专利名称：治疗肝损伤的参味护肝片及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物，特别是一种治疗肝损伤的药物组合物及其制备方法。
背景技术：
目前世界各地各种类型的病毒性肝炎、化学性肝损伤和肝硬化的发病率较高，尤其在发展中国家发病率更高。我国是病毒性肝炎的高发区，药物、毒物引起的肝损伤在我国很普遍，而且日益增多。尤其是病毒性肝炎，不但严重影响病人的健康，而且构成对其他健康者的威胁。因此，肝病的防治问题已成为全世界医药界共同关注的重要问题。大多数肝病患者主要是依靠药物治疗，某些西药的毒性物质需要肝脏代谢消除， 这无疑是在治疗肝病的同时又伤害肝脏，成为化学性肝损伤的另一诱因。因此，采用中药治疗，可以从预防入手，兼顾保健功能，可以满足广大患者身体健康的保健需要。因此，开发出一种在临床上治疗病毒性肝炎、化学性肝损伤和肝硬化等肝损伤性疾病的药物，对于减少肝病的危害具有现实意义。
发明内容
本发明人从中医治疗肝病的基本原则出发，通过大量的试验研究，由人参、白芍、 树舌、五味子、当归、甘草等六味中药组方，经过合理的加工、提取，制成用于治疗病毒性肝炎、化学性肝损伤、肝硬化的药物组合物。该药物组合物的药理作用较好、无毒副作用。同时本发明还提供了临床适用的剂型的制备方法。本发明的治疗方案是基于中医药理论，针对肝病发病机理的认识而确定的治疗原则，同时参考了现代药理学研究成果，筛选出具有滋补肝肾、养血柔肝、益气养阴、活血止痛等功能的天然中药，并按照中医治则及组方原则，而开发的新型药物组合物。在药理研究中治疗效果明显。本发明是以以下的方法实现的
本发明治疗肝损伤的药物组合物是由下述原料制成的
人参 80-150g,白芍 120-240g,树舌 160_300g，五味子 80_150g，当归 80_150g，甘草 60-90go本发明治疗肝损伤的药物组合物，各原料的最佳配比为
人参120g,白芍180g，树舌240g，五味子120g，当归120g，甘草80g。本发明临床应用的药物剂型的制备方法，包括以下步骤
⑴将人参加水煎煮两次，每次1 2小时，煎液滤过，滤液合并，通过DlOl大孔吸附树脂，水洗脱至无色，再用60%乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱液，减压回收乙醇后得到人参总皂苷提取物。⑵将树舌加水煎煮3次，每次2 3小时，煎液滤过，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1. 05 1. 08之间，加入乙醇使含醇量达到75%，静置12小时，离心除去乙醇溶液，滤渣加入75%的乙醇反复洗涤，即获得树舌多糖提取物。(3)将白芍、五味子两味药材混合，粉碎，加70%乙醇回流提取3次，每次1 2小时，合并提取液，静置48小时，吸取上清液，减压回收乙醇，即得白芍五味子提取物。⑷将当归、甘草两味药材加水煎煮两次，每次1 2小时，煎液滤过，滤液合并，减压浓缩，即得当归甘草提取物。(5)将制备的人参皂苷提取物、树舌多糖提取物、白芍五味子提取物和当归甘草提取物混合，按照药剂学的制剂方法，加入辅料适量，制成不同的剂型。本发明其特征在于临床上用于肝损伤的治疗和预防。利用本发明生产的药物的药理药效参味护肝片对肝损伤的治疗作用一、材料与方法
1.实验动物
Wistar大鼠，体重120_150g，雌雄各半。购于黑龙江中医药大学动物实验中心。清洁级健康昆明种小鼠，体重18_22g，雌雄各半。购于黑龙江中医药大学动物实验中心。2.药品与试剂
参味护肝片黑龙江中医药大学中医药研究院自制肝加欣吉林通化方大药业有限公司丙氨酸氨基转移酶试剂盒上海长征公司草氨酸氨基转移酶试剂盒上海长征公司四氯化碳上海试剂三厂 D-半乳糖sigma公司环磷酰胺江苏恒瑞医药股份有限公司 Hank' s洗液长沙欧迈生物科技有限公司 1640培养液长沙欧迈生物科技有限公司 ConA :sigma
3.仪器设备
全自动生化分析仪，低速冷冻离心机，光学显微镜，油镜，自动血球分析仪，酶标仪，超净工作台，恒温培养箱
4.统计方法
所有数据以 ±S表示，组间比较用t检验。二、参味护肝片对CCL4致大鼠慢性肝损伤的影响 1.分组及给药
将60只大鼠随机分为六组正常组、模型组、肝加欣组(390mg/kg)、参味护肝片高剂量组(3%ig/kg以下简称高剂量组)、参味护肝片中剂量组(17mg/kg以下简称中剂量组)和参味护肝片低剂量组(8. 5mg/kg以下简称低剂量组)。各给药组每日灌胃给药一次，正常组和模型组给予同体积蒸馏水，连续给药三个月。同时，除正常组外，其余各组每周二次30%CCL4 (2ml/kg)橄榄油溶液灌胃，连续三个月。2.观察指标
三个月后禁食M小时，动物摘眼球取血，取离心血清测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨
4酶(AST)，结果见表1。
3.实验结果
表1参味护肝片对CCL4致大鼠慢性肝损伤ALT、AST的影响
组别齐 D 量(mg/kg)例数(只)ALT (U/L)AST (U/L)空白组1054. 8 ±12. 72**152. 4±37. 91**模型组10158. 1±22. 44304. 3±72. 97高剂量组341086. 3 ±8. 98**229. 4±43. 41*中剂量组1710116. 2±5. 86*256. 5±46. 32低剂量组8. 510127. 8±8. 95*261. 9±40. 61肝加欣组3901090. 5 ±9. 63**225. 4±63. 62*
注与正常组比*Ρ<0· 05，**P<0. 01
由表1结果可见，对血清ALT的影响，模型组与空白组比较差异极显著(P<0. 01)，提示造模成功；与模型组比较高剂量组和肝加欣组能显著降低ALT的含量(P<0. 01)；与模型组比较中剂量组和低剂量组差异也有意义(P<0. 05)。对血清AST的影响，模型组与空白组比较差异极显著(P<0. 01)，提示造模成功；与模型组比较高剂量组和肝加欣组能显著降低 AST的含量(P<0. 05);与模型组比较中剂量组和低剂量组对血清AST也处于较低水平，但差异无统计学意义。三、参味护肝片对D-氨基半乳糖所致小鼠急性肝损伤的影响 1.分组及给药
将60只小鼠随机分为六组正常组、模型组、肝加欣组(545mg/kg)、高剂量组(48mg/ kg)、中剂量组(2%ig/kg)和低剂量组(iang/kg)。各给药组每日灌胃给药一次，正常组和模型组给予同体积蒸馏水，连续给药7天。2.观察指标
第6天晚间11点禁食，不禁水，于第7天早6点灌胃给药，2小时后造模。造模方法 除空白组外，其余各组腹腔注射0. 1%(0. 3ml/10g)D-氨基半乳糖，禁食10小时之后摘取眼球取血，取离心血清测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)，结果见表2。3.实验结果
表2参味护肝片对D-氨基半乳糖致小鼠急性肝损伤的影响
组别齐 D 量(mg/kg)例数(只)ALT (U/L)AST (U/L)空白组1029. 80±11. 71**100. 40±18. 91**模型组1061. 17±12. 41198. 39±12. 97高剂量组481027. 28 ±6. 98**109. 44±13. 41**中剂量组241034. 26 ±5. 98**132. 54±16. 32**低剂量组121038. 85 ±8. 95**131. 49±10. 61**肝加欣组5451032. 44 ±4. 63**105. 43±13. 62**
注与正常组比#P<0. 01
由表2结果可见，对血清ALT的影响，模型组与空白组比较差异极显著(P<0. 01 )，提示造模成功；与模型组比较各给药组均能显著降低ALT的含量(P<0. 01)，但给药组之间没有统计学意义。对血清AST的影响，模型组与空白组比较差异极显著(P<0. 01)，提示造模成功；与模型组比较各给药组均能显著降低AST的含量(P<0. 01)，但给药组之间没有统计学
眉、ο 四、参味护肝片对小鼠免疫功能的影响 (一)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响1.分组及给药
将60只小鼠随机分为六组正常组、模型组、肝加欣组(545mg/kg)、高剂量组(48mg/ kg)、中剂量组(2%ig/kg)和低剂量组(iang/kg)。各给药组每日灌胃给药一次，正常组和模型组给予同体积蒸馏水，连续给药7天。2.观察指标
给药第3天每只小鼠腹腔注射5%可溶性淀粉1ml，第7天给药后每只小鼠腹腔注射1% 鸡红细胞悬液0.細1，广1. 后断锥处死小鼠。固定在桌面上，腹部消毒后腹腔注射生理盐水1ml，按摩腹腔，沿腹部中央将皮肤剪一小口，上下撕开，暴露腹膜，轻提腹膜剪一小口，吸取约0. 2ml腹腔液滴于载玻片上水平涂片，将玻片放在湿盒内，置37°C温箱孵育30min，取出，用生理盐水淋洗，自然晾干后，用Giemsa-wright染液染5min，再用生理盐水淋洗，晾干后，油镜下观察，计数200个巨噬细胞中吞噬的鸡红细胞总数。结果见表3。吞噬指数=(被吞噬的鸡红细胞总数/200个吞噬细胞)/2
吞噬百分率=(吞噬鸡红细胞的巨噬细胞总数/200个吞噬细胞)*100% 3.实验结果
表3参味护肝片对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
权利要求
1.一种治疗肝损伤的药物组合物，其特征在于，药物组合物是由下述原料制成的药剂 人参 80-150g,白芍 120-240g,树舌 160_300g，五味子 80_150g，当归 80_150g，甘草 60_90g。
2.根据权利要求1所述的治疗肝损伤的药物组合物，其特征在于，各原料的最佳配比为人参120g,白芍180g，树舌240g，五味子120g，当归120g，甘草80g。
3.根据权利要求1、2所述的治疗肝损伤的药物组合物的用途，其特征在于该药物组合物在临床上用于治疗病毒性肝炎、化学性肝损伤和肝硬化等肝损伤性疾病。
4.根据权利要求1、2所述的治疗肝损伤的药物组合物的制备方法，其特征在于，它具体由以下步骤组成⑴将人参加水煎煮两次，每次1 2小时，煎液滤过，滤液合并，通过DlOl大孔吸附树脂，水洗脱至无色，再用60%乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱液，减压回收乙醇后得到人参总皂苷提取物。
5.⑵将树舌加水煎煮3次，每次2 3小时，煎液滤过，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1. 05 1. 08之间，加入乙醇使含醇量达到75%，静置12小时，离心除去乙醇溶液，滤渣加入75%的乙醇反复洗涤，即获得树舌多糖提取物。
6.⑶将白芍、五味子两味药材混合，粉碎，加70%乙醇回流提取3次，每次1 2小时， 合并提取液，静置48小时，吸取上清液，减压回收乙醇，即得白芍五味子提取物。
7.⑷将当归、甘草两味药材加水煎煮两次，每次1 2小时，煎液滤过，滤液合并，减压浓缩，即得当归甘草提取物。
8.(5)将制备的人参皂苷提取物、树舌多糖提取物、白芍五味子提取物和当归甘草提取物混合，按照药剂学的制剂方法，加入辅料适量，制成不同的剂型。
全文摘要
本发明涉及一种治疗肝损伤的药物组合物及制备方法和制药用途。本发明的药物组合物在临床上用于治疗病毒性肝炎、化学性肝损伤和肝硬化等肝损伤性疾病。该药物组合物是由人参、白芍、树舌、五味子、当归、甘草等中药材，经过合理的提取、精制后，与药用辅料组成的各类口服制剂。本发明的配方合理、安全有效、工艺先进、使用方便，适用于长期服用。经药理学试验证明，该制剂对CCL4致大鼠慢性肝损伤和D-氨基半乳糖致小鼠急性肝损具有保护作用，并有降酶的作用；能够促进大鼠胆汁的分泌；明显提高小鼠细胞免疫及体液免疫功能，不仅可以作为肝损伤患者较好的辅助治疗，也可以作为正常人群的保健用品而被长期服用。
文档编号A61K36/71GK102512511SQ20121000400
公开日2012年6月27日 申请日期2012年1月9日 优先权日2012年1月9日
发明者刘玉婕, 姜海, 舒尊鹏, 董培良, 韩华 申请人:姜海, 董培良, 韩华