴性无干扰，样品重现性良好，可以作为鉴别痫愈胶囊中丹参的依据。本发明确定了丹参薄层鉴别的检测方法，且经过方法学考察证明本方法灵敏度高，重复性好，且阴性对照无干扰，整个试验过程可操作性强，可以作为控制本品内在质量的指标之一。本发明通过对治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物痫愈胶囊中的丹参进行检测，能够有效控制痫愈胶囊的质量，使痫愈胶囊质量稳定可控，最终提高了产品的疗效及生物利用度，从而更好地满足了医疗的需要。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中图1是痫愈胶囊中丹参的薄层色谱鉴定图，其中，I表示丹参阴性对照样品；2_5表示四批供试品；6表示丹参对照药材；图2是痫愈胶囊中采用石油醚(60_90°C )-醋酸乙酯(9 O. 5)为展开剂的丹参的薄层色谱鉴定图，其中，I表示丹参对照药材；2_4表示四批供试品；5表示丹参阴性对照样品。
具体实施例方式下面通过实施例详细说明本发明，应当理解，下述实施例仅用于说明本发明，而不以任何方式限制本发明的范围。实施例1痫愈胶囊的处方及制备方法1、处方痫愈胶囊由黄芪140g、党参140g、丹参140g、柴胡70g、酸枣仁105g、远志70g、天麻105g、钩藤105g、石菖蒲105g、胆南星70g、当归140g、僵蚕105g、六神曲70g、郁金70g、甘草70g、制白附子35g配伍而成。
2、制备方法以上十六味，僵蚕、六神曲粉碎成细粉，过筛，备用；其余黄芪等十四味加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1. 5小时，第三次I小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.36(60°C)的稠膏，加入上述细粉，混合均匀，真空干燥，粉碎成细粉，用80%乙醇适量制粒，在70°C干燥，装入胶囊，即得。实施例2痫愈胶囊中丹参的薄层色谱鉴定1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取批次号为20110202，20110203，20110304和20110305的痫愈胶囊(购自西安千
禾药业有限责任公司，其组成、配比和制备方法如实施例1所示)内容物3g，加乙醚15ml，振摇，放置I小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参对照药材lg，同法制成对照药材溶液；再取按实施例1痫愈胶囊处方比例和工艺制备的不含丹参的阴性对照样品，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(参见《中国药典》2010版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μ1，点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4 I的石油醚(60-90°C)-醋酸乙酯为展开齐U，展开，取出，晾干，检视，结果见图1。结果显示，四批供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点。上述鉴定方法阴性无干扰，样品重现性良好，因此，可以作为鉴别痫愈胶囊中丹参的依据。实施例3痫愈胶囊中丹参的薄层色谱鉴定1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取痫愈胶囊(购自西安千禾药业有限责任公司)内容物3g，加乙醚15ml，振摇，放置I小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(参见《中国药典》2010版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μ1，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90°C)-醋酸乙酯(I I)为展开剂，展开，取出，晾干，检视。结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显示相同颜色的暗红色斑点。实施例4痫愈胶囊中丹参的薄层色谱鉴定1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取痫愈胶囊(购自西安千禾药业有限责任公司)内容物3g，加甲醇50ml，加乙醚15ml，振摇，放置I小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(参见《中国药典》2010版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μ1，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90°C)-醋酸乙酯(8 I)为展开剂，展开，取出，晾干，检视。结果显示，供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显示相同颜色的暗红色斑点。实施例5痫愈胶囊中丹参的薄层色谱鉴定(对照试验)1、试验条件双槽展开缸(上海信谊)；硅胶G(薄层色谱用，青岛海洋化工厂)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；薄层板自制，厚度O. 3mm。其余试剂均为分析纯。2、试验步骤取痫愈胶囊(购自西安千禾药业有限责任公司)内容物3g，加甲醇50ml，加乙醚15ml，振摇，放置I小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参对照药材lg，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(参见《中国药典》2010版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μ1，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90°C)-醋酸乙酯(9 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，检视，结果见图2。
结果显示，供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，未显示相同颜色的暗红色斑点。因此，不能作为展开剂使用。
权利要求
1.一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所述药物中的丹参，其中，所述薄层色谱的条件包括采用硅胶G薄层板和体积比为2 6 O. 5 2，优选为4 :1的A、B混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自60-90°C沸程的石油醚、30-60°C沸程石油醚、乙醚、环己烷、甲苯和苯，优选为60_90°C沸程的石油醚；所述B溶液选自乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、氯仿和甲醇，优选为乙酸乙酯。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述展开剂为体积比为2 6 O. 5 2，优选为4 I的60-90°C沸程的石油醚-乙酸乙酯。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的丹参包括如下步骤 (1)取所述药物，加乙醚振摇，放置，滤过，残渣用乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液； (2)取丹参对照药材，以与供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液； (3)取供试品溶液和对照品溶液点于同一薄层色谱板上，以体积比为2 6:0.5 2，优选为4 I的60-90°C沸程的石油醚-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，检视。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法鉴定所述药物中的丹参包括如下步骤 (1)取所述药物3g，加乙醚15ml，振摇，放置I小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液； (2)取丹参对照药材lg，以与供试品溶液相同的方法制成对照药材溶液； (3)吸取上述溶液各5μ 1，点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4 :1的60-90°C沸程的石油醚-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，检视。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物由以下十六味药材制备而成 黄芪100-200重量份、党参100-200重量份、丹参100-200重量份、柴胡30-120重量份、酸枣仁70-150重量份、远志30-120重量份、天麻70-150重量份、钩藤70-150重量份、石菖蒲70-150重量份、胆南星30-120重量份、当归100-200重量份、僵蚕50-200重量份、六神曲30-120重量份、郁金30-120重量份、甘草30-120重量份、制白附子10-60重量份； 优选地，所述药物由以下十六味药材制备而成黄芪140重量份、党参140重量份、丹参140重量份、柴胡70重量份、酸率仁105重量份、远志70重量份、天麻105重量份、钩藤105重量份、石菖蒲105重量份、胆南星70重量份、当归140重量份、僵蚕105重量份、六神曲70重量份、郁金70重量份、甘草70重量份、制白附子35重量份。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物的制备方法如下 以上十六味，僵蚕、六神曲粉碎成细粉，过筛，备用；其余十四味加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1. 5小时，第三次I小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至60°C下相对密度为1. 36的稠膏，加入上述细粉，混合均匀，真空干燥，粉碎成细粉，用80%乙醇适量制粒，在70°C干燥，装入胶囊，即得。
全文摘要
本发明提供一种治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法鉴定所述药物中的丹参，其中，所述薄层色谱的条件包括采用体积比为2～6∶0.5～2，优选为4∶1的A、B混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自60-90℃沸程的石油醚、30-60℃沸程石油醚、乙醚、环己烷、甲苯和苯，优选为60-90℃沸程的石油醚；所述B溶液选自乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、氯仿和甲醇，优选为乙酸乙酯。本发明的检测方法灵敏度高，重复性好，且阴性对照无干扰，整个试验过程可操作性强，可以作为控制本品内在质量的指标之一。
文档编号A61P25/08GK103033587SQ201110303570
公开日2013年4月10日 申请日期2011年9月30日 优先权日2011年9月30日
发明者胡小虎, 张琼, 吕慧锋 申请人:西安千禾药业有限责任公司