专利名称：宝华玉兰种子提取物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中草药提取物，特别是一种宝华玉兰种子提取物；本发明还涉及前述宝华玉兰种子提取物的用途。
背景技术：
宝华玉兰(Magnolia zenii)是木兰科木兰属的植物,为中国的特有植物。宝华玉兰的聚合果圆柱形，长6-14厘米，径2-3厘米，瞢莢果圆形，有疣点状凸起。种子宽倒卵圆形，长宽约I厘米，外种皮红色，内种皮黑色。现有技术中，宝华玉兰种子的用途未见相关报道
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种新的具有医药用途的宝华玉兰种子提取物。本发明所要解决的另一个技术问题是提供上述宝华玉兰种子提取物的用途。本发有所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种宝华玉兰种子提取物，其特点是该提取物以宝华玉兰种子为原料，采用乙醇浸泡的方式提取得到。本发明所述的宝华玉兰种子提取物技术方案中所述的乙醇的浓度优选为95%。本发明所述的宝华玉兰种子提取物技术方案中优选为浸泡2-3次，为常温浸泡，浸泡时间为为20-90天，合并浸取液，减压浓缩成浸膏。本发明所述的宝华玉兰种子提取物可以作为有效成份制备抗癌药物。以下为发明人所做的宝华玉兰种子提取物相关试验。一、实验药物EESMZC制备
取宝华玉兰种子，用95%乙醇浸泡3次，为常温浸泡，第一次浸泡90天，第二次浸泡60天，第三次浸泡60天，合并浸取液，减压浓缩成浸膏，即得宝华玉兰种子乙醇总浸膏。宝华玉兰种子乙醇总浸膏(Ethanol Extract from Seeds of Magnolia zenii Cheng)以下简称为 EESMZC。二、ICR鼠急性毒性实验证实EESMZC未呈现毒性
I、试验目的根据《化学药物急性毒性试验技术指导原则》的要求观察EESMZC —次给予ICR小鼠后的急性毒性反应和死亡情况。2、试验材料
受试样品EESMZC，由淮海工学院提供、生理盐水溶解、现配现用；
受试动物来源、种系、品系ICR小鼠，购自中国人民解放军医学科学院实验动物中心，实验动物生产许叫证SCXK(军)2007-004，合格证编号0008473 ;实验动物使用许可证:SYXK (军)2007-030。日龄35 — 56天，体重:18—22g，性另Ij :雌雄各半，动物数每组10只，共180只。3、试验方法(I)给受试样品途径与体积本实验采用灌胃给药，给药体积为0. 4ml/10g。(2)组别与剂量根据预实验结果，进行如下分组
以剂距 0.8 设置 8 个剂量，分别为 IOOOOmg / kg、8000mg / kg、6400mg / kg、5120mg / kg、4096 mg / kg、3277 mg / kg、2621 mg / kg、2097 mg / kg。(3)实验分组与观察
试验时，随机将动物分为10组，每组10只，雌雄各半，给药前动物禁食12h，按体重灌胃给药，给药后即观察小鼠的皮肤、眼、活动、摄食、饮水、排便，呼吸变化及中毒表现和死亡情况共14 d，死亡动物及时尸检，存活小鼠14d后处死并尸检；
4.统计处理应用 SPSS (Staffstical Package for the Social Science) 17. 0 通过机率单位加权回归法(Bliss法)计算LD50。试验结果各组别未出现死亡，受试样品EESMZC无毒性。·三、MTT结果表明，EESMZC对小鼠成纤维细胞NIH 3T3、人肝癌细胞H印G2、人乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外生长均可显著抑制。(一)EESMZC (种子乙醇总浸膏)抗炎抗肿瘤活性试验
实验目的测试受试样品对小鼠成纤维细胞NIH 3T3、人肝癌细胞H印G-2、人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外增殖有无抑制作用及作用强度。受试样品受试样品地下总膏由淮海工学院提供，DMSO溶解，配制成400mg/ml的母液，_20°C保存备用；
对照药物紫杉醇注射液；厂家太极集团四川太极制药有限公司；批号20090403。细胞株见表I :
表I :细胞株及培养条件
Complete grswth mediumAtmosphipr#
Oil line.............—..........."............—...........-T^mpsratiire ........................- - - —.............
__baif medhyii__Mrmi___air
小JT3 ^ DMEMihiRh glucose) CS 3 ^_ 95 _5e
入Jt.S鐘胸 HcpC.-_ KFM-1￠40_ CS ijX)_ 95%_5%
入MDA-MB-231 _ gMEMChighghcosrt CS 3”:_. 9 %_5
组别与剂量
阴性对照组；溶媒对照组(DMS0 0. 1%);阳性对照组(Taxol 10ug/ml)
受试样品组400ug/ml ；300ug/ml ；200ug/ml ； 100ug/ml ；75ug/ml ；50ug/ml ；25ug/ml ；12.5ug/ml ；6.25ug/ml
实验设备与试剂见表2
表2 :实验设备与仪器
权利要求
1.一种宝华玉兰种子提取物，其特征在于该提取物以宝华玉兰种子为原料，采用乙醇浸泡的方式提取得到。
2.根据权利要求I所述的宝华玉兰种子提取物，其特征在于所述的乙醇的浓度为95%。
3.根据权利要求I所述的宝华玉兰种子提取物，其特征在于浸泡2-3次，为常温浸泡，浸泡时间为为20-90天，合并浸取液，减压浓缩成浸膏。
4.权利要求1-3任何一项所述的宝华玉兰种子提取物为有效成份制备抗癌药物的用途。
全文摘要
本发明是一种宝华玉兰种子提取物，该提取物以宝华玉兰种子为原料，采用乙醇浸泡的方式提取得到。本发明宝华玉兰种子提取物无毒性，经MTT结果表明，EESMZC对小鼠成纤维细胞NIH3T3、人肝癌细胞HepG2、人乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外生长均可显著抑制。本发明宝华玉兰种子提取物可以作为有效成份制备抗癌药物。
文档编号A61P35/00GK102793748SQ20121014304
公开日2012年11月28日 申请日期2012年5月10日 优先权日2012年5月10日
发明者宋晓凯 申请人:淮海工学院