专利名称：一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸及其制备方法。
背景技术：
曲克芦丁系芦丁经羟乙基化制成的半合成黄酮化合物，具有抑制红细胞和血小板凝聚作用，防止血栓形成，同时能增加血中氧的含量，改善微循环，促进新血管生成以增进侧支循环。它对内皮细胞有保护作用，能对抗5-羟色胺和缓激肽引起的血管损伤，增加毛细血管的抵抗力，降低毛细血管的通透性，有防止因血管通透性升高而引起的水肿的作用， 并有抗放射性损伤、抗炎症、抗过敏、抗溃疡等作用；能抑制血小板的凝集，有防止血栓形成的作用.同时能对抗5-羟色胺、缓激肽引起的血管损伤，增加毛细血管抵抗力，降低毛细血管通透性，可防止血管通透性升高引起的水肿.对急性缺血性脑损伤有显著的保护作用.曲克芦丁适用于脑血栓形成和脑栓塞所致的偏瘫、失语以及心肌梗塞前综合征、 动脉硬化、中心性视网膜炎、血栓性静脉炎、静脉曲张、血管通透性升高引起的水肿等.曲克芦丁适用于脑血栓形成所致的偏瘫、失语、动脉硬化、梗死前综合征、血栓性静脉炎、静脉曲张、慢性静脉功能不全、中心性视网膜炎、糖尿病性视网膜炎及血管通透性升高引起的水肿等。本品经临床应用表明，应用范围广，疗效好，尤其对治疗闭塞性脑血管病较好。曲克芦丁口服吸收良好，口服本品300mg后，达峰时间为2 9h，与血浆蛋白结合率小于30%。主要由胆汁排出，尿中排泄量仅占3% 6%。目前临床应用的剂型主要为片剂和注射剂.由于曲克芦丁有胃肠道障碍及过敏反应，个别患者静脉滴注本品可引起心血管系统及肝脏毒性反应、急性脑水肿和心律失常等，严重者可产生暂时性精神失常.脑水解类药物是健康动物大脑经酶解纯化等方法得到的含有氨基酸和小分子肽等的混合物，能透过血脑屏障，改善脑代谢，可用于治疗各种原因所致的中枢神经系统疾病。脑蛋白水解物是上述药物中的一种，是以健康猪的新鲜大脑经酶解纯化得到的，含有多种氨基酸及磷脂类，能通过血脑屏障，提高耗氧量，增加脑活性，参与体内氧化作用；可改善肾上腺皮质机能，促进全身代谢；参与α -酮酸的氧化脱羧和葡萄糖代谢，提高脑氧及葡萄糖利用度，供给脑细胞修复再生所需的作为神经递质本身或神经递质和生物胺类的前体的各种氨基酸，调节脑神经活动，促进中枢递质氨基丁酸、多巴胺和5-羟色胺等生物合成；与游离氨结合成无毒的谷氨酰胺，降低血氨；同时改善肾上腺皮质机能，促进全身代谢，是一种脑功能不全辅助治疗药物。脑蛋白水解物是以猪脑为原料经过酶解等步骤得到有效部位，因此，在研究新的制剂过程中，对其物质基础也应该重新研究，中国专利94104516. I公开了脑蛋白水解物制备方法，采用制匀浆、脱脂、风干、酶解、超滤、离子交换等步骤，该方法中风干步骤会造成多肽等步骤的流失；中国专利申请号为01130523. 1,200510064567. 6,200710055421. 4等专利公开了脑蛋白水解物的新的制备方法，上述方法中都存在使得氨基酸大量流失的步骤， 因此，上述方法值得商榷；中国专利申请号为200610065169. O在制备过程脑蛋白水解物中，加入外源氨基酸，同样目前临床中使用的脑蛋白水解物制剂也是通过添加外源游离氨基酸制备的，说明现有技术的制备方法需要进一步改进。
发明内容
基于上述原因，本申请人通过科学的试验研究，对脑蛋白水解物进行研究，改进了脑蛋白水解物制备方法，并对曲克芦丁和脑蛋白水解物制剂进行了研究，将其制备成滴丸制剂，能较好的克服目前临床应用的制剂的缺陷，并对滴丸基质进行研究，发现水溶性基质制备成滴丸，具有圆整率高、溶散时限好、丸重差异低等优点。申请人:对脑蛋白水解物制备方法进行研究，得到一种新的方法，该方法采用阳离子交换方法及超滤方法等步骤，能较好的保留脑蛋白水解物中的游离氨基酸，而且所得到的脑蛋白水解物中游离氨基酸种类和含量与国家标准要求的一致，无需添加外源氨基酸.本发明制备方法得到的脑蛋白水解物有效成份为小分子多肽和16种天然游离氨基酸，全部为天然水解物，含有小分子多肽与16种游离氨基酸。不添加氨基酸，多肽分子量为5000 10000道尔顿，游离氨基酸为L型氨基酸，pH值为6. O 8. 0，符合国标要求，也更加适合人体上消化道的吸收。本发明通过下述技术方案实现的.一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸，其特征在于滴丸中含曲克芦丁和脑蛋白水解物的制剂活性成分与基质的重量比为I : 3-5，制剂活性成分中曲克芦丁与脑蛋白水解物的重量比为1-5 I ；其中基质为聚乙二醇1000、聚乙二醇1500、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、硬脂酸聚烃氧(40)酯、硬脂酸钠和泊洛沙姆中的一种或几种配合的混合基质；其中脑蛋白水解物是通过以下方法制备的将健康猪脑组织加入纯水，捣碎，匀浆，在65-90 0C保温15-45分钟，冷却至 30-50°C，加入草酸溶液调pH值为2. 0-4.0 ;搅拌下加入猪脑重量I. 5 % -3. O %的胃蛋白酶，搅拌，30-50°C保温2-6小时，收集上清液，沉淀离心，合并上清液；上清液减压浓缩到猪脑重量的1/2-1/5，用碱溶液调pH值5. 0-8. 0,100°C _120°C灭活3_6小时，加水至猪脑重量，用氢氧化钙溶液调PH值6. 5-7. 5，过滤，活性炭吸附，脱碳，得清液；加入猪脑重量1-3% 的胰蛋白酶，35-45°C保温1-4小时，煮沸15-30分钟，冷却，静置，过滤，得水解液；水解液上离子交换柱，用纯水洗脱，洗脱液弃去，再用浓度为5% -15%的氨水洗脱，收集洗脱液， 浓缩，用碱溶液调PH值6. 9-7. 5，减压浓缩，去除氨至尽，浓缩液静置，过滤，去除沉淀，得原液；原液在-20°C以下冻结保存，解冻，过滤，去除沉淀，得清液；稀释清液至每毫升含氮 5. 4-6. 8mg，含游离氨基酸25-50mg，并加入稀释液重量的O. 03% -O. I %亚硫酸氢钠，得到调配液；调配液用6000-10000分子量超滤膜超滤，收集滤液，O. 2 μ m膜除菌过滤，冷冻干燥，得到脑蛋白水解物。其中脑蛋白水解物制备中酸溶液为盐酸、磷酸、甲酸、乙酸、草酸溶液中的一种。其中脑蛋白水解物制备中碱溶液为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙溶液中的一种。
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其中脑蛋白水解物制备中离子交换柱是强酸型阳离子交换柱。一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸的制备方法为按配比将曲克芦丁和脑蛋白水解物充分混合均匀，得到制剂活性成分；调整滴丸机的温度控制系统，使滴丸机的滴头温度加热并保持在50°C -70°C，冷凝剂的温度冷却并保持在0°c至10°C ;待滴丸机滴头和冷凝柱内冷凝剂的温度分别达到所述温度状态时，将制剂活性成分加入到熔融的基质中，搅拌，保温，将熔融液置于滴丸机的滴头罐内，通过滴头滴入冷凝剂中收缩成形即得。一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸制备方法中的冷凝剂是甲基硅油、液体石蜡、植物油中的一种或几种。一、制剂组方筛选试验将健康猪脑组织加入纯水，捣碎，匀衆，在75°C保温30分钟，冷却至40°C，加入草酸溶液调PH值为3. O ;搅拌下加入猪脑重量2%的胃蛋白酶，搅拌，40°C保温4小时，收集上清液，沉淀离心，合并上清液；上清液减压浓缩到猪脑重量的1/3，用氢氧化钠溶液调pH值 5. 0-8. 0,110°C灭活4. 5小时，加水至猪脑重量，用氢氧化钙溶液调pH值7. 0，过滤，活性炭吸附，脱碳，得清液；加入猪脑重量2%的胰蛋白酶，40°C保温3小时，煮沸25分钟，冷却，静置，过滤，得水解液；水解液上强酸型阳离子交换柱，用纯水洗脱，洗脱液弃去，再用浓度为 10 %的氨水洗脱，收集洗脱液，浓缩，用氢氧化钠溶液调pH值7. 0，减压浓缩，去除氨至尽， 浓缩液静置，过滤，去除沉淀，得原液；原液在-20°C以下冻结保存，解冻，过滤，去除沉淀， 得清液；稀释清液至每毫升含氮6. Omg,含游离氨基酸40mg，并加入稀释液重量的O. 06 %亚硫酸氢钠，得到调配液；调配液用8000-10000分子量超滤膜超滤，收集滤液，O. 2 μ m膜除菌过滤，冷冻干燥，得到脑蛋白水解物。按重量比=2 I的比例将曲克芦丁和脑蛋白水解物充分混合均匀，得到制剂活性成分；将制剂活性成分分别与熔融的PEG1500、PEG4000、PEG6000、硬脂酸聚烃氧(40) 酯、硬脂酸钠、泊洛沙姆、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、虫蜡、单硬脂酸甘油酯、倍他环糊精、聚乙二醇4000 :聚乙二醇6000 = 3 I、聚乙二醇4000 :聚乙二醇6000 = 2 I、聚乙二醇4000 :聚乙二醇6000 = I I、聚乙二醇6000 :硬脂酸钠=I I混合，65°C下搅拌，保温；制剂活性成分与基质的重量比为I : 4;使滴丸机的滴头温度加热并保持65°C， 冷凝剂的温度冷却并保持在2-5°C ;待滴丸机滴头和冷凝柱内冷凝剂的温度分别达到所述温度状态时，将含熔融液置于滴丸机的滴头罐内，通过滴头滴入冷凝剂中收缩成形即得。试验结果见表I。表I试验结果
权利要求
1.一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸，其特征在于滴丸中含曲克芦丁和脑蛋白水解物的制剂活性成分与基质的重量比为I : 3-5，制剂活性成分中曲克芦丁与脑蛋白水解物的重量比为1-5:1;其中基质为聚乙二醇1000、聚乙二醇1500、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、硬脂酸聚烃氧(40)酯、硬脂酸钠和泊洛沙姆中的一种或几种配合的混合基质；其中脑蛋白水解物是通过以下方法制备的将健康猪脑组织加入适量纯水，捣碎，匀浆，在65-90°C保温15-45分钟，冷却至 30-50°C，加入草酸溶液调pH值为2. 0-4.0 ;搅拌下加入猪脑重量1.5% -3.0%的胃蛋白酶，搅拌，30-50°C保温2-6小时，收集上清液，沉淀离心，合并上清液；上清液减压浓缩到猪脑重量的1/2-1/5，用碱溶液调pH值5. 0-8. 0,100°C _120°C灭活3_6小时，加水至猪脑重量，用氢氧化钙溶液调PH值6. 5-7. 5，过滤，活性炭吸附，脱碳，得清液；加入猪脑重量1-3% 的胰蛋白酶，35-45°C保温1-4小时，煮沸15-30分钟，冷却，静置，过滤，得水解液；水解液上离子交换柱，用纯水洗脱，洗脱液弃去，再用浓度为5% -15%的氨水洗脱，收集洗脱液， 浓缩，用碱溶液调PH值6. 9-7. 5，减压浓缩，去除氨至尽，浓缩液静置，过滤，去除沉淀，得原液；原液在-20°C以下冻结保存，解冻，过滤，去除沉淀，得清液；稀释清液至每毫升含氮5.4-6. 8mg，含游离氨基酸25-50mg，并加入稀释液重量的O. 03% -O. I %亚硫酸氢钠，得到调配液；调配液用6000-10000分子量超滤膜超滤，收集滤液，O. 2 μ m膜除菌过滤，冷冻干燥，得到脑蛋白水解物。
2.根据权利要求I所述的一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸，其中制备方法中酸溶液为盐酸、磷酸、甲酸、乙酸、草酸溶液中的一种。
3.根据权利要求I所述的一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸，其中制备方法中碱溶液为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙溶液中的一种。
4.根据权利要求I所述的一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸，其中制备方法中离子交换柱是强酸型阳离子交换柱。
5.根据权利要求I所述的一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸，其中滴丸的制备方法为按配比将曲克芦丁和脑蛋白水解物充分混合均匀，得到制剂活性成分；调整滴丸机的温度控制系统，使滴丸机的滴头温度加热并保持在50°C _70°C，冷凝剂的温度冷却并保持在0°C至10°C ;待滴丸机滴头和冷凝柱内冷凝剂的温度分别达到所述温度状态时，将制剂活性成分加入到熔融的基质中，搅拌，保温，将熔融液置于滴丸机的滴头罐内，通过滴头滴入冷凝剂中收缩成形即得。
6.根据权利要求5所述的一种曲克芦丁脑蛋白水解物滴丸，其制备方法中的冷凝剂是甲基硅油、液体石蜡、植物油中的一种或几种。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，本发明公开了一种原料为曲克芦丁和脑蛋白水解物的滴丸及其制备方法，其中滴丸包括曲克芦丁、脑蛋白水解物和基质。本发明滴丸制剂处方是通过科学的筛选试验确定的。药理试验表明，本发明滴丸比市售曲克芦丁脑蛋白水解物为原料的制剂具有更好的药理作用。
文档编号A61K47/12GK102580055SQ20121006166
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月9日 优先权日2012年3月9日
发明者张睿 申请人:张睿