Irf1在主动脉弓缩窄疾病中的功能及其抑制剂的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种IRF1在主动脉弓缩窄相关疾病中的功能及其抑制剂的应用，属于基因的功能与应用领域。本发明以IRF1基因敲除小鼠和心脏特异性IRF1转基因小鼠为实验对象，通过主动脉弓缩窄模型，进行了心肌肥厚及纤维化和心功能的检测，结果表明与野生型对比，IRF1基因敲除小鼠心肌肥厚和纤维化的程度明显被抑制，而心脏特异性IRF1转基因小鼠的心肌肥厚和纤维化在一定程度上加重，且心功能明显恶化。这表明IRF1基因具有能够促进主动脉缩窄相关疾病的发生发展的作用，IRF1可作为药物靶标筛选主治疗动脉弓缩窄相关疾病的药物，IRF1的抑制剂可用于制备治疗主动脉弓缩窄相关疾病的药物。
【专利说明】IRF1在主动脉弓缩窄疾病中的功能及其抑制剂的应用
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明属于基因的功能与应用领域,特别涉及一种IRFl(interferon regulatoryfactor 1，IRF1)在主动脉弓缩窄相关疾病中的功能及其抑制剂的应用。
【背景技术】
[0003]据世界卫生组织报告，心血管疾病已成为威胁人类生命健康的全球性慢性非传染性疾病之一。目前，慢性心力衰竭病死率迅速增长，毫无疑问地成为威胁人类生命的重要病症之一。基础和临床研究证实心力衰竭往往是由心肌肥厚(Cardiac Hypertrophy)演变而来的，心肌肥厚是指心脏在遗传、环境、多种生理及病理因素的作用下，为了适应心脏做功增加而出现的心脏重量和体积增加，主要以心肌细胞体积增大和细胞外基质增多为特征。研究表明，心肌肥厚是冠心病、高血压、心律失常、心脏瓣膜病及心肌病等多种心血管疾病的共同病理生理过程，显著增加心力衰竭的发病率和病死率，且是多种心血管并发症的独立危险因素。此外，随着左室肥厚的进展，心肌缺血、恶性室性心律失常、心力衰竭、心源性猝死等心血管事件的发生率增加6-10倍。因此，阐明心肌肥厚发生发展的机制对防治慢性心力衰竭等心血管重症具有重要意义，研究其分子机制能为未来寻找防治心肌肥厚的新靶点奠定理论基础，并产生深远的临床实践意义和广大的社会价值。
[0004]心肌肥厚是指心脏在遗传、环境、多种生理及病理因素的作用下，为了适应心脏做功增加而出现的心脏重量和体积增加，主要以心肌细胞体积增大和细胞外基质增多为特征。心肌肥厚由多种因素调节，且是一种复杂的动态过程。研究表明持续的压力和/或容量负荷过度，可增加室壁应力，导致心肌`肥厚。大体可见心脏重量明显增加、心室结构改变；细胞水平上可见，心肌细胞长度和/或宽度增大，肌节数量增加、排列紊乱，胶原含量增加，纤维组织过度增生，细胞排列紊乱松散；分子水平上，转化生长因子-β、血管紧张素I1、内皮素、儿茶酚胺等各种胞外刺激信号可激活信号转导，诱导胚胎型基因的表达，从而促使细胞发生肥大表型变化，最终导致心肌细胞肥大。然而，现有的研究并不能完全诠释心肌肥厚的发生机制。因此，寻找抑制心肌肥厚的特异性分子，对于进一步阐述心肌肥厚的发生发展机制，具有重大的理论意义，可为临床防治心肌肥厚提供新靶点和新策略。
[0005]IRFl是干扰素调节因子家族(IRFs)的一员，在众多的免疫反应中，是一个多功能的转录调节因子。在不同的条件刺激下，IRFl可选择性的在不同细胞中的免疫应答反应中起作用。在许多恶性血液系统疾病，如急性白血病(AL)、骨髓增生异常综合症(MDS)和多种癌症，均伴有IRFl基因的异常表达。目前IRFl具有的多种生物学功能已经受到了人们的广泛关注，IRFl不仅可以诱导激活IRFS的表达，还是一种抑癌蛋白，由于IRFl有抑癌活性又是转录因子，其作用的靶基因是近年来人们研究的热点之一，对此的深入研究将有助于揭示肿瘤的发病机制。此外，IRFl基因还能使NK细胞、巨噬细胞发挥正常的免疫杀伤效应。IRFl作为体内重要的转录因子，近年来发现其还与缺血性脑损伤的发生、细胞因子诱发性胰岛损害密切相关。
【发明内容】
[0006]为解决上述现有技术的缺陷和不足，本发明的目的在于提供一种IRFl及其抑制剂在制备治疗主动脉弓缩窄疾病的药物中的应用。
[0007]本发明的目的通过下述技术方案实现:
一种IRFl在主动脉弓缩窄相关疾病中的功能，主要体现在IRFl基因具有恶化心功能的作用，特别是IRFl基因能够加重促进主动脉弓缩窄相关疾病发生的作用。
[0008]针对IRFl的上述功能，提供IRFl作为药物靶标在筛选保护心脏功能的药物中的应用。
[0009]针对IRFl的上述功能，提供IRFl作为药物靶标在筛选治疗主动脉弓缩窄疾病的药物中的应用。
[0010]针对IRFl的上述功能，提供IRFl的抑制剂在制备保护心脏功能的药物中的应用。
[0011]一种保护心脏功能的药物，包含IRFl的抑制剂。
[0012]针对IRFl的上述功能，提供IRFl的抑制剂在制备治疗主动脉弓缩窄疾病的药物中的应用。
[0013]一种治疗主动脉弓缩 窄疾病的药物，包含IRFl的抑制剂。
[0014]所述的IRFl的抑制剂优选为IRFl基因的siRNA、IRFl基因的RNA干扰载体，IRFl的抗体及其他能够抑制IRFl表达的抑制剂中的一种。
[0015]本发明以IRFl基因敲除小鼠和心脏特异性IRFl转基因小鼠为实验对象，通过主动脉缩窄术构建小鼠心肌肥厚(AB)模型，进行了 AB模型小鼠心肌肥厚及纤维化和心功能的检测，结果表明与野生型小鼠对比，IRFl基因敲除小鼠心肌肥厚和纤维化的程度明显被抑制，而心脏特异性IRFl转基因小鼠的心肌肥厚和纤维化在一定程度上增加，且心功能明显恶化。这提示IRFl具有恶化心脏功能的作用，能促进心肌肥厚及纤维化的发展，为研究防治心肌肥厚的新靶点和新策略提供了理论依据和临床基础。
[0016]本发明的研究结果表明，IRFl基因敲除小鼠在主动脉缩窄引起的心肌肥厚中，IRFl基因敲除后，小鼠心肌肥厚和纤维化的程度明显被抑制，而心脏特异性IRFl转基因小鼠的心肌肥厚和纤维化在一定程度上加重。证明了 IRFl基因在主动脉缩窄相关疾病模型中有着重要的恶化作用。
[0017]本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
(I)本发明发现IRFl基因的新功能，即IRFl基因具有能够恶化主动脉弓缩窄相关疾病的作用。
[0018](2)基于IRFl基因在恶化主动脉弓缩窄相关疾病中的功能，为研制主动脉弓缩窄相关疾病的药物提供靶标。
[0019](3) IRFl的抑制剂可用于制备保护心脏功能和治疗主动脉弓缩窄疾病的药物。
【专利附图】
【附图说明】
[0020]图1是IRFl+/+和IRFl-/-小鼠AB模型4周后心身比(HW/BW)、肺身比(LW/BW)及心胫比(HW/TL)的统计柱状图。[0021 ] 图2是IRFl+/+和IRFl-/-小鼠AB模型4周后心脏组织HE染色及心肌细胞横截面积统计柱状图。
[0022]图3是IRFl+/+和IRFl-/-小鼠AB模型4周后心脏组织天狼星红染色及左室胶原面积统计柱状图。
[0023]图4是NTG和IRFl-TG小鼠AB模型4周后心身比(HW/BW)、肺身比(LW/BW)及心胫比(HW/TL)的统计柱状图。
[0024]图5是NTG和IRFl-TG小鼠AB模型4周后心脏组织HE染色及心肌细胞横截面积统计柱状图。
[0025]图6是NTG和IRFl-TG小鼠AB模型4周后心脏组织天狼星红染色及左室胶原面积统计柱状图。
[0026]图7是IRFl+/+和IRFl-/-小鼠AB模型4周后超声检测心功能结果统计柱状图，其中，HR为小鼠心率、LVEDd为左室舒张末期内径、LVESd为左室收缩末期内径、EF为射血分数及FS为短轴缩短率。
[0027]图8是IRFl+/+和IRFl-/-小鼠AB模型4周后PV检测血流动力学结果统计柱状图，其中，EF为射血分数，dP/dt max为左室内压最大上升速率及dP/dt min为左室内压最小上升速率。 [0028]图9是NTG和IRFl-TG小鼠AB模型4周后超声检测心功能结果统计柱状图，其中，HR为小鼠心率、LVEDd为左室舒张末期内径、LVESd为左室收缩末期内径、EF为射血分数及FS为短轴缩短率。
[0029]图10是NTG和IRFl-TG小鼠AB模型4周后PV检测血流动力学结果统计柱状图，其中，EF为射血分数，dP/dt max为左室内压最大上升速率及dP/dt min为左室内压最小上
升速率。
【具体实施方式】
[0030]下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0031]实验用动物及饲养
实验动物:选用8-10周龄、体重在23.5-27.5g，背景为雄性C57BL/6品系的心脏特异性 Cre 小鼠(a -MHC-Cre (命名 IRFl+/+),背景为 C57BL/6,购自 Jackson Laboratory,货号 005650)、IRFl 基因敲除小鼠(IRF1-K0，B6.129 背景，购自 Jackson Laboratory，货号002762 ;购回的IRFl-KO与C57BL/6野生型小鼠回交至少5代，得到C57BL/6的IRFl-KO小鼠用于实验)、非转基因小鼠(NTG，背景为C57BL/6，购自北京华阜康生物科技有限公司)及心脏特异性IRFl转基因小鼠(IRF1-TG，背景为C57BL/6，其心脏组织中IRFl的表达量约是NTG的3倍)为实验对象。
[0032]心脏特异性IRFl转基因小鼠的构建:
转基因载体构建信息:用引物(上游引物:GCCACCATGAAGCTTATGCCAATCACTCGAATGCG ;下游引物:GTATGGGTAAAGCTTTGGTGCACAAGGAATGGCCT)扩增小鼠 IRFl 全长基因(NCBI, Gene ID: 16362，ΧΜ_006532308.I)，再把 mouse a -MHC Promoter、IRFl 基因和hGH polyA按顺序连到pBlueScript SK+载体上得到转基因载体，将转基因载体通过显微注射构造成受精胚胎(C57BL/6J背景)，得到心脏特异性IRFl转基因老鼠。(上述的转基因小鼠参照下述文献制备:Jiang DS, Bian ZY, Zhang Y, Zhang SM, Liu Y, Zhang R etal.Role of interferon regulatory factor 4 in the regulation of pathologicalcardiac hypertrophy.Hypertension 2013; 61:1193-1202.)
饲养环境:所有实验小鼠均饲养在武汉大学心血管病研究所SPF级实验动物中心。小鼠专用饲料由中国军事医学科学院动物中心提供。饲养条件:室温在22-24°C之间，湿度在40-70%之间，明暗交替照明时间为12h，自由饮水摄食。
[0033]实施例1心肌肥厚(AB)模型获得
1.实验动物分组:雄性C57BL/6野生型小鼠(IRF1+/+)、IRFl基因敲除小鼠(IRF1-/-)及心脏特异性IRFl转基因小鼠(TG)和非转基因小鼠(NTG)，通过主动脉缩窄术建立心肌肥厚模型。随机分为8组，分组如下:C57BL/6品系野生型小鼠假手术组(IRF1+/+SHAM)及AB术组(IRF1+/+ AB)、IRFl基因敲除小鼠假手术组(IRF1-/- SHAM)及AB术组(IRFl-/- AB)、非转基因小鼠假手术组(NTG SHAM)及AB术组(NTG AB)、心脏特异性IRFl转基因小鼠假手术组(TG SHAM)及AB术组(TG AB)。
[0034]2.心肌肥厚模型采用主动脉弓缩窄手术，模型操作流程:
2.1术前准备
(I)麻醉:先给小鼠称重，按照90mg/kg体重计算所需麻药(3%戊巴比妥钠)量，通过腹腔注射，并记录注射时间点。夹尾、夹趾无明显反应且小鼠状态良好为麻醉成功标准(一般注射后约IOmin无明显反应，以麻醉后约50min小鼠夹趾有反应,麻醉后30min左右为最佳手术时间)。
[0035](2)术区准备:将小鼠左胸部、左侧胸部及左前肢腋下的皮肤去毛。剃毛后用湿纱布擦拭术区去除鼠毛，以不影响手术视野为宜。
[0036](3)气管插管:用橡皮筋将小鼠上门齿固定于V形板斜面上，并迅速将气管插管经声门准确插入气管内，随后右侧卧位置于加热垫上(加热垫需提前预热)，然后将气管插管与呼吸机连接，固定小鼠。若小鼠的胸廓起伏与呼吸机频率一致，说明气管插管成功。
[0037]2.2主动脉弓降支结扎术
取右侧卧位，小鼠左前肢置于右前肢上方，并用医用胶带将两前肢固定。右胸部下方垫入棉签，抬高胸廓，依次用碘酒及体积分数为75%酒精对手术区域皮肤消毒。左手持眼科镊将左胸部皮肤捏起，右手持眼科剪剪开皮肤约1cm，依次分离肌肉及软组织，于第2-3肋水平打开胸腔，用棉签稍拨开左肺，游离主动脉弓降支，将7-0手术缝线穿过血管，并在血管上方平行放置一段26G (25.0-27.5g小鼠)或者27G (23.5_25.0g)注射器针头，将血管及针头一起结扎好，再抽出针头即可达到相应程度的血管缩窄。结扎完毕后依次缝合，关闭胸腔，用注射器从缝口处插入胸腔并抽出Icc气体以恢复胸腔内负压，拔出注射器后迅速缝合皮肤切口。假手术组(SHAM)在游离出主动脉降支后只穿线不结扎，余步骤同心肌肥厚(AB)模型组。
[0038]2.3术后护理
主动脉弓降支结扎术后，待小鼠出现自主呼吸、夹趾出现强烈反应，拔出气管插管，并将小鼠放入装有高压灭菌过的垫料、饲料和饮用水的饲养笼内，于饲养室继续饲养观察。IRFl基因敲除小鼠及野生型小鼠术后4周、非转基因小鼠及心脏特异性IRFl转基因小鼠术后4周分别进行各项指标的检测。
[0039]实施例2小鼠心肌肥厚(AB)模型心肌肥厚及纤维化检测
1.取材
(1)前期工作:预先准备装有20mL的体积分数10%甲醛的尿杯，并贴好标签(小鼠编号、组别、手术类型及取材日期)。将倒满质量分数10% KCl溶液的培养皿置于取材处。打开分析天平，调零备用。再称重处死小鼠。
[0040](2)取材:眼科弯镊夹住心耳下方的血管蒂，剪下心脏，迅速置于质量分数10% KCl溶液中。待心脏停跳在舒张期后，置于灭菌纱布上，轻轻挤压心腔内液体，蘸干表面液体后，称重并记录，将心脏放入相应的尿杯中，固定48h后用于病理学检测。
[0041](3)相关测量及计算:取出小鼠肺脏，修剪后滤纸吸干，称重并记录。剪开小鼠后肢胫骨处皮肤，测量并记录胫骨长度。计算心重与体重的比值(HW/BW)，肺重与体重的比值(Lff/Bff)以及心重与胫骨长度的比值(HW/TL)。
[0042]2.病理学检测
2.1制备石腊标本切片
由实验室专业病理工作人员制备石蜡标本切片，主要操作程序包括修剪心脏一包埋框处理→流水冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋一切片→摊片→晾干或烘烤后备用。
[0043]2.2苏木精-伊红(HE)染色
主要步骤为:55 °C烘烤30min → 二甲苯5min，3次→100%酒精Imin → 95%酒精1min → 70%酒精1min →双蒸水Imin —苏木素溶液(珠海贝索，BA-4021) 5min →水洗Imin →1%盐酸酒精(取3mL浓盐酸与297mL 70%酒精充分混合均匀)l_3s →水洗1min → Scott液(碳酸氢钠0.35g,七水硫酸镁2g,两者溶于1OOmL蒸懼水)Imin →水洗1min →伊红溶液(珠海贝索，BA-4024) 3_5min →蒸懼水洗去浮色一70%酒精1s → 95%酒精1s → 100%酒精30s，3次→二甲苯2min，3次→趁二甲苯未干立即封片一通风橱内吹干，显微镜拍照。
[0044]HE染色图片统计:每张图片选择3个以上边界清楚，核大致位于中央的细胞，用Image-Pro Plus 6.0软件圈细胞面积。
[0045]2.3天狼星红(PSR)染色
主要步骤为:55 V烘烤30min→ 二甲苯2min，3次→100%酒精Imin — 95%酒精1min → 70%酒精Imin→流水冲洗1Omin →双蒸水Imin →质量分数0.2%磷钥酸2min → 0.1%天狼猩红苦味酸溶液滴于组织上,湿盒中染色90min→去除残液→0.01N盐酸4s → 70%酒精I次一90%酒精1次→100%酒精30s，3次→二甲苯2min，3次→趁二甲苯未干立即盖玻片封片,显微镜拍照。
[0046]PSR染色图片统计:胶原比例=胶原面积/ (总面积-空白面积)X 100%。
[0047]心肌组织由心肌细胞和间质组织组成，心脏是一终末分化器官，心肌细胞失去增殖能力，各种生理或病理性刺激引起的心肌细胞反应，只能是单个细胞的体积增大而不能在数量上增殖。因此，在心肌肥厚的病理生理过程中，主要表现为心肌细胞体积增大，肌节数量增多，细胞排列紊乱，心脏间质改变包括心肌成纤维细胞的增殖与转化，胶原纤维密度增加，胶原分泌增加，胶原比例平衡失调等。
[0048]IRFl+/+和IRFl-/-小鼠AB模型后的表型结果见图1、图2、图3。SHAM (假手术)组中IRFl+/+小鼠和IRFl-/-小鼠的HW/BW、LW/BW及HW/TL之间的差异均无统计学意义；IRFl+/+ 小鼠 AB 术后 4 周的 HW/BW、LW/BW、HW/TL 高于其 SHAM 组；AB 术后 4 周，IRFl-/-小鼠的HW/BW、LW/BW及HW/TL均较IRFl+/+小鼠降低(图1 )。HE染色切片可观察到:SHAM组心脏无明显差异，AB组较SHAM组的心脏均增大，IRFl-/-小鼠的心脏明显小于IRFl+/+组小鼠；SHAM组心肌肌原纤维细胞排列整齐、致密，形态完整，胞核及核仁结构清晰；AB组肌丝排列紊乱、松散，心肌细胞体积明显增大，形态不规整，胞核深染、增大、畸形，核仁模糊，IRFl-/-组则无IRFl+/+组细胞肥大明显；IRFl-/_小鼠AB术后心肌细胞横截面积大于其SHAM组，小于IRFl+/+小鼠AB组，差异有统计学意义(图2)。PSR染色后，发现AB组心室心肌间质胶原含量较SHAM组增加，动脉血管周围胶原增加更为明显，胶原增粗，排列紊乱成网络状；而IRFl-/-小鼠AB术后胶原含量及血管周围胶原含量则无IRFl+/+小鼠AB术后增加明显；SHAM组之间无统计学差异(图3)。
[0049]图4、图5、图6是NTG和IRFl-TG小鼠AB模型后的表型结果。同样TG小鼠AB术后4周的HW/BW、LW/BW及HW/TL高于其SHAM组；AB术后4周TG小鼠的HW/BW、LW/BWL及HW/TL增大的程度明显大于NTG小鼠(图4)。心脏表型，AB组较SHAM组的心脏均增大，且AB术后TG小鼠心脏增大的程度远大于NTG小鼠。HE染色切片可观察到:TG小鼠AB术后心肌细胞横截面积大于SHAM组，显著大于NTG小鼠AB组(图5)。PSR染色可见，TG小鼠AB术后心肌间质胶原含量及血管周围胶原含量均大于NTG小鼠AB组(图6)。
[0050]实施例3心肌肥厚(AB)模型小鼠心功能检测 I超声检测心功能
1.1前期准备
(I)麻醉机准备:先连接氧气瓶和麻醉机上的进气接口，再拧开麻醉机上加药口密封盖，迅速加入异氟烷至安全刻度后拧紧密封盖。拧开氧气瓶上总阀门，调整流量控制阀的旋钮，出气压力维持在0.2-0.3mPa。
`[0051](2)待测小鼠准备:待检测小鼠用异氟烷迅速麻醉后，左胸前区剃毛，将处理好的小鼠头部伸入麻醉剂导管套头内，以1.5-2.0%异氟烷维持小鼠稳定的麻醉状态。
[0052]1.2心功能检测
小鼠取左侧卧位或仰卧位，并在剃毛区均匀涂抹超声耦合剂(天津成信公司)。采用高频超声诊断仪，频率为15MHz，选取标准左心室乳头肌短轴切面，测量小鼠心率(HR)、左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVESd)、射血分数(EF)及短轴缩短率(FS )。
[0053]2心脏导管超声(PV)检测血流动力学
2.1前期准备
(I)麻醉机准备:同超声检测心功能部分。
[0054](2)待测小鼠准备:待检测小鼠用异氟烷迅速麻醉后，颈部手术区剃毛，并用湿纱布擦拭去毛。将处理好的小鼠头部伸入麻醉剂导管套头内，以1.5-2.0%异氟烷以维持麻醉深度，避免麻醉过深或过浅。
[0055]2.2 PV 检测
碘酒及75%酒精消毒后，剪开小鼠颈部皮肤，依次分离肌肉和软组织，并游离出右颈总动脉，于血管下穿过双线并结扎远心端，同时活结结扎近心端。用血管剪在远心端剪一切口(1/3-1/2管径)，于体视显微镜下将Millarl.4F超微导管迅速插入右颈总动脉，同时穿一缝线将导管和血管结扎。打开近心端活结，将导管沿右颈总动脉-升主动脉插入左心室内，连接Powerlab生物信号采集处理系统。观察记录仪上波形情况，调节导管的位置使波形图清晰且稳定。监测射血分数、左室内压最大上升速率(dP/dt max)及左室内压最小上升速率(dP/dt min)等指标。
[0056]本实施例运用M型超声心动图和血流动力学检测评价心肌肥厚和心功能。图7、图8是IRFl+/+和IRFl-/-小鼠AB模型后超声检测心功能结果图。与IRFl+/+ SHAM组相比，IRFl+/+小鼠AB术后4周表现出心功能减弱和心肌肥厚，主要表现为心肌肥厚的指标LVEDd、LVESd增大，而反应心功能的指标EF、FS则下降。AB术后4周，IRFl-/-小鼠心肌肥厚的指标增大的程度及反应心功能的指标下降的程度无IRFl+/+小鼠明显，HR均无明显差异。SHAM组IRFl+/+小鼠与IRFl-/-小鼠的以上指标之间差异甚微，均无统计学差异(图7)。通过血流动力学指标的检测，观察到AB术后4周IRFl+/+小鼠dP/dt max和dP/dt min均比其SHAM组降低，AB术后IRFl-/-小鼠与IRFl+/+小鼠AB相比EF、dP/dt max和dP/dt min显著升高(图8)。
[0057]图9、图10是NTG和IRFl-TG小鼠AB模型后的超声和PV检测结果。与NTG SHAM组相比，NTG小鼠AB术后4周表现出心功能减弱和心肌肥厚。主要表现为心肌肥厚的指标LVEDcULVESd增大，而反应心功能的指标EF、FS则下降。AB术后4周，与NTG小鼠相比，TG小鼠心肌肥厚的指标增大的程度及反应心功能的指标下降的程度则大于NTG组，HR均无明显差异，SHAM组NTG小鼠与TG小鼠的以上指标之间差异甚微，均无统计学差异(图9)。通过血流动力学指标的检测，观察到AB术后4周NTG小鼠dP/dt max和dP/dt min均比其SHAM组降低，TG小鼠AB术后EF，dP/dt max和dP/dt min降低的程度则大于NTG组，差异有统计学意义(图10)。
[0058]上述研究结果表明，IRFl基因敲除小鼠在主动脉缩窄引起的心肌肥厚中，IRFl基因敲除后，小鼠心肌肥厚和纤维化的程度明显减少，而心脏特异性IRFl转基因小鼠的心肌肥厚和纤维化在一定程度上增加。证明了 IRFl基因在主动脉缩窄相关疾病模型中有着重要的恶化作用，其抑制剂可 用于制备治疗主动脉弓缩窄疾病的药物。
[0059]上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.1RFl作为药物靶标在筛选保护心脏功能的药物中的应用。
2.1RFl作为药物靶标在筛选治疗主动脉弓缩窄疾病的药物中的应用。
3.1RFl的抑制剂在制备保护心脏功能的药物中的应用。
4.一种保护心脏功能的药物，其特征在于:包含IRFl的抑制剂。
5.1RFl的抑制剂在制备治疗主动脉弓缩窄疾病的药物中的应用。
6.一种治疗主动脉弓缩窄疾病的药物，其特征在于:包含IRFl的抑制剂。
7.根据权利要求3或5所述的应用或权利要求4或6所述的药物，其特征在于:所述的IRFl的抑制剂为IRFl基因的siRNA、IRFl基因的RNA干扰载体或IRFl的抗体。
【文档编号】A61P9/00GK103751783SQ201410032541
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2014年1月23日 优先权日:2014年1月23日
【发明者】李红良, 蒋丁胜, 张艳, 张晓东, 刘万里, 刘小熊 申请人:武汉大学