食蟹猴b超引导下肝脏活体穿刺的方法
【专利摘要】本发明公开了一种食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法，包括：1）镇静状态下的食蟹猴准备；2）穿刺针准备；3）B超准备；4）经B超引导，进行食蟹猴肝脏活体穿刺采样。本发明能提高单次肝脏样品采样量，同时提高单只动物的肝脏样品采集总量，以及提高实验动物的存活率。
【专利说明】食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种肝脏活体穿刺的方法，特别是涉及一种食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法。
【背景技术】
[0002]食蟹猴(M.fascicularis)因其基因与人类高度近似，随着医学研究的发展，食蟹猴已作为一种国际上公认的实验动物，被广泛的应用于医药研发试验。
[0003]肝穿刺活组织检查(肝穿刺)是一种能直接了解组织的病理变化，做出较精确诊断检查方法，也是肝脏疾病分类的重要依据，因而肝活检极其重要。肝组织活检的穿刺方法有多种，如一般肝穿刺术、套管针穿刺术、分叶针切取术、快速肝穿刺术等。经肝穿刺，可以有利于多种肝病的鉴别诊断，了解肝脏病变的程度和活动性，提供各型病毒性肝炎的病原学诊断，发现早期、静止或尚在代偿期的肝硬化肝硬化，有利于药物的选择和药物的疗效判断，鉴别黄疸的性质和原因，作为慢性肝炎病情、预后的评判指标，可以进行诊断性治疗等。
[0004]然而，在食蟹猴实验过程中，经常遇到使用穿刺方法重复采集肝脏样品。目前国内尚没有关于食蟹猴肝脏穿刺方法的相关报道。然而，国外虽然有食蟹猴肝脏穿刺术的相关报道，但该方法采用穿刺针经皮直接穿刺采集肝脏样品，该方法单次采集样品量少，多次采集易造成食蟹猴肝脏严重损伤，易伤及大血管、胆囊或者其他脏器，动物存活率较低，影响试验的准确性。
[0005]因此，需开发出一种有效提高单次肝脏样品采集量，并且能提高动物的存活率的食蟹猴肝脏活体穿刺的 方法。
【发明内容】
[0006]本发明要解决的技术问题是提供一种食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法。该方法能提高单次肝脏样品采样量，同时提高单只动物的肝脏样品采集总量，以及提高实验动物的存活率。
[0007]为解决上述技术问题，本发明的食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法，包括步骤:
[0008]I)镇静状态下的食蟹猴准备；
[0009]2)穿刺针准备；
[0010]3) B 超准备；
[0011]4)经B超引导，进行食蟹猴肝脏活体穿刺采样。
[0012]所述步骤I)中，采用氯胺酮镇静食蟹猴，其具体步骤包括:按照5-10mg/kg的剂量，肌肉注射氯胺酮，对食蟹猴进行镇静；镇静后，将食蟹猴采取仰卧位，保定，剃去锁骨以下脐孔以上胸腹部的被毛，并使用碘伏消毒，然后用75%消毒酒精脱碘。
[0013]所述步骤2)中，穿刺针为18G的肝脏穿刺针或半自动的穿刺针。当使用半自动的穿刺针时，采样过程中可以通过连续两次按穿刺针尾部的扳机按钮，快速进针，方便快捷的采集到肝脏样品。
[0014]所述步骤4)中，采样的步骤包括:在食蟹猴肋骨边缘位置涂上B超耦合剂，选择合适的角度，探明肝脏及各肝小叶的具体位置，同时注意胆囊及血管(如大血管)的具体位置；将参照B超屏幕上的超声图像，沿肋骨边缘下针，穿透皮肤，将穿刺针抵到肝脏表面，按一次穿刺针尾部的扳机按钮，针头迅速穿入肝脏约2-3厘米，再次按穿刺针的扳机按钮，穿刺针的套管顺着针头迅速打出，肝脏样品便采集到针头的凹槽中，然后拔出穿刺针，用干棉球按住皮肤上采样位置进行止血，至少3分钟。
[0015]步骤4)中，采样时，避开在同一个肝叶的同一个采样位点，单个动物能连续或者间断采集6次肝脏样品。
[0016]上述方法，还包括:5)采样后的样品保存。如将采样后的样品保存至超低温冰箱(_70°C)或者液氮中。
[0017]本发明的有益效果如下；
[0018]1、采用B超引导，可以明确肝脏的位置及下针的位置和角度，可以有效提高单次肝脏样品采集量，单次肝脏样品采集量可提高至20mg以上；
[0019]2、在B超引导下，减小动物损伤，可以增加单只动物的采样次数，单个动物肝脏活体采集的次数可提高至6次，极大的提高了个体动物的样品采集量；
[0020]3、可以有效避开大的血管、胆囊和其他脏器，防止导致动物出现大出血或者损伤到其他脏器，极大提高了动物的存活率。
【专利附图】
【附图说明】
[0021]下面结合附图与具体实`施方式对本发明作进一步详细的说明:
[0022]图1是食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的示意图。
【具体实施方式】
[0023]本发明的食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法，包括步骤:
[0024]I)镇静状态下的食蟹猴准备
[0025]选择一只食蟹猴，使用氯胺酮，按照5-10mg/kg的剂量，肌肉注射，对食蟹猴进行镇静；
[0026]待食蟹猴安静(镇静)后，从笼中取出食蟹猴，放在台面上，采取仰卧位，助手保定食蟹猴，剃去食蟹猴锁骨以下脐孔以上胸腹部的被毛，并使用碘伏消毒，然后用75%消毒酒精脱鹏。
[0027]2)穿刺针准备
[0028]选择规格为18G的肝脏穿刺针(ACECUT AUTOMATIC BIOPSY SYSTEM)，打开包装，按照说明调整至采样状态。
[0029]3) B 超准备；
[0030]开启B超仪设备，并使用合适的消毒剂(如75%乙醇)消毒B超探头。
[0031]4)经B超引导，进行食蟹猴肝脏活体穿刺采样
[0032]在食蟹猴肋骨边缘位置涂上B超耦合剂，选择合适的角度，探明肝脏及各肝小叶的具体位置，同时注意胆囊及大血管的具体位置；[0033]参照B超屏幕上的超声图像(参照B超仪屏幕上显示的肝脏位置)，让穿刺针沿肋骨边缘垂直于皮肤进针(如图1所示)，然后沿着肝叶大概15度角的方向进针，将穿刺针抵到肝脏表面，按一次穿刺针尾部的扳机按钮，针头迅速穿入肝脏约2-3厘米，再次按穿刺针尾部的扳机按钮，穿刺针的套管顺着针头迅速打出，肝脏样品便采集到针头的凹槽中。然后拔出穿刺针，用干棉球按住穿刺孔止血约10分钟，即可完成单次采样。
[0034]该步骤中，可以重复采样，避开在同一个肝叶的同一个采样位点，单只动物能连续或者间断采集6次肝脏样品。
[0035]5)采样后的样品保存
[0036]参照穿刺针说明书，调整穿刺针的套管调整按钮，暴露凹槽及其中的样品，用准备好的干净针头拨下肝脏样品至指定的容器中，然后转移至超低温冰箱(_70°C)或者液氮中保存。
[0037]本发明通过动物在镇静状态下，并经B超引导下，实施活体肝脏采集，可有效提高单次肝脏样品采集量，增加单只动物采样次数，有效提高单只动物的样品总量；同时操作时，可以有效避开大的血管、胆囊和其他器官，准确下针，可以有效提高动物的存活率。因此，本发明的方法可以广泛 应用于医药研发试验，加快研发流程。
【权利要求】
1.一种食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法，其特征在于，包括步骤: 1)镇静状态下的食蟹猴准备； 2)穿刺针准备； 3)B超准备； 4)经B超引导，进行食蟹猴肝脏活体穿刺采样。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于:所述步骤I)中，采用氯胺酮镇静食蟹猴。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于:所述采用氯胺酮镇静食蟹猴，其步骤包括: 按照5-10mg/kg的剂量，肌肉注射氯胺酮，对食蟹猴进行镇静； 镇静后，将食蟹猴采取仰卧位，保定，剃去锁骨以下脐孔以上胸腹部的被毛，并使用碘伏消毒，然后用75%消毒酒精脱碘。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于:所述步骤2)中，穿刺针为18G的肝脏穿刺针或半自动的穿刺针。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于:所述步骤4)中，采样的步骤包括: 在食蟹猴肋骨边缘位置涂上B超耦合剂，探明肝脏及各肝小叶的具体位置，同时注意胆囊及血管的具体位置； 参照B超屏幕上的超声图像，沿肋骨边缘下针，将穿刺针抵到肝脏表面，按穿刺针尾部的扳机按钮，针头穿入肝脏2-`3厘米，再次按穿刺针的扳机按钮，穿刺针的套管顺着针头打出，肝脏样品便采集到针头的凹槽中，然后拔出穿刺针，用干棉球按住皮肤上采样位置进行止血,至少3分钟。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于:所述步骤4)中，采样时，避开在同一个肝叶的同一个采样位点，单个动物能连续或者间断采集6次肝脏样品。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法，还包括:5)采样后的样品保存。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于:所述采样后的样品，保存至_70°C超低温冰箱或者液氮中。
【文档编号】A61B10/02GK103445811SQ201210181650
【公开日】2013年12月18日 申请日期:2012年6月4日 优先权日:2012年6月4日
【发明者】苗晓青, 宗亚峰, 王海洋, 闫予希, 杨仲文, 李金燕, 王琪, 孔庆学, 王未艾, 孙利平 申请人:苏州药明康德新药开发有限公司, 上海药明康德新药开发有限公司