一种白细胞或单核细胞收集用冲洗液及收集装置的制作方法

本发明涉及医疗器械技术领域，具体涉及一种白细胞或单核细胞收集用冲洗液及收集装置。

背景技术：

众所周知，白细胞旧称白血球，也称为免疫细胞，是血液中的一类细胞，能够作为免疫系统的一部分帮助身体抵抗传染病以及外来的东西，是血液中一 种重要的血细胞，显微镜下为无色的有核细胞，一般呈球形。根据形态差异可分为颗粒和无颗粒两大类。颗粒白细胞（粒细胞）中含有特殊染色颗粒，用瑞氏染料染色可分辨出三种颗粒白细胞，即：嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞；无颗粒白细胞包括单核细胞和淋巴细胞。各类白细胞的防御保护作用各不相同。而目前，为了确保临床用血安全，避免输血反应，通常，人们将血液中的白细胞进行滤除后再进行输血，而过滤后的白细胞大多被人们舍弃，且临床在提取治疗恶性肿瘤、血液病等疾病的免疫性细胞的基细胞时，传统方法获得的基细胞量少，活性低，提取基细胞后的血液无法保存利用或者回输自体，造成了极大的浪费。而即使采用保护液对所提取的基细胞进行保存，其保存周期也较短，同时常用的保护液，在将基细胞进行保存后，当需使用基细胞时，基细胞不易从保护液中脱落。因此，如何加强对白细胞或单核细胞的收集、利用是本领域技术人员急需解决的难题。

技术实现要素：

本发明的一个目的是克服现有技术的不足，提供一种白细胞或单核细胞收集用冲洗液，该冲洗液具有与血浆类似的离子环境、pH环境和营养成分，有利于延长所收集到的白细胞或单核细胞的存活时间，且还能提升白细胞或单核细胞的收集量。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种白细胞或单核细胞收集用冲洗液，所述冲洗液中包括如下组分，氯化钠、氯化钾、枸橼酸钠、磷酸二氢钠、葡萄糖、白蛋白及甘露醇，其中，每1000ml所述保护液中含有氯化钠7.02~8.95g；氯化钾0.13~0.21g；枸橼酸钠2.52~3.57g；磷酸二氢钠3.80~5.25g；葡萄糖3.05~4.25g；白蛋白20~32g；甘露醇3.22~4.02g；将上述成分混合后，在1000ml容量瓶内加注蒸馏水稀释至1000ml。

优选地，每1000ml所述保护液中含有白蛋白20~28g；甘露醇3.50~3.85g。

优选地，所述冲洗液的pH值在7.1~7.3之间，所述冲洗液的渗透压在300～320mOsm/L。

本发明的另一个目的是提供一种白细胞或单核细胞的收集装置，用于收集血液中的白细胞或单核细胞，所述收集装置中包括装有上述冲洗液的白细胞反冲洗液袋。

优选地，所述收集装置中，按照血液流动方向包括依次设置的采血针、抗凝采血袋、带滤网的滴斗、白细胞或单核细胞收集器、去白细胞或单核细胞血液收集袋，所述收集装置还包括设于所述白细胞或单核细胞收集器血液输出端上的与所述去白细胞或单核细胞血液收集袋并联设置的所述白细胞反冲洗液袋、设于所述白细胞或单核细胞收集器血液输入端上的与所述抗凝采血袋并联设置的白细胞或单核细胞收集袋。

进一步优选地，所述收集装置还包括与所述收集器并联设置的排气管。

进一步优选地，所述收集装置还包括连接在所述白细胞或单核细胞收集袋上的离心管，用于对所述白细胞或单核细胞收集袋内的白细胞或单核细胞进行离心纯化处理。

进一步优选地，当所述采血针所采集的血液来自异体时，所述收集装置内还包括分别连接在所述去白细胞或单核细胞血液收集袋上的血细胞培养液袋及空血浆袋，分别用于血细胞与血浆的收集保存。

进一步优选地，当所述采血针所采集的血液来自自体时，所述收集装置内还包括连接在所述去白细胞或单核细胞血液收集袋上的输血针，用于白细胞或单核细胞收集结束后的血液返输回自体内。

由于上述技术方案的运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：

1）本发明所采用的白细胞或单核细胞收集用冲洗液，其具有与血浆类似的离子环境、pH环境和营养成分，有利于延长所收集到的白细胞或单核细胞的存活时间；

2）本发明采用的冲洗液，其添加了用于提高冲洗液渗透压的白蛋白，并添加了能够提高提高细胞存活率的脱水剂甘露醇，有利于白细胞或单核细胞的脱落，提升了白细胞或单核细胞的收集量；

3）本发明采用的收集装置，其结构简单，可以在线收集白细胞或单核细胞，且收集效率高，可达90%；存活率高，可达80%，收集到的白细胞或单核细胞可对其进行纯化并通过加入细胞因子进行诱导，制成CIK细胞等免疫活性细胞以治疗恶性肿瘤等多种疾病；而收集后的血液可保存利用或者回输回自体，有效避免了血液的浪费。

附图说明

附图1为实施例1中所述的白细胞或单核细胞的收集装置的结构示意图；

附图2为实施例2中所述的白细胞或单核细胞的收集装置的结构示意图；

其中： 1、采血针；2、抗凝采血袋；3、滴斗；4、白细胞或单核细胞收集器；5、去白细胞或单核细胞血液收集袋；51、血细胞培养液袋；52、空血浆袋；6、白细胞反冲洗液袋；7、白细胞或单核细胞收集袋；71、白细胞或单核细胞收集管；8、采样袋；9、输血针；

11、医用导管；12、排气管；21、22、23、24、25、26、27、28、止流夹。

具体实施方式

下面结合附图及具体实施例来对本发明的技术方案作进一步的阐述。

实施例1

一种白细胞或单核细胞收集用冲洗液，所述冲洗液中包括如下组分，氯化钠、氯化钾、枸橼酸钠、磷酸二氢钠、葡萄糖、白蛋白及甘露醇，其中，每1000ml保护液中含有氯化钠7.02~8.95g；氯化钾0.13~0.21g；枸橼酸钠2.52~3.57g；磷酸二氢钠3.80~5.25g；葡萄糖3.05~4.25g；白蛋白20~32g；甘露醇3.22~4.02g；将上述成分混合后，在1000ml容量瓶内加注蒸馏水稀释至1000ml。

本例中，该1000ml保护液中包含氯化钠7.83g；氯化钾0.16g；枸橼酸钠2.92g；磷酸二氢钠4.75g；葡萄糖4.03g；白蛋白27.5g；甘露醇3.86。本例中，该冲洗液的pH值为7.3之间，该冲洗液的渗透压为318mOsm/L。

该冲洗液具有与血浆类似的离子环境、pH环境和营养成分，有利于延长所收集到的白细胞或单核细胞的存活时间；同时添加了用于提高冲洗液渗透压的蛋白和能够提高提高细胞存活率的脱水剂甘露醇，有利于白细胞或单核细胞的脱落，提升了白细胞或单核细胞的收集量。

本例中还提供了一种白细胞或单核细胞的收集装置，用于收集血液中的白细胞或单核细胞，该收集装置包括装有上述冲洗液的白细胞反冲洗液袋6。

本例中的白细胞或单核细胞的收集装置，参见图1所示，按照血液流动流向，该收集装置包括依次设置的采血针1、抗凝采血袋2、带滤网的滴斗3、白细胞或单核细胞收集器4、去白细胞或单核细胞血液收集袋5，该收集装置还包括设于白细胞或单核细胞收集器4血液输出端上的与去白细胞或单核细胞血液收集袋5并联设置的白细胞反冲洗液袋6、设于白细胞或单核细胞收集器4血液输入端上的与抗凝采血袋2并联设置的白细胞或单核细胞收集袋7，该收集装置还包括连接在采血针1与抗凝采血袋2间的与抗凝采血袋2相并联的采样袋8。

本例中，该血液来自异体，该收集装置还包括分别连接在去白细胞或单核细胞血液收集袋5上的血细胞培养液袋51及空血浆袋52，分别用于血细胞与血浆的收集保存。整个收集装置中的各部件之间均通过医用导管11相连，且每个血袋上均带有止流夹，该收集装置还包括并联在白细胞或单核细胞收集器4上的排气管12。

工作原理如下：

1）打开止流夹26，其余止流夹关闭，通过采血针1将血液采集到抗凝采血袋2内，部分采集到采样袋8内，而后关闭止流夹26，将采样袋8进行热合离断，留样；

2）采血结束后，将抗凝采血袋2置于高处，去白细胞或单核细胞血液收集袋5置于低处，同时打开止流夹21、23，其余止流夹关闭，若医用导管11内有气泡，打开止流夹22，并通过排气管12将收集装置内的气泡排除，而后关闭止流夹22，抗凝采血袋2内的血液在重力的作用下，依次经过滴斗3、白细胞或单核细胞收集器4过滤后流入去白细胞或单核细胞血液收集袋5内；

3）抗凝采血袋2内的血液过滤结束后，关闭止流夹21、23，并将抗凝采血袋2与去白细胞或单核细胞血液收集袋5进行热合离断；

4）对去白细胞或单核细胞血液收集袋5进行离心处理，而后将血细胞培养液袋51及空血浆袋52并联后与去白细胞或单核细胞血液收集袋5相连，去白细胞或单核细胞血液收集袋5内的血液经离心后分为两层，上层为血浆层，下层为除去了白细胞或单核细胞的血细胞层，打开止流夹27，将上层的血浆层挤入到空血浆袋52内；而后将血细胞培养液袋51中的培养液挤入去白细胞或单核细胞血液收集袋5内，对下层的血细胞进行细胞培养；

5）打开止流夹24、25，挤压白细胞反冲洗液袋6内的冲洗液，将白细胞或单核细胞收集器4内的白细胞进行冲洗至白细胞或单核细胞收集袋7内；

6）冲洗结束后，关闭止流夹24、25，将白细胞或单核细胞收集袋7热合离断，并将白细胞或单核细胞收集袋7进行离心处理，将分离后的白细胞或单核细胞挤入白细胞后单核细胞收集管71，后续再对白细胞或单核细胞纯化，制备免疫活性细胞。

本例中的白细胞或单核细胞的收集装置，整个收集过程均处于一个封闭系统，不会对血液造成任何污染，同时与现有技术相比，可以在线收集白细胞或单核细胞，在最短时间所获得的血细胞或单核细胞含量更多，收集率可达90%，细胞存活率也得到了很大的提高，可达80%以上。

实施例2

本例与实施例1的区别在于，本例中所采集的血液来自自体，因此，无需再将去白细胞或单核细胞血液收集袋5进行离心处理，参见图2所示，无需空血浆袋52及血细胞培养液袋51两个部件，可直接将输血管连接至去白细胞或单核细胞血液收集袋5上，通过输血针9将去除了白细胞或单核细胞的血液注射回自体内，同时将获得的白细胞或单核细胞进行纯化处理，然后培养临床所需的免疫性细胞。

上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。