用于治疗原生动物感染的方法与流程

本发明涉及式i的化合物及其在使用式i的化合物治疗或预防受试者的原生动物感染的方法中的用途、式i的化合物在制备用于治疗受试者的原生动物感染的药物中的用途及在用于治疗或预防受试者的原生动物感染的方法中使用的医疗器械。
背景技术：
：贾第虫病、阿米巴病(amoebiasis)和隐孢子虫病是人肠道的最常见的原生动物寄生虫病以及非人动物物种中肠道疾病的常见原因。不同的药物已经用于控制这些疾病，但许多药物在从肠清除寄生虫方面具有显著的失败率和许多药物与不希望的副作用的高发生率相关，其在某些情况中经常导致使用禁忌。本领域中存在着对改善的疗法的需要，其需要一次或非常少的用药、与目标原生动物剂的非常高的清除水平相关、消除肠囊肿(以减少环境污染和再感染储主)、没有不良反应或仅与轻度和良好耐受的不良反应相关、不具有预先存在的抗性、对于孕妇和哺乳妇女及其它物种的使用是安全的和/或适合用作预防性用药。许多现有的抗原生动物剂，特别是用于治疗贾第虫病的那些，具有亚最优的内在功效。对于甲硝唑，贾第虫治愈率可能是高的，但在成人和儿科患者中施用5-10天时也报告低至60％(通过原生动物的清除测量的)。甲硝唑和替硝唑两者报告为具有约89％的中等功效。较新的抗贾第虫剂硝唑尼特表现出75％的总体反应率(通过原生动物的清除测量的)，范围为64-94％。为改善顺应性，非常希望的是给药方案是简单的和持续时间是短的。如以上概述的，甲硝唑给药的持续时间最通常是5-10天，导致错失治疗、不良的顺应性和降低的功效或治疗失败的许多可能性。贾第虫属对可用治疗的获得性抗性是广泛发生的且是增长的治疗失败的原因。这并不是令人惊讶的，因为大多数当前推荐的抗原生动物剂已经使用了几十年了。对于在1987和2013之间fda批准的抗原生动物剂的综述(kesselheim，a.s.和j.j.darrow(2014).″drugdevelopmentandfdaapproval.1938-2013.″newenglandjournalofmedicine370(26)：e39)仅公开了对于所有原生动物疾病的7种新的药剂(1989年的甲氟喹、1990年的依洛尼塞、1992年的卤泛群和阿托伐醌、2002年的硝唑尼特、2004年的替硝唑及2009年的青蒿素甲醚和苯芴醇的组合)。在这些药剂中，仅硝唑尼特和替硝唑用于贾第虫治疗，且两者具有低于90％的中等功效。通常，正是不良反应谱限制了抗原生动物剂的使用。当前可用的抗原生动物剂存在多种多样的不良反应。例如，对于广泛使用的甲硝唑的副作用包括金属味、恶心、头痛、眩晕、白细胞减少(leukopaenia)、失眠和刺激性。较不常见地，cns毒性特别地在高剂量的情况下报告，且在服用甲硝唑期间不推荐饮酒，因为可能发生与双硫仑相似的反应。甲硝唑在细菌中显示诱变性；基于动物研究，该药物在高剂量下和长期使用时是致癌的。对于奎纳克林，不良反应包括头痛、恶心、呕吐和苦味，导致差的顺应性。在其施用后也伴随皮肤、尿和巩膜的黄变。也可以发生指甲的蓝色或黑色色素沉着、荨麻疹和剥脱性皮炎。报告的其它副作用有在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(g6pd)-缺陷患者中的溶血、中毒性精神病和银屑病加重。奎纳克林，与其它抗原生动物剂相同，能够越过胎盘并到达胎儿，从而由于与新生儿畸形的可能关联性而导致在怀孕期间使用的禁忌。所描述的其它严重副作用包括精神病学障碍。对于由溶组织内阿米巴(entamoebahistolytica)引起的隐孢子虫病和阿米巴病的治疗，对可用治疗的限制甚至具有比对于贾第虫病更多的限制，没有用于隐孢子虫病的始终有效和特异性的治疗(cabada，m.m.和a.c.white，jr.(2010).″treatmentofcryptosporidiosis：doweknowwhatwethinkweknow？″curropininfectdis23(5)：494-499)。存在着对于具有新型的作用机制的抗原生动物剂以补充和/或替代当前可用的抗原生动物剂(其功效持续地受到抗原生动物抗性机制的破坏)的未满足的临床需要。另外仍存在着对于在多药抗性原生动物的感染的治疗中替代的抗原生动物剂的需要。但是，如pharmaceuticalresearchandmanufacturersofamerica在其2013年报告“medicinesindevelopmentforinfectiousdiseases”中报道的，没有开发出提供优于现有治疗的有希望的结果的新的抗原生动物剂和几乎没有产品线的扩展。本发明的目的是克服现有技术的至少一种缺陷。以上给出的
背景技术：
的讨论仅旨在帮助理解本发明。该讨论不是承认或认可所称的任何材料在本申请的优先权日时是或曾经是公知常识的部分。技术实现要素：根据本发明的一个方面，具有治疗或预防受试者的原生动物群集(colonisation)或感染的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药的步骤，其中原生动物感染由原生动物剂(protozoanagent)引起。在本发明的一个实施方式中，式i的化合物是：在本发明的另一个实施方式中，r1是h、环烷基、式ii或式iii；在本发明的另一个实施方式中，r3选自：h；nh2；nhnh2；o-ch2-ch3；nh-c(o)-苯基；n-ch-氯苯基；nh-氯苯基；nh-ch2-氯苯基；nh-n-ch-环烷基；n，且r4是ch-n-ch-ccl-和r4与r3键合；式iv；式v；和式vi；在本发明的另一个实施方式中，a0是n、c、ch，或a0是c且a0与r4键合以形成三唑环。在另一实施方式中，r4是ch-n-ch-ccl-。优选地，当r3是n时，r4与r3键合。在本发明的另一个实施方式中，a1是n、c、nh、-(ch)2-n-、-(c6h5)c-ch-n-或式vii；在本发明的另一个实施方式中，a2是n、c、nh、n-c(o)-苯基或式vii，或(ch2)n，其中n是1-3之间的整数，包括1和3。在本发明的另一个实施方式中，a3、a4、a5、a6、a7、a8、a11、a12、a13、a14、a15、a16、a17、a18、a19、a20、a21、a23、a24、a25、a26和a27独立地是c、o、n、nh、s。在本发明的另一个实施方式中，a9是c、o、n、nh、n-c(o)-o-ch2-ch3、n-c(o)-o-ch(ch3)2、n-c(o)-nh-ch2-ch3、n-c(o)-nh-ch2-苯基、n-c(o)-ch2-ch2-ch2-ch2-ch2-ch3、n-c(o)-ch2-呋喃-2-基。在本发明的另一个实施方式中，a10是c、nh、-n-(ch)2-、-n-ch-c(c6h5)-。在本发明的另一个实施方式中，a22是-ch(ch3)-、-n-ch-、-n-c(ch3)-、n-c(ch2oh)-。在本发明的另一个实施方式中，r2是h、cooh、ch2nh2、ch2oh、ch2nhnh2、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、庚基、环戊基、ch2(环己基)、(ch2)2(环戊基)或式vii，且r2和r4键合在一起以形成嘧啶、吡嗪或三嗪环，或r2和r9键合在一起以形成吡咯烷基羟吲哚环。在本发明的另一个实施方式中，r4是h2、n、nh、o、s，或r4和a0键合在一起以形成三唑环，或r4是n且r4和r2键合在一起以形成嘧啶环。在本发明的另一个实施方式中，r7是h、cl、br、f、oh、ch3、och3、sch3、cn、cch、cf3、ocf3、scf3、no2、丁基、叔丁基、二甲基氨基、苯基、正丙基、异丙基、-nh-c(o)-ch3、-(ch)2-cooh、哌嗪-1-基，或r7和r8键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环。在本发明的另一个实施方式中，r6、r8、r14、r16、r25和r27独立地是h、oh、cl、f、br、ch3、cn、och3、cooh、no2、cf3，r8和r7键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环，r14和r15键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环，r8和r9键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环，杂环或苯环，或r14和r13键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环。在本发明的另一个实施方式中，r5、r9、r17、r24和r28独立地是h、o、oh、cl、f、br、nh2、ch3、cf3、och3、cn、no2、苯基、-nh-ch(oh)-ch3、-nh-c(o)-ch3，或r9和r8键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环，或r13和r14键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环。在本发明的另一个实施方式中，r10、r11、r19、r20、r22和r23独立地是h、cl或br，或r10和r11键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环，或r19和r20键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环，或r22和r23键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环。在本发明的另一个实施方式中，r12、r18和r21独立地是h、cooh、ch2nh2、ch2oh、甲基、乙基、丙基、丁基、环戊基，或r12和r13键合在一起以形成吡咯烷基羟吲哚环。在本发明的另一个实施方式中，r15和r26独立地是h、cl、br、f、oh、ch3、och3、sch3、cn、cf3、ocf3、scf3、no2、cch、正丁基、叔丁基、二甲基氨基、苯基、正丙基、异丙基、-nh-c(o)-ch3、-(ch)2-cooh、哌嗪-1-基，或r15和r14键合在一起以形成取代或未取代的、饱和或不饱和的脂族环、杂环或苯环，和在本发明的另一个实施方式中，“----”是双键或单键。在本发明的另一个实施方式中，式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药选自图1中显示的化合物。在本发明的另一个实施方式中，式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药包含以下特征：其中a0是c；其中a1是n或式vii；其中a2是n或nh；其中a3、a4、a6、a7、a11、a12、a14、a15是n或c；其中a5、a13、a23、a24、a25、a26和a27是c；其中a8和a21是s；其中a9是nh；其中a10是n；其中a22是-n-ch-、-n-c(ch3)-或-n-c(ch2oh)-；其中r1是h、式ii、式iii、环烷基；其中r2是h；甲基；乙基；ch2nhnh2；ch2oh；丁基；环戊基；或式vii，且r2与r4键合以形成嘧啶环；其中r3是nh2、式iv、式v、式vi、nh2、nh-n-ch-环烷基或o-ch2-ch3；其中r4是nh、o、s；或r4是n且r4和r2键合在一起以形成嘧啶环；其中r7是h；f；cl；cf3；甲基；r7和r8键合在一起以形成未取代的苯环；oh；叔丁基；苯基；二甲氨基；异丙基；正丙基；cn；cch；正丁基；sch3；r7和r8键合在一起以形成未取代的不饱和杂环；och3；br；ocf3；哌嗪-1-基；或scf3；其中r6、r8、r14和r16独立地是h；oh；f；och3；cf3；甲基；cl；cn；br；r8和r7键合在一起以形成未取代的苯环；r8和r7键合在一起以形成未取代的不饱和杂环；r14和r15键合在一起以形成未取代的苯环；或r14和r15键合在一起以形成未取代的不饱和杂环；其中r5、r9、r13和r17独立地是h、oh、nh2、cl、f、och3、oh、-nh-ch(oh)-ch3；其中r12是h、甲基、乙基、ch2oh或环戊基；其中r15是h；f；cl；cf3；甲基；r7和r8键合在一起以形成未取代的苯环；oh；叔丁基；苯基；二甲氨基；异丙基；正丙基；cn；cch；正丁基；sch3；r15和r14键合在一起以形成未取代的不饱和杂环；och3；br；ocf3；哌嗪-1-基；或scf3；其中r24和r28独立地是h、oh或cl；其中r25和r27独立地是h或oh；其中r26是h、ch3、br、cl、oh、二甲氨基、-o-p(o)(oet)2、cf3或f；和其中“----”独立地是单键或双键。在本发明的另一个实施方式中，所述化合物选自：ncl008；ncl009；ncl023；ncl025；ncl026；ncl028；ncl029；ncl036；ncl037；ncl039；ncl040；ncl050；ncl061；ncl062；ncl064；ncl065；ncl068；ncl075；ncl076；ncl078；ncl079；ncl080；ncl081；ncl084；ncl085；ncl086；ncl088；ncl089；ncl090；ncl092；ncl094；ncl095；ncl097；ncl098；ncl099；ncl101；ncl104；ncl105；ncl106；ncl108；nclll1；ncl112；ncl114；ncl115；ncl116；ncl118；ncl119；ncl121；ncl122；ncl123；ncl124；ncl125；ncl126；ncl130；ncl131；ncl132；ncl133；ncl135；ncl136；ncl137；ncl138；ncl139；ncl140；ncl141；ncl144；ncl145；ncl146；ncl147；ncl148；ncl150；ncl152；ncl153；ncl154；ncl156；ncl157；ncl158；ncl159；ncl161；ncl162；ncl164；ncl165；ncl166；ncl167；ncl168；ncl169；ncl170；ncl171；ncl172；ncl173；ncl174；ncl176；ncl177；ncl178；ncl179；ncl180；ncl181；ncl183；ncl184；ncl185；ncl186；ncl187；ncl188；ncl189；ncl190；ncl193；ncl194；ncl195；ncl196；ncl197；ncl198；ncl199；ncl200；ncl201；ncl202；ncl203；ncl204；ncl205；ncl206；ncl207；ncl208；ncl209；ncl210；ncl211；ncl212；ncl213；ncl215；ncl216；ncl217；ncl218；ncl219；ncl220；ncl221；ncl222；ncl223；ncl223；ncl224；ncl225；ncl226；ncl227；ncl228；ncl229；ncl230；ncl231；ncl232；ncl233；ncl234；ncl235；ncl236；ncl237；ncl238；ncl239；ncl240；ncl241；ncl242；ncl243；ncl244；ncl245；ncl246；ncl247；ncl248；ncl249；ncl250；ncl251；ncl252；ncl253；ncl254；ncl255；ncl256；ncl257；ncl258；ncl259；ncl260；ncl261；ncl262；ncl263；ncl264；ncl265；ncl266；ncl267；ncl268；ncl269；ncl270；ncl271；ncl272；ncl273；ncl274；和ncl275。在本发明的另一个实施方式中，所述化合物选自：ncl028；ncl040；ncl062；ncl078；ncl079；ncl080；ncl081；ncl084；ncl088；ncl089；ncl097；ncl099；ncl123；ncl146；ncl157；ncl158；ncl177；ncl179；ncl188；ncl193；ncl195；ncl196；ncl197；ncl199；ncl202；ncl204；ncl205；ncl215；ncl216；ncl217；ncl219；ncl221；ncl245和ncl246。在本发明的优选实施方式中，所述化合物选自：ncl062；ncl078；ncl079；ncl080；ncl081；ncl084；ncl089；ncl097；ncl099；ncl157；ncl158；ncl179；ncl188；ncl193；ncl195；ncl196；ncl199；ncl204；ncl216；ncl217；ncl219；ncl221；ncl245和ncl246。在本发明的甚至更优选的实施方式中，所述化合物选自：ncl062；ncl089；ncl097；ncl099；ncl157；ncl179；ncl188；ncl193；ncl195；ncl196；ncl216；ncl219；和ncl221。在本发明的甚至更优选的实施方式中，所述化合物选自：ncl062；ncl097；ncl099；ncl157；ncl179；ncl188；ncl195；和ncl196。在本发明的另一个实施方式中，所述化合物是氯盐。在本发明的另一个实施方式中，所述化合物是选自以下的化合物：ncl812和ncl062。在本发明的另一个实施方式中，所述化合物不是选自以下的化合物：ncl812和ncl062。例如，所述化合物是ncl099。在本发明的另一个实施方式中，所述化合物是选自以下的化合物：ncl020、ncl021、ncl024、ncl035、ncl072、ncl077、ncl107、ncl109、ncl134、ncl143、ncl143、ncl151、ncl155和ncl160。在本发明的另一个实施方式中，所述化合物不是选自以下的化合物：ncl020、ncl021、ncl024、ncl035、ncl072、ncl077、ncl107、ncl109、ncl134、ncl143、ncl143、ncl151、ncl155和ncl160。例如，所述化合物是ncl099。在本发明的另一个实施方式中，受试者是最优选选自以下的动物：人、犬类、猫类、牛类、绵羊、山羊、猪、鸟类、鱼类和马类物种。在本发明的另一个实施方式中，化合物以0.1mg/kg-250mg/kg体重的范围内的剂量施用于受试者。在本发明的另一个实施方式中，原生动物剂选自包括以下的原生动物属：棘阿米巴属(acanthamoeba)、巴倍虫属(babesia)、巴拉姆希属(balamuthia)、肠袋虫属(balantidium)、贝诺孢子虫属(besnoitia)、芽囊原虫属(blastocystis)、唇鞭毛虫属(chilomastix)、cochlosoma、隐孢子虫属(cryptosporidium)、环孢子虫属(cyclospora)、囊等孢虫属(cystoisospora)、胞殖原虫属(cytauxzoon)、双核阿米巴属(dientamoeba)、艾美球虫属(eimeria)、内蜒属(endolimax)、内阿米巴属(entamoeba)、贾第虫属(giardia)、血变虫属(haemoproteus)、哈蒙德虫属(hammondia)、哈氏虫属(hartmannella)、肝簇虫属(hepatozoon)、六前鞭虫属(hexamita)、组织滴虫属(histomonas)、等孢子球虫属(isospora)、利什曼原虫属(leishmania)(包括维纳尼亚亚属(viannia))、住白虫属(leucocytozoon)、纳氏虫属(naegleria)、新孢子虫属(neospora)、五毛滴虫属(pentatrichomonas)、疟原虫属(plasmodium)(包括亚属疟原虫(bennettinia)(鸟类)；疟原虫(齐奥虫(giovannolaia))(鸟类)；疟原虫(血阿米巴(haemamoeba))(鸟类)；疟原虫(huffia)(鸟类)；疟原虫(laverania)(高等灵长类，包括恶性疟原虫(plasmodiumfalciparum))；疟原虫(诺维虫(novyella))(鸟类)；疟原虫(paraplasmodium)(蜥蜴)；疟原虫(疟原虫)(高等灵长类，包括巴西疟原虫(plasmodiumbrasilianum)、食蟹猴疟原虫(plasmodiumcynomolgi)、猪尾猴疟原虫(plasmodiuminui)、诺氏疟原虫(plasmodiumknowlesi)、三日疟原虫(plasmodiummalariae))；疟原虫(蜥阿米巴(sauramoeba))(蜥蜴)；疟原虫(vinckeia))、萨平属(sappinia)、肉孢子虫属(sarcocystis)、四毛滴虫属(tetratrichomonas)、泰累尔氏梨浆虫属(theileria)、弓形虫属(toxoplasma)、毛滴虫属(trichomonas)、三毛滴虫属(tritrichomonas)、锥体虫属(trypanosoma)(达氏锥虫亚属(duttonella)、蛇滴虫亚属(herpetosoma)、小单胞亚属(nannomonas)、裂体锥虫亚属(schizotrypanum)、锥虫亚属(trypanozoon))、泰泽属(tyzzeria)和温扬虫属(wenyonella)。在本发明的另一个实施方式中，原生动物剂选自表1(参见以下)中所列的原生动物组。在本发明的另一个实施方式中，原生动物剂是耐药性原生动物。在本发明的另一个实施方式中，感染或群集由至少两种原生动物剂的混合物引起。在本发明的另一个实施方式中，原生动物剂对选自表2(参见以下)中所列的组的一种或多种化合物是抗性的。在本发明的另一个实施方式中，在原生动物剂暴露于选自以下浓度范围的所述化合物时对于所述化合物是抗性的：0.001μg/ml-10,000μg/ml；0.01μg/ml-1000μg/ml；0.10μg/ml-100μg/ml；和1μg/ml-50μg/ml。在本发明的另一个实施方式中，受试者中的原生动物感染或群集是动物传染病(zoonosis)。在本发明的另一个实施方式中，受试者中的原生动物感染或群集基本上引起选自以下的适应症：锥虫病(由动质体目(kinestoplastorida)，锥体虫科(trypanosamidae)引起)；阿米巴病(amboebiasis)(由肉足虫亚门(sarcodina)，amoebidorida目，内阿米巴科(endamoebidae)引起)；巴贝西虫病(由梨形虫纲(piroplasmida)，巴倍科(babesiidae)引起)；小袋虫病(由纤毛门(ciliphora)，纲毛口目(trichostomatorida)，小袋虫科(balantidiidae)引起)；查加斯病(由动质体目，锥虫科(trypanosomatidae)引起)；隐孢子虫病(由球虫亚纲(coccidea)，隐孢子虫科(cryptosporidiidae)引起)；贾第虫病(由动鞭毛纲(zoomastigophora)，双滴虫目(diplomonadida)，双滴虫科(diplomonadida)，包括兰伯氏贾第虫(giardialamblia)引起)；利什曼病(由动鞭毛纲，锥虫科，利什曼原虫属(leishmania)引起)；疟疾(由疟原虫属，包括恶性疟原虫、间日疟原虫(plasmodiumvivax)、卵形疟原虫(plasmodiumovale)和三日疟原虫引起)；肉孢子虫病(由球虫亚纲(coccidia)，真球虫目(eucoccidiorida)，肉孢子虫科(sarcocystidae)引起)；弓形体病(由球虫亚纲，真球虫目，肉孢子虫科，包括刚地弓形虫(toxoplasmagondii)引起)；圆孢球虫病(由卡晏环孢子球虫(cyclosporacayetanensis)种引起)；由自由生活的阿米巴虫引起的感染(由纳氏虫属、棘阿米巴属和/或巴拉姆希属引起)；非人灵长类中的疟疾(由疟原虫属引起)；微孢子虫病(由比氏肠微孢子虫(enterocytozzonbieneusi)、肠脑炎微孢子虫(encephalitizoonintestinalis)和/或兔脑炎微孢子虫(e.cuniculi)引起)；非典型人锥虫病(路氏锥虫(t.lewisi)、伊氏锥虫(t.evansi)、布氏锥虫(t.brucei)、活泼锥虫(t.vivax)和/或刚果锥虫(t.congolense))；滴虫病(由阴道毛滴虫(trichomonasvaginalis)引起)；阿米巴痢疾(由溶组织内阿米巴(entamoebahistolyticum)引起)；和棘阿米巴病(由棘阿米巴属引起)。在本发明的另一个实施方式中，治疗有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐通过口服施用而施用于受试者。在本发明的另一个实施方式中，治疗有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐与选自表2(参见以下)中所列的化合物的第二抗微生物剂一起施用于受试者。在本发明的另一个实施方式中，治疗有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐通过肠胃外施用而施用于受试者。在本发明的另一个实施方式中，治疗有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐通过局部施用而施用于受试者。在本发明的进一步的方面中，本发明是包含治疗有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐及任选地药学上可接受的赋形剂或载体的抗原生动物药物组合物。在本发明的进一步的方面中，本发明是包含治疗有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐及任选地兽药可接受的赋形剂或载体的抗原生动物兽药组合物。在本发明的另一个实施方式中，组合物包含选自表2(参见以下)中所列的组的另外的抗微生物剂。在本发明的另一个实施方式中，组合物适应于口服施用。在本发明的另一个实施方式中，组合物适应于肠胃外施用。在本发明的另一个实施方式中，组合物适应于局部施用。在本发明的进一步的方面中，本发明是式i的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗受试者的原生动物群集或感染的药物中的用途。在本发明的另一个实施方式中，用途包括向受试者施用治疗有效量的式i的化合物或其药学上可接受的盐。在本发明的另一个实施方式中，式i的化合物以0.1mg/kg-250mg/kg体重的范围内的剂量施用于受试者。在一个优选的实施方式中，化合物以选自于以下的范围内的剂量施用于受试者：0.1mg/kg-100mg/kg体重；0.1mg/kg-50mg/kg体重；1mg/kg-20mg/kg体重；1mg/kg-10mg/kg体重；和2mg/kg-5mg/kg体重。在一个优选的实施方式中，化合物以在1小时内实现选自以下的化合物血浆浓度范围的剂量施用于受试者：0.01μg/ml-100μg/ml；0.1μg/ml-10μg/ml；1μg/ml-8μg/ml。优选地，在1小时后，该剂量实现高于8μg/ml的化合物血浆浓度。优选地，在7小时后，该剂量实现高于8μg/ml的化合物血浆浓度。优选地，在24小时后，该剂量实现高于8μg/ml的化合物血浆浓度。在一个优选的实施方式中，化合物以选自以下的频率施用于受试者：每30分钟；每小时；每2小时；每3小时；每4小时；每5小时；每6小时；每8小时；每12小时；每天一次；每2天；每周一次；每周两次；每2周一次；每月一次；每2月一次；每3月一次；每4月一次；每5月一次；每6月一次；每年一次；每2年一次；和一次。在本发明的另一个实施方式中，药物通过口服施用施用于受试者。在本发明的另一个实施方式中，药物通过肠胃外施用施用于受试者。在本发明的另一个实施方式中，药物通过局部施用施用于受试者。在本发明的进一步的方面中，本发明是在用于治疗或预防受试者的原生动物群集或感染的方法中使用的医疗器械，其中医疗器械包含本发明的组合物。在本发明的另一个实施方式中，医疗器械为选自以下的形式：应用于受试者的原生动物群集或感染的膏药、绷带、敷料或植入物。在本发明的进一步的方面中，本发明一种杀灭原生动物的方法，该方法包括使原生动物与式i的化合物或其药学上可接受的盐接触的步骤。在本发明的进一步的方面中，本发明是式i的化合物或其药学上可接受的盐杀灭原生动物的用途，所述用途包括使原生动物与式i的化合物或其药学上可接受的盐接触的步骤。在本发明的进一步的方面中，本发明是基本上如本文中参照随附的实施例和附图描述的方法、组合物、化合物、器械或用途。在本发明的优选的方面，式i的化合物是氯苯胍(本说明书也称为ncl812，且也称为1，3-双[(e)-(4-氯苯基)亚甲基氨基]胍)，其具有如下的结构：在本发明的一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r7、r9、r12、r13、r15、r16、r17是h；r4是o；r8和r14是cf3；和式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和所有式iv中“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl101)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nh2；a1是n且a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2、r5、r6、r7和r8是h；r4是nh；r9是cl；且式i中a0和a1之间的“----”及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl015)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16、r17是h；r4是nh；r7和r15是f；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和所有式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl021)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r7、r9、r12、r13、r15、r16、r17是h；r4是nh；r8和r14是f；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和所有式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl023)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv，a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r7、r8、r12、r14、r15、r16、r17是h；r4是nh；r9和r13是och3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和所有式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl028)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r7、r9、r12、r13、r15、r16、r17是h；r4是nh；r8和r14是och3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和所有式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl029)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nh2；a1是n；a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2、r5、r6、r8和r9是h；r4是nh；r7是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl030)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16、r17是h；r4是nh；r7和r15是cf3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl035)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16、r17是h；r4是nh；r7和r15是甲基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl038)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r7、r8、r12、r14、r15、r16、r17是h；r4是nh；r9和r13是甲基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl039)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r7、r9、r12、r13、r15、r16和r17是h；r4是nh；r8和r14是甲基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl040)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nh2；a1是n；a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2、r5、r6、r8和r9是h；r4是nh；r7是cf3；且式i中a0和a1之间的“----”及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl041)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nh2；a1是n；a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2、r5、r6、r7和r9是h；r4是nh；r8是cf3；且式i中a0和a1之间的“----”及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl043)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nh2；a1是n；a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2、r5、r6、r8和r9是h；r4是nh；r7是甲基；且式i中a0和a1之间的“----”及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl044)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nh2；a1是n；a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2、r5、r6、r7和r9是h；r4是nh；r8是cl；且式i中a0和a1之间的“----”及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl052)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r7、r9、r12、r13、r15、r16、r17是h；r4是nh；r8和r14是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl054)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是甲基；r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16、r17是h；r4是nh；r7和r15是cf3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl061)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是甲基；r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl062)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nhnh2；a1是n；a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2是甲基，r5、r6、r8和r9是h；r4是nh；r7是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl069)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r7、r9、r12、r13、r15、r16和r17是h；r4是s；r8和r14是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl070)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nh2；a1是n；a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2、r5、r6、r8和r9是h；r4是nh；r7是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl072)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nhnh2；a1是n；a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2是甲基；r5、r6、r8和r9是h；r4是nh；r7是cf3；且式i中a0和a1之间的“----”，及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl073)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14和r16是h；r4是nh；r7、r15和r17是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl074)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14和r16是h；r4是nh；r7是cl；r15是cf3；r17是f；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl078)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7是cl；r15是f；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl079)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7是cl；r12是甲基；r15是cf3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl080)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是cl；r12是甲基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl081)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r15和r16是h；r4是nh；r7和r17是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl082)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14和r16是h；r4是nh；r7和r15是cl；r17是f；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl084)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r15、r16和r17是h；r4是nh；r7是cl；r14是cn；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl086)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r15和r16是h；r4是nh；r7是cl；r17是f；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl088)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是甲基；r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7是cl；r15是cf3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl089)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r9、r12、r13、r16和r17是h；r4是nh；r7和r8键合在一起以形成未取代的苯环；r14和r15键合在一起以形成未取代的苯环；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl093)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中a0是c；a1是n；a2是nh；r1是环己基；r3是nh-n-ch-环己基；r4是nh；r2是h；且式i中a0和a1之间的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl094)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r9、r12、r13和r17是h；r4是nh；r6、r7、r8、r14、r15和r16是oh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl097)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是叔丁基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl099)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r7、r8、r9、r12、r13、r14和r15是h；r4是nh；r5、r6、r16和r17是oh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl101)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r8、r12、r14和r17是h；r4是nh；r6、r7、r9、r13、r15和r16是oh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl104)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r12、r16和r17是h；r4是nh；r7、r8、r9、r13、r14和r15是oh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl097)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r6、r7、r8、r9、r12、r13、r14、r15和r16是h；r4是nh；r5和r17是oh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl107)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r7、r8、r9、r12、r13、r14、r15和r17是h；r4是nh；r6和r16是oh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl108)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r8、r9、r12、r13、r14和r17是h；r4是nh；r6、r7、r15和r16是oh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl111)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是苯基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl112)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是二甲氨基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl113)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r8、r9、r12、r13、r14和r17是h；r4是nh；r6和r16是och3；r7和r15是oh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl117)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是异丙基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl120)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是正丙基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl121)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r8、r9、r12、r13、r14和r17是h；r4是nh；r6、r7、r15和r16是f；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl123)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是cch；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl126)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r7、r8、r9、r12、r13、r14、r15和r17是h；r4是nh；r6和r16是br；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl131)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是丁基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl136)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1是-c(c6h5)-ch-n-且a10是-n-ch-c(c6h5)-；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r7、r8、r9、r12、r13、r14、r15、r16和r17是h；r4是nh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl138)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是ch3s；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl140)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式iii；r3是式vi；a0是c；r2和r21是h；a1和a20是n；a2和a19是nh；a8和a21是s；r4是nh；r10和r11键合在一起以形成取代的苯环；r22和r23键合在一起以形成取代的苯环；且式i中a0和a1之间的“----”，及所有式iii和式vi的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl141)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是甲基；r5、r6、r7、r8、r9、r13、r14、r15、r16和r17是h；r4是nh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl143)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r9、r12、r13、r16和r17是h；r4是nh；r7和r8键合在一起以形成未取代的杂环；r14和r15键合在一起以形成未取代的不饱和的杂环；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl146)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1是-(ch)2-n-且a10是-n-(ch)2-；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是och3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl150)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是oh；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl151)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是乙基；r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl153)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是甲基；r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是br；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl155)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r12、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是cl；r9和r13是nh2；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl157)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是乙基；r5和r17是oh；r6、r8、r9、r13、r14和r16是h；r4是nh；r7和r15是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl158)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是环戊基；r5和r17是oh；r6、r8、r9、r13、r14和r16是h；r4是nh；r7和r15是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl159)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是ocf3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl160)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是甲基；r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是哌嗪-1-基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl161)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是o-ch2-ch3；a1是n；a2是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r2是甲基；r5、r6、r8和r9是h；r4是nh；r7是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl162)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r5、r6、r8、r9、r12、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是scf3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl166)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r6、r8、r9、r12、r13、r14和r16是h；r4是nh；r7和r15是cl；r5和r17是-nh-ch(oh)-ch3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl168)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中a0是c；r1是h；a2和r4是n；r3是nh2；a1是式vii；r2是式vii且r2与r4键合而形成嘧啶环；式i中r2和a0之间及a1和a2之间的“----”是双键；a22是-n-ch-；r24、r25、r27和r28是h；a23、a24、a25、a26和a27是c；且r26是cl。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl179)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是nh2；a1是n；a2和r4是nh；a0、a3、a4、a5、a6和a7是c；r5、r6、r8和r9是h；r2是丁基；r7是cl；且式i中a0和a1之间的“----”，及所有式ii的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl188)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中a0是c；r1是h；a2和r4是n；r3是nh2；a1是式vii；r2是式vii和r2与r4键合而形成嘧啶环；式i中r2和a0之间及a1和a2之间“----“的是双键；a22是-n-ch-；r24、r25、r27和r28是h；a23、a24、a25、a26和a27是c；且r26是ch3。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl195)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中a0是c；r1是h；a2和r4是n；r3是nh2；a1是式vii；r2是式vii且r2与r4键合而形成嘧啶环；式i中r2和a0之间及a1和a2之间的“----”是双键；a22是-n-ch-；r24、r25、r27和r28是h；a23、a24、a25、a26和a27是c；且r26是oh。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl196)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中a0是c；r1是h；a2和r4是n；r3是nh2；a1是式vii；r2是式vii且r2与r4键合而形成嘧啶环；式i中r2和a0之间及a1和a2之间的“----”是双键；a22是-n-ch-；r24、r25、r27和r28是h；a23、a24、a25、a26和a27是c；且r26是br。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl193)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中a0是c；r1是h；a2和r4是n；r3是nh2；a1是式vii；r2是式vii且r2与r4键合而形成嘧啶环；式i中r2和a0之间及a1和a2之间的“----”是双键；a22是-n-ch-；r24、r25、r26、r27和r28是h；且a23、a24、a25、a26和a27是c。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl199)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中a0是c；r1是h；a2和r4是n；r3是nh2；a1是式vii；r2是式vii且r2与r4键合而形成嘧啶环；式i中r2和a0之间及a1和a2之间的“----”是双键；a22是-n-c(ch3)-；r24、r25、r27和r28是h；a23、a24、a25、a26和a27是c；且r26是cl。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl204)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2、r6、r8、r9、r12、r13、r14和r16是h；r4是nh；r7和r15是cl；r5和r17是f；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl216)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是甲基；r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是ch3；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl217)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中r1是式ii；r3是式iv；a1和a10是n；a2和a9是nh；a0、a3、a4、a5、a6、a7、a11、a12、a13、a14和a15是c；r2和r12是甲基；r5、r6、r8、r9、r13、r14、r16和r17是h；r4是nh；r7和r15是叔丁基；且式i中a0和a1之间的“----”，所有式ii和式iv的“----”是双键。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl219)：在本发明的另一个优选的实施方式中，化合物是式i的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或前药，其中a0是c；r1是h；a2和r4是n；r3是nh2；a1是式vii；r2是式vii且r2与r4键合而形成嘧啶环；式i中r2和a0之间及a1和a2之间的“----”是双键；a22是-n-ch-；r24、r25、r27和r28是h；a23、a24、a25、a26和a27是c；且r26是cf3。本发明的这一实施方式的化合物的实例包括(ncl221)：在本发明的另一方面中，本发明是选自图1中显示的化合物列表的化合物。在一个优选的实施方式中，化合物是选自以下化合物的化合物：ncl231至ncl275。在进一步的方面，本发明是包含本发明的化合物的组合物。在再进一步的方面，本发明是包含本发明的化合物以及药学上可接受的赋形剂和/或载体的药物组合物。在再进一步的方面，本发明是包含本发明的化合物以及可接受的赋形剂和/或载体的兽药组合物。本文中使用的术语具有其在本领域中的通常含义，除非本文中有规定。如本文中使用的，术语氯苯胍，ncl812(也称为1，3-双[(e)-(4-氯苯基)亚甲基氨基]胍)指的是具有以下化学结构的化合物：优选地，原生动物剂选自表1中所列的属、亚属和种。表1附图说明本发明的进一步特征在以下几种其非限制性实施方式的说明中更完全地描述。这种说明仅为了举例说明本发明的目的而被包括。其不应理解为对以上给出的本发明的宽泛总结、公开和说明的限制。该说明参照附图进行，其中：图1显示化合物ncl001至ncl230的化学名称和化学结构；图2是说明ncl099抗十二指肠贾第虫的活性的图；图3是说明ncl812和甲硝唑对十二指肠贾第虫滋养体的粘附的作用的图；图4是说明ncl812抗十二指肠贾第虫的活性的曲线图；图5是说明ncl062抗十二指肠贾第虫的活性的曲线图；图6是说明甲硝唑抗十二指肠贾第虫的活性的曲线图；图7是基于n-倍最小抑制浓度说明红细胞裂解的曲线图；图8呈现了说明暴露于ncl812的贾第虫滋养体的超微结构的变化的照片。a-b：对照0.1％dmso，c：甲硝唑对照，d-g：ncl812暴露的滋养体(1hr)；图9是说明按照实施例7从制剂b的ncl812和ncl099累积释放的曲线图；图10是说明10μm的ncl化合物抗布氏锥虫(黑色)和杜氏利什曼原虫(灰色)的活性的图；图11是说明9种ncl化合物的理化和代谢特征的表格；图12是说明ncl026、ncl195、ncl259和ncl812的血浆浓度-时间分布的曲线图；和图13是说明在ip施用43mg/kg的平均剂量后雄性swiss远交小鼠中ncl195的血浆浓度的曲线图。具体实施方式综述在详细描述本发明之前，应理解本发明不限于本文中公开的特定示例方法或组合物。还应理解本文中使用的术语是仅用于描述本发明的特定实施方式的目的，且不意图是限制性的。本文中引用的所有公开文献，包括专利或专利申请，通过引用全文并入。但是，本文中提及的应用简单地称为用于描述和公开可以结合本发明使用的在该公开文献中所指的过程、方案和试剂的目的。本文中所称的任何公开文献的引用不构成为承认该发明不能通过在行发明而先于这样的公开。另外，本发明的实施利用了本领域技能内的常规微生物技术，除非另外说明。这样的常规技术是技术人员已知的。如本文及所附权利要求中使用的，单数形式“一”、“1”和“该”包括复数，除非上下文明确表明其它的情况。除非另外说明，本文中使用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域中的普通技术人员通常理解的相同含义。虽然与本文描述的那些材料和方法类似或等同的任何材料和方法可以用于实施本发明，本文中描述了优选的材料和方法。本文描述的本发明可以包括一个或多个值的范围(例如，大小、浓度、剂量等)。值的范围理解为包括该范围内的所有值(包括限定该范围的值)及导致与紧邻限定该范围的边界的值的值相同或基本上相同的结果的邻近该范围的值。本发明的药物组合物或兽药组合物根据施用方法、目标部位、患者的生理状态和施用的其它药物而以多个单位剂量施用。例如，适合于口服施用的单位剂型包括固体剂型(如粉剂、片剂、丸剂和胶囊)及液体剂型(如酏剂、糖浆、溶液和悬浮液)。活性成分也可以以无菌液体剂型肠胃外施用。胶囊可以包含活性成分及非活性成分如粉末载体、葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露糖醇、淀粉、纤维素或纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸、糖精钠、滑石、碳酸镁等等。如本文中使用的短语″治疗有效量″是指足以抑制与原生动物感染或群集相关的原生动物生长的量。也就是说，所称的根据本发明的方法或组合物施用治疗有效量的式i的化合物是指其中显著的杀原生动物(protozoacidal)或原生动物抑制(protozoastatic)活性导致原生动物感染的基本抑制的治疗效果。如本文中使用的，术语“治疗有效量″是指足以提供所需的生物学、治疗和/或预防结果的组合物的量。所需的结果包括原生动物感染或群集的消除或者疾病的征兆、症状或原因的减轻和/或缓解或者生物系统的任何其它所需改变。任何单个病例中的有效量可以通过本领域技术人员使用常规试验确定。与药物组合物或兽药组合物相关，有效量可以是推荐的调节患病状态及其征兆或症状的剂量。有效量根据所使用的组合物和采用的施用途径而不同。有效量考虑药代动力学和药效学特征以及特定患者的各种因素(如年龄、体重、性别等)和疾病影响的区域或致病微生物来优化。如本文中所称的，术语“治疗”或“处理”是指完全或部分地消除病症的症状和征兆。例如，在原生动物感染或群集的治疗中，治疗完全或部分地消除感染的征兆。优选地在感染的治疗中，治疗减少或消除感染原生动物传染病原体而导致微生物治愈。如本文中所称的，术语″原生动物″是指大的真核单细胞微生物域的成员。尽管长度通常为几微米，原生动物具有多种形状，范围从球形到棒形和螺旋形且可以作为单个细胞存在或可以以可变数目和形状的线性链或簇存在。优选地术语″原生动物″及其形容词″原生动物″、“原生动物的”是指原生动物。该术语可以指抗原生动物敏感株或抗原生动物抗性株。本文中所称的术语″抗性原生动物″是指表现出对表2中所列的以下抗微生物剂中任何一种的抗性的原生动物分离株。表2：抗微生物剂药物和兽药可接受的盐包括保持本公开的化合物的生物学有效性和性质且不是在生物学上或其它方面不利的盐。在许多情况中，本文公开的化合物能够通过氨基和/或羧基或与其相似的基团的存在而形成酸式和/或碱式盐。可接受的碱加成盐可以从无机和有机碱制备。仅举例来说，源自无机碱的盐包括钠、钾、锂、铵、钙和镁盐。源自有机碱的盐包括，但不限于伯胺、仲胺和叔胺的盐，如仅举例来说，烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、环烷基胺、二(环烷基)胺、三(环烷基)胺、取代的环烷基胺、二取代的环烷基胺、三取代的环烷基胺、环烯基胺、二(环烯基)胺、三(环烯基)胺、取代的环烯基胺、二取代的环烯基胺、三取代的环烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、杂芳基胺、二杂芳基胺、三杂芳基胺、杂环基胺、二杂环基胺、三杂环基胺、混合的二-和三-胺，其中胺上的取代基中至少两个是不同的且选自烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、杂芳基、杂环基等。还包括其中两个或三个取代基与氨基氮一起形成杂环基或杂芳基的胺。药学和兽药上可接受的酸加成盐可以从无机酸和有机酸制备。仅举例来说，可以使用的无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等等。仅举例来说，可以使用的有机酸包括乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等等。本公开中可使用的药学和兽药可接受的化合物盐可以通过常规的化学方法从母体化合物(其包含碱性或酸性部分)合成。一般地，这样的盐可以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量量的适宜碱或酸在水中或在有机溶剂中或在这两者的混合物中反应来制备；一般地，非水性介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是优选的。合适的盐的列表在remington′spharmaceuticalsciences.17thed.，mackpublishingcompany，easton，pa.(1985)，p.1418中找到，其公开内容通过引用合并于此。这样的可接受盐的实例是碘化物、乙酸盐、苯基乙酸盐、三氟乙酸盐、丙烯酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、o-乙酰氧基苯甲酸盐、萘-2-苯甲酸盐、溴化物、异丁酸盐、苯基丁酸盐、γ-羟基丁酸盐、β-羟基丁酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、己酸盐、辛酸盐、氯化物、肉桂酸盐、柠檬酸盐、癸酸盐、甲酸盐、富马酸盐、乙醇酸盐、庚酸盐、马尿酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、酞酸盐、对苯二酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、丙炔酸盐、丙酸盐、苯基丙酸盐、水杨酸盐、癸二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、焦硫酸盐、亚硫酸盐、重亚硫酸盐、磺酸盐、苯磺酸盐、p-溴苯基磺酸盐、氯苯磺酸盐、丙磺酸盐、乙磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐、甲磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、p-甲苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、酒石酸盐等等。本发明的药物组合物或兽药组合物可以以常规方式与其它药学上可接受的赋形剂一起(如果需要)配制成适合口服、肠胃外施用或局部施用的形式。施用模式可以包括肠胃外(例如，肌肉内、皮下和静脉内)施用、口服施用、局部施用和直接施用于感染部位如眼内、耳内(intraaural)、子宫内、鼻内、乳房内、腹膜内、病灶内等。本发明的药物组合物或兽药组合物可以配制用于口服施用。传统的非活性成分可以添加以提供所需的颜色、味道、稳定性、缓冲能力、分散或其它已知特征。实例包括以红色铁氧化物、硅胶、月桂基硫酸钠、二氧化钛、可食用白墨水等等。常规的稀释剂可以用于制备压缩片剂。片剂和胶囊两者可以制造为用于在一段时间内连续释放药物的持续释放组合物。压缩片剂可以是糖包衣的或薄膜包衣的片剂或者用于在胃肠道中选择性崩解的肠包衣片剂的形式。用于口服施用的液体剂型可以包含着色和/或调味以提高患者顺应性。作为实例，包含本发明的化合物的口服制剂可以是包含以下赋形剂中任何一种或组合的片剂：磷酸氢钙二水合物、微晶纤维素、乳糖、羟丙基甲基纤维素和滑石。本文描述的组合物可以是液体制剂的形式。优选的液体组合物的实例包括溶液、悬浮液、注射溶液、胶囊中包含的溶液。液体制剂可以包含包括溶解于溶剂中的治疗剂的溶液。一般地，可以使用治疗剂溶解于其中且可以施用于受试者的具有所需的作用的任何溶剂。一般地，可以使用具有所需作用的任何浓度的治疗剂。制剂在一些变化中是作为不饱和的、饱和的或超饱和的溶液的溶液。溶剂可以是纯溶剂或可以是液体溶剂组分的混合物。在一些变化中形成的溶液是原位胶凝制剂。可以使用的溶剂和溶液类型是这种药物递送技术中的熟练技术人员公知的。本文描述的组合物可以是液体悬浮液的形式。液体悬浮液可以按照本领域中已知的标准过程制备。液体悬浮液的实例包括微乳液、复合化合物的形成和稳定的悬浮液。液体悬浮液可以是未稀释的或浓缩的形式。用于口服使用的液体悬浮液可以包含合适的防腐剂、抗氧化剂和本领域中已知作为分散剂、助悬剂、增稠剂、乳化剂、湿润剂、助溶剂、稳定剂、矫味剂和甜味剂、着色剂等中的一种或多种发挥作用的其它赋形剂。液体悬浮液可以包含甘油和水。本文描述的组合物可以是口服膏剂的形式。口服膏剂可以按照本领域中已知的标准过程制备。本文描述的组合物可以是用于注射(如肌肉内注射)的液体制剂的形式，并使用本领域中已知的方法制备。例如，液体制剂可以包含聚乙烯吡咯烷酮k30和水。本文描述的组合物可以是局部制剂的形式。局部制剂可以是洗剂或乳膏的形式，其使用本领域中已知的方法制备。例如，洗剂可以用水性或油性基质配制且可以包括本领域中已知作为增粘剂、乳化剂、芳香剂或香料、防腐剂、螯合剂、ph调节剂、抗氧化剂等发挥作用的一种或多种赋形剂。例如，包含本发明的一种或多种化合物的局部制剂可以是包含以下赋形剂中的任何一种或组合的凝胶：peg8000、peg4000、peg200、甘油、丙二醇。ncl812化合物可以使用soluplus(basf，www.soluplus.com)进一步配制成固体分散体且可以用以下赋形剂中的任何一种或组合配制：peg8000、peg4000、peg200、甘油和丙二醇。对于气溶胶施用，本发明的组合物以细分的形式与非毒性表面活性剂和推进剂一起提供。表面活性剂优选可溶于推进剂中。这样的表面活性剂可以包括脂肪酸的酯或部分酯。本发明的组合物或者可以配制用于通过注射递送。作为实例，化合物经由任何一种以下途径通过注射递送：静脉内、肌肉内、皮内、腹膜内和皮下。本发明的组合物可以使用纳米技术药物递送技术如本领域中已知的那些技术配制。基于纳米技术的药物递送系统具有改善的生物利用度、患者顺应性和低副作用的优势。本发明组合物的制剂包括基于化合物溶解性制备纳米悬浮液或纳米乳液形式的纳米颗粒。纳米悬浮液是通过自下而上(bottom-up)或自上而下(top-down)的技术制备并使用合适的赋形剂稳定化的纳米尺寸药物颗粒。这一途径可以应用于可能具有不良水性和液体溶解性的本发明化合物，以增强饱和溶解性和改善溶解特性。这一技术的实例在sharma和garg(2010)(puredrugandpolymer-basednanotechnologiesfortheimprovedsolubility，stability，bioavailability，andtargetingofanti-hivdrugs.advanceddrugdeliveryreviews，62：p.491-502)中给出。饱和溶解性理解为取决于温度、溶解介质的性质和颗粒尺寸(＜1-2μm)的化合物特异性的常数。本发明的组合物可以以纳米悬浮液的形式提供。对于纳米悬浮液，表面积的提高可以导致饱和溶解性的提高。纳米悬浮液是胶体药物递送系统，由低于1μm的颗粒组成。本发明的组合物可以是包括纳米晶体悬浮液、固体-液体纳米颗粒(sln)、聚合物纳米颗粒、纳米胶囊、聚合物胶束和树状分子的纳米悬浮液的形式。纳米悬浮液可以使用自上而下的途径制备，其中较大的颗粒可以通过本领域中已知的多种技术减小到纳米尺寸，包括湿磨和高压均质化。或者，纳米悬浮液可以使用自下而上的技术制备，其中颗粒的受控沉淀可以从溶液完成。本发明的组合物可以以纳米乳液的形式提供。纳米乳液通常是透明的水包油或油包水双相体系，液滴尺寸在100-500nm的范围内，且目标化合物存在于疏水相中。纳米乳液的制备可以改善本文描述的本发明化合物的溶解性，从而导致更好的生物利用度。纳米尺寸悬浮液可以包括用于静电或立体稳定化的试剂如聚合物和表面活性剂。sln形式的组合物可以包含可生物降解的脂质如甘油三酯、甾醇类、蜡和乳化剂(如大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂和泊洛沙姆)。sln制剂的制备可以包括将药物溶解/分散在熔融脂质中，接着热或冷均质化。如果使用热均质化。熔融的脂质相可以分散在水相中并制备乳液。这可以通过冷却固化以获得sln。如果使用冷均质化，脂质相可以在液氮中固化并研磨到微米尺寸。所得的粉末可以在水性表面活性剂溶液中进行高压均质化。如本文所述的式i的化合物可以溶解在油/液体脂质中形成乳液制剂。纳米乳液可以使用高能和低能液滴减小技术制备。高能方法可以包括高压均质化、超声和微流化。如果使用低能方法，溶剂扩散和相转化将产生自发纳米乳液。用于纳米乳液中的脂质可以选自甘油三酯、大豆油、红花油和芝麻油。其它组分如乳化剂、抗氧化剂、ph调节剂和防腐剂也可以添加。组合物可以是控释制剂的形式且可以包括可降解的或非可降解的聚合物、水凝胶、有机凝胶或改变化合物释放的其它物理构建体。应理解这类制剂可以包括另外的非活性成分，其被添加以提供所需的颜色、稳定性、缓冲能力、分散或其它已知的所需特征。这样的制剂可以进一步包括脂质体，如乳液、泡沫、胶束、不溶性单层、液晶、磷脂分散体、片状层等。用于本发明中的脂质体可以由标准囊泡形成脂质形成，一般包括中性和带负电的磷脂和甾醇如胆固醇。本发明的制剂可以具有化合物的提高的溶解性和/或稳定性的优势，特别是对于使用纳米技术制备的那些制剂。这种提高的稳定性和/或式i的化合物的稳定性对于口服和/或肠胃外剂型可以提高生物利用度和增强药物暴露量。在整个本说明书中，除非上下文另外要求，否则词语″包含″或变型如″包括″或″含有″理解为暗示包括所阐述的整数或整数组，但不排除任何其它整数或整数组。实施例实施例1：ncl812类似物的制备材料和方法ncl812获得了具有960mg/g的确定效能(即，96％)的分析级ncl812。粉末在研究地点避直射阳光和在室温下存储在密封的样品容器中。制备等份(1ml)的原液(在dmso中包含25.6mg/ml的ncl812)并储存在-80℃下和紧接在使用前解冻。ncl812类似物的合成和测试如图1中确定的类似物ncl001至ncl275使用本领域中的标准方法合成。作为实例，用于制备化合物ncl097、ncl157、ncl179、ncl188、ncl195和ncl196的方法如下：ncl097(2，2’-双[(3，4，5-三羟基苯基)亚甲基]碳亚胺二酰肼盐酸盐)3，4，5-三羟基苯甲醛(412.0mg，2.673mmol，2.21eq.)和n，n′-二氨基胍盐酸盐(152.0mg，1.211mmol)在etoh(5ml)中的悬浮液在100℃下进行微波辐射(150w)10min。反应然后允许冷却到环境温度。收集所得的沉淀并用冷etoh(5ml)和et2o(5ml)洗涤以提供作为浅棕色固体的碳亚胺二酰肼(carbonimidicdihydrazide)(369.0mg，77％)。m.p.292℃(decomp.).1hnmr(300mhz，dmso-d6)δ9.06(brs，6h)，8.25-8.01(m，4h)，6.83(s，4h).13cnmr(75mhz，dmso-d6)δ152.2，149.7，146.2，136.5，123.7，107.4.lrms(esi+)：361.95[m+1]+。ncl157(2，2’-双[(2-氨基-4-氯苯基)亚甲基]碳亚胺二酰肼盐酸盐)2-氨基-4-氯-n-甲氧基-n-甲基苯甲酰胺的合成。向2-氨基-4-氯苯甲酸(5.6691g，33.041mmol)、n，o-二甲基羟胺盐酸盐(5.7504g，58.954mmol，1.78eq.)、n-(3-二甲氨基丙基)-n′-乙基碳二亚胺盐酸盐(7.7925g，40.649mmol，1.23eq.)和n-羟基苯并三唑水合物(5.2371g，38.793mmol(基于无水)，1.17eq.)在dmf(100ml)中的溶液添加二异丙基乙胺(18.0ml，13.4g，104mmol，3.15eq.)，且棕色溶液在环境温度下搅拌7h。反应然后真空浓缩，然后用1mnaoh(100ml)稀释和用ch2cl2(3×100ml)萃取。合并的有机提取物用1mhcl(100ml)洗涤，之后在mgso4上干燥并真空浓缩以提供棕色糖浆。这种油然后在真空下于60℃下进一步干燥以提供作为棕色糖浆的粗制weinreb酰胺(7.021g，99％)，其在静置时结晶。粗物质在没有进一步纯化的情况下使用。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.24(d，j＝8.4hz，1h)，6.62(d，j＝18hz，1h)，6.54(dd，j＝8.4，1.9hz，1h)，4.75(s，2h)，3.48(s，3h)，3.24(s，3h)。13cnmr(101mhz，cdcl3)δ169.2，148.4，137.1，130.6，116.6，116.1，115.0，61.1，34.0。2-氨基-4-氯苯甲醛的合成。粗制2-氨基-4-氯-n-甲氧基-n-甲基苯甲酰胺(751.1mg，3.532mmol)分割成ca.120mg批次且各批次溶解于thf(10ml)中和冷却到0℃，接着lialh4(thf中2m，0.5ml)添加到各批次，和溶液搅拌16h，从而允许反应达到室温。反应用饱和nh4cl(1ml)淬灭，接着合并、用饱和nahco3(160ml)稀释和用chcl3(2×150ml，1×75ml)萃取。合并的有机物在mgso4上干燥和真空浓缩以提供作为黄色/橙色晶体的粗制苯甲醛(463.3mg，85％)。该物质在没有进一步纯化的情况下使用。1h(400mhz，cd3od)9.77(d，j＝0.7hz，1h)，7.46(d，j＝8.3hz，1h)，6.83-6.71(m，1h)，6.63(dd，j＝8.4，1.9hz，1h)。13cnmr(101mhz，cd3od)δ194.6，153.0，142.5，138.4，118.3，116.8，116.1。2，2’-双[(2-氨基-4-氯苯基)亚甲基]碳亚胺二酰肼盐酸盐的合成。2-氨基-4-氯苯甲醛(128.0mg，0.823mmol，1.78eq.)和n，n′-二氨基胍盐酸盐(58.0mg，0.462mmol)在etoh(2ml)中的悬浮液在60℃下进行微波辐射(100w)5分钟。大部分溶剂然后真空除去，添加etoh(1ml)且烧瓶转移到冰箱中以实现结晶。收集所得的沉淀并用etoh(1ml)洗涤以提供作为浅黄色固体的碳亚胺酸二酰肼(21.0mg，13％)。1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ11.71(brs，2h)，8.40(s，2h)，8.37(s，2h)，7.29(d，j＝8.4hz，2h)，6.87(d，j＝2.0hz，2h)，6.73(brs，4h)，6.59(dd，j＝8.3，2.0hz，2h)。13cnmr(101mhz，dmso-d6)δ152.1，151.5，148.9，136.0，134.7，115.1，114.5，112.8。ncl179(4，6-双(2-(4-氯苯亚甲基)肼基)嘧啶-2-胺)2-氨基-4，6-二肼基嘧啶(67.3mg，0.434mmol)和4-氯苯甲醛(198.8mg，1.414mmol，3.26eq.)在etoh(25ml)中的悬浮液回流下加热16h。在此之后，移除冷凝器且溶液浓缩到大约1ml和所得的沉淀热过滤并用et2o(10ml)洗涤以提供作为灰白色无定形粉末的氨基嘧啶(42.8mg，25％)。m.p.275℃(decomp.)。1hnmr(400mhz，dmso)δ10.70(s，2h)，8.02(s，2h)，7.67(d，j＝8.4hz，4h)，7.52(d，j＝8.4hz，4h)，6.28(s，1h)，5.85(s，2h)。13cnmr(101mhz，dmso)δ162.8，162.6，138.8，134.1，133.1，128.9，127.6，73.5。ncl188((e)-2-(1-(4-氯苯基)亚戊基)肼-1-甲脒盐酸盐)1-(4-氯苯基)戊酮(1.8319g，9.3146mmol，1.95eq.)和氨基胍盐酸盐(527.6mg，4.773mmol)在etoh(15ml)中的悬浮液在65℃下加热16h。粗产物冷却到环境温度，然后用et2o(60ml)稀释并冷却到0℃以沉淀未反应的氨基胍盐酸盐(174.5mg)。母液然后真空浓缩且残留物溶解于et2o(20ml)中。溶液然后沸腾并加入己烷(10ml)以提供作为乳膏固体的甲脒。1hnmr(400mhz，dmso)δ11.54(s，1h)，7.99(d，j＝8.7hz，2h)，7.90(s，3h)，7.47(d，j＝8.6hz，2h)，2.91-2.82(m，2h)，1.48-1.32(m，4h)，0.89-0.84(m，3h)。13cnmr(101mhz，dmso)δ156.2，153.8，134.8，134.4，128.7，128.4，28.1，26.6，22.0，13.8。ncl195(4，6-双(2-((e)-4-甲基苯亚甲基)肼基)嘧啶-2-胺)2-氨基-4，6-二肼基嘧啶(58.9mg，0.380mmo1)和4-甲基苯甲醛(0.10ml，100mg，0.832mmol，2.19eq.)在etoh(4ml)中的悬浮液在回流下加热16h。反应混合物冷却到环境温度，接着收集球粒样沉淀，用et2o(20ml)洗涤。“球粒”然后压碎，且固体用et2o(10ml)进一步洗涤以提供作为白色“蓬松”粉末的嘧啶(85.8mg，63％)。m.p.274-276℃。1hnmr(400mhz，dmso)δ10.51(s，2h)，8.00(s，2h)，7.54(d，j＝8.0hz，4h)，7.26(d，j＝7.9hz，4h)，6.26(s，1h)，5.77(s，2h)，2.34(s，6h)。13cnmr(101mhz，dmso)δ162.8，162.6，140.1，138.4，132.5，129.4，126.0，73.3，21.0。ncl196(4’，4′-((1e，1′e)-((2-氨基嘧啶-4，6-二基)双(肼-2-基-1-亚基))双(甲基亚基))二酚)2-氨基-4，6-二肼基嘧啶(70.4mg，0.454mmol)和4-羟基苯甲醛(140.3mg，1.149mmol，2.53eq.)在etoh(3ml)中的悬浮液在回流下加热16h。反应混合物冷却到环境温度，接着收集沉淀，用et2o(25ml)洗涤以提供作为灰白色粉末的嘧啶(91.4mg，55％)。m.p.298℃(decomp.)。1hnmr(400mhz，dmso)δ10.31(s，2h)，9.74(s，2h)，7.94(s，2h)，7.48(d，j＝8.6hz，4h)，6.83(d，j＝8.6hz，4h)，6.20(s，1h)，5.70(s，2h)。13c(101mhz，dmso)δ162.7，162.5，158.3，140.5，127.7，126.3，115.7，73.0。实施例2：贾第虫属粘附分析目的.本研究的目的是测定ncl099和ncl812的抗贾第虫活性。方法.贾第虫株wb生长直到汇合(在具有10％胎牛血清的tyi-s-33培养基中生长和维持)。对于该分析，汇合培养物的培养基用新鲜的tyi-s-33培养基替换。培养物然后冷休克(在冰上)40分钟以使滋养体脱离。培养物的细胞密度调节为1x106细胞/ml且1ml添加到早已包含1ml的稀释化合物的24孔板的各孔(见下文)。盖玻片置于各孔的底部且试样在厌氧环境(烛罐)中在37℃下孵育2.5小时。在孵育后，除去盖玻片、空气干燥和用diff-quik(romanowski染料变体)染色。盖玻片使用polymount加载到载玻片上。10x倍放大率的图像在每个盖玻片的5个随机位置采集。dotcount自由软件用于计数每个图像的细胞数，且这一数据使用graphpadprismv6进行分析。化合物的原液在dmso中以25.6mg/ml制备。化合物在tyi-s-33培养基中1∶100稀释。1∶2的系列稀释然后在24孔板中的tyi-s-33培养基中进行。结果.本研究的结果在图2-3中显示。图2显示ncl099抗十二指肠贾第虫的体外活性。与对照相比，粘附细胞数的显著降低在11μg/ml(p＝0.0099)、38μg/ml(p＝0.001)和128μg/ml(p＝＜0.0001)的ncl099浓度下观察到(图2)。活性的提高随ncl099浓度的提高而看到。图3显示ncl812和甲硝唑抗十二指肠贾第虫的体外活性。粘附滋养体数量的显著降低对于甲硝唑(p＝0.0002)和ncl812(p＝＜0.0001)观察到。样品暴露5小时而不是2.5小时。结论.本研究证明ncl099和ncl812抑制贾第虫细胞粘附于表面的能力，从而限制这一病原体引起疾病的能力(因为粘附是引起疾病所必需的)。实施例3：刃天青还原分析目的.为测定ncl812和ncl062抗十二指肠贾第虫的体外活性。方法.贾第虫滋养体生长直到汇合。培养基用新鲜培养基替换，且它们冷休克40分钟(如上)。细胞稀释到～500000细胞/ml的浓度且100μl添加到分析板的各孔(除了仅培养基对照)。试样在厌氧环境(烛罐)中在37℃下孵育42小时。alamarbluetm添加达到10％的浓度且样品在厌氧环境中再孵育6小时。在孵育后，各样品的吸光度在570和630nm下读取。计算刃天青(alamarbluetm)的百分还原且数据用graphpadprismv6软件进行分析。试验设置：分析在200μl总体积中在96孔板中进行。100μl的ncl812或ncl062(dmso中25.6mg/ml的浓度)或者甲硝唑(dmso中5mg/ml的浓度)原液添加到9.9ml的tyi-s-33培养基中，然后在相同的培养基中1∶2系列稀释。细胞如上添加。结果.结果显示于图4-6中。测试的所有三种化合物(ncl812、ncl062和甲硝唑)显示滋养体代谢活性的降低(通过刃天青还原的百分比的降低指示)。两种ncl化合物在与甲硝唑相比时显示更高的活性。结论.ncl812和ncl062两者显示出针对十二指肠贾第虫滋养体的体外抑制活性。实施例4：红细胞溶血分析目的.本研究的目的是测定ncl812、ncl099和ncl062针对哺乳动物细胞的体外毒性。方法.全绵羊血从thermofisherscientific获得。红细胞通过在1500g下离心10分钟与其它血液组分分离并用盐水洗涤3次。红细胞在盐水中稀释到～1x1010细胞/ml的浓度。在dmso中稀释的50μl的ncl化合物(见下文)添加到1.5mleppendorf管且500μl的稀释红细胞添加到各管。红细胞在37℃下伴随轻柔振摇(75rpm)与化合物孵育30分钟。在孵育后，细胞置于冰上5分钟，然后以1500rpm离心10分钟以使细胞成团。除去上清液并在盐水中系列稀释。上清液和稀释液的吸光度在550nm处记录。样品裂解相对于在蒸馏水中100％裂解的细胞进行比较并使用graphpadprismv6软件进行分析。结果.本研究的结果显示在图7中(1-128μg/ml测试的ncl062，2-256μg/ml测试的ncl812，8-1024μg/ml测试的ncl099)。图7显示作为各种浓度下阳性对照(水中100％裂解的血液细胞)的百分比的细胞裂解量。结论.本研究证明各化合物在哺乳动物细胞(红细胞)中引起毒性效应所需的浓度远高于影响原生动物细胞(贾第虫)所需的浓度。本研究也证明，当与ncl812和ncl062相比时，ncl099表现为与哺乳动物细胞相比具有对于细菌和原生动物细胞的更高选择性。实施例5：透射电子显微镜研究目的.为测定ncl812对十二指肠贾第虫的超微结构的影响。方法.贾第虫wb株生长直到汇合(与以上相同)且老的培养基用包含6μg/mlncl812、25μg/ml甲硝唑或0.1％dmso(对照)的新鲜培养基替换。样品在37℃下孵育1小时(ncl处理的)或4小时(甲硝唑和dmso对照)，然后冷休克以使滋养体脱离。处理的样品在900xg下离心10分钟并用冷盐水洗涤两次。最终的细胞团重悬在预冷的固定剂(1.25％戊二醛，pbs中的4％多聚甲醛，及4％蔗糖，ph7.2)中并放置过夜。样品在2％四氧化锇溶液中后固定1小时并通过分级乙醇系列(70-100％)脱水。样品包埋在环氧树脂中并用乙酸双氧铀和柠檬酸铅染色，然后在feitecnaig2spirit透射电子显微镜上观察。结果.本研究的结果显示于图8中。该图显示与对照(a-c)相比，ncl处理的滋养体(d-g)的超微结构的重度变化。观察到液泡的产生和质膜的崩溃。结论.ncl812引起十二指肠贾第虫的超微结构的显著变化。实施例6：化合物的制剂以下制剂使用本领域中的标准方法制备。制剂a-局部制剂-具有本发明的化合物的peg-基凝胶4.0gpeg4000；3.5gpeg200；0.6g丙二醇；1.9g水；和0.204g化合物(例如，ncl099)peg4000、peg200和丙二醇混合并加热到150℃和直到所有固体晶体溶解。化合物添加到水中并超声处理30分钟直到完全悬浮。化合物溶液和凝胶溶液混合并允许冷却和固化。制剂a很可能显示可接受的粘度、皮肤施用的方便性、均匀的悬浮及一致和精细的质地。制剂b-局部制剂-具有本发明的化合物的peg-基凝胶3.0gpeg4000；1.0gpeg8000；3.0gpeg200；1.0g丙二醇；1.9g水；和0.202g化合物(例如，ncl099)peg4000、peg8000、peg200和丙二醇混合并加热到150℃和直到所有固体晶体溶解。化合物(例如，ncl099)添加到水中并超声处理30分钟直到完全悬浮。化合物溶液和凝胶溶液混合并允许冷却和固化。制剂b显示可接受的粘度、皮肤施用的方便性、均匀的悬浮及一致和精细的质地。制剂c-局部制剂-具有化合物-soluplus的peg-基凝胶2.5gpeg4000；4.0gpeg200；2.5g丙二醇；1.0g水；和1.8g化合物-soluplus的固体悬浮液soluplus购自basf(www.soluplus.com)。化合物-soluplus使用本领域中的标准方法制备。peg4000、peg200、化合物-soluplus和丙二醇混合并加热到150℃和直到所有固体晶体溶解。添加水和然后溶液进行超声处理。溶液允许冷却和固化。制剂c显示可接受的粘度、皮肤施用的方便性、均匀的悬浮及一致和精细的质地。制剂d-片剂制剂30mg脱水磷酸氢钙；80mg微晶纤维素；50mg乳糖；8mg羟丙基甲基纤维素；1.5mg滑石；10mg化合物(例如ncl099)赋形剂称重并混合5分钟。混合物进料到压片机的料斗中且机器按照本领域中的标准程序操作。制剂d显示可接受的片剂硬度、崩解性和脆性。制剂e-口服悬浮液2.0ml甘油；1.5ml无水乙醇；600mgncl812；知至60ml媒介(orasweet和oraplus，1∶1)。ncl812粉末通过75μm筛筛分。600mg筛分的ncl812与2.0ml甘油和1.5ml无水乙醇混合。混合物置于研钵中并手工研磨直到所有ncl812均匀悬浮。悬浮液超声处理30分钟。媒介(55ml的orasweet和oraplus混合物)然后添加到悬浮液并再研磨10分钟。体积通过转移到量筒中用oraplus和orasweet混合物累积到60ml。制剂e显示可接受的悬浮和显示可接受的短期稳定性。制剂f-肌肉内注射剂20mg/ml聚乙烯吡咯烷酮k30(pvpk30)；0.09mg/mlncl812；和50ml水。2％w/v的pvpk30溶液通过添加1.0g的pvpk30到50mlmilliq水中制备。溶液然后置于超声发生器中30分钟以平衡且4.5mg的ncl812添加到pvp溶液和以10rpm的最大速度置于培养摇床上24小时的时间，控制温度为25±1℃。溶液转移到5ml小瓶并检查净度、外观、ph和短期稳定性。溶液的ph是7.25。制剂f显示可接受的透明度和短期稳定性。实施例7：ncl812和ncl099从制剂b的释放目的：本研究的目的是测量ncl812和ncl099从实施例6中制剂的制剂b的释放。方法：franz扩散池用于定量ncl812和ncl099从其局部制剂的释放率。5毫升的无水乙醇(其选择作为所需的释放介质)加载到报告室中。接收液的温度使用水夹套保持恒定，在32±1℃。选择具有0.45μm孔隙大小的乙酰纤维素膜(pallcorporation)并置于供体和受体腔室之间。这之后，多个测试样品(制剂b)加载到供体腔室中。1毫升的接收液通过采样口以0.25、0.50、0.75、1、2、3、4、5、6、7、8和24小时的规律时间间隔收集。1毫升的新鲜无水乙醇立即返回到受体腔室。uv-hplc用于分析所得到的接收液的内容物。结果和结论：图9显示ncl812和ncl099随时间的累积释放。本研究证明制剂b提供ncl812和ncl099的可接受的释放分布。实施例8：化合物ncl812、ncl001-ncl275的nmr谱列表nmr谱分析使用本领域中的标准方法对化合物ncl812、ncl001-ncl275进行。nmr谱的列表显示于表3中。实施例9：ncl类似物231-247和ncl219的抗贾第虫活性目的：本研究的目的是使用刃天青还原分析测定ncl219和ncl231-ncl247抗十二指肠贾第虫的体外活性。方法：贾第虫滋养体生长直到汇合。培养基用新鲜培养基替换并冷休克40分钟。化合物在dmso中制备并以原液的1/100稀释开始在dmso中2倍系列稀释(例如，128mg/ml原液起始稀释是128μg/ml)。2μl的稀释液添加到适宜的孔且198ul的tyi-s-33培养基添加到各孔。细胞稀释到～500000细胞/ml的浓度且100μl添加到分析板的各孔(除仅培养基对照)。试样在厌氧环境(烛罐)中在37℃下孵育5小时。除去培养基并用100μl的温pbs替换，然后添加alamarbluetm到10％的浓度。样品在厌氧环境中孵育直到显色。在孵育后，各样品的吸光度在570和630nm下读取。计算刃天青(alamarbluetm)的百分还原(使用以下公式)且数据用graphpadprismv6软件进行分析。用于计算alamarblue的百分还原的公式是((eoxi630xa570)-(eoxi570xa630))/((ered570xc630)-(eredxc570))x100，其中：eoxi630＝34798，eoxi570＝80586，a570＝570nm下的吸光度，a630＝630nm下的吸光度，ered570＝155677，ered630＝5494，c630＝630nm下阴性对照孔的吸光度和c570＝570nm下阴性对照孔的吸光度。结果和结论：本分析中测试的化合物中三种显示出对十二指肠贾第虫的优良的体外抑制活性，ncl245(9.6um)、ncl246(5.4um)和ncl219(1.03um)。结果显示于表4中。表4*ic50不能计算^仅1个重复5小时后的ic50，24小时后的mic，nc-不收敛的实施例10：ncl类似物的抗锥虫活性背景：锥虫引起显著的人发病率和死亡率，估计每年有130万新病例，导致发生仅由于利什曼原虫的～30000个死亡。除此之外，锥虫如布氏锥虫(trypanosomabrucei)(非洲特有的)对人引起显著的发病率和死亡率(高达660万人受影响)以及造成畜牧业的重大损失(称为那加那病)。当前，对于这些生物体可用的化学疗法是有限的且具有不希望的毒性副作用。在本研究中，我们观察了来自ncl系列(详细信息参见表5)的20个化学类似物抗多囊期(procyclicstage)布氏锥虫和前鞭毛体期杜氏利什曼虫的体外效能。显示出会对任一寄生虫的有希望的体外活性的类似物在体外测试针对小鼠巨噬细胞系(atccraw264.7)的选择性。目的：本研究的目的是：(1)评价20种结构相关的氨基胍(来自ncl系列)抗布氏锥虫和杜氏利什曼虫的的体外抗寄生虫活性；和(2)确定这些化合物相对于哺乳动物细胞对寄生虫的选择性。方法：抗微生物剂(表5)全部溶解于dmso中到10mm的终浓度。戊烷脒(sigma)用作阳性对照并如ncl化合物一样制备。表5.杜氏利什曼原虫筛选。来自在dme-l+bob添加中维持的指数生长培养物的多囊前鞭毛体用于所有分析。化合物初始在10μm下筛选活性。化合物在96孔板中在培养基中稀释到10μm的最终体积。前鞭毛体稀释到～8x105细胞/ml的密度，然后添加到分析板，从而导致96孔板中4x105细胞/ml的最终细胞密度。细胞在27℃下孵育96hr，之后添加alamarblue(thermofisher)。荧光在530nm(激发)和590nm(发射)下读取。在10μm下显示抑制活性的化合物进一步研究以测定ic50值。化合物在96孔板中在细胞生长培养基中三倍系列稀释，使得浓度范围为0.005-10μm且添加前鞭毛体到1x106细胞/ml的终浓度。细胞在27℃下孵育72小时，之后添加alamarblue。荧光如上测量。布氏锥虫筛选.来自在sdm-79培养基中维持的指数生长细胞的多囊前鞭毛体用于所有分析。化合物初始在10μm下筛选活性。化合物在培养基中稀释到20μm的浓度并添加到96孔板。在添加前鞭毛体(终浓度4x105细胞/ml)后，化合物浓度是10μm。细胞在27℃下孵育48hr，之后添加alamarblue并如上所述进行荧光测量。在10μm下显示抑制的化合物进一步表征以测定ic50值。化合物在培养基中三倍系列稀释而导致0.004-10μm范围的终浓度。以4x105细胞/ml的终浓度添加前鞭毛体。细胞在27℃下孵育48小时，之后添加alamarblue。另外，8x105浓度的前鞭毛体暴露于ncl0261.5小时，之后通过以5000rpm离心7分钟除去药物和将细胞重悬于培养基中。细胞在27℃下孵育96小时并每日观察代谢活性(alamarblue分析)和形态变化。对照培养物暴露于dmso而不是ncl026。细胞毒性分析.小鼠巨噬细胞(raw264.7)在补充有l-谷氨酰胺和10％胎牛血清的rpmi1640培养基中生长。细胞在80％汇合时胰蛋白酶化且每3-4天分培养。对于细胞毒性分析，细胞稀释到2x104细胞/ml的最终细胞浓度且198μl添加到96孔板的各孔。细胞在37℃下5％co2中于湿润培养箱中孵育2小时，之后添加ncl化合物(2μl/孔，在dmso中预先稀释)。喜树碱、tritonx和仅dmso用作对照。细胞暴露于化合物24小时。细胞的代谢活性使用wst-1分析系统(rochelifescience)测定。除去上清液，添加具有10％wst-1的100μl的pbs到各孔并孵育1hr，之后在450nm下读取吸光度。化合物的选择性指数通过将针对巨噬细胞的ic50除以针对寄生虫的ic50来确定。ic50通过graphpadprism软件测定。结果：氯苯胍和19个结构类似物在10μm下筛选抗多囊前鞭毛体期的杜氏利什曼原虫和布氏锥虫的活性。在测试的化合物中，70％在杜氏利什曼原虫中显示≥90％的代谢活性降低，而15％在布氏锥虫中显示相似的代谢活性降低(参见图10)。多囊期的布氏锥虫和前鞭毛体期的杜氏利什曼原虫分别暴露于化合物48或96hr，之后使用刃天青染料测量其作用。试验一式三份地进行。p＝戊烷脒。误差±sd。在针对杜氏利什曼原虫具有活性的那些化合物中，ncl026、ncl028、ncl041、ncl042、ncl062、ncl099、ncl195、ncl201、ncl219和ncl246具有100％抑制寄生虫的最大活性。针对布氏锥虫，ncl026、ncl062和ncl246具有最大抑制效应。ncl026、ncl062和ncl246针对两种寄生虫物种是非常有效的。完成了具有抗寄生虫活性的化合物选择的进一步研究以测定ic50值。对于ncl028、ncl099、ncl166、ncl201、ncl245、ncl246和ncl812测定针对杜氏利什曼原虫的ic50值。ic50范围为0.37μm(ncl028)至6.48μm(ncl245和ncl246)。ic50值用6个最有效的类似物ncl024、ncl026、ncl062、ncl171、ncl195和ncl246针对布氏锥虫测定。在这些类似物中，ncl026、ncl171和ncl195是最有效的，ic50值分别为1.7、1.4和1.5μm。测定的最高ic50值对于ncl246为4.2μm。进行恢复试验以测定布氏锥虫在短期暴露于ncl026后恢复的能力。在1.5hr暴露后，进行选择的时间段以测定gi50或ic50。选择性指数(si)通过将巨噬细胞的gi50除以寄生虫的ic50确定。si≥10被认为对于寄生虫是选择性的。试验一式三份地重复。误差±sd。基于这一试验，化合物的选择性范围为0.57-27.9。一般认为＜10的选择性指数是相对非选择性的，而＞10的选择性指数认为是对于寄生虫是选择性的。基于这一规则，仅一种化合物(ncl171)可以被认为对于布氏锥虫是相对选择性的，而4种化合物在体外对于杜氏利什曼原虫是高度选择性的(ncl028、ncl099、ncl113和ncl219)。表6结论.本研究证明几个测试的化合物在体外显示针对杜氏利什曼原虫或布氏锥虫的高抑制活性。基于体外选择性指数，ncl171表现为对于布氏锥虫是最有希望的，而ncl028、ncl099和ncl219表现为对于杜氏利什曼原虫是最有希望的。实施例11：ncl026、ncl028、ncl099、ncl171、ncl177、ncl195、ncl217、ncl259和ncl812的理化和代谢性质目的：本研究的目的是评估ncl026、ncl028、ncl099、ncl171、ncl177、ncl195、ncl217、ncl259和ncl812的理化和代谢性质。九种化合物的理化和代谢特征使用计算机模拟和试验技术的组合来评估且结果总结在图11中。各化合物的计算的理化参数一般在通常与具有“药物-样”性质的化合物相关的限度内。但是，ncl026和ncl171的极性表面积值接近对于良好膜渗透性推荐的上限，从而反映了在这两种结构中相对高的杂原子数。所有化合物在中性ph条件下显示出低的动力学溶解度，除了较中等的ncl259。大多数的化合物在酸性条件(ph2)下显示较高的溶解度，表明在低ph下电离作用的提高。测量的分配系数值在ph7.4下相对高，logd7.4值范围为3.6至＞5.3。logd值在酸性条件(ph3)下较低，但是仍然被认为是中等至高(2.8至4.9)。观察的ph依赖性溶解度和分配系数结果与通过化合物的结构预测的其碱性特性一致。九种化合物的代谢稳定性在人和小鼠肝微粒体中评估。化合物中的五种，ncl026、ncl177、ncl195、ncl259和ncl812，在两个物种的肝微粒体中显示低降解率(eh值＜0.3)。ncl099、ncl171和ncl217显示中等至高的降解率(eh值0.49至0.88)，各化合物的降低率在物种之间是大致相当的。ncl028在人肝微粒体中显示低降解率和在小鼠肝微粒体中显示高降解率，其对于这一化合物可能表明物种之间代谢的显著差异。在任一物种中没有任何化合物在对照(非-辅因子)孵育中存在可测量的降解，表明不存在造成其总体代谢率的不依赖于主要辅因子的代谢。试验方法使用chemaxonjchem软件计算的理化参数各化合物的理论理化值通过用于excel软件的jchem使用chemaxon化学盒计算。计算的参数及对于其相关性的简单阐述在下面给出。分子量(mw)：理想地，mw应小于500以实现良好的膜渗透性。极性表面积(psa)：使用简化的2-维建模方法计算的，其已针对更复杂的3-维建模策略进行验证。该值在ph＝7.4下计算，其考虑了分子的电离作用。一般认为的是，小于大约的psa值提供可接受的口服药物吸收和膜渗透性。自由旋转键：不在环或限制系统中且不与氢原子结合的单键的数目。frb应当小于或等于10以实现良好的膜渗透性(参见d.veber等，j.med.chem.2002，45，2615-2623)。h键供体/受体：氢键供体/受体的数目给出与膜渗透性逆相关的分子氢键键合能力的指示。理想地，h键供体的数目应当低于5且h键受体的数目应当低于10。pka：化合物酸度的基础理化测量。在药物开发的情况中，该值本身仅指明电离作用是否可能在生理条件下是相关的。使用浊度测定的溶解度估计dmso中的化合物掺入ph6.5磷酸盐缓冲液或最终dmso浓度为1％的0.01mhcl(大约ph2.0)中。样品然后通过浊度测定法分析以测定溶解度范围(参见c.d.bevan和r.s.lloyd，anal.chem.2000，72，1781-1787)。logd测量测试化合物的分配系数值(logd)通过其色谱保留性质针对具有已知分配系数值的一系列标准化合物的相关性来估计。采用的方法是由lombardo开发的方法的基于梯度hplc的变型(参见f.lombardo等，j.med.chem.2001，44，2490-2497)。微粒体稳定性孵育方法：代谢稳定性分析通过在37℃和0.4mg/ml蛋白质浓度下与人和小鼠肝微粒体(xenotech，分别lot#1210057和1310211)一起孵育各测试化合物(以1μm)来进行。代谢反应通过添加nadph-再生系统启动(即，nadph是cyp450-介导的代谢需要的辅因子)且在60分钟孵育期内的各时间点通过添加包含安定作为内标的乙腈来淬灭。包括对照样品(不包含nadph)(且在2、30和60分钟淬灭)以监测在不存在辅因子的情况下的潜在降解。分析条件：仪器：与watersacquityuplc耦合的watersmicromassxevog2qtof；检测：mse模式下的正电喷雾电离；锥孔电压30v；柱：ascentisexpressamide柱(50x2.1mm，2.7μm)；lc条件：梯度循环时间：4分钟；注射体积：5μl；流速：0.4ml/min；流动相：乙腈-水梯度，具有0.05％甲酸代谢物；鉴别：本研究中不包括代谢物筛选，但是，因为使用mse模式(其允许同时获取低和高碰撞能ms谱)获取数据，如有必要，可以在之后进行事后代谢物检索。计算：测试化合物浓度对时间数据与指数衰减函数拟合以确定底物消耗的一级速率常数。在其中具有与一级动力学的明显偏离的情况中，仅曲线的最初线性部分用于确定降解速率常数(k)。使用本领域中的标准方法，各底物消耗速率常数然后用于计算：[1]降解半衰期，[2]体外固有清除率值(clint，体外)；[3]预测的体内肝固有清除率值(clint)；[4]预测的体内血液清除率值(cl血液)；和[5]预测的体内肝提取比率(eh)。以下换算参数在以上计算中假定(表7)。表7aring等(2011)journalofpharmaceuticalscince，100：4090-4110.体内肝提取比率的预测：基于体外测试化合物降解的相对速率获得的微粒体预测肝提取比率(eh)用于将化合物分类为低(＜0.3)、中等(0.3-0.7)、高(0.7-0.95)或非常高(＞0.95)提取的化合物。结果：九种化合物的理化和代谢特征使用计算机模拟和试验技术的组合进行评估且结果总结于图11中。实施例12：雄性swiss远交小鼠中iv施用后ncl026、ncl195、ncl259和ncl812的暴露目的：本研究的目的是评价雄性swiss远交小鼠中5mg/kgiv施用后ncl026、ncl195、ncl259和ncl812的系统暴露量。方法：ncl026、ncl195、ncl259和ncl812的系统暴露在体重26.2-32.1g的非禁食雄性swiss远交小鼠中进行研究。小鼠在整个给药前和给药后采样期间自由获取食物和水。各化合物通过浓注iv施用到尾静脉中(溶媒peg400中的20％(v/v)dmso，1ml/kg剂量体积，n＝8小鼠/化合物)。在施用后，在给药后5、15、30、120、240和480min收集血样(对于各化合物n＝2小鼠/时间点)。从各小鼠获得最多两个样品，样品通过颌下采血(大约120μl；清醒采样)或末端心脏穿刺(0.6ml；在小鼠用吸入异氟烷麻醉时)采集。未收集尿样，因为小鼠在研究期间饲养在层状笼(beddedcage)中。血液直接收集到包含肝素作为抗凝剂的聚丙烯eppendorf管中，且包含稳定混合物(含有(具有edta的蛋白酶抑制剂混合物)和氟化钾)以最小化血液/血浆样品中测试化合物的活体外降解的可能。一旦收集，血样立即离心，除去上清血浆，并储存在-80℃下直到使用本领域中的标准方法通过lc-ms进行分析。各化合物在由peg400中的20％(v/v)dmso组成的溶媒中施用。制剂通过在添加peg400之前将化合物溶解于dmso中而制备。制剂在给药之前不过滤并在制备的2.5h内施用于小鼠。各化合物的相应制剂的等份(n＝2)中其平均测量浓度对于ncl026、ncl195、ncl259和ncl812分别是4.58、4.31、5.26和5.25mg/ml。施用于各小鼠的剂量基于iv制剂中测量的浓度、剂量体积和单个小鼠体重来计算。血浆浓度对时间数据使用非区室方法分析(winnonlinversion6.3.0.395)。各药代动力学参数的标准计算使用本领域中的标准方法来计算。给药ncl812的一个小鼠在给药后几分钟开始表现出异常行为(狂乱的，活动过度的)；这一小鼠进行麻醉且血液在给药后15min收集。在本研究中没有其它动物表现为显示任何不良反应或化合物相关的副作用。血浆样品中观察到溶血的证据，但这很可能是由于iv制剂中使用的溶剂(peg400中的20％(v/v)dmso)，该溶剂是需要的，因为测试化合物在水性制剂溶媒中的有限溶解性。结果：ncl026、ncl195、cl259和ncl812的血浆浓度-时间曲线显示于图12中。药代动力学参数呈现于表8中。所有化合物表现出中等到长的表观终末消除半衰期。表8ncl026ncl195ncl259ncl812测量的剂量(mg/kg)4.84.45.45.3表观t1/2(h)1.52.42.98.2b血浆cl(ml/min/kg)100.616.356.0a9.5b血浆vss(l/kg)6.92.612.8a5.9bauc0-inf(h*μm)2.512.55.5a27.9ba时间零时的血浆浓度不能通过前两个测量的log-线性回归回归确定，且因此设定为首次观察的测量值。如此，0至5min的auc(且因此auc0-inf)被低估和基于auc0-inf计算的参数仅为近似值。b终末消除期未很好限定，值仅为近似值。实施例13：ncl195在雄性swiss远交小鼠中ip施用后的暴露目的：本研究的目的是获得ncl195在以50mg/kg的目标剂量ip施用后的血浆暴露的初步指示。方法：制剂通过在添加peg400之前将固体ncl195溶解于dmso中(到20％(v/v)的最终体积)来制备，从而产生澄清黄色溶液，其在制备的30分钟内给药于小鼠。最终制剂中测量的ncl195浓度是21.9mg/ml，得到43mg/kg的平均施用剂量。在施用后，血样收集直到给药后24h(n＝2只小鼠/时间点)。从各小鼠获得最多两个样品，样品通过颌下采血(大约120μl；清醒采样)或末端心脏穿刺(0.6ml；在小鼠用吸入异氟烷麻醉时)采集。未收集尿样，因为小鼠在研究期间饲养在层状笼中。血液直接收集到包含肝素作为抗凝剂的聚丙烯eppendorf管中，且包含稳定混合物(含有(蛋白酶抑制剂混合物)、氟化钾和edta)以最小化血液/血浆样品中ncl195的活体外降解的可能。一旦收集，血样立即离心，除去上清血浆，并储存在-20℃下直到使用本领域中的标准方法通过lcms进行分析。结果：在ip施用43mg/kg剂量的ncl195后没有在任何小鼠中观察到不良反应或化合物相关的副作用。血浆浓度-时间曲线(图13)表明ncl195在给药后快速吸收。在初始的7.5h给药后时间段中，血浆浓度保持高于3-4μg/ml，但是浓度在给药后7.5和24h之间回落到0.2-0.5μg/ml。假定2-倍的剂量增加导致ncl195暴露量的成比例提高，这些数据表明ncl195以100mg/kg(作为溶液制剂)ip施用将导致＞8μg/ml的血浆浓度下至少7.5小时的暴露。实施例14：ncl类似物抗克氏锥虫(trypanosomacruzi)的活性背景：查加斯病，也称为美洲锥虫病，是由原生动物寄生虫克氏锥虫(t.cruzi)引起的潜在致命的疾病。克氏锥虫在锥蝽携带者的感染排泄物通过叮咬处或通过哺乳动物宿主的完整粘膜接种时传播。媒介传播限于北美洲、中美洲和南美洲地区。在病区和非病区中，其它感染途径包括输液、器官和骨髓移植及先天性传播。归因于污染的食物和饮料的爆发已经在南美洲北部报告，其中涉及野生携带者群体和哺乳动物储存宿主的传播循环是突出的。感染在不存在有效治疗的情况下是终生的。克氏锥虫感染的最重要的后果是心肌病，其在20-30％的感染者中发生。世界卫生组织估计在2015年，全世界约6百万至7百万人被感染，主要在拉丁美洲。仅有两种药物，硝基呋喃硝呋莫司和硝基咪唑苄硝唑，具有抗克氏锥虫感染的确定疗效。但是，这些药剂中的每一种在有效性和安全性方面具有显著的限制。在患有急性查加斯病的患者中和在患有早期先天性查加斯病的患者中，苄硝唑和硝呋莫司两者都减轻症状的严重性，缩短临床病程和减少寄生虫血症(parasitaemia)的持续时间；但急性期的治愈率仅为80-90％左右。涉及患有慢性克氏锥虫感染的儿童的苄硝唑研究显示仅约60％的治愈率(基于治疗后3-4年转化为阴性血清学试验结果的转化率)。硝呋莫司的使用在最多70％的患者中与胃肠道副作用(厌食、体重减轻、恶心和呕吐)相关。神经毒性效应包括刺激性、失眠、定向障碍和震颤。少见的但更严重的副作用包括触觉异常、多神经病和周围神经炎。苄硝唑的使用通常与皮肤病学不良反应相关，一般是响应于抗组胺剂的轻度皮疹。但是，严重或剥脱性皮炎或与发烧和淋巴结病相关的皮炎造成治疗的立即中断。在疗程后期中发生的剂量依赖性的外周神经病使治疗的立即中止成为必要。虽然骨髓抑制是少见的，但其发生造成治疗的立即中断。缺乏安全和有效的治疗导致查加斯病被分类为具有重大公共健康影响的被忽视的寄生虫感染。查加斯病的全球费用估计超过70亿美元(lee，b.y.，k.m.bacon，m.e.bottazzi和p.j.hotez(2013).″globaleconomicburdenofchagas’disease：acomputationalsimulationmodel.″thelancetinfectiousdiseases13(4)：342-348)，且仍然存在着鉴定和开发改善的治疗的迫切和持续的需要。目的和方法：在鉴定用于治疗查加斯病的新药剂的尝试中，氯苯胍和79个类似物抗克氏锥虫的生物活性按照keenan等(keenan，m.，m.j.abbott，p.w.alexander，t.armstrong，w.m.best，b.berven，a.botero，j.h.chaplin，s.a.charman，e.chatelain，t.w.vongeldern，m.kerfoot，a.khong，t.nguyen，j.d.mcmanus，j.morizzi，e.ryan，i.scandale，r.a.thompson，s.z.wang和k.l.white(2012).″analoguesoffenarimolarepotentinhibitorsoftrypanosomacruziandareefficaciousinamurinemodelofchagasdisease.″journalofmedicinalchemistry55(9)：4189-4204)、buckner及其同事(buckner，f.s.，c.l.verlinde，a.c.laflamme和w.c.vanvoorhis(1996).″efficienttechniqueforscreeningdrugsforactivityagainsttrypanosomacruziusingparasitesexpressingbeta-galactosidase.″antimicrobialagentsandchemotherapy40(11)：2592-2597)及vanvoorhis和eisen(vanvoorhis，w.c.andh.eisen(1989).″fl-160.asurfaceantigenoftrypanosomacruzithatmimicsmammaliannervoustissue.″thejournalofexperimentalmedicine169(3)：641-652)描述的方法在体外筛选试验中评估。用于测定ic50的体外克氏锥虫分析。克氏锥虫分析使用表达β-半乳糖苷酶基因的tulahuen锥虫成虫。寄生虫通过在l6细胞中连续传代体外维持。简言之，l6细胞接种到96孔平底组织培养板中并在37℃下在5％co2中孵育24h以允许细胞粘附。克氏锥虫成虫然后以3的感染复数添加，且平板再孵育48h以允许感染建立。所有步骤使用补充有10％胎牛血清(fbs，bovogen)的rpmi培养基1640(没有酚红)进行。细胞外锥虫成虫然后被除去且ncl化合物以一式三份进行的七点系列稀释添加。苄硝唑(epichemptyltd.)包括作为对照。在与化合物96h孵育后，比色剂氯酚红-fl-d-半乳吡喃糖苷(cprg，roche)与0.3％v/vnonidetp-40一起添加。在4-6h后，观察到在通过活克氏锥虫的试剂异化后的颜色变化并使用dynex酶标仪在530nm下读取吸光度。％抑制通过以下公式计算：％抑制＝100-[(具有化合物的克氏锥虫-仅化合物)/(仅克氏锥虫-仅培养基)]×100。对于各化合物，％抑制值用于产生计算ic50的标准曲线。试验进行至少两次，且使用平均值。结果：80个ncl化合物的ic50值呈现于表9中。表9结论：值得注意的是，6个化合物具有低于10μm的ic50而30个化合物具有低于或等于20μm的ic50值。ncl系列提供了具有抗克氏锥虫活性的药剂的丰富来源。当前第1页12