专利名称：一种中药组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种天然药物组合物，更具体地涉及一种由黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚组成的天然药物组合物，该天然药物组合物的制备方法以及该天然药物组合物在用于制备减少癌症化疗相关性腹泻并对癌症治疗起增效作用的药物中的用途。
背景技术：
恶性肿瘤是当前危害人类生存，健康的主要疾病之一，其治疗手段包括手术、化疗、放疗、中医药治疗，而化疗治疗肿瘤的效果尤为突出。化疗药单用或联合用均会引起患者腹泻等毒副反应，肿瘤化疗后腹泻又叫化疗相关性腹泻。近年来随着化疗药物如5-氟尿嘧啶、紫杉烷类、羟基喜树碱、伊立替康等的面世及推广应用，化疗相关性腹泻的发生率逐年提高，而且若不进行积极治疗，易导致患者脱水、营养不良、血清电解质紊乱、酸碱平衡失调等，不仅对机体的康复带来极大的不利，也给周期性化疗带来一定的困难，因此对化疗相关性腹泻的有效治疗已成为肿瘤患者整体治疗的重要组成部分。化疗相关性腹泻就其临床表现来看，当属中医学“泄泻”范畴，中医药对于泄泻的研究，令人瞩目，但是目前尚无对抗癌症化疗具有减轻腹泻及增效作用的中成药。因此，研发一种高效低毒、价格低廉，易于推广的可用于减轻癌症化疗相关性腹泻并起化疗增效作用的天然中药成为临床亟待解决的问题。黄芪为豆科草本植物蒙古黄芪、膜荚黄芪的根，具有补气固表，利尿托毒，排脓功效。用于久泻脱肛。丁香为桃金娘科蒲桃属植物丁香花蕾和果实。用于治疗呃逆、吐泻，主治痢疾。近年来，黄芪和丁香抗癌作用得到证实，本发明人经过大量的各配方比例的研究和实验，最后获得了本发明的最佳药物比例组合物，并证明了其对癌症化疗相关性腹泻有极好的疗效并能同时对化疗增效，由此完成了本发明。
发明内容
本发明提供的一种天然药物组合物，由黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚以重量计按3-4: 3-8: 2-6: 3-7的比例组成。上述天然药物组合物，其中黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚的用量比例是4: 8: 6: 7。其中，黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物可通过本领域技术人员公知的常规方法提纯获得，常规方法获得的这些成分或商业购得的成分组成的本发明的天然药物均能获得相同的疗效。优选地，上述天然药物组合物中黄芪丁香水煎浓缩提取物的制备方法是:
按照配伍比例为1-4: I取黄芪、丁香，蒸馏水浸泡lh，加热煎煮，絹布过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，70°C减压干燥，即得。
上述天然药物组合物中黄芪多糖的制备方法是:黄芪粉碎，用95%乙醇提取皂苷后晾干，加入蒸馏水，逐滴加入饱和石灰水，调pH值，静置IOmin以润湿物料,微波福射Imin,间隔Imin后再福射Imin,过滤得提取液,重复上述操作2-3次，合并提取液，浓缩，用10%盐酸调节pH = 7，加入95%乙醇，洗出多糖，过滤，乙醇洗涤，干燥即得黄芪多糖。上述天然药物组合物中丁香乙醇提取物制备方法是:取丁香，干燥，粉碎，过筛，用乙醇浸泡12h，过滤，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15min，分离上清液，蒸馏去除乙醇，乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过筛，即得。上述天然药物组合物中丁香酚制备方法是:将丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5%的氢氧化钠固定，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，得淡黄色油状液体，即为丁香酚。本发明还提供了该天然药物组合物的优选的制备方法，包括:(I)黄芪丁香水煎浓缩提取物的制备按照配伍比例为1-4: I取黄芪、丁香，蒸馏水浸泡lh，加热煎煮，絹布过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，70°C减压干燥，即得。
(2)黄芪多糖的制备黄芪粉碎，用95%乙醇提取皂苷后晾干，加入蒸馏水，逐滴加入饱和石灰水，调pH值，静置IOmin以润湿物料,微波福射Imin,间隔Imin后再福射Imin,过滤得提取液,重复上述操作2-3次，合并提取液，浓缩，用10%盐酸调节pH = 7，加入95%乙醇，洗出多糖，过滤，乙醇洗涤，干燥即得黄芪多糖。(3) 丁香乙醇提取物制备取丁香，干燥，粉碎，过筛，用乙醇浸泡12h，过滤，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15min，分离上清液，蒸馏去除乙醇，乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过筛，即得。(4) 丁香酚制备将丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5%的氢氧化钠固定，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，得淡黄色油状液体，即为丁香酚。(5)按比例选取黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚，均匀混合，即得。上述天然药物组合物的制备方法，还包括:将步骤(5)制得的产品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物IOOmg或200mg规格的胶囊或片剂。本发明天然药物组合物在抗化疗相关性腹泻及抑制肿瘤方面的有益效果如下:1、本发明天然药物组合物，在伊立替康导致小鼠腹泻模型的研究表明:对于伊立替康所致小鼠的腹泻反应有明显的对抗作用。2、证明了本天然药物组合物能增强化疗药物对肿瘤的抑制作用，采用了小鼠肿瘤模型，观察该天然药物组合物与环磷酰胺联合对小鼠体内肿瘤的抑制作用。研究表明:该天然药物组合物能明显增加环磷酰胺对于肿瘤的抑制作用。3、本发明人独创地将黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚进行组合，并通过大量实验确定这些组分之间的用量配比，使该组合物发挥协同作用，经过反复实验研究，本发明的天然药物组合物各组分之间的比例在3-4: 3-8: 2-6: 3-7时产生了出乎意料的协同作用，增效明显，对副作用起到非常好的效果，尤其在各组分的用量比例是4: 8: 6: 7时尤其明显，这是本发明人付出大量创造性劳动而获得的，本领域普通技术人员仅仅通过公开的内容无法简单获得这种配比范围以及最佳用量比例。4、该天然药物组合物黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚各组分均可通过常规手段获得，其中组分如黄芪多糖还可通过商业购得，这样的组合物本身具有获得方便、成本较低的效果。这也是发明人通过大量创造性劳动方获得的兼具极佳疗效和较高工业实用性的产品。
具体实施例方式下面通过实施例和试验例进一步阐述本发明天然药物组合物的制备，以及其在抗腹泻和抗肿瘤中应用的有益效果。实施方案第一步:各种提取物的制备(I)黄芪丁香水煎浓缩提取物的制备按照配伍比例为1-4: I取黄芪、丁香，蒸馏水浸泡lh，加热煎煮，絹布过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，70°C减压干燥，即得。(2)黄芪多糖的制备黄芪粉碎，用95%乙醇提取皂苷后晾干，加入蒸馏水，逐滴加入饱和石灰水，调pH值，静置IOmin以润湿物料,微波福射Imin,间隔Imin后再福射Imin,过滤得提取液,重复上述操作2-3次，合并提取液，浓缩，用10%盐酸调节pH = 7，加入95%乙醇，洗出多糖，过滤，乙醇洗涤，干燥即得黄芪多糖。(3) 丁香乙醇提取物制备取丁香，干燥，粉碎，过筛，用乙醇浸泡12h，过滤，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15min，分离上清液，蒸馏去除乙醇，乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过筛，即得。(4) 丁香酚制备将丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5%的氢氧化钠固定(pH = 9 10)，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，得淡黄色油状液体，即为丁香酚。第二步:制剂 的制备(I)本发明天然药物组合物胶囊制剂的制备分别称取上述步骤制备的黄芪丁香水煎浓缩提取物16mg、黄芪多糖32mg、丁香乙醇提取物24mg与丁香酹28mg,同时称取淀粉395mg、硬脂酸镁5mg,均勻混合,填充成胶囊。(2)本发明天然药物组合物片剂的制备分别称取上述步骤制备的黄芪丁香水煎浓缩提取物16mg、黄芪多糖32mg、丁香乙醇提取物24mg与丁香酹28mg,同时称取淀粉295mg、乳糖IOOmg,均勻混合,用湿法制粒、干燥，整粒后与5mg硬脂酸镁混合，压成片剂。药效及药理学资料:在下述试验例子中组合物为:黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚的用量比例为4: 8: 6: 7。发明人对上述各成分用量比例在
3-4: 3-8: 2-6: 3-7之间时的多种配比组合获得的组合物进行了与上相同的实验，均发现在这种用量范围内 的天然药物组合物能获得很好的协同作用，对癌症化疗相关性腹泻能起到很好的效果并对癌症的治疗有增效作用。以下是优选的实施方式获得的药效学资料:试验例1:天然药物组合物治疗化疗相关性腹泻作用的药效学研究1、试验材料(I)黄芪，丁香，购于药材市场。(2)小鼠，雄性，实验前自由进食饮水。2、试验方法:将小鼠随机分为5组，每组5只，A组为模型组，B组为黄芪丁香水煎浓缩提取物IOg.kg—1 (相当于含生药量)，C组为黄芪多糖10g.kg—1 (相当于含生药量)，D组丁香乙醇提取物与丁香酚按6: 7比例混合10g.kg-1 (相当于含生药量)，E组为本发明的天然药物组合物10g.kg_1(相当于含生药量)，伊立替康腹腔注射给药(75mg/kg),每天I次,连续4天，复制化疗相关性腹泻模型。B、C、D、E组连续用相应提取物灌胃8天，将小鼠置于代谢笼，笼底铺白色滤纸以观察大便情况，并且观察小鼠肛周情况及鼠尾粪便污染情况，结合棉签刺激肛门排便，每日观察记录2次。腹泻程度标准评分如下:0分:大便正常或没有；1分:轻度腹泻，大便可见轻微湿软；2分:中度腹泻，大便较湿且不成型。并且有轻度肛周着色；3分，重度腹泻，水样便并伴有重度肛周着色。3、实验结果与模型组比较，黄芪丁香水煎浓缩提取物组化疗相关性腹泻的程度低于模型组，而本发明的天然药物组合物组腹泻发生率明显减轻。结果见表1.
表I本发明组合物对小鼠化疗相关性腹泻发生率及评分影响
评分标准、
Η ay剂量腹湾发生率-5-1=2-3^
A'OO55/5
——BIOaII3^4/5
CIOaO325/5DIOaOI45/5 EIOa23O3/5
注:a相当于含生药量试验例2:本发明天然药物组合物抗肿瘤作用的药效学研究1、实验材料(I)昆明种小鼠，体重20±2g，实验前自由进食饮水，24h自然光照射。(2)环磷酰胺，江苏恒瑞医药制药股份有限公司产品。2、试验方法:对小鼠S18tl肉瘤生长的抑制试验采用传代5-7天，生长良好的乳白色腹水，以适量无菌生理盐水稀释成瘤细胞悬液，细胞数为lOVmL，每组5只，每鼠右腋窝皮下接种0.2mL (含瘤细胞2 X IO6个)。接种次日随机分组，实验组将本发明的天然药物组合物分为(200，100mg/mL)两个剂量组，每鼠灌胃0.5ml,同时给予环磷酰胺IOg.kg-1.(Γ1 ;阴性对照组给予0.5mL蒸懼水；阳性药物组给予环磷酰胺IOgCf1，连续给药10天。常规饲养，饮水，食物不限。停药次日，小鼠全部脱颈椎处死，剥取皮下实体瘤瘤块，称重，按下列公式计算肿瘤抑制率(％):肿瘤抑制率=〔对照组平均瘤重(C)-实验组平均瘤重(T)〕/对照组平均瘤重(C)3、试验结果本发明天然药物组合物低、高剂量组均可增强环磷酰胺剂与对S18tl的抑制程度作用，尤其以高剂量组作用最强。(如表2)表2本发明天然药物组合物对S18tl小鼠的肿瘤抑制作用
权利要求
1.一种减少癌症化疗相关性腹泻并对治疗癌症起增效作用的天然药物组合物，其特征在于该组合物由黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚以重量计按3-4: 3-8: 2-6: 3-7的比例组成， 其中黄芪丁香水煎浓缩提取物的制备方法是: 按照配伍比例为1-4: I取黄芪、丁香，蒸馏水浸泡lh，加热煎煮，絹布过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，70°C减压干燥，即得； 其中黄芪多糖的制备方法是: 黄芪粉碎，用95 %乙醇提取皂苷后晾干，加入蒸馏水，逐滴加入饱和石灰水，调pH值，静置IOmin以润湿物料,微波福射Imin,间隔Imin后再福射Imin,过滤得提取液,重复上述操作2-3次，合并提取液，浓缩，用10%盐酸调节pH = 7，加入95%乙醇，洗出多糖，过滤，乙醇洗涤，干燥即得黄芪多糖； 其中丁香乙醇提取物的制备方法是: 取丁香，干燥，粉碎，过筛，用乙醇浸泡12h，过滤，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15min，分离上清液，蒸馏去除乙醇，乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过筛，即得； 其中丁香酚的制备方法是: 将丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5%的氢氧化钠固定，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，得淡黄色油状液体，即为丁香酚。
2.如权利要求1所述的天然药物组合物，其特征在于其中黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚的用量比例是4: 8: 6: 7。
3.如权利要求1或2的天然药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括: (1)黄芪丁香水煎浓缩提取物的制备 按照配伍比例为1-4: I取黄芪、丁香，蒸馏水浸泡lh，加热煎煮，絹布过滤，药渣再加蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，70°C减压干燥，即得； (2)黄芪多糖的制备 黄芪粉碎，用95%乙醇提取皂苷后晾干，加入蒸馏水，逐滴加入饱和石灰水，调pH值，静置IOmin以润湿物料,微波福射Imin,间隔Imin后再福射Imin,过滤得提取液,重复上述操作2-3次，合并提取液，浓缩，用10%盐酸调节pH = 7，加入95%乙醇，洗出多糖，过滤，乙醇洗涤，干燥即得黄芪多糖； (3)丁香乙醇提取物的制备 取丁香，干燥，粉碎，过筛，用乙醇浸泡12h，过滤，残渣继续浸泡12h，将两次滤液合并，3000rpm离心15min，分离上清液，蒸馏去除乙醇，乙酸乙酯提取，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过筛，即得； (4)丁香酚的制备 将丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，过滤，滤液用5%的氢氧化钠固定，过滤，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水层盐酸酸化，调溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，蒸除乙醚，得淡黄色油状液体，即为丁香酚； (5)按比例选取黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚均匀混合，即得。
4.如权利要求3所述的天然药物组合物的制备方法，其特征在于还包括:将步骤(5)制得的产品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物IOOmg或200mg规格的胶囊或片剂。
5.如权利要求1-2任一 项所述的天然药物组合物在制备减少癌症化疗相关性腹泻反应并对治疗癌症起增效作用的药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及一种中药组合物及其制备方法，该中药组合物由黄芪丁香水煎浓缩提取物、黄芪多糖、丁香乙醇提取物与丁香酚按3-4∶3-8∶2-6∶3-7的比例组成，该组合物对由癌症化疗相关性腹泻有极好的疗效并能同时对癌症化疗起增效作用。
文档编号A61K31/085GK103223013SQ20131013249
公开日2013年7月31日 申请日期2013年4月8日 优先权日2013年4月8日
发明者张宗升 申请人:张宗升