本发明涉及水果中有效成分提取的技术，更加具体地，涉及一种梨幼果总酚提取方法。
背景技术：
植物/水果多酚是广泛存在于植物/水果体内的重要次生代谢产物，具有抗氧化、抗肿瘤、保护肝脏等多种生理功能。植物/水果多酚在粮食、蔬菜中含量较少，但在水果及谷物皮层中含量较高。
梨是我国第三大水果，含有多种如熊果苷、绿原酸、香草醛等多酚类物质，具有一定的抗氧化保健功能。研究表明，在成熟果实中这些多酚物质的相对浓度不高，但是梨幼果中含量十分丰富。
在生产中，由于生理落果或疏花疏果等栽培管理的需要，大量幼果被遗弃，造成了多酚类生物资源的浪费。
为此，本发明提供了一种梨幼果总酚提取方法。
技术实现要素：
本发明旨在提供一种梨幼果总酚提取方法，以便高效地提取梨幼果总酚。
根据本发明的一方面，提供了一种梨幼果总酚提取方法，包括以下步骤：
(1)将梨幼果切成薄条，用液氮冷冻，然后经粉碎机粉碎；
(2)称取粉碎后的果肉5克，按照料液比为1:15-35的比例加入第一提取溶剂，经过超声、过滤、旋蒸后，得到第一次提取物；其中，超声温度为30-50℃，超声时间为10-40min，超声功率为150W；
(3)用第一次的滤渣，按照料液比为1:15-35的比例加入第二提取溶剂，经超声、过滤、旋蒸后，得到第二次提取物，把两次旋蒸得到的提取物，用纯甲醇定容至10毫升，得到总酚提取溶液；其中，超声温度为30-50℃，超声时间为10-40min，超声功率为150W；
(4)取1毫升总酚提取溶液，依次加入1毫升FC显色剂和3毫升7.5％碳酸钠溶液，摇匀，显色30-120min后，在765nm波长下测定吸光度，得到梨幼果总酚的提取率。
根据本发明的实施例，所述第一提取溶剂为乙酸乙酯，所述第二提取溶剂为丙酮。
根据本发明的实施例，步骤(2)中，按照料液比为1:30的比例加入第一提取溶剂，其中，超声温度为40℃，超声时间为10min。
根据本发明的实施例，步骤(3)中，按照料液比为1:25的比例加入第二提取溶剂，其中，超声温度为35℃，超声时间为20min。
根据本发明的实施例，步骤(4)中，显色时间为30min。
与现有技术相比，根据本发明实施例的梨幼果总酚提取方法，利用超声方法，并使用两种不同的提取溶液提取梨幼果总酚，使得梨幼果总酚的提取率显著提升。
具体实施方式
为使本发明技术方案和优点更加清楚，通过以下几个具体实施例对本发明作进一步详细描述。显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
根据本发明的一个实施例，一种梨幼果总酚提取方法包括以下步骤：
(1)以花后20天左右的梨幼果为材料，将梨幼果切成薄条，迅速用液氮冷冻，然后经粉碎机粉碎。
(2)称取粉碎后的果肉5克，按照料液比(即果肉与提取溶剂的重量比)为1:30的比例加入乙酸乙酯作为第一提取溶剂，经过超声、过滤后、旋蒸后，得到第一次提取物；其中，超声温度为40℃，超声时间为10min，超声功率为150W。
优选地，在此步骤(2)中，超声波的占空比为0.6-0.8。
优选地，在此步骤(2)中，超声操作时的气压为6-8Mpa。
(3)用步骤(2)中的滤渣，按照料液比为1:25的比例加入丙酮作为第二提取溶剂，经超声、过滤、旋蒸后，得到第二次提取物，把两次旋蒸得到的提取物，用纯甲醇定容至10毫升，得到总酚提取溶液；其中，超声温度为40℃，超声时间为10min，超声功率为150W；
优选地，在此步骤(3)中，超声波的占空比为0.4-0.55。
优选地，在此步骤(3)中，超声操作时的气压为3-5Mpa。
(4)取1毫升总酚提取溶液，依次加入1毫升FC显色剂(即，福林酚试剂)和3毫升浓度为7.5％的碳酸钠溶液，摇匀，显色30min后，在765nm波长下测定吸光度，得到梨幼果总酚的提取率为21.3％。
实施例2：
根据本发明的一个实施例，一种梨幼果总酚提取方法包括以下步骤：
(1)以花后20天左右的梨幼果为材料，将梨幼果切成薄条，迅速用液氮冷冻，然后经粉碎机粉碎。
(2)称取粉碎后的果肉5克，按照料液比(即果肉与提取溶剂的重量比)为1:20的比例加入乙酸乙酯作为第一提取溶剂，经过超声、过滤、旋蒸后，得到第一次提取物；其中，超声温度为30℃，超声时间为20min，超声功率为150W；
优选地，在此步骤(2)中，超声波的占空比为0.6-0.8。
优选地，在此步骤(2)中，超声操作时的气压为6-8Mpa。
(3)用步骤(2)中滤渣，按照料液比为1:15的比例加入丙酮作为第二提取溶剂，经超声、过滤、旋蒸后，得到第二次提取物，把两次旋蒸得到的提取物，用纯甲醇定容至10毫升，得到总酚提取溶液；其中，超声温度为30℃，超声时间为20min，超声功率为150W；
优选地，在此步骤(3)中，超声波的占空比为0.4-0.55。
优选地，在此步骤(3)中，超声操作时的气压为3-5Mpa。
(4)取1毫升总酚提取溶液，依次加入1毫升FC显色剂和3毫升浓度为7.5％的碳酸钠溶液，摇匀，显色60min后，在765nm波长下测定吸光度，得到梨幼果总酚的提取率为18.7％。
实施例3：
根据本发明的一个实施例，一种梨幼果总酚提取方法包括以下步骤：
(1)以花后20天左右的梨幼果为材料，将梨幼果切成薄块，迅速用液氮冷冻，然后经粉碎机粉碎。
(2)称取粉碎后的果肉5克，按照料液比(即果肉与提取溶剂的重量比)为1:10的比例加入乙酸乙酯作为第一提取溶剂，经过超声、过滤、旋蒸后，得到第一次提取物；其中，超声温度为50℃，超声时间为30min，超声功率为150W。
优选地，在此步骤(2)中，超声波的占空比为0.6-0.8。
优选地，在此步骤(2)中，超声操作时的气压为6-8Mpa。
(3)用步骤(2)中的滤渣，按照料液比为1:15的比例加入丙酮作为第二提取溶剂，经超声、过滤、旋蒸后，得到第二次提取物，把两次旋蒸得到的提取物，用纯甲醇定容至10毫升，得到总酚提取溶液；其中，超声温度为50℃，超声时间为30min，超声功率为150W；
优选地，在此步骤(3)中，超声波的占空比为0.4-0.55。
优选地，在此步骤(3)中，超声操作时的气压为3-5Mpa。
(4)取1毫升总酚提取溶液，依次加入1毫升FC显色剂和3毫升浓度为7.5％的碳酸钠溶液，摇匀，显色90min后，在765nm波长下测定吸光度，此时，测量的梨幼果总酚的提取率为19.5％。
需要说明的是，第一提取溶剂和第二提取溶剂的比例可以是相同的，例如，第一提取溶剂、第二提取溶剂与果肉的料液比均为1:30。
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。