一种益气活血药物在制备促进心肌血管生成药物中的应用的制作方法

本发明涉及一种益气活血的药物的新用途，特别涉及一种益气活血药物在制备促进心肌血管生成药物中的应用。

背景技术：

冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)一直是危害人类健康甚至生命的严重疾病，冠心病的发生，致使相当数量的患者不同程度的丧失劳动能力，既给患者造成生活上的困难，肉体上的痛苦，又给国家、社会带来一系列问题和严重损失。

缺血性心肌病是冠心病中比较严重的一种类型，且其并发症多、死亡率较高，其5年病死率为50％—80％，在我国心血管疾病死亡人数中占主要地位。缺血性心肌病主要为冠状动脉多支弥漫性狭窄或梗阻，引起的心肌长期广泛性缺血、心肌细胞变性、坏死和心肌纤维化，最终导致心肌变薄、心肌功能失常，心脏呈球形扩大和心力衰竭。因此，缺血性心肌病预防及治疗的重点为积极防治冠状动脉粥样硬化进展及恢复心肌血液灌注，改善心肌缺血，延缓心肌细胞的进一步破坏及心肌纤维化的发展。

血管新生(angiogenesis)的概念最早是由Hertrg、Folkman等人提出的，主要是指内皮细胞在缺血区原有毛细血管或微血管上基础上通过增殖和迁移到缺血组织中,以芽生或套迭的形式在原有的血管处生成新的毛细血管。血管新生贯穿于机体的整个生理病理过程，是一个非常复杂的过程，主要包括血管生成、血管发生和动脉生成3种方式，而血管新生的过程始终是受到促生长因子及抑制因子严密调控的，两种因子的平衡或失平衡决定了血管的新生状态，也就是说当促生长因子占主导地位时，血管新生即可发生。血管新生过程中的促血管新生因子主要包括血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子口(TGFB)、血管生成素(Ang)、血小板衍化生长因子(PDcF)、一氧化氮(N0)等。而理论基础研究及临床试验都表明，血管内皮生长因子(VEGF)是众多因子中特异性最强的一种，其他血管生成因子大都通过增强VEGF的表达来发挥其促血管生成的作用。因此，目前治疗性血管新生的主要机制为增加缺血心肌促血管因子含量，也就是增加VEGF的表达，从而促进血管新生，建立侧支循环。血管内皮生长因子(VEGF)被称为血管渗透因子，是一种内皮细胞的特异性促有丝分裂原，它可促进血管内皮细胞分裂、增殖、迁移、趋化，从而形成新的血管，并可以维持内皮细胞的存活，升高血管通透性，还能促进单核/巨噬细胞的迁移，刺激其分泌更多的血管生长因子，间接促进血管生成。除此之外，VEGF还可以动员骨髓中内皮祖细胞进入外周 循环，并定位到缺血组织，分化形成成熟的内皮细胞，形成新的血管。总之，VEGF可通过多种途径发挥其促血管新生作用。

目前促血管新生的治疗方法研究较多且较热的主要包括如下几种：蛋白治疗、基因治疗、干细胞移植、心肌激光血运重建、超声靶向破坏微泡造影剂的治疗等，其机制为通过注射外源性VEGF或者刺激内源性VEGF的分泌来增加缺血区心肌组织中VEGF的含量，促进缺血区心肌血管新生，建立新的侧支循环，改善缺血区心肌血供。但以上方法存在着存在病理性过度表达、机体免疫排斥、致畸致癌、技术要求高不易普及等诸多问题，安全性及有效性需要进一步的实验研究及临床观察。

专利号为201010212568，发明名称为“一种益气活血的药物组合物及其制备方法检测方法和用途”的发明专利公开了一种具有益气活血作用的药物，该药物具有扶正固本，益气活血，行脉止痛的作用。

本发明在前述发明专利的基础上继续对该药物的药效作用进行了深入研究，发现其新用途。

技术实现要素：

本发明目的在于公开一种药物的新用途，特别涉及一种益气活血药物在制备促进心肌血管生成药物中的应用。

本发明的技术方案具体如下：

本发明药物的原料药组成为：

本发明药物的原料药组成优选为：

本发明药物的原料药组成优选为：

本发明药物的原料药组成为：

本发明药物的原料药组成为：

取上述原料药，加入常规辅料，按照常规工艺，制成临床可接受的片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。

本发明药物的制备方法包括如下步骤：

取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪，粉碎成细粉，其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮1-3次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90-95℃时相对密度为1.05～1.15，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90-95℃时相对密度为1.15～1.25的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。

本发明药物的制备方法优选包括如下步骤：

取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪，粉碎成细粉，其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06～1.12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90℃时相对密度为1.20～1.22的清膏，与上述药粉混合，制成片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。

本发明药物制剂中滴丸的制备方法包括如下步骤：

取原料药，用8—12重量倍的水浸40—80分钟，煮沸1—3小时，取出药液，药渣再加6—10重量倍的水煎煮70—110分种，合并二次药液，滤过；药液通过已处理好的JD-1(WLD)大孔吸附树脂柱，树脂用量为原料药重量的1—3倍，控制吸附流速2-4ml/min，吸附完毕，用水冲洗树脂柱至流出液澄清后，用树脂重量2—4倍的60-90％乙醇洗脱，收集洗脱液，后用1—2体积倍水冲洗，合并洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1.20，喷雾干燥，得提取物喷雾干燥药粉，加入常规辅料制备得滴丸。

本发明药物制剂中滴丸的制备方法优选包括如下步骤：

取原料药，用10重量倍的水浸60分钟，煮沸2小时，取出药液，药渣再加8重量倍的水煎煮90分钟，合并二次药液，滤过；药液通过已处理好的JD-1(WLD)大孔吸附树脂柱，树脂用量为原料药重量的1.5倍，控制吸附流速2-4ml/min，吸附完毕，用水冲洗树脂柱至流出液澄清后，用树脂重量3倍的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，后用1.5体积倍水冲洗，合并洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.08-1.15，喷雾干燥，得提取物喷雾干燥药粉，加入常规辅料制备得滴丸。

其中，上述制备方法中喷雾干燥的条件控制为：进料速度为35—40ml/min，雾化速度：25000—35000rpm，进风温度：130—160℃，出风温度：70—80℃。

其中，上述制备方法中喷雾干燥的条件控制优选为：进料速度为37ml/min，雾化速度：30000rpm，进风温度：145～147℃，出风温度：71～76℃。

其中，上述制备方法中得提取物后，滴丸的制备方法还可以为：

称取聚乙二醇-4000，于60—90℃下水浴至彻底溶胀，加入上述提取物喷雾干燥药粉，加入比例为药粉：聚乙二醇-4000＝1：2—6，于80—90℃下保温搅拌均匀，使药粉完全溶解分散在聚乙二醇-4000中；移入滴丸机中，保持滴距和滴温，调整滴制参数为：油浴温度：80—90℃，药液温度：75—85℃，滴盘温度：85—90℃，制冷温度：10—15℃，管口温度：35—40℃，滴头口径为：3mm/5mm，滴速：1滴/1秒-----1滴/7秒；调节开关使液滴适速滴入冷凝剂二甲基硅油或液体石蜡中，药滴经过冷凝收缩成滴丸，收集滴丸，以转速1000-4000转/分离心脱油，再进入筛选干燥机进行筛选干燥，即得本发明药物滴丸。

其中，上述制备方法中得提取物后，滴丸的制备方法还可以优选为：

称取聚乙二醇-4000，于80-85℃下水浴至彻底溶胀，加入上述提取物喷雾干燥药粉，加入比例为药粉：聚乙二醇-4000＝1：4，于85℃下保温搅拌均匀，使药粉完全溶解分散在聚乙二醇-4000中；移入滴丸机中，保持滴距和滴温，调整滴制参数为：油浴温度：85℃，药液温度：80℃，滴盘温度：87℃，制冷温度：12℃，管口温度：37℃，滴头口径为： 3mm/5mm，滴速：1滴/2秒-----1滴/5秒；调节开关使液滴适速滴入冷凝剂二甲基硅油或液体石蜡中，药滴经过冷凝收缩成滴丸，收集滴丸，以转速1500-3000转/分离心脱油，再进入筛选干燥机进行筛选干燥，即得本发明药物滴丸。

本发明带来的有益效果：

通过实验发现，HE染色切片显示，用药组大鼠心肌组织HE染色切片都可见大量存活岛状心肌细胞及新生的薄壁毛细血管，生理盐水对照组大鼠心肌组织HE染色切片可见较少的正常心肌细胞，毛细血管基本消失。

免疫组化检测结果显示，高剂量本发明实施例1用药组VEGF蛋白表达量较中、低剂量组及对照组均显著增加，差异具有统计学意义(P<0.05)；与瑞舒伐他汀相比，中、高剂量本发明实施例1用药组VEGF蛋白表达量显著增加，差异具有统计学意义(P<0.05)。

本发明药物具有明显的促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成的作用，且其作用与剂量呈正相关，中、高剂量给药组较瑞舒伐他汀具有更强的促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成的作用。

附图说明

图1各组缺血区心肌组织HE染色切片(x10)

注：A组：瑞舒伐他汀组(0.75mg·kg-1·d-1)；B组：高剂量给药组(0.27g·kg-1·d-1)；C组：中剂量给药组(0.18g·kg-1·d-1)；D组：低剂量给药组(0.09g·kg-1·d-1)；E组：生理盐水对照组。

图2 4周后各组大鼠心肌梗死后VEGF蛋白检测

备注：A组：瑞舒伐他汀组(0.75mg·kg-1·d-1)；B组：高剂量给药组(0.27g·kg-1·d-1)；C组：中剂量给药组(0.18g·kg-1·d-1)；D组：低剂量给药组(0.09g·kg-1·d-1)；E组：生理盐水对照组。

下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。

实验例1本发明药物片剂-本发明实施例1片(按实施例1制备)在急性心肌梗死大鼠心肌血管新生中的作用研究。

1材料与方法

1.1实验动物与试药

雄性Wistar大鼠60只，周龄为10周，体重约200～250g，平均(241±7)g(购自山东鲁康动物经销中心，青岛大学附属医院动物实验室提供全价营养饲料，每日大鼠日耗饲料量约15g)。按随机数字法分为5组，每组12只，即：A组：瑞舒伐他汀组(0.75mg·kg^-1·d^-1)， B组：高剂量给药组(0.27g·kg^-1·d^-1)，C组：中剂量给药组(0.18g·kg^-1·d^-1)，D组：低剂量给药组(0.09g·kg^-1·d^-1)，E组：生理盐水对照组。所有动物均自由饮食。主要药品包括瑞舒伐他汀(商品名：可定，每片10mg，阿斯利康制药有限公司，批号：152013)和给药组(按照本发明实施例1制得)，瑞舒伐他汀和给药组的给药剂量按人鼠体表面积换算求得，大鼠每日用药等效剂量为：成人每日用药量/鼠与人体表比，根据体质量调整用药。试剂包括VEGF抗体(Santa.CruzBiotechnology)、PDGF抗体(Santa.CruzBiotechnology)、β-action抗体(北京康为世纪生物科技有限公司)和辣根过氧化物酶(HI冲)标记的山羊抗鼠抗体(北京康为世纪生物科技有限公司)；此外还包括PVDF膜、BCA蛋白定量试剂盒(碧云天生物技术研究所)、ECL发光试剂盒(碧云天生物技术研究所)、蛋白提取试剂盒(北京康为世纪生物科技有限公司)、预染蛋白(北京康为世纪生物科技有限公司)、上样缓冲液、凝胶电泳缓冲液、膜电泳缓冲液、TBST洗膜液及其他基础试剂等。各组大鼠灌胃4周后，结扎大鼠冠状动脉前降支制作大鼠急性心肌梗死模型，术后继续灌胃，记录大鼠死亡情况。并于4周后采外周血行血脂(总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇等)、肝肾功等生化化验，处死大鼠，取心肌组织行组织切片HE染色观察心肌梗死区相关的病理学变化，提取梗死区及缺血区心肌组织蛋白，行免疫组化检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达。

1.2主要仪器

包括小型动物呼吸机(上海软隆科技发展有限公司)、低温超速离心机(Backman，美国)、台式高速离心机(Sigma，美国)、DYY-6C型电泳仪(北京市六一仪器厂)、全自动生化分析仪(Sysmex CHEMIX一180，日本)、NIKON ECLIPSE TI光学显微镜(nikon，日本)、4℃冰箱，-20℃冰箱和-80℃冰箱(Thermo Forma ULT Freezer，美国)及组织匀浆机(Fekmar公司)、酶标仪、石蜡包埋机、石蜡切片机、全自动动化学发光仪、电子天平、心电图机(青岛大学附属医院中心实验室)。

1.3急性心肌梗死大鼠模型制作

急性心肌梗死大鼠制作步骤如下：

(1)术前准备：采用巴比妥钠溶液(30mg·kg^-1)腹腔注射麻醉，肌肉注射阿托品1mg/kg抑制呼吸道分泌物，四肢连接心电图导联，左侧胸部及颈部皮肤备皮。

(2)将麻醉、备皮后的大鼠仰卧位固定于实验用木板上，常规消毒铺巾，沿颈部正中切开皮肤，分离组织暴露气管，17号静脉留置针作为插管以45度斜进针，从甲状腺下方1～2个气管环状软骨下缘轻轻水平插入约0.7～1.5cm斜面向上。固定好气管插管，连接呼吸机(潮气量3ml·100g^-1；呼吸频率90次·min^-1；呼吸比l﹕2)。

(3)开胸及暴露心脏：从胸骨左缘心脏搏动明显处纵行切开皮肤约3cm，经左第3、4肋间心间波动最明显处钝性分离皮下组织及肌层，深入穿破胸膜，待动物呼吸平稳后用拉钩拉开胸腔，用止血钳轻轻划破心包膜，挤压两侧胸壁，使心脏弹出胸腔。

(4)结扎左冠状动脉前降支：用小镊子将心尖部向上推起固定，在左心耳下缘与肺动脉圆锥间靠近主动脉根2～3mm处结扎左冠状动脉前降支。结扎后观察心电图变化，以肢体 导联R波振幅明显增高，ST段弓背向上抬高大于0.1mV或者肉眼观察结扎处远端中央颜色变白，室壁搏动减弱为标准。利多卡因1～2滴滴于心脏表面以预防心律失常。成功后，将心脏复位，排气后逐层关闭胸腔。动物苏醒后拔除气管插管，缝合颈部皮肤。大鼠先放入清洁鼠笼，站灯加热，温度维持在35℃～37℃。大鼠完全清醒后转至普通鼠笼中，置于27℃室内正常饲养。术后每只大鼠连续注射青霉素钠3d(40万U·d^-1)，防止切口感染。(5)术后每日仍继续按各组规定给予等量生理盐水或干预药物灌胃治疗。

1.4血脂及肝肾功生化检测

于心肌梗死4周后早晨，大鼠禁食14小时后，腹腔注射水合氯醛麻醉，内眦静脉采血1.5至2mL。室温静置凝血后，3500rpm·分钟^-1离心4分钟，取300μL血清通过全自动生化分析仪测定：血清总胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)；肌酐(Cr)；谷丙转氨酶(ALT)。

1.5梗死区心肌病理组织学观察

心肌梗死4周静脉采血完毕后，处死大鼠后，迅速分离出大鼠心脏，先用生理盐水冲洗心脏表面血液，然后去掉心肌周围的脂肪组织，用滤纸吸干周围水分，大鼠心脏标本行VEGF蛋白检测，其余的沿心脏的长轴方向切除左前降支结扎部位以下心肌组织(包括梗死区、移行区、正常区)，10％中性甲醛溶液中固定，后经过脱水、透明、浸蜡等处理后经石蜡包埋后制成蜡块，间断均匀法地将石蜡连续切片(约4μm)，将切片放置到载玻片后，脱蜡后行HE染色，并在光学显微镜下观察梗死区心肌组织。

1.6缺血及梗死区VEGF蛋白检测

1、样本采集及总蛋白定量：沿心脏横轴距结扎处下端3-6mm处切取左心室梗死区及梗死边缘缺血区心肌组织置于0.7ml裂解液–蛋白酶抑制剂混合液中，匀浆机匀浆、静置30min后12000r·min^-1离心10min，吸取上清液，按照BCA蛋白定量试剂盒说明，应用安图酶标仪行标本蛋白定量，加入上样缓冲液后100℃5min蛋白变性，冷却后混匀、离心、80℃保存。2、免疫印迹法测VEGF蛋白含量：配制15％PAGE.SDS分离胶和6％PAGE.SDS的浓缩胶，每例标本取60ug总蛋白，4℃、60V、2.5h蛋白分离；然后4"C、40V、电转2.5h至PVDF膜上；室温下5％脱脂奶粉封闭液封闭中封闭2h；洗膜，VEGF抗体(1：500稀释)、B.action(1：1000稀释)4℃孵育12h；洗膜，辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗(1：3000稀释)室温孵育2h；洗膜，采用ECL发光法，全自动化学发光仪显影。采用灰度值测量软件测定VEGF及B–action条带光密度值，计算VEGF蛋白相对表达量。

1.7统计分析

实验数据均采用SPSS17.0统计软件进行统计学处理，计量资料均用x±S表示。采用单因素方差分析各组血生化结果、VEGF蛋白表达量，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1大鼠喂养及急性心肌梗死模型建立过程中存活情况

60只Wistar大鼠模型制作过程中存活情况：A组：瑞舒伐他汀组(0.75mg·kg^-1·d^-1)10只，B组：高剂量给药组(0.27g·kg^-1·d^-1)11只，C组：中剂量给药组(0.18g·kg^-1·d^-1)10 只，D组：低剂量给药组(0.09g·kg^-1·d^-1)9只，E组：生理盐水对照组9只。各组灌胃4周后，大鼠死亡原因主要为：喂养不当死亡、术前麻醉过程中麻醉剂剂量过多导致死亡、大鼠横卧时分泌物过多导致窒息死亡、结扎冠状动脉左前降支后缺血严重立即死亡、术后再发心肌梗死死亡、术后感染死亡等。

2.2各组TC、TG、LDL-C等血生化检测结果

各用药组与对照组比较：TC均有所降低，但仅瑞舒伐他汀组(0.75mg·kg^-1·d^-1)及高剂量给药组(0.27g·kg^-1·d^-1)与对照组相比，差异具有显著性意义(P<O.01)；TG也均有所下降，其中高剂量给药组下降最多，但与对照组比较差异无显著性意义(P>O.05)；LDL-C在瑞舒伐他汀组(0.75mg·kg^-1·d^-1)下降最显著，与中、低剂量给药及对照组相比，差异具有显著性意义(P<0.05)。ALT均未见升高，4组用药组与对照组相比，差异均无显著性意义(P>O.05)。Cr均未见升高，4组用药组与对照组相比，差异均无显著性意义(P>0.05)，结果见表1。

表1 各组大鼠血脂、肝功能和肾功能的比较，x±S

注：与对照组比较，¹⁾P<0.01，²⁾P<0.05；与瑞舒伐他汀组比较，³⁾P<0.05

2.3 HE染色心肌组织病理学改变

各组心肌组织HE染色后光镜下可见：E组生理盐水对照组梗死区内存活的正常心肌组织已很难见到，正常肌肉组织已被排列紧密的纤维组织所替代，心肌组织间毛细血管基本消失，偶可见小血管，数量极少。4组用药治疗组梗死区内仍可见大量的正常的呈岛状分布的心肌细胞，相互连接成片分布于胶原纤维束之间，在其中间均匀分布着大量直径大小不一、由一层内皮细胞组成的薄壁小血管。见图1

2.4缺血区心肌组织VEGF蛋白表达结果

在5组大鼠中4周后取心脏组织中梗死区及缺血区心肌，采用western–blot方法检测VEGF蛋白，以β-action为参照计算VEGF蛋白表达相对量。4周后各组组间比较，A组(瑞舒伐他汀组)、B组(高剂量给药组)、C组(中剂量给药组)及D组(低剂量给药组)VEGF蛋白相对表达量均较E组(生理盐水对照组)明显增加,其中B组(高剂量给药组)VEGF表达量最多，且差异均具有统计学意义(P<0.05)。D组(低剂量给药组)与A组(瑞舒伐他汀组)相比VEGF表达量轻度增加，差异无统计学意义；C组(中剂量给药组)与A组(瑞舒伐他汀组)相比VEGF表达量增加，差异有统计学意义(P<0.05)；B组(高剂量给药组)较中剂量、低剂量给药组VEGF表达量明显增加，差异具有显著性意义(P<0.01)；中剂量较低剂量给药组VEGF表达量明显增加，差异具有统计学意义(P<0.05)。见图2，表2。

表2 4周后各组大鼠心肌梗死区VEGF蛋白的表达(x±s)

备注：与对照组比较，¹⁾P<0.05；与高剂量给药组比较,²⁾P<0.05；与瑞舒伐他汀组比较，³⁾P<0.05。

4结论

本发明药物具有明显的促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成的作用，且其作用与剂量呈正相关，中、高剂量本发明药物较瑞舒伐他汀具有更强的促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成的作用。

下述实施例均能实现上述实验例所述的效果。

具体实施方式

实施例1：本发明药物片剂

取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪，粉碎成细粉，其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06～1.12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90℃时相对密度为1.20～1.22的清膏，与上述药粉混合，制成颗粒，干燥，压制成1000片(小片)，包糖衣或薄膜衣片，或压制成500片(大片)，包薄膜衣，即得。小片每片重0.3g，每日服用3次，一次4～6片；大片每片重0.6g，每日服用3次，一次2～3片。用于促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成。

实施例2：本发明药物胶囊剂

取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪，粉碎成细粉，其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06～1.12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并浓缩至90℃时相对密度为1.20～1.22的清膏，与上述药粉混合，制成胶囊剂。用于促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成。

实施例3：本发明药物颗粒剂

取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪，粉碎成细粉，其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06～1.12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回 收乙醇，并浓缩至90℃时相对密度为1.20～1.22的清膏，与上述药粉混合，制成颗粒剂。用于促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成。

实施例4：本发明药物丸剂

取上述原料药，加入常规辅料，按照常规工艺制成丸剂。用于促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成。

实施例5：本发明药物口服液

取上述原料药，加入常规辅料，按照常规工艺制成口服液。用于促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成。

实施例6：本发明药物注射剂

取上述原料药，加入常规辅料，按照常规工艺制成注射剂。用于促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成。

实施例7：本发明药物滴丸

取原料药，用10重量倍的水浸60分钟，煮沸2小时，取出药液，药渣再加8重量倍的水煎煮90分钟，合并二次药液，滤过；药液通过已处理好的JD-1(WLD)大孔吸附树脂柱，树脂用量为原料药重量的1.5倍，控制吸附流速2-4ml/min，吸附完毕，用水冲洗树脂柱至流出液澄清后，用树脂重量3倍的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，后用1.5体积倍水冲洗，合并洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.08-1.15，喷雾干燥，得提取物喷雾干燥药粉，加入常规辅料制备得滴丸，丸重49-52mg/粒，口服，一次10粒，一日3次。用于促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成。

实施例8：本发明药物滴丸

取原料药，用10重量倍的水浸60分钟，煮沸2小时，取出药液，药渣再加8重量倍的水煎煮90分钟，合并二次药液，滤过；药液通过已处理好的JD-1(WLD)大孔吸附树脂柱，树脂用量为原料药重量的1.5倍，控制吸附流速2-4ml/min，吸附完毕，用水冲洗树脂柱至流出液澄清后，用树脂重量3倍的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，后用1.5体积倍水冲洗，合并洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.08-1.15，喷雾干燥，喷雾干燥的条件为：进料速度为37ml/min，雾化速度：30000rpm，进风温度：145～147℃，出风温度：71～76℃，得提取物喷雾干燥药粉；称取聚乙二醇-4000，于80-85℃下水浴至彻底溶胀，加入上述提取物喷雾干燥药粉，加入比例为药粉：聚乙二醇-4000＝1：4，于85℃下保温搅拌均匀，使药粉完全溶解分散在聚乙二醇-4000中；移入滴丸机中，保持滴距和滴温，调整滴制参数为：油浴温度：85℃，药液温度：80℃，滴盘温度：87℃，制冷温度：12℃，管口温度：37℃，滴头口径为：3mm/5mm，滴速：1滴/2秒-----1滴/5秒；调节开关使液滴适速滴入100﹟二甲基硅油或液体石蜡中，药滴经过冷凝收缩成滴丸，收集滴丸，以转速1500-3000转/分离心脱油，再进入筛选干燥机进行筛选干燥，即得本发明药物滴丸，丸重50mg/粒，口服，一次10粒，一日3次。用于促进VEGF蛋白表达及缺血区心肌血管生成。