本发明涉及一种巴西蘑菇多糖冲剂的制备方法。
背景技术:
巴西蘑菇原产于巴西、秘鲁等地,其子实体内含有丰富的营养物质和生物活性物质如多糖、核酸、甾醇类等,在抗肿瘤、抗病毒、降血糖及提高机体免疫力等方面效果显著,深受食品和医药学界的重视。研究表明,巴西蘑菇的主要生理功能与其含有的多糖密切相关,其所含的抗肿瘤物质主要为活性多糖体,抑瘤率高达99%。其活性多糖还具有提高机体免疫力、抗病毒、抗凝血、降血脂、降低胆固醇等作用。我国于1992年从日本引进该菌种,并对其生态学特性、栽培方法、营养成分分析等方面进行了一定的研究。而在加工方面,以制成干菇为主,深加工产品很少。
技术实现要素:
本发明提出一种巴西蘑菇多糖冲剂的制备方法。
一种巴西蘑菇多糖冲剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将巴西蘑菇烘干后磨成粉末;
(2)称取粉碎好的巴西蘑菇,置于1000mL烧杯中,加入蒸馏水并混匀,调pH至7,进
行微波提取处理完后将提取液过滤,用旋转蒸发仪浓缩到l/4体积,加入终浓度体积分数为80%的乙醇,静置12h,离心收集沉淀,用无水乙醇沉淀,真空干燥得巴西蘑菇粗多糖,
(3)将巴西蘑菇粗多糖依次用石油醚、丙酮回流脱脂,挥干溶剂后,溶于蒸馏水中,90℃加热至彻底溶解,制成含粗多糖5%的溶液,利用Seveage法脱蛋白,然后用蒸馏水透析72h,透析液减压浓缩后,加入4倍体积的无水乙醇,置冰箱12h,离心分离沉淀,沉淀依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚各洗两次,真空干燥至恒重,得巴西蘑菇多糖粗品;
(4)取500mg多糖粗品,溶于pH7.4的Tris-盐酸缓冲液中,上平衡好的DEAE-Cellulose-52离子交换柱,以O~2mol/L NaCL梯度洗脱,流速为0.2m/min,利用收集管管收集,用苯酚-硫酸法检测糖,分步收集合并洗脱峰,减压浓缩,对蒸馏水透析48h,真空干燥得纯多糖;
(5)取巴西蘑菇粗多糖、可溶性淀粉和甜蜜素,将多糖、可溶性淀粉、甜蜜素按1:4:0.04的比例均匀混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用10目筛制粒,在55℃干燥,得浅黄色颗粒后即得。
优选地,所述步骤(1)微波提取过程为间歇微波处理,每次微波时间2min,中间停1min。
本发明所述方法制备的巴西蘑菇多糖冲剂,产率高、提取时间短、能耗节约等,甜度好、低热能、无毒性,完全适合糖尿病患者使用。
具体实施方式
实施例1。
一种巴西蘑菇多糖冲剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将巴西蘑菇烘干后磨成粉末;
(2)称取粉碎好的巴西蘑菇,置于1000mL烧杯中,加入蒸馏水并混匀,调pH至7,进
行微波提取处理完后将提取液过滤,用旋转蒸发仪浓缩到l/4体积,加入终浓度体积分数为80%的乙醇,静置12h,离心收集沉淀,用无水乙醇沉淀,真空干燥得巴西蘑菇粗多糖,
(3)将巴西蘑菇粗多糖依次用石油醚、丙酮回流脱脂,挥干溶剂后,溶于蒸馏水中,90℃加热至彻底溶解,制成含粗多糖5%的溶液,利用Seveage法脱蛋白,然后用蒸馏水透析72h,透析液减压浓缩后,加入4倍体积的无水乙醇,置冰箱12h,离心分离沉淀,沉淀依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚各洗两次,真空干燥至恒重,得巴西蘑菇多糖粗品;
(4)取500mg多糖粗品,溶于pH7.4的Tris-盐酸缓冲液中,上平衡好的DEAE-Cellulose-52离子交换柱,以O~2mol/L NaCL梯度洗脱,流速为0.2m/min,利用收集管管收集,用苯酚-硫酸法检测糖,分步收集合并洗脱峰,减压浓缩,对蒸馏水透析48h,真空干燥得纯多糖;
(5)取巴西蘑菇粗多糖、可溶性淀粉和甜蜜素,将多糖、可溶性淀粉、甜蜜素按1:4:0.04的比例均匀混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用10目筛制粒,在55℃干燥,得浅黄色颗粒后即得。
实施例2。
一种巴西蘑菇多糖冲剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将巴西蘑菇烘干后磨成粉末;
(2)称取粉碎好的巴西蘑菇,置于1000mL烧杯中,加入蒸馏水并混匀,调pH至7,进
行微波提取处理完后将提取液过滤,用旋转蒸发仪浓缩到l/4体积,加入终浓度体积分数为80%的乙醇,静置12h,离心收集沉淀,用无水乙醇沉淀,真空干燥得巴西蘑菇粗多糖,
(3)将巴西蘑菇粗多糖依次用石油醚、丙酮回流脱脂,挥干溶剂后,溶于蒸馏水中,90℃加热至彻底溶解,制成含粗多糖5%的溶液,利用Seveage法脱蛋白,然后用蒸馏水透析72h,透析液减压浓缩后,加入4倍体积的无水乙醇,置冰箱12h,离心分离沉淀,沉淀依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚各洗两次,真空干燥至恒重,得巴西蘑菇多糖粗品;
(4)取500mg多糖粗品,溶于pH7.4的Tris-盐酸缓冲液中,上平衡好的DEAE-Cellulose-52离子交换柱,以O~2mol/L NaCL梯度洗脱,流速为0.2m/min,利用收集管管收集,用苯酚-硫酸法检测糖,分步收集合并洗脱峰,减压浓缩,对蒸馏水透析48h,真空干燥得纯多糖;
(5)取巴西蘑菇粗多糖、可溶性淀粉和甜蜜素,将多糖、可溶性淀粉、甜蜜素按1:4:0.04的比例均匀混合搅匀,用75%乙醇制成软材,用10目筛制粒,在55℃干燥,得浅黄色颗粒后即得。
优选地,所述步骤(1)微波提取过程为间歇微波处理,每次微波时间2min,中间停1min。