本发明涉及医药领域，特别涉及一种用于抑制细菌感染的药物及其制备方法。
背景技术：
双黄连口服液主要成分有金银花、黄芩、连翘等，其中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素是其主要活性成分，具有较广的抗菌谱，有抑菌、解热、抗炎、抗病毒、利湿，退黄等作用，方中金银花为常用清热解毒药，用于温病初起的解表、清热、解毒、止痢；黄芩为常用清热燥湿、解毒、凉血，泻肺火药；连翘有清心、肺、胃之热，散温邪，解疮毒等作用；三药共奏清热解毒、利尿凉血之功能，具有辛凉解表、清热解毒功效，适用于风热感冒引起的上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌和病毒感染性疾病，然而双黄连口服液虽然具有抗菌作用，尤其是革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，但是见效慢，抗菌效果差。
技术实现要素：
本发明旨在克服上述技术现有的技术缺陷，目的是提供一种见效快、抗菌效果较好的用于抑制细菌感染的药物及其制备方法。
本发明的目的是以下述方式实现的：
一种用于抑制细菌感染的药物，由以下重量份原料组成：金银花250-350份、黄芩250-350份、连翘550-650份、利巴韦林2.5-3.5份。
如上所述的用于抑制细菌感染的药物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按量分别称取金银花、黄芩、连翘，粉碎；
（2）以上三味，黄芩加水煎煮，煎液过滤，浓缩并在75-85℃用盐酸溶液适量调节ph值至1.0-2.0，保温0.5-1.5h，静置10-14h，滤过，沉淀加6-8倍量水，用氢氧化钠溶液调节ph值至6.8-7.2，再加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸溶液调节ph值至1.8-2.2，55-65℃保温20-40min，静置10-14h，滤过，沉淀用乙醇洗至ph值为6.8-7.2，回收乙醇备用；
（3）金银花、连翘加水浸泡，煎煮，煎液滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25的清膏，然后加入乙醇，使含醇量达70-80％，含醇量为体积分数，充分搅拌，静置10-14h，过滤取上清液，回收乙醇至无醇味；
（4）向金银花、连翘提取物中加入黄芩提取物和利巴韦林，用氢氧化钠溶液调节ph值至6.8-7.2，搅匀，4-8℃冷藏64-80h，滤过，滤液灌装，灭菌，即得。
优选的，包括以下步骤：
（1）按量分别称取金银花、黄芩、连翘，粉碎；
（2）以上三味，黄芩加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩并在80℃时加入2mol/l盐酸溶液适量调节ph值至1.0-2.0，保温1小时；静置12小时，滤过，沉淀加6-8倍量水，用40％氢氧化钠溶液调节ph值至7.0，再加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用2mol/l盐酸溶液调节ph值至2.0，60℃保温30分钟，静置12小时，滤过，沉淀用乙醇洗至ph值为7.0，回收乙醇备用；
（3）金银花、连翘加水温浸30分钟后，煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液在70-80℃下浓缩至相对密度为1.20-1.25的清膏，冷至40℃时加入乙醇，使含醇量达75％，含醇量为体积分数，充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，残渣再加75％乙醇，搅匀，静置12小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇至无醇味；
（4）向金银花、连翘提取物中加入上述黄芩提取物和利巴韦林，并加水适量，以40％氢氧化钠溶液调节ph值至7.0，搅匀，4-8℃冷藏72小时，滤过，滤液加入蔗糖300g，搅拌使溶解，再加入香精适量并调节ph值至7.0、加水制成1000ml，搅匀，静置12小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
本发明提供的药物为中西药联用，采用利巴韦林，可增强双黄连口服液的抑菌作用，而且使用方便，毒副作用小。
具体实施方式
实施例1
一种用于抑制细菌感染的药物，由以下重量份原料组成：金银花250-350份、黄芩250-350份、连翘550-650份、利巴韦林2.5-3.5份。
如上所述的用于抑制细菌感染的药物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按量分别称取金银花、黄芩、连翘，粉碎；
（2）以上三味，黄芩加水煎煮，煎液过滤，浓缩并在75-85℃用盐酸溶液适量调节ph值至1.0-2.0，保温0.5-1.5h，静置10-14h，滤过，沉淀加6-8倍量水，用氢氧化钠溶液调节ph值至6.8-7.2，再加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸溶液调节ph值至1.8-2.2，55-65℃保温20-40min，静置10-14h，滤过，沉淀用乙醇洗至ph值为6.8-7.2，回收乙醇备用；
（3）金银花、连翘加水浸泡，煎煮，煎液滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25的清膏，然后加入乙醇，使含醇量达70-80％，含醇量为体积分数，充分搅拌，静置10-14h，过滤取上清液，回收乙醇至无醇味；
（4）向金银花、连翘提取物中加入黄芩提取物和利巴韦林，用氢氧化钠溶液调节ph值至6.8-7.2，搅匀，4-8℃冷藏64-80h，滤过，滤液灌装，灭菌，即得。
实施例2
一种用于抑制细菌感染的药物，由以下原料组成：金银花300g、黄芩300g份、连翘600g、利巴韦林3g。
如上所述的用于抑制细菌感染的药物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按量分别称取金银花、黄芩、连翘，粉碎；
（2）以上三味，黄芩加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩并在80℃时加入2mol/l盐酸溶液适量调节ph值至1.5，保温1小时；静置12小时，滤过，沉淀加7倍量水，用40％氢氧化钠溶液调节ph值至7.0，再加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用2mol/l盐酸溶液调节ph值至2.0，60℃保温30分钟，静置12小时，滤过，沉淀用乙醇洗至ph值为7.0，回收乙醇备用；
（3）金银花、连翘加水温浸30分钟后，煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液在75℃下浓缩至相对密度为1.22的清膏，冷至40℃时加入乙醇，使含醇量达75％，充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，残渣再加适量75％乙醇，搅匀，静置12小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇至无醇味；
（4）向金银花、连翘提取物中加入上述黄芩提取物和利巴韦林，并加水适量，以40％氢氧化钠溶液调节ph值至7.0，搅匀，6℃冷藏72小时，滤过，滤液加入蔗糖300g，搅拌使溶解，再加入香精适量并调节ph值至7.0、加水制成1000ml，搅匀，静置12小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例4
一种用于抑制细菌感染的药物，由以下原料组成：金银花300g、黄芩300g份、连翘580g、利巴韦林2.7g。
如上所述的用于抑制细菌感染的药物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按量分别称取金银花、黄芩、连翘，粉碎；
（2）以上三味，黄芩加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩并在80℃时加入2mol/l盐酸溶液适量调节ph值至1.5，保温0.5小时；静置14小时，滤过，沉淀加7倍量水，用40％氢氧化钠溶液调节ph值至7.2，再加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用2mol/l盐酸溶液调节ph值至2.2，55℃保温30分钟，静置12小时，滤过，沉淀用乙醇洗至ph值为7，回收乙醇备用；
（3）金银花、连翘加水温浸30分钟后，煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液在75℃下浓缩至相对密度为1.2的清膏，冷至40℃时加入乙醇，使含醇量达80％，充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，残渣再加适量75％乙醇，搅匀，静置12小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇至无醇味；
（4）向金银花、连翘提取物中加入上述黄芩提取物和利巴韦林，并加水适量，以40％氢氧化钠溶液调节ph值至6.8，搅匀，6℃冷藏72小时，滤过，滤液加入蔗糖300g，搅拌使溶解，再加入香精适量并调节ph值至7.0、加水制成1000ml，搅匀，静置12小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
实施例5
一种用于抑制细菌感染的药物，由以下原料组成：金银花260g、黄芩350g份、连翘630g、利巴韦林3.2g。
如上所述的用于抑制细菌感染的药物的制备方法，包括以下步骤：
（1）按量分别称取金银花、黄芩、连翘，粉碎；
（2）以上三味，黄芩加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩并在85℃时加入2mol/l盐酸溶液适量调节ph值至1，保温1.5小时；静置10小时，滤过，沉淀加8倍量水，用40％氢氧化钠溶液调节ph值至6.8，再加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用2mol/l盐酸溶液调节ph值至1.8，65℃保温20分钟，静置10小时，滤过，沉淀用乙醇洗至ph值为7.2，回收乙醇备用；
（3）金银花、连翘加水温浸30分钟后，煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液在75℃下浓缩至相对密度为1.25的清膏，冷至40℃时加入乙醇，使含醇量达80％，充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，残渣再加适量70％乙醇，搅匀，静置10小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇至无醇味；
（4）向金银花、连翘提取物中加入上述黄芩提取物和利巴韦林，并加水适量，以40％氢氧化钠溶液调节ph值至7.2，搅匀，8℃冷藏64小时，滤过，滤液加入蔗糖300g，搅拌使溶解，再加入香精适量并调节ph值至7.0、加水制成1000ml，搅匀，静置12小时，滤过，灌装，灭菌，即得。
本发明实施例6-18用于抑制细菌感染的药物配方表见表1-2，其余同实施例2。
表1实施例6-12配方表
表2实施例13-18配方表
实验例
1菌种的复苏
取少量菌粉溶解于1ml灭菌生理盐水中，轻轻吹打混匀。用移液枪取50µl于lb肉汤中，轻轻摇晃混匀后37℃120转/min恒温摇床摇4-6h。
细菌计数及细菌稀释液的制备
用移液枪取1制备的菌液1ml于9ml灭菌蒸馏水中，吹打混匀后取1ml于另一9ml灭菌蒸馏水中，轻轻吹打混匀，依次倍比稀释到10-9。分别取10-5、10-6、10-7、10-8、10-9稀释倍数的试管100µ菌液于mh固体培养基上，用涂菌棒涂匀，每个样品做3个平行实验，37℃培养18h。选取细菌个数在30～300的平板进行计数。选取合适的稀释倍数进行稀释，将菌液稀释到10-5cfu/ml，4℃冷藏备用。
双黄连+利巴韦林口服液对大肠杆菌mic的测定
3.1药液的稀释
取10个10ml试管，分别加入2ml无菌生理盐水，于第一管中加入2ml的双黄连+利巴韦林口服液，混匀后取2ml加入第二管中，依次稀释到第九管后弃去，第十管对照。
含药液的mh琼脂培养基的制备
将各个浓度的药液和mh琼脂培养基按1：9的比例配置，即原各个浓度药液稀释10倍，混匀后121°c高压灭菌30min，制备成含各个浓度药液的mh琼脂培养基，37°c培养箱保存备用。
的测定
取105cfu/ml的菌液100µl接种到含药液的mh固体培养基上，37°c培养20h，无大肠杆菌生长的最低浓度即为该药液的mic,反复实验3次，取平均值。
双黄连+利巴韦林口服液对大肠杆菌抑菌圈的测定及比较
4.1mh琼脂培养基反应孔的制备
普通琼脂液体灭菌加入培养皿的底部，放置平等试验台上待冷却后，将牛津杯放置上面，每个平板可放3-4个，然后加入含大肠杆菌菌液的mh琼脂，高度大致在牛津杯的口部下面少许。冷却后，用镊子将牛津杯和多余的固体琼脂取出，备用。
药液的稀释
取双黄连+利巴韦林口服液、双黄连口服液分别用生理盐水将其稀释十倍、100倍，标记，4°c保存备用。
抑菌圈的测定
取各个浓度的药液100µl加进反应孔中，并进行标记，37°c培养20h，观察测量并记录其抑菌圈的直径。
实验结果
1大肠杆菌细菌计数及稀释实验结果
将大肠杆菌原始菌液10倍倍比稀释，100µl接种，选择30～300个的平板进行计数。10-7稀释梯度的细菌个数在此范围：
选取10-7稀释的梯度进行计数，取其平均数86，即得原始菌液浓度8.6×109cfu/ml，将其稀释到10-5cfu/ml，备用。
双黄连+利巴韦林口服液对大肠杆菌mic测定实验结果
复方双黄连口服液对大肠杆菌mic实验结果显示，当稀释梯度为2-6时，无大肠杆菌生长，当稀释梯度为2-7时，平板已经有少量大肠杆菌生长，原始药液浓度为1g/ml，即此种双黄连+利巴韦林口服液对大肠杆菌的mic在0.78mg～1.56mg之间。
双黄连+利巴韦林口服液对大肠杆菌抑菌圈的测定及比较实验结果
将双黄连+利巴韦林口服液、双黄连口服液，稀释10倍、100倍分别取做抑菌实验，测得各自的抑菌圈见下表：
实验小结
本实验主要是双黄连+利巴韦林口服液对标准毒株大肠杆菌（25922）mic值的测定，其mic值在1.95mg～3.90mg之间，及其抑菌圈大小的测定与双黄连口服液进行比较，其抑菌圈匀优于后者。
以上所述的仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明整体构思前提下，还可以作出若干改变和改进，这些也应该视为本发明的保护范围。